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Background: Pseudomonas aeruginosa is an environmentally ubiquitous Gram-negative bacterium and important opportunistic human pathogen, causing severe chronic respiratory infections in patients with underlying conditions such as cystic fibrosis (CF) or bronchiectasis. In order to identify mechanisms responsible for adaptation during bronchiectasis infections, a bronchiectasis isolate, PAHM4, was phenotypically and genotypically characterized. Results: This strain displays phenotypes that have been associated with chronic respiratory infections in CF including alginate over-production, rough lipopolysaccharide, quorum-sensing deficiency, loss of motility, decreased protease secretion, and hypermutation. Hypermutation is a key adaptation of this bacterium during the course of chronic respiratory infections and analysis indicates that PAHM4 encodes a mutated mutS gene responsible for a similar to 1,000-fold increase in mutation rate compared to wild-type laboratory strain P. aeruginosa PAO1. Antibiotic resistance profiles and sequence data indicate that this strain acquired numerous mutations associated with increased resistance levels to b-lactams, aminoglycosides, and fluoroquinolones when compared to PAO1. Sequencing of PAHM4 revealed a 6.38 Mbp genome, 5.9 % of which were unrecognized in previously reported P. aeruginosa genome sequences. Transcriptome analysis suggests a general down-regulation of virulence factors, while metabolism of amino acids and lipids is up-regulated when compared to PAO1 and metabolic modeling identified further potential differences between PAO1 and PAHM4. Conclusions: This work provides insights into the potential differential adaptation of this bacterium to the lung of patients with bronchiectasis compared to other clinical settings such as cystic fibrosis, findings that should aid the development of disease-appropriate treatment strategies for P. aeruginosa infections., This work was supported by the National Institutes of Health [J.J.V. was supported in part by T32AI055432 awarded to the University of Virginia, J.P.O. was partially supported by T32AI007046 awarded to the University of Virginia, J.A.P., J.A.B., and J.B.G. were supported in part by grant R01GM088244 awarded to J.A.P.], the Cystic Fibrosis Foundation [J.B.G., M.B., J.P.O, and M.R.D. were supported in part by GOLDBE10G0 awarded to J.B.G., F.H.D. was supported by a postdoctoral fellowship (DAMRON10F0)], the Ministerio de Economia y Competitividad and Instituto de Salud Carlos III and by the Direccio General d'Universitats, Reserca I Transferencia del Coneixement del Govern de les Illes Balears [X.M., I.M.R., S.A. and A.O were supported by SAF2008-0467, REIPI RD06/0008, RD12/0015, PRE-R-22584-2011, and PI 12/00103]. P.B. and V.A.P.M.D.S. were supported by the Helmholtz Centre for Infection Research, Germany (project: Systems Biology of Pseudomonas, number 1100187) and the FP7 projects SystemTB (# 241587) and Microme (# 222886). The funders had no role in study design, data collection and analysis, decision to publish, or preparation of the manuscript.

RESUMO O objetivo do presente trabalho foi avaliar o teor, o rendimento e a composição química do óleo essencial de manjericão (Ocimum basilicum L.) submetido ao estresse salino por NaCl. Para tanto, o experimento foi conduzido em casa de vegetação, sob delineamento inteiramente casualizado, caracterizado por 5 (cinco) tratamentos de NaCl, adicionados à água de irrigação (0,01 - controle,T1; 1,2 - T2; 2,3 – T3; 3,4 – T4 e 4,5 dS m-1– T5, correspondendo respectivamente a 0,1; 12,0; 23,0; 34,0 e 45,0 mM ), com 4 (quatro) repetições. Aos 55 dias após o transplantio, as plantas foram colhidas, colocadas em sacos de papel e levadas a estufa de secagem com fluxo de ar forçado a 45 °C, por 10 dias até atingirem massas constantes. Após a secagem, foi realizada a pesagem da biomassa seca da parte aérea, misturada, moída em triturador elétrico de facas e posteriormente realizada a extração do óleo essencial para análise do teor, rendimento e composição química. O aumento do estresse por NaCl não alterou o teor e a composição química do óleo essencial, cujo rendimento reduziu 12,93% a cada acréscimo unitário dos níveis de salinidade. O cinamato de metila, cujo teor médio encontrado foi de 55%, e o metil chavicol, com 12%, foram os principais compostos identificados nas plantas de manjericão. ABSTRACT This study aimed to evaluate the content, yield and chemical composition of the essential oil of sweet basil (Ocimum basilicum L.) plants subjected to NaCl saline stress. The experiment was carried out in a greenhouse, in a completely randomized design, with 5 (five) NaCl treatments added to the irrigation water (0.01 - control, T1; 1.2 - T2; 2.3 - T3; 3.4 - T4 and 4.5 dS m-1 - T5, corresponding respectively to 0.1; 12.0; 23.0; 34.0 and 45.0 mM) and 4 (four) replicates. At 55 days after transplanting, plants were harvested, put in paper bags and taken to a forced-air oven at 45 ºC for 10 days, until reaching constant mass. After drying, the dry biomass of the aerial part was weighed, mixed, grinded in an electric blade grinder and later taken to an essential oil extraction so that its content, yield and chemical composition could be analyzed. The increase of NaCl stress did not change neither the content nor the chemical composition of the essential oil, whose yield was reduced by 12.93% for each unit increase in the salinity level. The methyl cinnamate, with an average content of 55%, and the methyl chavicol, with 12%, were the main compounds identified in the sweet basil plants.

Se desarrolla un protocolo para la obtención y establecimiento de suspensiones celulares de E. cinerea. La concentración de las hormonas 2,4 D Y BAP tienen un efecto significativo en la formación de callos friables de E. cinerea, obteniendo una respuesta periódica en la formación de callos friables con respecto a la concentración de las hormonas. Puede obtenerse hasta un 90% de formación de callos friables con varias combinaciones hormonales; primero, con concentraciones alrededor de 3,0 mg/L de 2,4 D Y 1,0 mg/L de BAp, y segundo, alrededor de 6,0 mg/L de 2,4 D Y1,0 mg/L de BAP. A partir de los callos anteriores, se obtienen suspensiones celulares con un activo crecimiento celular, con tiempos de duplicación entre cuatro y siete días, y alcanzando densidades celulares de 15 g células secas/L. Las suspensiones de E. cinerea ofrecen una herramienta importante para la propagación de esta especie vía embriogénesis somática, estudio de biorreactores, producción de metabolitos secundarios y procesos de biotransformación.A protocol is developed for obtaining and establishment of E. cinerea cell suspension. The concentration of hormones 2,4 D and BAP have a significant effect in the formation of friable callus of E. cinerea, obtaining a periodic answer in the formation of friable callus with regard to hormones concentration. It can be obtained until 90% of formation of friable callus in several hormone combinations, first with concentrations around 3,0 mg/L of 2,4 D and 1,0 mg/L of BAP; and second, around 6,0 mgIL of 2,4 D and 1,0 mg/L of BAP. Using the last callus, cell suspensions are obtained with an active cellular growth, with times of duplication between 4 and 7 days and obtaining cell densities of 15 g of dry cells/L. The suspensions of E. cinerea offer an important tool for the propagation of this specie by somatic embryogenesis, bioreactors study, production of secondary metabolites and biotransformation processes.

Os fitonematoides são parasitas altamente especializados que infestam plantas, principalmente as raízes, causando perdas econômicas a diferentes culturas. A resistência de algumas espécies do gênero Annona a fitonematoides já foi observada e relatada. Entretanto, ainda não foi identificado o mecanismo e, ou, os metabólitos associados a esta resistência. Este trabalho apresenta a aplicação da RMN de 1H em estudos metabolômicos de plantas do gênero Annona com o objetivo de avaliar e relacionar os perfis metabólicos dessas plantas com as suas propriedades nematicididas ou nemato repelentes. Inicialmente foi avaliada a resistência de Annona muricata ao nematoide Meloidogyne javanica através da comparação do metaboloma de raízes e folhas de plantas inoculadas e não inoculadas com o nematoide utilizando RMN de 1H e análise quimiométrica. As plantas expostas ao nematoide apresentaram alterações significativas no seu metabolismo após 24 horas de exposição. Os resultados sugerem que a resistência de A. muricata ao nematoide M. javanica pode esta associada à reação de hipersensibilidade. Vários metabólitos relacionados com resistência puderam ser identificados nas raízes e folhas de A. muricata com o emprego da RMN de 1H, dentre eles a dopamina, a xantina e acetogeninas. Neste trabalho, também foi avaliado o potencial da RMN de 1H combinado com regressão por mínimos quadrados parciais, para previsão da atividade larvicida dos extratos das folhas de Annona muricata. Para tanto, foi construído um modelo de calibração utilizando os sinais entre d 0,00 e 10,00 e os valores de DL50 dos extratos frente à Artemia salina. Os resultados mostraram o potencial da RMN de 1H no desenvolvimento de metodologias para previsão de atividades biológicas. Na busca por substâncias nematicidas foi avaliado o perfil metabólico e a atividade nematicida in vitro dos extratos das folhas de Annona crassiflora, utilizando o teste de mobilidade sobre o nematoide de vida livre Caenorhabditis elegans. A espécie A. crassiflora mostrou-se uma fonte promissora à descoberta de novos compostos bioativos contra nematoides. Finalmente, o potencial da RMN de 1H para análise quantitativa e não objetivada foi mais uma vez comprovado, possibilitando a identificação e quantificação da betaína trigonelina, pela primeira vez em várias espécies de Annona. Plant-parasitic nematodes are parasitizes highly specialized that infest plants, specially roots, causing economic losses to plant production of different cultures. The resistance of some species of the Annona genus to nematodes has been observed and reported. However, the mechanism has not been identified yet, neither the metabolites responsible for the resistance. This work presents a 1H NMR-based metabolomic studies applied to Annona genus with the aim to evaluate and correlate the metabolic profile of these plants to their nematicidal or nematode repellent activity. Initially the resistance of Annona muricata to the nematode Meloidogyne javanica through the comparison of the metaboloma of roots and leaves of infected and not infected plants wasevaluated. The plant infested with the nematodes showed metabolic alteration after 24 hours of infestation. The results suggest that the resistance of A. muricata to to the nematode Meloidogynejavanica can be related to a hypersensitivity reaction. Several metabolites related to nematode resistance could be identified in the roots and leaves of A. muricata by using the 1H NMR such as dopamine, xanthine and acetogenins. This work also evaluated the potencial of 1H NMR andpartial least-squares analyses to predicting the larvicidal activity of leaf Annona muricata extracts. For this, it was constructed a calibration model using as imput the 1H NMR signals between 0.00 to 10.00 and the DL50 values of the leaf extracts obtained in the Artemia salinalarvicidal test. The results showed the potential of 1H NMR in the development of methodologies to predicting the biological activities. Searching for nematicidal substances, it was evaluated themetabolic profile and the in vitro nematicial activity of leaf Annona crassiflora extract by mobility assay against the free-living nematode Caenorhabditis elegans. The species A crassiflora provided to be an auspicious source of new nematicidal substances. Finally, thepotential of 1H NMR in a quantitative and untargeted analysis was once again corroborated, allowing the identification and quantification of the betaine trigonelline, for the first time, in several species of Annona.

Las purinas y derivados como la alantoína son componentes abundantes del suelo, constituyendo una fuente de carbono y nitrógeno muy importante del hábitat natural de Streptomyces. En este trabajo de tesis se caracterizó la vía metabólica de degradación de alantoína como así también la regulación de la misma en S. coelicolor, mediante técnicas proteómicas, metabolómicas, bioquímicas, de biología molecular y de ingeniería genética. A partir de experimentos de proteómica se identificaron la mayor parte de las proteínas involucradas en la degradación de alantoína en esta bacteria. Posteriormente, se caracterizaron cuatro enzimas de esta vía, alantoinasa y alantoicasa, las cuales son esenciales para el crecimiento de la bacteria en medio con alantoína, e hidroxipiruvato isomerasa y tartronato semialdehído reductasa mediante técnicas bioquímicas y de ingeniería genética. Por otra parte, se identificó el regulador transcripcional negativo AllR del metabolismo de la alantoína en S. coelicolor. Ensayos in vitro permitieron identificar los sitios de unión de este regulador a tres promotores de la vía. Estos sitios se encuentran altamente conservados en otras especies de Streptomyces lo que denota una preservación en la regulación de esta ruta metabólica en este importante género bacteriano. Estos estudios permitieron proponer un modelo de regulación mediado por alantoato. A su vez, este trabajo permitió realizar una conexión importante entre el metabolismo primario de alantoína y el metabolismo secundario de producción de antibióticos en S. coelicolor. Por un lado, se evidenció que la degradación de alantoína provoca una marcada disminución de la producción de antibióticos. Mediante técnicas de metabolómica y análisis de compuestos nitrogenados en los cultivos se pudo determinar que el producto final de esta vía es amonio. El aislamiento de una mutante en el complejo ureasa, que no genera acumulación de amonio extracelular pero es capaz de producir niveles normales de antibióticos en medio con alantoína, permitió conectar el exceso de amonio con la inhibición de la producción de antibióticos durante el metabolismo de alantoína. Por otro lado, se estableció que el normal funcionamiento del regulador AllR es necesario para la producción de antibióticos en S. coelicolor, ya que la inactivación del gen allR afecta notablemente la síntesis de los mismos. La inactivación de genes que aumentan su expresión en ausencia del regulador AllR permitió identificar al gen hyi, que codifica para la enzima hidroxipiruvato isomerasa, como responsable de este efecto. La mutante AllR-Hyi- revierte la producción de metabolitos secundarios a los niveles de la cepa parental. Para agregar a esto, una mutación en el gen hyi en la cepa parental provoca un aumento de la síntesis de antibióticos y abre una puerta para estudios futuros como estrategia para aumentar la producción de compuestos bioactivos en esta especie bacteriana. Este trabajo expresa la importancia del estudio de las vías metabólicas primarias, no solo para aumentar el conocimiento general de este importante género bacteriano sino también debido a la interacción de estas vías con el metabolismo secundario y la posibilidad de una futura manipulación para beneficio del ser humano. Fil: Navone, Laura. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentina

