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Ethanol, methanol and water extracts representing mostly native plant species found in the Amazon region were prepared, respectively, by maceration, continuous liquid-solid extraction and infusion, followed by evaporation and freeze-drying. The freeze-dried extracts were tested for lethality toward Aedes aegypti larvae at test concentrations of 500 mg / mL. In general, methanol extracts exhibited the greatest larvicidal activity. The following 7 methanol extracts of (the parts of) the indicated plant species were the most active, resulting in 100% mortality in A. aegypti larvae: Tapura amazonica Poepp. (root), Piper aduncum L. (leaf and root), P. tuberculatum Jacq. (leaf, fruit and branch). and Simaba polyphylla (Cavalcante) W.W. Thomas (branch).Extratos aquosos, etanólicos e metanólicos, representando principalmente espécies vegetais nativas encontradas na região Amazônica, foram preparados, respectivamente, por infusão, maceração e extração contínua líquido-sólido, seguida de evaporação e liofilização. Os extratos liofilizados foram testados para atividade contra larvas de Aedes aegypti, na concentração única de 500 mg / mL. Os extratos metanólicos foram, em geral, os que apresentaram maior atividade larvicida. Os seguintes 7 extratos metanólicos das (partes das) espécies vegetais indicadas foram os mais ativos, provocando 100% de mortalidade em larvas de A. aegypti: Tapura amazonica Poepp. (raiz), Piper aduncum L. (folha e raiz), P. tuberculatum Jacq. (folha, fruto e galho) e Simaba polyphylla (Cavalcante) W.W. Thomas (galho).

Fluorescence in situ hybridization of Anopheles darlingi and A. nuneztovari demonstrated nucleolar organizer region activity at the end of the fourth larval instar, when the nucleolar organizer regions underwent gradual condensation. The heteromorphic sex chromosomes showed intraindividual size variation in the rDNA blocks located in the pericentromeric region and this coincided with the location of constitutive heterochromatin (C-banding).

An isoenzymatic comparative analysis of the variability and genetics differentiation among Anopheles species was done in populations of An. (Nys.) intermedius and An. (Ano.) mattogrossensis of the Anopheles subgenus, and of An. darlingi, An. albitarsis and An. triannulatus of the Nyssorhynchus subgenus, with the aim of detecting differences between both subgenera and of estimating the degree of genetic intere specific divergence. Samples from Macapá, State of Amapá and Janauari Lake, near Manaus, State of Amazonas, were analyzed for eight isoenzymatic loci. Analysis revealed differences in the average number of alleles per locus (1.6-2.3) and heterozygosity (0.060-0.284). However, the proportion of polymorphic loci was the same for An. (Nys.) darlingi, An. (Nys.) triannulatus and An. (Ano.) mattogrossensis (50%), but differed for An. (Nys.) albitarsis (62.5%) and An. (Ano.) intermedius (25%). Only the IDH1 (P > 0.5) locus in all species studied was in Hardy-Weinberg equilibrium. The fixation index demonstrated elevated genetic structuring among species, based on values of Fst = 0.644 and genetic distance (0.344-0.989). Genetic difference was higher between An. (Nys.) triannulatus and An. (Ano.) intermedius (0.989) and smaller between An. (Nys.) albitarsis sensu lato and An. (Nys.) darlingi (0.344). The data show interspecific genetic divergence which differs from the phylogenetic hypothesis based on morphological characters.

Trial tests and container observations were conducted in households to verify the residual effect of temephos in Manaus, Amazonas State, Brazil. Three plastic buckets, three tin cans, and three tires filled with water from an artesian well and larvicide were used in the experiment, with twenty-five third-instar larvae, which remained exposed for 24h, followed by mortality readings. The same types of containers were selected from common households. Collection and counts followed by chemical treatment were carried out on the larvae that were found. Follow-up was performed weekly to verify recolonization by Aedes aegypti.The experiment showed 100% mortality in the plastic buckets until day 90, and 80% in the tin cans until day 30, decreasing from day 45 onwards. Mortality in the tires decreased to 35% in the first month. Household results showed 100% mortality for all containers after 24h and differentiated values in the subsequent readings. Larvae were observed on day 35 in a tin can and on day 21 in a gallon can. There was a large diversity of results in the tires, with recolonization observed from day 7 onwards.Foram realizados testes experimentais e observações de recipientes nas residências para verificar o efeito residual do temefós em Manaus, Amazonas, Brasil. Na forma experimental, utilizou-se três baldes plásticos, três latas e três pneus, os quais receberam água de poço artesiano e o larvicida. Usou-se 25 larvas de 3º estádio que ficavam em exposição por 24 horas, seguindo-se a leitura da mortalidade. Selecionou-se os mesmos tipos de recipientes nas residências, realizou-se a coleta e contagem das larvas encontradas, realizando-se o tratamento químico. Semanalmente fazia-se o acompanhamento para se verificar a recolonização por Aedes aegypti. Em condições experimentais, constatou-se 100% de mortalidade no balde plástico até 90 dias do experimento, na lata 80% até o 30º dia, reduzindo-se a partir do 45º dia. Os pneus apresentaram queda na mortalidade para 35% no primeiro mês. Nas residências, observou-se 100% de mortalidade em todos os recipientes após 24 horas e resultados diferenciados nas leituras seguintes. Na lata, verificou-se larvas no 35º dia e no galão no 21º dia. Nos pneus, ocorreu grande diversidade de resultados observando-se recolonização a partir de sete dias.

