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INTRODUÇÃO: Toxocara canis é um ascarídeo parasita do intestino delgado de cães, causador da larva migrans visceral em seres humanos. MÉTODOS: Com o objetivo de demonstrar a eficácia do fungo Pochonia chlamydosporia sobre ovos de Toxocara canis em condições laboratoriais, foi montado ensaio experimental em placas de Petri com ágar-água 2%. RESULTADOS: Houve atividade ovicida de 43,8% (p

Com o objetivo de demonstrar a eficácia do fungo Paecilomyces lilacinus sobre ovos de Taenia saginata em condições laboratoriais, foi montado ensaio em placas de Petri com agar - água 2%. Houve atividade ovicida (p

The in vitro action of the nematophagous fungi Pochonia chlamydosporia (VC1 and VC4), Paecilomyces lilacinus, Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34), on eggs of Taenia saginata and capsules eggs of Dipylidium caninum was evaluated. A hundred fifty thousand eggs of T. saginata (experimental assay 1) and a hundred fifty thousand eggs capsules of D. caninum (experimental assay 2) were used. These eggs were maintained in plates of Petri containing the isolated fungi and without fungi (controls), in medium water-agar 2% (AA2%), where they grew for 10 days, being made 25 repetitions for each group. In of five, 10 and 15 days, about a hundred eggs were removed of each plate and placed in glass sheets with a drop of Amam blue 1%, and evaluated in agreement with the following parameters: type 1, physiologic and biochemical effect without morphological damage to the eggshell, with hyphae adhered to the eggshell; type 2, lytic effect with morphological change of the embryo and eggshell, without hyphal penetration through eggshell; and type 3, lytic effect with morphological change of the embryo and eggshell, besides hyphal penetration and internal egg colonization. In the experimental assay 1, the isolated fungi P. chlamydosporia (VC1 and VC4) and P. lilacinus presented ovicidal activity for the effects of the types 1, 2 and 3 on eggs of T. saginata, while the isolated fungi D. flagrans (AC001) and M. thaumasium (NF34) only presented effect of the type 1. In the experimental assay 2, the isolated fungi D. flagrans (AC001) and M. thaumasium (NF34) only presented effect of the type 1 for all the analyzed intervals. The isolated fungi of the P. chlamydosporia (VC1 and VC4) and P. lilacinus, presented effects of the type 1, 2 and 3 in the intervals of five, 10 and 15 days. At the end of the experiments 1 and 2, was demonstrated that the isolated P. chlamydosporia (VC1 and VC4) and P. lilacinus acted in a negative effect on eggs of T. saginata and capsules eggs of D. caninum, and the effect can be considered promising candidates in the biological control of those helminths. Com o objetivo de avaliar a ação in vitro dos fungos nematófagos Pochonia chlamydosporia (VC1 e VC4), Paecilomyces lilacinus, Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34), sobre ovos de Taenia saginata e cápsulas ovígeras de Dipylidium caninum, foram utilizados cento e cinqüenta mil ovos de T. saginata (ensaio experimental 1) e cento e cinqüenta mil cápsulas ovígeras de D. caninum (ensaio experimental 2). Esses ovos foram vertidos em placas de Petri contendo os isolados fúngicos e sem fungo (controle), em meio ágar-água 2% (AA2%), onde cresceram por 10 dias, sendo feitas 25 repetições para cada grupo. Nos intervalos de cinco, 10 e 15 dias, cerca de cem ovos foram retirados de cada placa e colocados em lâminas de vidro com uma gota de azul de Amam 1%, para serem avaliados de acordo com os seguintes parâmetros: efeito do tipo 1: efeito fisiológico e bioquímico sem prejuízo morfológico à casca, onde são visualizadas as hifas aderidas à casca do ovo; efeito do tipo 2: efeito lítico com alteração morfológica da casca e embrião; e efeito do tipo 3: efeito lítico com alteração morfológica do embrião e da casca, além de penetração de hifas e colonização interna do ovo. No ensaio experimental 1, os isolados fúngicos P. chlamydosporia (VC1 e VC4) e P. lilacinus, apresentaram atividade ovicida para todos os efeitos dos tipos 1, 2 e 3 sobre ovos de T. saginata, enquanto os isolados fúngicos D. flagrans (AC001) e M. thaumasium (NF34), só apresentaram efeito do tipo 1. No ensaio experimental 2, os isolados fúngicos D. flagrans (AC001) e M. thaumasium (NF34), também só apresentaram efeito do tipo 1, para todos os intervalos analisados. Já os isolados fúngicos do fungo P. chlamydosporia (VC1 e VC4) e P. lilacinus, apresentaram efeitos do tipo 1, 2 e 3 nos intervalos de cinco, 10 e 15 dias. Ao final dos ensaios experimentais 1 e 2, ficou demonstrado que os isolados P. chlamydosporia (VC1 e VC4) e P. lilacinus, agiram de forma negativa sobre ovos de T. saginata e cápsulas ovígeras de D. caninum, e desta forma, podem ser considerados candidatos promissores no controle biológico desses helmintos.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-09Bitstream added on 2014-06-13T20:44:12Z : No. of bitstreams: 1 nunes_ht_dr_jabo.pdf: 333051 bytes, checksum: f9efabd17af5f039b03bb7560e538926 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Nematóides de galhas e cisto, além de fungos de solo causadores de doenças constituem importante grupo de patógenos da cultura da soja, sendo o manejo integrado uma das principais medidas de controle visando a redução de perdas econômicas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia dos fungos Paecilomyces lilacinus e Pochonia chlamydosporia e de um produto comercial à base de Bacillus sp. e do nematicida químico Aldicarb no controle de Meloidogyne incognita, Heterodera glycines, Fusarium solani e Rhizoctonia solani em soja, variedade M-SOY 6101, para o que foram feitos ensaios in vitro, em casa de vegetação e em campo. Foi também avaliada a produção dos fungos em dois substratos, sua compatibilidade com agroquímicos utilizados em soja e capacidade de colonização de raízes. Os fungos colonizaram satisfatoriamente grãos de arroz e milheto. Também foram compatíveis a inseticidas baseados em Fipronil. P. chlamydosporia colonizou endofiticamente raízes de soja. Nenhum dos fungos, utilizados em tratamento de sementes inibiu a germinação ou causou tombamento em plântulas de soja, porém não foram eficientes em prevenir esta doença quando o substrato estava inoculado com F. solani e R. solani. Nos ensaios em casa de vegetação com infestação de plantas com M. incognita apenas aldicarb reduziu o número de juvenis no solo e ovos nas raízes, porém os tratamentos biológicos reduziram o número de ovos nas raízes, tendo P. lilacinus favorecido a manutenção do peso seco das raízes. Nos ensaios em campo, em 2 áreas naturalmente infestadas com M. incognita e H. glycines, somente Aldicarb se mostrou eficiente na redução do número de juvenis no solo e de juvenis e ovos de M. incognita e H. glycines nas raízes de plantas de soja. P. chlamydosporia foi o agente mais efetivo na redução... Root-knot, cyst nematodes, and soilborne fungi are considered important pathogens for soybean crop. The objective of this work was to evaluate the efficacy of the fungi Paecilomyces lilacinus and Pochonia chlamydosporia, a commercial product based on Bacillus sp. and aldicarb on the control of Meloidogyne incognita, Heterodera glycines Ichinohe, Fusarium solani and Rhizoctonia solani on soybean, cultivar M-SOY 6101. The experiments were conducted in vitro, in greenhouse and in the field. Mass production of the fungi on rice and millet was tested, as well as the compatibility of them with some chemical pesticides. The colonization of the soybean roots by the fungi tested was also evaluated. The fungi were able to colonize and sporulate on the grains tested. All of the biocontrol agents were compatible with the insecticide Fipronil. P. clamydosporia was able to colonize endophyticaly soybean roots. There were no germination inhibition or dumping off caused by the fungi applied to the seeds, however they were not able to control the dumping off caused by F. solani and R. solani when the substrate was treated with theese pathogens. In the green house trials when the substrate was treated with M. incognita only aldicarb reduced the number of juveniles in the soil and eggs in the roots, however the number of eggs in the roots was reduced by the biocontrol fungi. P. lilacinus was able to increase the root dry weight. In the field it was observed that at the 2 areas naturally infested with M. incognita and H. glycines, only Aldicarb was efficient to reduce the number of juveniles from the soil and juveniles and eggs of M. incognita e H. glycines in the soybean roots. P. chlamydosporia was the most effective fungus to reduce the number of H. glycines cists in the soil. P. lilacinus and aldicarb were also able to significantly reduce these propagules.