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Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) representa un grupo muy importante de patógenos emergentes, causante de diarrea y severas enfermedades en seres humanos, tales como colitis hemorrágica o síndrome urémico hemolítico (SUH). El SUH afecta mayormente a niños menores de 5 años, es la principal causa de insuficiencia renal aguda, una de las más importantes de insuficiencia renal crónica y puede causar la muerte. El bovino es el principal reservorio y los alimentos contaminados, la principal vía de contagio al hombre. Argentina posee la mayor incidencia a nivel mundial de SUH y una alta prevalencia de VTEC en bovinos y alimentos derivados. El serotipo O157:H7 es el mayormente involucrado en los casos de enfermedad en el mundo, y en Argentina, también el más frecuentemente asociado al SUH. Sin embargo, no todos los aislamientos de O157:H7 tienen la misma capacidad de infectar y de causar enfermedad en el hombre. Estudios filogenéticos determinaron que las cepas O157:H7 integran subpoblaciones de dispersión mundial, las cuales diferirían en relación a su asociación con enfermedad. A partir del análisis comparativo de genomas, se han descripto varios métodos de subtipificación molecular, los cuales analizan distintas regiones y tipos de variación en el genoma. La combinación de los datos obtenidos por esta variedad de metodologías puede ofrecer una visión más amplia y robusta sobre la estructura poblacional y la virulencia de este serotipo. En este contexto se plantearon como objetivos conocer la diversidad genética de VTEC O157:H7 de Argentina, en particular de aquellas cepas que están circulando en la región pampeana, e identificar subtipos asociados a patogenicidad y virulencia. Para ello, se usaron distintos métodos de subtipificación molecular, tales como polimorfismos específicos de linaje (LSPA6), polimorfismos de nucleótido simple (SNP) (rhsA 3468 C>G y tir 255 T>A), análisis de múltiples loci VNTR (MLVA), y determinación de filogrupos. Por otro lado se analizó la presencia de genes relacionados con virulencia, tales como genes que codifican factores putativos de virulencia (FPV), genes codificados en plásmidos, de genes que codifican efectores no codificados en LEE (nle), presentes en islas de patogenicidad y genes que codifican factores de adherencia. Como complemento, se evaluó también, la actividad citotóxica de los aislamientos. El 98 % de ellos pertenecieron al linaje I/II (2 % al linaje II). El 100 % presentó el alelo del SNP (8_rhsA) correspondiente al clado 8. Un alto porcentaje de aislamientos presentó en alelo tir 255 T>A T, asociado a hipervirulencia, y fue asignado al filogrupo E. Según el MLVA se encontró una amplia diversidad genética. Todos los aislamientos mostraron el perfil plasmídico ehxA-espP-katP-stcE y poseyeron los genes ehaA, elfA, iha y lpfA variantes lpfA1-3, lpfA2-2 y ECSP_0242. Las frecuencias de los genes ECSP fueron 95 % ECSP_2687, 88 % ECSP_3286, 86 % ECSP_3620, 53 % ECSP_2870/2872 y 44 % ECSP_1733. Los aislamientos se agruparon en once perfiles nle, el 46 % fueron positivos para todos los genes nle, mientras que los aislamientos restantes, excepto dos, carecieron de nleF mostrando la OI-71 incompleta. Todas las cepas O157:H7, excepto el aislamiento identificado como linaje II, fueron citotóxicas en células Vero. Los resultados indican que las cepas de la región pampeana de Argentina son un grupo filogenéticamente homogéneo que presenta diversidad genética en relación a sus perfiles MLVA y de genes nle. La pertenencia de los aislamientos al clado hipervirulento 8 y al linaje I/II, la alta prevalencia del alelo tir 255 T>A T y de genes de factores putativos de virulencia, permite asignar a la mayoría de las cepas O157:H7 de esta región un alto riesgo para la salud pública. Fil: González, Juliana. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Bustamante, Ana Victoria. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Sanso, Andrea Mariel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Verotoxin-producing E. coli (VTEC) O157:H7 is the dominant serotype isolated from patients with HUS and, Argentine has the highest rate of HUS in the world. However, not all O157:H7 isolates have the same ability to infect and cause disease in humans. Molecular typing had allowed to identify subpopulations related to the origin and virulence of O157:H7 strains. Our aim was to perform a genetic characterization of 43 O157:H7 strains isolated in Argentine mostly from cattle and humans in order to establish the potential public health risk. For this purpose, a combination of molecular subtyping methods were used, lineage-specific polymorphisms (LSPA6), simple nucleotide polymorphisms (SNP) (rhsA 3468 C>G y tir 255 T>A), multiple loci VNTR analysis (MLVA) and phylotyping determination; on the other hand, analysis of genes related to virulence, such as genes encoding putative virulence determinants (FPV), factors codified in plasmids, effectors not codified in LEE (nle) and genes encoding adherence determinants. Also, the cytotoxicity activity of the isolates was evaluated. The 98 % of them belonged to lineage I/II (2 % lineage II). All isolates carried the clade 8 SNP variant (8_rhsA). A high percentage of isolates presented tir allele 255 T>A T, associated with hypervirulence, and was assigned to phylogroup E. According to MLVA, a wide genetic diversity was found. All isolates showed the plasmid profile ehxA-espP-katP-stcE and harbored ehaA, elfA, iha and lpfA variants lpfA1-3 and lpfA2-2 and, ECSP_0242. The frequencies of the remaining ECSP genes were 95 % ECSP_2687, 88 % ECSP_3286, 86 % ECSP_3620, 53 % ECSP_2870/2872 and 44 % ECSP_1733. Isolates were grouped into eleven nle profiles, 46 % were positive for all nle genes, while the remaining isolates, except two, showed incomplete OI-71, particularly lacked nleF. All O157:H7 strains, except the isolate identified as lineage II, were cytotoxic on Vero cells. Results point out that argentinean pampa region strains are a phylogenetically homogenous group, which shows genetic diversity in MLVA and nle profiles. The belonging of the isolates to hypervirulent clade 8 and lineage I/II, the high prevalence of the allele tir 255 T>A T and nle and putative virulence factors genes, would allow assigning most O157:H7 strains of this region a high risk to public health.

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) es un patógeno asociado a enfermedades transmitidas por alimentos (ETA) que causa infecciosas severas en los humanos como diarrea, colitis hemorrágica (CH) y síndrome urémico hemolítico (SUH). El SUH afecta mayormente a niños menores de 5 años, es la principal causa de insuficiencia renal aguda, una de las más importantes de insuficiencia renal crónica, y puede causar la muerte. Argentina posee la mayor incidencia a nivel mundial de SUH y una alta prevalencia de VTEC en bovinos y alimentos derivados. El ganado bovino y los alimentos cárnicos son el principal reservorio y fuente de infección de VTEC, respectivamente. Las verotoxinas son el principal carácter de virulencia pero existen otros factores asociados a la patogénesis por VTEC, algunos de ellos codificados en islas de patogenicidad (PAI). La evaluación de los genes de virulencia contenidos en las PAI es una nueva herramienta para determinar el potencial riesgo de estas cepas en la salud pública, ya que éstas desempeñan un papel importante en la patogenicidad de la VTEC. Una evaluación de riesgo molecular (MRA) basada en la evaluación del contenido de genes nle se ha utilizado para predecir qué cepas representan un riesgo para los seres humanos. La clasificación de VTEC utilizando métodos filogenéticos ha mostrado que algunos serotipos se agrupan de acuerdo a su impacto en salud pública. Uno de estos métodos es la tipificación de secuencias de múltiples loci o MLST, el cual puede contribuir a establecer el riesgo que algunos aislamientos pueden presentar para la salud pública. Por otro lado, la identificación de los clones/linajes es importante ya que varias características, entre ellas la propensión a causar enfermedades, varía con el origen filogenético de VTEC. En relación a la diversidad filogenética y a la similitud con clones existentes en otras partes del mundo, asociados a enfermedad en seres humanos, no hay estudios previos realizados en cepas VTEC nativas, por lo cual, se desconocen qué clones de VTEC, especialmente no-O157:H7, están circulando en Argentina. El objetivo de esta tesis fue caracterizar la diversidad genética de las cepas VTEC no-O157:H7 nativas aisladas de diversas fuentes, principalmente ganado bovino y alimentos, identificar qué clones están circulando en el país para determinar las relaciones filogenéticos entre las cepas y compararlas con cepas de diferentes orígenes geográficos, especialmente con aquellas de casos clínicos en humanos, y evaluar las características relacionadas con virulencia de los mismos, con el fin de identificar el potencial riesgo que estas cepas pudieran tener para la salud pública. Para llevar a cabo este objetivo, se determinó el secuenciotipo (ST) de 59 aislamientos VTEC pertenecientes a 42 serotipos mediante MLST. Por otro otro lado, se determinó la distribución de genes ubicados en las PAI OI-36 (nleB2, nleC, nleD, nleH1-1), OI-57 (nleG2-3, nleG5-2, nleG6-2), OI-71 (nleA, nleF, nleG, nleG2-1, nleG9, nleH1-2), y OI-122 (nleB, nleE, ent/espL2, Z4321, Z4326, Z4332, Z4333) en 204 aislamientos de bovinos, alimentos y seres humanos pertenecientes a 52 serotipos no-O157:H7 y, en las cepas que resultaron positivas para el gen nleB, se determinaron sus niveles de expresión mediante reacciones de cuantificación relativa por PCR en tiempo real. En cuanto a la caracterización de los genes codificados en PAI, se encontraron diferencias en la frecuencia de los marcadores genéticos y una gran diversidad de perfiles de virulencia. En la mayoría de las cepas eae-negativas, solo estuvo presente el módulo 1 (Z4321) de OI-122. Sin embargo, se detectaron algunas cepas eae-negativas inusuales, que presentaron además de Z4321 otros genes de las PAI estudiadas. El análisis de agrupamiento, sin tener en cuenta los aislamientos que resultaron negativos para todos los genes, definió dos grupos principales: i) aislamientos eae-negativos (caracterizado por incluir seropatotipos -SPT- D, E o sin determinación, y aislamientos de origen bovino o alimentos); ii) eae-positivos (principalmente caracterizado por incluir aislamientos pertenecientes a SPT B, C, o no determinado). El análisis de MLST utilizando la base de datos EcMLST identificó 38 ST, de los cuales 17 (45%) fueron nuevos (algunos de ellos con alelos aún no registrados), en 18 serotipos. Quince de los 38 ST identificados se agruparon en 11 grupos clonales (CG) y 23 no fueron agrupados en ninguno de los CG definidos. En algunos serotipos, se determinaron diferentes ST. Los resultados mostraron un alto grado de heterogeneidad filogenética entre las cepas estudiadas, que varios de los aislamientos de bovino y alimentos pertenecieron a los mismos ST que comúnmente se asocian con casos clínicos en humanos en diversas áreas geográficas y la presencia de numerosos linajes emergentes en la región. De acuerdo a los análisis de expresión basal relativa del gen nleB se encontraron niveles de expresión heterogéneos entre las cepas estudiadas. No se encontraron diferencias significativas en los niveles de expresión asociadas al origen de los aislamientos (bovino y humano) ni al serotipo pero si entre el grupo proveniente de SUH y el no-SUH. Por otro lado, aislamientos no-O157:H7 pertenecientes a los serotipos O145:NM (bovino y humano) y O146:H21 (bovino) presentaron niveles de expresión de nleB superiores al control, una cepa O157:H7 aislada de un niño con SUH. En base al esquema de MRA analizado, los aislamientos eae-positivos con mayor potencial de virulencia fueron aquellos pertenecientes a los serotipos O5:NM, O26:H11, O38:H39, O111:H2, O118:H2/H16, O121:H19, O145:NM, O146:H21 y O165:NM. En relación a los aislamientos eae-negativos, se plantea la necesidad de utilizar marcadores adicionales que permitan predecir el potencial riesgo de causar enfermedad en seres humanos. VTEC representa un grave problema para la salud pública. Argentina tiene la mayor incidencia de SUH en el mundo y este estudio proporciona los primeros datos sobre los clones VTEC no-O157:H7 que están circulando en nuestra región. Los resultados mostraron que algunos de ellos pueden representar un alto riesgo zoonótico y esta información es importante para desarrollar iniciativas en salud pública. Fil: Cadona, Jimena Soledad. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Sanso, Andrea Mariel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Bustamante, Ana Victoria. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Verotoxigenic Escherichia coli (VTEC) is a pathogen associated with foodborne diseases that causes severe infectious diseases in humans such as diarrhea, hemorrhagic colitis (HC) and haemolytic uraemic syndrome (HUS). HUS mainly affects children under 5 years old, it is the main cause of acute renal failure, one of the most important causes of chronic renal failure and it can cause death. Argentina has the highest incidence worldwide with high frequency and prevalence of VTEC in bovines and derived foods. Cattle and meat foods are the main reservoir and source of VTEC infection, respectively. Verotoxins are the main virulence character but there are other factors associated with VTEC pathogenesis, some of them encoded in pathogenicity islands (PAIs). The evaluation of virulence genes in PAIs is a new tool to determine the risk potential of these strains in public health since they are played an important role in the pathogenicity of VTEC. A molecular risk assessment (MRA) based on the evaluation of gene content has been used to predict which strains pose a risk to humans. The classification of VTEC using phylogenetic methods has shown that some serotypes are grouped according to their impact on public health. One of these methods is the multilocus sequence typing or MLST, which can contribute to establishing the risk that some isolates can present for public health. On the other hand, the identification of clones/lineages is important since several characteristics, among them, the propensity to cause diseases, is related to the phylogenetic origin of VTEC. In this case, there are no previous studies carried out on native VTEC strains, so it is unknown which clones of VTEC, especially non-O157:H7, are circulating in Argentina. The objective of this thesis was to characterize the genetic diversity of native VTEC nonO157:H7 strains from diverse sources, mainly cattle and food, identify which clones are circulating in the country to determine the phylogenetic relationships between strains, compare them with strains of different geographical origins, especially with clinical cases strains, and evaluate the characteristics related to the virulence of them, in order to identify the potential risk that these strains have for public health. To carry out our objective, the sequence types (STs) in a total of 59 VTEC isolates belonging to 42 serotypes were determined using MLST. On the other hand, the distribution of genes in PAIs OI-36 (nleB2, nleC, nleD, nleH1-1), OI-57 (nleG2-3, nleG5-2, nleG6-2), OI-71 (nleA, nleF, nleG, nleG2-1, nleG9, nleH1-2), and OI-122 (nleB, nleE, ent/spL2, Z4321, Z4326, Z4332, Z4333) were analyzed in 204 isolates of bovines, humans and food belonging to 52 nonO157:H7 serotypes and, in the strains that were positive for the nleB gene, their expression levels were determined by means of relative quantification reactions by real-time PCR. Regarding the characterization of the genes encoded in PAIs, differences in the frequency of genetic markers and a great diversity of virulence profiles were found. In most of the eaenegative strains, only module 1 (Z4321) of OI-122 was present. However, some unusual eaenegative strains were detected, which presented in addition to Z4321 other genes of the PAIs studied. The cluster analysis, without taking into account the isolates that were negative for all the genes, defined two main groups: i) eae-negative isolates (characterized by including seropathotypes -SPTs- D, E or without determination, and bovine or food isolates); ii) eaepositive (mainly characterized by including isolates belonging to SPTs B, C, or not determined). The MLST analysis using the EcMLST database identified 38 STs, of which 17 (45%) were new STs (some of them with alleles not yet registered), in 18 serotypes. Fifteen of the 38 STs identified were grouped into 11 clonal groups (CGs) and 23 were not grouped in any of the CGs defined by the database. In some serotypes, different STs were determined. The results showed a high degree of phylogenetic heterogeneity among the strains studied, that several cattle and food isolates belonged to the same STs that are commonly associated with clinical cases in humans in different geographical areas and demonstrated the presence of numerous emerging lineages in the region. According to the relative basal expression analyzes of the nleB gene, heterogeneous expression levels were found among the strains studied. No significant differences were found in the levels of expression associated with the origin of the isolates (bovine and human) or serotype but did between the group from HUS and non-HUS. On the other hand, isolates non-O157 belonging to the serotypes O145:NM (cattle and human) and O146:H21 (cattle) presented higher nle expression levels than the control sample, a strain O157:H7 isolated from a child with HUS. Based on the MRA scheme analyzed, eae-positive isolates with increased virulence potential were those belonging to serotypes O5:NM, O26:H11, O38:H39, O111:H2, O118:H2/H16, O121:H19, O145:NM, O146:H21 y O165:NM. Regarding to eae-negative isolates, the need to use additional markers to predict the potential risk of causing disease in humans is proposed. VTEC represents a serious problem for public health. Argentina has the highest incidence of HUS in the world and this study provides the first data about the non-O157: H7 VTEC clones that are circulating in our region. The results showed that some of them could represent a high zoonotic risk and this information is important to develop public health initiatives.

FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais A superordem Xenarthra é formada por duas ordens, Cingulata (tatus) e Pilosa (preguiças e tamanduás). Existe pouca informação sobre anatomia patológica destes animais na literatura, portanto este trabalho teve o objetivo de descrever a patologia da superordem Xenarthra de vida livre e cativeiro no Brasil, por meio de um estudo observacional. Foram utilizados 141 animais de cinco estados (São Paulo, Minas Gerais, Bahia, Mato Grosso do Sul e Amazonas), de diferentes procedências, contendo 32 animais de cativeiro e 109 de vida livre. 44 animais foram mortos por atropelamentos e 10 por queimaduras. Outras doenças e alterações significativas estão relacionadas com distúrbios metabólicos (acúmulo de ferro, mineralização e deficiência de taurina), parasitas protozoários e metazoários, doenças infecciosas como candidíase, esporotricose, clostridiose e uma suspeita de cinomose e distúrbios proliferativos incluindo três casos de carcinoma de células escamosas. Uma quantidade significativa destes achados não haviam ainda sido descritos em Xenarthra. Concluindo, as lesões aqui descritas podem ter serventia como fonte de conhecimento e de contribuição para a melhoria de trabalhos de conservação destas espécies. The Xenarthra superorder is composed by two orders, Cingulata (armadillos) and Pilosa (sloths and anteater). There is little information concerning anatomic pathology of these animals in the literature, thus this work aimed to describe the pathology of Xenarthra from wildlife and captivity in Brazil, through an observational study. We used 141 animals from five states (São Paulo, Minas Gerais, Bahia, Mato Grosso do Sul and Amazonas) from different sources, containing 32 captive and 109 free living animals. 44 animals were killed by runovers and 10 by burns. Other diseases and significant changes are related to metabolic disorders (iron storage, mineralization and taurine deficiency), protozoan and metazoan parasites, infectious diseases such as candidiasis, sporotrichosis, clostridiosis and a suspected distemper, and proliferative disorders including three cases of squamous cell carcinoma. A significant amount of these findings have not yet been described in Xenarthra. Concluding, lesions described herein may serve as reference for wildlife forensics; and as a contribution to the improvement of conservation efforts of these species.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A esporotricose é uma infecção fúngica crônica profunda da pele causada pelo gênero Sporothrix spp. Pode se apresentar na forma cutânea, linfo-cutânea e extracutânea, embora esta última ainda sem muitos estudos e esclarecimentos. O objetivo desse trabalho foi caracterizar por histopatologia e imuno-histoquímica, as lesões cutâneas e extracutâneas da esporotricose e comparar os diferentes métodos diagnósticos em gatos da região metropolitana de Belo Horizonte. No período de março de 2018 a março de 2019, foram avaliados 110 gatos resgatados pelo Centro de Controle de Zoonoses de Belo Horizonte, com suspeita clínica de esporotricose felina, confirmada ou não por cultivo e isolamento. Os gatos com impossibilidade de serem tratados foram eutanasiados. Após a eutanásia, os animais foram avaliados por exames macroscópico, citopatológico, histopatológico e imuno-histoquímico. Testes moleculares para a confirmação da espécie de Sporothrix também foram realizados. Dos 110 animais, 74 foram positivos para Sporothrix spp. por coloração de rotina, 30 por imuno-histoquímica e 2 somente por cultura fúngica e PCR. A citopatologia e a histopatologia foram eficientes no diagnóstico da doença, embora em gatos com lesões contendo carga fúngica baixa, a imuno-histoquímica foi necessária para a confirmação do agente. Os achados histopatológicos mais comuns na pele foram: dermatite piogranulomatosa, dermatite histiocitária e plasmocitária e dermatite granulomatosa, com intensidades variadas na quantidade de leveduras nas lesões. Os achados extracutâneos foram rinite/rinosinusite histiocitária e plasmocitária ou piogranulomatosa, linfadenite histiocitária sinusoidal, linfadenite granulomatosa, pneumonia histioplasmocitária e neutrofílica, conjuntivite histiolinfoplasmocitária, glossite granulomatosa, periorquite granulomatosa e necrosante e meningite histiocitária, todos com presença de leveduras em diferentes intensidades. Em quatro dos 110 gatos com lesões cutâneas ulcerativas, foram diagnosticados três casos com carcinoma de células escamosas e um caso de nocardiose cutânea, sendo considerados importantes para o diagnóstico diferencial. Sporotrichosis is a chronic deep fungal infection of the skin caused by the genus Sporothrix spp. The disease has cutaneous, lympho-cutaneous and extracutaneous forms, although the last one has not been studied and clarified yet. The aim of this study was to characterize by histopathology and immunohistochemistry exams, the cutaneous and extracutaneous lesions of sporotrichosis in cats from metropolitan region of Belo Horizonte. In the period from March 2018 to March 2019, 110 cats rescued by the Zoonoses Control Center of Belo Horizonte, were evaluated with clinical suspicion of feline sporotrichosis, confirmed or not by culture and isolation. Cats unable to be treated were euthanized. After euthanasia, the animals were evaluated by macroscopic, cytopathological, histopathological and immunohistochemical exams. Molecular tests to confirm the Sporothrix species were also performed. Out of 110 animals, 74 were positive for Sporothrix spp. on routine hematoxylin and eosin staining, 30 by immunohistochemistry and two only by fungal culture and PCR. Cytopathology and histopathology exams were efficient in the diagnosis of the disease, although in cats with lesions containing low fungal load, immunohistochemistry was needed to confirm the agent. The most common histopathological findings on the skin were pyogranulomatous dermatitis, histiocytic and plasmacytic dermatitis and granulomatous dermatitis, with different amount of yeasts in the lesions. The extracutaneous findings were histiocytic and plasmacytic or pyogranulomatous rhinitis/rhinosinusitis, sinusoidal histiocytic lymphadenitis, granulomatous lymphadenitis, histioplasmacytic and neutrophilic pneumonia, histiolymphoplasmacytic conjunctivitis, granulomatous glossitis, granulomatous and necrotic periorchitis and histiocytic meningitis, all with many different numbers of yeasts. In four of the 110 cats with ulcerative skin lesions, other diseases were diagnosed; three cases of squamous cell carcinoma and one case of cutaneous nocardiosis, being considered important for the differential diagnosis.

La salmonelosis no tifoidea es la segunda zoonosis transmitida por alimentos más importante en la Unión Europea (UE). El ganado porcino es, tras la avicultura, la segunda fuente de infección más importante, existiendo una relación directa entre el consumo de carne de cerdo contaminada por Salmonella y la infección en humanos. Teniendo en cuenta que España es a la vez el país con mayor prevalencia de salmonelosis porcina y el segundo productor de carne de cerdo de la UE, el control de la infección por Salmonella a lo largo de la cadena de producción porcina debe ser una obligación para un país que exporta más de la mitad (51%) de la carne de cerdo que produce (MAPAMA, 2018b).El estudio de la epidemiología de la salmonelosis porcina en la explotación es fundamental para conocer los factores de riesgo y poder aplicar las medidas preventivas correspondientes para su control efectivo. La contaminación por Salmonella de las canales de cerdo en el matadero, procedente mayoritariamente de la excreción de la bacteria por los animales que llegan para sacrificio, es uno de los principales factores de riesgo en la contaminación de la carne y la consiguiente infección de las personas. Así, con el primer artículo de esta Tesis Doctoral (Publicación I: Influence of on-farm pig Salmonella status on Salmonella shedding at slaughter) se trata de esclarecer la posible relación entre el estatus serológico frente a Salmonella de los cerdos en la fase final del ciclo de producción (cebo) y la excreción de Salmonella de los animales una vez llegan al matadero. Para ello se obtuvieron muestras serológicas de 202 cerdos a lo largo del periodo de cebo junto con muestras de nódulos linfáticos mesentéricos (NLM) y de heces en el sacrificio. Ello nos permitió estudiar la dinámica natural de la infección por Salmonella en el cerdo durante la fase de cebo y hasta llegar al matadero. Se observó que los cerdos que excretaban Salmonella en el matadero habían seroconvertido antes durante la fase de cebo, mostrando unos valores serológicos al llegar al matadero significativamente más elevados que los cerdos que no excretaron Salmonella, estableciendo una relación positiva entre el estatus serológico frente a la infección en la granja y la excreción en el matadero. Sin embargo, una proporción importante (26,1%) de cerdos seronegativos durante el cebo y sin detección de la bacteria en NLM acabaron excretando Salmonella en el matadero, lo que podría estar relacionado con la exposición de los cerdos a ambientes muy contaminados por Salmonella (el camión de transporte y los establos del matadero). Por otra parte, el riesgo de excreción de Salmonella en el matadero fue significativamente superior en aquellos cerdos en los que se aisló la bacteria en NLM (PEntender la posible relación entre el estatus serológico de los cerdos durante el cebo y la excreción de Salmonella en el matadero abriría la puerta a nuevas estrategias de control de la infección dentro de los denominados Programas Nacionales de Control de la Salmonelosis Porcina. Desde 1995 se han puesto en marcha en diferentes países europeos planes nacionales con el objetivo de disminuir la prevalencia de infección de Salmonella en las explotaciones porcinas, pero a excepción de los países escandinavos, los resultados obtenidos no parecen haber sido satisfactorios en la mayoría de los países donde se han llevado a cabo. Esta problemática se aborda en la Publicación II (Looking for new approaches for the use of serology in the context of control programmes against pig salmonellosis) donde, basándonos en los resultados del primer artículo y en un estudio más detallado de la relación entre serología frente a Salmonella en la explotación y la excreción en matadero, se plantea un nuevo enfoque para estos programas. Este enfoque se centra en evitar en lo posible la contaminación del matadero tras predecir el riesgo de excreción de Salmonella que presentan los animales que llegan al mismo. Ello permitiría aplicar con suficiente antelación (tanto los días previos en la granja como durante su estancia en los establos del matadero) posibles medidas que redujeran la excreción y por lo tanto la consiguiente contaminación del matadero. Para este trabajo se analizaron muestras de suero de 6 lotes de cerdos cebados entre 2010 y 2016. Los sueros se recogieron a los 30, 60 y 90 días del periodo de cebo y antes del sacrificio. En el matadero también se recolectaron muestras de heces de los mismos animales. Se encontró una relación significativa positiva entre los valores serológicos a los 60, 90 días y antes del sacrificio y la excreción de Salmonella en matadero. Los cerdos con valores serológicos más elevados en esos momentos del muestreo tuvieron mayor riesgo de excretar la bacteria al llegar al matadero. Un cerdo muestreado a los 90 días del periodo de cebo con un porcentaje de densidad óptica (%DO) igual a 10 presentó una probabilidad del 43% de excretar la bacteria. Esta probabilidad se incrementaba hasta el 65% para un cerdo con un %DO=40. Por lo tanto, la serología en la explotación podría ayudar a predecir la probabilidad de excreción de Salmonella en el matadero, convirtiéndose en una herramienta de diagnóstico eficaz.Tras quedar patente la importancia del estatus sanitario frente a Salmonella de los cerdos durante el periodo de cebo, parecía evidente la necesidad de evaluar posibles estrategias de control de la infección durante esta etapa. Aunque tradicionalmente el control de las infecciones entéricas se ha llevado a cabo mediante el uso de antibióticos (bien como terapéuticos, metafilácticos o como promotores del crecimiento), el aumento de las resistencias a los antimicrobianos impide su uso generalizado en estas fases finales de producción, siendo necesaria la búsqueda de alternativas. A la gran variedad de aditivos con efecto antimicrobiano in vitro autorizados por la UE, se une la diversidad de protocolos de actuación y dosificación existentes, por lo que en ocasiones puede resultar complicada la elección de una pauta de administración idónea. De entre todos ellos, los ácidos orgánicos (AO) han sido uno de los más estudiados debido a su patente efecto antimicrobiano in vitro. Por este motivo, en las dos publicaciones siguientes se evalúa la eficacia in vivo de la administración al pienso de cebo de un AO, el butirato sódico, que ya ha demostrado con anterioridad su eficacia in vitro frente a Salmonella. Para este estudio se realizaron varios ensayos de campo en un cebadero comercial de pequeño tamaño (≈100 animales distribuidos en 8 cuadras). La mitad de los animales recibieron pienso adicionado con butirato sódico (grupo tratamiento –GT-) durante toda la fase de cebo (aproximadamente 3,5 meses) y la otra mitad consumieron el mismo pienso sin el aditivo (grupo control –GC-). Se obtuvieron muestras de heces y suero de los cerdos de los dos grupos de forma periódica y durante todo el periodo de tratamiento. Tras el sacrificio se recogieron también muestras de heces y de NLM en el matadero.En el primer ensayo (Publicación III: Effect of the addition of protected sodium butyrate to the feed on Salmonella spp. infection dynamics in fattening pigs), se realizaron dos réplicas y se evaluó la eficacia del butirato sódico protegido a base de una grasa vegetal (GUSTOR BP70®, Norel S.A., Madrid, Spain) y administrado a una concentración de 3 kg/t de pienso. Cuando los resultados de las dos réplicas se analizaron en conjunto, se observó en el GC un aumento significativo del riesgo de excreción a los 90 días de cebo y una vez en el matadero. También se detectó una tendencia descendente significativa de los valores serológicos en el GT y, por lo tanto, de la seroprevalencia en fechas previas al sacrificio. El segundo ensayo, de una sola réplica, se presenta en la Publicación IV (Use of a new form of protected sodium butyrate to control Salmonella infection in fattening pigs), donde se evaluó la eficacia del mismo butirato sódico pero encapsulado de forma diferente, con una fórmula de ácidos grasos destilados de coco (DICOSAN +®, Norel S.A., Madrid, Spain). Se administró a la misma concentración que en el ensayo anterior (3 kg/t) durante los 3,5 meses de duración del periodo de cebo. Los resultados este ensayo mostraron una reducción significativa en el número de cerdos infectados (61% vs. 4%; PLa realización de estos dos ensayos ha permitido obtener interesantes resultados sobre la eficacia del uso de butirato sódico de cara a poder utilizarlo como alternativa a los antimicrobianos para el control de la infección y excreción por Salmonella en los cerdos de cebo.La última parte de este trabajo de Tesis Doctoral se dedica a estudiar una de las grandes lagunas existentes en la epidemiología de la salmonelosis porcina: la infección en los lechones lactantes. La información acerca de la epidemiología de la infección por Salmonella en condiciones de campo durante esta etapa del ciclo productivo es escasa, principalmente debido a la complejidad y coste de los ensayos a realizar, al ser necesario el sacrificio de un gran número de animales jóvenes para disponer de datos precisos de prevalencia de infección. Por esta razón, los estudios realizados hasta el momento se han llevado a cabo mayoritariamente mediante técnicas poco sensibles para la detección de Salmonella (muestreos fecales mediante uso de hisopos rectales), posiblemente infra estimando los resultados de prevalencia reales. En la Publicación V (Weaned piglets: another factor to be considered for the control of Salmonella infection in breeding pig farms) se aborda este estudio aprovechando la disponibilidad de lechones de 4 semanas de vida sacrificados en un matadero comercial. De esta manera se disponía de diferentes tipos de muestras (contenido intestinal, NLM y músculo diafragmático) que permitieron un estudio más exhaustivo de cada animal analizado. Se observó que la prevalencia de infección y excreción en lechones fue elevada (≈36%), muy superior a lo publicado en estudios previos, sugiriendo que los lechones desempeñaban un papel activo en el mantenimiento de Salmonella en las explotaciones. También se observaron valores serológicos significativamente más altos en lechones no infectados que en lechones infectados (valores medios de %DO de 17,3 vs. 12,0; respectivamente; P=0,002), lo que indicaba un posible efecto protector del calostro frente a la infección. El 75% de las cepas de lechones analizadas estaban genéticamente relacionadas con cepas aisladas de cerdas de la misma explotación, sugiriendo una activa circulación de cepas de Salmonella entre cerdas y lechones. Se concluyó que la mejora de la calidad del calostro y de su ingesta por parte de los lechones, junto con la reducción de la excreción en las cerdas, ayudaría a controlar la infección por Salmonella en las granjas de producción.

