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Las úlceras crónicas cutáneas representan un problema importante de salud pública debido a las consecuencias que genera en el paciente. El presente estudio está fundamentado en la necesidad de diseñar, preparar y evaluar en ensayos in vitro el potencial regenerativo de un producto biológico obtenido de la combinación de plaquetas y células madres mesenquimales de cordón umbilical (MSC-CU) sobre una base de gel de fibrina, con potencial aplicación en úlceras cutáneas de índole crónica. Para ello se protocolizó la obtención de MSC-CU, las cuales fueron cultivadas y caracterizadas por citometría de flujo y se demostró su capacidad de diferenciación hacia el linaje osteogénico, condrogénico y adipogénico. También se obtuvo plaquetas por aféresis sanguínea, las cuales fueron requeridas para la formación del gel de fibrina rico en plaquetas (GFRP), el gel de fibrina pobre en plaquetas (GFPP), GFRP combinado con MSC-CU y GFPP combinado con MSC-CU. Los productos desarrollados fueron incubados hasta por 96 horas, liberando un líquido seroso, en el cual se midieron la concentración de los factores de crecimiento: PDGF-BB, EGF y VEGF. También se midieron los factores inmunomoduladores TGF-β1 y prostaglandina E2. Adicionalmente el líquido seroso liberado (medio condicionado) fue estudiado como suplemento en los medios de cultivo para estimular la proliferación y migración celular de fibroblastos dérmicos. La cinética de liberación de las biomoléculas evidenció una liberación similar entre el GFRP y GFRP-MSC a excepción de la PGE2 que tuvo una mayor concentración en este último producto. Los ensayos de migración y proliferación mostraron que el GFRP y el GFRP-MSC tienen un efecto similar significativo en comparación con el GFPP-MSC. En conclusión, el gel de fibrina con plaquetas y MSC-CU muestra un efecto regenerativo in vitro similar que el gel de fibrina solo con plaquetas.

El propósito de este estudio fue evaluar la transportación apical (TA), producida después de la instrumentación de conductos distales de molares maxilares con instrumentos manuales, rotatorios y reciprocantes utilizando Tomografía Computarizada Cone Beam (CBCT), imagen utilizada para demostrar la capacidad de la CBCT de campo reducido (FOV reducido) para evaluar los métodos de la TA: treinta conductos radiculares fueron asignados aleatoriamente a cualquiera de los grupos, limas manuales K; Mtwo, RECIPROC® (n = 10 para cada grupo) para la preparación biomecánica. Las limas maestras apicales fueron #40, Mtwo 40 (#40/04) y R40 (# 40/06), respectivamente. Se utilizó CBCT de FOV reducido imágenes para medir TA (mm) en 3 lugares diferentes (3, 5 y 7 mm) desde el ápice. Resultados: El sistema rotatorio Mtwo produjo la menor transportación en comparación con la técnica manual y la técnica reciprocante (RECIPROC ®), en el nivel apical a 3mm. No había diferencia estadísticamente significativa entre los 3 sistemas empleados a una distancia de 5 y 7 mm respectivamente. Conclusiones: Existió diferencia estadísticamente significativa en el nivel apical de 3mm al comparar el sistema Mtwo con los sistemas manual y RECIPROC®, a nivel apical a 5 y 7mm respectivamente no existe diferencia estadísticamente significativa al comparar los sistemas manual, rotatorio y reciprocante; al emplear los sistemas Mtwo y RECIPROC®, a nivel clínico el riesgo de TA es pequeño, considerando que existe un mínimo riesgo de errores de procedimiento para la PBM del conducto radicular.

Objetivo: Comparar el diagnóstico radiográfico de lesiones de caries proximal usando la técnica radiográfica de aleta de mordida digital CCD y de la tomografía computarizada de haz cónico in vitro. Materiales y métodos: Se evaluó la base de datos de los diagnósticos radiográficos de 108 piezas dentarias (50 molares y 58 premolares) con 106 superficies mesiales y 100 distales. Esta base de datos registraba el diagnóstico de caries proximal clasificado en R0, R1, R2, R3 y R4. Se calculó la concordancia en el diagnóstico mediante la prueba de Coeficiente de Kappa. El estudio tuvo una significancia de 95% y un p

A esporotricose é uma micose subcutânea zoonótica de distribuição mundial, causada por espécies fúngicas do complexo Sporothrix schenckii. Os protozoários do gênero Acanthamoeba constituem um grupo amplamente distribuído no ambiente (solo, água e ar) e algumas espécies podem ser patogênicas e/ou oportunistas. Estes organismos coexistem no mesmo ambiente, podendo resultar em algumas alterações interespecíficas. O objetivo do estudo foi verificar o perfil da interação entre S. schenckii sensu stricto e S. brasiliensis e A. castellanii, através de um modelo in vitro de cocultivo como fator modulador de características intrínsecas de ambos microrganismos. Para isso, foram avaliados o índice de fagocitose de S. schenckii sensu stricto e S. brasiliensis por A. castellanii; a viabilidade de S. schenckii sensu stricto e S. brasiliensis após contato com A. castellanii; a viabilidade das amebas após contato com os fungos; e a influência de S. schenckii sensu stricto e S. brasiliensis no processo de encistamento de A. castellanii. As análises indicaram que S. schenckii e S. brasiliensis sofreram eventos fagocíticos por A. castellanii. Os resultados não demonstraram aumento significativo da replicação fúngica na presença da ameba e nem diminuição da viabilidade amebiana em cocultura com os fungos. Porém, os resultados foram obtidos através de testes in vitro, sendo necessários estudos com a coinfecção in vivo para confirmação desta hipótese. Sporotrichosis is a worldwide zoonotic subcutaneous mycoses, caused by species of the fungal Sporothrix schenckii complex. The protozoa from genus Acanthamoeba are widely distributed in the environment (soil, water and air), and some species may be pathogenic and/or opportunistic. These organisms coexist in the same environment, which may result in some interspecific changes. The aim of our study was to verify the profile of interaction between S. schenckii sensu stricto and S. brasiliensis and A. castellanii, by an in vitro model of co-culture as a modulator factor of both microorganisms intrinsic characteristics. In order to do so, we evaluated the phagocytosis index of S. schenckii sensu stricto and S. brasiliensis by A. castellanii; S. schenckii sensu stricto and S. brasiliensis viability after contact with A. castellanii; amoeba viability after contact with the fungus; and the influence of S. schenckii sensu stricto and S. brasiliensis in encystment process of A. castellanii. Our analyses indicated that S. schenkki and S. brasiliensis have suffered phagocytic events by A. castellanii. Results also showed that there was no significant increase in fungal replication in the presence of amoebae and there was no change in the viability of amoebas in co-culture with fungi. Our results were obtained through in vitro assays, which make possible the absence of these results in vivo, so there is a need for studies with co-infection in vivo in order to have a thorough understanding of this relationship. Our results were obtained through in vitro assays, which make possible the absence of these results in vivo, so there is a need for studies with co-infection in vivo in order to have a thorough understanding of this relationship.

Objetivo: Comparar in vitro la resistencia adhesiva con la técnica de push out de postes de fibra de vidrio sometidos a diferentes tratamientos de superficie, análisis topográfico y nanofiltración por MEB. Materiales y Métodos: Estudio experimental in vitro, analítico y transversal. 60 raíces de premolares inferiores de humanos se dividieron de manera aleatoria en 5 grupos (n=12) y preparadas para recibir el mismo poste de fibra de vidrio White post y cemento de resina RelyX U200. Los postes en el G1 se trataron con peróxido de hidrógeno-silano, el G2 con ácido fosfórico-silano, el G3 con fluoruro fosfato acidulado a los 2 min –silano, el G4 con fluoruro fosfato acidulado a los 6 min –silano y el G5 con silano (control). Luego de la cementación las raíces fueron seccionadas en 6 discos radiculares en las regiones del conducto radicular cervical, medio y apical. Se evaluó la resistencia adhesiva (RA) de 10 especímenes de cada grupo mediante push out y tipo de falla, 2 especímenes para evaluar nanofiltración (NF); además de 6 postes para el análisis topográfico de la superficie mediante microscopia electrónica de barrido. La prueba de Post Hoc (Scheffe) y Chi cuadrado fueron usados para el análisis de los datos (p

Orientador: José Angelo Camilli Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Desordens musculoesqueléticas estão entre os acometimentos mais comuns a saúde humana com as fraturas ósseas se destacando como uma das mais debilitantes. Fraturas comprometem a qualidade de vida das pessoas e impõem significativa sobrecarga econômica a sociedade. O câncer ósseo, por sua vez, ocorre mais frequentemente em crianças e adultos jovens entre 5 e 20 anos de idade. Por ano cerca de 1000 novos casos de osteosarcoma (câncer ósseo) são diagnosticados só nos Estados Unidos. Por ano cerca de 1000 novos casos de osteosarcoma (câncer ósseo) são diagnosticados só nos Estados Unidos. Objetivando melhorar a qualidade do tratamento para essas condições nós alteramos a composição do vidro bioativo Bioglass®45S5 adicionando Dióxido de Nióbio (Nb2O5) ou Gálio (Ga). Nós buscamos dois diferentes objetivos principais: (1) aumentar a bioatividade do Bioglass®45S5 por meio da adição do Nb2O5 o que alteraria a estrutura interna do vidro, aumentando sua taxa de dissolução e consequentemente a formação da camada de hidroxiapatita sobre sua superfície a fim de ser usado para a regeneração de grandes fraturas; (2) produzir vidros bioativos capazes de liberar Gálio localmente, de uma forma controlada, para que este atue na regeneração de defeitos ósseos pós- osteotomia enquanto mata células cancerígenas remanescentes no local da lesão. Para alcançar esses objetivos nós conduzimos duas séries diferentes de estudos que estão apresentados nessa tese em duas partes. A parte um descreve três investigações que mostram que a adição do Nb2O5 a rede do Bioglass®45S5 produziu um vidros biocompatíveis, não genotóxicos e com bioatividade aumentada estimulando maior formação de osso subperiostal e a diferenciação de Células Tronco Embrionárias humanas (CTEs) e Células Mesenquimais derivadas da medula óssea. Além disso, esses vidros sofram capaz de proporcionar a regeneração de um defeito ósseo de 5 mm de diâmetro na calvária de ratos em 8 semanas. A segunda parte dessa tese mostra um estudo no qual nós investigamos o potencial da incorporação de Gálio em vidros bioativos biodegradáveis projetados especificamente para aplicações em câncer ósseo. Nós observamos que adição de 3% de Gálio promoveu a morte de mais de 50% das células de osteosarcoma (SAOS2 cells) sem afetar os osteoblastos saudáveis. Os vidros bioativos contendo gálio fornecem uma entrega controlada e local de íons gálio no sítio da fratura e tem potencial considerável em aplicações clínicas para o tratamento de câncer ósseo. Nós acreditamos que através do desenvolvimento de novos biomateriais para substituição óssea nosso estudo irá contribuir para a redução da morbidade e melhorar o prognóstico de milhões de vítimas de fraturas. Além disso, o conhecimento gerado pelo presente trabalho vem a aumentar a compreensão acerca da interação entre substitutos ósseos sintéticos e o tecido ósseo lesado, esclarecendo as respostas do corpo a presença de vidros bioativos contendo Nióbio ou Gálio. Assim, o presente estudo fomenta a literatura com informação relevante para prática clínica e futuras investigações Abstract: Musculoskeletal disorders are the most widespread human health issue with bone fractures standing among the most debilitating ones. Bone fractures compromises the quality of life of people and cause significant economic burden to society. On the other hand, bone cancer occurs most frequently in children and young adults between the age of 5 and 20 years, but may also grow in the elderly. Each year, about 1,000 new cases of osteosarcoma are diagnosed in the United States alone.Aiming to improve the quality of the treatment for these conditions we altered the composition of the Bioglass®45S5 adding Niobium Dioxide (Nb2O5) or Gallium (Ga). We targeted two different main goals: (1) increase the bioactivity of the Bioglass®45S5 by means of doping it with Nb2O5 which would alter the glass¿ internal structure, enhancing its dissolution rate and consequently the formation of a hydroxyapatite-like layer on its surface in order to use it for the regeneration of large fractures; (2) to produce a Ga-doped bioactive glass that can locally release gallium in a controlled manner to regenerate post-osteotomy defects whilst killing any remainder cancer cell. To meet these goals we conducted two different series of studies that are displayed in this thesis in two parts. Part one describes three investigations that show that the addition of Nb2O5 into Bioglass®45S5 produced biocompatible, non-genotoxic glasses which stimulated greater subperiosteal bone formation and the differentiation of Embryonic Stem Cells (ESCs) and bone marrow- derived Mesenchymal Stem Cells (BM-MSCs). Furthermore one composition of Nb-doped glass was able to regenerate a 5-mm size calvarial defect in rats after 8 weeks. The second part of this thesis shows a study in which we investigated the potential of incorporating gallium into bio-degradable bioactive glasses specifically targeted towards bone cancer applications. We observed that adding 3% of gallium killed more than 50% of the osteosarcoma cells (SAOS2) whilst it did not affect healthy human osteoblasts. The gallium doped bioactive glasses provide a localised controlled delivery of gallium ions at the surgical site of interest and has considerable potential clinical applications for bone cancer treatment. We believe that developing novel biomaterials for bone replacement our study will reduce the morbidity and to improve the prognostic of millions of victims of fractures. Nonetheless, the knowledge generated by the present work comes to improve the comprehension about the interaction between the synthetic bone substitutes and the injured bone tissue, clarifying the responses of the body in the presence of the Nb or Ga- doped bioactive glasses. Thus, the present study foments the literature with relevant information for clinic practise and further investigations Doutorado Anatomia Doutor em Biologia Celular e Estrutural CNPQ 141210/2017-6

