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Este Trabajo de Fin de Grado presenta el proceso de diseño y fabricación de férulas mediante impresión 3D para inmovilización de antebrazo. El modelado de la férula se realizará mediante parametrización, siendo esta una de sus principales características, cumpliendo con el objetivo propuesto de que puedan adaptarse a cualquier individuo. Para ello, se recopilarán una serie de medidas del antebrazo de un paciente, para introducirlas en diversos programas (Excel y Autodesk Inventor), que harán posible que la férula se ajuste perfectamente al paciente. Este proyecto comienza con la introducción y contextualización del estado de la técnica. De esta forma, se presentan las siguientes cuestiones: nociones históricas sobre la inmovilización de miembros para su recuperación, ideas y conocimientos recopilados Para la correcta realización de esta tarea se ha contado con el asesoramiento recibido por expertos en la materia. Por último, se expondrá detalladamente el proceso completo de obtención de una férula impresa en 3D totalmente personalizada, funcional y testada. El objetivo final de este trabajo consiste en desarrollar una técnica de inmovilización, accesible a todo el mundo gracias a la parametrización y que proporcionará inminentes mejoras, las cuales se mencionarán posteriormente, respecto de las escayolas tradicionales. Beneficios como reducción de peso, ventilación, comodidad, ajuste sencillo e incluso menores costes respecto a las soluciones que ofrecen las ortopedias. This final Degree Project presents the design procces and manufacturing of splints through 3D printing for forearm inmobilitazion. The splint modeling will be done by parameterization, being one of its mains characteristics,, fulfilling with the porporsed objecive theat it can suit to every individual. For they, it will be collected a series of forearm measurements of a patient, to introduce them to various programs (Excel and Autodesk Inventor), that will make posible the perfect fit of the splint to the patient. This Project begins with the introduction and contextualitation of the state of the técnique. In this manner, there are presented the following questions: historic notions about the members inmmobilization for their recovery, ideas and collected knowledge. For the proper performance of this task, its been taken the advice of experts in the field. The complete process of obtaining a customized, functional and tested 3D printed splint will be exposed in detail. The final and main objective of this project consists in developing an accessible inmobilization tecnique thanks to parameterization, later mentioned, that will provide imminent improvements in comparassion to traditional casts: benefits like wight reduction, ventilation, comfort, simple fit and even lower costs over other solutions offered by orthopedics.

Els enzims presenten una sèrie d’avantatges catalítiques respecte als catalitzadors químics emprats en síntesis química clàssica: especificitat, selectivitat i la possibilitat de treballar en condicions suaus de temperatura i pressió. No obstant, també presenten una sèrie de limitacions com són la baixa estabilitat i les baixes productivitats. En el present treball es combinen dues tècniques per tractar d’optimitzar les reaccions d’interès seleccionades: la immobilització i l’enginyeria de reacció. Les reaccions objectiu d’aquest treball són reaccions d’oxidoreducció centrades en la biosíntesis de molècules, de mitjà i alt valor afegit, d’alt interès industrial. En la primera part de la tesis s’ha utilitzat una alcohol deshidrogenasa (ADH99) per a la oxidació de l’alcohol chlorolactol a chlorolactona i una NAD(P)H oxidasa (NOX) com a sistema de regeneració del cofactor. La chlorolactona és un precursor per a la síntesis d’estatines les quals són fàrmacs utilitzats per a la reducció del LDL-colesterol ja que inhibeixen l’enzim encarregat de la seva biosíntesis. Ambdós enzims van ser immobilitzats eficientment en diferents suports, dels quals es van seleccionar els tres que van mostrar major activitat retinguda. Seguidament es va estudiar l’estabilitat dels derivats immobilitzats en condicions de reacció i es va determinar la càrrega enzimàtica màxim per a cada enzim. Es va descartar l’ús de la NOX immobilitzada ja que no es va millorar l’estabilitat amb cap suport. Posteriorment es van optimitzar les condicions de reacció amb un disseny experimental (DoE) amb l’ADH99 soluble però utilitzant la quantitat màxima d’ADH99 que es pot afegir a la reacció quan es fa servir el l’ADH99 immobilitzada en epoxy-agarosa-UAB M2. Finalment es va estudiar la capacitat de reutilització del derivat immobilitzat, on es va poder millorar 1.5 vegades tant el producte obtingut com el rendiment del biocatalitzador. No obstant, la millor configuració va resultar ser la utilització dels dos enzims en forma soluble. La segona part d’aquesta tesis es va centrar en la reacció d’oxidació de l’alcohol vainillínic a vanil·lina biocatalitzada per l’eugenol oxidasa (EUGO). La vanil·lina és la molècula que dona les propietats organolèptiques a la vainilla, el segon aromatitzant més car del món. La síntesi de vanil·lina via biotecnològica és d’un gran interès industrial ja que pot etiquetar-se com a natural. L’EUGO va ser immobilitzada eficientment en diferents suports dels que es van seleccionar els tres que van retenir més activitat i se’n van estudiar els mateixos paràmetres de l’apartat anterior. En aquest cas els tres derivats immobilitzats van ser utilitzats per a realitzar la reacció de síntesi, amb l’objectiu de seleccionar el més estable operacionalment. Tots els derivats van permetre ser reutilitzats 5 vegades conservant una elevada conversió en l’últim cicle. L’epoxy-agarosa-UAB M2 va ser el suport que millor estabilitat va mostrar. Els bons resultats obtinguts en el segon apartat d’aquest treball van permetre aprofundir en aquesta reacció. Pel que, en el tercer apartat, es va realitzar una optimització de les condicions de reacció des del punt de vista de millorar les mètriques del procés i també amb l’objectiu de fer el procés més sostenible ambientalment. A l’hora d’escollir les noves condicions de reacció es van tenir en compte l’activitat de la EUGO i la seva estabilitat. Ambdues condicions van ser testades en la reacció objectiu amb l’EUGO soluble i immobilitzada. En les noves condicions es va poder millorar la productivitat volumètrica 5.7 i 6.6 vegades respectivament, en comparació a les condicions prèvies. Finalment, en el reciclatge de l’enzim immobilitzat es van poder realitzar 5 cicles de reacció en les primeres condicions i 18 cicles de reacció en les noves condicions on es va poder millorar el rendiment del biocatalitzador 3.9 i 12.4 vegades respectivament. Las enzimas presentan una serie de ventajas catalíticas respecto a los catalizadores químicos empleados en síntesis química clásica: especificidad, selectividad y la posibilidad de trabajar en condiciones suaves de temperatura y presión. No obstante, también presentan una serie de limitaciones como son la baja estabilidad y las bajas productividades. En el presente trabajo se combinan dos técnicas para tratar de optimizar las reacciones de interés seleccionadas: la inmovilización y la ingeniería de reacción. Las reacciones objetivo de este trabajo son reacciones de oxidoreducción centradas en la biosíntesis de moléculas, de medio y alto valor añadido, de alto interés industrial. En la primera parte de la tesis se ha utilizado una alcohol deshidrogenasa (ADH99) para la oxidación del alcohol chlorolactol a chlorolactona y una NAD(P)H oxidasa (NOX) como sistema de regeneración del cofactor. La chlorolactona es un precursor para la síntesis de estatinas las cuales son fármacos utilizados para la reducción del LDL-colesterol puesto que inhiben la enzima encargada de su biosíntesis. Ambas enzimas fueron inmovilizados eficientemente en diferentes soportes, de los cuales se seleccionaron los tres que mostraron mayor actividad retenida. Seguidamente se estudió la estabilidad de los derivados inmovilizados en condiciones de reacción y se determinó la carga enzimática máximo para cada enzima. Se descartó el uso de la NOX inmovilizada puesto que no se mejoró la estabilidad con ningún apoyo. Posteriormente se optimizaron las condiciones de reacción con un diseño experimental (DoE) con la ADH99 soluble pero utilizando la cantidad máxima de ADH99 que se puede añadir a la reacción cuando se usa la ADH99 inmovilizada en epoxy-agarosa-UAB M2. Finalmente se estudió la capacidad de reutilización del derivado inmovilizado, donde se pudo mejorar 1.5 veces tanto el producto obtenido como el rendimiento del biocatalizador. No obstante, la mejor configuración resultó ser la utilización de las dos enzimas en forma soluble. La segunda parte de esta tesis se centró en la reacción de oxidación del alcohol vanillínico a vanillina biocatalizada por la eugenol oxidasa (EUGO). La vanillina es la molécula que da las propiedades organolépticas a la vainilla, el segundo aromatizante más caro del mundo. La síntesis de vainillina vía biotecnológica es de un gran interés industrial puesto que puede etiquetarse como natural. La EUGO fue inmovilizada eficientemente en diferentes soportes de los que se seleccionaron los tres que retuvieron más actividad y se estudiaron los mismos parámetros que en el apartado anterior. En este caso los tres derivados inmovilizados fueron utilizados para realizar la reacción de síntesis, con el objetivo de seleccionar el más estable operacionalmente. Todos los derivados permitieron ser reutilizados 5 veces conservando una elevada conversión en el último ciclo. La epoxy-agarosa-UAB M2 fue el soporte que mejor estabilidad mostró. Los buenos resultados obtenidos en el segundo apartado de este trabajo permitieron profundizar en esta reacción. Por lo que, en el tercer apartado, se realizó una optimización de las condiciones de reacción desde el punto de vista de mejorar las métricas del proceso y también con el objetivo de hacer el proceso más sostenible ambientalmente. A la hora de escoger las nuevas condiciones de reacción se tuvieron en cuenta la actividad de la EUGO y su estabilidad. Ambas condiciones fueron testadas en la reacción diana con lo EUGO soluble e inmovilizada. En las nuevas condiciones se pudo mejorar la productividad volumétrica 5.7 y 6.6 veces respectivamente, en comparación a las condiciones previas. Finalmente, en el reciclaje de la enzima inmovilizada se pudieron realizar 5 ciclos de reacción en las primeras condiciones y 18 ciclos de reacción en las nuevas condiciones donde se pudo mejorar el rendimiento del biocatalitzador 3.9 y 12.4 veces respectivamente. Enzymes have some catalytic advantages over chemical catalysts used in classical chemical synthesis: specificity, selectivity and the possibility to work under mild conditions of temperature and pressure. However, they also have some limitations such as low stability and low productivity. This work combines two techniques aiming to optimise the target reactions: immobilisation and reaction engineering. The target reactions of this work are redox reactions focused on the biosynthesis of molecules, of medium-high value, of industrial interest. In the first part of the thesis, an alcohol dehydrogenase (ADH99) was used, with an NAD(P)H oxidase (NOX) as a cofactor regeneration system, to oxidise a chlorolactol to chlorolactone. Chlorolactone is a precursor for the synthesis of statins which are drugs used to lower LDL-cholesterol by inhibiting the enzyme responsible for its biosynthesis. Both enzymes were efficiently immobilised on different supports, selecting the three that showed the highest retained activity. The stability of the immobilised derivatives under reaction conditions was studied and the maximum enzyme load for each enzyme also was determined. The use of immobilised NOX was discarded because no stability improvements were achieved with any support. The reaction conditions were optimised by design of experiments (DoE), using soluble ADH99 added at maximum loading onto an epoxy-agarose support. Finally, the reusability of the immobilised enzyme was studied, where both the total product obtained and the biocatalyst yield could be improved 1.5-fold. However, the best configuration resulted from the use of the two enzymes in soluble form. The second part of this thesis was focused on the oxidation reaction of vanillyl alcohol to vanillin catalysed by eugenol oxidase (EUGO). Vanillin is the molecule that gives vanilla its organoleptic properties. Vanillin biotechnological synthesis is of high interest industrially because it is the second most expensive flavouring in the world and the product can be labelled as natural. Similar to the previous section, EUGO was efficiently immobilised onto different supports, selecting the three that retained most activity. These supports were used to study the stability of the immobilised enzyme and the maximum EUGO load that can be immobilised. In this case, the three immobilised derivatives were used to perform the target reaction, in order to select the most stable operationally. All immobilised derivatives could be reused 5 times maintaining a high conversion in the last cycle. Epoxy-agarose-UAB M2 was the support that showed the best stability, improving the biocatalyst yield 3-fold. The encouraging results obtained in the second section of this work allowed us to deepen the study of this reaction. Therefore, in the third section, an optimisation of the reaction conditions was carried out to improve the process metrics and also aiming to make the process more environmentally sustainable. The EUGO activity and its stability were taken into account to choose the reaction conditions. Both conditions, maximum activity and maximum stability, were tested in the target reaction with soluble and immobilised EUGO. Using the new conditions, it was possible to improve the volumetric productivity 5.7 and 6.6-fold respectively, compared to the previous conditions. Finally, the reusability of the immobilised EUGO allowed us to perform 5 reaction cycles and 18 reaction cycles, with unoptimised and optimised reaction conditions respectively. This resulted in an improvement of the biocatalyst yield of 3.9 and 12.4-fold, respectively, compared to reactions with soluble enzyme under the same conditions. Universitat Autònoma de Barcelona. Programa de Doctorat en Biotecnologia