In order to evaluate the influence of photoperiod on the accumulation of allantoin in comfrey (Symphytum officinale L.), a well known medicinal plant, an experiment was conducted during July and August, 1998. Cuttings obtained from 90 day old plants were submitted to four photoperiods (8, 12, 16 and 20 hours). After 60 days, allantoin content in roots and rhizomes was evaluated. The results showed that increases in photoperiod promoted an increment in the average content of allantoin in roots (0.06%, 0.303%, 1.213% and 4.78%). On the other hand, in rhizomes, allantoin accumulation decreased (9.65%, 7.14%, 0.55%) when the photoperiod was increased from 8 to 12 and 16 hours, respectively, stabilizing on a 20-hour photoperiod (0.53%). Plants cultivated under field conditions presented 2.55% and 2.63% allantoin content in rhizomes and roots, respectively. Based on the fact that in comfrey the roots are considered to be sites of allantoin synthesis, the results demonstrated that photoperiod could influence both the synthesis of allantoin in these organs as well as its accumulation in the rhizomes. Com o objetivo de avaliar a influência do fotoperíodo na produção e acúmulo de alantoína em plantas de confrei (Symphytum officinale L.), uma conhecida espécie medicinal, um experimento foi conduzido nos meses de julho e agosto de 1998. Mudas obtidas de plantas com 90 dias de idade foram submetidas a quatro fotoperíodos diferentes (8, 12, 16 e 20 horas) durante 60 dias, e os teores de alantoína em raízes e rizomas foram avaliados. pelos resultados, constatou-se que fotoperíodos crescentes promoveram um aumento no teor médio de alantoína em raízes (0,06%, 0,303%, 1,213% e 4,78%) e uma redução no acúmulo de alantoína em rizomas (9,65%, 7,14% e 0,55%), quando o fotoperíodo foi aumentado de 8 para 12 e 16 horas, respectivamente, tendendo a estabilizar-se em fotoperíodo de 20 horas (0,53%). Plantas cultivadas em condições de campo apresentaram um teor de 2,55% e 2,63% de alantoína em rizomas e raízes, respectivamente. Tendo em vista que as raízes de confrei são consideradas sítios produtores de alantoína, pelos resultados, ficou demostrado que as condições de fotoperíodo influenciaram tanto a síntese dessa substância nesses órgãos, como o seu acúmulo nos rizomas.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico O estudo da diversidade de peptídeo sintetases não ribossomais (NRPS) e policetídeo sintases (PKS) de origem microbiana em ambientes naturais é uma importante ferramenta para a busca de metabólitos secundários de interesse industrial. Essa informação, aliada à descoberta da capacidade dos micro- organismos anaeróbios em sintetizar metabólitos secundários, torna o microbioma do trato gastrointestinal (TGI) do bovino da raça Nelore, caracterizado recentemente, um ambiente em potencial para a bioprospecção desses compostos. O objetivo desse estudo foi determinar a existência e diversidade de genes codificadores de PKS e NRPS no microbioma do TGI do bovino da raça Nelore por PCR-DGGE e pela construção e sequenciamento de bibliotecas de clones. Foram identificados genes codificadores de NRPS nos microbiomas do rúmen, retículo e omaso de um bovino da raça Nelore. A análise da PCR-DGGE demonstrou a variação da diversidade e da composição desses genes ao longo das comunidades analisadas. Os maiores índices de riqueza e diversidade foram encontrados na amostra da fração sólida do rúmen. Contudo, a maior parte das UTOs é compartilhada pelas quatro comunidades. A análise filogenética das sequências de aminoácidos dos domínios de adenilação (domínios A) das NRPS indica que as NRPS identificadas agrupam-se com peptídeo sintetases não caracterizadas de Butyrivibrio proteoclasticus B316, de Clostridium bolteae, de Coprococcus catus GD/7 e de Xanthomonas citri. As sequências traduzidas obtidas apresentaram entre 37 e 91 % de identidade em relação às depositadas no GenBank. A baixa identidade das sequências codificadoras do domínio A das NRPS, obtidas a partir do microbioma do TGI do bovino da raça Nelore, em relação a sequências depositadas no banco de dados do NCBI, indicaram que esse microbioma abriga um potencial inexplorado para a bioprospecção de novos produtos. The diversity study of microbial nonribosomal peptide synthetases (NRPS) and polyketide synthases (PKS) in natural environments provides an important tool in the search for secondary metabolites of industrial interest . This information associate to the recent discovery of the ability of anaerobic microorganisms to synthesize secondary metabolites makes the newly described gastrointestinal tract (GIT) microbiome from a Nellore steer an potential environment to bioprospect new secondary metabolites. Thereby, this work aimed to determine the existence and diversity of genes encoding PKS and NRPS in the GIT microbiome of a Nelore steer by PCR-DGGE and by construction and analysis of a clone library. NRPS genes were identified in the rumen, reticulum and omasum microbiomes. The PCR-DGGE analysis demonstrated differences in the diversity and composition of these genes along the communities. The highest levels of richness and diversity were observed for the rumen solid fraction sample, however, most of the OTUs are shared by the four communities. The phylogenetic analysis of amino acid sequences indicate that the identified adenylation domains (A) clustered with those from uncharacterized peptide synthetases from Butyrivibrio proteoclasticus B316, Clostridium bolteae, Coprococcus catus GD/7 and Xanthomonas citri . Most of the indentified A domains showed between 37 and 91 % identities at aminoacid level to their closest matches in GenBank. These low identities indicate that this microbiome harbors untapped potential for new products bioprospecting.

Proyecto de Investigación (Código: 5401-1510-9801) Instituto Tecnológico de Costa Rica. Vicerrectoría de Investigación y Extensión (VIE). Escuela de Biología. Centro de Investigación en Biotecnología (CIB), 2014 Debido a la importancia medicinal de Uncaria tomentosa, se han realizado varias investigaciones referentes a la producción de metabolitos secundarios de dicha planta. Con base a esto surge la necesidad de identificar a nivel genético secuencias que estuvieran relacionadas con metabolismo secundario. Gracias a un proyecto previo se contaba con mucha información que podía ser utilizada para identificar más secuencias de importancia por lo que se planteó este proyecto con el objetivo de obtener secuencias de genes de Uncaria tomentosa mediante diseño bioinformático de imprimadores basados en los datos obtenidos por microarreglos heterólogos de Arabidopsis thaliana. Para lograr los objetivos planteados, se desarrolló un software con el que se puede analizar la información obtenida mediante microarreglos de una forma más eficiente. Por otro lado, se obtuvo el transcriptoma a partir de muestras de ARN y los resultados obtenidos fueron analizados con la herramienta CLC Bio, complementando con otras como Blastx, Primer 3 y BioEdit. Con la información obtenida se diseñaron 4 pares de imprimadores para enzimas de metabolismo secundario y 2 pares de imprimadores para genes constitutivos. Con todos los imprimadores se obtuvieron amplicones que fueron secuenciados a través de la empresa Macrogen. Además, con los datos obtenidos del transcriptoma se elaboró una tabla con posibles secuencias genómicas de U. tomentosa, utilizando el software CLC Bio. Paralelamente se realizaron pruebas de elicitación en plantas in vitro y de invernadero utilizando los hongos Trichoderma sp y Penicillium sp para determinar si el estrés inducido por la presencia de estos microorganismos podría incrementar la producción de metabolitos secundarios. Se realizó una cromatografía de capa fina que parecía indicar que el estrés al que el hongo Trichoderma sp somete a la planta podría estimular la producción de metabolitos secundarios. Como producto de este proyecto, se cuenta con 4 posibles secuencias parciales de genes presentes en el ADN genómico de U. tomentosa que codifican para enzimas de metabolismo secundario así como los imprimadores respectivos para amplificarlos, además de dos pares de imprimadores para posibles genes constitutivos. Por otro lado, se facilitó el manejo de grandes bases de datos como la generada por microarreglos mediante el software E-Pathway. Se cuenta con el transcriptoma analizado y con un manual que servirá de guía para trabajar con los datos generados a partir de transcriptomas de otras especies. Además de 81 posibles secuencias genómicas de U. tomentosa. Instituto Tecnológico de Costa Rica. Vicerrectoría de Investigación y Extensión (VIE). Escuela de Biología. Centro de Investigación en Biotecnología (CIB)

Los taxoides son diterpenos polioxigenados provenientes de la ruta metabólica del 2-metil-eritritol 4-fosfato cuya biosíntesis se genera en los plastidios. La importancia de los taxoides entre ellos el taxol, en el área de la medicina humana es muy valiosa debido a la utilización en oncología, fármaco utilizado contra el cáncer de seno, pulmón y ovario. Las especies de árboles de Taxus spp. están en peligro de extinción debido a la tala inmoderada, a la baja reproducción, lento crecimiento; por lo que el cultivo de tejidos vegetales in vitro es una alternativa biotecnológica de alto impacto y de gran ayuda para el conocimiento de la producción de los taxoides a nivel in vitro y sobre todo, para la conservación de este valioso recurso natural. Los objetivos de este artículo son: origen del taxol, su mecanismo de acción biológico, la biosíntesis de los taxoides, el método de extracción así como la producción de taxoides in situ y en cultivos in vitro de callos y células de Taxus spp. The taxoids are polioxigenated diterpenes from the metabolic pathway of the 2-methyl-erythritol 4-phosphate whose biosynthesis is generated in the plastides. The importance of the taxoides including taxol, in the area of human medicine is very valuable due to the use in oncology, drug used against breast, lung and ovarian cancer. The species of trees of Taxus spp. are in danger of extinction due to logging immoderate, to the low reproduction rate, slow growth; therefore, the plant tissue culture in vitro is a biotechnological alternative high-impact and a great help to the knowledge of the production of the taxoides to level in vitro and above all, for the conservation of this valuable natural resource. The objectives of this article are to determine some general information about the geographical distribution of Taxus spp.; chemical characteristics of taxoids, biological mechanism of action of taxol; path of biosynthesis, methods of extraction and analysis of the taxoids and a current review of the production of taxoids in situ and in vitro cultures and cells of Taxus spp.

Titulo en ingles: A review on the production of taxoids anti-cancer of callus and cells of Taxus spp. in cultures in vitro.Título corto: Una revision sobre la producción de taxoides anticancerígenos.Resumen: Los taxoides son diterpenos polioxigenados provenientes de la ruta metabólica del 2-metil-eritritol 4-fosfato cuya biosíntesis se genera en los plastidios. La importancia de los taxoides entre ellos el taxol, en el área de la medicina humana es muy valiosa debido a la utilización en oncología, fármaco utilizado contra el cáncer de seno, pulmón y ovario. Las especies de árboles de Taxus spp. están en peligro de extinción debido a la tala inmoderada, a la baja reproducción, lento crecimiento; por lo que el cultivo de tejidos vegetales in vitro es una alternativa biotecnológica de alto impacto y de gran ayuda para el conocimiento de la producción de los taxoides a nivel in vitro y sobre todo, para la conservación de este valioso recurso natural. Los objetivos de este artículo son: origen del taxol, su mecanismo de acción biológico, la biosíntesis de los taxoides, el método de extracción así como la producción de taxoides in situ y en cultivos in vitro de callos y células de Taxus spp. Palabras clave: cáncer, biotecnología, metabolismo secundario, taxol, Taxaceae. Abstract: The taxoids are polioxigenated diterpenes from the metabolic pathway of the 2-methyl-erythritol 4-phosphate whose biosynthesis is generated in the plastides. The importance of the taxoides including taxol, in the area of human medicine is very valuable due to the use in oncology, drug used against breast, lung and ovarian cancer. The species of trees of Taxus spp. are in danger of extinction due to logging immoderate, to the low reproduction rate, slow growth; therefore, the plant tissue culture in vitro is a biotechnological alternative high-impact and a great help to the knowledge of the production of the taxoides to level in vitro and above all, for the conservation of this valuable natural resource. The objectives of this article are to determine some general information about the geographical distribution of Taxus spp.; chemical characteristics of taxoids, biological mechanism of action of taxol; path of biosynthesis, methods of extraction and analysis of the taxoids and a current review of the production of taxoids in situ and in vitro cultures and cells of Taxus spp. Key words: cancer, biotechnology, secondary metabolism, taxol, Taxaceae.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-30Bitstream added on 2014-06-13T20:34:29Z : No. of bitstreams: 1 000753751.pdf: 1940688 bytes, checksum: b05878b3c0476680c5e2ba4f09045b5e (MD5) O presente trabalho teve por objetivos investigar o desenvolvimento e o teor de óleo essencial, bem como identificar os componentes químicos da parte aérea de Baccharis trimera (Less.) DC. cv. CPQBA-1, em função de teores de adubo orgânico e rebrotos. As mudas, obtidas a partir de sementes, foram transplantadas para a área experimental do Departamento de Produção Vegetal – Setor Horticultura (UNESP – FCA/Botucatu), no espaçamento de 0,6 x 0,6 m entre plantas e entre linhas. O delineamento utilizado foi de blocos casualizados, com quatro repetições, cinco doses de composto orgânico: 10, 20, 30, 40 e 50 t.ha-1 e controle (0 t.ha-1), totalizando 24 parcelas contendo, 12 plantas úteis em cada uma. As variáveis analisadas foram: altura (cm), diâmetro da planta (cm), matéria seca (kg.ha-1), matéria fresca (kg.ha-1), teor de água (%), teor de óleo essencial (%) e componentes químicos do óleo essencial presentes na parte aérea. Foram realizadas colheitas: 120, 242 e 365 DAT. Após cada colheita as plantas foram pesadas, desidratadas em estufa artificial para obtenção da matéria seca e, destiladas em aparelho do tipo Clevenger para obtenção do óleo essencial. Posteriormente, o óleo essencial foi analisado em cromatógrafo a gás acoplado a espectrômetro de massas (CG-EM). Os resultados das análises de campo foram comparados por meio da análise estatística de regressão e os resultados das análises dos componentes principais foram analisados pelo teste Tukey... The present study aimed to investigate the development and essential oil content, and identify the chemical compounds from aerial part of Baccharis trimera (Less.) DC. cv. CPQBA-1, submitted on levels of organic fertilizer and regrowth. The seedlings were obtained from seeds and transplanted to experimental area from Department of Plant Production - Horticulture Sector (UNESP - FCA / Botucatu), spaced 0.6 x 0.6 m between plants and between rows. The experimental design was randomized blocks with four replications, five dosages of organic fertilizer: 10, 20, 30, 40 and 50 t.ha- 1 and control (0 t.ha- 1), totaling 24 plots containing 12 useful plants each one. The variables analyzed were: height (cm), plant diameter (cm), dry matter (kg.ha-1), fresh matter (kg.ha- 1), water content (%), oil content (%) and chemical compounds of the essential oil from aerial part. Samples were taken at 120, 242 and 365 DAT. After each harvest the plants were weighed, dried in an oven to obtain the dry matter and was distilled in apparatus of Clevenger type to obtain the essential oil. Subsequently, the essential oil was analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) and gas chromatography with flame ionization detector (GC-FID). The results of field were compared by and regression analysis and the results of the chemical components were analyzed by Tukey test at 5 %. The cultivar showed suffer little influence of organic fertilizer rates for the variables: height (120, 242 and 365 DAT), dry and fresh weight (365 DAT), and essential oil content (120, 242 and 365 DAT). The cultivar showed satisfactory correlation for the variables: plant diameter (120 and 365 DAT) and fresh matter (242 DAT). Furthermore, was highly influenced by the levels of...