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Besides increasing production fees, the indiscriminate used of nematicidal chemicals may threaten farmers and consumers health, as well as contaminate the environment. Consequently, alternative methods for management of nematodes are preferred, such as the use of nematophagous fungi allied to organic matter incorporation to the soil. The objectives of this work were: 1- to evaluate the minimum effective dose of papaw seed's flour (FSM) with and without biofumigation, for the control of M. javanica; 2- to evaluate the effect of Pochonia chlamydosporia, applied in the form of chlamydospore or colonized coconut fiber, together with different doses of FMS against M. javanica and 3- to evaluate the effect of fungi and bacteria, isolated from soils treated with FSM, over M. javanica. The collective and accumulative effect of the toxic gasses released during the FSM decomposition, together with the high temperatures, conferred a considerable reduction in the quantity of FSM to be incorporated to the soil, especially if the soil was immediately covered after incorporation. Evaluating the applying of P. chlamydosporia fungi, it was determined that colonized coconut fiber was not efficient as a method for the introduction of this microorganism. Soil application of P. chlamydosporia must be done on infested soil and a period of more than seven days has to be held before planting, in order to allow fungi establishment and its activity over the initial nematode inoculum, with a consequent reduction in penetration, number of root knots and number of eggs at end of the nematode's life cycle. No antagonistic activity against nematodes was observed in bacteria isolated from soils where FSM was incorporated. Only one isolate of the fungi Trichoderma sp. resulted in nematode control, and only when introduced in the soil together with the host planting, 15 days before nematode eggs introduction. This period of exposition was not proportioned in the experiment from where the fungi was isolated, thus it was impossible to determine the role of such isolate in the control of the nematode. O uso indiscriminado de nematicidas, além de onerar o custo de produção, pode colocar em risco a saúde dos aplicadores, dos consumidores e contaminar o meio ambiente. Desta forma, métodos alternativos para o manejo de nematóides são cada vez mais desejáveis, tais como o uso de fungos nematófagos aliado à incorporação de matéria orgânica. Os objetivos do presente trabalho foram avaliar a dose mínima efetiva de farinha de sementes de mamão (FSM) em biofumigação ou não, para o controle de M. javanica; testar o efeito de Pochonia chlamydosporia, aplicado na forma de clamidósporos ou de fibra de coco colonizada, juntamente com diferentes doses de FSM sobre M. javanica e verificar o efeito de fungos e bactérias, isolados de solos tratados com FSM sobre M. javanica. O efeito conjunto e cumulativo dos gases tóxicos liberados durante a decomposição da FSM, aliado às elevadas temperaturas proporcionou uma considerável redução da quantidade de FSM a ser incorporada no solo, principalmente se o solo for coberto imediatamente após a incorporação desse material. Ao se avaliar a forma de aplicação do fungo P. chlamydosporia constatou-se que a fibra de coco colonizada não foi efetiva como método de introdução deste microrganismo. A aplicação de P. chlamydosporia deve ser feita em solo infestado e deve-se aguardar um período maior do que uma semana antes do plantio para que o fungo possa se estabelecer e atuar sobre o inóculo inicial do nematóide, o que reduz a penetração e os números de galhas e ovos no final do ciclo de vida do nematóide. Bactérias isoladas de solo onde havia sido incorporado FSM não apresentaram atividade antagônica ao nematóide. Somente um isolado do fungo Trichoderma sp. resultou em controle do nematóide e apenas quando introduzido no solo no plantio com o hospedeiro, isto é, 15 dias antes da introdução dos ovos do nematóide. Este período de exposição não foi proporcionado noexperimento de onde este fungo foi isolado, portanto não é possível determinar o papel desse isolado no controle do nematóide.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-25Bitstream added on 2014-06-13T20:58:18Z : No. of bitstreams: 1 martinelli_prp_me_jabo.pdf: 3498110 bytes, checksum: 26c5aa48f388ce4f86f0f39aaecfd26a (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Embora numerosas espécies de fitonematóides já tenham sido encontradas em pomares de citros em todo o mundo, poucas são consideradas pragaschave da cultura. No Brasil, apenas o nematóide dos citros (Tylenchulus semipenetrans Cobb) e o nematóide das lesões radiculares dos citros (Pratylenchus jaehni Inserra et al.) detêm esse status. Entre esses, T. semipenetrans é o mais distribuído, enquanto P. jaehni é o mais agressivo. Essa praga já foi encontrada em pomares de mais de 30 municípios paulistas, dois mineiros e três paranaenses. O objetivo deste estudo foi isolar, identificar, documentar ao microscópio fotônico e eletrônico de varredura e avaliar a eficácia de fungos nematófagos para o controle biológico dos nematóides dos citros (P. jaehni e T. semipenetrans). Foram analisadas 38 amostras coletadas em pomares de citros de municípios paulistas e goiano no Laboratório de Nematologia da UNESP/FCAV, Câmpus de Jaboticabal-SP. Dessas amostras, foram isolados Arthrobotrys robusta de 23,7% das amostras, A. musiformis de 18,4%, A. oligospora de 10,5% e A. conoides de 5,2%. Monacrosporium elegans, M. eudermatum, Dactyllela leptospora e Paecilomices lilacinus foram encontrados em 2,6% das amostras. Do total de 26 isolados dos fungos obtidos, 92,8% foram patogênicos a T. semipenetrans e 82,1% a P. jaehni. Um isolado de cada espécie desses fungos foi incluído na documentação das características mais marcantes ao microscópios fotônico e eletrônico de varredura. Em testes in vitro, foram selecionados isolados de cinco espécies de fungos nematófagos, sendo Monacrosporium eudermatum, Dactylella leptospora, Arthrobotrys musiformis, A. conoides e Paecilomyces lilacinus formulados para T. semipenetrans. Para P. jaehni, foram formulados Arthrobotrys robusta, A. oligospora, A. musiformis, Dactylella leptospora e Monacrosporium eudermatum... Although many species of nematodes have already been found in orchards of citrus in the world, few are considered key pests of the culture. In Brazil, only the citrus nematode (Tylenchulus semipenetrans Cobb) and the lesion nematode of citrus (Pratylenchus jaehni Inserra et al.) have that status. Between these, T. semipenetrans is more distributed, but P. Jaehni is the most aggressive. This pest has been found in orchards of more than 30 counties in São Paulo State, two in Minas Gerais and three in Paraná State. The aim of this study was to isolate, identify, document and assess the effectiveness of nematophagous fungi for the biological control of the citrus nematode (P. jaehni and T. semipenetrans). Were analyzed 38 samples collected in the citrus orchards of Counties of Sâo Paulo State and one in Goiás, in Laboratório de Nematologia of UNESP/FCAV, Câmpus of Jaboticabal, SP. From these samples were isolated Arthrobotrys robusta, 23.7% of the samples, A. musiformis 18.4%, A. oligospora 10.5% in A. conoides 5.2%. Monacrosporium elegans, M. eudermatum, Dactyllela leptospora and Paecilomices lilacinus were found in 2.6% of samples. From a total of 26 isolates of the fungi obtained, 92.8% were pathogenic to T. semipenetrans and 82.1% to P. Jaehni. An isolate from each species of these fungi was included in the documentation of the most remarkable characteristics at the light microscope and scanning electron microscope. In tests in vitro were selected five isolates of nematophagous fungi being Monacrosporium eudermatum, Dactylella leptospora, Arthrobotrys musiformis, A. conoides and Paecilomyces lilacinus formulated for T. Semipenetrans. For, P. Jaehni were formulated Arthrobotrys robusta, A. oligospora, A. musiformis, Dactylella leptospora and Monacrosporium eudermatum. These fungi have been applied in doses of 1, 2, 4 and 6 liters of a formulation consisting of equal parts of mixing ...