The most preferred containers by Aedes aegypti were studied April and July (rainy and dry periods) in two Manaus neighbourhoods. In all, 2,700 premises and 13,912 containers were examined, most (87%) recorded outdoors. Out of the 13,100 inspected premises, only 1.6% showed to be positive for Aedes aegypti, summing up to 7,916 collected samples. Most frequently found containers outdoors in either neighbourhood regardless of rain or dry period were Bottles flasks and Storage, and indoors, Fixed, Flowerpots, and buckets. Productivity was estimated according to the number of premises and positive containers investigated, showing the actual container groups productivity. Considering both rainy and dry periods outdoors at Praça 14 the groups of Tyre, Flask, Bottle, Construction Equipment and Fixed, had the highest averages respectively. Construction Equipment and Flask groups were the most productive in Coroado in April. Flask, Construction Equipment and Storage groups stood out in July.

Various species of Anopheles (Nyssorhynchus) were studied in the Amazon with the objective of determining their importance as malaria vectors. Of the 33 known Anopheles species occurring in the Amazon, only 9 were found to be infected with Plasmodium. The different species of this subgenus varied both in diversity and density in the collection areas. The populations showed a tendency towards lower density and diversity in virgin forest than in areas modified by human intervention. The principal vector, An. darlingi, is anthropophilic with a continuous activity cycle lasting the entire night but peaking at sunset and sunrise. These species (Nyssorhynchus) are peridomiciliary, entering houses to feed on blood and immediately leaving to settle on nearby vegetation. Anopheles nuneztovari proved to be zoophilic, crepuscular and peridomiciliary. These habits may change depending on a series of external factors, especially those related to human activity. There is a possibility that sibling species exist in the study area and they are being studied with reference to An. darlingi, An. albitarsis and An. nuneztovari. The present results do not suggest the existence of subpopulations of An. darlingi in the Brazilian Amazon.Várias espécies de Anopheles (Nyssorhynchus) foram estudadas na Amazônia a fim de se determinar sua importância na transmissão da malária. Das 33 espécies de Anopheles de ocorrência conhecida na Amazônia, apenas 8 foram encontradas infectadas por Plasmodium. O principal vetor, An. darlingi, é antropofílico com um ciclo contínuo de atividade que dura a noite inteira mas que tem picos ao anoitecer e ao amanhecer. As diferentes espécies desse subgênero variaram tanto em diversidade como em densidade nas áreas de coleta. A população de anofelinos apresentou tendências de menor densidade e diversidade em florestas virgens do que em áreas que sofreram intervenção humana. Essas espécies (Nyssorhynchus) são peridomiciliares entrando nas casas para se alimentar de sangue. De imediato retiram-se e pousam-se novamente na vegetação próxima. Anopheles nuneztovari provou ser zoofílico, crepuscular e peridomiciliar. Esses hábitos podem mudar dependendo de uma série de fatores externos, especialmente aqueles relacionados com as atividades humanas. Os índices de infecção mostrados foram altos. No entanto os registros não mostram que surtos são desencadeados senão quando os casos de malária provocados pelo An. darlingi são detectados. Há possibilidade de que existam espécies crípticas na área, são estudadas com referência a An. darlingi, An. albitarsis e An. nuneztovari. Nessas circunstâncias, os resultados atuais, não sugerem a existência de subpopulações de An. darlingi na Amazônia brasileira.