182 p. La enfermedad de Lyme es causada por la transmisión de la bacteria llamada Borrelia burgdorferi. Esta tesis tiene como objetivo el estudio de la respuesta inmune de los macrófagos a B. burgdorferi, centrándonos en los elementos involucrados en su actividad fagocítica y la posterior respuesta inflamatoria mediada por estas células, a fin de comprender más profundamente la interacción de este tipo de células y la bacteria. Mediante enfoques analíticos de gran escala, como la transcriptómica y la proteómica, hemos estudiado en macrófagos murinos y humanos, las rutas de señalización implicadas en la fagocitosis de este patógeno, y hemos descrito un conjunto de receptores de membranas responsables de su ingestión y eliminación. Nuestro estudio ha permitido el descubrimiento y descripción de los receptores CD180 y CD64 como elementos moduladores y mediadores de la respuesta inmune a B. burgdorferi, así como del consiguiente proceso inflamatorio. También hemos esclarecido la importancia y el comportamiento de diferentes factores de señalización, como SHIP1, FcR¿, Syk y MyD88, revelando la existencia de una compleja conexión entre las familias de los receptores que intervienen en el proceso de fagocitosis de este patógeno. Este conocimiento conducirá a una mejor comprensión del rol de los macrófagos en respuesta a B. burgdorferi, arrojando luz sobre los síntomas inflamatorios observados durante la borreolisis de Lyme y revelando nuevas dianas terapéuticas para un tratamiento más efectivo de la enfermedad. CICbioGUNE

Campylobacter fetus subsp. venerealis y Campylobacter fetus subsp. fetus son agentes causales de la campylobacteriosis genital bovina (CGB), una de las enfermedades reproductivas más importantes en los rodeos bovinos de Argentina. Hasta la actualidad, se han realizado escasos estudios sobre el comportamiento de ambas subespecies de C. fetus en los rodeos bovinos. Lo antedicho, probablemente se deba a que el diagnóstico de rutina de la CGB se realiza por inmunofluorescencia directa (IFD) a partir de muestras de esmegma prepucial por su rapidez, bajo costo, sensibilidad y especificidad, pero sin la identificación microbiológica de las cepas. Además, los conjugados que se emplean en esta técnica, no diferencian entre C. fetus subsp. fetus y C. fetus subsp. venerealis. Por lo tanto, se carece de información sobre la presencia de ambas subespecies a nivel regional. El cultivo microbiológico sigue siendo la técnica de referencia, sin embargo la alta contaminación de algunas muestras clínicas, sumado al costo de un equipamiento adecuado y el tiempo que requiere el cultivo y la posterior caracterización por pruebas bioquímicas, determinan que el diagnóstico microbiológico no se realice en forma rutinaria. En las últimas décadas se han desarrollado y puesto a punto técnicas de biología molecular para optimizar la identificación y la caracterización de C. fetus. La aplicación de nuevas técnicas permitirá complementar los resultados obtenidos por las pruebas tradicionales, caracterizar los perfiles fenotípicos y genotípicos de las cepas, determinar su influencia en la patogenia de la enfermedad, el grado de homología entre ellas y finalmente, contribuir con estudios epidemiológicos que analicen el comportamiento de las cepas en los rodeos a través de los años. El objetivo de la presente tesis doctoral fue caracterizar parámetros fenotípicos y genotípicos de cepas de C. fetus aisladas del tracto reproductor y de abortos bovinos de la provincia de Buenos Aires. El documento se divide en cuatro capítulos, correspondiendo cada uno de los objetivos particulares propuestos. En el Capítulo I se realiza la identificación de las cepas de C. fetus del cepario constituido a partir de los ceparios de C. fetus pertenecientes a los laboratorios de Bacteriología (EEA-INTA Balcarce) y Microbiología Clínica y Experimental de la Facultad de Ciencias Veterinarias (UNCPBA) conformados por primoaislamientos de muestras de esmegma prepucial, mucus cérvico vaginal y abortos, conservados a -80 °C. La identificación de C. fetus se realizó mediante IFD y pruebas bioquímicas convencionales. De un total de 159 aislamientos registrados en ambas instituciones entre los años 1999 y 2014, se seleccionaron 95 cepas indígenas de C. fetus de los ceparios citados. Los criterios de selección considerados fueron: año de aislamiento, muestras clínicas de origen y localización geográfica, los cuales permitieron los estudios de distribución temporal y espacial que se desarrollaron en los capítulos siguientes. Para la identificación bioquímica de género, especie y subespecie bacteriana, las cepas fueron descongeladas y cultivadas. Posteriormente, se realizó la descripción de la morfología de colonias y bacteriana mediante tinciones y observación en fresco por microscopía de campo oscuro. La inmunomarcación de las cepas se realizó por IFD. La identificación de especie y subespecie bacteriana se realizó mediante pruebas bioquímicas de rutina de nuestro laboratorio. Conjuntamente, se utilizó un sistema comercial miniaturizado de identificación para bacterias del género Campylobacter, Arcobacter y Helicobacter de origen humano. La morfología de las colonias y bacteriana de todas las cepas, fueron compatibles con las descriptas para las especies de Campylobacter. La IFD y las pruebas bioquímicas de rutina permitieron clasificar todas las cepas dentro de la especie C. fetus. Por pruebas bioquímicas, se diferenciaron ambas subespecies. La totalidad de las cepas analizapositiva. Las pruebas de producción de SH2 en sustratos sensibilizados y de tolerancia a la glicina, fueron definitorias en la determinación de la subespecie bacteriana y para el biotipo intermedius de C. fetus subsp. venerealis. Por pruebas bioquímicas convencionales, 50 cepas (52,6%) fueron clasificadas como C. fetus subsp. fetus, 40 (42,1%) como C. fetus subsp. venerealis y 5 (5,3%) como C. fetus subsp. venerealis biotipo intermedius. El sistema miniaturizado comercial no permitió la diferenciación de algunas cepas de ambas subespecies: seis cepas (6,3%) no pudieron ser caracterizadas. Sesenta y ocho (76,4%) fueron identificadas como C. fetus subsp. venerealis y 21 (23,6%) clasificadas como C. fetus subsp. venerealis/C. fetus subsp. fetus. Los resultados de la identificación de especie y subespecie bacteriana por pruebas bioquímicas y el sistema comercial, fueron comparables para 89 cepas. Se registraron coincidencias para 32 cepas identificadas como C. fetus subsp. venerealis por ambas metodologías. De las 21 cepas clasificadas como C. fetus subsp. venerealis/C. fetus subsp. fetus por el sistema comercial, 15 se correspondieron con C. fetus subsp. fetus y seis con C. fetus subsp. venerealis por pruebas bioquímicas. La limitante del sistema comercial para identificar cepas de C. fetus subsp. fetus, no permitió comparar los resultados para esta subespecie.das presentaron fluorescencia En el Capítulo II, se caracterizan los parámetros de patogenicidad de C. fetus mediante la capacidad de adherencia y citopatogenicidad. Como modelos de estudio se utilizaron cultivos celulares primarios de útero y vagina bovina y la línea celular MDBK. Las monocapas con semiconfluencia celular, fueron desafiadas con las cepas. Para los cultivos primarios se seleccionaron 35 cepas (13 cepas de C. fetus subsp. venerealis, dos de C. fetus subsp. venerealis biotipo intermedius y 20 de C. fetus subsp. fetus) en base a: el año de aislamiento, la muestra clínica de origen, la localidad geográfica y la subespecie bacteriana. Los cultivos de células MDBK fueron desafiados con la totalidad de las cepas. El inóculo fue establecido en una DO610 de 0,8. La incubación se realizó de acuerdo al objetivo del ensayo: evaluación de la capacidad de adherencia (3 h) y efecto citopatogénico (48-72 h). La adherencia bacteriana se observó por tinción de Giemsa y fueron puestas a punto las técnicas de inmunocitoquímica y microscopía electrónica de barrido para confirmar y caracterizar la adherencia de C. fetus. Se calcularon los indicadores: porcentaje de adherencia a células y número de bacterias adheridas por célula. Para la comparación de los cultivos primarios y células MDBK, las cepas fueron utilizadas como bloques para las variables observadas. El efecto de los cultivos se evaluó mediante un análisis de variancia (ANOVA) con un diseño en bloques. Los resultados permitieron confirmar la capacidad de adherencia de C. fetus a las células uterinas, vaginales y MDBK como así también la aplicabilidad de las técnicas empleadas. El 100% de las cepas fueron adherentes. Los porcentajes de adherencia fueron significativamente mayores para los cultivos primarios en relación a la línea MDBK. Contrariamente, el número de C. fetus por célula fue significativamente mayor para las células MDBK. La aplicación de las técnicas de inmunocitoquímica y microscopía electrónica de barrido permitieron confirmar y caracterizar la adherencia de C. fetus. Para la evaluación del efecto citopatogénico de C. fetus en células uterinas, vaginales bovinas y MDBK, se registraron alteraciones citoplasmáticas, nucleares y muerte celular. Las alteraciones citoplasmáticas fueron evaluadas mediante la observación en fresco y tinción de Giemsa. El coeficiente de distensión celular ((F 70%. La PFGE – SmaI permitió identificar 19 PFPs para las 28 cepas de C. fetus. En el Capítulo IV se relacionaron los parámetros fenotípicos y genotípicos analizados en los capítulos anteriores, con los datos de origen de las cepas de C. fetus y entre sí. La distribución temporal y por muestra clínica de origen de las subespecies de C. fetus fueron analizadas mediante las herramientas de gráfico en el programa Excel. La distribución espacial se evaluó mediante el programa SatScan V9.3 tomando como unidad de localización geográfica al centroide del partido de origen de las cepas. La visualización espacial de las cepas se realizó mediante mapas gráficos utilizando el software QGis 2.10.1. Para la visualización de la distribución espacial de los parámetros de patogenicidad se consideraron los mayores y menores porcentajes de adherencia y de citopatogenicidad para cada subespecie bacteriana. El efecto del origen y de la subespecie de C. fetus sobre los parámetros de patogenicidad, se analizó mediante un ANOVA. Para evaluar la asociación lineal entre los parámetros observados en los distintos cultivos celulares en relación a la muestra clínica de origen y las subespecies, se calculó el coeficiente de correlación de Pearson y de Spearman. En el período de tiempo analizado se registró la presencia de ambas subespecies de C. fetus con un predominio de C. fetus subsp. fetus en siete años. El mayor número de cepas de C. fetus subsp. fetus fueron aisladas de fetos y de C. fetus subsp. venerealis de hembras y toros. Se observa una distribución temporal homogénea para el porcentaje de adherencia de las cepas en los diferentes cultivos. En células MDBK, los porcentajes fueron menores en relación a los cultivos primarios. La distribución del número de C. fetus por célula fue homogénea, si bien en la mayoría de los años los mayores valores se registraron en los cultivos de células MDBK. Los porcentajes de citopatogenicidad de las cepas fueron superiores al 50% y el F > 1,3 en todos los años de estudio. La subespecie bacteriana no tuvo efecto significativo sobre los parámetros de patogenicidad evaluados. La mayor patogenicidad se observó en las cepas de origen fetal y la menor en las aisladas de toros. Las correlaciones entre los parámetros de patogenicidad fueron positivas y significativas. La adherencia y el efecto citopatogénico se correlacionaron independientemente del número de bacterias adheridas por célula, principalmente para las cepas aisladas de fetos y hembras. La presencia del polipéptido mayor fue independiente de los datos de origen de las cepas. La distribución temporal de las cepas con el polipéptido mayor fue homogénea en todos los años. Al evaluar la distribución espacial, no se observó ninguna tendencia de distribución definida. El polipéptido se observó en 46 cepas aisladas de fetos, 30 de hembras y 11 de toros. En cambio, las cepas que no presentaron el polipéptido fueron aisladas de muestras de fetos (3) y hembras (5). La subespecie bacteriana no tuvo asociación significativa sobre los parámetros de patogenicidad. La mayor patogenicidad se observó en las cepas de origen fetal y la menor en las aisladas de toros. Las subespecies bacterianas, los parámetros de patogenicidad y la presencia del polipéptido mayor de las cepas no registraron tendencias de distribución temporal ni geográfica. Los resultados de la distribución temporal, espacial y por muestra clínica de origen para las cepas caracterizadas por PCR, fueron similares a los obtenidos por pruebas bioquímicas. Los PFPs de C. fetus no se relacionaron con el año de aislamiento, la localización geográfica y la muestra clínica de origen de las cepas en estudio. El porcentaje de similitud para la especie C. fetus fue > 70%. El porcentaje intrasubespecie para C. fetus subsp. venerealis (13 cepas) fue > 80% y sólo tres fueron 100% homólogas y para C. fetus subsp. fetus (15 cepas) > 70%, ocho fueron indistinguibles bajo esta metodología. Los resultados confirman la utilidad de la PFGE – SmaI como una herramienta molecular de alto poder discriminatorio a nivel de subespecie para C. fetus. Para C. fetus subsp. venerealis, sólo dos cepas aisladas de mucus cérvico vaginal fueron indiferenciables bajo esta metodología. En las cepas aisladas de toros las homologías registradas fueron < 75% y para los fetos < 70%. Para C. fetus subsp. fetus, tres cepas aisladas de feto fueron indistinguibles. En las cepas aisladas de hembras las homologías fueron < 70% y en toros