Objetivo: El propósito del presente estudio fue evaluar la adaptación de cofias metálicas fabricadas con la técnica fusión selectiva por láser en función del ángulo de convergencia total y el espacio para el cemento. Materiales y Métodos: Se confeccionaron modelos de trabajo los cuales se dividieron en 3 grupos (n=10): ángulo de convergencia total 12° con espacios para el cemento de 80 µm interno / 60 µm, ángulo 16° se le asignó 70 µm interno/ 50 µm marginal y para 20° fue 40 µm interno/ 30 µm marginal. Para evaluar la adaptación se utilizó el método de la réplica de la silicona; cada muestra se seccionó en sentido vestíbulo – palatino y disto – mesial, teniendo un total de 12 mediciones que fueron realizadas en el estéreomicroscopio Greenough Leica S8 APO (Leica Biosystems GmbH, Wetzlar, Germany) a un aumento de 40X. Resultados: El promedio de la discrepancia marginal en el grupo 12° fue 64.62.µm (1.88), para 16° 53.89 µm (1.33). y para 20° de 37.54 µm (3.10). Para la discrepancia axial en el grupo 12° fue 76.64 µm (10.18), 70.02 µm (8.44), 51.36 µm (5.55) para 16° y 20° respectivamente. La discrepancia oclusal en el grupo de 12° fue 278.40 µm (24.37), en el 16° de 192.62 µm (11.43) y para 20° 204.31 µm (11.62). Conclusiones: Los ángulos de convergencia total de 12° y 16° presentaron la mayor adaptación marginal.

En este trabajo, presentamos el desarrollo y la implementación de un algoritmo biológico para la evaluación de extractos de plantas, compuesto naturales aislados y compuestos análogos sintéticos sobre modelos de infección in vitro e in vivo de Leishmania. Este algoritmo inició con la implementación in vitro de un sistema de cribado biológico de alto rendimiento para evaluar la actividad anti-Leishmania de 97 compuestos sintéticos y 149 especies de plantas utilizadas en la Amazonia sobre amastigotes axénicos de Leishmania amazonensis. Esto permitió seleccionar a 8 especies de plantas activas que por fraccionamiento biodirigido permitió aislar a 35 compuestos naturales. La actividad sobre amastigotes axénicos de L. amazonensis y la evaluación de la citotoxicidad sobre macrófagos peritoneales de ratón BALB/c de 35 compuestos naturales y 97 compuestos sintéticos permitió seleccionar a 22 compuestos con un índice de selectividad mayor a 10. La evaluación de la actividad anti-Leishmania de 22 compuestos sobre amastigotes intracelulares de L. amazonensis permitió seleccionar 10 compuestos activos que fueron evaluados sobre el modelo biológico in vivo utilizando ratones BALB/c infectados con parásitos de L. amazonensis. Finalmente, la implementación de este algoritmo permitió seleccionar a la chalcona 42, chalcona 43 y la fagaridina como los compuestos más activos sobre parásitos de Leishmania en modelos de infección in vitro e in vivo.

Objetivo: Evaluar in vitro la concentración de Flúor Total (FT) y Flúor Soluble Total (FST) en las pastas dentales para niños que tengan una concentración mínima de 1000 ppm F- en el etiquetado. Materiales y métodos: Se realizó un estudio descriptivo, transversal, in vitro, donde la muestra estuvo conformada por 7 marcas de pastas dentales para niños con concentraciones ≥ 1000 ppm F-, por cada marca se obtuvieron tres tubos de pasta dental, las cuales se compraron en diferentes supermercados o farmacias de Lima Metropolitana. De cada pasta dental se tomaron muestras por duplicado. Las concentraciones de FT y FST se analizaron mediante el uso del electrodo selectivo de ion F-. Resultados: El FT de las pastas dentales analizadas estuvo cerca del valor que indica el fabricante a excepción de tres marcas, cuyas concentraciones fueron menores que las del fabricante siendo una de ellas la de menor valor (X: 525.27). Seis de las siete pastas dentales analizadas presentaron una concentración de FST ≥ 1000 ppm F-. Solo una pasta dental presentó 19% de Flúor Insoluble (Fins). Conclusiones: El presente estudio muestra que todas las pastas dentales dirigidas al público infantil que presentan una concentración ≥1000 ppm F- están indicadas para niños de 6 años a más según el rotulado; solo tres pastas dentales presentaron discrepancias entre lo que indica el fabricante y el FT encontrado. Solo una pasta dental presentó los valores más bajos de FT y FST.

Objetivo: Evaluar la acción del ácido fosfórico y de su composición como método de remoción de ácido fluorhídrico en cerámicas feldespáticas. Introducción: El ácido fluorhídrico es utilizado en la actualidad como un acondicionador de la cerámica feldespática. Este a su vez genera precipitaciones o residuales químicos que se mantienen en la superficie y que deben ser removidos para mejorar la fuerza de unión. Para la remoción de estos residuales se utilizan métodos tales como los baños de ultrasonido, agua- aire en spray, acetona, alcohol y ácido fosfórico. Es importante saber que este último hoy en día se encuentra en varias presentaciones en el mercado y que se utiliza con distintas técnicas de aplicación que están descritas en la literatura. Materiales y métodos: Estudio experimental in vitro. Se utilizan 18 discos de cerámica feldespática de 10mm de diámetro y 2mm de altura. Todos los discos son acondicionados con ácido fluorhídrico al 9.5%, posteriormente lavados y secados. Luego se distribuyen aleatoriamente en 7 grupos donde se varió el método de aplicación (activo, pasivo) y el tiempo de aplicación (30s, 60s, 90s). Todos los discos fueron sometidos a pruebas de microcizallamiento para evaluar la resistencia de unión. Conclusión: El ácido fosfórico como método de limpieza de la cerámica no aumenta la resistencia de unión de las cerámicas acondicionadas con ácido fluorhídrico.

Objetivo: Evaluar la influencia del tipo de matriz en la evaluación del color de discos de resina compuesta después de fotopolimerización. Materiales y métodos: Es un estudio de tipo experimental in vitro. El procedimiento por realizar será comparar el color luego de la fotopolimerización de 18 especímenes confeccionados de resina compuesta mediante cuatro matrices diferentes. Se analizarán los resultados de acuerdo con las variables del estudio. Por último, de construirán tablas y mapas en función de los resultados encontrados. Resultados: La muestra estuvo conformada por 18 especímenes, para el valor de “a” se obtuvo diferencias estadísticamente significativas con todos los grupos, excepto el de matriz de silicona de condensación (p=0.50). En cuanto a “b” se encontró diferencias estadísticamente significativas con todos los grupos con respecto al control (p

Entre os fatores que levam à perda de implantes dentários estão aqueles relacionados ao trauma cirúrgico. Durante a perfuração do osso e instalação do implante dental, pode ocorrer elevação da temperatura do tecido ósseo peri-implantar. A necrose tecidual induzida pelo calor compromete a capacidade óssea de cicatrização e osseointegração. O objetivo deste trabalho foi avaliar a variação da temperatura durante a perfuração de osso sintético, a partir do uso de fresas coletoras retas para implante com desenho modificado. Sete novas fresas teste (T) de diâmetros variados foram comparadas com fresas controle (C) já existentes no mercado, a partir da mensuração da temperatura por termopar. Foi utilizado um corpo de prova de poliuretano em bloco, simulador de osso tipo I. As perfurações foram realizadas a 780 rpm e torque de 55 N.cm, sem irrigação e velocidade de carga constante de 2 kg, até a profundidade de 13 mm, com equipamento cirúrgico acoplado em dispositivo desenvolvido unido a máquina de ensaio universal. O termopar foi instalado no bloco de osso sintético a 2,0 mm da extremidade externa do raio de cada fresa. Foram coletadas as temperaturas ao final da perfuração (Tp) e no momento da remoção da fresa (Tr). As partículas obtidas de cada perfuração foram aferidas em balança de precisão (M, massa, em gramas). Os dados coletados referente a Variação de Temperatura de Perfuração (Tp, °C), Variação de Temperatura de Remoção (Tr, °C) e Massa (g) foram registrados em uma planilha no Microsoft Word Excel® para tabulação, submetidos ao teste de Shapiro-Wilk, seguido do teste de Kruskal-Wallis ou Tukey, com p

La presencia del virus de laringotraqueitis infecciosa aviar (ILTV) en la industria avícola peruana ha sido asociado a un incremento del 18% en la mortalidad de las aves ponedoras infectadas, así como a una disminución del 16% en la producción de huevos. El empleo de vacunas atenuadas contra ILTV ha sido asociado a brotes de infección en campo debido a que estos virus atenuados pueden recombinarse entre sí. En el presente trabajo se realizó la expresión de la glicoproteína J de ILTV en la envoltura viral de baculovirus (Ch-Bv-gpJ) el cual fue utilizado como un vehículo presentador del antígeno viral y como un potenciador de la respuesta inmune celular asociada a la inmunidad innata debido a sus propiedades como un agente adyuvante. Para los ensayos de inmunización y desafío se utilizaron 6 grupos (n=10 aves SPF de 1 día de edad por grupo) que fueron distribuidos de la siguiente manera (A) 105 UFP/ave de baculovirus recombinante “Ch-Bv-gpJ”; (B) 106 UFP/ave de baculovirus recombinante “Ch-Bv-gpJ”; (C) 107 UFP/ave de baculovirus recombinante “Ch-Bv-gpJ”; (D) 106 UFP/ave de baculovirus no recombinante; (E) grupo control no inmunizado ni desafiado y (F) grupo control sólo desafiado. Los resultados demostraron que a pesar que no se detectó presencia de anticuerpos en suero de aves inmunizadas con 106 UFP de baculovirus recombinante “Ch-Bv-gpJ” (grupo B) después del desafío, este grupo fue capaz de eliminar la replicación viral puesto que no se detectó carga viral en tráquea y se redujeron marcadamente las manifestaciones de los signos clínicos comparado con el grupo control sólo desafiado (grupo F). Esto demostró que el empleo de 106 UFP/ave de baculovirus recombinante “Ch-Bv-gpJ” es la dosis óptima frente a infecciones del virus de laringotraqueitis infecciosa aviar. Sin embargo, más evaluaciones son necesarias para establecer el rol protectivo de baculovirus recombinante “Ch-Bv-gpJ” en condiciones de campo.

Objetivo: Comparar el potencial de remineralización a través de la microdureza del esmalte de premolares con desmineralización artificial, expuestos a dos barnices fluorados: NaF al 5% (Duraphat) y NaF al 5% con TCP (Clinpro™ White Varnish). Metodología: El estudio in vitro incluyó 45 bloques de esmalte que fueron divididos al azar en tres grupos:Grupo 1 (grupo control), Grupo 2 (NaF al 5%) y Grupo 3 (NaF al 5% con TCP). Se crearon lesiones artificiales de caries en el esmalte y luego se aplicó a cada grupo el barniz correspondiente. La muestra fue sometida a pH cíclico por cinco días consecutivos y luego la microdureza superficial fue medida usando la prueba de dureza Vickers. Resultados: La microdureza superficial obtenida después del régimen de tratamiento en cada grupo fue mayor que los valores de microdureza superficial post desmineralización artificial, en donde el Grupo 1 (149,17) presentó la menor microdureza superficial post remineralización, seguida del Grupo 2 (175,85) y el Grupo 3 (182,66). Se observó diferencia significativa cuando se comparó el Grupo 1 con el Grupo 2 y el Grupo 3; sin embargo, entre el Grupo 2 y Grupo 3 no se observó diferencia significativa. Conclusiones: El uso del barniz fluorado en la remineralización de lesiones cariosas incipientes en ambos casos fue efectivo. La adición del TCP en estos compuestos fluorados mostró un mayor valor de microdureza del esmalte dental en comparación con el barniz fluorado con NaF al 5%, pero esta diferencia no fue significativa. Palabras clave: remineralización, in vitro, flúor.