In the present study, we have examined the variability in Anopheles nuneztovari mitochondrial DNA of three populations from the Brazilian Amazon and one from western Colombia (Sitronela), using four restriction endonucleases (BclI, ClaI, HindIII, SstI). The haplotype diversity (h) was slightly elevated in all populations (0.5000 to 0.6765), whereas the nucleotide diversity (pi) was lower in the Sitronela population (0.0029) and higher in populations from the Brazilian Amazon (0.0056 to 0.0098). The degree of sequence divergence (delta) estimated within the Brazilian Amazon and that in Sitronela (0.0329 to 0.0371) suggests that these geographic populations of A. nuneztovari may eventually constitute separate species. The low sequence divergence values among the three Brazilian Amazon populations (0.0012 to 0.0031) indicate that these populations are genetically similar. These results are consistent with those recently reported for allozymes of these same populations.Neste estudo, apresentamos a variabilidade no DNA mitocondrial de três populações da Amazônia brasileira e uma do oeste da Colômbia (Sitronela) de A. nuneztovari, utilizando-se quatro endonucleases de restrição (BclI, ClaI, HindIII, SstI). A diversidade haplotípica (h) foi ligeiramente elevada em todas as populações (0.5000 a 0.6765), enquanto que a diversidade de nucleotídeo (pi) foi menor na população de Sitronela (0.0029) e maior nas populações da Amazônia brasileira (0.0056 a 0.0098). O grau de divergência de seqüência (delta) estimado entre as populações da Amazônia brasileira e Sitronela (0.0329 a 0.0371) sugere que estas populações geográficas de A. nuneztovari podem eventualmente representar espécies distintas. Os valores baixos de divergência de seqüência entre as três populações da Amazônia brasileira (0.0012 a 0.0031) indicam que estas populações são geneticamente semelhantes. Estes resultados são consistentes com os reportados recentemente para aloenzimas nestas mesmas populações.

C-banding was used to study the variations in heterochromatic block markings in chromosomes of Anopheles darlingi and A. nuneztovari from Manaus, State of Amazonas, and Macapá, State of Amapá, Brazil. Both species had two differently shaped X chromosomes and a Y chromosome that was entirely heterochromatic. The X1 chromosome of A. darlingi had markings that extended 1/3 of the total length whereas in the X2 chromosome the markings were located around the centromeric region. The markings on autosomal chromosomes were concentrated in the centromeric region in both species, with a heterochromatic block in one arm of chromosome II of A. darlingi. A. nuneztovari had three heterochromatic blocks in chromosome X1 (longer) and two blocks in X2 (shorter). X2X2 females were not detected in either species. The X1 and X2 chromosomes of males were found in A. darlingi, whereas in A. nuneztovari only the X1 chromosome was detected. Only intraspecific variation was found in heterochromatic block markings in the sex chromosomes and autosomes in the two populations of both species at each location.Pela técnica do bandamento C detectou-se variação de marcação dos blocos heterocromáticos dos cromossomos de A. darlingi e A. nuneztovari de Manaus, Amazonas, e de Macapá, Amapá, Brasil. Os cromossomos sexuais de ambas as espécies mostraram duas formas de cromossomos X e o Y foi totalmente heterocromático. No cromossomo X1 de A. darlingi a marcação atingiu 1/3 e no cromossomo X2 foi apenas na região centromérica. Nos autossomos de ambas as espécies as marcações foram constantes nas regiões centroméricas, e o cromossomo II de A. darlingi mostrou um bloco heterocromático em um dos braços. A. nuneztovari mostrou polimorfismo de tamanho para o cromossomo X, tendo o X maior (X1) três blocos e o menor (X2) dois blocos heterocromáticos. Fêmeas homozigotas (X2X2) não foram detectadas nas duas localidades. Em machos de A. darlingi foram encontrados os cromossomos X1 e X2, enquanto que em machos de A. nuneztovari somente o cromossomo X1 foi detectado. Apenas variação intraespecífica de blocos heterocromáticos nos cromossomos X e nos autossomos foi registrada nas duas populações de ambas as espécies estudadas em cada localidade.

Quassinoids neosergeolide and isobrucein B, obtained from Picrolemma sprucei, have proven in vitro antitumor, antimalarial, anthelminthic, cytotoxic, insecticide and leishmanicidal activities. There is interest in the in vivo pharmacological study of these natural compounds and their semi-synthetic derivatives, however, the quantities obtained in previous extraction processes have been shown to be a limiting factor for continuation of these studies. Herein, we describe a method for obtaining grams of these quassinoids whose purification relies only on recrystallization.Os quassinóides neosergeolida e isobruceína B, obtidos de Picrolemma sprucei, possuem atividades antitumoral, antimalárica, anti-helmíntica, citotóxica, inseticida e anti-leishmania comprovadas em estudos in vitro. Há interesse no estudo farmacológico in vivo dessas substâncias naturais e de seus derivados semi-sintéticos, porém a quantidade obtida nos processos de extração tem se mostrado um fator limitante à continuação desses estudos. No presente trabalho, descrevemos um método para obtenção de gramas desses quassinóides cuja purificação depende apenas de cristalização fracionada.

Four natural Amazonian Anopheles darlingi populations were analyzed for 19 loci, 12 of which showed variation, i.e., 68.4% of polymorphic loci. The Ariquemes, Rondônia, population was the most variable, with a large number of alleles per locus (2.26 ± 0.27) and high polymorphism (P = 63.15). The highest values of observed and expected intralocus heterozygosity were observed in the Manaus, Amazonas, population (Ho = 0.432 ± 0.11; He = 0.375 ± 0.08), and the lowest in the Cachoeira Porteira, Pará, population (Ho = 0.236 ± 0.09; He = 0.290 ± 0.11). Wright's F-statistic revealed disequilibrium caused by an excess of homozygotes, as shown by the Fis > Fst values (Fis = 0.083 > 0.026) reflecting intrapopulational differentiation. The four populations studied were genetically similar, as indicated by distance and similarity values. Chromosomal variation of Amazon population also did not indicate geographical differentiation, and populations in the central region of the Amazon Basin showed high polymorphism in relation to the marginal populations, which were mainly monomorphic.