La parasitosis gastrointestinal continúa siendo una de las principales causas de pérdidas económicas en la producción pecuaria y dentro de ella, la haemonchosis es sin duda la enfermedad más patógena y la que mayores pérdidas genera en la producción ovina. El control de las parasitosis debiera consistir en diversas estrategias de manejo de los animales y las pasturas junto con la administración de antihelmínticos, luego del diagnóstico parasitológico y terapéutico adecuado. Sin embargo, en las últimas tres décadas el control se basó casi exclusivamente en el utilización masiva de drogas antihelmínticas de amplio espectro cada vez más eficaces y persistentes. El incremento de la resistencia antihelmíntica junto con las nuevas tendencias de producción orgánica y disminución de los residuos de drogas en los alimentos generó interés en el estudio de nuevas estrategias de control. En este contexto el presente trabajo de Tesis Doctoral abordó la resistencia antihelmíntica desde un enfoque integrador fármaco-parasitológico, cuyo objetivo fue estudiar la relación que existe entre las concentraciones de diferentes lactonas macrocíclicas en plasma, tejidos/fluidos de localización parasitaria del ovino y en el parásito “blanco” y la eficacia sobre Haemonchus contortus resistente. Para ello se dividió la Tesis en 3 secciones experimentales. En la Primera se realizó la caracterización in vivo de factores que afectan la relación entre concentraciones en el sitio de localización parasitaria, concentraciones en el parásito “blanco” (H. contortus) y eficacia antihelmíntica para diferentes lactonas macrocíclicas en corderos infestados con parásitos resistentes y bajo condiciones estandarizadas. Dentro de esta sección se relizaron 3 experimentos en donde se comparó la utilización de dos vías de administración (subcubtánea e intraruminal), las diferentes lactonas macrocíclicas (ivermectina-abamectina-moxidectina) y la duplicación de la dosis como estrategias para aumentar la eficacia antihelmíntica. Se encontró que si bien la disposición plasmática es mayor al utilizar la vía subcutánea, las concentraciones son mayores en los tejidos y contenidos del tracto gastrointestinal a los 2-3 días post-tratamiento por vía intraruminal y esto produce un efecto relevante cuando se trata de nematodos resitentes, de tal forma que la eficacia contra H. contortus fue un 40 % mayor al utilizar la vía intraruminal, coincidentemente con las mayores concentraciones de ivermectina halladas dentro del parásito. Esto demuestra que la incorporación de la droga al parásito por vía transcuticular es relevante para la eficacia clínica, aún para aquellos parásitos que son hematófagos. En el segundo experimento se encontró que a la dosis terapéutica, moxidectina fue más efectiva frente a nematodos resistentes a ivermectina. Las concentraciones de los 3 fármacos encontradas en los tejidos del tracto gastrointestinal durante los primeros 2 días post tratamiento es relevante para su acción sobre los nematodos resistentes. Sin embargo, a pesar de que moxidectina obtuvo las menores concentraciones acumuladas en los parásitos adultos, el total de parásitos recuperados (al día 2) post tratamiento y su eficacia antihelmíntica fue mayor que la de ivermectina y abamectina. En el tercer experimento, donde se comparó la eficacia y la acumulación de fármacos en los tejidos de los corderos y en el H. contortus, utilizando ivermectina y moxidectina a la dosis terapéutica y al doble de la dosis terapéutica, debido al extremo grado de resistencia, sólo la administración de doble dosis de moxidectina fue efectiva. En la Sección Experimental II, se caracterizó in vitro la actividad de las lactonas macrocíclicas contra H. contortus resistente, mediante el desarrollo del test de inhibición de motilidad larval utilizando estadios larvarios de H. contortus. Esta prueba resultó ser una prueba eficaz para establecer diferencias entre aislamientos susceptibles de resistentes. Sin embargo, es una prueba difícil de implementar para el diagnóstico de resistencia de rutina. También se desarrolló un método ex vivo, para caracterizar el ingreso del fármaco dentro de los parasitos adultos. El incremento de la exposición a ivermectina y moxidectina se reflejan como un incremento en la cantidad de droga recuperada en los H. contortus. En la Sección Experimental III se estudiaron los cambios génicos en H. contortus asociados al fenómeno de resistencia. Se validó una metodología para cuantificar la expresión de glicoproteína-P2 en aislamientos de H. contortus susceptibles y resistentes a LMs. Se encontró una sobreexpresión en los aislamientos de parásitos resistentes. Además, el tratamiento con ivermectina, a diferencia de abamectina y moxidectina, fue el único que indujo un incremento significativo de la expresión de glicoproteína-P2 en los especímenes de H. contortus resistentes recuperados de corderos tratados a los 0,5 y 1 días post-tratamiento comparado con los H. contortus recuperados de animales sin tratamiento. Como conclusión, el presente trabajo de Tesis Doctoral a través de estudios in vivo, in vitro y utilizando herramientas de la biología molecular aporta información que es de utilidad para diseñar estrategias para prologar la vida útil de las lactonas macrocíclicas siempre que sean usados de manera racional y con una base de evaluación profesional por el veterinario. Fil: Lloberas, María Mercedes. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Lifschitz, Adrián L. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Entrocasso, Carlos M. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Gastrointestinal parasitic diseases are the main causes of economic losses in livestock. Haemonchus contortus infection is undoubtedly the most pathogenic disease that causes the greatest losses in sheep production. The parasite control should be based on management strategies of animals and pastures together with the rational administration of anthelmintics after the appropriate parasitological diagnostic. However, in the last three decades, parasitic control has been based almost exclusively on the massive use of broad-spectrum and persistent anthelminthic drugs. The increase in anthelminthic resistance along with the new tendency of organic production and reduction of drug residues in food generated interest in the study of new control strategies. In this context, the present work of Doctoral Thesis focused on the anthelmintic resistance from an integrative pharmaco-parasitological approach. The objective of the currern work was to study the relationship that exists between the concentrations of different macrocyclic lactones in plasma, tissues / fluids of parasitic location of sheep and in the target parasite and the efficacy against resistant H. contortus. The Thesis was divided into 3 experimental sections. In the first, the in vivo characterization of factors affecting the relationship between concentrations at the site of parasitic localization, concentrations in the target parasite and anthelmintic efficacy for different macrocyclic lactones in lambs infested with resistant nematodes was evaluated under standardized conditions. Three experiments were carried out within this section, comparing the use of two administration routes (subcutaneous and intra-ruminal), the different macrocyclic lactones (ivermectin-abamectin-moxidectin) and the duplication of the dose as strategies to increase the anthelmintic efficacy. The results showed that although the plasma disposition is greater after the ivermectin administration by the subcutaneous route, higher drug concentrations were measured in the tissues and contents of the gastrointestinal tract after 2-3 days post-treatment by intraruminal route. The drug increment in the target tissues was reflected in a higher concentrations of ivermectin found within the parasite and a higher efficacy against H. contortus after the intraruminal administration. The current results corroborated that the drug entry to the parasite by the transcuticular route is relevant for clinical efficacy, even for those parasites that are hematophagous. In the second experiment, it was found that moxidectin administered at the therapeutic dose was more effective vi against nematodes resistant to ivermectin. Although moxidectin showed the lowest accumulated concentrations in adult parasites, lower number of parasites were recovered (at day 2) after moxidectin treatment and its anthelmintic efficacy was greater compared to those obtained after ivermectin and abamectin administration. In the third experiment, the influence of the dose rate on the efficacy and accumulation of drugs in the target tissues of lambs and in H. contortus was evaluated. Due to the high level of resistance, only the administration of double dose of moxidectin was effective. In Experimental Section II, the activity of macrocyclic lactones against resistant H. contortus was characterized in vitro by the development of the larval motility inhibition test using larval stages of H. contortus. This test demonstrated to be an effective test to establish differences between resistant and susceptible isolates. However, it is a difficult test to implement for the routinely diagnostic of anthelmintic resistance. An ex vivo method was also developed to characterize the entry of the drug into the adult parasites. The increased exposure to ivermectin and moxidectin enhanced the amount of drug recovered in H. contortus. In Experimental Section III, the genetic changes in H. contortus associated with the phenomenon of resistance were studied. The expression of glycoprotein-P2 in susceptible and resistant H. contortus isolates was determined. Overexpression was found in isolates of resistant parasites. In addition, treatment with ivermectin, unlike abamectin and moxidectin, was the only one that induced a significant increase in the expression of glycoprotein-P2 in resistant H. contortus recovered from treated lambs at 0.5 and 1 day post-administration. In conclusion, the present Doctoral Thesis validated in vivo and in vitro studies and molecular tools to improve the parasitic control strategies and to extend the lifespan of macrocyclic lactones. To obtain this in the field, it is necessary the rational use of these drugs in each farm with a previous professional evaluation by the veterinarians.

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O mais apropriado seria, contudo, a sua adoção, como medida terapêutica, apenas nos casos com comprovada indicação cirúrgica, o que pode ser estabelecido após o diagnóstico microscópico e prognóstico definidos. Objetivou-se determinar a frequência das lesões em baços de cães esplenectomizados no período de 12 anos (2006-2017), bem como avaliar a eficácia de técnicas de coleta de amostras - punção aspirativa por agulha fina (PAAF) ou biópsia esplênica por agulhas Tru-cut guiadas por ultrassom - de lesões proliferativas esplênicas em cães para diagnóstico microscópico prévio à esplenectomia. No estudo retrospectivo, verificou-se que a frequência de lesões não neoplásicas [50,45% (113/224)] e neoplásicas [49,55% (111/224)] esplênicas foi muito semelhante. Entre as neoplásicas, as de caráter maligno foram mais frequentes [79,27% (88/111)], sendo o hemangiossarcoma o mais comum [52,25% (58/111)], isto é, a possibilidade de ocorrência de uma neoplasia maligna foi cerca de 74% maior do que uma benigna. Em suma, verificou-se que em 60,71% (136/224) dos casos estudados, tratavam-se de lesões benigas e, portanto, não teriam indicação de esplenectomia. As técnicas de PAAF e a biópsia por agulha Tru-cut demonstraram ter baixo risco de complicações. Quanto à eficácia diagnóstica, pela PAAF obteve-se 71,43% (15/21) de diagnósticos conclusivos, sendo 60% (9/15) desses compatíveis com o resultado final realizado pela avaliação histopatológica, após a esplenectomia (padrão ouro). Já a biópsia por Tru-cut obteve 71,43% (5/7) de diagnósticos conclusivos e 28,57% (2/7) de inconclusivos. Dentre os conclusivos, em 100% dos casos o diagnóstico foi compatível com o padrão ouro. Desta maneira, visto a possibilidade da ocorrência de lesões esplênicas benignas em cães ser 1,52 vezes maior do que as malignas, associado ao fato de 67% das lesões não neoplásicas terem sido menores do que 3 cm, sendo 65,17% delas focais, o uso da PAAF e da biópsia por Tru-cut deve ser recomentado, sobretudo, para lesões esplênicas pequenas e focais, uma vez que tais técnicas representam boas alternativas para o estabelecimento do diagnóstico prévio a esplenectomia, o que pode reduzir o número de esplenectomias desnecessárias The spleen can be affected by multiple inflammatory, hyperplastic and neoplastic diseases, due to their anatomical and physiological characteristics. Routinely, in the face of the detection of a splenic proliferative lesion, veterinarians usually opt for splenectomy, before obtaining a conclusive diagnosis of the lesion, which can lead to deleterious consequences to the dog. The most appropriate would be, however, its adoption, as a therapeutic measure, only in cases with proven surgical indication, which can be established after a definite microscopic diagnosis and prognosis. The objective of this study was to determine the frequency of splenectomized dog spleens in the 12-year period (2006-2017), as well as to evaluate the efficacy of specimen collection techniques - fine needle aspiration (FNA) or splenic biopsy using Tru -cut-guided splenic proliferative lesions in dogs for microscopic diagnosis prior to splenectomy. In the retrospective study, the frequency of non-neoplastic [50,45% (113/224)] and neoplastic [49,55% (111/224)] splenic lesions was found to be very similar. Among the neoplastic ones, malignant ones were more frequent [79,27% (88/111)], with hemangiosarcoma being the most common [52,25% (58/111)], that is, the possibility of a Malignant neoplasm was about 74% greater than a benign one. In summary, it was verified that in 60.71% (136/224) of the cases studied, they were benign lesions and, therefore, there would be no indication of splenectomy. FNA techniques and Tru-cut needle biopsy showed a low risk of complications. Regarding the diagnostic efficacy, the FNA obtained 71.43% (15/21) of conclusive diagnoses, 60% (9/15) of which were compatible with the final result of the histopathological evaluation, after splenectomy (gold standard). The Tru-cut biopsy obtained 71.43% (5/7) of conclusive diagnoses and 28.57% (2/7) of inconclusive diagnoses. Among the conclusive, in 100% of the cases the diagnosis was compatible with the gold standard. In this way, since the possibility of benign splenic lesions in dogs is 1.52 times greater than the malignant ones, 67% of the non-neoplastic lesions were smaller than 3 cm, 65.17% of them focal lesions , the use of FNAB and Tru-cut biopsy should be recommended, especially for small and focal splenic lesions, since such techniques are good alternatives for establishing the diagnosis prior to splenectomy, which may reduce the number of splenectomies unnecessary. Keyword: Tru-cut;FNA;histopathology;splenctomy

284 p. El Maedi-Visna (MV) es una enfermedad muy difundida a nivel mundial y en nuestro país, que tiene especial importancia en Castilla y León, donde causa importantes pérdidas económicas en ovino intensivo de leche de raza Assaf Española. La enfermedad, de curso crónico, pasa a menudo desapercibida hasta estados avanzados de la misma, especialmente la forma mamaria, dando lugar a una pérdida progresiva de la producción lechera. La falta de vacunas o tratamientos efectivos hacen que sea fundamental el contar con técnicas de diagnóstico sensibles que permitan conocer la situación epidemiológica de los rebaños y la detección precoz de los animales infectados para su eliminación en las sucesivas reposiciones. El objetivo general de esta tesis doctoral es contribuir al conocimiento de la patogenia del MV, describiendo la respuesta inmune del hospedador frente a la infección, así como la valoración de diferentes métodos de diagnóstico para la detección precoz y el estudio de las cepas circulantes. Se describen tres patrones de lesión en pulmón, glándula mamaria y SNC en función de la población celular predominante en el infiltrado inflamatorio: histiocítico, linfocítico y mixto. El patrón histiocítico se caracterizó por un predominio de macrófagos formando el infiltrado inflamatorio junto con algunos linfocitos B, por una respuesta serológica más intensa, caracterizada por altos títulos de anticuerpos, y por una mayor cantidad de virus en tejido mediante valoración subjetiva en IHQ. Al contrario, los animales con patrón linfocítico presentaron lesiones con un predominio de linfocitos T, títulos bajos de anticuerpos en test ELISA y una menor cantidad de virus en tejido. Por lo tanto, los animales con patrón histiocítico serían fácilmente detectables mediante test serológicos, mientras que aquellos con patrón linfocítico, incluso con valores negativos, pueden pasar desapercibidos en el rebaño. El patrón mixto, descrito por primera vez en esta tesis doctoral, se caracterizó por un infiltrado inflamatorio mixto formado por células CD68+y CD3+ en cantidades similares, así como por una respuesta serológica variable. Dicho patrón apareció principalmente en animales con lesiones mínimas, que podrían ser iniciales o latentes, y que evolucionarían a formas linfocíticas o histiocíticas con la progresión de la infección. Se observa que el patrón de lesión es el mismo en pulmón y SNC de un mismo animal, mientras que la glándula mamaria presenta un predominio de lesiones linfocíticas, aunque con un número superior de macrófagos en el tipo histiocítico. Estas diferencias podrían deberse a que se trata de un órgano de naturaleza mucosa, en continua estimulación antigénica, que podría desarrollar una respuesta inmune de tipo Th1 más marcada. Se hace una clasificación detallada de las lesiones producidas por el MV en los tres principales órganos diana de la enfermedad, clasificándose como mínimas (+), moderadas (++) o graves (++). Las lesiones mínimas, con presencia de VMV confirmada mediante IHQ, supusieron un claro aumento de la prevalencia de la enfermedad con respecto a estudios anteriores, llegando a la detección de lesiones en prácticamente la totalidad de los animales infectados. Así, la histopatología resulta una herramienta de gran utilidad en la detección de la enfermedad, que debe complementarse con otras técnicas de diagnóstico, especialmente en lesiones mínimas. Mediante la valoración de las principales técnicas utilizadas en la actualidad para el diagnóstico del MV, se observó que la más sensible es la IHQ, que llegó a detectar el 100% de los animales positivos, seguida por la PCR y por la serología. El test ELISA, económico y sencillo de realizar en condiciones de campo, mostró una sensibilidad del 85,5%. Estos resultados suponen que una parte de animales infectados están pasando desapercibidos con los actuales sistemas de control, y que debería utilizarse más de una técnica para el diagnóstico. El ‘’gold standard’’ según los resultados obtenidos en nuestros estudios, sería complementar la serología con la IHQ y la histopatología, que aunque no es viable en condiciones de campo, podría realizarse en muestras de matadero para conocer la situación real de las explotaciones. La obtención de falsos negativos mediante test ELISA podría relacionarse con la existencia de cepas con variedades antigénicas no detectadas por un determinado test, así como a la existencia de un patrón de lesión de tipo linfocítico con baja producción de anticuerpos o a formas iniciales, donde se pueden detectar lesiones mínimas y virus en tejido mediante IHQ, pero aún no se ha desarrollado una respuesta inmune periférica detectable mediante test ELISA. La única célula diana del MV mediante técnicas de IHQ tantos en muestras de tejido de los tres órganos diana como en leche fue el macrófago, no observándose positividad en células epiteliales o en otros tipos celulares. La distribución de las lesiones y del antígeno vírico formando manguitos perivasculares en lesiones mínimas y entre el infiltrado inflamatorio más difuso en lesiones moderadas y graves, y el hecho de que no se observara positividad en zonas sin lesión hace pensar en una difusión de la infección por vía saguínea, como se ha propuesto en estudios previos por el paso de monocitos infectados de sangre a macrófagos. La presencia de virus en leche tanto mediante ICC como PCR confirma la posible transmisión del virus por esta vía, aunque la detección del mismo únicamente en la mitad de las muestras hace pensar en un mayor peso de la vía respiratoria en la transmisión de madre a cordero. La mayoría de animales positivos a MV en muestras de leche presentaban lesiones moderadas o graves en la glándula mamaria, siendo más fácil la llegada de macrófagos infectados a las luces acinares en el caso de infecciones difusas que en lesiones mínimas. Esta tesis doctoral también contribuye al conocimiento de las cepas víricas circulantes en Castilla y León, detectándose los genotipos A2/A3, similar al previamente descrito en la región en la forma nerviosa de la enfermedad y B2, más próximo a cepas italianas que a las artríticas descritas en España. La secuenciación y el conocimiento de las cepas circulantes tiene gran importancia para el diagnóstico y el control de la enfermedad, ya que permite desarrollar test serológicos que empleen proteínas específicas para determinadas variedades genéticas o bien el diseño de primers específicos para la detección mediante PCR. Además se describen diferentes variaciones en la región MHR y otros genes relacionados con la patogenia del MV, contribuyendo al conocimiento de los factores genéticos que pueden influir en la resistencia del hospedador a la infección o al desarrollo de lesiones. No se observaron diferencias entre la cepa vírica y la gravedad de las lesiones en glándula mamaria, haciendo pensar que el tipo y la gravedad de la lesión desarrollada se relacionan más con la respuesta inmune del hospedador que con factores virales. En conclusión, los resultados de esta tesis doctoral muestran que la respuesta inmune del hospedador parece jugar un papel fundamental en el desarrollo de las lesiones producidas por el MV, determinando el tipo de infiltrado inflamatorio predominante y la respuesta serológica, y relacionándose con la cantidad de virus presente en los tejidos y su posibilidad de excreción y transmisión, así como con la facilidad para detectar la infección mediante diferentes técnicas de diagnóstico. La detección precoz, incluso de animales con lesiones mínimas, es de gran importancia especialmente en rebaños en los que se hayan obtenido bajas prevalencias de MV mediante los métodos de control tradicionales, para poder eliminar todos los animales infectados y conseguir la erradicación de la enfermedad.