Submitted by Boris INFORMAT (boris@uerj.br) on 2021-04-26T01:15:35Z No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_FINAL_Raphael_de_Mello_Carpes.pdf: 1795936 bytes, checksum: d55f8e4fbf8768004e3efca63f927115 (MD5) Made available in DSpace on 2021-04-26T01:15:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_FINAL_Raphael_de_Mello_Carpes.pdf: 1795936 bytes, checksum: d55f8e4fbf8768004e3efca63f927115 (MD5) Previous issue date: 2013-03-26 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Coral reefs are diverse ecosystems that have a high density of biodiversity leading to intense competition among species. These species may produce unknown substances, many with pharmacological value. Chromonephthea braziliensis is an invasive soft coral from the Indo-Pacific Ocean that has been possibly transported by oil platforms and whose presence can be a threat to Arraial do Cabo region s biodiversity. This species produces secondary metabolites that are responsible for inducing damage to the local ecosystem. The purpose of this study is the search of new drugs for generally chemotherapy based on the structure of bioactive compounds. Coral extracts were prepared from dried colonies (solvents: hexane, dichloromethane, ethyl acetate, and methanol). Chemical analyses were performed to characterize the extracts and evaluated their cytotoxic and mutagenic activities, using the bacterial reverse mutation assay (Salmonella/microsome) with TA97 strains, TA98, TA100 and TA102; genotoxic activity, using DNA breakage analysis and micronucleus formation and; toxic effects for nauplii microcrustaceans. Cytotoxicity was observed in the presence of S9 mix for dichloromethane extract for strain TA102 at the 20 µg/plate concentration and methanol extract for TA97 at 5 and 20 µg/plate. The dichloromethane, ethyl acetate and methanol extracts present genotoxicity for plasmidial DNA at high concentrations (250 µg/mL), but no DNA damage was observed in micronucleus assay. All extracts were toxic for nauplii microcrustaceans at least one of tested concentrations (0.01 1000 µg/mL), but LC50 was calculated only for the hexane, dichloromethane and ethyl acetate extracts. Os recifes de corais são ecossistemas diversos com alta densidade de biodiversidade, o que leva a intensa competição entre as espécies. Estas espécies podem produzir substâncias desconhecidas, muitas com valor farmacológico. Chromonephthea braziliensis é um coral mole invasor, originário do Oceano Indo-Pacífico, que foi possivelmente transportado por plataformas de petróleo e cuja presença é uma ameaça para a biodiversidade da região de Arraial do Cabo (RJ). Esta espécie produz metabólitos secundários que são responsáveis pela indução de danos para o ecossistema local. A finalidade deste estudo é a busca de novas substâncias para quimioterapia geral com base na estrutura de compostos bioativos. Extratos desse coral foram preparados a partir de colônias liofilizadas (solventes: hexano, diclorometano, acetato de etila e metanol). Realizaram-se análises químicas para a caracterização dos extratos e avaliaram-se as atividades: mutagênicas e citotóxicas, usando o ensaio de mutação reversa bacteriana (Salmonella/microssoma) com as linhagens TA97, TA98, TA100 e TA102; genotóxicas, utilizando análise da quebra do DNA e formação de micronúcleos na linhagem RAW 264,7 de macrófagos e; tóxicas para náuplios de microcrustáceos Artemia salina. Observou-se citotoxicidade, na presença de S9 mix, dos extratos diclorometano para a linhagem TA102 na concentração de 20 µg/100 µL/placa e metanol para a TA97 com 5 e 20 µg/100 µL/placa. Os extratos diclorometano, acetato de etila e metanol apresentaram genotoxicidade no DNA plasmidial em concentrações elevadas (250 µg/mL), mas nenhum dano ao DNA foi observado no ensaio de micronúcleo. Todos os extratos foram tóxicos para os náuplios de microcrustáceos em pelo menos uma das concentrações usadas (0,01 1000 µg/mL), e a LC50 pode ser determinada apenas para os extratos hexano, diclorometano e acetato de etila.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-05T18:24:17Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao- Thiago_ Barboza 2013.pdf: 1863787 bytes, checksum: d8304e59fae3b2db1cbaf38efbbdc6be (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-05T18:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao- Thiago_ Barboza 2013.pdf: 1863787 bytes, checksum: d8304e59fae3b2db1cbaf38efbbdc6be (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro The Brazilian flora encompasses medicinal importance species that can be used to develop new drugs. However, plants have been reduced in alarming rate, due to various human activities. Plant tissue culture promotes the conservation and use of species allowing for the production of bioactive substances for medicinal products. Leishmaniasis is considered a worldwide health problem, where Leishmania braziliensis is the most epidemiological importance specie in Brazil. Recently it has been registered increased resistance to treatment line. Similarly, the widespread use of antibiotics has led to an increase in multidrug-resistant bacteria, which represent a serious risk of infection. Annona mucosa have substances, such as acetogenins and alkaloids that exhibit antiparasitic and antimicrobial activities. In view of the problem, the aim of this work was to evaluate the leishmanicidal and antibacterial potential of extracts of A. mucosa obtained in vitro and in vivo. We proposed a protocol of in vitro germination, not yet reported for the species, aiming to achieve axenic seedlings. Hypocotyls explants was cultivated in WPM and leaf explants on MS medium supplemented with PIC and different concentrations of KIN, BAP or TDZ. The formed callus was cultured in liquid medium of the same composition for the production of cell suspensions. The materials were subjected to methanolic extraction and subsequent fractionation in hexane and dichloromethane. The activity of extracts on L. braziliensis was evaluated in vitro in the form promastigote and in vivo in amastigote form, in infected mice macrophages. Both, were treated with the extract per 96h and 48h, respectively. The evaluation of antimicrobial activity was performed by macrodilution assay in Mueller-Hinton, analyzing the growth of the strains after 16h of incubation at 48°C. The in vitro germination of A. mucosa was achieved in sterile vermiculite as substrate and has a 85% germination rate. The higher callus formation and friability was obtained in media containing KIN, that may be cultured in suspension. The extracts of the material in situ and in vitro showed leishmanicidal activity, despite the toxicity in macrophages. Cell suspension cultures showed antileishmanial potential in vitro and reduction of infection in macrophages. The evaluated extracts showed selective antimicrobial activity, with growth inhibition of Streptococcus pyogenes and Bacillus thuringiensis in different tested concentrations. It was concluded that the biotechnological techniques allowed to use plant materials regarding pharmacological properties for antileishmanial and antibacterial activities. A biodiversidade brasileira abrange plantas de importância medicinal que podem ser utilizadas na formulação de novos fármacos. Contudo, tem sido reduzida em velocidade alarmante, em função de diferentes ações antrópicas. A cultura de tecidos vegetais propicia a conservação e uso do germoplasma permitindo a obtenção de substâncias de importância medicinal. As leishmanioses são consideradas um problema de saúde pública mundial sendo a espécie Leishmania braziliensis de maior importância epidemiológica no Brasil. Recentemente tem-se registrado aumento da resistência à linha de tratamento usual. Do mesmo modo, o uso indiscriminado de antibióticos levou ao aumento de bactérias multirresistentes, que representam sério risco de infecção. A espécie Annona mucosa (Jacq.) possui substâncias, como acetogeninas e alcaloides, que apresentam atividades antiparasitária e antimicrobiana. Nesse sentido, o objetivo do trabalho foi avaliar o potencial leishmanicida e antibacteriano de extratos de A. mucosa de material produzido in vitro e in vivo. Foi proposto um protocolo de germinação in vitro, ainda não reportada para a espécie, com vistas à obtenção de plântulas axênicas. Em meio WPM foram cultivados explantes hipocotiledonares e foliares em meio MS, suplementados com PIC e diferentes concentrações de KIN, BAP ou TDZ. Os calos obtidos foram cultivados em meio líquido de mesma composição para a produção de suspensões celulares. Os materiais foram submetidos à extração metanólica e posterior fracionamento em hexano e diclorometano. Para a avaliação da atividade dos extratos sobre L. braziliensis foi usado o modelo in vitro, com a forma promastigota, e in vivo na forma amastigota, a partir do tratamento de macrófagos peritoneais de camundongos infectados com o parasito. Ambas as formas foram tratadas com os extratos por 96 e 48h, respectivamente. A atividade antimicrobiana foi avaliada por macrodiluição do extrato em Mueller-Hinton, sendo avaliado o crescimento das cepas após 16h de incubação a 48ºC. A germinação in vitro da espécie foi alcançada em substrato vermiculita estéril umedecido com solução de sais do meio MS, com taxa média de 85%. A maior produção de calos friáveis foi obtida em meios contendo KIN, com potencial uso para cultivo em suspensões celulares. Os extratos do material in situ e in vitro apresentaram atividade leishmanicida, apesar da toxicidade para macrófagos. Culturas de células em suspensão apresentaram potencial leishmanicida in vitro e redução da infecção em macrófagos. Os extratos do material avaliado apresentaram atividade antimicrobiana seletiva, com inibição do crescimento de Streptococcus pyogenes e Bacillus thurigiensis em diferentes concentrações avaliadas. Os métodos biotecnológicos empregados permitiram a obtenção de materiais com propriedades medicinais para as atividades leishmanicida e antibacteriana, assim como o material in vivo, constituindo este estudo o primeiro relato para as atividades propostas em A. mucosa.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T19:05:35Z No. of bitstreams: 1 S1516-05722013000100010.pdf: 247946 bytes, checksum: d283ba6a4ddecd7e74fe6346bdd8a980 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T19:05:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S1516-05722013000100010.pdf: 247946 bytes, checksum: d283ba6a4ddecd7e74fe6346bdd8a980 (MD5) Previous issue date: 2013-01-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T20:09:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1516-05722013000100010.pdf: 247946 bytes, checksum: d283ba6a4ddecd7e74fe6346bdd8a980 (MD5) S1516-05722013000100010.pdf.txt: 26919 bytes, checksum: 02875e649bd07d4a072c45e837b0ea90 (MD5) Previous issue date: 2013-01-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:47:22Z No. of bitstreams: 2 S1516-05722013000100010.pdf: 247946 bytes, checksum: d283ba6a4ddecd7e74fe6346bdd8a980 (MD5) S1516-05722013000100010.pdf.txt: 26919 bytes, checksum: 02875e649bd07d4a072c45e837b0ea90 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:47:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1516-05722013000100010.pdf: 247946 bytes, checksum: d283ba6a4ddecd7e74fe6346bdd8a980 (MD5) S1516-05722013000100010.pdf.txt: 26919 bytes, checksum: 02875e649bd07d4a072c45e837b0ea90 (MD5) Previous issue date: 2013-01-01 Este trabalho teve como objetivo verificar se o horário de colheita da erva-cidreira brasileira [Lippia alba (Mill.) N. E. Br.], fenotipo carvona-limoneno, tem influência sobre a produção de massa foliar, rendimento e composição do óleo essencial. Foram avaliados cinco horários de colheita quando a cultura estava com 145 dias desde o transplante: 8:00, 10:00, 12:00, 14:00 e 16:00 h com cinco repetições, distribuídos em blocos casualizados. O experimento foi conduzido na Fazenda Experimental Lageado da FCA-UNESP/Botucatu no Setor de Horticultura do Departamento de Produção Vegetal. A colheita foi realizada a 15 cm da superfície do solo e o óleo essencial obtido através de hidrodestilação, em aparelho tipo Clevenger. Levou-se em consideração os fatores agronômicos e o rendimento obtido por hidrodestilação. O óleo essencial foi analisado em cromatógrafo gasoso acoplado a espectrômetro de massas (CG/EM). Os resultados foram submetidos à análise de variância (Teste F) e as médias comparadas pelo teste de Tukey. Não houve diferença estatística para produção de massa foliar, teor de óleo essencial e produtividade de óleo essencial em massa fresca e seca. No entanto, entre os compostos majoritários do óleo essencial das folhas, carvona e limoneno, a melhor produtividade de carvona foi obtida às 10:00 h, em matéria fresca (2,050 L ha-1) e em matéria seca (2,068 L ha-1), e para o limoneno às 16:00 h, em matéria fresca (1,068 L ha-1) e em matéria seca (1,060 L ha-1). This study aimed to verify whether the harvest time of the Brazilian erva-cidreira [Lippia alba (Mill.) N. E. Br.], limonene-carvone chemotype, influences leaf mass production and essential oil yield and composition. Five different harvest times were evaluated at 145 days after transplanting: 8:00, 10:00, 12:00, 14:00 and 16:00, with five replicates, distributed in randomized blocks. The experiment was carried out at Lageado Experimental Farm of the School of Agronomical Sciences FCA-UNESP/Botucatu, Horticulture Sector, Department of Plant Production. Harvest was conducted from 15 cm above the soil surface and essential oil was obtained through steam distillation in a Clevenger-type apparatus. Both the agronomical factors and the yield obtained through steam distillation were considered. The essential oil was analyzed in a gas chromatographer coupled to a mass spectrometer (GC/MS). Results were subjected to analysis of variance (F Test) and means were compared according to Tukey's test. There was no statistical difference for leaf mass production, essential oil content and essential oil yield in fresh and dry matter. However, considering the major essential oil compounds, carvone and limonene, the best yield was obtained at 10:00 for carvone in fresh (2050 L ha-1) and dry matter (2068 L ha-1), and at 16:00 for limonene in fresh (1068 L ha-1) and dry matter (1060 L ha-1). UNESP FCA UFU ICIAG UNESP FCA

Un tejido vegetal, como toda materia viva, se encuentra en un estado dinámicoestacionario desde el punto de vista químico. Hay una constante síntesis y degradación de biomoléculas o metabolitos que determina el dinamismo de los sistemas biológicos, pero a su vez, al estar en equilibrio la velocidad de síntesis o aparición con la de degradación o desaparición de componentes celulares, las concentraciones de los mismos se mantienen aproximadamente constantes, estacionarias. Fil: Ringuelet, Jorge Abel. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina Fil: Viña, Sonia Zulma. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina

Pogostemon cablin (Blanco) Benth., comumente conhecido como patchouli, é uma espécie aromática utilizada pela indústria de perfumes devido a fragrância amadeirada e propriedade fixadora do óleo essencial. Fatores que afetam o teor dos constituintes do óleo essencial devem ser avaliados visando obter matéria prima de melhor qualidade. O experimento foi conduzido em casa de vegetação com delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x3 e 4 repetições, sendo dois níveis de giberelina (0 e 200 mg L-1) e três níveis de extrato de alga marinha (0, 15 e 30 mg L-1). A aplicação dos reguladores vegetais foi realizada 30 dias após o plantio das mudas, e a avaliação do experimento deu-se 45 dias após a aplicação dos tratamentos. Não houve diferença significativa para a altura das plantas, a concentração de extrato de alga marinha de 15 mg L-1 promoveu aumento no número de folhas em relação à testemunha e a concentração de 30 mg L-1 promoveu decréscimo. Em relação à área foliar e ao número de folhas houve relação inversa para os níveis de extrato de alga marinha, onde o tratamento com maior concentração do regulador resultou em aumento da área foliar e redução do número de folhas. O teor de óleo essencial foi superior após a aplicação de 15 mg L-1 de extrato alga marinha isoladamente ou combinado com GA3. A produtividade do óleo essencial também aumentou com a aplicação 15 mg L-1 de extrato de alga marinha e quando utilizado somente GA3. A utilização de extrato de alga marinha aumentou a concentração de patchoulol no óleo essencial. Pogostemon cablin (Blanco) Benth., commonly known as patchouli, is an aromatic species used by the perfume industry due to its woody fragrance and the fixative characteristic of its essential oil. Factors affecting the content of the constituents of essential oils should be evaluated in order to obtain raw materials with better quality. The experiment was carried out in a greenhouse in a completely randomized 2x3 factorial arrangement and four replications, with two levels of gibberellin (0 and 200 mg L-1) and three levels of seaweed extract (0, 15 and 30 mg L-1). Plant regulators were applied thirty days after planting the seedlings; the experiment was evaluated forty-five days after the treatments. There was no significant difference in plant height; the 15 mg L-1 concentration of seaweed extract promoted an increase in the number of leaves in relation to the control; and the 30 mg L-1 concentration promoted a decrease. In relation to leaf area and leaf number, there was an inverse relationship for the seaweed extract levels, in which the treatment with higher a concentration of the regulator resulted in an increased leaf area, reducing the number of leaves. The essential oil content was higher after applying 15 mg L-1 of seaweed extract alone or combined with GA3. The yield of essential oil also increased by applying 15 mg L-1 of seaweed extract and when only GA3 was used. The use of seaweed extract increased the patchoulol concentration in the essential oil.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:56:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vivian Pupo de Oliveira Machado.pdf: 408979 bytes, checksum: 1346e7d9172ff64c6b220a5af3321fbc (MD5) Previous issue date: 2012-12-14 Calendula officinalis L. (Asteraceae), known as calendula or marigold, is an annual plant and is widely used worldwide as medicinal and ornamental plant. The objective of this work was to evaluate the effect of biostimulant Stimulate®, applied by foliar spray, on the development, in the production of flowers and the content flavonoids in marigold. The experiment was conducted in greenhouse conditions, in Avaré-SP. Seedlings were obtained from commercial seed marigold (Calendula officinalis L., cv. Dobrada Sortida), and the experiment was conducted in plastic pots containing a mixture of organic substrate, loam and sand (ratio 1:1:1). Treatments consisted of different doses of the product Stimulate®, applied by foliar spray, as follow: T1= 0 (distilled water); T2= 3 mL L-1; T3= 6 mL L-1; T4= 9 mL L-1; T5= 12 mL L-1 and T6= 15 mL L-1, applied after 20 days of transplanting the seedlings to pots, carrying out 10 consecutive applications of the product, in the early-morning hours. Biometric evaluations of plants growth were performed at 30, 60 and 90 days after transplanting (height, number of leaves, dry weight of shoot and root) and during the reproductive phase (number of flowers, fresh and dry weight of flowers and content of flavonoids). The experimental design was completely randomized, with 6 treatment and 8 replicates in each treatment, a total of 48 pots. Data were tabulated and submitted to analysis of variance and regression analysis, observing the behavior of the variables according to Stimulate® doses Applying Stimulate® in marigold by foliar spray was not effective in increasing the vegetative growth and total flavonoid content in flowers. In relation to flowering, the Stimulate® application may be used as efficient management technique to provide an increased production of flowers per plant. Calendula officinalis L. (Asteraceae), conhecida como calêndula ou malmequer, é uma planta anual e é amplamente utilizada em todo o mundo como planta medicinal e ornamental. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do bioestimulante Stimulate®, aplicado via pulverização foliar, no desenvolvimento, na produção de inflorescências e no teor de flavonoides em calêndula. O experimento foi instalado em condições de casa de vegetação, no município de Avaré-SP. As mudas foram obtidas a partir de sementes comerciais de calêndula (Calendula officinalis L., cv. Dobrada Sortida), e o experimento foi conduzido em vasos plásticos contendo uma mistura de substrato orgânico, terra argilosa e areia (proporção 1:1:1). Os tratamentos consistiram de diferentes doses do produto Stimulate®, aplicadas via pulverização foliar, a saber: T1= 0 (água destilada); T2= 3 mL L-1; T3= 6 mL L-1; T4= 9 mL L-1; T5= 12 mL L-1 e T6= 15 mL L-1, aplicadas após 20 dias do transplantio das mudas para os vasos, realizando-se 10 aplicações consecutivas do produto, nas primeiras horas da manhã. Foram realizadas avaliações biométricas de crescimento das plantas (altura, número de folhas, massa seca de parte aérea e raiz; aos 30, 60 e 90 dias após transplantio) e avaliações durante a fase reprodutiva (número de capítulos florais, massa seca e fresca dos capítulos florais e teor de flavonoides). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 6 tratamentos e 8 repetições em cada tratamento, num total de 48 vasos. Os dados obtidos foram tabulados e submetidos à análise de variância e análise de regressão, observando-se comportamento das variáveis em função das doses de Stimulate®. A aplicação de Stimulate® em calêndula via pulverização foliar não foi eficiente em aumentar o crescimento vegetativo das plantas e o teor de flavonoides totais presente nas inflorescências. Em relação ao florescimento, a utilização de Stimulate® pode ser indicada como técnica de manejo eficiente em proporcionar um aumento da produção de inflorescências por planta.