Um inquérito entomològico foi realizado na área de influência da Hidrelétrica de Balbina, situada a 146 km de Manaus, Amazonas, para avaliar os possíveis efeitos sobre as populações de Anophelese de outros culicídeos. Cinco anos após a formação do lago, An. darlingi, An. nuneztovarie An. triannulatusforam as espécies encontradas com maior freqüência nas coletas realizadas em 1. Rodovia BR-174, 2. Acceso á Usina Hidrelétrica de Balbina e 3. Área Uatumã-Morena. Para cada espécie os índices mosquito/homem/hora foram respectivamente: Area 1 - 0,57; 12,85; 0,43. Área 2 - 0; 3,75; 0,18 e Área 3 - 0; 26,38; 0,34. Representantes das duas primeiras espécies se mostraram positivas para Plasmodiumcom testes imunoenzimáticos. A prevalência de mosquitos positivos foi 1:35 para An. darlingie apenas 1:548 para An. nuneztovari.A densidade dos outros culicídeos foi baixa (Área 1 - 3,23 m/h/h; Área 2 - 4,5 m/h/h; Área 3 - 7,40 m/h/h) embora a diversidade foi comparável ( 32 espécies diferentes) com as encontradas em outras hidrelétricas construídas em rios de águas brancas ou claras da Amazônia. Nas águas pretas da Balbina, uma proliferação inicial de macrófitas foi seguida pela redução destas possivelmente pela falta de nutrientes na água. A diminuição no crescimento de macrófitas deve estar relacionada com a escassez de Mansoniasp. na área.

Of eleven proteins analyzed in four Amazonian populations, the esterases showed the greatest variation, with five activity zones. EST1, EST2 and EST5 showed variation in each of the populations studied. EST1 and EST2 are each controlled by two, and EST5 by four, codomi-nant alleles. LAP presented six activity zones, with codominant variation in LAP5and LAP6.oc—GPDH was monomorphic with one activity band on starch gel and two on polyacrylamide gel. 1DH presented two activity zones, with variation in the IDHl region. PGM had a single activity zone, with variation in all populations. The Ariquemes populations showed five alleles and the other populations three, all of then codominant. Three activity zones with two codominant alleles were observed for ODH. Aldehyde Oxidase showed two activity zones, with variation in AOl only in the Ariquemes and Porto Velho/Samuel populations. 6-PGDH showed only one activity zone and variation only in the Ariquemes population. The remaing systems - XDH, G-6-PDH and GDH. was monomorphic.

Malaria affects 300 million people worldwide every year and 450,000 in Brazil. In coastal areas of Brazil, the main malaria vector is Anopheles aquasalis, and Plasmodium vivax is responsible for the majority of malaria cases in the Americas. Insects possess a powerful immune system to combat infections. Three pathways control the insect immune response: Toll, IMD, and JAK-STAT. Here we analyze the immune role of the A. aquasalis JAK-STAT pathway after P. vivax infection. Three genes, the transcription factor Signal Transducers and Activators of Transcription (STAT), the regulatory Protein Inhibitors of Activated STAT (PIAS) and the Nitric Oxide Synthase enzyme (NOS) were characterized. Expression of STAT and PIAS was higher in males than females and in eggs and first instar larvae when compared to larvae and pupae. RNA levels for STAT and PIAS increased 24 and 36 hours (h) after P. vivax challenge. NOS transcription increased 36 h post infection (hpi) while this protein was already detected in some midgut epithelial cells 24 hpi. Imunocytochemistry experiments using specific antibodies showed that in non-infected insects STAT and PIAS were found mostly in the fat body, while in infected mosquitoes the proteins were found in other body tissues. The knockdown of STAT by RNAi increased the number of oocysts in the midgut of A. aquasalis. This is the first clear evidence for the involvement of a specific immune pathway in the interaction of the Brazilian malaria vector A. aquasalis with P. vivax, delineating a potential target for the future development of disease controlling strategies.