Background : : : : The canine osteosarcoma is characterized by being an aggressive bone tumor that affects mainly large dogs, middle-aged and male, accounting for 80-85% of bone tumors and 5-6% of all tumors. The risk of developing this tumor is, on average, 125 times greater in dogs weighing over 36 kg than in dogs weighing less than 9 kg. This cancer develops more frequently in the appendicular skeleton (75%), preferably the bones of the forelimbs, where approximately 60% of body weight are sustained. The canine osteosarcoma is very similar to human, in which the metaphyseal region of long bones is the most affected, causing lameness and swelling of the affected limb. The diagnosis is made from epidemiological data, history of the animal, X-rays and laboratory tests such as cytology fine-needle aspiration (FNAC) and measurement of the enzyme alkaline phosphatase (ALP). The staging of the disease becomes a major method for the treatment, whereas primary bone tumors are highly complex and end up interfering with the animal organism in whole. The objective of this study is to report a clinical study of 12 dogs with osteosarcoma, showing the procedures performed from diagnosis to treatment. Material, Methods and Results : Dogs were assisted at the Clinic of Small Animals VUH - UFSM and after the clinical examination were referred to the Department of Radiology. After the radiographic study, blood samples for biochemical and material for cytological analysis of the tumor were collected. After the confirmation of the neoplasm, the physician who prescribed the treatment, depending on the case, the accession to it was left to the owner. In this study, we observed the development of osteosarcoma in dogs from two to 14 years old. Furthermore, in 10 animals (83.3%) the tumor was located in one of the members and nine of these (75%) affected forelimbs. Still, eight dogs (66.7%) were males. The animals weighed on average, 30 kg and five were crossbreeds. Eight dogs (66.7%) had an elevation in enzyme ALP. In this study, five dogs (41%) received no treatment, four (33.3%) were killed and three (25.7%) had the treatment as prescribed by the clinician. Three of the dogs treated survived for a few weeks and two of those who received appropriate treatment survived more than a year. Discussion : The clinical and epidemiological findings of this study corroborate the literature, making them increasingly used in the auxiliary tests cited. For a proper diagnosis it is necessary for the veterinary practitioner to know which tests to determine use. Approximately 98% of the patients have micrometastases at diagnosis, however, only 5% of dogs with osteosarcoma have radiographic evidence of pulmonary metastasis. These will only cause clinical signs in advanced stages, leading the majority of dogs to euthanasia. Moreover, the appearance of bone thinning and explosion in the limb are strong indications of osteosarcoma. The FNAC is one of the main tests for diagnosing neoplastic, because the laboratory technician can visualize the tumor cells in proliferation and other features visible only under a microscope. The enzyme alkaline phosphatase is of great value in the diagnosis and prognosis of this tumor and may demonstrate metastases when elevated. Epidemiological data along with auxiliary tests make the diagnosis of this neoplasm safer, which assists the owner in the decision for the treatment of the affected animals. As there is still little understanding of the anticancer treatment by the owners, treatment schedules may not be implemented, which prolongs the disease and causes more suffering to the dogs.

Este consiste da avaliacao comparativa de dois metodos comumente empregados para a classificacao de tumores de mama. Compara-se o sistema de classificacao histologico-descritivo da Organizacao Mundial da Saude (OSM) e o metodo de graduacao histologica proposto por Elston & Ellis (1991). Carcinomas simples e complexos foram incluidos neste estudo. Todos os carcinomas complexos foram definidos como de grau I (75%; 24/32) ou II (25%; 8/32). Os carcinomas simples foram graduados em I (36,4%; 20/55), II (32,7%; 18/55) e III (30,9%; 17/55). Os subtipos tambem foram avaliados e os carcinomas tubulopapilares distribuiram-se nos graus I (54,1%; 20/37), II (37,8%; 14/32) e III (8,1%; 3/37). Os carcinomas solidos foram graduados em grau II (33,3%; 3/9) e III (66,7%; 6/9). Nos carcinomas anaplasicos foram encontrados os graus II (11,1%; 1/9) e III (88,9%; 8/9). Conclui-se que o metodo de graduacao de Elston & Ellis foi mais preciso para determinar o comportamento biologico do que o sistema histologico-descritivo.

Para verificar a toxidez e o quadro clinico e patologico da intoxicacao por Dodonea viscosa em bovinos, a planta foi administrada para cinco bovinos onde quatro receberam folhas verdes e um recebeu folhas secas. Quatro dos bovinos que receberam as folhas verdes e secas apresentaram sinais clinicos e morreram. Um bovino nao adoeceu e nem morreu. A planta mostrou-se toxica a partir de 25g/kg de peso vivo. As folhas secas fornecidas na dose de 30g/kg mantiveram a toxidez. O menor periodo de evolucao clinica nos que morreram foi de 3 horas e o maior foi de 19 horas.A evolucao clinica foi cerca de 8,5h ate a morte. O inicio dos sinais clinicos variou de 13 horas e 30 minutos a 45 horas. Os animais manifestaram apatia, anorexia, leve tenesmo, dificuldade para se manter em estacao apoiando-se contra obstaculos, tremores musculares, decubito esternal, movimentos de pedalagem, coma e morte. A alteracao macroscopica mais significativa foi observada no figado, que apresentava padrao lobular acentuado caracterizada por alternacao de areas vermelho-escuras, com o centro mais deprimido, intercaladas com areas amarelo-claras conferindo ao orgao o aspecto de noz–moscada. Hemorragias petequiais foram encontradas em serosas de orgaos da cavidade abdominal e toracica e no intestino. A principal alteracao microscopica foi observada no figado que apresentou necrose coagulativa centrolobular ou massiva, associada a congestao e hemorragia.

Background : : : Oral neoplasms are common in cats. Just the percentage of oral squamous cell carcinoma (SCC) accounts for about 70% of all feline oral tumors also it is considered highly invasive and malignant. There are reports that the flea collar increases five times the risk oral SCC development. In addition, smoke exposure is also considered a risk factor, and the animals were exposed to tobacco when makes it self-cleaning. SCC well differentiated is characterized histologically by numerous keratin pearls formation and clearly evident intercellular bridges with poor mitotic activity and nuclear pleomorphism. The median age of cats with oral SCC is about 11-13 years, but, cats as young as three years and as old as twenty-one years have been previously reported. However, it was not found reports of oral SCC in cats at age younger than one year old. The aim of this article is reports one case of oral SCC feline at age of three months old. Five days after surgical procedure the patient returned to the veterinary and the owner report that it returned to eating well. Case : It was exanimate a three months old male mixed breed cat presenting oral volume increased and the biopsy test was suggested. However, the owner returned 3 months later when the animal showed tumor 6 cm in diameter, dysphagia, tongue protrusion, excessive salivation, halitosis and weight loss. It was indicated a wide surgical excision of tumoral mass. The tissue was submitted to histopathology. Discussion : The historical, macroscopic characteristics and predisponents factors may aid in carcinoma diagnosis, however, the cytologic or histological examination of tissue confirms this diagnosis. Therefore, the microscopic evaluation revealed a malignant neoplastic proliferation of stratified squamous epithelial cells desmosomal junctions evident, few foci keratin pearl formation and presence of mononuclear inflammatory reaction perifocal. A well-differentiated squamous cell carcinoma was diagnosed by histological study. Thirty days after the surgical procedure, the animal showed a complete recovery with weight increase and eating normally. Thus, surgery proves to provide excellent quality of life maintenance for a long period of time and, although it had shown no signs of recurrence at the present moment, the literature describes that SCC long-term recurrences are common. Indeed, an important question is the quality of life of the felines with oral SCC, whereas this neoplasm led to a marked decrease in eating and drinking due to pain. Therefore, the treatment target is making the possible to maintain an excellent quality of life as long as possible. With the surgery was possible the maintenance of an excellent quality of life for a longer period. An early diagnosis could have defined the need for surgical procedure before the animal presented clinical signs characteristic, whereas represent a locally invasive neoplasm with poor response to conventional treatments models and unfavorable prognosis. Actually, increased incidences of SCC have been associated with clinical and preventive veterinary medicine improvements, which led to the prolongation of life to this animal, becoming more susceptible to senile disease, but this paper reports one case of oral SCC feline at age of three months old.

Osteossarcomas extra-esqueléticos primários são raros em pequenos animais, compreendendo menos de 2% de todos os casos de osteossarcomas em cães. Sabe-se que os principais tumores testiculares em cães são seminomas, tumores das células de Sertoli e de células intersticiais (Leydig), sendo raro o aparecimento de outros tipos de neoplasias. Sabe-se também que cães criptorquidas, unilaterais ou bilaterais, são mais suscetíveis ao desenvolvimento de neoplasias do que cães normais. O objetivo deste estudo é de descrever um caso de osteossarcoma extra-esquelético primário testicular de um canino da raça Fila Brasileiro, de oito anos de idade e criptorquida unilateral, que foi atendido no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brasil.

Quérion (dermatofitose nodular) é uma apresentação clínica de micose cutânea caracterizada por uma dermatite profunda que varia de uma reação granulomatosa até piogranulomatosa, com aspecto de nódulo edematoso, circular e alopécico. Em animais é causado principalmente pelas espécies de dermatófitos Microsporum gypseum, M. canis e Trichophyton mentagrophytes. Microsporum gypseum é um fungo geofílico, cosmopolita e sua transmissão ocorre por contato com solos contaminados. É relatado um caso de lesão do tipo quérion causada por M. gypseum em um cão da raça Dachshund, fêmea, 4 anos de idade, atendido no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, com uma lesão circular na região do focinho medindo 4 cm de diâmetro. Por se tratar de uma lesão dermatofítica com infecção bacteriana e muito prurido, optou-se pelo tratamento tópico com creme contendo associação medicamentosa de miconazol, gentamicina e betametasona, duas vezes ao dia, por quarenta e cinco dias, havendo regressão completa do quadro, sem recidiva clínica. É apresentada uma extensiva revisão de casos similares observados em outros países. Aparentemente trata-se do primeiro caso de quérion registrado em animais na literatura veterinária brasileira com a respectiva identificação do dermatófito. Kerion (nodular dermatophytosis) is a round and nodular edematous reaction to dermatophyte infection, with a patch of erythematous scaling alopecia, characterized by a granulomatous dermatitis to a deep pyogranulomatous inflammation. In animals it is caused mainly by the species of dermatophytes Microsporum gypseum, M. canis and Trichophyton mentagrophytes. Microsporum gypseum is a cosmopolitan geophilic fungus and its transmission occurs from contaminated soil to man and animals. It is described a kerion by Microsporum gypseum causing a circular lesion on the nostril measuring 4 cm of diameter in a Dachshund, female, 4-years old dog, consulted at the Hospital de Clínicas Veterinárias, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto alegre, Brazil. Due to inflammatory lesion and severe pruritus, a topical treatment with miconazole, gentamicin and betametazone ointment was applied twice a day. In 45 days, the lesion was completely recovered. It is presented an extensive review of similar cases reported in other countries. Aparently, this case appears to be the first report of Kerion in animals in Brazilian publications with the proper identification of the dermatophyte.

Diabetes mellitus, uma das endocrinopatias mais comuns nos caes, e caracterizada por alteracao no metabolismo da glicose. Em animais, alguns dos fatores predisponentes a diabetes sao a obesidade e a senilidade. Assim, o presente trabalho objetivou avaliar a influencia da obesidade e da senilidade na glicemia de caes saudaveis na cidade de Mossoro, RN. Foram utilizados 60 caes, divididos em quatro grupos: 22 animais idosos (maiores de 8 anos); 15 caes obesos; 3 animais obesos e idosos; e 20 caes nao obesos adultos (entre 1 e 6 anos). Apos um periodo de jejum alimentar de 8 a 12 horas, foram coletadas amostras de sangue total sem anticoagulante que foram utilizadas imediatamente para determinacao da glicemia em glicosimetro. As medias dos diferentes grupos foram avaliados estatisticamente utilizando a analise de variância ANOVA, seguido pelo teste de comparacoes multiplas de Tukey-Kramer. Os resultados das glicemias (media±erro-padrao) foram: idosos 63,6±3,11 mg/dL; obesos 59,9±3,90 mg/dL; idosos obesos 62,7±7,45 mg/dL; e adultos nao obesos 58,6±1,83 mg/dL. No entanto, a avaliacao estatistica relevou nao haver diferenca significante entre os grupos. Assim, os grupos de animais obesos, idosos e idosos obesos nao apresentaram glicemia significantemente diferente daquela dos animais adultos nao obesos. Deste modo, nao e necessario o estabelecimento de diferentes valores de referencia para glicose sanguinea para caes obesos e senis.

A endometrite e uma importante causa de subfertilidade na egua. O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito de diferentes tratamentos sobre o endometrio de eguas infectadas experimentalmente. Foram utilizadas vinte eguas resistentes, com historico reprodutivo desconhecido, e cinco eguas susceptiveis, com historico de endometrites recorrentes e subfertilidade. Apos o primeiro exame histopatologico os ciclos foram sincronizados com prostaglandina. Na fase estral, as eguas foram infectadas com 1 x 10 9 Streptococcus equi. Vinte e quatro horas apos a infeccao, os animais eram submetidos aos exames clinico, bacteriologico e citologico. Constatada a presenca de sinais clinicos de endometrite, os grupos de eguas foram distribuidos entre cinco diferentes tratamentos: leucocitos frescos, leucocitos congelados, leucocitos lisados, Interleucina-8 e grupo controle. As eguas foram tratadas diariamente, por no maximo, quatro dias, ou ate que o exame bacteriologico nao evidenciasse o crescimento de Streptococcus . No quinto dia, as eguas eram entao submetidas a novo exame histopatologico e, no setimo, dia todas as eguas eram tratadas com penicilina, independentemente de terem eliminado a infeccao ou nao. Sete dias apos, as eguas eram novamente submetidas a exame histopatologico e sincronizadas para realizar uma nova infeccao e novo tratamento. As biopsias foram avaliadas quanto a endometrite. Conclui-se que eguas susceptiveis a endometrite, com presenca de Streptococcus no utero, nao apresentam neutrofilia apos cinco dias de infeccao. Provavelmente o menor tempo de eliminacao bacteriana observado nos tratamentos com leucocitos frescos e congelados deva-se a outros fatores que nao o efeito quimioatraente dessas celulas.

Chitosan and alginate have the capacity to absorb the secretion, to stimulate collagen production and to restore tissue lesions, and were proved to be biocompatible and biodegradable. This article describes the treatment of an open infected bite-injury located on the right side of the abdominal-chest region, with subcutaneous-tissue loss, in a cat. Chitosan and chitosan-alginate films developed in the Department of Biotechnological Process of the Chemical Engineering School of the State University of Campinas (Unicamp) were used to cover the wound. These film dressings were changed at intervals of 48, 72 hours, and at 4, 7, 14, 21, and 24 days. On the 30th day the patient was released. Facing the satisfactory evolution of the injury, one may conclude that both films were effective for the treatment of the described case, leading to a healthy granulation reconstruction of the tissue, and to quick healing and scaring within 30 days.