Antecedents: el traumatisme greu es considera una de les principals causes de mort, especialment entre la població jove, i una proporció important es deu a accidents de trànsit. Aquests pacients han de ser immobilitzats per evitar l’empitjorament de les lesions. És necessari un abordatge ABCDE i contemplar la biomecànica del traumatisme, lesions i possibles efectes adversos per tal d’escollir les tècniques i dispositius més indicats. Objectiu: comparar l’ús de les tècniques i dispositius d’immobilització en pacients amb risc de lesió medul·lar Metodologia: es realitza una revisió de revisions segons el model d’Arksey O’Malley guiada per les paraules clau. Es busquen revisions publicades en els últims deu anys en les bases de dades Cinhal, Cochrane Library, Scielo, ScienceDirect i PubMed. Resultats: S’identifiquen 317 articles, dels quals es seleccionen 6 després d’aplicar els criteris d’inclusió. Els estudis mostren la necessitat d’aplicar criteris d’immobilització als pacients conscients i motivar-los a l’autoextracció si en son capaços. En pacients inconscients, caldrà pressuposar una lesió medul·lar. L’assistència ha de prioritzar maniobres salvadores de vides i, un cop aplicades, iniciar amb estabilització manual i aplicació de dispositius. Les complicacions més freqüents són l’augment de la PIC, dificultat respiratòria, dolor i lesions per pressió. Davant de tot pacient traumàtic, caldrà valorar el risc-benefici de la immobilització. Conclusions: la immobilització és una prioritat un cop el pacient està estable. Quan es pugui, s’haurà d’optar per autoextracció guiada. Si cal excarcerar, serà necessària la combinació de dispositius i maniobres. Són necessaris nous estudis per determinar quins són els millors dispositius i tècniques. Antecedentes: el traumatismo grave es una de las principales causas de muerte, especialmente entre la población joven, sobre todo debido a accidentes de tráfico. Para evitar el empeoramiento de sus lesiones, estos pacientes deben ser inmovilizados; por ello, es necesario un abordaje ABCDE y contemplar la biomecánica del traumatismo, lesiones y posibles efectos adversos, a fin de escoger las técnicas y dispositivos más indicados. Objetivo: comparar el uso de las técnicas y dispositivos de inmovilización en pacientes con riesgo de lesión medular. Metodología: se realiza una revisión de revisiones según el modelo de Arksey O’Malley guiada por las palabras clave. Se buscan revisiones publicadas en los últimos diez años en las bases de datos Cinhal, Cochrane Library, Scielo, ScienceDirect y PubMed. Resultados: se identifican 317 artículos, de los cuales se seleccionan 6 después de aplicar los criterios de inclusión. Los estudios muestran la necesidad de aplicar criterios de inmovilización en los pacientes conscientes, y motivarles para la autoextracción si son capaces. En pacientes inconscientes se debe presuponer una lesión medular. La asistencia priorizará las maniobras salvadoras de vidas y, una vez aplicadas, se iniciará la estabilización manual y aplicación de dispositivos. Las complicaciones más frecuentes son el aumento de la PIC, la dificultad respiratoria, el dolor y las lesiones por presión. Ante todo paciente traumático, se valorará el riesgo-beneficio de la inmovilización. Conclusiones: la inmovilización es una prioridad cuando el paciente está estable. Cuando se pueda, se deberá optar por la autoextracción guiada. Si es preciso excarcelar, se deben combinar distintos dispositivos y maniobras. Son necesarios nuevos estudios para determinar cuáles son las mejores técnicas y dispositivos. Background: severe trauma is considered one of the main causes of death, especially among the young population, and a significant proportion of it’s related to traffic accidents. These patients should be immobilized to avoid worsening of their injuries. An ABCDE approach is needed to assess the victim. The biomechanics of trauma, injuries and possible adverse effects should be considered in order to choose the most appropriate techniques and devices. Aim: to compare the use of immobilisation techniques and devices in patients at risk of spinal cord injury. Methods: a review of reviews was conducted, according to the Arksey O'Malley method and guided by key words. A search was made for reviews published in the last 10 years in Cinhal, Cochrane Library, Scielo, ScienceDirect and PubMed. Results: 317 articles were identified, 6 of which were selected after applying the inclusion criteria. The studies show the need to apply immobilization criteria in conscious patients, and to motivate them to self-extricate if they are capable. In unconscious patients, spinal cord injury should be assumed. Life-saving interventions must be prioritised, and only once applied, manual stabilization and application of devices will be initiated. The most frequent complications are increased ICP, respiratory distress, pain and pressure injuries. With any trauma patient, it will be necessary to consider the risk-benefit of immobilization. Conclusions: immobilization is a priority once the patient is stable. When possible, guided self-extraction should be chosen. If extrication is necessary, a combination of devices and manoeuvres is required. Further studies are needed to determine the best techniques and devices.