Malaria affects 300 million people worldwide every year and is endemic in 22 countries in the Americas where transmission occurs mainly in the Amazon Region. Most malaria cases in the Americas are caused by Plasmodium vivax, a parasite that is almost impossible to cultivate in vitro, and Anopheles aquasalis is an important malaria vector. Understanding the interactions between this vector and its parasite will provide important information for development of disease control strategies. To this end, we performed mRNA subtraction experiments using A. aquasalis 2 and 24 hours after feeding on blood and blood from malaria patients infected with P. vivax to identify changes in the mosquito vector gene induction that could be important during the initial steps of infection. A total of 2,138 clones of differentially expressed genes were sequenced and 496 high quality unique sequences were obtained. Annotation revealed 36% of sequences unrelated to genes in any database, suggesting that they were specific to A. aquasalis. A high number of sequences (59%) with no matches in any databases were found 24 h after infection. Genes related to embryogenesis were down-regulated in insects infected by P. vivax. Only a handful of genes related to immune responses were detected in our subtraction experiment. This apparent weak immune response of A. aquasalis to P. vivax infection could be related to the susceptibility of this vector to this important human malaria parasite. Analysis of some genes by real time PCR corroborated and expanded the subtraction results. Taken together, these data provide important new information about this poorly studied American malaria vector by revealing differences between the responses of A. aquasalis to P. vivax infection, in relation to better studied mosquito-Plasmodium pairs. These differences may be important for the development of malaria transmission-blocking strategies in the Americas.

Dados sobre a leucina aminopeptidase durante o desenvolvimento ontogenético em Anopheles nuñez-tovarìevidenciaram seis zonae de atividade, eendo a LAP1, LAP2, LAP4 e LAP5 presentes nos estádios larvais, pupae e adultos e a LAP3 e LAP6 características desses dois últimos estágios. Diferenças na intensidade de coloração foram detectadas conforme o estágio considerado. A LAP1 e LAP5 apresentam intensidade fraca em todos os estágios e a LAP2 e LAP4 mostram atividade intensa nos estádios larvais, diminuindo nos dois estágios subseqüentes. Considerando-se as funções das enzimas, foi admitido que a LAP3, no estágio de pupa, possa estar relacionada com a histólise dos tecidos larvais. Dos seis locidetectados, variação alélica foi constatada apenas para o locus LAP5,sendo detectados dois alelos de ação codominante. As freqüências genotípicas de progênies de fêmeas inseminadas naturalmente desviam-se significativamente do equilíbrio de Hardy-Weinberg.

Foram estudadas populações de Anopheles triannulatusprocedentes da hidrelétrica de Balbina (AM), quanto ao sistema das esterases, usando-se gel de poliacrilamida e como substrato α-naftil propionato A análise eletroforética possibilitou identificar seis zonas de atividade e o mecanismo de herança foi estudado para cinco locique foram polimórficos. Foram detectados dois alelos para as esterases 1, 2 e 4 e três para as esterases 3 e 5, sendo todos de ação codominante. Os dados de frequências gênicas mostraram-se diferentes para os alelos em cada locus.Os valores de qui-quadrados para as frequências genotípicas evidenciaram que a população não está em equilíbrio para todos os loci,sendo as frequências observadas dos homozigotos superiores as esperadas. Esses resultados foram interpretados como decorrentes de alterações ambientais que estão ocorrendo na área em estudo.

No estudo do ciclo biológico de Anopheles nuñez-tovari foram analisadas 108 posturas, totalizando 13.999 ovos. A média de ovos postos por postura foi de 128,83 + 4,85 e uma taxa de eclosão elevada de 84,06%. Foi constatado qe 89% dos ovos eclodem com 48 horas após a oviposição, mostrando, no total, um período médio de eclosão de 1,86 + 0,004 dias. A média de ovos eclodidos por postura foi de 109,39 + 5,26. Os dados de correlação entre ovos postos e ovos eclodidos evidenciaram que à medida que aumenta o número de ovos por postura há também um aumento correspondente na taxa de eclosão . Contudo, quando as posturas são reunidas em intervalos de classe de 40 ovos, constatou-se que não há correlação para algumas delas. Para as fases imaturas, verificou-se que existem diferenças no tempo de desenvolvimento, sendo o estádio 4o - pupa - o mais longo, apresentando uma média de 3,15 + 0,03 dias. A menor média foi observada para os estádios 2o - 3o com 1,46 + 0,02 dias. Valores intermediários foram constatados para os estádios 1o - 2o, 3o - 4oe estágio de pupa - adulto (2,34 + 0,02; 1,67 + 0,02 e 1,54 + 0,01 dias, respetivamente). Para o ciclo completo ovo-adulto observou-se um tempo médio de desenvolvimento de 12,02 + 0,04 dias. As maiores taxas de mortalidade foram verificadas para o 4o. estádio (19,6%0) e para o estádio até a emergência do imago, foi de 71,40%, sendo um valor elevado segundo os dados da literatura. A comparação dos períodos do desenvolvimento entre A. nuñez-tovari com A. darlingi e A. trannulatuspossibilitou considerar A. nuñez-tovari como mais próxima da primeira espécie.