Estudos demonstram que a administração transdérmica de princípios ativos terapêuticos oferecem muitas vantagens, pois utilizam a pele como via de entrada para substâncias que proporcionem benefícios em função de seus compostos. Sendo assim, justifica-se o interesse e o crescimento de pesquisas que visam a descobrir formas de quantificar e potencializar a permeação de substâncias na pele. O microagulhamento é uma dessas técnicas utilizadas recentemente, pois tem como objetivo a criação de microrupturas na pele, penetrando suas barreiras. O ácido ascórbico é um ativo farmacológico que, quando associado à técnica de microagulhamento, possui ação antioxidante, formadora de colágeno e inibidora da melanogênese. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi verificar e analisar a retenção e permeação do Ácido Ascórbico 5%, associado ao microagulhamento em sistema de disfunção vertical. Os resultados mostraram que as micropunturas são efetivas no que diz respeito a ampliar a retenção do ativo em todas as camadas da pele no tempo de 30 minutos, entretanto, a permeação foi maior no grupo tratado em relação ou controle no tempo de 15 minutos. Studies demonstrate that the transdermal administration of therapeutic active ingredients offer many advantages once the skin is used as a gateway for substances that provide benefits depending on their compounds. This may justify the interest and the growth of researches that seek to discover ways to quantify and potentiate the permeation of substances in the skin. Microneedling is one of the techniques recently used since it aims to create microruptures in the skin, penetrating its barriers. Ascorbic acid is a pharmacological active that associated with the microneedle technique, has antioxidant, collagen-forming and melanogenesis inhibiting action. The objective of this study was, therefore, to verify and analyze the retention and permeation of 5% Ascorbic Acid associated to microneedling in a vertical dysfunction system. The results showed that micropunctures are effective in increasing the retention of the active in all the layers of the skin in the time of 30 minutes, however, the permeation was greater in the treated group in relation or control in the time of 15 minutes.

The maxillofacial region may be affected by a variety of benign lesions (odontogenic and non-odontogenic), but locally invasive. The use of a conservative treatment can generate high rates of recurrence, whereas a radical approach can lead to aesthetic-functional disorders. The use of Carnoy's solution, as a complementary therapy to surgical treatment, has been described in the literature with the purpose of reducing the recurrence rates of these lesions, in addition to minimizing damages resulting from an aggressive surgical treatment. Thus, the present dissertation is constituted by two chapters that aim, respectively: 1) to characterize the physico-chemical and pharmacological properties of Carnoy's solution with and without chloroform; 2) to evaluate in vitro the effect of different formulations of Carnoy's solution on calcified human substrates. As methodological approaches, laboratory studies were performed. In Chapter 1, the physico-chemical / pharmacological properties and behavior of different formulations of the Carnoy solution used in oral and maxillofacial surgery were evaluated through Raman microspectroscopy, UV / Visible spectrophotometry, among others. The results of this study showed that the Carnoy solution presents acidic pH and, when chloroform is present, it becomes slightly more acidic, as well as giving the solution a higher viscosity. When the solutions were not filtered after preparation, precipitation of iron salts occurred after the seventh day when the chloroform was used in its composition. A study was carried out with 36 lower third molars and 18 mandibular bone fragments, both donated and collected from humans, which were divided into three groups: two groups (Group I = Carnoy solution with chloroform, Group II = Carnoy solution without chloroform) and a control group (saline solution). The samples were evaluated through Raman microspectroscopy, Knoop microhardness test and scanning electron microscopy (SEM) with X-ray dispersive energy spectrum (EDX). There was demineralization / degradation of dental structures in both the mineral matrix / organic matrix and carbonate / phosphate (GI and GII, p

Objetivo: Evaluar in vitro la influencia del Orthospeed® sobre la resistencia friccional de los alambres Sentalloy® de 0.014” (GAC) y Turbo® 0.017 x 0.025” (Ormco). Materiales y métodos: Se utilizaron 60 segmentos de alambre, 30 de 0.014” y 30 de 0.017 x 0.025”, asignándose 10 de cada grupo para las capas intermedias: estado seco, saliva artificial y Orthospeed®; cada alambre se colocó sobre una maqueta formada por una placa con tres brackets Damon MX. Resultados: En ambos tipos de alambre se encontró diferencia estadísticamente significativa al comparar todas las capas intermedias, así mismo, entre los pares seco y saliva y los pares seco y Orthospeed®, sin embargo, no se encontró diferencia estadística significativa entre saliva y Orthospeed®. Conclusiones: La aplicación del Orthospeed® redujo la resistencia friccional entre los alambres y brackets utilizados.

Las especies de Cryptosporidium son causa frecuente de diarrea y tienen una significativa morbimortalidad en pacientes pediátricos. Un gran numero de agentes terapéuticos se han evaluado contra este parásito, sin embargo solo la nitazoxanida ha sido aprobado por la FDA y en pacientes inmunocomprometidos no hay una droga totalmente efectiva. La lactoferrina es una glicoproteína multifuncional presente en la leche materna con propiedades bacteriostáticas, antimicrobiales y antiinflamatorias. Condujimos un estudio para determinar el efecto de la lactoferrina en la infección in vitro por C. parvum y en sus esporozoitos. 2017-09-08

Los aceites esenciales son sustancias obtenidas de productos naturales que han creado interés por las distintas aplicaciones que se les puede dar en medicina, industria farmacéutica, cosmética y alimentaria. La especie Aloysia citriodora Palau (Cedrón) es una planta ampliamente cultivada en el Perú, es consumida habitualmente en infusiones, y su aceite esencial es de agradable aroma cítrico y penetrante. El objetivo del presente trabajo fue conocer la composición química del aceite esencial de Aloysia citriodora Palau de la región de Huarochiri, Lima, Lima y realizar un fraccionamiento biodirigido con el fin de conocer la actividad in vitro del aceite esencial y sus fracciones contra Escherichia coli y Salmonella typhimurium. La composición del aceite esencial fue determinada por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas, los compuestos mayoritarios presentes fueron: α-Citral (22.13%), 9,10-dehidro-isolongifoleno (15.46%), β-Citral (14.06%) y limoneno (10.28%). Para la identificación de los compuestos se realizó una comparación entre los espectros de masas obtenidos con los presentes en las bibliotecas del cromatógrafo. También se calcularon los índices aritméticos de retención y se los compararon con los de la biblioteca de espectros de masas de Adams. El aceite esencial de Aloysia citriodora mostró actividad antibacteriana in vitro, la concentración mínima inhibitoria tanto para Escherichia coli como para Salmonella typhimurium fue 1.6%. Por medio de cromatografía de columna en fase normal se logró fraccionar al aceite esencial en 3 fracciones claramente diferenciadas: AE1, AE2 y AE3. La fracción con mejor actividad antibacteriana fue la AE2, la cual presentó un MIC de 1.6% contra las bacterias E. coli y S. typhimurium. El compuesto mayoritario en la fracción AE2 fue el citral, el cual es el principal responsable de la actividad antibacteriana encontrada en el aceite esencial de Aloysia citriodora. Con el presente estudio se contribuye con la caracterización del aceite esencial de Aloysia citriodora Palau proveniente de Huarochiri, Lima, Lima, Perú y con la identificación de su principal compuesto activo contra Escherichia coli y para Salmonella typhimurium.

RESUMEN: Los sistemas de liberación controlada son una prometedora alternativa para el tratamiento de infecciones intracelulares por su capacidad para modificar el perfil de liberación de un principio activo e incluso vectorizar su distribución a nivel celular. En esta investigación se desarrollaron dos sistemas de liberación de doxiciclina utilizando micropartículas y liposomas, elaborados por secado por aspersión y evaporación en fase reversa, respectivamente. Las micropartículas fueron preparadas con dos diferentes mezclas de agentes encapsulantes: gelatina:sacarosa 70:30 y gelatina:sacarosa:caroboxitemilcelulosa 13.64:85.86:0.50, y se caracterizaron en términos de humedad, actividad acuosa, propiedades de fluidez, tamaño, potencial zeta, rendimiento, eficiencia y liberación in vitro. Se diseñaron dos tipos de liposomas: neutros DMPC y aniónicos DMPC:DMPS 1:1, utilizando una concentración de fosfolípido 6 mg/mL. Se estudió el efecto de adición de DMPS en el tamaño y carga superficial de liposomas de DMPC, la capacidad de incorporación de doxiciclina en los dos sistemas y la internalización de los liposomas en células DH82, evaluada por microscopía confocal. El sistema microparticulado compuesto por gelatina:sacarosa:caroboxitemilcelulosa presentó mejores características en términos de Índice de Carr (23.33 %), Relación Hausner (1.30), morfología suave y superficie externa lisa, eficiencia de encapsulación (57.91 %) y menor cantidad de principio activo liberado a pH ácido. En cuanto a los liposomas, aquellos compuestos por DMPC:DMPS 1:1 mostraron ser mayormente internalizados de acuerdo con el perfil de intensidad de fluorescencia. xviii Los resultados indicaron que las dos formulaciones, microparticulada y liposomal, tienen potencial de ser implementadas en el tratamiento de enfermedades intracelulares en las que la doxiciclina tenga una acción terapéutica. ABSTRACT: Drug delivery systems are a promising alternative for intracellular infections treatments due to their capability to modify drug release profiles and even vectorize in a cellular level. Two drug delivery systems of doxycycline were developed in this research with microparticles and liposomes, the first one elaborated by spray drying and the second with reverse-phase evaporation vesicle. Microparticles were prepared with two different wall material mixtures: gelatin:sucrose 70:30 and gelatin:sucrose:carboxymethyl cellulose 13.64:85.86:0.50, and were evaluated in terms of moisture, water activity, flow properties, size, zeta potential, yield, efficiency and in vitro release. Two different types of liposomes were designed: neutral DMPC and anionic DMPC:DMPS 1:1, each one with 6 mg/mL of phospholipid. The DMPS addition effect on DMPC liposomes was studied by its size and surface charge, as well as the doxycycline incorporation capacity on the two systems and the liposomes internalization in DH82 cells by confocal microscopy. The microparticulate system, composed by gelatin:sucrose:carboxymethyl cellulose showed better characteristics in terms of Carr’s Index (23.33 %), Hausner Ratio (1.30), soft morphology and smooth external surface, encapsulation efficiency (57.91 %) and lower quantity of active ingredient released at acid pH. Regarding liposomes, those composed by DMPC:DMPS 1:1 showed to be mainly uptake according to the data provided by the fluorescence intensity profile. Results suggested that both formulations, microparticles and liposomes, have potential to be used in the intracellular diseases treatments in which doxycycline has therapeutical effect.

Objetivos: El propósito de este estudio fue de evaluar in vitro de Coca Cola®, Pilsen Callao® y Red Bull® en la tensión de ligaduras elastoméricas convencionales Morelli® y las trataras con material lubricante Synergy® en diferentes intervalos de tiempo. Materiales y métodos: Para el estudio se empleó ligaduras elastoméricas convencionales, Morelli® y las tratadas con material lubricante, Synergy®, las cuales se evaluaron en seco, en saliva artificial y en inmersiones de Coca Cola®, Pilsen Callao® y Red Bull®. La tensión se midió a través de una máquina de evaluación universal en intervalos de tiempo de 0 horas, 24 horas, 7 días, 24 días y 28 días. Resultados: El análisis de varianza ANOVA multifactorial de tres vías fue usado para comparar el efecto de las bebidas de evaluación sobre la tensión de las diferentes ligaduras elastoméricas lo cual se afirma que no hay diferencia estadísticamente significativas Conclusiones: Todas las ligaduras elastoméricas expuestas a bebidas experimentaron pérdida de la tensión, siendo las ligaduras elastoméricas Morelli® las que presentó menor tensión que las ligaduras elastoméricas Synergy®.