Trabajo fin de grado. Defendido en junio de 2021. Introducción: El uso de contenciones mecánicas tiene una prevalencia elevada en la salud mental en España. Surge la necesidad de implantar el modelo High and Intensive Care para reducir su uso. Objetivos: Analizar si el uso de contenciones disminuye, y si la calidad de vida de pacientes y el nivel de satisfacción de estos, sus familiares y enfermeras se incrementan tras la implantación del modelo. Metodología: Desarrollo de un estudio cuasi-experimental en una unidad de agudos de psiquiatría. Los participantes serán pacientes hospitalizados, familiares y enfermeras de este servicio. Se compararán los resultados de ambos grupos, recibiendo el grupo-post la intervención propuesta. Beneficios: Disminuir el uso de contenciones mecánicas. Abstract: Introduction: The use of mechanical restraint has a high prevalence in mental health in Spain. Implementing the High and Intensive Care model is critical to reduce its use. Objectives: It is intended to discover if the decreased use of restraints results in an increased quality of life for patients and a greater level of satisfaction for patients, relatives and nurses after implementation. Methodology: A quasi-experimental study will be developed in an acute psychiatric unit. The participants will be hospitalized patients, their families, and the nurses of this service. The results of both groups will be compared, the post-group will receive the proposed intervention. Benefits: Reduce the use of mechanical restraints. Ordenador con navegador de Internet; Adobe Acrobat Reader 64 p. (Según el contador de la aplicación)

[ES] Los compuestos de aceites esenciales (eugenol, carvacrol, vainillina y timol) están siendo muy estudiados por sus excelentes propiedades antimicrobianas y antioxidantes para ser utilizados en tecnología de alimentos. Sin embargo, debido a sus propiedades fisicoquímicas (solubilidad, volatilidad, fuerte olor, sabor, aroma, baja estabilidad, etc), la adición directa de estos compuestos a un alimento conlleva una serie de limitaciones. Una solución a estos problemas pasaría por la inmovilización de estos compuestos bioactivos sobre nano y microestructuras. En este contexto, el presente trabajo tiene por objetivo estudiar los principales métodos y soportes para la inmovilización de componentes de aceites esenciales, para su posterior uso en la industria alimentaria. Los resultados demuestran que existen diversos tipos de soportes que pueden ser empleados para la inmovilización, siendo los más comunes los basados en polímeros, óxidos de metales y materiales cerámicos. Éstos difieren entre sí en tamaño, morfología, composición y capacidad para la funcionalización. De ellos destaca la sílice mesoporosa MCM-41 como el material más empleado, debido a su gran versatilidad y reactividad química. Respecto al método de anclado, la unión mediante enlace covalente ha demostrado ser la más eficaz. Esta revisión también demuestra que la inmovilización de aceites esenciales en soportes nano y microestructurados permite obtener compuestos biológicos compatibles con las condiciones de proceso (pH, temperatura y humedad) y ser reutilizables, adquiriendo un mayor rendimiento., [EN] Essential oil compounds (eugenol, carvacrol, vanillin, and thymol) are being widely studied for their excellent antimicrobial and antioxidant properties for use in food technology. However, due to their physicochemical properties (solubility, volatility, strong smell, taste, aroma, low stability, etc.), the direct addition of these compounds to a food entails a series of limitations. A solution to these problems would be the immobilization of these bioactive compounds on nano and microstructures. In this context, the present work aims to study the main methods and supports for the immobilization of essential oil components, for their subsequent use in the food industry. The results show that there are various types of supports that can be used for immobilization, the most common being those based on polymers, metal oxides and ceramic materials. These differ from each other in size, morphology, composition and capacity for functionalization. Among them, the mesoporous silica MCM-41 stands out as the most used material, due to its great versatility and chemical reactivity. Regarding the anchoring method, the union by covalent bond has proven to be the most efficient. This review also demonstrates that the immobilization of essential oils in nano and microstructured supports allows obtaining biological compounds compatible with the process conditions (pH, temperature and humidity) and being reusable, acquiring a higher performance..

En el presente trabajo de investigación se evaluó el efecto del pH y la inmovilización de Saccharomyces cerevisiae en la fermentación alcohólica de los azúcares contenidos en una bebida gaseosa de descarte, para la obtención de bioetanol; así como la remoción de color y la determinación de la Demanda Química de Oxigeno (DQO). Se caracterizó fisicoquímicamente la bebida gaseosa de descarte seleccionada, luego se inmovilizó Saccharomyces cerevisiae en Alginato de calcio por el método de atrapamiento. Para la fermentación alcohólica, una muestra de la bebida gaseosa de descarte fue acondicionada, es decir desgasificada, esterilizada y su pH ajustado a 4 o 5, según el tratamiento; luego depositada en un Biorreactor tipo tanque agitado de 1.4 L configurado según la norma DIN 28131. Cada Biorreactor inoculado con Saccharomyces cerevisiae con y sin inmovilización se mantuvo en condiciones anaeróbicas, temperatura ambiente y agitación lenta (80 rpm) durante 16 horas. La bebida gaseosa de descarte se caracterizó en cuanto a: pH igual a 2.5, 10 ºBrix o azucares disueltos, 15.68 g/L de glucosa por el método del DNS y una concentración de etanol igual a 0.062 g/L por el método enzimático. Se inmovilizo 10 g de Saccharomyces cerevisiae en Alginato de sodio, al 1 y 2%, obteniéndose aproximadamente 250 mL de perlas uniformes de 2 mm de diámetro, de color crema y consistencia blanda a una concentración al 2%. Mientras, se obtuvieron esferas indefinidas a una concentración al 1%. En la caracterización fisicoquímica durante la fermentación alcohólica, el pH descendió paulatinamente en todos los tratamientos hasta un valor promedio igual a 3. El contenido de azucares disueltos o ºBrix, así como la concentración de glucosa disminuyó progresivamente, principalmente en el tratamiento acondicionado a un pH 4 sin inmovilización, hasta aproximadamente 3.1 ºBrix y una concentración de glucosa restante igual a 2.47 g/L. La mayor concentración de bioetanol se produjo en el tratamiento acondicionado a pH 4 sin inmovilización, mientras que el tratamiento acondicionado a pH 5 con inmovilización produjo la menor concentración de bioetanol. Asimismo, se logró la remoción del color de la bebida gaseosa de descarte en un 70.6 % y una reducción de la DQO en un 54 % con el tratamiento acondicionado a pH 4 sin inmovilización. Con base en estos resultados se puede señalar que es posible emplear bebidas gaseosas de descarte como sustrato fermentable para Saccharomyces cerevisiae. Palabras Clave: Bebida gaseosa de descarte, Saccharomyces cerevisiae, pH, inmovilización, azucares reductores, bioetanol, color, DQO. Tesis

Uno de los principales problemas a los que se enfrentan las industrias procesadoras de zumos cítricos es el amargor debido a la presencia de limonina. Esta Tesis Doctoral se centra en el desarrollo de un proceso biotecnológico basado en la inmovilización de biocatalizadores que degraden este compuesto amargo sin alterar las características físico-químicas del zumo. A partir de estudios de tolerancia y acondicionamiento a limonoides se seleccionó la cepa de R. fascians como la más activa en la degradación de limonina. Posteriormente, se llevó a cabo la inmovilización de las células microbianas por atrapamiento en criogeles de PVA y en perlas huecas de alginato de calcio. Se comprobó su efectividad en el desamargado tanto en sistemas modelo como en zumos sintéticos y zumos naturales de naranja. También se constató que la aplicación de esta técnica no modificaba el contenido en compuestos bioactivos (compuestos fenólicos) de los zumos tratados.

Es conocida la capacidad biorremediadora de muchos microorganismos, sin embargo, es poco conocida la capacidad de éstos trabajando en consorcio, es por ello que, en la presente investigación, se presenta a Spirulina plstensis y Pseudomonas aeruginosa en consorcio con la finalidad de remover plomo en las concentraciones de 10, 20 y 30 mg/L de este metal. Se optimizó la cepa de Spirulina platensis en el medio de cultivo Hoagland utilizando fotobiorreactores tipo fed-batch y Pseudomonas aeruginosa. en medio de cultivo caldo CASO. Para ambos microorganismos se evaluó su capacidad biorremediadora en estado libre e inmovilizada en alginato de sodio, obteniéndose 83.3% de remoción del metal por parte de Spirulina platensis en estado libre, 66% de remoción para Spirulina platensis en estado inmovilizado, 69.3% de remoción por parte de Pseudomonas aeruginosa en estado libre, 71.3% de remoción para Pseudomonas aeruginosa inmovilizado, el consorcio en estado libre logró una remoción maxima de 86.5% e inmovilizada en alginato se obtuvo 78.3% de remoción. En este sentido, ambas cepas cultivadas en estado libre, inmovilizadas, solas o en consorcio, tienen el potencial de ser utilizadas en remoción de metales pesados, especialmente nitrato de plomo que fue el metal evaluado en esta investigación. The bioremediation capacity of many microorganisms is known, however, their ability to work in a consortium is little known, which is why, in the present investigation, Spirulina platensis and Pseudomonas aeruginosa. in consortium with the purpose of removing lead in the concentrations of 10, 20 and 30 mg / L of this metal. The strain of Spirulina platensis. in the Hoagland culture medium using photobioreactors and Pseudomonas aeruginosa in culture medium broth CASO. For both microorganisms, their bioremediation capacity was evaluated in the free state and immobilized in sodium alginate, obtaining 83.3% of metal removal by Spirulina platensis in free state, 66% removal for Spirulina platensis in immobilized state, 69.3% removal by Pseudomonas aeruginosa in free state, 71.3% removal for Pseudomonas aeruginosa immobilized, the consortium in the free state achieved a maximum removal of 86.5% and immobilized in alginate 78.3% removal was obtained. In this sense, both strains grown in a free state, immobilized, alone or in a consortium, have the potential to be used in heavy metal removal, especially lead nitrate, which was the metal evaluated in this investigation.