Metaphase karyotypes of Anopheles (Nyssorhynchus) darlingi and Anopheles (N.) nuneztovari from Manaus and Highway BR-174 (Manaus-Boa Vista), State of Amazonas, and Macapá, State of Amapá, Brazil, showed 2n = 6. They consisted of a pair of metacentric (chromosome II) and a pair of submetacentric (chromosome III) autosomes as well as sex chromosomes X and Y. In the sex chromosomes, the X was acrocentric in A. darlingi and submetacentric in A. nuneztovari. The Y chromosome was pointed in both species. The chromosomes of A. nuneztovari were larger than those of A. darlingi except for the Y chromosome. A. nuneztovari showed size polymorphism in the X chromosome. Somatic pairing and a strong constriction around the centromeric region in chromosomes II and III were exhibited in both species. The secondary constriction was only detected in chromosome II of A. darlingi from the Manaus population and chromosome III from the Macapá population.

The residual power of deltametrine FW (25 mg 1 .a/m2) was evaluated and compared to that of DDT (2 g i.a./m2) by means of biological tests. The different kinds of material used in constructing houses in Amazonia, such as: masonry, wood, and wattle and daub, were used. Data from logistic regression showed that the drop in mortality, the inclination of the curve in relation to time, was similar for the two insecticides in the first samples. The negative coeficient for the variable, months after application, confirmed a reduction in the activity of both insecticides. Wooden and wattle walls showed positive and negative coeficiencies respectively from the beginning. The wooden walls retained a residual effect but the wattle walls were shown to be the least indicated for the application of insecticides The experiments demonstrated a more prolonged residual effect for deltametrine as compared to DDT, and that insecticides work better on brick and cement and wooden walls than they do on wattle and daub constructions. For these reasons, it would be necessary to spray brick and cement walls every 8 months, wooden ones every 9 months and wattle constructions every 7 months to control the vectors of malaria.

Ovários de Anopheles triannulatus foram dissecados 24 e 48 horas após as fêmeas terem sido alimentadas com fonte protéica (sangue), afim de se estudar o seu efeito sobre a ovogênese. Foram analisadas secçõees hisiológicas, ao nível da ultraestrutura, e observadas as mudanças morfológicas que ocorrem nas interfaces células foliculares-ovócito e célula folicular-célula. Foram observados aspectos estruturais que corroboram a hipótese da produção exógena das proteínas do vitelo. Os grânulos de vitelo originaram-se principalmente por condensação das vesículas pinocíticas formadas na superfície do ovócito.

Resumo Três amostras de populações naturais de Anopheles darlingi foram analisadas quanto às freqüências das inversões, cujas coletas foram obtidas no Km 175 da Rodovia BR-174 (Manaus/Boa Vista). Duas amostras foram coletadas durante o período da estação chuvosa e a terceira no período da estação seca. Os resultados evidenciaram o caráter altamente polimórfico das populações de A. darlingi da Amazônia e também modificações das variantes genéticas, no decorrer das amostragens. Ocorreram variações, em diferentes níveis, nas freqüências das inversões dos três pares de cromossomos e quanto às freqüências de três regiões de despareamento, sendo uma no cromossomo X e duas no cromossomo 2. Foram realizados testes de associação de inversões intra e intercromossômicas e a comparação dos resultados de cada teste, nas três amostras simultaneamente, evidenciou que uma mesma associação não está presente em duas ou três amostragens ao mesmo tempo. Essas modificações, ocorridas nos diferentes períodos, foram interpretadas como decorrentes da reestruturação da composição genética das populações, face às alterações ambientais. Altas freqüências de heterozigotos, com valores próximos ou acima de 50%, foram observadas para a maioria das inversões, porém em níveis diferentes conforme a inversão e o período de amostragem considerados. O número médio de inversões, por individuo, no estado heterozigoto, também se modificou no decorrer dos períodos, sendo os maiores valores registrados durante a estação chuvosa. Esses resultados foram discutidos considerando-se a heterogeneidade das florestas amazônicas e a estratégia adaptativa da espécie. Também é discutida a hipótese de que a constituição cariotípica dos espécimes poderia interferir nos parâmetros da capacidade vetorial da espécie.

Resumo Foi analisado o polimorfismo cromossômico de Anopheles darlingi, cuja amostra foi obtida na Rodovia BR-174 (Manaus/Boa Vista). Foram descritas duas novas inversões independentes, estendendo-se para doze o número de rearranjos de A. darlingi. Três regiões de despareamento também foram descritas, sendo uma no cromossomo X e duas no cromossomo 2. Ocorreu uma alta incidência de inversões no estado heterozigoto e o número médio por indivíduo foi elevado (4,13 ± 0.13). As freqüências elevadas e significativas de heterozigotos para a maioria das inversões foram interpretadas como indicativas de uma adaptabilidade maior dos mesmos em relação à heterogeneidade ambiental. Os testes para associação de inversões evidenciaram a ocorrência de uma associação intracromossômica (braços 3R e 3L) e quatro intercromossômicas (cromossomos X - 3 e 2 - 3). Os dados de polimorfismo cromossômico de Anopheles darlingi corroboram a hipótese de que populações centrais da área de distribuição geográfica de uma espécie são mais polimórficas que as populações marginais. As populações de A. darlingi da Amazônia são altamente polimórficas quando comparadas com as populações do sul nas quais foram fixados determinados arranjos com reduzido polimorfismo.