(Complete abstract, click electronic access below)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior The in vitro effects of four isolates of the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001), Monacrosporium sinense (SF53) and Pochonia chlamydosporia (VC1 and VC4) on eggs of Fasciola hepatica and Schistosoma mansoni was evaluated in two assays (A and B). Eggs of F. hepatica (assay A) and S. mansoni (assay B) were incubated in Petri dishes with 2% water-agar inoculated with the grown fungal isolates and a control without fungus. After seven, 14 and 21 days post- inoculation, one hundred eggs were removed and classified according to the following parameters: type 1, lytic effect without morphological damage to eggshell; type 2, lytic effect with morphological alteration of embryo and eggshell; and type 3, lytic effect with morphological alteration of embryo and eggshell, with hyphal penetration and internal egg colonization. In assay A, D. flagrans (AC001) and M. sinense (SF53) showed results only for type-1 effect on F. hepatica eggs, but with no significant difference (p>0.01) between them. P. chlamydosporia (VC1 and VC4) showed percentage results for ovicidal activity of type-1, -2 and -3 effects on F. hepatica eggs, with type-3 effect of 12.8% (VC1) and 16.5% (VC4); 14.4% (VC1) and 18.7% (VC4), 20.1% (VC1) and 21.5% (VC4) at seven, 14 and 21 days respectively. At the end of assay A no difference was found in the action of VC1 and VC4 for type-1, -2 and -3 effects over the three studied periods. In assay B, D. flagrans (AC001) and M. sinense (SF53) showed percentage results only for type 1 effect on S. mansoni eggs, with no significant difference (p>0.01) between them. P. chlamydosporia showed ovicidal activity on S. mansoni eggs with percentage results for type-1, -2 and -3 effects showing type 3 effect of: 26.6% (VC1) and 17.2% (VC4); 25.6% (VC1) and 22.6% (VC4); 26.3% (VC1) and 23.0% (VC4) at seven, 14 and 21 days respectively. At the end of the assay B, no difference was found in the action between the isolates VC1 and VC4 for type-1, -2 and -3 effects as well. The results of the A and B in vitro assays showed that P. chlamydosporia (VC1 and VC4) negatively affected F. hepatica and S. mansoni eggs and can therefore be used as biological control agent for these helminths. Avaliou-se, em dois ensaios experimentais (A e B), a ação in vitro de quatro isolados de fungos nematófagos dos gêneros Duddingtonia flagrans (AC001), Monacrosporium sinense (SF53) e Pochonia chlamydosporia (VC1 e VC4) sobre ovos de Fasciola hepatica e Schistosoma mansoni. Ovos de F. hepatica (ensaio A) e ovos de S. mansoni (ensaio B) foram vertidos em placas de Petri com ágar-água 2% com os isolados fúngicos crescidos, e em placas de Petri sem fungo como controle. Ao completarem sete, 14 e 21 dias, aproximadamente cem ovos foram removidos e classificados de acordo com os seguintes parâmetros: efeito do tipo 1, efeito lítico sem prejuízo morfológico à casca do ovo; efeito do tipo 2, efeito lítico com alteração morfológica da casca e embrião; e efeito do tipo 3, efeito lítico com alteração morfológica do embrião e da casca, além de penetração de hifas e colonização interna do ovo. No ensaio A, os fungos D. flagrans (AC001) e M. sinense (SF53) apresentaram resultados percentuais somente para o efeito do tipo 1 sobre os ovos de F. hepatica, porém sem apresentar diferença significativa (p>0,01) entre eles. O fungo P. chlamydosporia (VC1 e VC4) demonstrou resultados percentuais de atividade ovicida para os efeitos dos tipos 1, 2 e 3 sobre os ovos de F. hepatica, com efeito do tipo 3 de 12,8% (VC1) e 16,5% (VC4); 14,4% (VC1) e 18,7% (VC4), 20,2% (VC1) e 21,5% (VC4), respectivamente aos sete, 14 e 21 dias. Ao final do ensaio experimental A, não foi observada diferença na ação de VC1 e VC4 para os efeitos dos tipos 1, 2 e 3 ao longo dos três períodos estudados. No ensaio experimental B, os fungos D. flagrans (AC001) e M. sinense (SF53) apresentaram somente resultados percentuais para o efeito do tipo 1 sobre os ovos de S. mansoni, sem contudo apresentar diferença significativa (p>0,01) entre eles. P. chlamydosporia demonstrou atividade ovicida sobre ovos de S. mansoni com resultados percentuais para os efeitos dos tipos 1, 2 e 3 apresentando um efeito do tipo 3 de 26,6% (VC1) e 17,2% (VC4); 25,6% (VC1) e 22,6% (VC4); 26,3% (VC1) e 23,0% (VC4) respectivamente aos sete, 14 e 21 dias. Contudo ao final do ensaio experimental B, também não foi observada diferença na ação entre os isolados VC1 e VC4 para os efeitos dos tipos 1, 2 e 3. Os resultados dos ensaios experimentais in vitro A e B demonstraram que P. chlamydosporia (VC1 e VC4) influenciou de forma negativa os ovos de F. hepatica e S. mansoni, e assim pode ser considerado como um potencial candidato a controlador biológico desses helmintos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Twenty-nine isolates of Pochonia chlamydosporia were found in Meloidogyne infested-soils samples of vegetables crops from Viçosa (MG), Mariópolis (PR) and Venda Nova do Imigrante (ES). Among them, 65.52 % were identified as P. chlamydosporia var. chlamydosporia and 34.48 % as P. chlamydosporia var. catenulata. The potential of these isolates including four isolates from Alicante Spain, as biological control agents against Meloidogyne javanica on tomato plants was evaluated under greenhouse conditions. The isolates Pc-1, Pc-2, Pc-3, Pc-4, Pc-9, Pc-10, Pc-21, Pc-24, Pc-28 and Pc-64 were the most efficient in reducing the number of eggs of the nematode per root system. These isolates were re-evaluated and the most efficient were the Pc-64, originated from Alicante Spain, reducing 72.0 % the number of eggs and 10.4 % the number of galls, and the Pc-10, originated from Viçosa Brazil, reducing 60.0 % the number of eggs and 21.3 % the number of galls. The isolate Pc-10 was then used in the following experiments. When this isolate was added into the M. javanica infested-soil 7 days before the transplanting of the tomato seedlings, all chlamydospore rates (5,000, 10,000, 15,000, 20,000 or 25,000 per gram of soil) resulted in reduction of the number of eggs of M. javanica (up to 56 %), but no effect on the number the galls was observed. In the following experiment, the application of 5,000 chlamydospores/g of soil of the antagonist 15 days before the transplanting of tomato reduced in 82 % the number of eggs and in 50 % the number of galls per root system. In another experiment, the isolate Pc-10 of P. chlamydosporia was used with summer cover crops, pearl millet (Pennisetum americanum (L.) Leek) and suriname grass (Brachiaria decumbens Stapf), or winter cover crops, black oat (Avena strigosa Schreb) and oil radish (Raphanus sativus var. oliferus Metzg), for reducing Meloidogyne javanica population in the soil was studied under greenhouse conditions. The cover crops treatments, associated or not with P. chlamydosporia, reduced the root- knot nematode population. P. chlamydosporia Pc-10 alone did not reduce the number of galls or eggs of the nematode in the summer experiment. On the other hand, the fungus alone reduced the number of galls and eggs of M. javanica in the winter experiment. The isolates Pc-3, Pc-10 and Pc-19 promoted the growth of tomato seedlings on coconut fiber substrate, in vitro conditions. The fungal isolate Pc-19 colonized the rhizosphere of