LL’objectiu principal ha estat desenvolupar noves estratègies d’immobilització que condueixin a catalitzadors heterogenitzats amb propietats catalítiques millorades. a) S’ha preparat i avaluat una nova família de derivats de cis-4-hidroxifenilprolinol suportats sobre poliestirè (PS) en la reacció tàndem entre hidroxilamines N-protegides i aldehids α,β-insaturats en batch i flux. Els nous catalitzadors immobilitzats es comparen molt favorablement respecte a les referències prèvies i proporcionen 5-hidroxiisoxazolidines com a diastereoisòmers únics, amb enantioselectivitats elevades i bons rendiments. b) S'ha preparat una isotiourea quiral immobilitzada sobre PS i s'ha aplicat a la resolució cinètica acilativa enantioselectiva de BINOL (s) monoacilats amb anhídrid isobutíric en batch i flux. S'ha registrat una alta selectivitat i una notable estabilitat del sistema catalític en les condicions de funcionament per al BINOL no substituït. S'ha implementat i operat un procés de flux continu amb una mostra de 100 mmol (32,8 g) de BINOL monoacetilat racèmic en un experiment de 84 hores amb un reactor de llit empaquetat que conté 1 g (f = 0,37 mmol.g-1) de la resina funcional. c) S'ha utilitzat l’estratègia de copolimerització radical per preparar una nova família d’àcids fosfòrics quirals derivats del SPINOL immobilitzats sobre PS. L’espècie òptima immobilitzada permet la desimetrització catalítica d’oxetans disubstituïts en 3,3 amb excel·lents rendiments i enantioselectivitats, presentant una reciclabilitat molt alta. Finalment, s'ha implementat i operat un procés de flux continu per a la preparació seqüencial de 17 productes diversos enantioenriquits. d) S’ha explorat l’ús de l’electricitat com a oxidant verd en combinació amb sals de metalls abundants actuant com a catalitzadors. S'ha desenvolupat una oxidació electroquímica co-catalitzada per manganès/coure de tipus Wacker-Tsuji d’alquens aril-substituïts, que proporciona α-aril cetones en rendiments de moderats a excel·lents, amb els avantatges d’evitar el pal·ladi com a catalitzador i qualsevol oxidant químic extern, en un procediment rendible i fàcil d’utilitzar. El objetivo principal ha sido desarrollar nuevas estrategias de inmovilización que conduzcan a catalizadores heterogeneizados con propiedades catalíticas mejoradas. a) Se ha preparado y evaluado una familia de derivados de cis-4-hidroxidifenilprolinol soportados sobre poliestireno (PS) en la reacción tándem entre hidroxilaminas N-protegidas y aldehídos α,β-insaturados en batch y en flujo. Los nuevos catalizadores se comparan muy favorablemente con las referencia previas, proporcionando 5-hidroxiisoxazolidinas diastereoméricamente puras con altas enantioselectividades y buenos rendimientos. b) Se ha preparado una isotiourea quiral inmovilizada sobre PS y se ha aplicado a la resolución cinética acilativa enantioselectiva de BINOL(es) monoacilados con anhídrido isobutírico en batch y en flujo. Se ha registrado una alta selectividad y una notable estabilidad del sistema catalítico en las condiciones de operación para BINOL no sustituido. Se ha implementado y operado un proceso de flujo continuo con una muestra de 100 mmol (32,8 g) de BINOL monoacetilado racémico en un experimento de 84 horas con un reactor de lecho empaquetado conteniendo 1 g (f = 0,37 mmol.g-1) de la resina funcional. c) Se ha utilizado una estrategia de copolimerización radical para preparar una nueva familia de ácidos fosfóricos quirales derivados de SPINOL inmovilizados sobre PS. La especie óptima permite la desimetrización catalítica de oxetanos 3,3-disustituidos con excelentes rendimientos y enantioselectividades, exhibiendo alta reciclabilidad. Finalmente, se ha implementado y operado un proceso de flujo continuo para la preparación secuencial de 17 productos enantioenriquecidos. diversos d) Se ha explorado el uso de la electricidad como oxidante verde en combinación con sales de metales abundantes como catalizadores. Se ha desarrollado una oxidación electroquímica de tipo Wacker-Tsuji de tipo Wacker-Tsuji co-catalizada por manganeso/cobre, que proporciona α-aril cetonas con rendimientos de moderados a excelentes, con las ventajas de evitar el paladio como catalizador y cualquier oxidante químico externo, en un procedimiento económico y fácil de operar. The main goal in this thesis has been to develop novel immobilization strategies leading to heterogenized catalysts with improved catalytic properties. Firstly, a new family of polystyrene (PS)-supported cis-4-hydroxydiphenylprolinol derivatives has been prepared and evaluated in the tandem reaction between N-protected hydroxylamines and α,β-unsaturated aldehydes in batch and flow. The new immobilized catalysts compare favorably with previous, well-established catalysts, affording 5-hydroxyisoxazolidines as single diastereomers with high enantioselectivities and good yields. Secondly, a PS-immobilized chiral isothiourea has been prepared and applied to the enantioselective acylative kinetic resolution of monoacylated BINOL(s) with inexpensive isobutyric anhydride in batch and flow. High selectivity and a remarkable stability of the catalytic system in the operation conditions have been recorded for unsubstituted BINOL. A continuous flow process has been implemented and operated with a 100 mmol (32.8 g) sample of racemic monoacetylated BINOL in a 84 hours experiment with a packed bed reactor containing 1 g (f = 0.37 mmol.g-1) of the functional resin. Thirdly, we have used radical co-polymerization strategy to prepare a new family of PS-immobilized SPINOL-derived chiral phosphoric acids. The optimal immobilized species brings about the catalytic desymmetrization of 3,3-disubstituted oxetanes in excellent yields and enantioselectivities, exhibiting a very high recyclability. Finally, a continuous flow process has been implemented and operated for the sequential preparation of 17 diverse enantioenriched products. In addition, the use of electricity as a green oxidant in combination with salts of abundant metals as catalysts has also been explored. We have thus developed a manganese/copper co-catalyzed electrochemical Wacker-Tsuji-type oxidation of aryl-substituted olefins, affording α-aryl ketones in moderate to excellent yields, with the advantages of avoidance of palladium as a catalyst and any external chemical oxidant, in an easily operated, cost-effective procedure.

Este proyecto se realiza con el objetivo de presentar una propuesta para la mejora de los procesos operativos del Centro de Diagnóstico Automotor del Valle Ltda., a saber: - Revisión técnico-mecánica y emisiones contaminantes. -Expedición de licencias de conducción. -Patios y grúas. La definición del problema se desarrolló con la ayuda de la herramienta técnica n ominal con un enfoque cualitativ o y con la participación de los colaboradores de la compañía , cuya experiencia permitió abordar los principales problemas operativos . Y un enfoque cuantitativ o a partir de los registros de los in dicadores del año inmediatamente anterior. La combinación del análisis cualitativo y cuantitativo permitió concluir la necesidad de intervenir y profundizar en los tres procesos mencionados. Con este trabajo se desarrolló un diagnóstico del estado actual de los procesos, así como los principales problemas en cada uno de estos, que fueron prioriza dos con diferentes herramientas que permitieron detectar el principal problema, sus causas. A partir de esto, se presentó la propuesta de mejora que fue validada por la Gerencia del Centro de Diagnóstico Automotor del Valle Ltda., encontrando que la misma está alineada con las necesidades de la organización y el entorno competitivo de sus servicios, así como con los objetivos estratégicos de la compañía.

El espacio funcional de las interjecciones queda delimitado por las transformaciones evidenciadas en el proceso de traslación de un sintagma nominal o verbal a la función expresiva o apelativa características de las llamadas interjecciones “impropias”. Este proceso no es otro que el de la inmovilización de todos y cada uno de los planos que definen un sintagma: el morfemático, el sintáctico y el léxico-semántico. El resultado son sintagmas solo exclamativos, amorfemáticos, semánticamente imposibilitados para la representación conceptual y sintácticamente incapacitados para establecer dependencias en la estructura oracional.