Los postes de fibra de vidrio reforzados con resina en unión con las estructuras dentarias y cemento de resina se comportan como un monobloque. Una unión inadecuada en las interfaces produce descementación y falilas en la adhesíón del poste frente a fuerzas oclusales o de cizallamiento. Algunos autores sugieren estrategias como el tratar la superficie del poste argumentando que generan retención mecánica y química entre el poste y conducto radicular. 2017-09-08

En el presente trabajo se realizó un estudio in Vitro con el fin de comparar la resistencia adhesiva a la tracción en dentina del sistema adhesivo convencional Adper Single Bond de 3M y un sistema autograbante Adper Prompt L-Pop. de 3M. Para realizar el estudio se utilizaron 20 piezas dentarias humanas posteriores, sanas, recientemente extraídas. Previa confección de los cuerpos de prueba, los molares fueron inmersos en formalina al 2%, lavados con agua y limpiados con una mezcla de piedra pómez con agua. Posteriormente fueron seccionados en sentido vestíbulo lingual, para así obtener dos mitades a las cuales se les eliminó los restos de cámara pulpar y se les alisó la superficie interna hasta obtener una superficie totalmente plana. Sobre ellos se confeccionaron los cuerpos de prueba que consistieron en un cilindro de resina de dimensiones normadas que se adhirieron al sustrato dentario con las dos técnicas de adhesión, en 20 mitades de molares se realizó la técnica de autograbado y en las 20 mitades restantes se realizó la técnica de grabado ácido total. Los cuerpos de prueba fueron sometidos al test de resistencia a la tracción en una máquina de ensayos universal TINIUS OLSEN. Los resultados obtenidos en Nw fueron transformados a Kg/cm2 para luego obtener los datos en MPa, estos resultados fueron sometidos a análisis estadístico mediante el Test Student, no encontrándose diferencias estadísticamente significativas en la resistencia adhesiva entre ambos grupos. Se concluyó que las restauraciones de resina aplicados con una sistema de adhesivo de 5° generación (Adper Single Bond de 3M) presentaron valores mayores en promedio que el de las restauraciones realizadas con un sistema de adhesivo convencional de la misma marca, pero esta diferencia no fue estadísticamente significativa. Estos resultados pueden deberse a que la técnica adhesiva convencional, considerada la técnica más confiable y respaldada en la bibliografía obtiene excelentes resultados en esmalte, pero en dentina el rendimiento de los adhesivos autograbantes es mayor.

En las últimas décadas, la incidencia de queratitis producida por hongos se ha incrementado, siendo la principal causa de complicaciones oculares (ceguera). Los estudios y experiencia de los médicos oftalmólogos sugieren que la nueva generación de triazoles, dentro de ellas el Voriconazol, representa una poderosa herramienta para el tratamiento de queratitis micótica. Diversos estudios comprueban las ventajas de Voriconazol por vía intravenosa (solución para inyección), oral (comprimidos) y tópica (como solución), pero ninguna sobre vía tópico en gel. El gel oftálmico de Voriconazol al ser una nueva forma farmacéutica, no existen estudios que evalúen la susceptibilidad antifúngica. Se realizó una prueba de sensibilidad in-vitro utilizando la técnica de microdilución en caldo, evaluando la concentración del inoculo, temperatura y los tiempos de incubación de tres cepas ATCC con mayor incidencia en queratitis fúngica. Los resultados encontrados indican que Candida albicans ATCC® 90028 y Aspergillus fumigatus ATCC® 204305 son susceptibles al gel oftálmico de Voriconazol. Caso contrario, con Fusarium solani ATCC® 36031, quien muestra una fuerte resistencia frente a Voriconazol. Por otro lado, las lecturas obtenidas a las 24 y 48 horas para levaduras, muestran valores similares. Se concluye que una cepa de estudio resultó resistente al gel oftálmico de Voriconazol (Fusarium solani ATCC® 36031).

The microorganisms when presented in biofilm express properties different from when they are in the planktonic form. One of these properties is a higher resistance to antimicrobial agents. The aim of this study was to evaluate the formation of dermatophytes’ biofilms in in vitro and ex vivo assay performed in polystyrene coverslip and nail fragments, respectively, and their susceptibility to three antifungal agents (itraconazole, voriconazole and griseofulvin) in planktonics and biofilm forms. To this end, at first, they were used 26 strains isolated from clinical specimens of human and animal: Trichophyton rubrum (4) Trichophyton tonsurans (6), Trichophyton mentagrophytes (3), Microsporum gypseum (3) e Microsporum canis (10). The biofilms were initially formed in microdilution plates, and the strains were classified by the amount of biomass as non producers (2/26), weak (7/26), moderate (1/26) and strong biofilm producers (16/26). Then, strains, strong producers of biofilms, were chosen, one of each species, to biofilm formation in coverslip Thermanox® and nail fragments for later analysis by optical, confocal and scanning electron microscopy. The analyzes demonstrated that all species formed biofilms in vitro and ex vivo, with different density and architecture. M. gypseum and M. canis produced biofilms with higher and lower amounts of biomass, respectively. At a second step, according to the recommendations of the CLSI M38-A2 protocol, the minimum inhibitory concentration (MIC) values for the three antifungal agents against these 26 strains were determined, in the planktonic form. MICs values ranged from 0.00195-0.25 μg/ml for itraconazol, 0.00195-0.125 for voriconazole and

FACEPE A anfotericina B (AnB) é um antibiótico macrolídeo derivado de uma cepa de Streptomyces nodosus, de reconhecida atividade antifúngica e leishmanicida. No entanto, tem seu uso limitado em razão da elevada toxicidade. Para tentar reduzir essa toxicidade na forma convencional tem se estimulado o desenvolvimento de novos sistemas de liberação. A via tópica oferece algumas vantagens, todavia a eficácia tópica só é obtida quando o fármaco apresenta adequado grau de penetração na pele. As microemulsões (MEs) são uma proposta interessante para a veiculação por via tópica da AnB, pois atuam como promotores de permeação, devido ao reduzido tamanho das gotículas formadas, assim como pelo seu alto conteúdo de tensoativos, que desorganiza os lipídeos da pele. Além disso, as MEs podem proporcionar uma modificação na biodisponibilidade e na diminuição da toxicidade dos fármacos, visto que esses sistemas apresentam-se como reservatórios capazes de liberar e direcionar os fármacos para tecidos e células específicas do organismo. Portanto, o objetivo deste estudo foi desenvolver e comparar as características biofarmacêuticas e potencial irritante de MEs e sistemas convencionais (SCs) contendo óleo de Syagrus cearensis para administração tópica de AnB. Diagramas de fase pseudo-ternários foram construídos utilizando o método de titulação de água para desenvolver as MEs e os SCs foram preparados de acordo com a técnica clássica de inversão de fase. No estudo de permeação e retenção cutânea, pele de porco dermatomizada sem estrato córneo foi utilizada como um modelo de biomembrana lesionado. O potencial de irritação foi avaliado utilizando três métodos alternativos, os ensaios da membrana corioalantóide (HET-CAM e CAM-TBS) e o teste de opacidade e permeabilidade em córnea bovina (BCOP). A formulação otimizada (ME02) consistiu em Anfotericina B a 0,1% (p/p), óleo catolé 9,1% (p/p), Smix (1:1, Tween 20 e Kolliphor EL) 81%, tamanho de gotícula de 31,02 ± 0,9 nm, potencial zeta de -23,4 mV e viscosidade 0,63 ± 0,1 Pa.s. A ME02 exibiu maior retenção de AnB nas camadas de pele (84,79 ± 2,08 μg.cm-2) do que todas as outras formulações. Em geral, as MEs apresentaram maior liberação e retenção do fármaco do que os SCs e todas as formulações mostraram maior retentividade que permeabilidade. Apenas as MEs desenvolvidas usando Labrasol/Plurol (L/PO) como par de tensoativos exibiram um potencial de irritação moderado, todas as outras formulações foram classificadas como não-irritantes ou levemente irritantes. Os resultados indicam que as formulações contendo óleo de S. cearensis são alternativas promissoras para a administração tópica da AnB visando o tratamento da leishmaniose cutânea. Amphotericin B is a macrolide antibiotic derived from a strain of Streptomyces nodosus, known for its antifungal and antileishmanial activity. However, it has limited use due to the high toxicity. In order to reduce the toxicity in the conventional way, the development of new delivery systems has been stimulated. Topical administration of active drugs is a route that offers certain advantages, however, topical efficacy is only obtained from drugs with a suitable degree of penetration into the skin. Microemulsions are an interesting proposal for topical administration of Amphotericin B, because they act as permeation enhancers, due to the small size of the droplets formed, as well as to its high content of surfactants, which disrupts the skin lipids. Moreover, the MEs can also provide a change in bioavailability and by decreasing the toxicity of drugs, since such systems are presented as reservoirs capable of releasing drugs and targeting tissues and specific cells of the organism. Therefore, the aim of this study was to compare the biopharmaceutical characteristics and irritation potentials of microemulsions (MEs) and conventional systems (CSs) containing oil from Syagrus cearensis for intradermal delivery of Amphotericin B (AmB). Pseudo-ternary phase diagrams were constructed using a water titration method to develop the MEs, and the CSs were prepared according to the classical technique of phase inversion. In the skin permeation and retention study, dermatomed pig skin without stratum corneum was used as an alternative disturbed skin model. The irritation potential was evaluated using three different methods, chorioallantoic membrane assays (HET-CAM and CAM-TBS), and bovine corneal opacity and permeability test (BCOP). The optimized formulation (ME02) consisting of 0.1% (w/w) Amphotericin B, 9.1% (w/w) catolé oil, 81% (w/w) Smix (1:1, Tween 20 and Kolliphor EL) possessed droplet size of 31.02 ± 0.9 nm, zeta potential of -23.4 mV and viscosity 0.63 ± 0.1 Pa.s. ME02 exhibited greater retention of AmB in to skin layers (84.79 ± 2.08 μg.cm-2) than all the others formulations. In general, MEs showed higher drug release and retention than CSs and all of the formulations showed greater retentivity than permeability. Only MEs developed using Labrasol/Plurol Oleique (L/PO) as the surfactant and co-surfactant exhibited a moderate irritation potential, all other MEs and CSs were classified as non-irritants or slight irritants. The results indicate that formulations containing oil from S. cearensis are promising alternatives for the delivery of AmB targeting the treatment of cutaneous leishmaniasis.

Sporotrichosis is a cosmopolitan subcutaneous mycosis, found mainly in tropical and subtropical areas of Latin America, caused by species of Sporothrix schenckii complex. The aim of this study was to demonstrate the capacity of Sporothrix schenckii complex to produce in vitro biofilms and to determine the profile of these biofilms against to classical antifungal drugs. Four species from Sporothrix schenckii complex were used: S. brasiliensis (n=10), S. schenckii sensu stricto (n=2), S. globosa (n=2) and S. mexicana (n=4). The formation of biofilms was performed by transferring inoculum of 2 x 105 conidia/mL for microdilution plates, which were incubated at 25 °C for 5 days. After each day of incubation, XTT and Crystal Violet assays were made to determine the metabolic activity and biomass of biofilm, respectively. For susceptibility tests, three different concentrations (planktonic MIC, 10 x MIC and 50 x MIC) of antifungals amphotericin B (AMB), caspofungin (CAS), ketoconazole (KTC), voriconazole (VRC) and fluconazole (FLC) were transferred to biofilm wells, which were incubated for 72 hours at 25 °C. The biofilms profile then antifungal drugs presence was determined by the XTT and crystal violet assays. Biofilms were produced in Thermanox™ coverslips for viewing by optical microscopy with congo-red staining, scanning electron microscopy and confocal microscopy. It was found that all species from S. schenckii complex are strong biofilm-forming, with no difference formation between them. Absorbance of biofilm after drug exposure showed that biomass and metabolic activity was significantly reduced (p