O presente estudo teve por objetivo avaliar as variações provocadas por diferentes protocolos de atividade física nos parâmetros hemato-bioquímicos de eqüinos de salto. Foram utilizados dezessete eqüinos atletas, de raças de hipismo, com idades variando entre 5 e 12 anos. Todos os animais fizeram parte de três grupos de exercício e um de repouso. Foram realizadas coletas de sangue venoso e verificação da freqüência cardíaca com os animais em repouso (grupo Controle) e imediatamente após a realização de três diferentes protocolos de exercício. Os animais foram submetidos a 20 e 40 minutos de exercício em esteira com inclinação de 0° a velocidade constante de 5 m/s (grupo Esteira), 40 minutos de trabalho montado sendo 10 minutos ao passo, 20 minutos de trote e 10 minutos de galope em pista plana de areia (grupo treinamento) e prova de salto à velocidade média de 350 m/min, altura dos obstáculos de 1,20 metros e extensão do percurso de 430 metros (grupo Prova). Os parâmetros hematológicos (número de eritrócitos, concentração de hemoglobina e contagem leucocitária), a freqüência cardíaca, dosagem das enzimas creatina quinase (CK), aspartato aminotransferase (AST), lactato desidrogenase (LDH) e fosfatase alcalina (FA), dosagem de sódio e potássio, bicarbonato, proteínas plasmáticas totais, uréia e creatinina foram analisados. Os valores obtidos foram comparados com os valores basais e entre os grupos de exercício. O exercício em Esteira provocou aumento significativo no percentual de hematócrito e concentração de creatinina. A concentração de glicose apresentou redução após 20 e 40 minutos de exercício. O grupo Treinamento revelou aumento no número de eritrócitos, aumento de hematócrito, proteínas totais, CK, LDH, FA, creatinina, potássio e redução nas concentrações de glicose. O grupo Prova apresentou contagem de eritrócitos superior aos demais grupos, assim como percentual de hematócrito, concentração de hemoglobina e proteínas plasmáticas totais. Nesse grupo, as dosagens de CK, LDH, FA, lactato, creatinina e potássio apresentaram valores significativamente superiores em relação ao grupo Controle. A freqüência cardíaca revelou aumento significativo após a realização da atividade física quando comparados com o grupo Controle e entre os grupos. As variações encontradas foram de amplitude maior no grupo Prova. O aumento da intensidade do exercício físico provoca alterações em alguns parâmetros hemato-bioquímicas em cavalos de salto. A contagem eritrocitária, o percentual de hematócrito, a concentração de proteínas plasmáticas, lactato, potássio, creatinina, CK e FA elevam-se com o aumento da intensidade do exercício. A contagem leucocitária, dosagem de AST, sódio, bicarbonato e uréia não sofreram influência da intensidade de exercício proposta nos protocolos. A concentração de glicose é reduzida pelo exercício desempenhado nos grupos treinamento e prova.

Background : : : : rabies is a fatal zoonosis caused by a highly neurotropic RNA virus which causes neurological signs and that is distributed almost worldwide. Rabies affects domestic and wild animals and this is a disease transmitted by their bites, through which the virus present in the saliva is inoculated. In Brazil, Desmodus rotundus is the main hematophagous bat species that transmits rabies, especially to herbivores e equines. In equines, the clinical manifestation varies a lot, including both the paralytic and the furious form of the disease. The goal of this study is to describe a case of equine rabies in the city of Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil. Case : a six-year old male American Quarter Horse, which presented a clinical picture characterized by colic, depraved appetite and difficulty to move, was admitted to the Hospital de Clinicas Veterinarias of Universidade Federal do Rio Grande do Sul (HCV-UFRGS). The horse did not respond to treatment, therefore, it was submitted to exploratory laparotomy, when the moderate intestinal constipation and low intestinal motility was observed. A large colon enterotomy was performed and the intestinal contents were partially emptied. During recovery from anesthesia, the animal remained in lateral decubitus, not making any attempt to stand up. The animal did not show a favorable clinical evolution a few hours later, displaying weakness particularly in the hind limbs. Consequently, the animal underwent euthanasia. Samples of body organs were collected and fixed in formol 10%, processed routinely for histological purposes and then stained by hematoxylin and eosin. The histopathological examination revealed nonsuppurative meningoencephalitis in the central nervous system, without the presence of Negri bodies. Due to the history of recent rabies cases in neighbor areas of the property from where the animal came, direct immunofluorescence (IFD) and immunohistochemical (IHQ) exams for rabies were requested. The result was negative in IFD and a positive immunolabeling was observed in IHQ, thus demonstrating a viral antigen labeling in neurons of the cervical spine, pons, mesencephalon and cerebellum. Discussion : intracytoplasmic inclusions, also known as Negri bodies, are important and pathognomonic findings that were not observed in this case. Its presence and concentration depend on the stage and course of the disease, and they are not present in up to 30% of rabies cases, because certain virus strains do not produce Negri bodies. In equines, the occurrence of Negri bodies is less frequent than in bovines. IFD is the most adequate rabies diagnosis method, which is a highly sensitive technique (80-100%). The result was negative for this case, being confirmed only by IHQ. The immunohistochemical test is an important laboratorial diagnosis tool of rabies, because it allows the solution of unspecific meningoencephalitis cases when Negri bodies are not present. The treatment of animals with rabies is not considered. Vaccination in endemic regions or in areas where a rabies case has occurred is necessary. Rabies cases near the property where the animal lived were reported, but a prophylactic vaccination was not carried out. Rio Grande do Sul had a peculiar epidemiological status regarding rabies, as urban rabies cases had not been reported for approximately 17 years. However, rabies transmitted by hematophagous bats is still endemic in rural areas. This case demonstrates the importance of maintaining a rabies vaccination schedule in equine properties.

Episódios de doenças causadas pela ingestão de alimentos contaminados, principalmente os de origem animal, vêm aumentando consideravelmente. Várias espécies bacterianas têm sido responsáveis por estes surtos e a presença destes microrganismos em locais de industrialização e produção de alimentos está relacionada, principalmente, com a higienização inadequada realizada nestes ambientes. O trabalho teve como objetivo principal isolar e identificar os microrganismos presentes em um ambiente de matadouro-frigorífico de bovinos e através da amplificação por PCR identificar linhagens de Escherichia coli enterotoxigênicas entre os isolados. Um total de 580 bactérias foram isoladas e identificadas através das provas bioquímicas. Destas, 168 foram pertencentes a espécie Staphylococcus aureus, 123 a espécie Escherichia coli , 79 a espécie Corynebacterium vitarumem e as demais pertencentes aos gêneros Bacillus sp., Corynebacterium sp. e a família Enterobacteriaceae. As 123 bactérias identificadas como E. coli foram submetidas a extração de DNA plasmidial para os ensaios de PCR. Os resultados mostraram que 37 isolados de E. coli, foram positivos para o gene ST e destas, 20 também foram positivos para o gene LT e 2 foram somente positivos para o gene LT. Com os dados obtidos neste estudo foi possível observar a predominância de bactérias relacionadas com a contaminação fecal e bactérias originárias da pele dos bovinos. Os pontos com maiores índices de contaminação foram as mesas, tanto no matadouro como no frigorífico. The ingestion of contaminated foods of animal origin has considerably increased the occurrence of food-borne diseases. Several bacterium species are deemed responsible for outbreaks of those diseases and the presence of such species in food processing plants depends on the proper hygiene routines there adopted. The aims of this study were: (i) to isolate and characterize the microorganisms present in a bovine slaughterhouse and processing/chilling environment, and (ii) to identify enterotoxigenic Escherihcia coli (ETEC) among isolates using the PCR amplification protocol. Out of the total 580 bacteria isolated and identified by biochemical assays, 168 were Staphylococcus aureus, 123 Escherichia coli, and 79 Corynebacterium vitarumem. The remaining belonged to the Bacillus spp. and Corynebacterium spp. genera, and to the Enterobacteriaceae family. The 123 bacteria identified as E. coli underwent a plasmid DNA extraction routine for the PCR assays. The results revealed 37 E. coli isolates to be positive for the ST gene, out of which 20 were correspondingly positive for the LT gene and 2 were only LT positive. The data evidenced the predominance of bacteria indicating faecal contamination and of bacteria found in bovine hides. The sampling sites of higher contamination were desks, in both the slaughterhouse and in processing/chilling plants inspected.

O carcinoma inflamatório mamário é um carcinoma anaplásico com características clínicas e histopatológicas como crescimento rápido, envolvimento difuso, eritema, calor e dor nas mamas, edema nos membros posteriores, extensa infiltração de células inflamatórias, células epiteliais malignas nos linfonodos regionais apresentando um péssimo prognóstico. O cão é a única espécie animal em que esta neoplasia ocorre espontaneamente, entretanto apresenta uma incidência bastante rara tanto em humanos quanto em caninos. Este trabalho descreve dois casos de carcinoma inflamatório mamário em duas cadelas da raça Dobermann apresentando aumento de volume mamário com espessamento da pele na região das mamas, com secreção liquido-sanguinolenta local, aumento da temperatura e dor no local e edema de membros posteriores. Em ambos os casos, o resultado do exame citológico revelou carcinoma anaplásico e os animais apresentaram uma rápida evolução da doença em menos de 30 dias, optando-se pela eutanásia nos dois casos. Os achados de necrópsia indicaram metástases pulmonares em ambos os cães e com o exame histológico confirmaram o diagnóstico de carcinoma anaplásico. Este trabalho elucida bem os sinais clínicos característicos dos cães com carcinoma inflamatório, que se assemelham muito a mastite, demonstra o prognóstico reservado desta enfermidade, além de chamar a atenção para este raro tumor ter ocorrido na mesma raça. The mammary inflammatory carcinoma is an anaplasic carcinoma with clinical and histopathological characteristics as rapid growth, diffuse involvement, eritema, warmth and pain of the mammary gland, edema in the posterior limbs, extense infiltration of inflammatory cells, malignant epithelial cells in the lymph nodes, presenting bad prognostic. The dog is the only animal specie that this tumor occurs naturally, however this tumor is rare in human and in dogs. The mammary inflammatory carcinoma is one of the most malignant tumors in dogs. This study describes two cases of mammary inflammatory carcinoma in two dobermans presenting an increase mass of the mammary tissue, thickening of the skin in the region of the breasts, serosanguineous discharge of the region, high local temperature and local pain and edema of posterior limbs. In both cases, was diagnosed anaplasic carcinoma by the histopathology and the animals presented a rapid evolution of the illness in less than 30 days, opting to euthanasia in both animals. The autopsy findings had disclosed pulmonary metastasis in both dogs and confirmed the result of anaplasic carcinoma of the cytology. These cases elucidate the characteristic clinical signals of the animals with inflammatory carcinoma, that is very similar as mastitis, demonstrates the bad prognostic of this disease, observing that this rare tumor occurred in two dogs of the same breed.

Background : : : : Feline Cushing’s syndrome (FCS) is a disorder of excessive cortisol secretion by the adrenal glands and is rare in cats. The most frequently observed clinical signs are polyuria, polydipsia, and polyphagia which are also consistent with diabetes mellitus . These diabetic cats are often insulin resistants. The dexamethasone suppression test is considered the test of choice for the diagnosis of hyperadrenocorticism. The majority of cats with naturally occurring Cushing’s syndrome have pituitary-dependent hyperadrenocorticism and it is caused by functional microadenoma or macroadenoma pituitary. Computed tomography or magnetic resonance imaging is helpful in diagnosis of pituitary tumors. Treatments of pituitary-dependent hyperadrenocorticism include surgery of the pituitary or adrenals, radiation of the pituitary, and medical therapies. Bilateral adrenalectomy continues to represent the best long-term therapeutic strategy until hypophysectomy becomes more widely available. This paper reports a cat with macroadenoma pituitary causing hiperadrenocorticism and insulin resistance. Case : A 12-year-old female castrated Brazilian shorthair cat was referred to the veterinary due to polyuria, polydipsia, weight loss and polyphagia. The presence of hyperglycemia (blood glucose >250 mg/dl), glucosuria and elevated fructosamine concentration revealed diabetes mellitus . Insulin therapy was introduced but the glycemia was poorly controlled despite the high dose of insulin. Concomitant disease was suspected. Abdominal ultrasonography revealed bilaterally enlarged adrenals. The dexamethasone suppression test showed pituitary-dependent hyperadrenocorticism. Computed tomography or hypophysectomy wasn‘t available. Medical therapy with mitotane was introduced but anorexia and vomiting developed. Bilateral adrenalectomy was performed without complications and histological evaluation of adrenal revealed hyperplasia. After surgery, treatment with mineralcorticoids and glucocorticoids was introduced. The cat had resolution of clinical signs and insulin requirements were decreased. According to the owner, three weeks after surgery, the cat showed abnormal behavior, compulsive walking and circling. The cat died eight months after bilateral adrenalectomy. A complete necropsy was performed and histopathological examination confirmed the pituitary macroadenoma. Discussion : Insulin resistance should be suspected in diabetic cat if control of glycemia is poor despite the high insulin dosage. Clinical signs related to poorly controlled diabetes mellitus are common in cats with hyperadrenocorticism. Hyperadrenocorticism can cause severe insulin resistance and it is often associated with a pituitary macrotumor. Pituitary tumors may lead to hypercotisolism. Bilateral adrenalectomy is a viable alternative to transphenoidal hypophysectomy for treatment of feline pituitary-dependent hyperadrenocorticism when hypophysectomy is not available. Neurological signs can be a result of pituitary tumors and they can get worse after the adrenalectomy because of the enlargement of the tumor. Despite of clinical signs, the cat had improved in response to the bilateral adrenalectomy and had a good quality of life during eight months after surgery.

Background: The most common health problems described in fishes are noninfectious, infectious, and metabolic disorders. Fishes have neoplasias that are similar to those observed in mammals. Though these neoplasias do not cause economic losses to aquaculture, they have aroused a crescent interest from the comparative pathology’s point of view. Neoplasias of the oral cavity in fishes are usually reported as individual cases, but mandible tumors are not common, and most of them are squamous cells carcinomas. The aim of this study is to report a case of carcinosarcoma of the mandible in a rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), obtained from a trout farm in Campos do Jordao, Sao Paulo, Brazil. Case: The fish underwent necropsy and tissue samples were collected and fixed with a buffer-neutralized formalin solution, which were then embedded in paraffin, sectioned in 5 µm sections and stained with hematoxylin-eosin. The histological sections were stained for immunohistochemical procedures, according to a modified avidin-biotin-peroxidase complex technique. Slides containing tissue were deparaffinized with xylol and rehydrated with alcohol of different grades. The endogenous peroxidase activity was blocked by incubating the slides for 20 min at 0.3% H 2 O 2 in a solution of 5% methanol. After rinsing the slides in water and in a PBS/0.05%-Tween 20 solution, they were incubated in normal serum diluted 1:100 containing 10% bovine albumin in PBS (BSA), at room temperature for 30 min in humid chamber. After incubation, the primary anti-cytokeratin and anti-vimentin antibody was added to a 1:200 dilution in 10% PBS-BSA, and the slides were incubated until the next day at 41 o C in humid chamber. The slides were then rinsed in PBS and incubated for 7 min in a 50 mL 30.3-diaminobenzidine solution containing 1% PBS-BSA in 50 mL H 2 O 2 . Hematoxylin was used for counterstaining. The immunohistochemical analysis showed a tumor with epithelial and mesenchymatous neoplastic components. The epithelial component presented an epidermoid carcinoma with well differentiated and keratinizing areas, in addition to other little differentiated, non-keratinizing areas. The mesenchymatous component presented a fibrosarcoma. The immunohistochemical analysis demonstrated signs of cytokeratin in carcinomatous elements and of vimentin in sarcomatous elements. Discussion: Fishes are valuable resources in human nutrition, medicine, science and leisure. Similarly to other poikilothermic vertebrates, fishes also develop benign and malign neoplasias. However, it is their infectious diseases that are more known and studied. Teleost fishes constitute the widest and most diverse class of vertebrates, with over 20,000 known species. The diversity and placement in the phylogenetic tree make teleost fishes the ideal objects for comparative carcinogenesis studies, which could allow a broader knowledge about basic neoplastic development mechanisms, in comparison to studies limited to mammal models only. According to our knowledge and considering the literature available on fish tumors, this is the first description of a carcinosarcoma of the mandible affecting a rainbow trout.

Demodicose e a ectoparasitose causada por acaros do genero Demodex e a ocorrencia no gato e rara. Os sinais clinicos da doenca felina sao inespecificos e os diagnosticos diferenciais sao extensos. A forma generalizada geralmente esta associada a infeccao pelos virus da Imunodeficiencia Felina (FIV) ou da Leucemia Felina (FeLV). Esporotricose e uma micose causada pelo Sporothrix schenckii . Gatos apresentam elevada susceptibilidade a doenca e podem desempenhar importante papel na sua transmissao. Pediculose e a infestacao por piolhos que nos gatos e comumente determinada pela especie Felicola subrostratus . E relatado um caso de demodicose associada a esporotricose e pediculose, em um gato co-infectado por FIV/ FeLV, com 8 anos de idade, que apresentou na primeira avaliacao escoriacoes e ulceras cutâneas, alopecia e prurido cervical, descamacao no dorso, espirros e adenite generalizada. Inicialmente, foram diagnosticadas esporotricose e pediculose, atraves da demonstracao dos respectivos agentes etiologicos, e a infeccao pelo FIV e FeLV detectada no soro pelo ensaio imunoenzimatico. Instituiu-se tratamento com itraconazol 50mg diariamente por via oral e imidacloprid topico. Apos 30 dias, persistia o prurido associado a eritema generalizado e presenca de Felicola subrostratus nos pelos. Apos nova investigacao, detectouse a presenca de Demodex cati no exame direto de raspado de pele e na histopatologia. Instituiu-se terapia com ivermectina 0,4 mg/kg diariamente por via oral em associacao ao itraconazol e imidacloprid. Apos 4 meses de tratamento irregular houve abandono. Decorridos 16 meses, o paciente retornou pela ultima vez com cura clinica da pediculose, demodicose e esporotricose. A rara associacao de diferentes infeccoes dificultou a realizacao do diagnostico definitivo.