[ES] Los compuestos antimicrobianos de origen natural presentan reconocida actividad antimicrobiana y antifúngica, pero su aplicación en alimentos se ve limitada por sus propiedades fisicoquímicas, así como por la posible interacción con componentes del alimento. Con el fin de evitar estos inconvenientes se han propuesto diversos sistemas de encapsulación y/o inmovilización de los compuestos bioactivos. La inmovilización de los antimicrobianos en diversos soportes y superficies permite mantener la efectividad antimicrobiana del compuesto anclado frente a microorganismos patógenos y alterantes, y posibilita su aplicación en diferentes etapas del procesado de alimentos. Este trabajo se centra en la descripción de los antimicrobianos de origen natural usados en la industria alimentaria para prevenir el crecimiento o inhibir diversos microorganismos, las diferentes metodologías de inmovilización posibles, los distintos materiales que pueden ser usados como soporte de anclaje, así como ejemplos de sistemas de inmovilización de antimicrobianos naturales para su aplicación en la industria alimentaria. Tras realizar la revisión bibliográfica se puede destacar que la inmovilización covalente de antimicrobianos naturales permite que el compuesto activo mantenga o incluso mejore su efectividad sin liberarlo al medio, demostrando así que es una técnica prometedora para la conservación de alimentos y que suple las limitaciones de las metodologías convencionales no afectando a las características organolépticas del alimento y dando lugar a productos mínimamente procesados. Por tanto, esta revisión proporciona información valiosa para el desarrollo de nuevos sistemas antimicrobianos para el control de la contaminación microbiana en los alimentos., [EN] Antimicrobial compounds of natural origin show recognized antimicrobial and antifungal activity, but their application in food is limited by their physicochemical properties, as well as by their potential interaction with food components. In order to avoid these drawbacks, different encapsulation and/or immobilization systems for bioactive compounds have been proposed. The immobilization of antimicrobials on diverse supports and surfaces allows preserving the antimicrobial effectiveness of the anchored compound against pathogenic and spoilage microorganisms, and enables its application at different food processing stages. This work focuses on the description of naturally-occurring antimicrobials used in the food industry to prevent growth or inhibit microorganisms, established immobilization methodologies, different materials that can be used as grafting support, as well as examples of natural antimicrobials immobilization systems for application in the food industry. After the literature review it can be noted that the covalent immobilization of natural-occurring antimicrobials allows the active compound to maintain or even improve its effectiveness without releasing it into the medium, demonstrating that it is a promising technique for food preservation and that it overcomes the limitations of conventional methodologies without affecting the organoleptic characteristics of the food and resulting in minimally processed products. Therefore, this review provides valuable information for the development of new antimicrobial systems for the control of microbial contamination in food., [CA] Els compostos antimicrobians d'origen natural presenten reconeguda activitat antimicrobiana i antifúngica, però la seua aplicació en aliments es veu limitada per les seues propietats fisicoquímiques, així com per la possible interacció amb components de l'aliment. Per tal d'evitar aquests inconvenients s'han proposat diversos sistemes d'encapsulació i/o immobilització dels compostos bioactius. La immobilització dels antimicrobians en diversos suports i superfícies permet mantenir l'efectivitat antimicrobiana del compost ancorat enfront de microorganismes patògens i alterants, i possibilita la seua aplicació en diferents etapes del processat d'aliments. Aquest treball es centra en la descripció dels antimicrobians d'origen natural usats en la indústria alimentària per prevenir el creixement o inhibir diversos microorganismes, les diferents metodologies d'immobilització possibles, els diferents materials que poden ser usats com a suport d'ancoratge, així com exemples de sistemes d'immobilització d'antimicrobians naturals per a la seua aplicació en la indústria alimentària. Després de realitzar la revisió bibliogràfica es pot destacar que la immobilització covalent d'antimicrobians naturals permet que el compost actiu mantinga o inclús millore la seua efectivitat sense alliberar-lo al mig, demostrant així que és una tècnica prometedora per a la conservació d'aliments i que suplix les limitacions de les metodologies convencionals no afectant les característiques organolèptiques de l'aliment i donant lloc a productes mínimament processats. Per tant, esta revisió proporciona informació valuosa per al desenrotllament de nous sistemes antimicrobians per al control de la contaminació microbiana en els aliments. Per tant, aquesta revisió proporciona informació valuosa per al desenvolupament de nous sistemes antimicrobians per al control de la contaminació microbiana en els aliments.

La poda de olivo como biomasa puede resultar una buena materia prima para la producción de bioetanol de segunda generación. Al tratarse de una biomasa lignocelulósica, y tomando como referencia la ruta biotecnológica seguida para su aprovechamiento, requiere de una etapa de pretratamiento que haga más accesible la celulosa, una hidrólisis de ésta para liberar azúcares y, por último, una fermentación para convertir los azúcares en bioetanol. En el presente documento, además del estudio de este proceso de obtención de bioetanol a partir de poda de olivo, se ha abordado la posibilidad de inmovilizar las células fermentativas para protegerlas de las condiciones desfavorables de la hidrólisis en una hipotética hidrólisis y fermentación simultáneas. Con el objetivo de estudiar las diversas posibilidades para pretratar la poda de olivo, las diferentes estrategias de fermentación y las distintas técnicas de inmovilización, se llevó a cabo una revisión bibliográfica del proceso de obtención de bioetanol de segunda generación centrando la atención en la poda de olivo, biomasa abundante en la Comunidad Autónoma de Andalucía. En función a la bibliografía consultada, el esquema de trabajo más prometedor estaría compuesto por un pretratamiento secuencial de molienda, extracción con agua líquida caliente y explosión de vapor (en conjunto presenta buenos rendimientos de bioetanol), una hidrólisis enzimática y una fermentación simultánea a la hidrólisis con inmovilización de las células fermentativas (suele obtener mejores rendimientos de bioetanol que la hidrólisis y fermentación por separado). Para completar el estudio y ampliar el campo de conocimiento, se necesita de más experiencias a diversos niveles de escalado y con varias de las opciones de pretratamiento, fermentación e inmovilización.

Many chemical routes have been proposed to immobilize peptides on biomedical device surfaces, and in particular, on dental implants to prevent peri-implantitis. While a number of factors affect peptide immobilization quality, an easily controllable factor is the chemistry used to immobilize peptides. These factors affect peptide chemoselectivity, orientation, etc., and ultimately control biological activity. Using many different physical and chemical routes for peptide coatings, previous research has intensely focused on immobilizing antimicrobial elements on dental implants to reduce infection rates. Alternatively, our strategy here is different and focused on promoting formation of a long-lasting biological seal between the soft tissue and the implant surface through transmembrane, cell adhesion structures called hemidesmosomes. For that purpose, we used a laminin-derived call adhesion peptide. However, the effect of different immobilization chemistries on cell adhesion peptide activity is vastly unexplored but likely critical. Here, we compared the physiochemical properties and biological responses of a hemidesmosome promoting peptide immobilized using silanization and copper-free click chemistry as a model system for cell adhesion peptides. Successful immobilization was confirmed with water contact angle and X-ray photoelectron spectroscopy. Peptide coatings were retained through 73 days of incubation in artificial saliva. Interestingly, the non-chemoselective immobilization route, silanization, resulted in significantly higher proliferation and hemidesmosome formation in oral keratinocytes compared to chemoselective click chemistry. Our results highlight that the most effective immobilization chemistry for optimal peptide activity is dependent on the specific system (substrate/peptide/cell/biological activity) under study. Overall, a better understanding of the effects immobilization chemistries have on cell adhesion peptide activity may lead to more efficacious coatings for biomedical devices. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

Introducción: La inmovilización con férula de yeso en miembro inferior es un procedimiento frecuente para niños en los servicios de urgencias, el cual no está exento de riesgos relacionados con la inmovilidad y presión, sobre estos factores los enfermeros tienen que adoptar cuidados preventivos. Objetivo: Comprobar la eficacia del parche-talonera polimérico en la prevención de úlceras iatrogénicas en niños inmovilizados con férula de yeso en miembro inferior. Material y Método: Ensayo clínico aleatorio preventivo sobre pacientes pediátricos de 0 a 14 años que precisen inmovilización con férula de yeso en miembro inferior. Se realizó muestreo consecutivo no probabilístico simple ciego. Análisis estadísticodescriptivo de las variables y test de la X2 con las variables aplicación del parche y aparición de úlceras.Resultados: Se obtuvo una muestra de n=74 pacientes. Se objetivó úlcera en 21.7% de pacientes, piel íntegra (48.2%) y eritema que palidece 30.1%. Se aplicó el test de la X2 para las variables aplicación de parche polimérico y aparición de úlcera, obteniendo X2=0.135 con p=0.713, y por tanto, no existe significación estadística entre estas dos variables. Conclusiones: No existe relación directa entre la prevención de úlceras por presión en niños inmovilizados con férula de yeso y la aplicación de parche protector polimérico. Es fundamental que los enfermeros/as ofrezcan una educación sanitaria de calidad en los cuidados y mantenimiento de la férula para evitar complicaciones. Enfermería GlobalNº 59 Julio 2020Página 136ABSTRACT: Introduction: Immobilization with plaster cast in lower limb is a frequent procedure for children in the emergency services, which is not without risks related to immobility and pressure, on these factors nurses have to adopt preventive care. Objective: To verify the efficacy of the polymeric heel patch in the prevention of iatrogenic ulcers in children immobilized with a plaster splint in the lower limb. Material and method: Preventive randomized clinical trial on pediatric patients aged 0 to 14 years who require immobilization with a lower limb cast cast. Simple blind non-probabilistic consecutive sampling was performed. Descriptive statistical analysis of the variables and X2 test with the application variables of the patch and the appearance of ulcers. Results: A total sample of n = 74 patients was obtained. Ulcer was observed in 21.7% of patients, whole skin (48.2%) and erythema that pales 30.1%. The X2 test was applied for the application of polymer patch and ulcer appearance variables, obtaining X2 = 0.135 with p = 0.713, and therefore, there is no statistical significance between these two variables. Conclusions: There is no direct relationship between the prevention of pressure ulcers in children immobilized with plaster splint and the application of polymeric protective patch. It is very important that nurses offer a quality health education in the care and maintenance of the splint to avoid complications.