Submitted by LEONARDO DE FREITAS SILVA null (leonardofreitas86@gmail.com) on 2016-10-20T13:26:49Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado- reapresentação 1.pdf: 1472109 bytes, checksum: e157f95a9ba34bce0469c51f091af276 (MD5) Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-10-26T17:52:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_lf_me_arafo.pdf: 1472109 bytes, checksum: e157f95a9ba34bce0469c51f091af276 (MD5) Made available in DSpace on 2016-10-26T17:52:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_lf_me_arafo.pdf: 1472109 bytes, checksum: e157f95a9ba34bce0469c51f091af276 (MD5) Previous issue date: 2016-10-17 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A estabilidade primária de implantes dentários corresponde a um fenômeno mecânico relativo à qualidade ou quantidade óssea, ao tipo de implante e a técnica de instalação. O objetivo deste trabalho foi avaliar o tempo de fresagem, aquecimento dos sítios fresados e a estabilidade dos implantes instalados em cavidades realizadas com ultrassom cirúrgico e instrumentos rotatórios. Foram realizadas 64 cavidades em 04 blocos de poliuretano simulando as densidades de ossos tipo I, II, III e IV. A temperatura da superfície do bloco nos leitos foi medida durante a fresagem. A estabilidade dos implantes foi mensurada por meio do torque de inserção, de remoção e frequência de ressonância. O implante cilíndrico TitaOss 3,75 x 11 mm foi instalado em todas as cavidades. Os resultados mostraram maior tempo e temperatura para o grupo em que foi usado o ultrassom. Quanto à estabilidade primária não houve diferença significante entre os grupos estudados. Pôde-se concluir que a estabilidade primária dos implantes não foi influenciada pelos métodos de fresagem utilizados e que o ultrassom cirúrgico necessitou de mais tempo e gerou mais calor do que o instrumento rotatório para o preparo das cavidades. The primary stability of dental implants corresponds to a mechanical phenomenon related to bone quality or quantity, type of implant and installation technique. The objective of this study was to evaluate the time of drilling, heating drilled sites and stability of implants placed in cavities made with piezosurgery and rotary instruments. Polyurethane blocks were used simulating the densities of bone type I, II, III and IV. The surface temperature of the block was measured in the cavity during drilling, and recorded the highest temperature variation. The stability of the implants was measured with a torque insertion, torque of removal and resonance frequency. The cylindrical implant TitaOss 3.75 x 11 mm was used in all cavities. The results showed greater time and temperature for the group that was used piezosurgery. The primary stability was no significant difference between groups. It could be concluded that implant primary stability was not influenced by the used methods and piezosurgery took more time and generated more heat than the conventional rotatory instruments to prepare the cavities.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-07T15:14:00Z No. of bitstreams: 1 Paula Azevedo dos Santos Tese completa.pdf: 2247901 bytes, checksum: de2f4110fb7968af2bf65df8905ed4b1 (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-07T15:14:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula Azevedo dos Santos Tese completa.pdf: 2247901 bytes, checksum: de2f4110fb7968af2bf65df8905ed4b1 (MD5) Previous issue date: 2016-09-25 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Aeromonas is an important pathogen for humans and animals and is responsible for the etiology of intestinal and extraintestinal diseases. The presence of Aeromonas spp. in food and water demonstrates that it s an important vehicle of infection in humans. The pathology caused by these bacteria involves several virulence factors, such as the ability to adhere, invade and produce toxins. The properties conferred by these factors have been extensively studied in experiments of interaction between bacterial strains and cell culture. However, there is no animal model established to study Aeromonas spp. pathogenesis. The present study assessed the interaction of eight Aeromonas spp. strains, previously isolated from human faeces, food and water with HEp-2, Caco-2 and T-84 cell lines as to the cytotoxic effects, the pattern of adhesion, invasive capacity and intracellular survival. We also evaluated the interaction of five A. caviae strains isolated from human diarrheic faeces with rabbit ileal and colonic mucosa ex vivo, using in vitro organ culture model (IVOC). The results showed that Aeromonas strains were adherent to three cells lines in 6 h of incubation, displaying the aggregative adherence pattern. Among eight strains studied, 50 % produced cytotoxic effects on HEp-2 cells, while none of the strains produced cytotoxic effects on Caco-2 and T-84 cells at 48 h. This study demonstrated that strains of Aeromonas isolated from different sources were able to invade intestinal (T-84, Caco-2) and epithelial (HEp-2) cell lines cultivated in vitro surviving within intracellular environments up to 72 h. All strains adhered to rabbit ileal and colonic mucosa, with higher degree of adherence on the colonic mucosa. The typical aggregative adherence pattern was observed among all strainsstudied. Through electron microscopy and light microscopy we observed extensive colonization of ileal and colonic mucosa, large mucus production, biofilm formation and morphological alterations such as intense vacuolization, structural disorganization, cell extrusion and destruction of the villi. Our study demonstrated that the in vitro organ culture (IVOC) of rabbit intestinal mucosa may be used to investigate the mechanisms of pathogenesis of Aeromonas spp. Our results also contributed to reinforce the pathogenic potential of Aeromonas strains, confirming its importance inpublic health. Aeromonas é um importante patógeno para o homem e animais, sendo responsável pela etiologia de doenças intestinais e extra-intestinais. A presença de Aeromonas spp. nos alimentos e na água faz com que estes sejam importantes veículos de infecções para os seres humanos. A patologia causada por esta bactéria envolve inúmeros fatores de virulência, dentre eles a capacidade de aderir, invadir e produzir toxinas. As propriedades atribuídas a esses fatores têm sido extensivamente estudadas em experimentos de interação entre cepas bacterianas e cultura de células. No entanto, não há um modelo animal bem estabelecido no estudo da patogênese de Aeromonas spp. O presente estudo avaliou a interação de oito cepas de Aeromonas spp. previamente isoladas, a partir de fezes humanas, alimentos e água com linhagens celulares HEp-2, T-84 e Caco-2 quanto a ação das toxinas citotóxicas, o padrão de aderência celular, a capacidade de invasão e a sobrevivência intracelular. A interação de cinco cepas de A. caviae originárias de fezes diarreicas humanas com mucosa ileal e colônica de coelho ex vivo, utilizando cultivo de órgão in vitro (IVOC) também foi avaliada. Observamos que todas as cepas de Aeromonas foram aderentes às três linhagens celulares em 6 horas de incubação, exibindo o padrão agregativo. Entre as oito cepas estudadas, 50% produziram efeitos citotóxicos em células HEp-2, enquanto que nenhuma cepa foi citotóxica em células Caco-2 e T-84 após 48 horas de incubação. Este estudo demonstrou que as cepas de Aeromonas isoladas de diferentes fontes foram capazes de invadir linhagens intestinais (T-84, Caco-2) e linhagem epitelial (HEp-2) cultivadas in vitro e que sobreviveram no ambiente intracelular por até 72 h. Todas as cepas aderiram a mucosa ileal e colônica de coelho ex vivo, com maior grau de aderência na mucosa colônica. O típico padrão agregativo de aderência foi observado entre as cepas estudadas. Através de microscopia eletrônica e microscopia de luz foi possível observar extensiva colonização da mucosa do íleo e do cólon, grande produção de muco, formação de biofilme e alterações morfológicas tais como, intensa vacuolização, desorganização estrutural, extrusão celular e destruição das vilosidades. Nosso estudo demonstrou que a cultura de órgão in vitro (IVOC) da mucosa intestinal de coelho pode ser utilizada para investigar os mecanismos de patogênese de Aeromonas spp. Nossos resultados também contribuíram para corroborar o potencial patogênico de cepas de Aeromonas, ratificando sua importância na área de saúde pública.

Submitted by ALINE SILVA ANDRADE null (alynesandrade@hotmail.com) on 2016-05-25T18:52:56Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO FINAL 25_05_2016 PARA REPOSITORIO UNESP.pdf: 1640140 bytes, checksum: 1d8244378caa2e1a54d7c3ab788fdacf (MD5) Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-05-31T14:06:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 andrade_as_me_arafo_par.pdf: 644728 bytes, checksum: 71ea41c3a10ae63a6f903e598e5303a0 (MD5) Made available in DSpace on 2016-05-31T14:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 andrade_as_me_arafo_par.pdf: 644728 bytes, checksum: 71ea41c3a10ae63a6f903e598e5303a0 (MD5) Previous issue date: 2016-03-31 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Cimentos à base de silicato tricálcico são desenvolvidos como alternativa ao Mineral Trióxido Agregado (MTA). O objetivo do estudo foi avaliar a biocompatibilidade e bioatividade do cimento experimental silicato tricálcico com 20% de óxido de zircônio (ZrO2) (STC) e MTA Plus (MTAP). Capítulo1- Células humanas de osteoblastos (Saos-2) foram utilizadas para análise da viabilidade celular por meio dos ensaios de MTT e Vermelho Neutro (NR), da bioatividade pela atividade da enzima fosfatase alcalina (ALP) e da presença de área mineralizada pela coloração de Vermelho de Alizarina (ARS). Os dados obtidos para MTT, NR e ALP foram analisados por ANOVA e Bonferroni, e ARS, por ANOVA e Tukey (p ≤ 0,05). Nos ensaios de viabilidade celular, os materiais não foram citotóxicos. Maior atividade de ALP ocorreu aos 7 dias para todos materiais avaliados. Área mineralizada foi observada em todos os grupos, sendo menor para o grupo STC. Concluiu-se que o cimento experimental silicato tricálcico com 20% de óxido de zircônio e MTA Plus apresentam citocompatibilidade e potencial bioativo. Capítulo 2- A reação inflamatória induzida pelo STC e MTAP foi investigada em subcutâneo de ratos. Tubos de polietileno foram preenchidos com STC (n= 20) e MTAP (n= 20) e implantados no subcutâneo dorsal de quarenta ratos. No grupo controle (GC; n= 20), tubos vazios foram implantados. Após 7, 15, 30 e 60 dias, os tubos de polietileno com o tecido conjuntivo circundante foram fixados e embebidos em parafina. O número de células inflamatórias foi avaliado nos cortes corados em HE; e a densidade numérica de células para interleucina-6 (IL-6) após imunomarcação. Os dados obtidos foram analisados pelos Testes ANOVA e Tukey (p ≤ 0,05). Elevado número de células inflamatórias e imunomarcadas para IL-6 foram observadas aos 7 dias, em todos os grupos; no entanto, o número de células inflamatórias foi significativamente maior para os grupos STC e MTAP. Diferenças significantes não foram detectadas em relação ao número de células imunomarcadas para IL-6 nas cápsulas entre os grupos GSTC, GMTAP e GC, em cada período. Uma redução gradativa e significante da reação inflamatória e imunomarcação para IL-6 foi observada, em todos os grupos. Aos 60 dias, as cápsulas de tecido conjuntivo denso exibiram diversos fibroblastos e feixes organizados de fibras colágenas. Concluiu-se que o cimento experimental silicato tricálcico com 20% de óxido de zircônio e MTA Plus são materiais biocompatíveis. Tricalcium silicate- based cements have been developed as an alternative to Mineral Trióxido Agregado (MTA). The aim of the study was to evaluate biocompatibility and bioactivity of the tricalcium silicate cement replaced with 20% zirconium oxide (STC) e MTA Plus (MTAP). Chaper 1- Human osteoblastic cells (Saos-2) were exposed to test materials and assessed for viability, MTT and Neutral Red (NR) assay, and bioactivity for ALP activity assay and alizarin red staining (ARS). Unexposed cells acted as the control group. Statistical analysis was performed using ANOVA and the Bonferroni post- test (P < 0.05) to MTT, NR and ALP, and ANOVA and Tukey post- test (P ≤ 0.05) to ARS. MTT and NR results, all tested cements were non-cytotoxic. The highest ALP activity occurred at the 7th days. Mineralized area was observed in all materials, STC group showed lower mineralized area. Experimental tricalcium silicate with 20% zirconium oxide and MTA Plus have present biocompatibility and bioactive potential. Chapter 2- The inflammatory reaction induced by tricalcium silicate cement replaced with 20% zirconium oxide (STC) e MTA Plus (MTAP) was evaluated in rat subcutaneous tissues. A polyethylene tube filled with STC (n= 20) and MTAP (n= 20) was placed into the dorsal subcutaneous of forty rats; in the control group (GC; n= 20), empty tubes were implanted. After 7, 15, 30 and 60 days, the polyethylene tubes surrounded by connective tissue were embedded in paraffin. The number of inflammatory cells was estimated in HE-stained sections; numerical density of interleukin-6 (IL-6)- immunolabelled cells was also performed. The differences amongst the groups were analysed statistically by Tukey’s test (P ≤ 0.05). A high number of inflammatory cells and IL-6-positive cells were observed at 7 days, in all groups; however, the number of inflammatory was significantly higher (P ≤ 0.05) to STC and MTAP groups. The number of IL-6- positive cells in the capsules was not significantly different amongst GSTC, GMTAP and GC groups in each period. In the capsules of animals from all groups, a gradual and significant reduction (P ≤ 0.05) of these parameters was seen over time. At 60 days, the connective tissue capsules exhibited numerous fibroblasts and bundles of collagen fibres. Experimental tricalcium silicate with 20% zirconium oxide and MTA Plus are biocompatible. FAPESP: 2014/13353-1