Los alcaloides bencilisoquinolínicos (ABI) son metabolitos especializados con una distribución filogenética antigua pero conservada todavía en clados modernos. Varios de ellos, como la morfina, sanguinerina y berberina tienen importancia en la medicina moderna. En esta revisión se analizan los aspectos más sobresalientes del estado actual de la biosíntesis de ABI. Se han realizado estudios que han permitido conocer la biosíntesis de 22 de estos metabolitos nitrogenados. En su formación participan 43 enzimas agrupadas en oxido-reductasas, transferasas y liasas, que en algunos casos representan ejemplos atípicos de la forma en la que se originó la diversificación del metabolismo secundario, entre ellos proteínas citocromo P450 (CYP450) con actividades catalíticas para la ruta de los ABI, o la enzima norcoclaurina sintasa (NCS) que esta emparentada con proteínas alergénicas de defensa. Así mismo, hay avances genéticos en los que se ha podido caracterizar 30 enzimas, permitiendo conocer procesos de regulación. Otro aspecto interesante es la compartimentación de los sitios de biosíntesis y acumulación de ABI ya que en varios casos están separados espacialmente y en distintas especies o en la misma pueden participar varios tipos de células. Ello ha sugerido el transporte intra e intercelular de los alcaloides, los precursores y de las enzimas, se ha documentado el transporte de berberina entre el citoplasma y las vacuolas del almacenamiento. El panorama de la biosíntesis de ABI se ha construido con los estudios de ejemplares de importancia farmacológica. The benzylisoquinoline alkaloids (BIA) are specialized metabolites with an ancient phylogenetic distribution, but still preserved in modern clades. Some of them, such as morphine, sanguinerine or berberine, are important for modern medicine. This review discusses the highlights of the current state of the biosynthesis of BIA. There have been studies that show the biosynthesis of 22 of these nitrogenous metabolites. In their formation there are 43 enzymes grouped into oxidoreductases, transferases and lyases, which in some cases represent atypical examples of the manner in which the secondary metabolism diversification was originated. Two of these examples are the cytochrome proteins P450 (P450), with catalytic activities for ABI route, or the norcoclaurine synthase enzyme (NCS), which share substantial identity with defense allergenic proteins. Likewise, there are genetic advances that have produced the characterization of 30 enzymes, allowing knowledge of regulatory processes. Another interesting aspect is the compartmentation of the biosynthesis sites and accumulation of BIA, since in several cases they are spatially separated and in different species, or in the same species several types of cells may be involved. This has suggested intra and intercellular transport of alkaloids, precursors and enzymes, and it has been documented berberine transport between the cytoplasm and the vacuoles of storage. The picture for the biosynthesis of BIA has been constructed with exemplary studies of alkaloids with pharmacological importance. Os alcalóides benzilisoquinolinas (ABI) são metabólitos especializados com uma distribuição filogenética antiga, mas ainda preservada em clados modernos. Vários deles, como a morfina, sanguinarina e berberina são importantes na medicina moderna. Neste artigo, se analisam os aspectos mais destacados do estado atual da biossíntese de ABI; há estudos que tem permitido conhecer a biossíntese de 22 desses metabólitos nitrogenados. Na sua síntese participam 43 enzimas agrupadas em oxidoreductases, transferases, liases e, em alguns casos, representam exemplos atípicos da forma pela qual se originou a diversificação do metabolismo secundário, incluindo as proteínas do citocromo P450 (CYP450), com atividades catalíticas para a rota dos ABI, ou a enzima norcoclaurina sintase (NCS), que está relacionada com proteínas alergênicas de defesa. Da mesma forma, há avanços genéticos na caracterização de 30 enzimas, permitindo conhecer processos de regulação. Outro aspecto interessante é a compartimentalização dos sítios de biossíntese e acumulação de ABI uma vez que em muitos casos estão separados espacialmente e em diferentes espécies, ou na mesma podem participar vários tipos de células. Isto há sugerido o transporte intra e intercelular de alcalóides, precursores das enzimas; tem sido documentado o transporte de berberina entre o citoplasma e os vacúolos de armazenamento. A perspectiva na biossíntese de ABI foi construída com os estudos de exemplares de importância farmacológica.

O objetivo deste trabalho foi avaliar os teores de lignina e celulose em plantas de cana-de-açúcar após a aplicação de dois maturadores para a colheita. O experimento foi conduzido em uma área de cana-soca, cultivar SP 803280, no município de Igaraçu do Tietê/SP. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com quatro repetições. Os tratamentos constituíram-se da aplicação de dois maturadores: sulfometuron-methyl (Curavial) e glyphosate (Roundup original). As doses utilizadas foram: glyphosate a 72 g e.a. ha-1; glyphosate a 144 g e.a. ha-1 ; glyphosate a 72 g e.a. ha-1 + sulfometuron methyl a 10 g p.c. ha-1; glyphosate a 108 g e.a. ha-1 + sulfometuron-methyl a 12 g p.c. ha-1; sulfometuron-methyl a 20 g p.c. ha-1; e a testemunha sem aplicação de maturadores. As análises de lignina e celulose foram realizadas pelo método lignina em detergente ácido modificado. O glyphosate e o sulfometuron-methyl alteraram os níveis de lignina no momento da colheita, e esse efeito foi observado também durante o crescimento da cana-de-açúcar (meses após a aplicação desses produtos). O glyphosate a 72 g e.a. ha-1 promoveu reduções nos teores de lignina, na colheita e durante o crescimento da cana-de-açúcar, quando comparados com os da testemunha, enquanto o sulfometuron-methyl isolado na menor dose (10 g ha-1) promoveu aumento nos teores desse biopolímero na soqueira da cana-de-açúcar. The aim of this study was to evaluate the content of lignin and cellulose in sugarcane after application of ripeners. The experiment was carried out in a sugarcane ratoon area, variety SP803280 in Igaraçu Tietê, São Paulo, Brazil. The experimental design was a randomized complete block with four replications. The treatments consisted of application of two ripeners: sulfometuron methyl (Curavial) and glyphosate (Roundup Original). The doses used were: glyphosate 200 mL pc ha-1; glyphosate at 400 mL p.c. ha-1, glyphosate at 200 mL p.c. ha-1 plus sulfometuron methyl at 10 g p.c. ha-1; glyphosate at 150 mL p.c. ha-1 plus sulfometuron methyl at 12 g p.c. ha-1; sulfometuron methyl at 20 g p.c. ha-1 and the untreated control without ripener application. Lignin and cellulose analyses were made using acid detergent lignin modified. Glyphosate and sulfometuron methyl altered lignin levels at harvest and during sugarcane growth (months after application of the products). In general, glyphosate at 200 mL ha-1 promoted reductions in lignin compared to the control, while sulfometuron methyl isolated at a dose of 10 g ha-1 promoted an increase in the levels of this compound in sugarcane.