The objective of the present research was to determine the ketamine - xilazine effects on the anesthetic and post anesthetic period and the physiological constants during the immobilization period of Panthera onca breed under the Parque Zoológico Natural de Pucallpa captivity conditions. For this purpose ten jaguars in Captivity from the Parque Zoológico Natural de Pucallpa weighing 40 to 67 kg were used. These were immobilized with 17.4 ± 3,97 mg/kg of ketamine clorhydrate (KC) and 0.82 ± 0.37 mg/kg of xylazine clorhydrate (XC). The initial effect and complete induction time, rectal, temperature, cardiac and respiratory frequency and recovery time were recorded. The initial effect time was 6.9 ± 2.88 minutes and the time of complete induction was 12.9 ± 6.19 minutes. The rectal temperature during immobilization time was from 38.5 to 41.2 oc. The cardiac and respiratory frequency was from 64 to 116 bits/minute and from 26 to 36 respirations per minute respectively. The recuperation time was 151.1 ± 17.46 minutes. Conclusivelly, the anesthetic and post anesthetic period and physiologycal constants of Panthera onca breed under the Parque Zoológico Natural de Pucallpa captivity conditions, maintained into normal ranges under the ketamine-xilazine association effect. El objetivo del presente trabajo fue determinar los efectos de la asociación de xilacina – ketamina sobre el periodo de anestesia y pos anestesia y las constantes fisiológicas durante la inmovilización de Panthera onca criados bajo las condiciones de cautiverio en el Parque Zoológico Natural de Pucallpa. Para ello se utilizaron diez otorongos en cautiverio entre 9 y 15 años de edad y entre 40-67 Kg de peso vivo del Parque Zoológico Natural Pucallpa ,Ucayali, Perú. Estos fueron inmovilizados con una combinación de Clorhidrato de Ketamina (KH) y Clorhidrato de Xilacina (XH) de 17.40 +- 3.97 mg/kg y 0.82 +- 0.37 mg/kg respectivamente.Se registró el tiempo de efecto inicial y de inducción completa, la temperatura rectal, frecuencia cardíaca y respiratoria y el tiempo de recuperación. El tiempo de efecto inicial fue de 6.9 +- 2.88 minutos y el tiempo de inducción completa de 12.9 +- 6.19 minutos. La temperatura rectal durante la inmovilización fue de 38.5 a 41.2 °C. La frecuencia cardiaca y respiratoria fue de 64-146 latidos/mm y de 20-36 respiraciones /mm respectivamente. Los animales se recuperaron en 151.1 +- 17.46 minutos. De esto podernos concluir que el periodo de anestesia, pos anestesia y las constantes fisiológicas de los ejemplares de Panthera onca criados bajo las condiciones de cautiverio en el Parque Zoológico Natural de Pucallpa, se mantuvieron dentro los rangos normales bajo los efectos de la asociación xilazina - ketamina.

L-asparaginase (L-asnase) is an amino hydrolase that has been used in the last decades for leukemia treatment, which boosted scientific studies on production, purification and immobilization of this enzyme. More recently, L-asnase has called food industry attention because of its effect on acrylamide formation in fried and baked foods. Several studies have been carried out in order to evaluate the effect of L-asnase in reducing acrylamide formation in different food models. This review brings up an overview in L-asnase kinetic parameters from different sources, immobilization methods, its therapeutic use in leukemia treatment and food processing applications. This review also discusses acrylamide formation in fried and baked foods. Commercial L-asnase is produced by two microorganisms, Escherichia coli and Erwinia sp. However, studies using different microorganisms have shown the possibility of producing this enzyme from different sources, obtaining enzymes with interesting kinetic properties. Immobilization strategies have provided enzymes with greater activity and stability, which could contribute to maintain L-asnase activity in the body for longer periods. Researches applying L-asnase in food products have shown significant reduction in acrylamide production, above 90% in some cases. For this purpose, during enzyme application some variables must be taken into account, as enzyme dose, food matrix, pretreatment, processing time and temperature. Medical and food applications make L-asnase a multipurpose enzyme. Reducing prices, improving enzyme stability and reducing co-lateral effects in leukemia treatment are still challenges to overcome. La L-asparaginasa (L-asnasa) es una amino hidrolasa que se ha utilizado en las últimas décadas para el tratamiento de la leucemia, lo que ha estimulado estudios científicos sobre la producción, purificación e inmovilización de esta enzima. Más recientemente, la L-asnasa ha llamado la atención de la industria alimentaria debido a su efecto sobre la formación de acrilamida en alimentos fritos y cocinados. Se han realizado varios estudios para evaluar el efecto de la L-asnasa en la reducción de la formación de acrilamida en diferentes modelos dietéticos. Esta revisión de literatura trae una descripción general de la cinética de l-asnasas obtenidas por diferentes fuentes, métodos de la inmovilización, su uso terapéutico en el tratamiento de la leucemia y en el proceso de alimentos. Esta revisión también analiza la formación de acrilamida en alimentos fritos y cocinados. La L-asnasa comercial es producida por dos microorganismos, Escherichia coli y Erwinia sp. Sin embargo, estudios utilizando diferentes microorganismos han demostrado la posibilidad de producir esta enzima a partir de diferentes fuentes, obteniendo enzimas con interesantes propiedades cinéticas. Las estrategias de técnicas de inmovilización a través de nano y microsistemas han proporcionado a las enzimas una mayor actividad y estabilidad, lo que podría contribuir a mantener la actividad de la asnasa en el organismo durante períodos más largos. La investigación que aplica L-asnasa a productos alimenticios ha mostrado una reducción significativa en la producción de acrilamida, por encima del 90% en algunos casos. Para ello, durante la aplicación de la enzima, se deben tener en cuenta algunas variables, como la dosis enzimática, la matriz alimentaria, el pretratamiento, el tiempo de procesamiento y la temperatura. Las aplicaciones médicas y alimentarias hacen de la L-asnasa una enzima multipropósita. La reducción de los precios, la mejora de la estabilidad de las enzimas y la reducción de los efectos secundarios en el tratamiento de la leucemia siguen siendo retos por superar. L-asparaginase (L-asnase) é uma hidrolase amino que tem sido usada nas últimas décadas para o tratamento da leucemia, o que impulsionou estudos científicos sobre produção, purificação e imobilização dessa enzima. Mais recentemente, a L-asnase chamou a atenção da indústria alimentícia por causa de seu efeito na formação de acrilamida em alimentos fritos e cozidos. Vários estudos têm sido realizados para avaliar o efeito da L-asnase na redução da formação de acrilamida em diferentes modelos alimentares. Esta revisão traz de uma visão geral da cinética de L-asnases obtidas de diferentes fontes, métodos de imobilização, seu uso terapêutico no tratamento de leucemia e processamento de alimentos. Esta revisão também discute a formação de acrilamida em alimentos fritos e cozidos. A L-asnase comercial é produzido por dois microrganismos, Escherichia coli e Erwinia sp. No entanto, estudos utilizando diferentes microrganismos têm mostrado a possibilidade de produzir essa enzima de diferentes fontes, obtendo enzimas com propriedades cinéticas interessantes. Estratégias de técnicas de imobilização através de sistemas nano ou microparticulado têm proporcionado enzimas com maior atividade e estabilidade, o que poderia contribuir para manter a atividade L-asnase no corpo por períodos mais longos. Pesquisas que aplicam L-asnase em produtos alimentícios têm mostrado redução significativa na produção de acrilamida, acima de 90% em alguns casos. Para isso, durante a aplicação da enzima, algumas variáveis devem ser levadas em consideração, como dose enzimática, matriz alimentar, pré-tratamento, tempo de processamento e temperatura. Aplicações médicas e alimentares fazem da L-asnase uma enzima multiuso. Reduzir os preços, melhorar a estabilidade das enzimas e reduzir os efeitos co-laterais no tratamento da leucemia ainda são desafios a serem superados.