The Chagas disease is a major public health problem, affecting about 6 million people worldwide and causes high morbidity and mortality in affected populations. The benznidazole (BZ), the drug used in the treatment has limited effectiveness and cause serious adverse effects. The drug transport by nanoparticles has demonstrated efficacy as the controlled and targeted release of pharmacological molecules, in addition to its desirable properties such as good biocompatibility and biodegradability. The objective of this study was to evaluate the cytotoxicity of benznidazole nanoparticles of calcium carbonate (CaCO3 @ BZ) on host cells LLC-MK2; determining the trypanocidal effect on epimastigotes, trypomastigote and amastigotes of T. cruzi Y strain and comparing the effect of BZ as well as to characterize the mechanism of death. The cytotoxicity tests using the MTT method conducted with LLC-MK2 cells grown in DMEM with 10% FBS showed IC50 of 55 ug / ml for BZ @ CaCO3 and 160 g / mL for BZ. epimastigotes were cultured in LIT 10% FBS at 28 ° C in the presence of CaCO3 @ BZ for 24, 48 and 72 hours. BZ @ CaCO3 showed trypanocidal activity against epimastigotes the three treatment times (24h IC50 = 8.72 mg / ml, 48 h IC50 = 8 ug / ml, 72 h IC50 = 4.8 ug / ml) this being more significant effect the BZ (IC50 = 24h 56.7 g / ml IC50 = 48h 15.9 g / ml, 72 h IC50 = 4.3 ug / ml). trypomastigotes were obtained from LLC-MK2 cells infected supernatants, resuspended in DMEM with 2% FCS and treated for 24 h. The trypomastigotes were more likely BZ @ CaCO3 (IC50 = 1.8 ug / ml) than the BZ (IC50 = 67 ug / ml). These assays were also performed with calcium carbonate nanoparticles free drug (@ CaCO3) used as negative control. In the tests with the amastigote forms obtained by infecting LLC-MK2 cells BZ @ CaCO3 was able to reduce the% of infected cells, the number of amastigotes per infected cells and the survival rate at 24 hours of incubation. Flow cytometric assays using fluorescence markers 7-amino actinomycin D, annexin V-PE and rhodamine 123 demonstrated that the trypanocidal effect of both BZ @ CaCO3 as BZ associated death by necrosis with altered mitochondrial potential. Thus, it is concluded that the CaCO3 has BZ @ trypanocidal effect in vitro on the three forms of Trypanosoma cruzi, this being potentially greater effect than that observed for BZ. A doença de chagas é um grande problema de saúde pública, afeta cerca de 6 milhões de pessoas em todo o mundo e causa altos índices de morbidade e mortalidade nas populações afetadas. O benzonidazol (BZ), fármaco utilizado no tratamento apresenta eficácia limitada e provoca sérios efeitos adversos. O transporte de fármacos por meio de nanopartículas tem demonstrado eficiência quanto à liberação controlada e direcionada de moléculas farmacológicas, além de apresentar propriedades desejáveis, como boa biocompatibilidade e biodegradabilidade. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a citoxicidade de nanopartículas de benzonidazol em carbonato de cálcio (BZ@CaCO3) sobre células de hospedeiras LLC-MK2; determinar o efeito tripanocida sobre as formas epimastigotas, tripomastigotas e amastigotas da cepa Y de T. cruzi e comparar ao efeito do BZ, bem como, caracterizar o mecanismo de morte. Os testes de citotoxicidade utilizando o método do MTT realizados com células LLC-MK2 cultivadas com meio DMEM a 10% de SBF demonstraram IC50 de 55 µg/mL para BZ@CaCO3 e 160 µg/mL para BZ. Formas epimastigotas foram cultivadas em meio LIT a 10% de SBF a 28ºC na presença de BZ@CaCO3 por 24, 48 e 72 horas. BZ@CaCO3 mostrou atividade tripanocida sobre formas epimastigotas nos três tempos de tratamento (CI50 24h = 8,72 µg/mL; CI50 48h = 8 µg/mL; CI50 72 h = 4,8 µg/ml) sendo esse efeito mais significativo que o do BZ (CI50 24h = 56,7 µg/mL CI50 48h = 15,9 µg/mL; CI50 72h = 4,3 µg/ml). Formas tripomastigotas foram obtidas a partir dos sobrenadantes de células LLC-MK2 infectadas, ressuspensas em meio DMEM com 2% de SBF e tratadas durante 24 h. As formas tripomastigotas foram mais susceptíveis a BZ@CaCO3 (IC50 = 1,8 µg/mL) do que ao BZ (CI50= 67 µg/mL). Esses ensaios também foram realizados com nanopartículas de carbonato de cálcio livres de fármacos (@CaCO3) utilizadas como controle negativo. Nos ensaios com as formas amastigotas obtidas por infecção de células LLC-MK2 BZ@CaCO3 foi capaz de reduzir o % de células infectadas, o número de amastigotas por células infectadas e o índice de sobrevivência em 24h de incubação. Ensaios de citometria de fluxo utilizando os marcadores de fluorescência 7- amino actinomicina D, anexina V- PE e rodamina 123 mostraram que o efeito tripanocida tanto da BZ@CaCO3 quanto do BZ está relacionado a morte por necrose com alteração do potencial mitocondrial. Assim, conclui-se que a BZ@CaCO3 apresenta efeito tripanocida in vitro sobre as três formas de Trypanossoma cruzi, sendo esse efeito potencialmente maior do que o observado para BZ.

Introdução: A detecção de pirogênios é imprescindível no controle da qualidade de produtos injetáveis. O Teste de Pirogênio em coelhos ainda tem larga aplicação, apesar da existência de métodos alternativos como o Teste de Ativação de Monócitos (MAT). Objetivo: Revisar o uso dos métodos alternativos no teste de pirogênio, apontando avanços e perspectivas a partir do reconhecimento do MAT pela Farmacopeia Europeia e sua aceitação para fins regulatórios no Brasil. Método: Uma busca foi realizada nas bases PubMed e BVS, com posterior classificação, categorização por assuntos e análise crítica dos resultados. Resultados: Foram identificados 24 trabalhos, abordando temas como as aplicações do MAT, sua validação e comparação com testes in vivo. O MAT apresentou melhores resultados quando comparado a outros testes, tanto na avaliação de produtos biológicos como na detecção de pirogênios não-endotoxinas. Limitações para sua difusão incluem a dificuldade de obtenção de sangue total humano como fonte de monócitos, para o qual diversas alternativas têm sido propostas. Conclusões: O MAT se mostra um método promissor, com aplicação na avaliação da segurança de novas tecnologias. Sua aplicação no Brasil depende de uma política nacional de implantação, que inclua maior Integração entre BraCVAM, Concea e RENAMA na busca por seu reconhecimento para fins regulatórios.

Objetivo: Comparar la resistencia de unión de tres agentes cementantes resinosos autoadhesivos de curado dual empleados sobre cerámica feldespática, siendo la superficie adamantina previamente grabada con ácido ortofosfórico al 37% por 15 segundos. Materiales y métodos: 16 discos de cerámica feldespática Vitadur alpha VM7 (Vita, Alemania) fueron divididos aleatoriamente en GI (Control): Ácido fluorhídrico (HF) al 10% Condac Porcelana (FGM, Brasil) por 1 min + lavado por 20 s + secado durante 20 s. + Silano Prosil (FGM, Brasil) + RelyX ARC (3M ESPE, EEUU); GII: HF al 10% Condac Porcelana (FGM, Brasil) por 1 min + lavado por 20 s + secado durante 20 s + Silano Prosil (FGM, Brasil) + RelyX U200 (3M ESPE, EEUU); GIII: HF al 10% Condac Porcelana (FGM, Brasil) por 1 min + lavado por 20 s + secado durante 20 s + Silano Prosil (FGM, Brasil) + Permacem 2.0 (DMG, Alemania); GIV: HF al 10% Condac Porcelana (FGM, Brasil) por 1 min + lavado por 20 s + secado durante 20 s + Silano Prosil (FGM, Brasil) + BisCem (Bisco, EEUU) y cementados en esmalte grabado. Las muestras fueron almacenadas en suero fisiológico por 24 hs para después ser seccionadas con una máquina de corte obteniendo especímenes de 1x1 x 6mm. Posteriormente, los especímenes fueron almacenados en suero fisiológico a 37°C por 24 hs antes de ser sometidos a una prueba de resistencia de unión a la microtracción con el microtensiómetro Microtensile tester (Bisco, EEUU). Los datos fueron analizados con ANOVA y el post test de Tukey. Resultados: Los cementos autoadhesivos RelyX U200, 3M; Permacem 2.0, DMG y BisCem, Bisco presentaron una mayor resistencia de unión (13.20±3.47 MPa, 13.67±5.11 MPa, 1 0.79±4.86 MPa; respectivamente) en comparación con el cemento convencional RelyX ARC, 3M (7.86±3.37 MPa), existiendo una diferencia estadísticamente significativa (p

Objetivo: El objetivo del estudio fue comparar in vitro la validez diagnóstica de dos sistemas de radiografía digital directa: dispositivo de carga acoplada (CCD) de Sirona® XIOS XG y placa de fósforo foto-estimulable (PSP) de Dürr® VistaScan en la detección de lesiones de caries proximal incipiente. Metodología: Se evaluaron 112 superficies proximales de 27 molares y 31 premolares extraídos, con o sin lesión de caries dental proximal incipiente. Se empleó como estándar de oro la evaluación histológica. Las imágenes radiográficas así como las del estéreo microscopio fueron evaluadas por un observador calibrado. Resultados: Los valores de sensibilidad obtenidos para el sistema CCD y PSP fueron de 0.35 y 0.31, respectivamente. Los valores de especificidad fueron similares para ambos sistemas (0.87). Los valores Az mostraron baja exactitud diagnóstica para ambos sistemas: 0.61 para el CCD y 0.59 para el PSP, no encontrándose diferencia estadísticamente significativa entre ambos valores (p=0.78). Conclusiones: Los sistemas CCD y PSP presentaron mejor capacidad para la detección de superficies sanas, pero una baja exactitud para detectar lesiones de caries dental proximal incipiente. Ambos presentaron baja concordancia con la evaluación histológica.

Objetivo: Comparar el diagnóstico de lesiones de caries oclusal usando la técnica de radiografía de aleta de mordida convencional y tomografía de haz cónico in vitro. Materiales y métodos: Se evaluaron 108 piezas dentarias (50 molares y 58 premolares) 108 superficies oclusales. Se realizó la adquisición de imágenes mediante tomografía de haz cónico (I-Cat de Imagines Sciences®) y radiografía convencional (Vario DG Sirona® con placas Kodak® Ultraspeed N°2); estas imágenes fueron evaluadas por dos observadores según el tipo de lesión de caries oclusal, considerando solo superficies sanas (R0) y lesiones R1, R2, R3 y R4. Resultados: Los valores más altos de concordancia para radiografía convencional bitewing y para tomografía computarizada cone beam, fueron 77 (71,3%) y 53 (49,1%) respectivamente, ubicándose dentro de la categoría R0 (sanas), mostrando diferencia significativa entre ambos métodos. Conclusiones: Existe diferencia en el diagnóstico de lesiones de caries dental oclusal utilizando la técnica radiográfica de aleta de mordida convencional y tomografía computarizada de haz cónico in vitro.

Orientadores: Michelle Franz Montan Braga Leite, Francisco Carlos Groppo Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O uso de formulações tópicas na cavidade oral apresenta baixa eficácia devido à complexidade e variabilidade da mucosa de revestimento e difícil acessibilidade aos tecidos profundos, como a polpa dental. Microagulhas têm sido relatadas como eficiente e indolor sistema transdérmico e transmucosa de fármacos para ação local e/ou sistêmica e poderia melhorar ação de fármacos tópicos em Odontologia. Visando a melhora da biodisponibilidade de formulações tópicas, estudos de permeação in vitro são muito importantes pois podem permitir a previsão do comportamento destas frente à barreira utilizada. No entanto, não existe um modelo de barreira que mimetize as condições reais da cavidade oral. Nesse contexto, este estudo teve como objetivos padronizar barreiras de tecidos espessos da cavidade oral de suínos, adaptar células de difusão e condições experimentais para realização de estudos de permeação in vitro com essas barreiras, visando o desenvolvimento de produtos tópicos em Odontologia. Além disso, avaliar a eficiência e aplicabilidade de microagulhas revestidas ou não como promotores de absorção in vitro, na metodologia desenvolvida. Artigo 1: foram padronizados os tecidos espessos de palato de porco (com e sem osso) como barreiras e condições experimentais para realização de ensaios de permeação in vitro. Em seguida, o sistema de microagulhas Dermaroller® (0,2, 0,5 e 1 mm de comprimento) foi aplicado naqueles tecidos, os quais foram montados em células de difusão vertical (Franz) adaptadas. Foram avaliados o fluxo, quantidade total permeada e o fator de promoção de permeação (EF) para os anestésicos locais lidocaína e prilocaína. Os tecidos foram padronizados com sucesso e a célula de Franz adaptada permitiu manter as condições ao longo das 12h dos experimentos de permeação. A permeação dos fármacos analisados ocorreu eventualmente, demonstrando a resistência das barreiras à difusão de fármacos. A aplicação prévia das microagulhas nos tecidos aumentou a permeação das drogas-teste em relação aos grupos-controle. Artigo 2: microagulhas de 0,7 mm foram revestidas com a droga Sulforrodamina B, aplicadas na superfície de mucosa jugal de suínos, seguida de ensaios de permeação (24h). Dois tipos de fluxo salivar (estático e dinâmico) foram simulados no compartimento doador da célula e comparados com a presença de umidade como controle negativo. Foram avaliados o tempo para início da permeação, fluxo e o EF. Ambos os tipos de fluxos salivares alteraram o perfil de permeação da droga modelo, aumentando a quantidade de droga permeada, em comparação com o controle, demonstrando a importância da saliva na realização de testes de permeação in vitro. Conclusões gerais: os tecidos foram padronizados e permitiram realizar ensaios de permeação nas células de Franz adaptadas. O uso de microagulhas foi eficaz em aumentar a permeação de fármacos nas condições avaliadas. A presença de fluxo salivar demonstrou ser importante para simular as condições reais da cavidade oral em permeação in vitro, pois pode ser fundamental na dinâmica da permeação através do tecido. O presente estudo representa um aprimoramento na realização de experimentos de permeação in vitro visando a melhora de formulações tópicas e promotores de absorção para uso em Odontologia Abstract: The use of topical formulations in the oral cavity presents low efficiency because of the complexity and variability of the mucosal lining and hard accessibility of deep tissues, as dental pulp. Microneedles have been reported as efficient and painless transdermal and transmucosal drug systems for local and/or systemic effect and could improve action of topical drugs in Dentistry. Aiming at improving the bioavailability of topical formulations, in vitro permeation studies are very important because it may allow predicting the behavior of these formulations in front of the barrier used. However, there is no barrier model that mimics the actual conditions of the oral cavity. In this context, this study aimed to standardize thick tissue barriers of the oral cavity from pigs, adapt diffusion cells and experimental conditions for performing in vitro permeation studies with these barriers, in order to develop topical products in Dentistry. Moreover, to evaluate the efficiency and applicability of microneedles coated or not as in vitro absorption enhancers in this methodology. Article 1: pig thick palate tissues (with and without bone) and experimental conditions were standardized to carry out in vitro permeation experiment. The microneedle device Dermaroller® (0.2, 0.5 and 1 mm length) was applied in those tissues, which were mounted in adapted Franz-type vertical diffusion cells. The Flux and the permeation enhancement factor (EF) of the local anesthetics lidocaine and prilocaine were evaluated. Tissues were successfully standardized and the adapted Franz cell allowed to maintain the experimental conditions through the 12h of permeation assay. The permeation of the analyzed drugs has occurred eventually, demonstrating the effectiveness of the barriers. The microneedles pretreatment on tissues increased the permeation flux of the tested drugs, in comparison to control groups. Article 2: microneedles of 0.7 mm were coated with the drug Sulforhodamine B, and applied on the porcine buccal mucosa surface, followed by permeation tests (24h). Two types of salivary flow (static and dynamic) were simulated inside the donor chamber and were compared with a moistened gauze as a negative control. We evaluated the onset time to permeation (Lag Time), flux and EF. Either of the simulated salivary flux affected the permeation profile of the model drug, by means of increasing drug permeation, as compared to the negative control, demonstrating the importance of saliva during in vitro permeation studies. General conclusions: tissues were standardized and allowed to perform permeation assays with adapted Franz cells. The use of microneedles in those barriers was effective to increase the permeation of drugs under the conditions evaluated. The presence of salivary flow has proved to be important to simulate the real conditions of the oral cavity in in vitro permeation, which might have an essential role on permeation dynamics across the tissue. This study represents an advancement to perform in vitro permeation assays, aiming at the improvement of topical formulations and absorption enhancers for use in Dentistry Doutorado Farmacologia, Anestesiologia e Terapêutica Doutor em Odontologia FAPESP 2012/02492-5, 2011/18113-0, 2012/06974-4 CAPES 7353/13-8