tomato plants and produced a large amount of chlamydospores after 15 days. Scanning microscopy revealed that the isolate Pc-10 colonized the rhizoplane of the tomato plants in this same period and the hyphae penetrated the epidermal cells. Vinte e nove isolados de Pochonia chlamydosporia foram obtidos de solos cultivados com olerícolas e naturalmente infestados com Meloidogyne spp. nos municípios de Viçosa (MG), Mariópolis (PR) e Venda Nova do Imigrante (ES). Desses isolados, 65,52 % foram identificados morfologicamente como P. chlamydosporia var. chlamydosporia e 34,48 % como P. chlamydosporia var. catenulata. Tais isolados, juntamente com mais quatro isolados de P. chlamydosporia provenientes da Universidade de Alicante, Espanha, foram avaliados quanto ao potencial de controle de Meloidogyne javanica, em casa de vegetação. Dos trinta isolados testados, os isolados Pc-1, Pc-2, Pc-3, Pc-4, Pc-9, Pc-10, Pc-21, Pc-24, Pc-28 e Pc-64 foram os mais eficientes na redução do número de ovos do nematóide por sistema radicular. Na reavaliação destes isolados, os mais eficientes foram o Pc-64, proveniente da Espanha, com redução no número de ovos e de galhas de 72 e 10,4 %, respectivamente, e o isolado Pc-10, de Viçosa, com redução de 60 % quanto ao número de ovos e de 21,3 % quanto ao número de galhas. O isolado Pc-10 foi utilizado para testes posteriores. Quando aplicado ao solo infestado com ovos de M. javanica, sete dias antes do plantio do tomate, esse isolado reduziu o número de ovos por sistema radicular quando comparado ao tratamento testemunha sem o fungo, mas não houve aumento da eficiência com o aumento da dose aplicada (5.000, 10.000, 15.000, 20.000 ou 25.000 clamidósporos/g de solo). A aplicação do fungo não reduziu o número de galhas por sistema radicular. No entanto, a aplicação deste isolado, na dose de 5.000 clamidósporos/g de solo, 15 dias antes do transplantio do tomateiro em solo infestado com o nematóide, proporcionou reduções de 50 e 82 % nos números de galhas e ovos, respectivamente. Além disso, o isolado Pc-10 de P. chlamydosporia foi aplicado ao solo cultivado com plantas de cobertura de solo de verão ou de inverno para redução da população de M. javanica, em casa de vegetação. O cultivo das plantas de cobertura de solo, tanto de verão como de inverno, em associação ou não com P. chlamydosporia, promoveu reduções significativas na população de M. javanica. No ensaio com as plantas de verão, a aplicação de P. chlamydosporia var. chlamydosporia Pc-10 nos solos em pousio (solo nu) ou em cultivo sucessivo com tomateiro, não reduziu o número de galhas ou de ovos quando comparado com suas respectivas testemunhas. No entanto, no ensaio com as plantas de inverno, o antagonista reduziu o número de galhas nesses tratamentos bem como o número de ovos no tratamento pousio solo nu. Os isolados Pc-3, Pc-10 e Pc-19 promoveram o crescimento de plântulas de tomate quando crescidas em substrato de fibra de coco colonizado. A análise em microscópio óptico das raízes de plântulas de tomate crescidas em substrato com P. chlamydosporia var. chlamydosporia Pc-19 permitiu observar que o fungo colonizou a rizosfera das plântulas em apenas 15 dias e produziu uma grande quantidade de clamidósporos. A análise em microscopia de varredura do isolado Pc-10 permitiu constatar que este isolado, além de colonizar o rizoplano das plantas, também penetra nas células epidermais da raiz de tomate.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-19Bitstream added on 2014-06-13T18:44:30Z : No. of bitstreams: 1 cardoso_er_dr_jabo.pdf: 228976 bytes, checksum: ca70e1512974c2bad475cf6b0242c931 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O uso de agentes biológicos para controle de nematóides é considerado uma das várias medidas a serem empregadas em um manejo integrado de pragas, sendo uma preocupação de caráter mundial. Contudo, foram estudados os fatores determinantes da freqüência de fungos totais e nematófagos, da atividade enzimática e da distribuição de nematóides de solos não rizosféricos e rizosféricos sob alface (Lactuca sativa L.); banana (Musa cavendishii L.); grama batatais (Paspalum notatum) e Impatiens (Impatiens valleriana). A atividade predadora dos fungos nematófagos foi avaliada contra o nematóide Panagrellus redivivus. O número de fungos totais variou de 6,9 x 105 a 31,2 x 105 UFC g-1 solo seco no solo não-rizosférico e de 6,9 x 105 a 25,6 x 105 UFC g-1 solo seco no solo rizosférico. As contagens dos fungos nematófagos corresponderam a 23-41 % e 23-34 % dos fungos totais encontrados no solo rizosférico e não-rizosférico, respectivamente. Enquanto as contagens dos fungos totais do solo rizosférico se distribuíram na seguinte seqüência: alface > banana > grama-batatais > Impatiens, os nematófagos diminuíram na seguinte ordem: alface > Impatiens > banana > grama-batatais. A matéria orgânica e a umidade do solo influenciaram a distribuição tanto dos fungos totais como dos nematófagos do solo não-rizosférico. A distribuição dos nematóides nas amostras de solo e raiz foram Rotylenchulus sp., Helicotylenchus sp. e Tylenchus sp. para alface, Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp. e Rotylenchulus sp. para banana, Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp. e Rotylenchulus sp. para grama-batatais, Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp., Rotylenchulus sp. e Tylenchus sp. para Impatiens. Em termos gerais, as atividades da desidrogenases, amilases, celulases e endoglucanases distribuíram-se no solo não-rizosférico de acordo... Biological control of nematodes is considered one of the many practices that can be used in integrated pest management. We investigated the factors affecting the frequency of the total and the nematophagous fungi, soil enzymatic activity as well as the distribution of the nematodes in rhizospheric and bulk soil of lettuce (Lactuca sativa L.); Impatiens (Impatiens valleriana); banana (Musa cavendishii L.) and Bahiagrass (Paspalum otatum). The effect of the nematophagous fungi were evaluated against the nematode Panagrellus redivivus. The total fungal number ranged from 6,9 x 105 to 31,2 x 105 UFC g-1 dry soil in the bulk soil and from 6,9 x 105 to 25,6 x 105 UFC g-1 dry soil in the rhizosphere. Nematofagous fungi counts were to 23-41 % and 23-34 % of the total fungi found in the rhizosphere and bulk soil, respectively. While the total fungi counts of the rizosphere were distributed in the following sequence: lettuce > banana > Bahiagrass > Impatiens, the nematophagous fungi decreased in the following order: lettuce> Impatiens >banana > Bahiagrass. Moisture and organic matter contents of the bulk soil influenced the distribution of the total and nematophagous fungi of the soil. The following phytonematodes found in the samples of soil and roots were Rotylenchulus sp., Helicotylenchus sp. and Tylenchus sp (lettuce), Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp. and Rotylenchulus sp (banana), Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp. and Rotylenchulus sp. (Bahiagrass), Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp., Rotylenchulus sp. and Tylenchus sp. (Impatiens). In general, the activities of the enzymes desidrogenase, amylase, celulase and endoglucanase followed the distribution of the frequency of the soil total and nematophagous fungi ...(Complete abstract, click electronic access below)

Observou-se a ação in vitro dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Verticillium chlamydosporium sobre ovos de Ascaris lumbricoides. Após sete, dez e quatorze dias de interação, o fungo promissor a ser utilizado no controle biológico de Asaris lumbricoides foi o Verticillium chlamydosporium (26-30%). Os outros fungos não foram satisfatórios. The in vitro action of the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Verticillium chlamydosporium on eggs of Ascaris lumbricoides was observed. After 7, 10 and 14 days of interaction, the fungus showing most promise for use in biologically control over Ascaris lumbricoides was Verticillium chlamydosporium (26-30%). The other fungi did not present satisfactory results.