O objetivo deste trabalho foi avaliar os teores de lignina e celulose em plantas de cana-de-açúcar após a aplicação de dois maturadores para a colheita. O experimento foi conduzido em uma área de cana-soca, cultivar SP 803280, no município de Igaraçu do Tietê/SP. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com quatro repetições. Os tratamentos constituíram-se da aplicação de dois maturadores: sulfometuron-methyl (Curavial) e glyphosate (Roundup original). As doses utilizadas foram: glyphosate a 72 g e.a. ha-1; glyphosate a 144 g e.a. ha-1 ; glyphosate a 72 g e.a. ha-1 + sulfometuron methyl a 10 g p.c. ha-1; glyphosate a 108 g e.a. ha-1 + sulfometuron-methyl a 12 g p.c. ha-1; sulfometuron-methyl a 20 g p.c. ha-1; e a testemunha sem aplicação de maturadores. As análises de lignina e celulose foram realizadas pelo método lignina em detergente ácido modificado. O glyphosate e o sulfometuron-methyl alteraram os níveis de lignina no momento da colheita, e esse efeito foi observado também durante o crescimento da cana-de-açúcar (meses após a aplicação desses produtos). O glyphosate a 72 g e.a. ha-1 promoveu reduções nos teores de lignina, na colheita e durante o crescimento da cana-de-açúcar, quando comparados com os da testemunha, enquanto o sulfometuron-methyl isolado na menor dose (10 g ha-1) promoveu aumento nos teores desse biopolímero na soqueira da cana-de-açúcar.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:38:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_5360_Flávia M Macedo Martins_Dissertação de Mestrado.pdf: 2696884 bytes, checksum: 7169965e2213d5a67f234e55aa67cf89 (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 Os metabólitos secundários das plantas podem sofrer alterações qualitativas e quantitativas dependendo dos estímulos ambientais presentes. Dentre os estímulos ambientais associados a alterações nos metabólitos secundários, ressaltam-se as interações bióticas: planta/micro-organismos, planta/insetos e planta/planta, idade e estágio de desenvolvimento, ritmo circadiano; e os fatores abióticos: luminosidade, temperatura, pluviosidade e estado nutricional, sazonalidade, disponibilidade de água, radiação UV, composição atmosférica e altitude. O presente trabalho relata o estudo da influência do desenvolvimento da planta, da sazonalidade e da disponibilidade de nutriente e água no solo nas atividades antimicrobiana, antifúngica, citotóxica e alopática dos extratos vegetais obtidos a partir de Xylopia sericea St. HiII. A amostragem de partes aéreas da planta foi realizada em diferentes estações do ano (seca e chuvosa) e em diferentes habitats, uma área caracterizada como natural (Parque estadual de Itaúnas) e outra como degradada (Campus do Ceunes/UFES), no Município de São Mateus/ ES. A qualidade nutricional do solo, pH e teor de matéria orgânica foram avaliados nas diferentes áreas amostradas. Além disso, medidas da altura e da circunferência na altura do peito das plantas foram estabelecidas para estimar o estágio de desenvolvimento das mesmas. Os extratos das partes aéreas de Xylopia sericea foram obtidos por maceração em etanol. Os extratos etanólicos foram caracterizados quimicamente e submetidos aos testes de citotoxicidade, antifúngico, antibacteriano e de alelopatia. Os resultados revelaram influência dos fatores ambientais relativos às diferentes áreas, e das diferentes estações, nas atividades biológicas testada. Ademais, na triagem farmacognóstica dos extratos foram detectados alcalóides, flavonóides, saponinas, triterpenos, esteróides, taninos, cumarinas e naftoquinonas. Através das análises utilizando CLAE foi possível identificar os flavonóides quercetina, rutina e hesperidina.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-17T15:00:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Giseli_Rodrigues_Crizel.pdf: 1172342 bytes, checksum: af5fe6fdd3d4858626ec7a5c2452798b (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-18T10:39:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Giseli_Rodrigues_Crizel.pdf: 1172342 bytes, checksum: af5fe6fdd3d4858626ec7a5c2452798b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-18T10:39:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Giseli_Rodrigues_Crizel.pdf: 1172342 bytes, checksum: af5fe6fdd3d4858626ec7a5c2452798b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2012-01-12 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Em um primeiro experimento se objetivou estudar alterações decorrentes do efeito da radiação UV-C (comprimento de onda de 100-280 nm) aplicada durante o cultivo de morangueiros cvs. Aromas e Albion e no segundo experimento objetivou-se estudar a aplicação de radiação UV-C durante o período vegetativo (estolonamento) de morangueiros cv. Aromas avaliaram-se para ambos os experimentos: firmeza de polpa, teor de fenóis totais, antocianinas totais, carotenóides totais, ácido L-ascórbico, atividade antioxidante e atividade da enzima fenilalanina amonioliase, textura da polpa e cor da epiderme. A radiação UV-C aplicada durante o cultivo não alterou a firmeza na cv. Aromas, já para os frutos da cv. Albion resultou em menor firmeza dos frutos. A aplicação da radiação UV-C originou na cv. Aromas frutos com massa média superior, sendo que para a cv. Albion não houve diferença entre os tratamentos. Um incremento no teor de ácido ascórbico, teor de compostos fenólicos, no teor de antocianinas totais e atividade antioxidante, assim como uma maior atividade da PAL foram verificados para os frutos tratados. As 24 aplicação de radiação UV-C durante o cultivo de morangos promove maturação antecipada de 4 dias, a indução da síntese de moléculas antioxidantes, como compostos fenólicos e antocianinas, possivelmente como conseqüência da maior atividade de enzima PAL. A radiação UV-C aplicada 34 vezes durante o ciclo vegetativo de formação de estolões, no segundo experimento, obteve-se mudas que produzem frutos com maturação antecipada em 8 dias, com maior teor de acido L-ascórbico, antocianinas e carotenóides, sem alterar a produção por planta nem o peso médio dos frutos. Com esses resultados, pode-se concluir que a aplicação de radiação UV-C durante o ciclo de cultivo precedente afeta a qualidade dos frutos do cultivo sucessivo. A explicação mais plausível para a elevação dos compostos fitoquímicos é de que o estresse causado pela radiação UV-C na planta geram espécies reativas de oxigênio (ERO), que estimulam respostas de defesa através do aumento da atividade da PAL, enzima responsável pela síntese de compostos fenólicos. In order to study the effect of changes resulting from UV-C radiation (254 nm) applied during the cultivation of strawberry cv. Aromas and cv. Albion and during the growing season of strawberry cv. Aromas were evaluated: firmness, content of total phenols, total anthocyanins, carotenoids, ascorbic acid, antioxidant activity and phenylalanine amonioliase enzyme activity, texture and superficial color. The UV-C applied during the going don‟t changed the firmness of cv. Aromas, but the fruits of cv. Albion treated with UV-C resulted in lower firmness. The UV-C tratament in cv. Aromas resveted in fruits with higher weight, and for cv. Albion no diference were found. An increase in ascorbic acid, phenolic content, anthocyanins and antioxidant activity, as well as an increase in PAL activity was observed in the treated fruits. Thus, the UV-C application during cultivation promotes the induction of antioxidant molecules synthesis, such as phenolic compounds and anthocyanins possibly as a result of increased PAL enzyme activity. Evaluating the application of UV-C during the vegetative cycle of stolon formation, was obtained that plants produce fruits withearly maturity the 8 days, with higher content of L-ascorbic acid, anthocyanins and carotenoids, without affecting the yield per plant or the weight of fruit. With these results, it can be concluded that the application of UV-C radiation during the previous crop cycle affects the quality of the fruits of continuous cultivation.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:52:05Z No. of bitstreams: 1 S0100-83582011000200019.pdf: 1005426 bytes, checksum: 5d51b7f0f24cf7e36cae15e88ab724ba (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:52:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0100-83582011000200019.pdf: 1005426 bytes, checksum: 5d51b7f0f24cf7e36cae15e88ab724ba (MD5) Previous issue date: 2011-06-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T17:46:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-83582011000200019.pdf: 1005426 bytes, checksum: 5d51b7f0f24cf7e36cae15e88ab724ba (MD5) S0100-83582011000200019.pdf.txt: 22719 bytes, checksum: 05eda1b2cef06dcecb8921915a3ecdd5 (MD5) Previous issue date: 2011-06-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:20:35Z No. of bitstreams: 2 S0100-83582011000200019.pdf: 1005426 bytes, checksum: 5d51b7f0f24cf7e36cae15e88ab724ba (MD5) S0100-83582011000200019.pdf.txt: 22719 bytes, checksum: 05eda1b2cef06dcecb8921915a3ecdd5 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:20:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-83582011000200019.pdf: 1005426 bytes, checksum: 5d51b7f0f24cf7e36cae15e88ab724ba (MD5) S0100-83582011000200019.pdf.txt: 22719 bytes, checksum: 05eda1b2cef06dcecb8921915a3ecdd5 (MD5) Previous issue date: 2011-06-01 O bloqueio parcial das rotas onde atuam os herbicidas, com uso de baixas doses, pode ter implicações importantes, como a alteração do balanço de processos metabólicos nas plantas. Assim, foi conduzido no ano agrícola 2006/2007 um experimento em cana-soca de segundo corte na Fazenda Jurema, pertencente ao grupo COSAN, município de Barra Bonita-SP, para verificar os efeitos do glyphosate e do sulfumeturon-methyl, em subdoses, no comportamento fisiológico da cana-de-açúcar pelos níveis de clorofila e carotenoides. Os tratamentos constituíram-se da aplicação de dois herbicidas: sulfumeturon-methyl (Curavial 360 e.a. kg-1) e glyphosate (Roundup 480 i.a. kg-1), isolados e em misturas, em diferentes doses, e um tratamento controle, sem a aplicação dos herbicidas. As doses utilizadas foram: glyphosate 200 mL p.c. ha-1; glyphosate 400 mL p.c. ha -1; glyphosate 200 mL p.c. ha -1 + 10 g p.c. ha-1 de sulfumeturon-methyl; glyphosate 150 mL p.c. ha -1 + 12 g p.c. ha -1 de sulfumeturon-methyl; e sulfumeturon-methyl 20 g p.c. ha -1. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com quatro repetições. As avaliações foram realizadas 15 e 30 dias após o plantio (DAP) e 30, 60, 90, 120, 150 e 180 dias após a colheita (DAC). As folhas foram cortadas padronizando-se o mesmo peso e área foliar. Para determinação do conteúdo de clorofila e carotenoides, amostras de 0,2 g de tecido foliar fresco foram preparadas e os extratos filtrados, sendo efetuadas leituras em espectrofotômetro (663 e 645 nm para clorofilas a e b, respectivamente). A aplicação de glyphosate e sulfumeturon-methyl nas maiores doses interferiu no conteúdo de carotenoides quando estes foram comparados com a testemunha. A maior dose de glyphosate diminuiu significativamente o conteúdo de clorofilas e carotenoides na cana-de-açúcar, porém esse resultado não se manteve quando a dose foi reduzida para 200 mL p.c. ha-1 . Os teores de clorofila foram inversamente proporcionais aos níveis Fe. A aplicação de sulfumeturon-methyl não interferiu nos teores de clorofila, no entanto os níveis de carotenoides se mostraram mais sensíveis e seus teores reduzidos. As alterações observadas nos níveis de clorofilas e carotenoides pela aplicação dos produtos podem afetar de maneira distinta o metabolismo da fotossíntese pela absorção e/ou conversão de energia. The partial blockage of the routes of action of herbicides, using low doses, may have important implications by altering the balance of the metabolic processes in plants. Thus, an experiment was conducted in cutting cane ratoon 2 at Cosan Group's Fazenda Jurema in Barra Bonita-SP, during the agricultural years 2006/2007, to verify the effects of glyphosate and sulfometuron methyl sub-doses on the physiological behavior of sugarcane based on the the levels of chlorophyll and carotenoids. The treatments consisted of applications of two herbicides: sulfometuron methyl (480 a.i. kg-1) and glyphosate (360 a.e. kg-1) in different doses and mixtures (Roundup and Curavial, respectively), plus a control treatment, without herbicide application. The doses used were: glyphosate pc ha-1 of 200 mL, 400 mL of glyphosate pc ha-1; pc ha-1 of 200 mL glyphosate + 10 g of pc ha-1 of sulfometuron methyl; pc ha-1 of 150 mL glyphosate + 12 g of pc ha-1 of sulfometuron methyl, sulfometuron methyl pc ha¹ of 20. The experiment was arranged in a randomized block design with four replications. The evaluations were carried out 15 and 30 days after planting (DAP) and 30, 60, 90, 120, 150 and 180 days after harvest (DAH). The leaves were cut using the same standardized weight and leaf area. To determine the content of chlorophyll and carotenoids, samples of 0.2 g of fresh leaf tissue were prepared and the extracts were filtered, and spectrophotometer readings were conducted (663 and 645 nm for chlorophyll a and b, respectively). The application of glyphosate and sulfumeturon methyl at larger doses were found to interfere in the carotenoid content, when compared with the control. The highest dose of glyphosate significantly reduced the content of chlorophyll and carotenoid in sugarcane, but this result was not maintained when the dose was reduced to 200 mL. The contents of chlorophyll were inversely proportional to the levels of Fe. The application of sulfumeturon methyl did not affect the levels of chlorophyll; however, the carotenoid levels were more sensitive and were reduced. The changes observed in the chlorophyll and carotenoid levels caused by the application of the herbicides may distinctly alter the metabolism of photosynthesis by absorbtion and/or conversion of energy. UNESP FCA Dep. de Produção Vegetal UNESP FCA Dep. de Produção Vegetal

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da deficiência hídrica e aplicação de ácido abscísico (ABA) sobre aspectos fisiológicos e teor de flavonoides em plantas de calêndula. O experimento foi instalado em condições de casa-de-vegetação com plantas envasadas. No início do florescimento de plantas de calêndula, foram aplicados quatro intervalos de suspensão da irrigação (irrigação diária; três; seis e nove dias sem irrigar), acompanhados por três doses de ABA (0, 10 e 100 μM). Avaliou-se o conteúdo relativo de água na folha (CRA) e as trocas gasosas, utilizando-se um analisador portátil por infravermelho (A: fotossíntese líquida, gs: condutância estomática, E: transpiração, Ci: concentração intercelular de CO2 e EUA: eficiência de uso da água). Aos nove dias sem irrigação ocorreram reduções significativas em todas as variáveis de trocas gasosas analisadas, independente da aplicação de ABA. Concluiu-se que o efeito principal do ABA foi o de causar diminuição na gs, a qual foi acompanhada de redução em A somente quando as plantas estavam desidratadas. As intensidades de deficiência hídrica testadas não causaram interferência no acúmulo de flavonoides nas inflorescências. Entretanto, o ABA restringiu a biossíntese de flavonoides, tanto nas plantas-controle como nas plantas submetidas à deficiência hídrica. The goal of this study was to evaluate the effects of water deficit and abscisic acid (ABA) application on physiological parameters and flavonoid production in marigold plant. The experiment was performed under nursery conditions with potted plants. It was tested water deficit by withholding water (control - diary irrigation, 3, 6 and 9 days without irrigation) followed by 3 ABA concentrations (0, 10 e 100 μM) applied in the beginning of blooming. It was evaluated the relative water content and the leaf gas exchange using a portable infrared gas analyzer (A: net photosynthesis, gs: stomatal conductance, E: transpiration, Ci: CO2 intercellular concentration and EUA: water use efficiency). At the end of 9 days of water deficit there were significant decreases in all the characteristics evaluated, independent of ABA application. This suggests that the main effect of ABA was to cause a reduction on gs which was accompanied of a reduction in A, only when the plants were submitted to the water deficit. There was no significant difference among the levels of water deficit tested in relation to the total flavonoid content in inflorescences. However, ABA restricted the flavonoids biosynthesis both in control plant and stressed plants.

O bloqueio parcial das rotas onde atuam os herbicidas, com uso de baixas doses, pode ter implicações importantes, como a alteração do balanço de processos metabólicos nas plantas. Assim, foi conduzido no ano agrícola 2006/2007 um experimento em cana-soca de segundo corte na Fazenda Jurema, pertencente ao grupo COSAN, município de Barra Bonita-SP, para verificar os efeitos do glyphosate e do sulfumeturon-methyl, em subdoses, no comportamento fisiológico da cana-de-açúcar pelos níveis de clorofila e carotenoides. Os tratamentos constituíram-se da aplicação de dois herbicidas: sulfumeturon-methyl (Curavial 360 e.a. kg-1) e glyphosate (Roundup 480 i.a. kg-1), isolados e em misturas, em diferentes doses, e um tratamento controle, sem a aplicação dos herbicidas. As doses utilizadas foram: glyphosate 200 mL p.c. ha-1; glyphosate 400 mL p.c. ha -1; glyphosate 200 mL p.c. ha -1 + 10 g p.c. ha-1 de sulfumeturon-methyl; glyphosate 150 mL p.c. ha -1 + 12 g p.c. ha -1 de sulfumeturon-methyl; e sulfumeturon-methyl 20 g p.c. ha -1. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com quatro repetições. As avaliações foram realizadas 15 e 30 dias após o plantio (DAP) e 30, 60, 90, 120, 150 e 180 dias após a colheita (DAC). As folhas foram cortadas padronizando-se o mesmo peso e área foliar. Para determinação do conteúdo de clorofila e carotenoides, amostras de 0,2 g de tecido foliar fresco foram preparadas e os extratos filtrados, sendo efetuadas leituras em espectrofotômetro (663 e 645 nm para clorofilas a e b, respectivamente). A aplicação de glyphosate e sulfumeturon-methyl nas maiores doses interferiu no conteúdo de carotenoides quando estes foram comparados com a testemunha. A maior dose de glyphosate diminuiu significativamente o conteúdo de clorofilas e carotenoides na cana-de-açúcar, porém esse resultado não se manteve quando a dose foi reduzida para 200 mL p.c. ha-1 . Os teores de clorofila foram inversamente proporcionais aos níveis Fe. A aplicação de sulfumeturon-methyl não interferiu nos teores de clorofila, no entanto os níveis de carotenoides se mostraram mais sensíveis e seus teores reduzidos. As alterações observadas nos níveis de clorofilas e carotenoides pela aplicação dos produtos podem afetar de maneira distinta o metabolismo da fotossíntese pela absorção e/ou conversão de energia. The partial blockage of the routes of action of herbicides, using low doses, may have important implications by altering the balance of the metabolic processes in plants. Thus, an experiment was conducted in cutting cane ratoon 2 at Cosan Group's Fazenda Jurema in Barra Bonita-SP, during the agricultural years 2006/2007, to verify the effects of glyphosate and sulfometuron methyl sub-doses on the physiological behavior of sugarcane based on the the levels of chlorophyll and carotenoids. The treatments consisted of applications of two herbicides: sulfometuron methyl (480 a.i. kg-1) and glyphosate (360 a.e. kg-1) in different doses and mixtures (Roundup and Curavial, respectively), plus a control treatment, without herbicide application. The doses used were: glyphosate pc ha-1 of 200 mL, 400 mL of glyphosate pc ha-1; pc ha-1 of 200 mL glyphosate + 10 g of pc ha-1 of sulfometuron methyl; pc ha-1 of 150 mL glyphosate + 12 g of pc ha-1 of sulfometuron methyl, sulfometuron methyl pc ha¹ of 20. The experiment was arranged in a randomized block design with four replications. The evaluations were carried out 15 and 30 days after planting (DAP) and 30, 60, 90, 120, 150 and 180 days after harvest (DAH). The leaves were cut using the same standardized weight and leaf area. To determine the content of chlorophyll and carotenoids, samples of 0.2 g of fresh leaf tissue were prepared and the extracts were filtered, and spectrophotometer readings were conducted (663 and 645 nm for chlorophyll a and b, respectively). The application of glyphosate and sulfumeturon methyl at larger doses were found to interfere in the carotenoid content, when compared with the control. The highest dose of glyphosate significantly reduced the content of chlorophyll and carotenoid in sugarcane, but this result was not maintained when the dose was reduced to 200 mL. The contents of chlorophyll were inversely proportional to the levels of Fe. The application of sulfumeturon methyl did not affect the levels of chlorophyll; however, the carotenoid levels were more sensitive and were reduced. The changes observed in the chlorophyll and carotenoid levels caused by the application of the herbicides may distinctly alter the metabolism of photosynthesis by absorbtion and/or conversion of energy.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-13T21:34:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) TESE_Rafael_Messias.pdf: 2609392 bytes, checksum: 052f447897b25a7e84b4e23835f3905b (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-15T17:28:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 TESE_Rafael_Messias.pdf: 2609392 bytes, checksum: 052f447897b25a7e84b4e23835f3905b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-15T17:28:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE_Rafael_Messias.pdf: 2609392 bytes, checksum: 052f447897b25a7e84b4e23835f3905b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2011-04-07 Historicamente, os objetivos dos esforços agronômicos tem se focado na produtividade, através do uso de fertilizantes que, devido aos processos de produção, tem se tornado cada vez mais livres de micronutrientes e elementos-traço, limitando a demanda para as plantas, causando o empobrecimento dos solos, e consequentemente, limitando a qualidade das culturas. Assim, a busca por fertilizantes foliares complementares, capazes de biofortificar culturas e lidar com a deficiência de micronutrientes em plantas, tem sido objeto de vários estudos. Neste contexto, a água extraída do folhelho pirobetuminoso (água de xisto), durante o processo de pirólise para obtenção de óleo combustível e outros produtos, representa uma alternativa segura do ponto de vista ambiental. Neste estudo, a água de xisto foi caracterizada físico-químicamente e avaliou-se a segurança e potencial de sua utilização na agricultura, com ou sem enriquecimento com micronutrientes. Os resultados mostraram uma grande variedade de compostos orgânicos, nutrientes minerais e elementos-traço neste subproduto, representando uma matriz complexa que poderia ser de interesse para a nutrição e a indução do metabolismo primário e secundário das plantas. A aplicação foliar de diferentes doses de água de xisto em alface mostrou ausência de contaminantes tóxicos, indicando a sua segurança para uso na produção de alimentos. Além disso, o aumento na produtividade e em determinados nutrientes em alface, assim como a melhoria do crescimento de plantas de milho e o incremento na produtividade e qualidade de grãos, incluindo metabólitos primários e secundários, também foram observados devido à aplicação foliar de água de xisto. O enriquecimento com micronutrientes também mostrou incremento na produtividade, teor de aminoácidos, bem como no acúmulo de alguns minerais em grãos de milho. No entanto, a suplementação com micronutrientes não aumentou o teor de carotenóides, sugerindo que a água de xisto poderia ser utilizada na agricultura, sem necessidade de enriquecimento, o que representa uma alternativa adequada para fornecer nutrientes e biofortificar culturas. Historically, the aim of agronomic efforts has been focused on yield, using fertilizers that, due to the production processes, have become increasingly free of trace elements and micronutrients, limiting the demand for plants, causing soil depletion, and consequently, limiting the quality of crops. Thus, the search for foliar supplementary fertilizers, able to biofortify crops and to deal with plant micronutrient deficiency, has been the subject of several studies. In this context, the water extracted from shale rock (shale water) throughout the pyrolysis process to obtain fuel oil and other products represent an environment safety alternative. In this study, shale water was characterized physical-chemically and evaluated the security and potential of its use in agriculture delivered with or without micronutrient enrichment. The results showed a great variety of organic compounds, mineral nutrients and trace elements in this by-product, which represent a complex matrix that could be of interest for plant nutrition and induction of primary ans secondary metabolisms. The foliar application of different doses of shale water in lettuce showed an absence of toxic contaminants, indicating its security to use in food production. Furthermore, the increase on yield and in certain nutrients in lettuce as well as the improvement of maize plants growth and grains yield and quality, including primary and secondary metabolites, were also observed by the foliar application of shale water. The enrichment with micronutrients also shows improvements on yield, amino acids content as well as of some minerals accumulation in maize grains. However, micronutrient supplementation did not increase carotenoids content, suggesting that shale water could be used in agriculture without de necessity of enrichment, representing an appropriate alternative to provide nutrients and biofortify crops.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico The nutrients used for plant fertilization affect their susceptibility to insect herbivores. Among the major pests of tomato in the world is a leafminer, Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae). Thus, the aim of this study was to determine the influence of plant fertilization with calcium, sulfur, nitrogen and potassium in reproduction, growth, survival and damage of T. absoluta. This study was conducted in a greenhouse. The experimental design was randomized blocks with nine treatments and five replications. The treatments consisted of fertilization levels of deficiency and excess calcium, sulfur, nitrogen and potassium. One treatment with normal fertilization was established beyond these levels. The eggs from T. absoluta were transferred for the leaves of tomato a month after the start of the experiment. The number of surviving insects, the developmental stage of insects and the number of mines per leaf were evaluated daily. The contents of nutrients were determined in leaves of tomato. Among the nutrients studied, only the doses of sulfur and nitrogen fertilizer used in the affected T. absoluta. The reproduction of T. absoluta was lower in plants with normal fertilization, higher the mortality of larvae and these plants suffered less damage than those with nutritional deficiency. The maximum reproductive performance of T. absoluta occurred in plants with nutritional deficiency. The plants with higher levels of nutrients in leaves were less susceptible to T. absoluta. Os nutrientes utilizados na adubação das plantas afetam sua suscetibilidade aos insetos herbívoros. Entre as principais pragas do tomateiro no mundo está a traça Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae). Assim, o objetivo deste trabalho foi determinar a influência da adubação das plantas com cálcio, enxofre, nitrogênio e potássio na reprodução, desenvolvimento, sobrevivência e danos de T. absoluta. Este trabalho foi conduzido em casa de vegetação. O delineamento experimental foi em blocos casualizados com nove tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foram constituídos de níveis de adubação em deficiência e em excesso de cálcio, enxofre, nitrogênio e potássio. Além destes níveis estabeleceu-se um tratamento com adubação normal. Um mês após o início do experimento, foram transferidos ovos de T. absoluta para as folhas do tomateiro. Diariamente avaliaram-se o número de insetos sobreviventes, o estádio de desenvolvimento dos insetos e o número de minas por folha. Foram determinados os teores de nutrientes nas folhas do tomateiro. Dos nutrientes estudados apenas as doses de enxofre e de nitrogênio usadas na adubação afetaram T. absoluta. Nas plantas com adubação normal foi menor a reprodução de T. absoluta, maior a mortalidade larval e estas plantas sofreram menores danos do que aquelas com deficiência nutricional. O máximo desempenho reprodutivo de T. absoluta ocorreu em plantas com deficiência nutricional. As plantas com maiores teores de nutrientes nas folhas foram menos suscetíveis a T. absoluta.