A técnica walking bleach amplamente utilizada para clareamento endógeno em dentes despolpados e escurecidos, é considerada simples, conservadora e de resultados previsíveis na busca de um perfil estético, capaz de alterar significantemente a autoestima dos pacientes. Com o objetivo de analisar novos produtos para este fim, o presente estudo visa avaliar in vitro o potencial clareador e possível difusão do percarbonato de sódio, comparado ao peróxido de carbamida a 37% em dentes bovinos manchados. Foram utilizados nesta pesquisa 40 incisivos centrais divididos em quatro grupos conforme os agentes clareadores recebidos e controle: G1- peróxido de carbamida a 37%; G2- percarbonato de sódio; G3 – (controle positivo) percarbonato de sódio sem barreira; G4 (controle negativo) –bolinha de algodão estéril. Os espécimes foram individualizados em recipientes de vidro preenchidos totalmente com água destilada até a altura do cíngulo. As leituras de cor foram realizadas nos dias: tempo zero (antes do manchamento), 1° (inicial), 7º, 14°, 21° e 28° (final) utilizando um colorimetro Shade Eye através do sistema CIEL*a*b*.Para a análise de possível difusão, as amostras de água obtidas foram analisadas por um peagâmetro digital portátil Kasvi nos dias 0,1,7,14 e 21.Para a análise inferencial dos componentes da cor e difusão das amostras nos diferentes tempos foi utilizada a análise de variância de duas vias (Two-way ANOVA), complementada por teste de Tukey quando detectadas diferenças estatisticamente semelhantes para um nível de significância α=0,05. Os resultados obtidos demostraram que o percarbonato de sódio é tão eficaz e seguro quanto o peróxido de carbamida quando utilizado como agente clareador interno para dentes bovinos. ABSTRACT - The walking bleach tequinic widely used for bleaching in endogenous pulped and discolored teeth, is considered simple, conservative and predictable results in the search for an aesthetic profile, able to significantly change the self-esteem of patients. In order to analyze new products for this purpose, this study aims to evaluate the in vitro whitening potential and possible diffusion of sodium percarbonate, compared to carbamide peroxide 37% in stained bovine teeth. They were used in this research 40 central incisors divided into four groups according to the received control and bleaching agents: G1 carbamide peroxide at 37%; G2 sodium percarbonate; G3 - (positive control) sodium percarbonate with no buffer; G4 (negative control) –without whitening solution or staining. The specimens were kept individually in glass containers completely filled with distilled water up to the height of the girdle. The color readings were taken on days: zero time (prior to staining), 1st (starting), 7th, 14 °, 21 ° and 28 ° (final) using a colorimeter Shade eye through the CIEL * a * b * system. For the analysis of possible diffusion, the obtained water samples were analyzed by a portable digital pHmeter Kasvi on days 0,1,7,14 and 21. For the inferential analysis of color components and distribution of samples at different times was used to analyze two-way variance (two-way ANOVA), complemented by Tukey test when detected statistically similar differences for a significance level α = 0.05. The results showed that the sodium percarbonate is as effective and safe as the carbamide peroxide when used as internal bleaching agent for bovine teeth.

Objetivo: El objetivo de este estudio fue evaluar la resistencia de unión de un adhesivo universal aplicado en diferentes protocolos de adhesión entre cerámica feldespática y una resina compuesta in vitro. Materiales y Métodos: Se emplearon discos de cerámica feldespática de 10 mm de diámetro x 1.5 mm de grosor, a los cuales fueron adheridos bloques de resina de 0.9 mm de diámetro x 1 mm de alto, de acuerdo a los siguientes protocolos: I)Ácido fluorhídrico 10% por 2min +silano +adhesivo universal II)Ácido fluorhídrico 10% por 2min+silano+adhesivo convencional III)Fluorfosfato acidulado 1.23% por 2min + silano + adhesivo universal IV)Fluorfosfato acidulado 1.23% por 2min + silano + adhesivo convencional V)Fluorfosfato acidulado 1.23% por 6min+ silano+ adhesivo universal VI)Fluorfosfato acidulado 1.23% por 6min+silano+adhesivo convencional VII)Adhesivo Universal. Las muestras fueron almacenadas durante 24h a 37ºc para luego ser llevadas a la prueba de microcizallamiento. El patrón de falla de las muestras fue observada mediante estereomicroscopio, los datos fueron analizados con las pruebas estadísticas ANOVA y Tukey post-hoc (< 0.05). Resultados: Los resultados mostraron que los grupos IV, V, VI y VII obtuvieron los valores más altos de resistencia de unión sin diferencias significativas entre ellos, siendo que el protocolo flúorfosfato acidulado1.23% 6min + silano + adhesivo convencional dio el mayor valor de resistencia de unión (22.67MPa); en cuanto al patrón de falla, la mayor incidencia fue la falla cohesiva de adhesivo (25.71%), no obstante no se encontró diferencia significativa entre los grupos. Conclusión: La reparación de cerámica feldespática con resina compuesta puede ser realizada usando solo el adhesivo universal como protocolo de adhesión.

Este estudio comparó la resistencia a la tracción y filtración marginal de coronas provisorias de distintas resinas acrílicas, fijadas con diferentes cementos temporarios. Se utilizaron 108 premolares sin caries, extraídos por razones ortodóncicas donde se tallaron pilares con paredes convergentes hacia oclusal (8°), desgaste de 0,8mm determinado por el diámetro del instrumento utilizado (piedras troncocónicas de extremo redondeado) y chánfer a nivel adamantino, siguiendo la conexión amelo-cementaria. Las muestras fueron distribuidas en dos grupos, 54 muestras para pruebas de Tracción y 54 muestras para pruebas de Filtración. Los materiales utilizados en la confección de las coronas fueron: A- Resina de Acrílico Reticulado con relleno de micropartículas (sistema cerec, Sirona Alemania), B- Resina Duralay (Reliance Dental Mfg.Co./USA.), C- Resina Luxatemp (DMG/Alemania). En el procedimiento de cementado se utilizaron: I- cemento de (HO)Ca, Dycal (Densply, Brasil). II- cemento de Ox de Zn con agregado de silicona y silano, Temposil (Coltene/Suiza), III – cemento de Ox de Zn con agregado de fluoruros, clorhexidina y nitrato de potasio, GC TempAdvantage (American In). En primer lugar se desarrolló el estudio in vitro, de resistencia a la tracción de coronas provisorias realizadas en distintas resinas acrílicas y cementadas con cementos temporales, sobre pilares tallados en premolares. Se realizó un análisis de correlación entre la fuerza (N) requerida para el desalojo de las coronas y la superficie de unión corona-diente (mm2), resultando la misma estadísticamente significativa (correlación de Pearson: 0,423; p=0,0001). Los valores medios obtenidos de resistencia a la tracción fueron: GRUPO A (41,09N); GRUPO B (43,52N); GRUPO C (41,26N) sin diferencias significativas, p=0,484. Con respecto al factor “cemento”, Subgrupo I (56,87N), II (40,75N) y III (28,25N), la diferencia fue estadísticamente significativa, p=0,0001. Luego se efectuó el estudio in vitro de filtración marginal de coronas provisorias realizadas en distintas resinas acrílicas y cementadas con cementos temporales, sobre pilares tallados en premolares y se establecieron valores estadísticos descriptivos, donde considerando solo el factor “categoría corona” (GRUPOS A, B Y C). Se observó que los valores de longitud de filtración estuvieron dentro de rangos similares en los tres grupos, aunque el B registró los valores más altos. Considerando sólo el factor “cemento” (subgrupos I, II y III), el subgrupo II registró los valores más bajos, en tanto que los subgrupos I Y III registraron valores semejantes y algo mayores, con valores de 0,94mm y 1,00mm de media respectivamente. La combinación que registró menor penetración fue: Grupo A con subgrupo II (0,62 mm de media), en tanto que la combinación con valores de longitud o profundidad de filtración más elevados fue: Grupo B con Subgrupo II (1,25mm de media). Conclusión: Se puede establecer que las coronas confeccionadas por el sistema CAD/CAM y cementadas con hidróxido de calcio generan las mejores condiciones referidas a resistencia a la tracción y que las coronas confeccionadas por el sistema CAD/CAM y cementadas con cemento de óxido de Zn con el agregado de fluoruros, clorhexidina y nitrato de potasio, ofrecen mejores propiedades referidas a filtración marginal.

La calidad de unión entre la superficie del poste de fibra de vidrio y el muñón es esencial para formar un solo núcleo. Si esta unión es afectada, ocasionaría una mala distribución de las fuerzas oclusales. Objetivo: Comparar la resistencia adhesiva entre el poste de fibra de vidrio y muñón de resina utilizando diferentes tratamientos de superficie. Material y métodos: La resistencia adhesiva se evaluó mediante el método de tracción. El diseño del estudio fue analítico, corte transversal y experimental in vitro. La población estuvo conformada por postes de fibra de vidrio estériles. El tamaño muestral fue de 24 postes; fueron divididos en cuatro grupos según el tratamiento de superficie: Grupo I, control negativo, con silano (60s); grupo II, control positivo, con peróxido de hidrógeno al 9%(30 volúmenes, 10min) seguido de lavado y silano(60s); grupo III y IV, grupos experimentales, con ácido fosfórico al 37%(15s) lavado y silano(60s) y con clorhexidina al 2%(60s) lavado y silano (60s). Luego, se elaboró un muñón para cada poste, la muestra fue colocada en la máquina de ensayo universal. La fuerza de tracción fue recopilada en Mpa. Resultados: Se determinó que el grupo silano obtuvo una media de 15,38; peróxido de hidrógeno al 9%+silano 20,28; ácido fosfórico al 37%+silano 17,08; y clorhexidina al 2%+silano 13,44 Según la prueba de Shapiro Wilk, los cuatro grupos presentan distribución normal (p>0,05) y siguiendo la prueba de Barlett, se aprobó el supuesto de homogeneidad (p>0,05). Mediante la prueba multivariada de ANOVA; se determinó que existe diferencia estadística (p=0,0194), al menos, en un par de los cuatro grupos. Conclusiones: Existe diferencia estadísticamente significativa entre el grupo de peróxido de hidrógeno al 9%(30 volúmenes, 10 min)+silano(60s) y clorhexidina al 2%(60s)+silano(60s) (p=0,025). Siendo el primero, la sustancia con mayor resistencia adhesiva.