A viabilidade de uma formulação do fungo Monacrosporium sinense foi avaliada no controle de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Dois grupos de 10 bezerros cada um, mestiços Holandês x Zebu, de seis a nove meses de idade, foram colocados em pastagem de Brachiaria brizantha. Em um dos grupos, cada animal recebeu 20g de péletes em matriz de alginato de sódio, contendo massa miceliana do fungo M. sinense via oral, duas vezes por semana, durante seis meses, com início no mês de outubro; no outro grupo, controle, os bezerros não receberam esse tratamento. As contagens de ovos por grama de fezes (OPG) e de larvas infectantes por kg de matéria seca foram maiores (P

A viabilidade de uma formulação do fungo Monacrosporium sinense foi avaliada no controle de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Dois grupos de 10 bezerros cada um, mestiços Holandês x Zebu, de seis a nove meses de idade, foram colocados em pastagem de Brachiaria brizantha. Em um dos grupos, cada animal recebeu 20g de péletes em matriz de alginato de sódio, contendo massa miceliana do fungo M. sinense via oral, duas vezes por semana, durante seis meses, com início no mês de outubro; no outro grupo, controle, os bezerros não receberam esse tratamento. As contagens de ovos por grama de fezes (OPG) e de larvas infectantes por kg de matéria seca foram maiores (P

Resumo Experimentos foram realizados para avaliar a atividade predatória in vitro e in vivo de isolados brasileiros de fungos nematófagos sobre nematóides gastrintestinais de ruminantes. Ensaio in vitro foi realizado para avaliar a atividade predatória de isolados fúngicos das espécies Arthrobotrys conoides A. cladodes A. musiformis, A. oligospora, Duddingtonia flagrans, Monacrosporium appendiculatum, M. sinense, M. thaumasium e Nematoctonus robustus sobre larvas infectantes de Strongyloides papillosus. Após sete dias de interação em superfície de ágar-água, variações inter e intraespecíficas na atividade predatória dos isolados sobre as larvas infectantes. A interação entre o fungo Duddingtonia flagrans e larvas infectantes de Haemonchus contortus foi estudada através de microscopia óptica e eletrônica de varredura. A formação de armadilhas pelo fungo ocorreu 9 h e as primeiras larvas predadas foram observadas 11 h após a inoculação das larvas sobre as colônias crescidas em superfície de membrana de diálise. Elétron-micrografias de varredura foram realizadas 12, 24, 36 e 48 h após a predação das larvas pelo fungo. Detalhes das estruturas de predação e da interação fungo-larva são descritos. Pôde ser visualizada a presença de substância mucilaginosa nos pontos de aderência da armadilha à cutícula do nematóide. A presença de bactérias foi observada em alguns pontos de interação entre o fungo e a cutícula das larvas. A penetração da cutícula pelas hifas do fungo foi evidenciada somente após 48 h de predação. A utilização do fungo predador de nematóides D. flagrans no controle dos parasitos gastrintestinais de caprinos H. contortus e S. papillosus foi investigada. Avaliou-se dinâmica de passagem de conídios e clamidósporos e micélio do fungo pelo trato digestivo de caprinos. Foram formados quatro grupos com cinco caprinos cada. No grupo A, cada animal recebeu 1x106 conídios de D. flagrans por kg de peso vivo. No grupo B, cada animal recebeu 1x106 clamidósporos por kg de peso vivo. No grupo C, cada animal recebeu 1 g de massa micelial por kg de peso vivo. No grupo 4 (grupo controle) os animais não receberam nenhum propágulo fúngico. Amostras fecais foram coletadas 3 horas antes e 12, 24, 30, 36, 42, 48, 60, 72, 84 e 96 h após a inoculação das estruturas fúngicas e colocadas em placas de Petri contendo ágar-água. Estas placas foram examinadas durante 30 dias para verificar a presença do fungo e larvas predadas. Um segundo ensaio avaliou o efeito da administração das estruturas sobre o desenvolvimento larvar em coproculturas nos intervalos de 12-24; 24-30; 30-36; 36-48; 48-60; 60-72; 72-84 e 84-96 h após o tratamento com as estruturas fúngicas. O percentual de desenvolvimento larval foi determinado usando a relação de larvas/ovos depositados nas culturas fecais. O fungo D. flagrans sobreviveu à passagem pelo trato digestivo dos caprinos e manteve sua atividade predatória, sendo observado de 12 a 96 h após a inoculação de clamidósporos e conídios. Houve redução significativa (p

Scutellonema bradys (Steiner & LeHew) Andrassy is the most important yam nematode in the State of Bahia, Brazil, being responsible for the decay of yam tubers, known as dry rot disease. Nematode-trapping fungi are potential biocontrol agents against plant parasitic nematodes. The in vitro predatory ability of Arthrobotrys musiformis Drechsler and Monacrosporium thaumasium Drechsler on S. bradys was evaluated. The fungi were grown in PDA medium, than transferred to the center of Petri dishes with 2% agar plus water. After 14 days of the fungal cultures incubation, 150 nematodes were added to the dishes. For a period of 5 days, at 24-hour intervals, the number of captured nematodes was counted. Both fungi formed trapping structures of single ring and three-dimensional adhesive network types, 24 hours after the addition of the nematodes to the fungal cultures. The percentage of nematodes captured by each fungus increased linearly with time, reaching 94.6% and 97.3% of captured nematodes by A. musiformis and M. thaumasium, respectively, at the fifth day of evaluation. Both fungi presented good predatory ability upon S. bradys. This is the first report of nematophagous fungi capturing S. bradys. Further studies should evaluate the potential of these fungi as biocontrol agents of S. bradys in yam plantations. Scutellonema bradys (Steiner & LeHew) Andrassy é o nematóide mais importante da cultura do inhame (Dioscorea cayennensis Lam.) no Estado da Bahia, Brasil, responsável pela necrose superficial das túberas, conhecida como casca preta do inhame. Os fungos nematófagos são potenciais agentes de biocontrole contra nematóides fitoparasitos. A atividade predatória de Arthrobotrys musiformis Drechsler a S. bradys foi avaliada in vitro. Os fungos foram multiplicados em meio BDA durante 15 dias, transferidos para o centro de placas de Petri contendo 2% de agar-água e após 14 dias de incubação, foram adicionados 150 nematóides. Durante cinco dias, em intervalos de 24 horas, foi quantificado o número de nematóides capturados pelos fungos. Ambos os fungos formaram estruturas de captura do tipo anéis simples e malha adesiva tri-dimensional, 24 horas após a infestação das placas com S. bradys. A percentagem de nematóides capturados por cada fungo aumentou linearmente com o tempo, atingindo 94,6% e 97,3% de captura por A. musiformis e M. thaumasium, respectivamente, no quinto dia de avaliação. Ambos os fungos apresentaram boa capacidade predatória sobre S. bradys. Esse é o primeiro relato de fungos nematófagos capturando S. bradys. Estudos futuros deverão avaliar o potencial destes agentes de biocontrole como alternativa para o controle de S. bradys em plantios de inhame.