Estevia es una planta selvática subtropical del alto Paraná, nativa del Noroeste de la provincia de Misiones en el Paraguay. Posee un potente edulcorante que llega a ser hasta 300 veces más dulce que la sacarosa y no contiene calorías. Las moléculas responsables de esta característica son glucósidos de diterpeno que se encuentran en las hojas y, cuando menos en los estadios iniciales, son sintetizados a partir del mevalonato, a través de la misma ruta del ácido giberélico. Los estudios que abordan el tema de la nutrición mineral en estevia en el mundo son escasos y se circunscriben en gran parte, a las investigaciones adelantadas en el Brasil por Malavolta y sus colaboradores en 1997. En Colombia, los estudios científicos sobre el tema se limitan a algunos resultados encontrados por la Universidad de Córdoba y Corpoica en trabajos desarrollados con nitrógeno, fósforo y potasio. Por tal motivo, el presente trabajo revisa la ruta de síntesis de los principales edulcorantes producidos por la planta, discute el importante papel que en ella juegan algunos minerales, y realiza un análisis de los aspectos nutricionales más importantes de esta planta, con base en los estudios realizados en Brasil y Colombia. Stevia is a subtropical wild plant of the upper Parana river, native of the northwest of the province of Missions in Paraguay. The plant contains a potent sweetener that is 300 times stronger than sucrose and supplies no calories. The molecules that determine this feature are diterpene glycosides, which are present in the leaves and, at least during the first stages, are synthesized from mevalonate, following the same path as gibberellic acid. Studies on mineral nutrition in stevia are scarce. They are circumscribed indeed to those conducted in Brazil by Malavolta and collaborators. In Colombia, the scientific studies about the topic are limited to some works by Universidad de Córdoba and Corpoica dealing with nitrogen, phosphorus and potassium. In this framework, the current work reviews the synthesis path of the main edulcorants produced by this plant, discusses the important role played by certain minerals in this process, and based on studies conducted in Brazil and Colombia, analyzes the most important nutritional aspects of this species.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:42:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ Amauri_Costa_da_Costa.pdf: 821830 bytes, checksum: 461372c264b8901d1eddb80605e2c297 (MD5) Previous issue date: 2010-07-06 Enzymatic browning and softening are the main changes on fresh-cut peaches. Initially we studied the combination of antioxidant molecules and protective texture control enzymatic activities of peroxidase (POD) and polyphenoloxidase (PPO), enzymatic browning and softening the flesh of peaches cv. Esmeralda, minimally processed and refrigerated. For this we tested the use of L-cysteine (Cis), L-ascorbic acid (AA) and calcium chloride (CC), alone or in combination: (i) water (control); (ii) AA+CC; (iii) Cis+CC; e, (iv) Cis+AA+CC. After treatment, the slices were packed in packages sealed with PVC film 30μm and stored for six days at 4±1ºC and 85±3 RH. The samples were evaluated under physical-chemical, enzymatic and sensory every two days. Treatment Cis+AA+CC had the highest values of L* and h°, ie was more effective in preventing browning. Treatments with L-cysteine showed a lower PPO activity and treatment Cis+AA+CC was the most effective in containing the POD activity, indicating that the best performance of this treatment is associated with lower activity of these enzymes. The sensory evaluation indicated that the treatment Cis+AA+CC was the most efficient, providing the maintenance of the sensory characteristics acceptable of fresh-cut peaches, cv. Esmeralda. In sequence was tested using ultraviolet radiation type C (UV-C) radiation as a means of increasing the conservation value of these fruits as well as to increase the synthesis of compounds of nutritional value and functional. That were applied to the following treatments: (i) fruit without UV-C, peeled, sliced and stored under refrigeration (control); (ii) fruits treated with UV-C and immediately peeled, sliced and stored under refrigeration (UV-C 0); (iii) fruits treated with UV-C and kept at room temperature 24h before processing (UV-C 24), (iv) fruits treated with UV-C and kept at room temperature 48h before processing (UV-C 48); and (v) fruit without treatment with UV-C, processed and treated with metabisulphite K (MB K). Evaluations, color (L* and hue angle), firmness, ascorbic acid and phenolic compounds, antioxidant activity and transcriptional expression of genes supposedly related to physiological changes were taken immediately after processing and every 24h for six days. The application of UV-C resulted in a significant improvement in the storage potential of the peaches. But for that to happen, it was necessary to wait 24 to 48h before processing. With this procedure there was a stimulus to the transcription of genes in the metabolism of ethylene, cell wall synthesis and oxidation of phenolic compounds. Still, there was less browning of fruits treated with UV-C, indicating that this change is not only dependent on the concentration of total phenolics and PPO activity. O escurecimento enzimático e o amolecimento são as principais alterações em pêssegos minimamente processados. Inicialmente estudou-se a combinação de moléculas antioxidantes e protetores de textura no controle da atividade das enzimas polifenoloxidase (PPO) e peroxidase (POD), do escurecimento enzimático e do amolecimento da polpa de pêssegos, cv. Esmeralda, minimamente processados e refrigerados (MPR). Para isso testou-se o uso de L-cisteína (Cis), ácido L-ascórbico (AA) e cloreto de cálcio (CC), isolados ou em combinação: (i) água (controle); (ii) AA+CC; (iii) Cis+CC; e, (iv) Cis+AA+CC. Após o tratamento, as fatias foram acondicionadas em embalagens rígidas envoltas com filme PVC 30μm e armazenadas durante seis dias a 4±1ºC e 85±3 UR. As amostras foram avaliadas sob aspectos físico-químicos, enzimáticos e sensoriais a cada dois dias. O tratamento Cis+AA+CC apresentou os maiores valores de L* e hº, ou seja, foi o mais eficaz na prevenção do escurecimento. Os tratamentos com L-cisteína apresentaram menor atividade da PPO e o tratamento Cis+AA+CC foi o mais efetivo na contenção da atividade da POD, indicando que o melhor desempenho desse tratamento está associado à menor atividade dessas enzimas. A avaliação sensorial indicou que o tratamento Cis+AA+CC foi o mais eficiente, proporcionando a manutenção de características sensoriais aceitáveis aos pêssegos MPR, cv. Esmeralda. Em sequência testou-se o uso de radiação ultravioleta tipo C (UV-C) como meio de aumentar o potencial de conservação desses frutos, assim como para aumentar a síntese de compostos de interesse nutricional e funcional. Para isso foram aplicados os seguintes tratamentos: (i) frutos sem UV-C, pelados, fatiados e armazenados sob refrigeração (AR) (controle); (ii) frutos tratados com UV-C e imediatamente pelados, fatiados e armazenados em AR (UV-C 0); (iii) frutos tratados com UV-C e mantidos 24h à temperatura ambiente (TA) antes do processamento (UV-C 24); (iv) frutos tratados com UV-C e mantidos 48h a TA antes do processamento; e (v) frutos sem tratamento com UV-C, processados e tratados com metabissulfito de K (MB K). As avaliações, coloração (L* e ângulo hº), firmeza de polpa, teor de ácido ascórbico e compostos fenólicos, atividade antioxidante e a expressão transcricional de genes supostamente relacionados às alterações fisiológicas, foram realizadas imediatamente após o processamento e a cada 24h por seis dias. A aplicação da radiação UV-C provocou uma significativa melhora no potencial de conservação dos pêssegos. Mas para que isso ocorresse, foi necessário se aguardar de 24 à 48h antes do processamento. Com esse procedimento houve estímulo à transcrição de genes do metabolismo do etileno, da parede celular e da síntese e oxidação de compostos fenólicos totais (CFT). Mesmo assim, houve menor escurecimento dos frutos tratados com UV-C, indicando que essa alteração não é apenas dependente da concentração de CFT e da atividade da PPO.

Universidade Federal de Sao Carlos Studies of marine natural products in 20 years of research have revealed a wide variety of molecules with complex structures and hitherto unknown, and potent biological activities. The aims of this study were to isolate microbial strains associated with Didemnum granulatum, to fermentate such strains for the production of crude extracts and the screening of these extracts for bioactive secondary metabolites. For the isolation of the strains, six different culture media were prepared with artificial sea water: malt extract 2% and 3%, carrot/potato, corn, oat and GPY. The strains were cultivated for 30 days in 250mL of the same culture media. The crude extracts were obtained by partition with ethyl acetate. The extracts were sent for the cytotoxic activity bioassay and analyzed by thin layer chromatography (TLC) on silica gel plate (with absorption in UV-vis). Among the 26 extracts, samples DG (M3) 6'C and DG (M3) 5'C showed potent cytotoxic activity, samples DG (B) 13, DG (M3) 1 and DG (G) 2B a moderate activity. The analysis by TLC indicated the presence of bioactive secondary metabolites in the extracts. The strains were identified as bioactive three fungal: DG (M 3) 6'C (Penicillium sp.) DG (M3) 5'C (Cladosporium sp.) DG (M3) 1 (Aspergillus sp.) And two bacterial: DG (B) 13 (Aurantimonas sp.) DG (G) 2B (Nocardiopsis sp.). These were grown on a larger scale of broth (500 mL) and extracted after 7, 14, 21 and 30 days of incubation. We carried out a cleaning process of these extracts by solid phase extraction (SPE) column of silica gel derivatized with C18 (35 mL of eluent: 100% H2O, MeOH/H2O 1:1 and MeOH 100%). The fractions generated were analyzed by HPLC-UV-MS trying to find characteristic profiles of secondary metabolites. From the DG sample (M3) 6'C (A + B), was isolated and identified the compound 13- deoxy-fomenona previously obtained by Tirilly et al. in 1983. Although this compound is not unheard of, no literature reports of studies involving bioassays cytotoxic against tumor cells and even this compound has been isolated from other species of microorganisms other than the fungus Dicyma pulvinata. Os estudos sobre produtos naturais marinhos, durante os ultimos 20 anos de pesquisa, revelaram uma grande variedade de moleculas com estruturas complexas e ate entao desconhecidas, alem de potentes atividades biologicas. Assim, os objetivos deste trabalho foram isolar linhagens de micro-organismos associadas a ascidia Didemnum granulatum, sua posterior fermentacao para a producao de extratos brutos e a analise destes extratos na busca por metabolitos secundarios bioativos. Para o isolamento das linhagens foram utilizados os seguintes meios de cultura preparados com agua do mar artificial: extrato de malte 2% e 3%, cenoura/batata, fuba, aveia e GPY. A fermentacao das linhagens foi feita em 250 mL dos mesmos meios de cultura sem agar, durante 30 dias. Os extratos brutos foram obtidos por particao com acetato de etila. Estes extratos foram enviados para bioensaio de atividade citotoxica contra celulas tumorais e analisados por cromatografia em camada delgada (CCD) em placa de silica gel (com diferentes reveladores). Dentre os 26 extratos, as amostras DG(M3) 6 C e DG(M3) 5 C apresentaram potente atividade citotoxica, as amostras DG(B)13, DG(M3)1 e DG(G)2B uma atividade moderada. As analises por CCD indicaram a presenca de metabolitos secundarios nos extratos bioativos. As linhagens bioativas foram identificadas como sendo tres fungicas: DG(M3)6 C (Penicilium sp.); DG(M3)5 C (Cladosporium sp.); DG(M3)1 (Aspergillus sp.) e duas bacterianas: DG(B)13 (Aurantimonas sp.); DG(G)2B (Nocardiopsis sp.). Estas foram cultivadas em escala maior de meio liquido (500 mL) e extraidas apos 7, 14, 21 e 30 dias de incubacao. Realizou-se um processo de limpeza destes extratos por extracao em fase solida (SPE) em coluna de silica-gel derivatizada com C18 (35 mL dos eluentes: H2O 100%, MeOH/H2O 1:1 e MeOH 100%). As fracoes geradas foram analisadas por CLAE-UV-EM buscando-se encontrar perfis caracteristicos de metabolitos secundarios. A partir da amostra DG(M3) 6 C (A+B), foi isolado e identificado o composto 13-desoxi-fomenona, previamente obtido por Tirilly et al. em 1983. Apesar deste composto nao ser inedito, nao ha relatos na literatura de estudos envolvendo bioensaios citotoxicos contra celulas tumorais e nem mesmo deste composto ter sido isolado de outras especies de microrganismos que nao seja do fungo Dicyma pulvinata.