Journal Article; BACKGROUND Despite widespread use, optimum choice of antimicrobial agents, concentrations, combinations and exposure times have not been determined for antibiotic lock technique (ALT). Our objective was to evaluate the efficacy of different antibiotic combinations using an in vitro model of catheter-related infection. Daptomycin (DAP) 5 mg/mL, teicoplanin (TEC) 5 mg/mL, both alone and combined with gentamicin (GM) 2.5 mg/mL, clarythromycin (CLA) 5 mg/mL or ethanol 35 % were evaluated against four clinical strains of methicillin resistant coagulase negative staphylococci. Lock solutions were renewed every 24 h. RESULTS After 72 h catheters were reincubated with culture media to investigate bacterial regrowth. All antibiotic combinations resulted in significant reductions (p

In the present study, two low generation triazine-based dendrimers, G1.0(Cl)4 dendrimer and G1.5(OH)8 dendrimer, were synthesized and their cytotoxicity were tested by using the NIH 3T3 and the A2780 cell lines. In the synthesis process of the G1.0(Cl)4 dendrimer, cyanuric chloride (CAC) which has high reactivity chlorine atom was connected to the terminal of triethylene glycol (TEG) via nucleophilic substitution by controlling temperature. The prepared G1.0(Cl)4 dendrimer was purified by silica gel column chromatography. Then the four chlorine atoms in the G1.0(Cl)4 dendrimer were substituted by diethanolamine (DEA) to give dendrimer with the hydroxyl terminal group G1.5(OH)8. The starting materials, CAC, G1.0(Cl)4 dendrimer and G1.5(OH)8 dendrimer were analyzed by one-dimensional NMR, FTIR and MS techniques. The two dendrimers, G1.0(Cl)4 and G1.5(OH)8, showed perfect stability in the air environment at room temperature. However, G1.0(Cl)4 is not soluble in water while the G1.5(OH)8 dendrimer is a water soluble compound. Furthermore, cell biological evaluation at the studied concentrations showed that the CAC, as well as the prepared G1.0(Cl)4 and G1.5(OH)8 dendrimers, have no cytotoxicity towards the NIH 3T3 and A2780 cell lines.

OBJETIVO: Avaliar a influência de Lactobacillus rhamnosusna expressão dos fatores de virulência de Candida albicans in vitro.MÉTODOS: Uma suspensão de L. rhamnosusfoi inicialmente cultivada em ágar MRS. No dia seguinte, foi adicionado ágar Sabouraud dextrose sobre o crescimento dos lactobacilos e C. albicansfoi cultivada, por 24, 48 e 72 horas. As cepas de Candidaforam então isoladas para investigação da capacidade de formação de biofilme, por meio do cultivo em placas de 96 poços e leitufra das densidades ópticas e contagem de unidades formadoras de colônia por mL (UFC/mL). Também se investigou a capacidade de formação de tubo germinativo, após incubação em soro de cavalo e contagem em 200 células. Os resultados foram comparados aos observados nas cepas de Candidacultivadas na ausência de L. rhamnosus, utilizando o teste tde Student para análise estatística.RESULTADOS: Observou-se uma redução significativa no crescimento de C. albicans na presença de lactobacilos após 24, 48 ou 72 horas. Também foi observada redução significativa na formação de tubo germinativo após a interação por 48 ou 72 horas. Quanto à formação de biofilme, não foi observada diferença significante entre as cepas de Candidacultivadas na presença ou na ausência de lactobacilos.CONCLUSÃO: Os resultados sugerem que L. rhamnosusé capaz de influenciar significativamente o crescimento e a expressão de fatores de virulência de C. albicans in vitro, podendo interferir na patogenicidade desses micro-organismos. PURPOSE: To investigate the influence of Lactobacillus rhamnosus in the expression of virulence factors of Candida albicans in vitro.METHODS: A suspension of L. rhamnosus was initially grown in MRS agar. The other day, Sabouraud dextrose agar was added on the growth of lactobacilli and C. albicans was seeded for 24, 48 and 72 hours. Candida strains were then isolated for investigation of the ability of biofilm formation, by means of cultivation into 96 wells plaque, and reading the optical densities and counting colony forming units per mL. Also the ability of germ tube formation was investigated, after incubation in horse serum and counting of 200 cells. The results were compared to Candida strains grown in the absence of L. rhamnosus, using Student's t test for statistical analysis.RESULTS: there was a significant reduction in the growth of C. albicans in the presence of lactobacilli after 24, 48 or 72 hours. Significant reduction was also observed in germ tube formation after interaction for 48 or 72 hours. For biofilm formation, no statistically significant difference was observed between the Candida strains grown in the presence or absence of lactobacilli.CONCLUSION: The results suggest that L. rhamnosus is able to influence significantly the growth and expression of virulence factors of C. albicans in vitro, and may interfere with pathogenicity of these micro-organisms.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-07T15:16:35Z No. of bitstreams: 1 Adriane de Lacerda Nery Dissertacao completa.pdf: 1136047 bytes, checksum: 8b47244acd965d6576f2af2254091f0b (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-07T15:16:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adriane de Lacerda Nery Dissertacao completa.pdf: 1136047 bytes, checksum: 8b47244acd965d6576f2af2254091f0b (MD5) Previous issue date: 2015-07-15 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Leishmaniasis are a group of diseases caused by protozoan of genus Leishmania spp affecting of 98 countries. In Brazil, in the year 2013 were 3.253 reported cases of visceral leishmaniasis and 18.226 cases of cutaneous leishmaniasis. The first choice of treatment is still performed with pentavalent antimonials and in cases of failures drugs of second line of treatment are pentamidine and anfotericin B. These drugs cause many adverse effects and has lately emerged resistant strains. In endemic areas it has been increasingly common the appearance of co-infection Leishmania and Mycobacterium tuberculosis. The treatment of tuberculosis with pyrazinamid and isoniazid control the leishmaniasis.The aim of this study was evaluate the anti-leishmania activity in vitro of INZ and PZA and yours derivatives compounds (serie G and serie R,respectively) on the Leishmania (Viannia) braziliensis. The molecules were tested on infected monolayers of peritoneal murine macrophages for 48h. All the molecules te inhibited the infection index in a dose-dependent manner in relation to controls. The molecules of the R series were more active than PZA, but the result was only significant for R02 (p < 0,005). Only R05 (CC50 = 76,64µM) was relatively toxic to macrophages. The most active compounds were R02, G01 and G02 whose select index were 14,31, 19 and 30, respectively. Nitrite assay was performed in supernatants of infected monolayers of peritonial macrophages treated with the substancies at 10 and 100µM. G01 and G02 stimulated NO2 prodution, however, the result was only statistically significant for G02 at 100µM (p < 0,001). All the compounds of R serie stimulated NO2 production however the results were statistically significant for the R03 and R05 at 100µM (p < 0,001). Additionally, a in silico preditive pharmacokinetic analysis was performed to active molecules using the admetSAR software the data showed that G01, G02 and R02 were similar to their original molecules as to high capacity to be absorbed by the gastrointestinal tract, low hepatotoxic and carcinogenic potencial. Together, these data demonstrate that these molecules are selectively toxic to the parasite with the potencial to be tested orally on studies in experimental infection. As leishmanioses são um grupo de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania spp que afetam 98 países. No Brasil, no ano de 2013, foram relatados 3.253 casos de leishmaniose visceral e 18.226 casos de Leishmaniose Tegumentar Americana. O tratamento de primeira escolha continua sendo realizado com antimoniais pentavalentes, e em casos de insucessos os fármacos de segunda escolha são a pentamidina e a anfotericina B. Tais medicamentos causam intensos efeitos adversos e ultimamente têm surgido cepas resistentes aos mesmos. Em áreas endêmicas têm sido cada vez mais comum o surgimento da co-infecção Leishmania com Mycobacterium tuberculosis. O tratamento para a tuberculose com pirazinamida (PZA) e isoniazida (INZ), controla a leishmaniose. Esses dados sugerem atividade anti-leishmania da PZA e da INZ. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade in vitro da INZ e da PZA e seus compostos derivados (série G e série R, respectivamente) sobre Leishmania (Viannia) braziliensis. As moléculas foram testadas em monocamadas de macrófagos peritoneais de camunongos infectados com L. (V) braziliensis durante 48h. Todas as moléculas testadas inibiram o índice de infecção de forma dose dependente em comparação aos controles. As moléculas da série R foram mais ativas do que a PZA, porém o resultado foi significativo somente para a R02 (p < 0,005). Apenas a molécula R05 (76,64µM) foi relativamente tóxica para macrófagos. Os compostos mais ativos foram R02, G01 e G02, cujos índices de seletividade foram 14,31, 19 e 30, respectivamente. A dosagem de nitrito foi feita em sobrenadantes de monocamadas de macrófagos peritoniais infectados e tratados com as substâncias nas concentrações 10 e 100µM. A G01 e a G02 estimularam a produção de NO2 nas duas concentrações, entretanto o resultado foi estatisticamente significativo para a G02 em 100µM (p < 0,0001), a G05 só estimulou óxido nítrico na maior concentração. Todos os compostos da série R estimularam NO2, contudo, o resultado foi estatisticamente significativo para a R03 e R05 a 100µM (p < 0,001). Adicionalmente, foi realizado uma análise preditiva in sílico de parâmetros farmacocinéticos das moléculas mais ativas in vitro, utilizando o software admetSAR. Os dados obtidos mostraram que de forma semelhante às suas moléculas originais a G01, G02 e R02 apresentaram alta capacidade de serem absorvidas pelo trato gastrointestinal, baixo potencial hepatotoxico e carcinogênico. Juntos, esses dados demonstram que essas moléculas são seletivamente tóxicas para o parasito com potencial para serem testadas pela via oral em estudos em modelo experimental de infecção.

El principal desafío para combatir la malaria ocasionada por P. falciparum está en comprender la complejidad del parásito y sus procesos de adaptación biológica. Se desconoce el comportamiento a nivel de expresión y adaptación de las principales proteínas implicadas en la virulencia de P. falciparum (tráfico de PfEMP1, interacción con proteínas del glóbulo rojo, formación de knobs (Protuberancias presentes en la membrana de los GRI) durante los procesos de cultivo de cepas nativas. En el presente estudio se evaluó el perfil de expresión en 11 genes implicados en la virulencia en cepas aisladas de 6 pacientes –con diferentes características clínicas y provenientes de la Amazonía peruana– cultivadas entre la segunda y vigésima generación de parásitos. Se identificaron dos grupos de genes: el primero formado por 5 genes que se mantenían estables a lo largo de las generaciones y el otro grupo formado por 6 genes los cuales presentaban variaciones entre cepas y generaciones. Los genes del primer grupo codificaban mensajeros para proteínas relacionadas con el tráfico y correcta ubicación de la proteína PfEMP1; los del segundo grupo codificaban proteínas que interactúan con el citoesqueleto del GR y que sirven como base para la formación de “knobs”. Se muestra que las cepas de la Amazonía presentaron diferentes niveles de mensajeros para la producción de proteínas que interactúan con el GR durante todas las generaciones. Este estudio identifica aquellos genes que mantienen o cambian su expresión durante el proceso de adaptación al cultivo in vitro en cepas nativas.

Objetivo: Comparar el diagnóstico de lesiones de caries dental interproximal utilizando la técnica radiográfica de aleta de mordida digital (sistema de placas de fósforo) y tomografía computarizada de haz cónico in vitro. Materiales y métodos: Se seleccionaron 108 dientes (50 molares y 58 premolares), 106 superficies mesiales y 100 distales con condiciones estandarizadas por dos examinadores previamente calibrados. Se evaluaron en dos distintos métodos de diagnóstico, la técnica radiográfica de aleta de mordida digital (sistema de placas de fósforo Dürr DENTAL) y la tomografía computarizada de haz cónico (i-CAT Next Generation) in vitro. Las imágenes fueron anotadas y clasificadas según el tipo de caries interproximal en RO, RI, R2, R3 y R4. Se calculó la fiabilidad interexaminador mediante la prueba Chi cuadrado corregido por Yates, así mismo se calculó la especificidad y la sensibilidad tomando como gold estándar la tomografía de haz cónico. Resultados: La fiabilidad interexaminador fue muy buena (0.99), la discrepancia del diagnóstico de lesiones cariosas proximales con ambos métodos encontró que si hubo diferencia estadísticamente significante (p < 0.0 I). Se observó que la radiografías bitewing de placa de fósforo tiene una sensibilidad de 55% y un valor predictivo negativo de 36.8%, así como una especificidad de 91.3% y un valor predictivo positivo de 95.7%. Conclusiones: Existe diferencia en el diagnóstico de lesiones de caries dental interproximal utilizando la técnica radiográfica de aleta de mordida digital (sistema de placas de fósforo) y tomografía computarizada de haz cónico in vitro.