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:34:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-06-07Bitstream added on 2014-06-13T19:44:38Z : No. of bitstreams: 1 krzyzanowski_aa_dr_jabo.pdf: 810568 bytes, checksum: f1ddd45c015fb5bb8cfd48d426c11545 (MD5) Instituto Agronômico do Paraná (IAPAR) Os objetivos do trabalho foram isolar, identificar, comparar meios de cultura para crescimento, esporulação de fungos nematófagos e testá-los no controle de Meloidogyne exigua e M. paranaensis em laboratório, casa de vegetação e em cafezal infestado. Foram testados dois isolados de Arthrobotrys oligospora e um de Arthrobotrys sp., A. musiformis, Monacrosporium robustum e Paecilomyces liIacinus. Os dados obtidos revelaram que esses fungos ocorrem em diferentes agroecossistemas, têm exigências nutricionais especiais e apresentam diferentes níveis de predação para os nematóides estudados. Os meios, farelo de arroz, extrato de levedura e ágar, e o de fubá e ágar propiciaram crescimento e esporulação adequados para a maioria dos isolados estudados. A mistura de palha de café com farelo de arroz foi um substrato adequado para formulação desses fungos. Uma aplicação de 1 ou 2 L da mistura de partes iguais desse substrato colonizado pelos fungos, proporcionou a redução da população dos nematóides. No período estudado a cultura tratada não esboçou sinais de recuperação, indicando que cafezais depauperados, em solos degradados, não se recuperam com uma aplicação. Os dados também possibilitaram inferir que o controle biológico dos nematóides do cafeeiro será tanto mais efetivo quanto mais cedo forem iniciados os tratamentos, e a aplicação sistemática dos fungos, com isolados mais agressivos contra os nematóides presentes, deve ser efetuada. The objective of the research was to isolate, identify and compare culture media for growth and sporulation of nematode antagonistic fungi, and to evaluate the efficiency of these agents for biological control of Meloidogyne exigua and M. paranaensis under laboratory, greenhouse and field environmental conditions. Two isolates of Arthrobotrys oligospora, one of Arthrobotrys sp. and one of each species of A. musiformis, Monacrosporium robustum and Paecilomyces liIacinus, were also evaluated. It was observed that those fungi were very common under distinct agroecosystems, having special nutrition requirements, and also different pathogenicity levels for the nematodes above related. The culture media prepared with rice meal, malt extract and agar as well as the com meal agar favoured adequate growth and sporulation of most the isolates evaluated. The mixture of coffee straw with rice meal showed to be an adequate substrate for these fungi formulation under experimental trials. Just one application of one or two liters of a mixture of equal parts of the substrate colonized by the fungi, reduced the population of nematodes. However, the treated coffee trees did not show any sign of recovery during the period of study, indicating that weak coffee trees under poor soil conditions could not recover with just one treatment. The data also show that biological control of coffee nematodes can be more effective as early as the treatment with the fungi is applied, and, considering that it is a perennial crop, the fungi systematic application along with the selection of more aggressive isolates against the nematodes, must be done.

Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais The viability of the formulation with nematophagous fungi D. flagrans was evaluated in the biological control of cattle gastrointestinal nematodes. Two groups, with eight Holsteinzebu calves each, it was placed in two lots grazed with Brachiaria decumbens on four hectare each one. The experiment started in March of 2005 and turn off in September of 2005. In the control group (A), each animal received 20 grams without fungus of the pellets; in the treated group (B), the animals received 20 grams of with D. flagrans fungus pellets. The counting of the infective larvae recovered in the paddock of the group B, it harvested until 20 centimeters of the distance in the dung pats, it was lower than in the plot A (P

Este trabalho objetivou avaliar, in vitro e in vivo, o fungo predador Arthrobotrys musiformis, administrado via oral na forma de conídios microencapsulados em alginato ou in natura em meio líquido, após passagem pelo trato gastrintestinal de ovinos. No teste in vitro, avaliou-se a manutenção da atividade predatória, e no teste in vivo, a capacidade de controlar nematóides parasitos de ovinos naturalmente infectados, mantidos em pastagens. O resultado do teste in vitro confirmou a viabilidade de A. musiformis (95,5%), mesmo após a passagem pelo trato gastrintestinal. Na avaliação in vivo, não houve diferença estatística entre o número de ovos por grama de fezes dos grupos tratados e controle, provavelmente em razão da baixa lotação dos piquetes, da quantidade e periodicidade insuficientes de oferecimento de conídios aos ovinos, o que teria proporcionado dispersão e migração das larvas na pastagem. Contudo, os helmintos recuperados na necropsia dos animais traçadores mostraram que A. musiformis reduziu em 50,9% e 57,6% o número de Trichostrongylus colubriformis dos grupos tratados com conídios microencapsulados e in natura, respectivamente, e em 95% o número de L4 de Haemonchus do grupo tratado com conídios in natura. Embora os resultados não sejam conclusivos, A. musiformis mostrou-se promissor agente no biocontrole de nematóides parasitos gastrintestinais. The objective of the present study was to assess in vitro and in vivo the predatory fungus Arthrobotrys musiformis administered orally, in the form of alginate-microencapsulated conidia, or in natura in liquid medium after passage through the gastrointestinal tract of sheep. Maintenance of the predatory activity of the fungus was evaluated in the in vitro test, and its ability to control parasitic nematodes in naturally infested sheep maintained on pastures was analyzed in the in vivo test. The result of the in vitro test confirmed the viability of A. musiformis (95.5%) even after passage through the gastrointestinal tract. In vivo analysis revealed no difference in the number of eggs per gram between treated and control groups, probably because of the low crowding of the corrals, the insufficient amount and interval time of conidial supplying, permitting dispersal and migration of the larvae in the pasture. However, helminths recovered at autopsy from the tracer animals showed that A. musiformis reduced 50.9% and 57.6% the number of Trichostrongylus colubriformis in the groups treated with microencapsulated conidia and conidia in natura, respectively, and 95% the number of L4 larvae of Haemonchus in the group treated with conidia in natura. Despite the inconclusiveness of the results, A. musiformis was considered a promising agent in the biocontrol of gastrintestinal parasitic nematodes.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:46:52Z No. of bitstreams: 1 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:46:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) Previous issue date: 2005-09-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T17:56:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) S0100-204X2005000900013.pdf.txt: 30178 bytes, checksum: 0a1cfcf78027f182859c7b199c681a27 (MD5) Previous issue date: 2005-09-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:16:13Z No. of bitstreams: 2 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) S0100-204X2005000900013.pdf.txt: 30178 bytes, checksum: 0a1cfcf78027f182859c7b199c681a27 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:16:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) S0100-204X2005000900013.pdf.txt: 30178 bytes, checksum: 0a1cfcf78027f182859c7b199c681a27 (MD5) Previous issue date: 2005-09-01 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Este trabalho objetivou avaliar, in vitro e in vivo, o fungo predador Arthrobotrys musiformis, administrado via oral na forma de conídios microencapsulados em alginato ou in natura em meio líquido, após passagem pelo trato gastrintestinal de ovinos. No teste in vitro, avaliou-se a manutenção da atividade predatória, e no teste in vivo, a capacidade de controlar nematóides parasitos de ovinos naturalmente