Stevia rebaudiana Bert. es una planta selvática subtropical nativa de Paraguay, que posee un potente edulcorante de hasta 300 veces más dulce que la sacarosa y no tiene calorías. Las moléculas responsables de esta característica son glucósidos de diterpeno, presentes en hojas y sintetizados, al menos en los estados iniciales, usando la misma ruta de síntesis del ácido giberélico, en la que el ácido shiquímico, da origen a muchos compuestos aromáticos. El acetato es el precursor de los terpenos o isoprenoides por la ruta del acetato-mevalonato, donde se encuentran los esteviósidos, aunque en este artículo se discute una ruta alternativa. La presente actualización pretende aportar algunas herramientas para el entendimiento de las principales rutas de síntesis de los glucósidos de esteviol. Stevia rebaudiana Bert. is a subtropical wild plant of Paraguay , that possesses a potent sweetener up to 300 times higher than sucrose and has no calories. The molecules responsible for these characteristics are diterpen glycosides, found in leaves and synthesized at least, at initial states, which use the same pathway of the gibberellic acid in which the shiquimic acid gives origin to many aromatic compounds. The acetate is the precursor of the terpens or isoprenoids through the acetate-mevalonate pathway, where steviosides are found. Although in this article, an alternative route is discussed. This updating pretends to contribute tools for the understanding of the main pathways of steviol glycosides synthesis.

Basil is mostly grown, in Brazil, by small farmers to sell the leaves. Climate factors play an important role on the development of medicinal, aromatic and condiment plants and on the production of active ingredients. This study analyzed the production of biomass and essential oil of basil (Ocimum basilicum L.) grown in different seasons, growth environments and fertilizations in Uberlândia, MG. Two experiments were done, the first one from September to October 2008 (season 1) and the second one from February to May 2009 (season 2). The experimental design was completely randomized, as a 2 x 2 factorial, two growth environments (protected environment and field) and two fertilization types (mineral and organic), and five repetitions. The planting space was 60 cm between rows and 30 cm between plants. Harvest was done on November 19 2008 and on May 20 2009.The variables analyzed were plant height, leaf length and width, fresh and dry matter mass, essential oil yield and composition. Plant height was greater on season 2, with average of 58.3 cm comparing the two seasons and growth environments. Significant interaction was found between season and growth environment for the variables plant height, fresh leaf mass and essential oil yield of dry leaves. Basil grown in the months of February to May 2009, in protected environment, favored culture development, production and essential oil yield. O manjericão é cultivado, no Brasil, principalmente por pequenos produtores que visam à comercialização de suas folhas. Fatores climáticos têm grande influência sobre o desenvolvimento das plantas medicinais, aromáticas e condimentares e sobre a produção de princípios ativos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a produção de biomassa e óleo essencial de manjericão (Ocimum basilicum L.) cultivado em diferentes épocas, ambientes de cultivo e tipos de adubação. O experimento foi conduzido no município de Uberlândia, MG. Realizou-se dois experimentos, o primeiro nos meses de setembro a novembro de 2008, (época 1), e o segundo de fevereiro a maio de 2009, (época 2). O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2 x 2, com cinco repetições, sendo dois ambientes de cultivo (ambiente protegido e campo) e dois tipos de adubação (mineral e orgânica). O espaçamento utilizado foi 60 cm entre linhas e 30 cm entre plantas. As colheitas foram realizadas no dia 19/11/2008 e no dia 20/05/2009. As variáveis analisadas foram altura da planta, comprimento e largura de folha, massa fresca e seca de folhas, rendimento e composição de óleo essencial de manjericão. Comparando-se as duas épocas e os dois ambientes de cultivo, os resultados mostraram que a altura das plantas foram maiores na época 2, apresentando média de 58,3 cm. Houve interação entre a época e o ambiente de cultivo, para as variáveis altura de planta, massa fresca de folhas e rendimento de óleo essencial em folhas secas. O manjericão cultivado nos meses de fevereiro a maio de 2009, em ambiente protegido, favoreceu o desenvolvimento da cultura, a produção e o rendimento de óleo essencial. Mestre em Agronomia

Estevia es una planta selvática subtropical del alto Paraná,nativa del Noroeste de la provincia de Misiones en el Paraguay.Posee un potente edulcorante que llega a ser hasta 300 vecesmás dulce que la sacarosa y no contiene calorías. Las moléculasresponsables de esta característica son glucósidos de diterpenoque se encuentran en las hojas y, cuando menos en los estadiosiniciales, son sintetizados a partir del mevalonato, a través dela misma ruta del ácido giberélico. Los estudios que abordanel tema de la nutrición mineral en estevia en el mundo sonescasos y se circunscriben en gran parte, a las investigacionesadelantadas en el Brasil por Malavolta y sus colaboradores en1997. En Colombia, los estudios científicos sobre el tema selimitan a algunos resultados encontrados por la Universidad deCórdoba y Corpoica en trabajos desarrollados con nitrógeno,fósforo y potasio. Por tal motivo, el presente trabajo revisa laruta de síntesis de los principales edulcorantes producidos porla planta, discute el importante papel que en ella juegan algunosminerales, y realiza un análisis de los aspectos nutricionales másimportantes de esta planta, con base en los estudios realizadosen Brasil y Colombia.

Despite the importance of Artemisia annua L. as the only source of the anti-parasitic drug artemisinin, little is known on the effects of biotic and abiotic stress on artemisinin accumulation. Water deficit is the most limiting factor on plant growth, however it can trigger secondary metabolite accumulation, depending on the plant growth stage and intensity. A. annua cultivated in growth chambers was submitted to five water deficit treatments (watered, 14, 38, 62 e 86 hours without irrigation). Water deficits of 38 and 62 hours (Yw = -1.39 and -2.51 MPa, respectively) increased leaf artemisinin content, but only 38 hours led to a significant increase in both leaf and plant artemisinin (29%), with no detriment to plant biomass production. The other treatments had no effect on, or decreased artemisinin accumulation. A. annua plants tolerated well water deficit treatments, including the most severe water deficit applied (Yw -3.97 MPa or 86 hs without irrigation) and recovered their turgor pressure after rehydration. These results suggest that moderate water deficit prior to harvesting the crop may not only reduce time and costs in drying the crop, but can also induce artemisinin accumulation, both of which increase crop profit margins. Results also suggest that artemisinin could be part of A. annua chemical system of defense against water deficit. A despeito da importância da Artemisia annua L. como a única fonte da droga anti-parasitária artemisinina, muito pouco é sabido sobre o papel dessa molécula em plantas sob estresses biótico e abiótico. A deficiência hídrica é o principal fator limitante no crescimento vegetal, mas pode induzir a acumulação de metabólitos secundários, dependendo da intensidade e fase de desenvolvimento da planta. Plantas de A. annua cultivadas em câmaras de crescimento foram submetidas a cinco tratamentos (plantas irrigadas e com 14, 38, 62 e 86 horas sem irrigação). Deficiências hídricas de 38 e 62 horas (Yw = -1.39 e -2.51 MPa, respectivamente) aumentaram o conteúdo foliar de artemisinina, mas somente a deficiência hídrica de 38 horas induziu um aumento significativo da molécula em folhas (29%) e planta inteira, sem afetar o acúmulo de biomassa. Os outros tratamentos não afetaram significativamente o conteúdo de artemisinina. As plantas de A. annua apresentaram uma boa tolerância a deficiência hídrica, incluindo o tratamento mais severo (Yw -3.97 MPa ou 86 h sem irrigação) e recuperaram a pressão de turgor após a reidratação. Estes resultados sugerem que uma deficiência hídrica moderada imediatamente antes da colheita de A. annua pode não somente reduzir o tempo e os custos de secagem da cultura, mas também induzir ao acúmulo de artemisinina, condições que, conjuntamente, são benéficas para o cultivo commercial da espécie. Finalmente, estes resultados sugerem que a artemisinina pode ser parte do sistema químico de defesa da A. annua contra a deficiência hídrica.

El cultivo de células vegetales ha surgido como una alternativa para la obtención de metabolitos de alto valor agregado, producidos en las plantas en bajas concentraciones y para los cuales, no existen procesos de síntesis química conocidos; sin embargo, para la implementación de esta tecnología es necesario el desarrollo de estrategias que permitan incrementar la productividad de los cultivos in vitro. En este trabajo se discuten diferentes alternativas planteadas para lograr este objetivo: en la primera parte se presentan las formas para obtener líneas celulares sobreproductoras, abordando las estrategias clásicas de selección y la ingeniería genética; posteriormente se discuten los efectos que sobre el crecimiento y la producción de metabolitos secundarios pueden tener la composición química del medio de cultivo y las condiciones físicas en las que se conduce el proceso; finalmente, se presenta la elicitación como alternativa para inducir la síntesis de metabolitos secundarios en cultivos de células vegetales. The strategy of plant cell culture has become an alternative for the production of high value metabolites that are normally produced in low levels in plants and for which there is not chemical synthesis processes known. However, for the implementation of this technology it is necessary to develop strategies that let us improve the productivity of the in vitro cultures. In this work, different alternatives in order to fulfill that objective are presented: in the first part, the strategies to obtain overproducer cell lines are discussed, showing the clasic strategies for cell line selection and genetic engineering as alternatives; after that, the efect over the growth and secondary metabolite productition of the chemical medium composition and physical conditions of the process are reviewed; finally, the elicitation is presented as an alternative to induce the synthesis of secondary metabolites in plant cell cultures.

Effects of homeopathic drugs Sulphur and Arsenicum album in growth variables and essential oil content of mint are analyzed. Four homeopathic dinamizations (6, 12, 24 and 30CH) were used for both drugs in the centesimal scale (CH=centesimal hahnemannian), besides control (water). Treatments were conducted in greenhouse and homeopathic drugs applied weekly (250 mL vase-1) for 98 days. Plant height, root system's dry mass, shoot's dry mass and essential oil content were determined. Among the tested homeopathy drugs, Sulphur increased values of fresh and dry biomass more than Arsenicum album. Plant height increased by the two drugs and their respective dinamizations. Whereas Sulphur inhibited dry biomass production, except 6CH dinamization, it increased substantially mint plant's essential oil content. Arsenicum album presented the same behavior as Sulphur drug, with the difference that it increased the fresh biomass in 24 and 30CH dinamizations. Results suggest that Sulphur and Arsenicum album modify plant metabolism, especially by increasing secondary metabolism as occurs with essential oil contents. Este trabalho teve como objetivo analisar o efeito dos medicamentos homeopáticos Sulphur e Arsenicum album em algumas variáveis de crescimento e teor de óleo essencial da menta (Mentha arvensis L.). Utilizaram-se, para ambos os medicamentos, quatro dinamizações homeopáticas (6, 12, 24 e 30CH) na escala centesimal (CH=centesimal hahnemanniana), além do controle (água) para os dois medicamentos. Os tratamentos foram conduzidos em casa-de-vegetação, e os medicamentos homeopáticos aplicados semanalmente (250 mL vaso-1) durante 98 dias. Foram determinados: altura das plantas, massa seca do sistema radicular, massa fresca e seca da parte aérea e teor de óleo essencial. Dentre as homeopatias testadas, o Sulphur proporcionou maiores valores de biomassa fresca e seca do que a homeopatia Arsenicum album. A altura das plantas foi incrementada por ambos os medicamentos e suas respectivas dinamizações. O Sulphur inibiu a produção de biomassa seca, com exceção da dinamização 6CH, e aumentou substancialmente o teor de óleo essencial nas plantas de menta. O medicamento Arsenicum album apresentou o mesmo comportamento do medicamento Sulphur, com a diferença de que este incrementou a biomassa fresca nas dinamizações 24 e 30CH. Os resultados sugerem que os medicamentos Sulphur e Arsenicum album modificam o metabolismo das plantas, especialmente aumentando o teor de metabólicos secundários como o teor de óleo essencial.

Brazil has the most diversified flora in the world concerning terrestrial plants, with about 45,000 species of superior plants, which correspond to almost 22% of all known vegetable species of the planet. In that great patrimony is worth emphasizing the importance of the chemical diversity of the biosynthetic secondary metabolites of these plants, which have recently arisen great interest of the pharmaceutical industry hoping to discover life-saving property drugs as well as new raw materials for the industry in general. In that scenery, the phytotherapy has revived as a therapeutic option well accepted and accessible in different countries, including Brazil. However, the vast majority of Brazilian medicinal plants heritage along with its usage, chemical, toxicological, pharmacological properties lack of appropriate assessment. It is important to fully investigate them all in order to prevent any possible mutagenic and/or other risks related to it. In that context, the present work aims at the study of barks and leaves of three native species of the popularly known as quina which is used in traditional medicine: Strychnos pseudoquina A. St.-Hil., Loganiaceae family; Coutarea hexandra (Jacq.) K. Schum and Bathysa cuspidata (A.St.-Hil.) Hook., both of the Rubiaceae family. That study carried out phytochemistry prospection through Thin Layer Chromatography (TLC) of gel silica and through High- performance Liquid Chromatography (HPLC), as well as the quantitative analysis of groups of potentially active secondary metabolites, so as to compare the chemical composition among the species, and also aid in the identification of the respective vegetable drugs. Another appraised aspect was the mutagenic action of the extracts using Ames Test assay of reverse genic mutation in Salmonella typhimurium. Once the investigated vegetable species belong to botanical genus that are bearers of active alkaloids, the presence of the natural occurring products quinine and strychnine, obtained from commercial samples, was investigated in the extracts, being appraised also as to the mutagenic potential. The results obtained by the phytochemistry prospection showed certain similarity among the groups of secondary metabolites found in the appraised species. Among barks and leaves of the three vegetable species differences were detected in the chemical composition. By the quantification of total polyphenolics, proanthocyanidins and flavonoids variation can be verified in the chemical content of them in the different species. The species B. cuspidata and C. hexandra did not present mutagenic potential in leaves and barks when confronted with TA 100 and TA 98 strains. For the species S. pseudoquina, barks of the stem did not show mutagenic action while the extracts of leaves presented mutagenic potential for TA100 and TA98 strains in the used doses. There was no evidence of the presence of the alkaloids quinine and strychnine in the extracts through TLC. Standards of these alkaloids did not present mutagenic potential but cytotoxicity in high doses. Due to the fact that the popular use of these three species the bark constitutes the most employed part, the mutagenicity absence demonstrated by the Ames test for that pharmacogene is a subsidy for the establishment of the safety of these vegetable drugs. The use of leaves of S. pseudoquina requests caution and should be banned since further studies will be necessary to evaluate that mutagenic potential. O Brasil tem a flora mais diversa do mundo quanto a plantas terrestres, com cerca de 45.000 espécies de plantas superiores, que equivale a quase 22% de todas as espécies vegetais conhecidas do planeta. Nesse grande patrimônio, vale ressaltar a importância da diversidade química dos metabólitos secundários biossintetizados pelas plantas, a qual tem despertado grande interesse da indústria farmacêutica visando a descoberta de novos fármacos. Nesse cenário, a fitoterapia tem ressurgido como opção medicamentosa bem aceita e acessível em diferentes países, entre esses o Brasil. No entanto, grande parte das plantas medicinais da flora nativa brasileira consumida na medicina popular apresenta poucas informações sobre suas propriedades química, farmacológica e toxicológica. No emprego de plantas medicinais, faz-se importante a prevenção de possíveis riscos mutagênicos relacionados a compostos presentes nos vegetais, para minimizar a sua exposição ao homem. Nesse contexto, insere-se o presente trabalho, que visou o estudo de cascas e folhas de três espécies nativas do Brasil, conhecidas popularmente como quina e usadas na medicina tradicional, a saber: Strychnos pseudoquina A. St.-Hil., família Loganiaceae; Coutarea hexandra (Jacq.) K. Schum e Bathysa cuspidata (A.St.-Hil.) Hook., ambas da família Rubiaceae. Esse estudo realizou a prospecção fitoquímica por Cromatografia em Camada Delgada (CCD) de sílica gel e por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), como também, a análise quantitativa de grupos de metabólitos secundários potencialmente ativos, de forma a comparar a composição química entre as espécies, e também auxiliar na identificação das respectivas drogas vegetais. Outro aspecto avaliado foi a ação mutagênica dos extratos utilizando Teste de Ames ensaio de mutação gênica reversa em Salmonella typhimurium. Por se tratarem de espécies vegetais pertencentes a gêneros botânicos reconhecidamente portadores de alcalóides ativos, a presença dos produtos naturais quinina e estricnina, obtidos de amostras comerciais, foi investigada nos extratos, sendo também avaliados quanto ao potencial mutagênico. Os resultados obtidos pela prospecção fitoquímica mostraram certa semelhança entre os grupos de metabólitos secundários encontrados nas espécies avaliadas. Entre as cascas e folhas das três espécies vegetais foram detectadas diferenças na composição química. Pela quantificação de polifenóis totais, proantocianidinas e flavonóides pode-se verificar variação no conteúdo químico dos mesmos, nas diferentes espécies. A espécie B. cuspidata e C. hexandra não apresentaram potencial de mutagenicidade para as folhas e cascas frente às cepas TA 100 e TA 98. Já para a espécie S. pseudoquina, as cascas do caule não mostraram ação mutagênica, enquanto os extratos das folhas apresentaram potencial mutagênico para as linhagens TA100 e TA98 nas doses utilizadas. Não foi evidenciada, por CCD, a presença dos alcalóides quinina e estricnina nos extratos. Padrões destes alcalóides não apresentaram potencial mutagênico, mas citotoxicidade em doses elevadas. Contudo, como no uso popular dessas três espécies, as cascas constituem a parte mais empregada, a ausência de mutagenicidade demonstrada pelo teste de Ames para esse farmacógeno é um subsídio para o estabelecimento da segurança dessas drogas vegetais. O uso de folhas de S. pseudoquina requer cautela, devendo ser proscrito e estudos mais aprofundados serão necessários para avaliar esse potencial mutagênico.