Porcine colonic spirochetosis (PCS) caused by Brachyspira pilosicoli has been identified as a contributing cause of diarrhea and reduced performance of growing pigs in all major swine producing countries. The current view that transmission of PCS occurs through contamination of the environment by acutely or persistently infected pigs is based on the assumption that the spirochetes remain viable in the environment. The purpose of this study was to compare the viability of Brachyspira pilosicoli kept in pure culture or mixed with feces at four different temperatures over time with that of Brachyspira hyodysenteriae . The results of the present study indicated that Brachyspira pilosicoli survived significantly longer than Brachyspira hyodysenteriae in pure cultures held at 24°C and 37°C, and at all temperatures in spiked fecal materials. Pure cultures of Brachyspira pilosicoli survived at least 63 days at -70°C, seven days at 4°C, 14 to 28 days at 24°C and seven to 28 days at 37°C. There was significant differences in the survival of the 2 species of spirochetes when mixed with feces. At -70°C, Brachyspira pilosicoli and Brachyspira hyodysenteriae survived respectively an average of 21 and 3 days, and at 4°C 12,25 and 4,25 days. Viability was reduced to one to seven days at 24°C and one to three days at 37°C for Brachyspira pilosicoli and Brachyspira hyodysenteriae . Information on the survival of Brachyspira pilosicoli outside the pig’s body provides a basis to improve strategies for PCS control.

Na ultima decada, o uso de sistemas microventilados (sistema VMA) em bioterios possibilitou alojar animais com melhor qualidade sanitaria devido ao maior controle ambiental fornecido por esses sistemas. Contudo, ainda e necessario uma melhor avaliacao desses sistemas, principalmente no que tange as respostas dos animais. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a integridade do epitelio do trato respiratorio superior (septo nasal e traqueia) de ratos mantidos em sistema VMA. Cem ratos, da linhagem Wistar-Hannover, heterogenicos, machos, de padrao sanitario convencional, foram mantidos durante 6 meses em dois distintos sistemas de ventilacao: ventilacao para conforto (grupo VGD, controle) e sistema VMA com intervalos de troca de cama variando de 3, 5, 7 e 9 dias (grupos IT3, IT5, IT7 e IT9, respectivamente). Apos a eutanasia dos animais, fragmentos de septo nasal e traqueia foram coletados e processados conforme a rotina de tecnica histologica. Os parâmetros morfometricos avaliados em septo nasal foram: 1) area de epitelio por unidade de superficie de membrana basal (EP/MB), 2) area de cilios por unidade de superficie de membrana basal (CI/MB), 3) numero de nucleos por unidade de superficie de membrana basal (NN/MB), 4) area de muco acido por unidade de superficie de membrana basal (MAc/MB), 5) area de muco acido por area de epitelio (MAc/EP) e 6) numero de nucleos por area de epitelio (NN/EP). O grupo VGD apresentou diferenca estatistica com grupos mantidos em sistema VMA em todos parâmetros avaliados, sugerindo maior grau de lesao tecidual. Entre os grupos mantidos em sistema VMA, o grupo IT3 foi o que apresentou o septo nasal com maior integridade epitelial. Na traqueia, a avaliacao por escores revelou lesoes severas (Grau III) somente no grupo VGD enquanto os grupos IT3, IT5, IT7 e IT9 apresentaram lesoes leves e medias. Os dados mostram que animais mantidos no sistema VMA, independente do intervalo de trocas de cama a que foram submetidos, apresentaram menor intensidade de lesoes no septo nasal e na traqueia do que os animais mantidos em VGD. A maior integridade epitelial apresentada pelo grupo IT3 e IT7 para septo nasal e traqueia, respectivamente, pode ser relacionado com a qualidade das condicoes ambientais fornecida aos animais alojados no sistema VMA, confirmando ser este sistema mais apropriado para a manutencao de ratos em bioterios.

O uso de antimicrobianos, como as penicilinas, é comum na maternidade, como profilático em leitões recém nascidos ou para o tratamento de diversas infecções bacterianas. As penicilinas em suas diferentes formulações (como a penicilin-procaína e amoxicilina) são bastante usadas, por seu espectro compatível com algumas das principais infecções prevalentes em leitões na maternidade. Raramente são registrados casos de intoxicações, cursando com mortalidade de leitões, ou reações anafiláticas. Este trabalho descreve um surto de mortalidade na fase de aleitamento, após administração de produto antimicrobiano à base de penicilina e estreptomicina. Os leitões tratados (157) pertenciam a duas granjas produtoras de leitões, integradas de uma agroindústria no sul do Brasil. Os sintomas presentes foram inquietação, dispnéia, tremores musculares, vômito e diarréia, todos ocorrendo num período máximo de 15 minutos a duas horas após administração do antimicrobiano. A mortalidade (13%) foi considerada decorrente de uma reação de anafilaxia posterior à administração de antimicrobianos à base de penicilina. Antimicrobials, such as penicillin, are frequently used in pork production in the prophylaxis and treatment of bacterial diseases in weanling piglets and suckling piglets and sows, therefore the penicillins are usually regarded as one of safest groups of antimicrobials for use in animals. Uncommonly, cases of intoxication with mortality and anaphylaxis have been reported. In the present report we describe an outbreak of mortality in 157 pre-weaning piglets, after injection of penicillin with streptomycin. Two comercials breeder herds, from two different farms, but with similar environment, management and genetic characteristics presented mortality episodes in Southern Brazil. The main symptoms were uneasiness, dyspnea, shivering, emesis and diarrhea in piglets treated commencing 15 minutes after injection and continuing for up to two hours. The cause of mortality (13%) in the piglets was an anaphylactic reaction, caused by penicillin injection.

The occurrence of bovine external otitis in tropical regions is predominantly assigned to parasitic infestations . These infections represent a significant problem and can be associated with vestibular disease and death. Yeasts of the genus Malassezia are members of the normal microbiota on human and animal skin, and may also be associated with bovine parasitic otitis. The purpose of this study was to evaluate the prevalence of the genus Malassezia in healthy cattle and cattle with otitis by direct microscopic examination and culture. Specimens of 1010 cattle were collected with sterile swabs, inoculated onto Mycosel medium, supplemented with olive oil, and incubated at 32 o C for one week. In addition, 200 cattle (143 healthy and 57 with otitis) were also evaluated by direct microscopic examination using a Gram staining method to detect Malassezia spp.. Using the direct examination of the specimens no significant difference was observed between the presence of Malassezia spp. from 143 healthy animals (30.7%) and from 57 animals with otitis (26.3%). Culture was positive for Malassezia spp. in 329 (38.12%) of a total of 863 healthy cattle and in 93 (63.27%) of 147 cattle with otitis (p Malassezia spp. from cattle with a high level of confidence was possible by culture. This exam was much more specific, allowing a much more accurate visualisation of yeast cells and giving isolates for biochemical tests.

Activation of astrocytes or astrogliosis is a prominent component of the inflammatory response and an indicator of injury in the brain. These astrocytes produce a large array of inflammatory mediators, growth and neuroprotective factors. This study was an investigation from astrocyte (GFAP) response and TGF- ? 1 involvement during VSV acute encephalitis using immunohistochemistry to verify relation between astrocytes and TGF- ? 1. Animals developed symptoms around 6 th day after VSV inoculation. Viral proteins were mainly detected at olfactory bulb, ventricular cell layer and disseminated to hippocampus, mesencephalon and diecephalon areas and brain stem. Also at 6 th day post inoculation GFAP and TGF- ? 1 staining was observed in good association with virus-detected areas of brain. However, in mice with severe symptoms we observed reduction in the intensity of GFAP labeling at the same areas where TGF- ? 1 upregulation was observed. These areas show correlation with areas of necrosis and where are astrocytes with degenerative aspect. We observed TGF- ? 1 staining in damaged astrocytes, suggesting an effort of those cells in controlling inflammation in acute phase of VSV encephalitis.

Background : : : Ovarian tumors are considered rare both in dogs and cats. Germ cell neoplasms correspond to approximately 15% of the cases and can be classified into dysgerminomas, teratomas and teratocarcinomas. Reports of bilateral dysgerminoma in dogs and cats are rare. The aim of this work was to describe a case of bilateral dysgerminoma and cystic endometrial hyperplasia with pyometra in a bitch by presenting the clinical, surgical, pathological and immunohistochemical findings. Case : A 10-year-old female crossbred dog was presented with a history of vomiting, apathy and purulent vulvar discharge. Physical examination revealed hyperthermia and pain was observed on abdominal palpation. Ultrasound examination revealed cystic formation and increased echogenicity inside the uterus. The animal underwent ovariohysterectomy (OHE). Macroscopically, the ovaries were multinodular, spherical to ovoid in shape, measuring 6 cm in diameter, and with a dark red color; they exhibited a firm consistency and a hemorrhagic cut surface with cystic areas and foci of necrotic tissue. At microscopic evaluation of both ovaries, the neoplasm consisted of large and polyhedral cells with amphophilic cytoplasm which were arranged in cords separated by connective tissue. The cells exhibited an anaplastic appearance, with central nuclei, large amounts of granular chromatin and one or more evident nucleoli. Several mitotic figures, often incomplete and with consequent formation of multinucleated cells similar to giant cells, were observed. Immunohistochemical detection of cytokeratin and vimentin was performed for further examination. The ovarian tumor exhibited positive staining for cytokeratin and negative staining for vimentin. Discussion : Most ovarian tumors are asymptomatic and many times are considered incidental findings during spaying surgeries. On physical examination, affected animals may show palpable abdominal masses, ascites and systemic signs caused by hormonal disturbances. The macroscopic and microscopic findings seen in this case are in accordance with those found in the literature and confirm the diagnosis of bilateral dysgerminoma and cystic endometrial hyperplasia-pyometra. Dysgerminoma should be differentiated from other neoplasias as lymphosarcoma, solid adenocarcinoma, solid granulosa cell tumor, theca cell tumor and teratoma. Diagnosis is performed by histopathological analysis. Immunohistochemistry can be performed to identify the origin of tumoral cells in order to assist the differential diagnosis for other neoplasias. Even though the immunohistochemical result can be positive for cytokeratin, this is not considered usual for dysgerminomas. The positive result for cytokeratin is related to the anaplastic characteristic of the tumor. Most cases of dysgerminomas are described in older dogs and cats, yet it can develop in younger animals. Dysgerminoma is a tumor that is typically unilateral and is hardly ever found in both ovaries. The rarity with which this neoplasia is observed in bitches can be related to the premature age at which OHE is performed.

A esporotricose e uma micose, subcutânea e zoonotica, causada pelo fungo dimorfico Sporothrix schenckii que afeta animais e humanos. A micose em caes era considerada rara devido aos poucos relatos descritos na literatura, no entanto, nos ultimos anos observou-se um crescente registro de casos desta doenca no Brasil. Neste estudo foram analisadas as caracteristicas clinicas da esporotricose em tres caes diagnosticados no Laboratorio de Micologia (FV-UFPel), os quais apresentavam dispneia, secrecao nasal e espirros. Dois destes demonstravam tambem, lesoes cutâneas ulceradas e crostosas no plano nasal. Embora um dos animais nao apresentasse lesoes cutâneas, os sinais respiratorios eram evidentes assim como a presenca de linfadenopatia. Este estudo alerta para a ocorrencia da esporotricose em caes na regiao de Pelotas e Rio Grande, e salienta para a similaridade das lesoes observadas, com outras doencas infecciosas e neoplasicas, o que torna importante a realizacao de diagnostico diferencial.

A raiva é causada pelo vírus da raiva (VR), um RNA vírus membro do gênero Lyssavirus, família Rhabdoviridae. O objetivo deste trabalho foi determinar as características de uma amostra (RV183-07) isolada de uma cadela que morreu em uma área livre de raiva urbana, onde não ocorriam casos da infecção em cães há mais de 20 anos, buscando inferir a fonte mais provável de contaminação da mesma. O vírus foi identificado por imunofluorescência direta, multiplicado em camundongos e analisado antigenicamente frente a um painel de anticorpos monoclonais antilissavírus. Um fragmento do genoma viral correspondente ao gene da nucleoproteína (N) foi submetido à transcrição reversa seguida da reação em cadeia da polimerase e o amplicom obtido foi submetido à análise com enzimas de restrição. Um fragmento de 303 pares de bases do gene N foi clonado, sequenciado e comparado com outras sequências do vírus da raiva disponíveis no Genbank. O isolado RV183-07 demonstrou características antigênicas e genomicas de vírus que têm os morcegos não hematófagos da espécie Tadarida brasiliensis como hospedeiro natural. A fonte de contaminação mais provável da cadela foi um contato acidental com um morcego não hematófago da espécie Tadarida brasiliensis, habitante comum daquela área. Em vista disso, o status de “livre de raiva urbana” da área não foi comprometido. Rabies is caused by rabies virus (RV), a RNA virus member of the Lyssavirus genus, family Rhabdoviridae. The aim of this study was to determine antigenic characteristics of a rabies virus isolate (RV183-07) recovered from a stray bitch that died of rabies and to infer the most likely source of contamination, since no urban rabies has been reported in the area in more than 20 years. The virus was identified by direct immunofluorescence and multiplied by one passage in mice. The antigenic profile of the isolate was determined with a panel of monoclonal antibodies to lyssavirus antigens on infected brain tissues. A fragment of the viral genome corresponding to the nucleoprotein (N) gene was submitted to reverse transcription/polymerase chain reaction and the amplicon obtained was subjected to restriction enzyme analysis. A 303 base pair fragment of the N gene was cloned, sequenced and compared to other RV sequences available at Genbank. The isolate RV183-07 displayed antigenic and genomic characteristics of rabies virus variants whose natural reservoir is the non-hematophagous bat Tadarida brasiliensis. Therefore, the most likely source of contamination of the bitch was an incidental contact with an infected bat of that species, common inhabitants of the area. In view of that, the status of “urban rabies-free” of the area was not compromised.

Fibrossarcoma felino e uma neoplasia maligna, localmente invasiva e de tecido conjuntivo fibroso que, em alguns gatos, esta associada a vacinacao, particularmente a vacinas com adjuvantes. Ocasionalmente, fibrossarcoma aparece naturalmente, nao associado a vacina. O presente artigo relata o caso de um felino macho de 10 anos de idade, com um historico de emagrecimento cronico ha alguns meses e aumento do volume abdominal cranial. Atraves de exames ultrassonografico e radiografico, identificou-se uma massa na regiao hipogastrica e diante do quadro, encaminhou-se o animal a laparotomia exploratoria. A neoplasia localizava-se na regiao do ducto biliar e uma segunda massa solitaria foi identificada no lobo caudado do figado. Houve a remocao cirurgica dos tumores e a coleta de amostras para exame histopatologico. De acordo com os achados dos exames por imagem, avaliacao macroscopica e histopatologica, o diagnostico foi fibrossarcoma primario de ducto biliar.