São relatados resultados preliminares sobre o polimorfismo protético de populuções naturais de Anopheles darlingi, procedentes de duas localidades da região amazônica-Ariquemes (Rondônia) e Rodovia PA-422 (Pará). Pata as esterases, foi detectada variação para o locus Est-2na população de Ariquemes, enquanto foi monomórfico na população da PA-422, sendo verificados nesta última, apenas indivíduos com o genótipo Est2*F/Est2*F. A freqüência do alelo Est2*F foi estimada em 0,80 na população de Ariquemes, valor este muito maior do que o observado na população da BR-174 (Manaus/Boa Vista), em estudos anteriores, que foi de 0,48. Os resultados para o sistema da leucina aminopeptidase (LAP) sugerem que a enzima é controlada por três loci, aparentemente monomórficos em ambas as populações.

Resumo São relatadas observações sobre a atividade de picar de populações de Anopheles nuneztovari que apresentam hábito exofílico e cujas coletas foram feitas no período entre 18:00 e 22:00 horas, em diferentes pontos da Rodovia BR-174 (Manaus/Boa Vista). Foi verificado que ocorrem variações no início e término da atividade de picar, contudo a mesma está concentrada no horário entre 18:30 e 19:10 horas aproximadamente.

Resumo Foram obtidos dados sobre grau de incidência e distribuição de espécies de Anopheles, de interesse epidemiológico, da área de influência do reservatório da Hidrelétrica de Tucuruí (Pará). As coletas foram desenvolvidas no período de julho a setembro de 1980 e em dois períodos de 1981 fevereiro/março e outubro/novembro. Os pontos de coleta localizaram-se ao longo das rodovias Transamazônica (BR-230) trecho Marabá-Vila Repartimento, BR-422, PA-263, rio Tocantins, Vale do Caraipé, cidade de Tucuruí, área do Canteiro de Obras e núcleos residenciais Permanente e Temporário. Foi analisado um total de 9.918 anofelinos e constatada a ocorrência de doze espécies, distribuídas nos subgêneros Nyssorhynchus, Arribalzagia e Anopheles, predominando as espécies do primeiro. Anopheles darlingi, principal vector da malária humana, foi detectado em diferentes pontos da área, tanto na forma alada como na forma larvária. Foi questionada a possibilidade de que A. nuñez-tovari, A. triannulatus e A. oswaldoi sejam vectores secundários da malária na região, pois A. darlingi foi registrada nos pontos em que ocorreram casos autóctones de malária. Contudo, como as três espécies foram registradas em altas densidades populacionais e também como A. noroestensis e A. albitarsis apresentaram distribuição ampla, sugere-se que essas espécies sejam controladas na área. É discutida a hipótese de que focos de A. darlingi, provavelmente, venham a se instalar em diferentes pontos do reservatório, assim como focos de A. nuñez-tovari, A. triannulatus, A. oswaldoi e A. albitarsis. Considerando-se que foram constatados focos de A. darlingi nas proximidades dos núcleos residenciais Permanente e Temporário, sugere-se a transformação gradativa da mata circundante em um cinturão de vegetação não densa, objetivando-se a formação de uma área de dimensão suficientemente grande para isolar os núcleos residenciais e as populações de A. darlingi localizadas nas imediações.

Resumo São discutidos dados relativos à constituição cromossômica de espécies e populações de Anopheles e também alguns aspectos relacionados a caracteres morfológicos, ecológicos e comportamentais. Especial atenção foi dada às diferenças cromossômicas entre espécies e entre populações, resultantes de rearranjos por inversões paracêntricas, detectadas pela análise do padrão de bandas dos cromossomos politênicos. Foram brevemente revisados dados relativos a espécies do complexo Anopheles maculipennis, complexo Anopheles gambiae e três espécies do subgênero Nyssorhynchus — Anopheles darlingi, Anopheles nuneztovari e Anopheles albitarsis.