infectados, mantidos em pastagens. O resultado do teste in vitro confirmou a viabilidade de A. musiformis (95,5%), mesmo após a passagem pelo trato gastrintestinal. Na avaliação in vivo, não houve diferença estatística entre o número de ovos por grama de fezes dos grupos tratados e controle, provavelmente em razão da baixa lotação dos piquetes, da quantidade e periodicidade insuficientes de oferecimento de conídios aos ovinos, o que teria proporcionado dispersão e migração das larvas na pastagem. Contudo, os helmintos recuperados na necropsia dos animais traçadores mostraram que A. musiformis reduziu em 50,9% e 57,6% o número de Trichostrongylus colubriformis dos grupos tratados com conídios microencapsulados e in natura, respectivamente, e em 95% o número de L4 de Haemonchus do grupo tratado com conídios in natura. Embora os resultados não sejam conclusivos, A. musiformis mostrou-se promissor agente no biocontrole de nematóides parasitos gastrintestinais. The objective of the present study was to assess in vitro and in vivo the predatory fungus Arthrobotrys musiformis administered orally, in the form of alginate-microencapsulated conidia, or in natura in liquid medium after passage through the gastrointestinal tract of sheep. Maintenance of the predatory activity of the fungus was evaluated in the in vitro test, and its ability to control parasitic nematodes in naturally infested sheep maintained on pastures was analyzed in the in vivo test. The result of the in vitro test confirmed the viability of A. musiformis (95.5%) even after passage through the gastrointestinal tract. In vivo analysis revealed no difference in the number of eggs per gram between treated and control groups, probably because of the low crowding of the corrals, the insufficient amount and interval time of conidial supplying, permitting dispersal and migration of the larvae in the pasture. However, helminths recovered at autopsy from the tracer animals showed that A. musiformis reduced 50.9% and 57.6% the number of Trichostrongylus colubriformis in the groups treated with microencapsulated conidia and conidia in natura, respectively, and 95% the number of L4 larvae of Haemonchus in the group treated with conidia in natura. Despite the inconclusiveness of the results, A. musiformis was considered a promising agent in the biocontrol of gastrintestinal parasitic nematodes. Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Dep. de Produção Vegetal Unesp FCAV Centro de Pesquisas em Sanidade Animal Unesp FCAV Dep. de Patologia Veterinária Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Dep. de Produção Vegetal Unesp FCAV Centro de Pesquisas em Sanidade Animal Unesp FCAV Dep. de Patologia Veterinária

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:59:28Z No. of bitstreams: 1 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:59:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) Previous issue date: 2004-08-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:56:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) S0103-84782004000400043.pdf.txt: 12399 bytes, checksum: 865b26bba6a695839af2abd458d0bf22 (MD5) Previous issue date: 2004-08-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:14:36Z No. of bitstreams: 2 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) S0103-84782004000400043.pdf.txt: 12399 bytes, checksum: 865b26bba6a695839af2abd458d0bf22 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:14:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) S0103-84782004000400043.pdf.txt: 12399 bytes, checksum: 865b26bba6a695839af2abd458d0bf22 (MD5) Previous issue date: 2004-08-01 O nematóide reniforme (Rotylenchulus reniformis) é um importante patógeno de importantes culturas brasileiras, tais como soja, algodão, feijão, caupi, maracujazeiro, mamoeiro, tomate e alface, entre outras. Dentre os fungos nematófagos com potencial de utilização comercial como agentes do controle biológico de nematóides, destacam-se espécies do gênero Monacrosporium. No presente estudo, avaliou-se, in vitro, a capacidade predatória e de parasitismo de Monacrosporium robustum ao nematóide reniforme. em períodos de 24, 48 e 72 horas após, constatou-se que a percentagem de predação do nematóide pelo fungo foi de, respectivamente, 81,3, 99,9 e 100. The reniform nematode (Rotylenchulus reniformis) is an important pathogen of many of the most important Brazilian crops such as soybean, cotton, beans, cowpea, passiflora, papaya, tomato, lettuce, among others. Among the nematophagous fungi with potential of commercial utilization as agents of biological control of nematodes are the species of Monacrosporium.The predatory capacity of Monacrosporium robustum to the reniform nematode was evaluated in vitro. The percentage of predatism was 81.3%, 99.9% and 100% at 24, 48 and 72h, respectively, after inoculation. Universidade Estadual de São Paulo FCAV Departamento de Fitossanidade

The viability of a formulation of the fungus Monacrosporium thaumasium associated with ivermectin was evaluated for the biological control of bovine gastrointestinal nematode parasites. Four groups of five calves each were placed in pastures with a stocking rate of 1.6 animal/hectare. In group 1 (control), the calves did not receive any treatment. In group 2, each animal received 20g of pellets of M. thaumasium orally twice a week during a six-month period that began with the onset of the rainy season (October 23, 2000). In group 3, each animal received 20g of pellets of M. thaumasium orally twice a week during the same period as 2, as well as two strategic treatments with ivermectin (200 mcg/kg) on May 10, 2001 and July 5, 2001. In group 4, the animals were treated with ivermectin alone as described for group 3. EPG counts for group 1 were significantly greater (P< 0.01) than those for groups 2 and 3 and the difference at the end of the study period was near 100%. The EPGs of group 4 animals remained high until the first strategic treatment with ivermectin. Values for groups 1 and 4 differed significantly (P< 0.05) from those of groups 2 and 3 from December 2000 onwards. It was concluded that the use of this dose and periodicity of application of M. thaumasium pellets makes the application of anthelminthic treatments unnecessary. A viabilidade de uma formulação do fungo Monacrosporium thaumasium associada com ivermectina foi avaliada no controle biológico de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Quatro grupos de cinco bezerros foram colocados em pastagens com uma taxa de lotação de 1,6 animal/hectare. No grupo 1 (controle), os bezerros não receberam nenhum tratamento. No grupo 2, cada animal recebeu 20 g de pellets de M. thaumasium, via oral, duas vezes por semana e durante um período de seis meses que começou na estação chuvosa (23 de outubro, 2000). No grupo 3, cada animal recebeu 20g de pellets de M. thaumasium, via oral, duas vezes por semana e durante o mesmo período do grupo 2, assim como dois tratamentos estratégicos com ivermectina (200 mcg/kg) em 10 de maio de 2001 e em 5 de julho de 2001. No grupo 4, os animais foram tratados somente com ivermectina como descrito no grupo 3. As contagens de OPG dos animais do grupo 1 foram significativamente maiores (P< 0,01) do que os animais dos grupos 2 e 3 e a diferença no final do experimento foi próxima de 100%. Os OPGs dos animais do grupo 4 permaneceram altos até o primeiro tratamento estratégico com ivermectina. Os resultados do grupo 1 e 4 diferiram significativamente (P< 0,05) daqueles dos grupos 2 e 3 a partir de dezembro de 2000. Concluiu-se que a aplicação de pellets de M. thaumasium nesta dosagem e periodicidade de aplicação tornaram os tratamentos anti-helmínticos desnecessários.