RESUMO As adaptações da matriz extracelular, que está intimamente ligada à manutenção da integridade e do desempenho do sistema musculoesquelético, não estão consensualmente descritas na literatura após recarga por desuso. O objetivo deste estudo foi analisar a área de tecido conjuntivo perimisial e de secção transversa das fibras musculares nos músculos sóleo e plantar de ratas imobilizadas e posteriormente reabilitadas por protocolos de alongamento e exercício excêntrico. A expressão do tecido conjuntivo perimisial de ambos os músculos estudados não apresentou diferença significativa após o procedimento de imobilização e treinamento. O treino excêntrico aplicado por 10 dias foi suficiente para recuperar a área das fibras para o músculo plantar, enquanto a recuperação do músculo sóleo aconteceu somente após o protocolo de 21 dias. RESUMEN No figuran descriptas de manera consensual en la literatura las adaptaciones extracelulares, ligadas al mantenimiento de la integridad y del desempeño del sistema musculoesquelético tras inmovilizaciones. En este estudio se evalúa el área del perimisio del tejido conjuntivo y de la sección transversal de las fibras musculares del sóleo y del plantar en ratas inmovilizadas y después rehabilitadas siguiendo los protocolos de estiramiento y de ejercicio excéntrico. En el área evaluada de ambos músculos no se observaron significativas diferencias tras el procedimiento de inmovilizarlos y entrenarlos. Aplicados en diez días, el entrenamiento excéntrico ha sido suficiente para recuperar el área de las fibras para el músculo plantar, mientras que el músculo sóleo ha tardado veintiuno días en recuperarse. ABSTRACT The adaptations of the extracellular matrix, which is closely related to the maintenance of the integrity and performance of the musculoskeletal system, are not widely described in the literature after rehabilitation due to prolonged disuse. The aim of this study was to analyze the perimysial connective tissue area and the cross-sectional area of muscle fibers in soleus and plantaris muscles of immobilized female rats, later rehabilitated due to stretching and eccentric exercise protocols. The expression of the perimysial connective tissue of both studied muscles did not show significant differences after the procedure of immobilization and training. Eccentric training applied for 10 days was enough to recover the area of fibers for the plantaris muscle, while the recovery of the soleus muscle happened only after the 21-days protocol.

Los péptidos son polímeros que contienen entre dos y pocas docenas de aminoácidos, unidos por enlaces peptídicos entre el grupo carboxilo de uno de ellos y el grupo α-amino del siguiente, con límite de masa molecular de 6.000 Da y de relevancia para el cuidado de la salud y la nutrición. El mercado mundial de péptidos está orientado principalmente a la industria farmacéutica, y se estima que alcanzará US $ 23.70 millones en 2020, lo que significa una tasa de crecimiento anual compuesta de 2,8 % para el período 2014 a 2020. En contraste, la producción de péptidos bioactivos para uso alimenticio (nutracéuticos, alimentos funcionales y conservantes) es escasa, aunque es un ámbito de intensa investigación. El objetivo general de este trabajo es aplicar proteasas pre-purificadas de Asclepias curassavica L. (Asclepiadaceae), una planta superior que crece en Argentina, en forma soluble o inmovilizada y en sistemas acuoso-orgánicos, como un nuevo catalizador de la síntesis de péptidos con potencial actividad antihipertensiva in vitro.La originalidad de este trabajo está centrada tanto en la síntesis de péptidos con potencial actividad antihipertensiva in vitro utilizando fitoproteasas autóctonas, como en su potencial aplicación en la formulación de alimentos funcionales. Para seleccionar los medios de reacción más promisorios de las síntesis de péptidos, se estudió el efecto de los solventes orgánicos sobre la actividad proteolítica y la estabilidad operacional de asclepaína en sistemas homogéneos y macroheterogéneos, utilizando la enzima libre e inmovilizada en diferentes soportes. Los medios de reacción más promisorios fueron el sistema homogéneo formado por metanol 30 % v/v en buffer Tris-HCl 0,1 M pH 8, y el sistema macroheterogéneo formado por 50 % v/v de acetato de etilo en buffer Tris-HCl 0,1 M pH 8. En ellos, asclepaína expresó tiempos de vida media de 7,21 y 11,07 h, respectivamente.El efecto de los de los solventes orgánicos sobre la estructura secundaria de asclepaína cI se estudió por FTIR y se evaluó mediante el coeficiente de similitud espectral (r), tomando como referencia la estructura secundaria obtenida en buffer Tris-HCl 0,1 M pH 8. Asclepaína cI no mostró diferencias significativas de r en buffer, metanol 30 % v/v o DMS 70 % v/v, en concordancia con el hecho de que en dichos medios miscibles se obtuvieron los mayores tiempos de vida media de asclepaína. Por el contrario, asclepaína cI en los sistemas bifásicos formados por 1-octanol 30 % v/v, hexano 50 % v/v, acetato de etilo 50 % v/v en buffer Tris-HCl 0,1 M pH 8, presentó diferencias espectrales significativas. Sin embargo, y a pesar de su menor similitud, asclepaína cI mostró mayor estabilidad en los sistemas bifásicos que en los sistemas miscibles seleccionados. La selección del donador de acilo (sustrato limitante) para las reacciones de síntesis se realizó mediante un estudio de las preferencias de asclepaína por diversos derivados aminoacídicos sintéticos, en los medios de reacción previamente seleccionados.Asclepaína en buffer Tris-HCl 0,1 M pH 8 y en metanol 30 % v/v exhibió amplia preferencia por los derivados aminoacídicos no polares, especialmente por Val; mientras que en acetato de etilo 50 % v/v mostró preferencia por los aminoácidos polares, especialmente por Gln y Tyr.A partir de la base de datos BIOPEP (2012) y de bibliografía, tomando como base las preferencias de asclepaína, se seleccionaron los péptidos Val-Gly (VG), Gln-Gly (QG) y Tyr-Gln (YQ), con actividad antihipertensiva in vitro con el objeto de sintetizarlos por vía enzimática. Se obtuvieron con éxito los péptidos Z-VG, análogo de VG, Z-QG, análogo de QG y Z-YQQ, análogo de YQ. El péptido Z-VG fue sintetizado por vía enzimática bajo control cinético y termodinámico, en metanol al 30 % v/v en buffer Tris-HCl 0,1M pH 8, utilizando asclepaína en forma soluble e inmovilizada. El rendimiento en producto de la reacción de síntesis bajo control cinético y termodinámico, utilizando asclepaína soluble, fue de 19 % y 13,5 %; pero se logró una maximización de 95 % de rendimiento empleando asclepaína inmovilizada en OGS bajo control cinético. El péptido Z-QG fue obtenido mediante síntesis bajo control cinética y no así bajo control termodinámico; el rendimiento máximo alcanzado fue de 76,43 %.El péptido Z-YQQ fue sintetizado por vía enzimática bajo control cinético en acetato de etilo 50 % (v/v) y buffer Tris-HCl 0,1M (pH 8), con un rendimiento de 100 % utilizando asclepaína soluble como catalizador.La actividad antihipertensiva de los péptidos Z-YQQ y Z-VG se evaluó como actividad inhibitoria de ECA en ensayos in vitro. El péptido de síntesis enzimática Z-YQQ-OH mostró un porcentaje de inhibición 35,5 % mayor al expresado por el péptido modelo YQ (Shamloo y col., 2015). Por el contrario, la actividad antihipertensiva del péptido Z-VG fue 37,3 % inferior a la del péptido análogo VG (Cheung y col., 1980). No obstante, en ambos casos los valores de IC50 obtenidos son notablemente mayores que el valor correspondiente al del inhibidor comercial captopril (IC50 de 0,21 x 10-4 mM), dicha diferencia puede deberse a que no existe un método estandarizado para medir la actividad antihipertensiva in vitro como actividad inhibitoria de ECA; por lo que éstos valores serán corroborados por una nueva metodología.Los resultados del párrafo anterior demuestran que Z-YQQ y Z-VG son promisorios agentes antihipertensivos, el primero en mayor medida. Por ello fue seleccionado para realizar estudios de toxicidad, estabilidad y otras actividades biológicas del mismo. Al evaluar la actividad antimicrobiana de Z-YQQ en un cultivo batch a escala de laboratorio frente a una cepa Gram positiva (S. aureus ATCC 25923) y frente a una cepa Gram negativa (E. coli ATCC 25922) no se observó inhibición del crecimiento microbiano.Por otra parte, se determinó la actividad anticoagulante del péptido Z-YQQ mediante Wiener Lab Test. El péptido sintetizado por vía enzimática Z-YQQ actuó sobre la vía general y sobre la vía extrínseca de la cascada de coagulación sanguínea, aumentando el tiempo de coagulación y retrasando el tiempo de polimerización de fibrinógeno a fibrina y la formación del coágulo, de manera similar a heparina. Dichos resultados pusieron de manifiesto su potencial, no solo como agente antihipertensivo, sino también como agente anticoagulante. Además, se demostró que el péptido Z-YQQ retuvo el 82 % de su actividad anticoagulante durante 15 min en un pool de plasma humano de individuos sanos, demostrando la alta estabilidad del péptido sintetizado en el rango de tiempo estudiado.La toxicidad aguda del péptido Z-YQQ se determinó como porcentaje de viabilidad celular después de exponer, durante 4 h a 37 °C, la línea celular humana 293 FT a diferentes concentraciones del péptido mencionado. Se empleó el método estadístico Kruskall-Wallis ANOVA para evaluar las diferencias significativas en los valores de viabilidad celular y se determinó que Z-YQQ no fue citotóxico en ensayos in vitro a las concentraciones analizadas.En general, esta tesis doctoral aporta nuevas estrategias y productos de interés para la industria alimenticia y farmacéutica, que implican una expansión del mercado actual y la potencial transferencia de resultados al sector socio-productivo interesado en los mismos. Además, contribuye al aprovechamiento de los recursos naturales renovables autóctonos de nuestro país, como son las fuentes vegetales de enzimas proteolíticas que han sido escasamente exploradas y no poseen patentes que dificulten su explotación. Fil: Origone, Anabella Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Física Aplicada "Dr. Jorge Andrés Zgrablich". Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ciencias Físico Matemáticas y Naturales. Instituto de Física Aplicada "Dr. Jorge Andrés Zgrablich"; Argentina

