Orientador: José Luiz da Costa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Farmacêuticas Resumo: No meio ambiente, os agrotóxicos podem contaminar a água e o solo, além de acumular-se na biota, através da cadeia alimentar, podendo causar desequilíbrio ecológico. A alimentação dos tamanduás-bandeira é constituída principalmente de formigas e cupins, e a captura destes se dá através da língua. O tamanduá-bandeira come até 30 mil formigas e cupins por dia e, portanto, precisa de variados habitats para encontrar esta quantidade necessária de alimento. Assim, acredita-se que estes animais estão expostos a agrotóxicos utilizados nos cultivos agrícolas na região do Cerrado brasileiro. Este trabalho tem por objetivo avaliar a exposição do tamanduá-bandeira a agrotóxicos utilizados no Cerrado. Foi avaliada a exposição a agrotóxicos através de análises toxicológicas realizadas em amostras de sangue post mortem de animais atropelados em rodovias do estado do Mato Grosso do Sul. Também foram analisadas amostras de sangue de animais vivos, capturados e monitorados por coletes de GPS como parte do Projeto Bandeiras e Rodovias. As amostras foram armazenadas sob congelamento (-20 ºC) desde a coleta até o momento da análise. O método foi validado seguindo as recomendações do Scientific Working Group for Forensic Toxicology para análises qualitativas e quantitativas (SWGTOX). Os agrotóxicos investigados são aqueles dos principais cultivos do Cerrado (grãos, eucalipto, cana-de-açúcar e pastagens). As amostras foram submetidas ao método de extração QuEChERS (quick, easy, cheap, effective, rugged and safe). Trata-se de uma extração simples, utilizando acetonitrila seguida de uma etapa de limpeza do extrato. Dentre as vantagens deste método, destacam-se a sensibilidade na detecção de substâncias de diferentes classes químicas em um único método, a pouca quantidade de solvente utilizada e a rápida execução. Após a extração, as amostras foram analisadas em cromatógrafo líquido acoplado a espectrômetro de massas sequencial (LC-MS/MS) modelo LCMS8060 (Shimadzu, Kyoto, Japão). Oito agrotóxicos (2,4-D, aldicarbe, atrazina, carbofurano, clorpirifós, fentiona, mevinfós e fipronil) e o produto de transformação do aldicarbe (aldicarbe sulfona) foram analisados. O método foi otimizado em monitoramento de reações múltiplas (MRM). O método proposto foi validado e aplicado para as análises de sangue, a fim de se avaliar a exposição do tamanduá-bandeira aos agrotóxicos selecionados. A linearidade foi avaliada entre as concentrações de 5 ng/mL e 1000 ng/mL, exceto para o 2,4-D, que foi avaliada entre 25 ng/mL e 5000 ng/mL. Para cinco dias de análise, a curva analítica apresentou r² maior que 0,98 (1/x2), imprecisão e inexatidão menor que 20% para todos os compostos. A recuperação variou entre 10,2% e 31,9%, enquanto o efeito matriz foi melhor que 38,1%, excetuando-se o clorpirifós e a fentiona. Foram analisadas 64 amostras, sendo 27 amostras post mortem e 37 amostras de animais vivos monitorados por GPS. Os compostos selecionados não foram detectados nas amostras analisadas. Além disso, o método proposto foi avaliado quanto à correlação de concentração entre sangue total e plasma para ser utilizado em rotina no laboratório para confirmação de suspeitas de intoxicações por agrotóxicos de pacientes que são admitidos no Hospital de Clínicas da UNICAMP. O método mostrou correlação linear entre as duas matrizes testadas (r² maior que 0,99 (1/x²). A recuperação variou entre 13,9% e 24,8%, enquanto o efeito matriz foi melhor que 41,2%, excetuando-se o clorpirifós e a fentiona. Foram analisadas três amostras de casos de tentativa de suicídio, das quais duas confirmaram intoxicação por aldicarbe (aldicarbe e aldicarbe sulfona foram detectados) e a terceira confirmou intoxicação por carbofurano Abstract: In the environment, pesticides can contaminate water and soil, besides accumulating in biota, through the food chain, which can cause ecological imbalance. The feeding of giant anteaters consists mainly of ants and termites, and their capture is done through the tongue. The giant anteater eats up to 30,000 ants and termites a day and therefore needs a variety of habitats to find this necessary amount of food. Thus, it is believed that these animals are exposed to pesticides used in agricultural crops in the Brazilian Cerrado region. This work aims to evaluate the exposure of the giant anteater to pesticides used in the Cerrado. Exposure to pesticides was assessed through toxicological analyzes carried out on post mortem blood samples from animals found in highways in the state of Mato Grosso do Sul. Also blood samples from live animals, captured and monitored by GPS vests as part of the Flags and Highways Project were analyzed. The samples were stored under freezing (-20 ºC) from collection to the moment of analysis. The method was validated following the recommendations of the Scientific Working Group for Forensic Toxicology for qualitative and quantitative analyzes (SWGTOX). The investigated pesticides are those of the main Cerrado crops (grains, eucalyptus, sugar cane and pastures). The samples were submitted to the QuEChERS extraction method (quick, easy, cheap, effective, rugged and safe). It is a simple extraction, using acetonitrile followed by an extract cleaning step. Among the advantages of this method, stand out the sensitivity in detecting substances of different chemical classes in a single method, the small amount of solvent used and the fast execution. After extraction, the samples were analyzed in a liquid chromatograph tandem-mass spectrometer (LC-MS/MS) model LCMS8060 (Shimadzu, Kyoto, Japan). The total of 8 pesticides (2,4-D, aldicarb, atrazine, carbofuran, chlorpyrifos, fentiona, mevinfós and fipronil) and the aldicarb transformation product (aldicarb sulfone) were analysed. The method was optimized in multiple reaction monitoring (MRM). The proposed method was validated and applied for blood tests, in order to assess the exposure of the giant anteater to the selected pesticides. Linearity was assessed between the concentrations of 5 ng/mL and 1000 ng/mL, except for 2,4-D, which was evaluated between 25 ng/mL and 5000 ng/mL. For five days of analysis, the analytical curve showed r² value greater than 0.98 (1/x2), imprecision and inaccuracy less than 20% for all compounds. The recovery varied between 10.2% and 31.9%, while the matrix effect was better than 38.1%, except for chlorpyrifos and fenthion. 64 samples were analyzed, being 27 post mortem samples and 37 samples of live animals monitored by GPS. The selected compounds were not detected in the analyzed samples. In addition, the proposed method was evaluated for concentration correlation between whole blood and plasma to be used routinely in the laboratory to confirm suspected pesticide poisoning in patients admitted in the Hospital de Clínicas of UNICAMP. The method showed a linear correlation between the two matrices tested (r² value greater than 0.99 (1/x²). Recovery varied between 13.9% and 24.8%, while the matrix effect was better than 41.2%, except for chlorpyrifos and fenthion. Three samples of suicide attempt cases were analyzed, which two of them confirmed intoxication by aldicarb (aldicarb and aldicarb sulfone were detected) and the third confirmed carbofuran intoxication Mestrado Ciências Farmacêuticas - Insumos Farmacêuticos Naturais, Biotecnológicos e Sintéticos Mestra em Ciências