São apresentados dados sobre inquérito entomológico para espécies de Anopheles rea lizado no Município de Ariquemes e discutida a incidência da malária neste Município e no Estado de Rondônia. Os resultados do inquérito entomológico na zona urbana de Ariquemes evidenciaram a diversidade de espécies nos diferentes Setores, possibilitando verificar o grau de penetração dos anofelinos na cidade. São correlacionados casos autóctones de malária e a presença do principal vetor da malária humana na Amazônia, o Anopheles darlingi. A dinâmica da transmissão da malária na zona urbana é enfocada, discutindo-se os riscos verificados para cada Setor e são apresentadas estratégias de controle, ao nível do vetor, fundamentadas no manuseio do habitat. Να zona rural estão sendo estudados parâmetros populacionais relacionados (1) à atividade de picar, abrigo natural, sí-tios de reprodução e deslocamento para hematofagia; e (2) comportamento das populações para atividade hematófaga e preferências alimentares. Os resultados, embora preliminares, evidenciam variações na densidade populacional e na diversidade de espécies, as quais devem estar relacionadas à mudanças estacionais. Variações nas preferências alimentares das espécies também foram verificadas, sendo constatada elevada antropofilia de A. darlingi. Dois parâmetros relevantes na atividade hematófaga de A. darlingi foram detectados, observando se que os anofelinos estão penetrando nas habitações petas partes inferiores e que não estão pousando nas paredes com DDΤ. Na vegetação circundante às habitações, está havendo preferência para locais de pouso, que podem ser alternativamente alto e baixo.

Dados sobre o grau de incidência e distribuição de espécies Anopheles, em Ariquemes (RO), evidenciaram que a diversidade é maior na periferia da cidade e que Anopheles darlingi é registrada em praticamente todas as localidades de coleta. O inquérito entomológico revelou níveis diferentes de penetração da espécie na área urbana, podendo-se constatar que os Setores 1 e 3 são áreas livres de malária; Setores 2 e 4 mostram riscos na periferia; e a Área Industrial e Setor de Áreas Especiais, Conjunto BNH, Setor 5 e Vila Velha constituem áreas de alto risco da malária. Nestes últimos, os índices de mosquitos por homem/hora foram os mais elevados, observando-se variações no decorrer das amostragens e conforme a localização da área urbana. Medidas de densidade populacional revelaram mudanças estacionais, sendo os menores valores registrados no período de inverno. A transmissão da malária é discutida, considerando-se: 1) o papel da estrutura física da cidade, na época da fundação, 2) os igarapés que margeam a área urbana e suas relações com o ciclo de desenvolvimento dos anofelinos, 3) os padrões comportamentais da atividade de picar das espécies correlacionados a ambientes naturais e às áreas ecologicamente alteradas, e 4) a importância do manuseio ambiental no controle da malária, para redução da densidade populacional. Para conter o processo migratório do vetor é proposto um cinturão de proteção à cidade, constituído de mata não densa, incluindo também proteção biológica para incentivar a zoofilia dos anofelinos. Os resultados de infecção natural, obtidos em áreas de autoctonia da malária, permitem citar A. darlingi como vetor, sendo discutida a possibilidade de que outras espécies estejam envolvidas na transmissão.

Trial tests and container observations were conducted in households to verify the residual effect of temephos in Manaus, Amazonas State, Brazil. Three plastic buckets, three tin cans, and three tires filled with water from an artesian well and larvicide were used in the experiment, with twenty-five third-instar larvae, which remained exposed for 24h, followed by mortality readings. The same types of containers were selected from common households. Collection and counts followed by chemical treatment were carried out on the larvae that were found. Follow-up was performed weekly to verify recolonization by Aedes aegypti.The experiment showed 100% mortality in the plastic buckets until day 90, and 80% in the tin cans until day 30, decreasing from day 45 onwards. Mortality in the tires decreased to 35% in the first month. Household results showed 100% mortality for all containers after 24h and differentiated values in the subsequent readings. Larvae were observed on day 35 in a tin can and on day 21 in a gallon can. There was a large diversity of results in the tires, with recolonization observed from day 7 onwards.

ABSTRACT This study investigated the potential of Bacillus thuringiensis isolates obtained in the Cerrado region of the Brazilian state of Maranhão for the biological control of Aedes aegypti larvae. The isolates were obtained from soil samples and the identification of the B. thuringiensis colonies was based on morphological characteristics. Bioassays were run to assess the pathogenicity and toxicity of the different strains of the B. thuringiensis against third-instar larvae of A. aegypti. Protein profiles were obtained by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Polymerase chain reaction assays were used to detect the toxin genes found in the bacterial isolates. Overall, 12 (4.0%) of the 300 isolates obtained from 45 soil samples were found to present larvicidal activity, with the BtMA-104, BtMA-401 and BtMA-560 isolates causing 100% of mortality. The BtMA-401 isolate was the most virulent, with the lowest median lethal concentration (LC50) (0.004 × 107 spores/mL), followed by the Bacillus thuringiensis var. israelensis standard (0.32 × 107 spores/mL). The protein profiles of BtMA-25 and BtMA-401 isolates indicated the presence of molecular mass consistent with the presence of the proteins Cry4Aa, Cry11Aa and Cyt1, similar to the profile of Bacillus thuringiensis var. israelensis IPS-82. Surprisingly, however, none of the cry and cyt genes analyzed were amplified in the isolate BtMA-401. The results of the present study revealed the larvicidal potential of B. thuringiensis isolates found in the soils of the Cerrado region from Maranhão, although further research will be necessary to better elucidate and describe other genes associated with the production of insecticidal toxins in these isolates.