A viabilidade de uma formulação do fungo Monacrosporium thaumasium (Drechsler, 1937) foi avaliada no controle biológico de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Dois grupos de sete bezerras cada, mestiças Holandês ´ Zebu, de quatro a seis meses de idade, foram colocados em pastagens de Cynodon dactilon. No grupo A, cada animal recebeu 20g de pellets (formulação granulada) de M. thaumasium via oral, duas vezes por semana, durante quatro meses, com início na estação chuvosa (outubro, 2001). No grupo B (controle), as bezerras não receberam nenhum tratamento. As contagens de ovos por grama de fezes (OPG) e das larvas infectantes encontradas na pastagem do grupo B foram significativamente maiores (P

Biological control is based on the use of microorganisms to combat populations of a specific pathogen. Nematophagous fungi have shown to be promising agents to combat nematode parasites of plants and animals. These organisms produce special structures along the hyphae, named traps, which are responsible for capturing and killing the nematode pre-parasitic stages. The growth of the isolates I31 of Arthrobotrys robusta and NF34a of Monacrosporium thaumasium was studied after submission to four different methods of preservation during eighteen months. The isolates were stored at 4ºC and cryopreserved with or without addition of cryoprotectants and stored in silica gel. The isolates did not present variation in radial growth when stored at 4ºC and frozen with or without addition of cryoprotectants. There was no significant difference between the dry mycelial mass of the isolates stored at 4ºC and those frozen after the addition of cryoprotectants. Storage in silica gel and freezing without cryoprotection interfered negatively in the capacity of the fungi to produce mycelial mass. This characteristic also was observed for sporulation of the two isolates. The behaviour of the isolates when maintained for prolonged periods under laboratory conditions is an important factor for selection of the most efficient method of preservation. O controle biológico é uma técnica baseada no emprego de microorganismos no combate a população de um patógeno específico. Os fungos nematófagos têm demonstrado serem agentes promissores no combate aos parasitos de plantas e de animais. Estes organismos produzem estruturas diferenciadas a partir das hifas, denominadas armadilhas, capazes de capturar e matar os estágios pré-parasitários dos nematóides. Foi avaliado o comportamento dos isolados I31 de Arthrobotrys robusta e NF34a de Monacrosporium thaumasium após terem sido submetidos a quatro métodos de preservação por período de dezoito meses. Os isolados foram armazenados em temperatura de 4ºC, criopreservados com e sem adição de crioprotetores e em sílica-gel. Os isolados I31 e NF34a não apresentaram variação no crescimento radial quando submetidos a armazenamento em temperatura de 4ºC e congelados com e sem adição de crioprotetores. Não foi evidenciada diferença entre a produção de massa micelial seca dos isolados armazenados em 4ºC e congelados com adição de crioprotetores. A preservação em sílica-gel e o congelamento sem crioproteção demonstraram interferir negativamente na capacidade do fungo em produzir massa micelial. Este comportamento negativo foi evidenciado também na capacidade de esporulação dos isolados. A escolha de um método eficiente de preservação destes microorganismos é uma das formas de se assegurar a capacidade predatória destes isolados após períodos prolongados de manutenção em condições laboratoriais.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O controle biológico de helmintos parasitos de bovinos é uma forma alternativa ao uso dos fármacos e tem como principal objetivo a redução do número de larvas infectantes disponíveis na pastagem. Os fungos nematófagos produzem estruturas em forma de armadilha, responsáveis pela captura e morte dos estágios pré-parasitários dos nematóides. A manutenção contínua da atividade predatória dos isolados fúngicos é um dos pré-requisitos básicos para o sucesso desta forma de controle. Neste trabalho foi verificado o comportamento dos isolados I31 de Arthrobotrys robusta e NF34a de Monacrosporium thaumasium, submetidos a manutenção em temperatura de 4 o C, criopreservados com e sem adição de DMSO e glicerol e mantidos em sílica-gel. Os resultados demonstraram que os isolados NF34a e I31 não apresentaram variação no crescimento radial, quando armazenados em temperatura de 4 o C e congelados com ou sem adição de crioprotetores. Não houve diferença na produção massal de micélio seco dos isolados quando armazenados a temperatura de 4 o C e congelados com adição de crioprotetores. O armazenamento em sílica-gel e o congelamento sem crioproteção pareceram interferir negativamente na capacidade dos fungos em produzir massa micelial. O armazenamento de NF34a em temperatura de 4 o C e o congelamento com adição de DMSO foram os tratamentos em que se obteve maior redução das larvas infectantes in vitro. Não foi verificada diferença na capacidade predatória in vitro do isolado I31 quando mantido em temperatura de 4 o C ou quando congelado com adição de DMSO ou glicerol. A manutenção dos isolados em sílica-gel e o congelamento sem crioproteção interferiram negativamente na capacidade predatória, porém estes ainda foram capazes de reduzir a população de larvas infectantes em relação ao grupo controle. No teste de passagem dos isolados pelo trato gastrintestinal de bovinos, a administração de 20 g de micélio aos animais foi suficiente para recuperação de material fúngico nas fezes e pico de redução no número de larvas infectantes nas fezes após 24 horas da administração das amostras. O isolado NF34a foi responsável pelos maiores índices de redução das populações de larvas de helmintos após a passagem pelo trato gastrintestinal dos animais e o armazenamento em 4 o C foi o tratamento em que se observou maior taxa de redução. A criopreservação parece ser um método eficiente para manutenção dos isolados, porém neste trabalho foi evidenciada diminuição da capacidade predatória do isolado NF34a. A manutenção dos isolado em sílica-gel deve ser utilizado para manutenção das amostras por períodos prolongados, quando não houver disponibilidade de nitrogênio líquido. Biological control of helminths parasites of cattle is an alternative to the use of anthelmintics, and its main goal is to reduce the amount of infective larvae in the pasture. The nematophagous fungi produce trap-shaped structures, which are responsible for capturing and destroying the pre-parasite stages of nematodes. Continuous maintenance of the fungi isolates’ predatory activity is one of the basic prerequisites for the success of this form of control. This research analyzed the behaviour of I31 isolates of Arthrobotrys robusta and NF34a isolates of Monacrosporium thaumasium, submitted to maintenance at a temperature of 4 o C, cryopreserved with and without DMSO and glicerol, and kept in silica gel. Results showed that the NF34a and I31 isolates did not present variation in radial growth when stored at a temperature of 4 o C and frozen with or without adding cryoprotectants. There was no difference in production of dry biomass by the isolates when stored at a temperature of 4 o C and frozen with added cryoprotectants. Silica gel storage and freezing without cryoprotection seemed to interfere negatively with the fungi’s capacity to produce biomass. Storing NF34a at a temperature of 4 o C and freezing it with DMSO were the treatments in which the largest in vitro reduction of infective larvae was obtained. There was no difference in terms of in vitro predatory capacity of the I31 when stored at a temperature of 4 o C or when frozen with DMSO or glicerol. Storage of the isolates in silica gel and freezing without cryoprotection interfered negatively in their predatory capacity, but they were still able to reduce the population of infective larvae in relation to the control. When the passage of isolates through the gastrointestinal tract of bovines was tested, the administration of 20 g of mycelium was enough to recover fungi material in feces and for a peak reduction of the number of infective larvae in feces 24 hours after the administration of the samples. The NF34a isolate was responsible for the largest reduction rates in helminth larvae populations following passage through the gastrointestinal tract of the animals, and storage at 4 o C was the treatment in which the largest reduction rate was observed. Cryopreservation seems to be an effective method for keeping the isolates, although, in this research, a reduction of the NF34a’s predatory capacity became evident. Storage of the isolates in silica gel should be chosen when keeping the samples for long periods of time, whenever liquid nitrogen is not available.

RESUMO - O controle dos nematódeos trichostrongilídeos é obtido através da aplicação de anti-helmínticos nos hospedeiros. Nas últimas décadas, estratégias de controle foram desenvolvidas visando a aplicação de anti-helmínticos em épocas em que as condições ambientais são desfavoráveis ao desenvolvimento dos estádios pré-parasitários. Estas estratégias apesar de serem bem sucedidas, apresentam inconveniências tais como o desenvolvimento de resistência aos princípios ativos mais comumente usados, a possibilidade de ocorrerem resíduos na carne e no leite e a ecotoxicidade de alguns compostos. Esses problemas reais e potenciais tem impulsionado estudos visando o desenvolvimento de alternativas que possam contribuir para redução ou substituição do uso desses compostos. Entre elas, o controle biológico dos estádios pré-parasitários através da ação de fungos nematófagos é uma alternativa promissora. Este artigo reúne as principais informações geradas nos estudos com estes microrganismos visando a redução do número de larvas de nematódeos trichostrongilídeos disponíveis nas pastagens. ABSTRACT - Nematophagous fungi are promising candidates for use as biological control agents to reduce the numbers of infective larvae of trichostrongylid on pasture. In the last five years research aimed at the use of nematophagous fungi to control trichostrongylid nematodes has been intensified. This paper presents a review of the current status of knowledge on the effect of this group of microorganism on the free living stages of these nematodes. Made available in DSpace on 2022-08-22T14:20:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Atividade-fungos-nematofagos-estagios-preparasitarios-nematodeos-trichostrongilideos.pdf: 4005468 bytes, checksum: 7a6046e48327723f4d627d1d522bb56d (MD5) Previous issue date: 1996