Tesis doctoral realizada en el Instituto de Biología Molecular y Celular de Plantas. Universidad Politécnica de Valencia, Los fenilpropanoides constituyen un grupo de metabolitos secundarios producidos y utilizados por las plantas como parte de la respuesta defensiva tanto constitutiva como inducible. Un gran número de ellos están implicados en la resistencia frente a la enfermedad a diferentes niveles: señalización (ácido salicílico), agentes antimicrobianos (fitoalexinas), y endurecimiento de la pared celular (lignina). Las amidas derivadas del ácido hidroxicinámico (HCAAs) son un conjunto de metabolitos, pertenecientes al grupo de los fenilpropanoides, que desempeñan un importante papel en la defensa de las plantas frente a patógenos y predadores. Las HCAAs se forman a partir de la condensación de tioésteres de hidroxicinamoil-CoA con feniletilaminas, tales como la tiramina. El último paso en la biosíntesis de las HCAAs está catalizado por el enzima tiramina hidroxicinamoil transferasa (THT). En la presente tesis se muestra la identificación y el estudio de cuatro HCAAs, p-cumaroildopamina, feruloildopamina, p-cumaroiltiramina y feruloiltiramina, asociadas a la infección de tomate con la bacteria Pseudomonas syringae pv. tomato. Su identificación y caracterización estructural se han llevado a cabo mediante técnicas de cromatografía líquida de alta resolución y espectrometría de masas (HPLC-MS). Se ha analizado la posible implicación del ácido salicílico y del etileno en la inducción patogénica de dichas moléculas y del enzima responsable de su biosíntesis (THT). Además, se ha estudiado la actividad antioxidante y antibacteriana in vitro de las cuatro HCAAs identificadas. Por último, se han obtenido líneas transgénicas de Arabidopsis thaliana y de tomate que sobreexpresan el gen de la THT, y se han analizado los perfiles cromatográficos de dichas líneas.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-30Bitstream added on 2014-06-13T18:48:46Z : No. of bitstreams: 1 fernandes_fa_me_botfca.pdf: 465475 bytes, checksum: 063d7036f70ae424700b2f7818e66ed8 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A manutenção dos resíduos vegetais na superfície do solo é essencial para a sustentabilidade do sistema plantio direto, para tanto, é fundamental a seleção de coberturas vegetais com elevada capacidade de produção de massa seca, principalmente, em regiões onde as condições climáticas são favoráveis à rápida decomposição, além do estabelecimento de manejos da palhada que minimizem esse efeito, visando à proteção superficial do solo, formação de palhada, bem como reciclagem de nutrientes, com impacto direto nos atributos químicos do solo e na resposta das culturas subseqüentes ou em rotação. Assim o objetivo do trabalho foi avaliar a persistência da palhada de espécies de cobertura em função da aplicação de silicato e calcário e a resposta da cultura do feijão em sucessão em semeadura direta. O delineamento experimental utilizado foi em blocos ao acaso disposto em um esquema fatorial 3x5, com quatro repetições. O trabalho foi desenvolvido em estufa, no Departamento de Produção Vegetal, pertencente à Faculdade de Ciências Agronômicas – UNESP, Campus Botucatu. As parcelas foram constituídas por cinco doses de silicato de cálcio, calculadas em função da quantidade necessária para elevar a saturação por bases a 70%, dispostas da seguinte forma: 1 – 0 de silicato cálcio e 100% de calcário; 2 - 25% de silicato de cálcio e 75% de calcário; 3 – 50% de silicato de cálcio e 50% de calcário; 4 – 75% de silicato de cálcio e 25% de calcário; 5 - 100% de... The maintenance of residual vegetation on the surface of the soil is essential for the sustainability no till, therefore, is essential the selection of covering vegetation with an increase capacity for the production of dry mass, especially in regions where climate conditions are favorable for rapid decomposition, along with establishing ways to handle the ground cover to minimize this effect, aiming for the protection of the soil surface, ground cover formation, as well as nutrients recycling, with direct impact on chemical properties of the soil and on response to subsequent or rotation crop. Therefore, the objective of the research was to evaluate the continued usage of the ground cover species as in function of the correction of the soil with silicate and lime and the response of the beans crop in succession in the direct plantation system. The experimental outlined used was the random blocks arranged in a 3x5 factorial design, with four replication. The experiment was developed in greenhouse, in the Department of Agriculture, of the Faculdade de Ciências Agronômicas – FCA – UNESP, Campus Botucatu. The plots were composed by five doses of calcium silicate, calculated as a function of the quantity necessary to increase base saturation to 70%, arranged as follows: 1 – 0% calcium silicate and 100% lime; 2 – 25% calcium silicate and 75% lime; 3 – 50% calcium silicate and 50% lime; 4 – 75% calcium silicate and 25% lime; 5 – 100% calcium silicate and 0% lime and three species of cover crops: millet (Pennisetum americanum L) beard grass (Brachiaria brizantha) pigeon pea (Cajanus cajan L.). The lime used was a mixture of CaCO3 and MgCO3 PA, so as to obtain the same proportions of Ca and Mg, both in the lime and in the silicate, this way varying, only the silicon content in each treatment. The parameters analyzed were: content and accumulation of nutrients ...(Complete abstract, click electronic access below)

O objetivo deste trabalho foi determinar a produção de folhas, caules, inflorescências, relação folha/caule e rendimento de óleo essencial, em função de épocas de colheitas, nas condições da Amazônia Ocidental brasileira. Made available in DSpace on 2019-07-02T00:37:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PRODUCAODEFOLHASCAULES....pdf: 13823349 bytes, checksum: ebceb3a58cdc4419d344eed04a496e0d (MD5) Previous issue date: 2006 Monografia (Graduação) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus. Orientador: Dr. Francisco Célio Maia Chaves.

Los metabolitos secundarios producidos por las plantas están involucrados en una multitud de interacciones ecológicas, entre ellas las interacciones planta-planta, planta-microorganismos, planta-animales y planta-insectos. Además de protegerlas de algunos patógenos, también ayudan a las plantas a sobrevivir en condiciones medioambientales adversas. Dadas sus características medicinales e industriales, dichos metabolitos también son de gran importancia para el ser humano. Sin embargo, el estudio de estos compuestos en plantas tropicales a nivel bioquímico, molecular y genético, es aún limitado. Dentro de las estrategias de bioprospección de la diversidad de muchos países tropicales como Colombia, la exploración y explotación del metabolismo secundario de plantas constituye un reglón importante. En el presente trabajo se reporta una metodología experimental basada en el aislamiento de ADN genómico de plantas colectadas en campo, y el uso de cebadores degenerados empleados en la amplificación en cadena de la polimerasa (PCR) para identificar genes que codifican enzimas decarboxilasas dependientes de piridoxal. Estas enzimas están involucradas en la vía metabólica para la síntesis de alcaloides. Basados en la homología de secuencias reportadas en las bases de datos, se diseñaron cebadores degenerados para amplificar secuencias conservadas de estas enzimas en 18 familias de plantas diferentes. Se obtuvieron seis secuencias obtenidas de plantas del género Piper sp. Este reporte demuestra el potencial uso de ésta y otras metodologías actuales para aumentar el conocimiento, entendimiento y exploración del metabolismo secundario de las plantas de Colombia. Palabras clave: bioprospección, metabolismo secundario, cebadores degenerados, microarreglos, decarboxilasas dependientes de piridoxal. Plant secondary metabolites play an important role in plant-plant, plant-microorganisms and plant-insect interactions. They also protect the plants against stress environmental conditions. Plant secondary metabolites are also very important to humans due to their nutritional, pharmaceutical, medical and industrial properties. However, the secondary metabolism of tropical plant species still remains very poorly understood and characterised at the biochemical, molecular and genetic level. Within bioprospection programs to study the biodiversity of Colombian plants, the secondary metabolism is a very important target. Here we present an experimental methodology based on genomic DNA isolation from field collected plants, and the use of degenerate primers to PCR amplify genes that encodes pyridoxal-dependent enzymes which are involved in the alkaloids biosynthesis. Based on sequence homology we designed degenerate primers to amplify conserved gene sequences from 18 different plant families. Six putative tydc/tdc decarboxylases sequences were obtained from plants of the Piper genus. This report shows the usefulness of the DNA collection and PCR-based methodology e to increase the understanding and exploration of the secondary metabolism of Colombian plants. Key words: Bioprospection, secondary metabolism, degenerate primer, microarrays, PLP-dependent decarboxylases.

Los alcaloides indol terpenoicos (TIA) son metabolitos secundarios de importancia medicinal por sus propiedades como agentes anticancerígenos, entre otras. Sin embargo, su explotación en la industria farmacéutica se ha visto limitada, ya que la acumulación de estos compuestos en las plantas que los producen es mínima. Dichos alcaloides son biosintetizados por la vía del shikimato y de los terpenoides, los cuales proveen los precursores: secologanina y triptamina, respectivamente. La secologanina es sintetizada vía terpenoides, y estudios preliminares sugieren que es sintetizada vía del 2-C-metil-D-eritrol-4-fosfato (MEP) y no vía acetato/ácido mevalónico. Se cree que la secologanina es una de las moléculas limitantes en la biosíntesis de TIA. En el presente estudio se cuantif ican y evalúan por HPLC los niveles de este compuesto y sus predecesores iridoides, ácido logánico y secologanina, en diferentes partes de la planta medi­cinal Catharanthus roseus. La distribución de estos iridoides varía según el tejido analizado, encontrándose mayor acumulación de secologanina en el segundo par de hojas de la planta. Los niveles de transcriptos de las enzimas involucradas en los pasos tempranos de la vía de los iridoides fueron monitoreados también en diferentes tejidos usando la técnica transferencia de ARN, Northern blots. Adicionalmente, las plantas se elicitaron con jasmonato de metilo (MeJA), con el fin de estudiar el efecto de esta molécula en la trans­cripción de genes que codifican enzimas involucradas en los pasos tempranos de la vía de los iridoides. Los resultados obtenidos en este estudio sugieren que la vía del MEP puede estar más activa que la vía del acetato/ácido mevalónico en tejidos aéreos jóvenes de la planta. Adicionalmente, es evidente que el MeJA afecta la biosíntesis de TIA estimulando la transcripción de diferentes genes. Palabras clave: metabolismo secundario, alcaloides indol terpenoicos, jasmonato de metilo, vía del mevalonato, secologanina. Terpenoid indole alkaloids (TIA) are of pharmaceutical importance, however the industrial use of these compouds is very limited because its accumulation is very low in plant tissues. TIA are derived f rom the shikimate and terpenoid pathways, which supply secologanin and tryptamine, the indole and iridoid moieties, respectively. Secololganin is a terpenoid which is belived to be synthesised the MEP pathway rather than by the acetate/mevalonic acid pathway. Secologanin is thought to be a limiting molecule in the biosynthesis of TIAs. Levels of loganic acid, loganin and secologanin were measured by HPLC using tissue derived from different parts of Catharanthus roseus plants. Higher levels of secologanin were found in second pair of leaves. Transcript levels of genes encoding enzymes involved in the early steps of the iridoid pathway were also monitored by northern blots of RNA f rom C. roseus plants. The effect of the elicitor molecule methyl jasmonate in the transcription of genes was also studied. The results obtained in the present work suggest that in young aerial tissues of the plant, the MEP pathway could be more active than the acetate/mevalonic acid pathway. Moreover, there is a clear effect of MeJA in the transcription of the genes studied. Key words: Secondary metabolism, terpenoid indol alcaloids, methyl jasmonate, mevalonate pathway, secologanin.

Se desarrolla un protocolo para la obtención y establecimiento de suspensiones celulares de E. cinerea. La concentración de las hormonas 2,4 D Y BAP tienen un efecto significativo en la formación de callos friables de E. cinerea, obteniendo una respuesta periódica en la formación de callos friables con respecto a la concentración de las hormonas. Puede obtenerse hasta un 90% de formación de callos friables con varias combinaciones hormonales; primero, con concentraciones alrededor de 3,0 mg/L de 2,4 D Y 1,0 mg/L de BAp, y segundo, alrededor de 6,0 mg/L de 2,4 D Y1,0 mg/L de BAP. A partir de los callos anteriores, se obtienen suspensiones celulares con un activo crecimiento celular, con tiempos de duplicación entre cuatro y siete días, y alcanzando densidades celulares de 15 g células secas/L. Las suspensiones de E. cinerea ofrecen una herramienta importante para la propagación de esta especie vía embriogénesis somática, estudio de biorreactores, producción de metabolitos secundarios y procesos de biotransformación. A protocol is developed for obtaining and establishment of E. cinerea cell suspension. The concentration of hormones 2,4 D and BAP have a significant effect in the formation of friable callus of E. cinerea, obtaining a periodic answer in the formation of friable callus with regard to hormones concentration. It can be obtained until 90% of formation of friable callus in several hormone combinations, first with concentrations around 3,0 mg/L of 2,4 D and 1,0 mg/L of BAP; and second, around 6,0 mgIL of 2,4 D and 1,0 mg/L of BAP. Using the last callus, cell suspensions are obtained with an active cellular growth, with times of duplication between 4 and 7 days and obtaining cell densities of 15 g of dry cells/L. The suspensions of E. cinerea offer an important tool for the propagation of this specie by somatic embryogenesis, bioreactors study, production of secondary metabolites and biotransformation processes.