La investigació plasmada en aquesta tesi doctoral tracta l’aplicació dels principis d’enginyeria de reacció i immobilització enzimàtica per a la millora de reaccions d’oxidoreducció biocatalitzades. En una primera part de la tesi, es va estudiar la co-immobilització de la monooxigenasa P450 BM3 juntament amb un enzim regenerador del cofactor NADPH, la glucosa deshidrogenasa (GDH-Tac). Els millors derivats es van obtenir utilitzant dos suports d’agarosa, un funcionalitzat amb grups epoxy (83% i 20% activitats retingudes respectivament) i l’altre amb grups amino (28% i 25% activitats retingudes respectivament). Posteriorment es va provar de re-utilitzar aquests enzims immobilitzats en diferents cicles de reacció utilitzant un dels substrats naturals de la P450 BM3, el laurat de sodi. Un cop demostrat que ambdós enzims immobilitzats podien ser reciclats, es va estudiar l’aplicació d’aquests en dues reaccions d’interès industrial, la hidroxilació de la α-isoforona i la hidroxilació del diclofenac. En el primer cas, va fer falta optimitzar certs paràmetres de la reacció abans d’aplicar els derivats. Un cop es van tenir unes condicions acceptables, es va comprovar que els resultats obtinguts anteriorment amb el laurat de sodi, no podien ser extrapolats. La reutilització no va ser possible. En quant al diclofenac, es van obtenir resultats similars. En ambdós casos però, l’aplicació dels enzims en la seva forma soluble, va permetre obtenir conversions altes: 86.2% per a la α-isoforona (50 mM inicial) i 100% per al diclofenac (3.5 mM inicial). El producte hidroxilat de l’α-isoforona, la 4-hidroxi-isoforona, ha de ser oxidat en un segon pas per arribar a l’intermediari desitjat, la keto-isoforona. Aquesta segona reacció es duu a terme amb una alcohol deshidrogenasa, la qual també necessita un regenerador de cofactor, la NADPH oxidasa. Al aplicar els dos enzims en la seva forma soluble, al cap de 24h, es va aconseguir un 95.7% de rendiment i una productivitat de 6.52 g L-1 dia-1. A part, l’enzim diana, l’alcohol deshidrogenasa, es va poder immobilitzar en epoxy-agarosa obtenint una activitat retinguda del 58.2%. Al intentar re-utilitzar-lo, es va poder operar durant 96h (4 cicles) millorant el rendiment del biocatalitzador fins a 2.5 vegades comparat amb la reacció en soluble. La reacció d’hidrogenació de la α-isoforona, per altre banda, resulta en la 3,3,5- trimetilciclohexanona, un substrat amb interès industrial per a l’obtenció de polímers. En aquest cas, es va utilitzar la Baeyer-Villiger ciclohexanona monooxigenasa juntament amb una glucosa deshidrogenasa comercial (GDH-01) per a realitzar la reacció d’inserció d’un àtom d’oxigen en l’anell de carbonis. Es van optimitzar diferents paràmetres de la reacció com la formulació del biocatalitzador, la velocitat d’adició de substrat i la quantitat d’enzim afegida. Un cop optimitzada la reacció es va escalar primer a 1 litre i finalment a 100 litres. En aquesta última reacció a escala pre-industrial, es va obtenir una conversió del 85%, una productivitat de 2.7 g L- 1 h-1 i un rendiment del biocatalitzador de 0.83 g g-1 cww. Finalment aquesta mateixa reacció es va realitzar utilitzant els enzims immobilitzats i reciclantos. Tant la ciclohexanona monooxigenasa com la glucosa deshidrogenasa (GDH-01) es van poder immobilitzar en agarosa funcionalitzada amb grups amino. En el primer cas es va obtenir una activitat retinguda del 62.4% (mètode obtingut de la bibliografia) i en el segon cas del 62.6%. En reacció, els dos enzims immobilitzats van ser utilitzats tant per separat com conjuntament. Al cap de sis cicles de reacció (132.5 mM de substrat inicial), es va assolir un rendiment de biocatalitzador 3.6 vegades superior per a la monooxigenasa i 1.9 vegades superior per a la GDH- 01 comparat amb la reacció en soluble. The research performed and disclosed in this thesis deals with the reaction engineering and the enzyme immobilization principles as tools to improve biocatalyzed oxidoreductive reactions. On a first stage, the co-immobilization of the P450 BM3 monooxygenase together with a NADPH cofactor regeneration enzyme, the glucose dehydrogenase (GDH-Tac), was studied. The best derivates were obtained when using two agarose supports, an epoxy functionalized (83% and 20% retained activity respectively) and an amino functionalized (28% and 25% retained activity respectively). Later on, the re-cycling of the immobilized enzymes was tested in reaction cycles using one of the natural substrates of the P450 BM3, the sodium laurate. Once it could be demonstrated that re-cycling of both P450 BM3 and GDH-Tac was possible, both enzymes were studied in two of the project’s target reactions, the hydroxylation of α- isophorone and the hydroxylation of diclofenac. In the first case, the optimization of the reaction conditions had to be performed prior to the reaction cycles. The reactor configuration, the oxygen income or the glucose concentration were adjusted. However, when the reaction was performed using the co-immobilized enzymes, the P450 BM3 was deactivated and it could not be re-used. The same happened with the hydroxylation of diclofenac. On the other hand, the reaction using soluble enzymes, resulted in 86.2% conversion for the α-isophorone (50 mM initial concentration) and 100% for the diclofenac (3.5 mM initial concentration). The product resulting from the hydroxylation of α-isophorone, the 4-hydroxy-isophorone, can be further oxidized to keto-isophorone, an intermediary for the synthesis of carotenoids and vitamin E. In order to enzymatically perform this step, an alcohol dehydrogenase and a NADPH oxidase, as a cofactor regenerator, were employed. When used in their soluble form, after 24 hours, 95.7% yield and a space time yield of 6.52 g L-1 day-1 were achieved. Moreover, the alcohol dehydrogenase was immobilized on epoxy-agarose and 58.2% retained activity was obtained. When re-used, the derivate could operate for 96h (4 cycles) improving the biocatalyst yield 2.5- fold compared with the reaction with soluble enzymes. The hydrogenation of α-isophorone results in 3,3,5-trimethylcyclohexanone, an industrial interesting substrate due to the polymers that can be obtained from its oxidized product, the trimethyl-ε-caprolactone. This compound is obtained by the Baeyer-Villiger insertion of an oxygen atom into the carbon ring. For this purpose, a cyclohexanone monooxygenase together with a commercial glucose dehydrogenase (GDH-01) were used. Different parameters of the reaction were optimized such as the biocatalyst formulation, the substrate addition rate or the biocatalyst loading. Afterwards, the reaction was scaled up to 1 liter first and then up to 100 liters. In this last pre-industrial reaction, 85% conversion, a space time yield of 2.7 g L-1 h-1 and a biocatalyst yield of 0.83 g g-1 cww could be obtained. Finally, this same reaction was performed using both enzymes immobilized and re-cycling was intended. The cyclohexanone monooxygenase could be immobilized following a previously described method and 62.4% retained activity was achieved. In the GDH-01 case, different supports were screened albeit at the end, it was also the amino functionalized agarose that resulted successful. A retained activity of 62.6% was obtained. In the reaction cycles, the immobilized enzymes were used either separately or both together. In the best case scenario, after six cycles of reaction (132.5 mM initial substrate) 3.6-fold and 1.9-fold higher biocatalysts yields were obtained for the monooxygenase and the GDH-01, respectively.