Entre os meses de junho e agosto de 2006 dois surtos de intoxicacao pelas larvas de P. flavipes ocorreram, um em ovinos (surto 1) e outro em bovinos (surto 2). O surto nos ovinos ocorreu nos meses de junho e julho, no municipio de Encruzilhada do Sul/RS, e morreram 25 ovinos de um rebanho de 175 ovinos e 11 bovinos. Os ovinos eram mantidos em uma area de 40 hectares de pasto nativo. O surto nos bovinos ocorreu no mes de agosto, no municipio de Sombrio/SC, e morreram 17 animais que estavam num lote de 77 bovinos, o rebanho total da propriedade era de 280 animais. O lote de bovinos estava em uma area de 90 hectares, onde dois animais morreram devido a ingestao das larvas de P. flavipes. O lote foi transferido para outra area, onde morreram mais 15 animais em um periodo de 5 dias. Seis ovinos do surto 1 e seis bovinos do surto 2 foram necropsiados. Grande quantidade de agrupamentos de larvas de P. flavipes foram encontradas no campo e no rumen dos animais de ambos os surtos. Larvas de P. flavipes foram coletadas em ambos os surtos e foram armazenadas congeladas a -20oC. Larvas frescas e larvas congeladas foram administradas para 6 ovinos, por meio de uma seringa com a ponta cortada. A menor dose letal foi de 7,5 g/kg em administracao unica. Animais que receberam doses sub-letais de 5 g/kg e posteriormente doses letais de 10 g/kg e 15 g/kg em intervalos de 15 e 30 dias, mostraram menor sensibilidade a intoxicacao, um animal nao adoeceu e outro adoeceu apenas depois de receber uma dose de 15 g/kg. Os animais intoxicados experimentalmente mostraram sinais de doenca cerca de 48 horas e morreram cerca de 54 horas apos a intoxicacao. O exame bioquimico, realizado em intervalos de 12 horas, revelou alteracoes apenas nos animais que adoeceram. Os niveis sericos de GGT apresentavam-se elevados depois de 24 horas da intoxicacao e continuaram a se elevar ate a morte; AST apresentou aumento significativo cerca de 30 horas apos a dosificacao e, posteriormente, decaindo ate a morte; os niveis sericos de glicose sofreram queda proximo a morte dos animais. As lesoes de necropsia, observadas nos casos espontâneos e experimentais, foram semelhantes e mais consistentes no figado, que se apresentava com acentuacao do padrao lobular e com areas de coloracao amarelada com petequias subcapsulares. Foram observados tambem edemas cavitarios, edema da parede da vesicula biliar, perirrenal e na regiao inicial do duodeno, pâncreas e abomaso. Alem das hemorragias no figado, havia hemorragias no tecido subcutâneo, coracao, e mucosas e serosas da cavidade abdominal. O principal achado histopatologico era caracterizado por necrose coagulativa centrolobular ou massiva, associada a hemorragia e congestao centrolobular e degeneracao e tumefacao hepatica na regiao periportal. Observou-se, ainda, deplecao e necrose linfoide nos centros germinativos de linfonodos, nas placas de Peyer e na polpa branca do baco. A microscopia eletronica demonstrou lesao hepatica com hepatocitos necroticos, e dilatacao dos espacos de Disse e endotelio vascular. Foi observada tambem intensa proliferacao de reticulo endoplasmatico liso no animal que recebeu doses graduais das larvas. As larvas descongeladas e dessecadas a 100oC, por 24 horas, foram administradas a um coelho e mostraramse toxicas. Outros dois coelhos receberam fracoes solidas e liquidas das larvas, respectivamente, e apenas o coelho que recebeu a fracao solida morreu.

O Anaplasma platys e o agente de uma doenca branda conhecida como trombocitopenia ciclica canina, que cursa frequentemente com trombocitopenia e parasitemia das plaquetas, a cada quatorze dias. Alguns recentes relatos tem descrito uma doenca severa principalmente associada a infeccao por Ehrlichia canis. Este relato descreve os principais achados clinicos, hematologicos e bioquimicos da coinfeccao por A. platys e E. canis diagnosticada atraves da PCR e nested PCR, usando oligonucleotideos especificos. Os caes apresentavam sinais inespecificos, sem disturbios hemostaticos como trombocitopenia, considerado principal achado da infeccao por A. platys e comum na E. canis . Anemia foi observada nos dois casos, e em nenhum houve alteracao nos niveis sericos de ureia, creatinina, alanino aminotransferase e fosfatase alcalina. Em um cao, observou-se hiperglobulinemia, decorrente da resposta imune, concordando com a literatura que cita exacerbacao clinica associada a este tipo de coinfeccao.

Os ectoparasitos sao causadores de dermatopatias nos animais domesticos, acometendo, frequentemente, caes e gatos e podendo assumir um possivel potencial zoonotico. Assim, o presente trabalho teve por objetivo descrever a ocorrencia de acaros, causadores de sarnas, em caes e gatos, no municipio de Mossoro, estado do Rio Grande do Norte. O estudo foi conduzido entre fevereiro de 2002 a janeiro de 2007, no qual foram coletadas amostras de 503 animais (entre caes e gatos), atraves de raspados cutâneos, individualmente identificados e diagnosticados no Laboratorio de Parasitologia Animal da Universidade Federal Rural do Semi-Arido (UFERSA). A analise dos dados foi realizada por meio de frequencia absoluta e relativa. Em relacao aos caes, 77 (18,6%) apresentaram alguma especie de acaro, com 70 (90,9%) positivos para Demodex canis e 7 (9%) acometidos por Sarcoptes scabiei var. canis , enquanto que, em gatos, os positivos representaram 26 (28,5%) animais, com presenca de 18 (69,2%) felinos com Notoedres cati, 4 (15,3%) positivos para S. scabiei e 4 (15,3%) com Lynxacarus radovskyi. Os caninos e felinos estudados apresentaram acaros distintos.

Foram testadas na imunoistoquimica (IHQ) para diarreia viral bovina (BVDV) 654 biopsias de tecidos cutâneos da orelha de bovinos e tecidos de 161 fetos bovinos abortados. Concomitantemente, foram avaliados pela necropsia, histologia e IHQ 19 casos ocorridos entre janeiro de 1996 e dezembro de 2003 e dois casos acompanhados entre janeiro de 2004 e agosto de 2005, remetidos ao Setor de Patologia Veterinaria (SPV) da Universidade Federal do Rio Grande do Sul. No total, duas biopsias, seis bovinos e tres fetos bovinos abortados apresentaram antigenos do BVDV na IHQ. As lesoes macroscopicas desses animais ocorreram principalmente no trato digestivo, como enterite e ulceracoes na cavidade oral, gengiva e lingua. Atrofia de timo e linfadenomegalia tambem foram observadas. Histologicamente, hiperplasia linfoide e perda da estrutura folicular nos linfonodos, necrose das placas de Peyer, gliose e neuronofagia (cerebro) e nefrite e degeneracao tubular renal foram algumas das lesoes observadas. Na IHQ a marcacao positiva do antigeno viral foi evidenciada principalmente na pele, cerebro, cerebelo, intestino delgado, linfonodos e baco. A prevalencia de casos de BVDV em bovinos representou 23,8% do total de 21 bovinos suspeitos necropsiados entre janeiro de 1996 a agosto de 2005 e 1,86% dos fetos abortados examinados entre junho 1999 e maio 2004 no SPV-UFRGS.

Streptococcus suis sorotipo 2 e um dos mais importantes patogenos de suinos, o qual traz significativas perdas economicas em todo o mundo, alem de ser um risco a saude publica. O presente trabalho objetivou estudar a prevalencia de Streptococcus suis sorotipo 2 em tonsilas de suinos sadios em idade de abate e analisar o perfil de sensibilidade antimicrobiana das amostras isoladas. Foram coletadas 116 tonsilas de suinos abatidos provenientes de seis municipios de diferentes regioes de Mato Grosso. As amostras foram submetidas ao isolamento bacteriano e provas bioquimicas. Para a confirmacao da especie e sorotipo, foram realizadas as tecnicas de PCR para os genes codificantes do 16S rRNA e capsular cps2j . O perfil de sensibilidade as drogas antimicrobianas foi realizado pelo metodo de difusao em disco, testando-se os seguintes antibioticos: ampicilina, lincomicina, norfloxacina, penicilina G, oxacilina e tetraciclina. Das 116 amostras analisadas, 17 foram positivas atraves do exame bacteriologico para o Streptococcus suis sorotipo 2, perfazendo uma prevalencia de 14,65%. Todas as amostras foram confirmadas atraves de PCR como sendo Streptococcus suis sorotipo 2. Dentre os antibioticos testados, a oxacilina e ampicilina foram os mais sensiveis, enquanto a lincomicina, tetraciclina, norfloxacina e penicilina G foram os mais resistentes.

A pleuropneumonia suina (PPS) e uma doenca infecto-contagiosa decorrente da infeccao e efeitos patologicos do Actinobacillus ( A. ) pleuropneumoniae , caracterizada por pneumonia necrotica e hemorragica associada a pleurisia fibrinosa. A doenca causa prejuizos devido a perdas por morte, pouco desenvolvimento e condenacoes de carcacas no abatedouro. O isolamento do A. pleuropneumoniae e necessario para investigacao de resistencia a antibioticos e a identificacao do sorotipo e importante para estudos epidemiologicos e controle da doenca atraves de programas de vacinacoes. Este trabalho mostra a ocorrencia dos sorotipos da bacteria atraves da sorotipificacao pela composicao da capsula polissacaridea por imunodifusao em gel de agarose contra soros dos sorotipos 1 ao 12. As amostras (399) analisadas foram isoladas no periodo de 1993 a 2006 em diferentes regioes do Brasil. Houve 171 amostras nao sorotipificaveis. Durante o periodo estudado, os sorotipos mais prevalentes foram 5 (14,8%), 3 (13,8%), 10 (7,3%),6 (6,5%) e 7 (5%). Foi observado diminuicao na ocorrencia dos sorotipos 5 e 3 a partir do ano de 2000, indicando que as vacinas empregadas possivelmente diminuiram a doenca clinica. Neste tempo, outros sorotipos como o 4, 6, 8 e 10 ocorreram, o que requer maior atencao no comercio de animais, assim como o monitoramento dos rebanhos brasileiros.

Difalo, pênis duplo ou bífido é uma anomalia congênita rara que ocorre em animais e no homem, com escassos relatos na literatura. Este relato apresenta um caso de difalia em um bovino macho adulto castrado. A peça do sistema reprodutor de um bovino foi encaminhada por um frigorífico local para realização de exame histológico. O material foi analisado, fixado em formol 10%, processado de forma rotineira para histologia e corado pela hematoxilina-eosina. Macroscopicamente, a peça apresentava duas glandes penianas, uma composta pelo corpo cavernoso, corpo esponjoso, uretra e prepúcio do pênis, sugerindo que esta fosse a parte normal. Adjacente a essa, havia uma formação tecidual idêntica à glande peniana, que, ao corte, no entanto, não se observavam uretra, corpos cavernoso e esponjoso. Ao exame microscópico das duas glandes, confirmou-se sua estrutura histológica, uma composta por corpo cavernoso, corpo esponjoso e uretra e a outra somente de tecido conjuntivo fibroso revestido por epitélio. O diagnóstico foi baseado nas alterações macroscópicas e constituição histológica característica. Esta anomalia pode prejudicar a micção assim como o desempenho reprodutivo do animal. Diphallus, double or bifid penis is a rare congenital anomaly that affects animals and human, which a few cases have been report in the literature. This report describes a case of diphallia in a bovine male, adult, castrated originating from a slaughterhouse that had two penile glands for histological exam. For microscopic examination, specimens were previously fixed in 10% formalin solution, processed routinely for histology and stained with hematoxylin-eosin. Macroscopically, duplication of glans penis in this bull was observed, one of them was composed with corpus cavernosum, corpus spongiosum, urethra and prepuce. Besides, one portion of tissue that reminds a glans penis was next the normal organ. Although, corpus cavernosum, corpus spongiosum, urethra did not find. In histological examination of the two glands, only one showing corpus cavernosum, corpus spongiosum and urethra and another one had fibrous connective tissue lined by epithelium. The definitive diagnosis was based on macroscopic and histological features. This congenital anomaly could cause difficult in urination, also, affect reproductive performance of this animal.

A deposicao sistemica do amiloide pode ocorrer de forma hereditaria, a predisposicao ocorre principalmente em gatos Abissinios e caes da raca Shar-pei Chines. Um canino da raca Shar-pei Chines foi encaminhado para necropsia no Setor de Patologia Veterinaria da UFRGS. O canino apresentava aumento de volume dos membros posteriores e nos seus exames bioquimicos havia um aumento significativo de creatinina e ureia. Na necropsia observou-se edema nos membros posteriores, rins palidos e mineralizacao na regiao medular renal. Erosoes bilaterais na regiao ventral da lingua, mineralizacao no endocardio do atrio esquerdo, parede das arterias aorta e pulmonares tambem foram observados. Fragmentos de rim, mergulhados em solucao de lugol, demonstraram inumeros pontos escuros que corresponderam ao deposito de amiloide nos glomerulos. Na histopatologia, se evidenciou a presenca de proteinas amiloides no rim, figado e tireoide, resultado este confirmado pela coloracao de vermelho Congo. A diferenciacao com permanganato de potassio demonstrou ser um amiloide do tipo AA. No canino analisado nao havia indicio de doenca inflamatoria cronica. Com isso, supoem-se que a amiloidose seja de causa hereditaria.

A raiva e uma zoonose causada pelo virus da raiva (VR), um membro do genero Lyssavirus da familia Rhabdoviridae . Apesar do VR, ser considerado antigenicamente estavel, amostras com variacoes antigenicas tem sido detectadas. Na busca de identificar possiveis variantes circulantes no Brasil, um dos objetivos do presente estudo foi identificar as caracteristicas antigenicas de amostras de virus rabico circulantes nas regioes Centro-Oeste e Norte do Brasil. Para tanto, amostras do VR coletadas naquelas regioes, isoladas de diferentes hospedeiros, tiveram seu perfil antigenico avaliado por imunofluorescencia indireta frente a um painel de anticorpos monoclonais preparados contra antigenos de lissavirus. Foram identificados tres perfis antigenicamente distintos: um caracteristico de amostras de origem de caes domesticos, outro de amostras de morcegos hematofagos e outro de amostras de morcegos nao hematofagos. O segundo objetivo deste estudo consistiu em avaliar a estabilidade antigenica e a patogenia de amostras com tais perfis antigenicos distintos. Para atingir este objetivo, tres amostras de VR com diferentes perfis antigenicos foram submetidas a vinte inoculacoes sucessivas em camundongos. A medida em que as passagens eram realizadas, o perfil antigenico das mesmas era monitorado. Os resultados obtidos revelaram que todas as amostras mantiveram-se relativamente estaveis e todas as amostras ao longo as 20 inoculacoes mantiveram altamente patogenicas. Duas delas (a amostra com perfil antigenico de caes e a amostra com perfil antigenico de morcegos hematofagos) mantiveram-se antigenicamente estaveis ao longo de todas as 20 inoculacoes. Por outro lado a amostra com perfil antigenico usualmente detectado em morcegos nao hematofagos apresentou uma modificacao antigenica apos a setima passagem sucessiva. Isto pode indicar diferencas no grau de adaptacao do virus a especie hospedeira natural. Sumarizando os resultados desses estudos, conclui-se que as variantes do VR circulantes nas regioes Norte e Centro-Oeste do Brasil possuem caracteristicas antigenicas comuns a amostras cujos hospedeiros naturais sao caes domesticos, morcegos hematofagos e morcegos nao hematofagos. As variantes detectadas apresentam um elevado grau de estabilidade antigenica; a variante cujo hospedeiro natural sao morcegos nao hematofagos parece menos estavel antigenicamente. Essa menor estabilidade antigenica poderia ter relacao com o grau de adaptacao a especie hospedeira natural, hipotese que sera examinada mais profundamente em estudos futuros.

Este estudo incluiu 523 suinos, entre tres e quatro meses de idade, com sinais clinicos sugestivos de circovirose. A maioria (471) desses animais foi recebida viva no Setor de Patologia Veterinaria - SPV/UFRGS, onde foram avaliados clinicamente, eutanasiados e necropsiados. Os principais sinais observados foram caquexia, crostas eritematosas circulares na pele, alteracoes articulares, palidez ou ictericia de mucosas, diarreia, sinais respiratorios e sinais nervosos. Os principais achados macroscopicos foram linfadenomegalia, pulmoes nao colapsados, consolidacoes pulmonares, hiperqueratose do quadrilatero esofagico, esplenomegalia, rins palidos ou amarelados com pontos brancos, ascite, hidropericardio e hidrotorax. Fragmentos de pele, linfonodo inguinal, linfonodo mesenterico, tonsila, baco, ileo, colon, figado, rim, pulmao, coracao e cerebro foram coletados e processados convencionalmente para histologia. As principais alteracoes microscopicas incluiram infiltrado linfoistiocitario e deplecao centrofolicular em orgaos linfoides, infiltrado linfoistiocitario nos intestinos, pneumonia intersticial, hepatite portal mononuclear, nefrite intersticial e hiperplasia centrofolicular, edema e dilatacao de vasos linfaticos dos intestinos e linfonodos. Amostras de colon e ileo de 111 suinos que apresentavam conteudo de consistencia fluida foram coletadas e processadas para bacteriologia. Em 27 desses animais foram detectados agentes bacterianos patogenicos. E. coli foi o mais prevalente, mas Salmonella sp. e Brachyspira sp. tambem foram detectadas. Cortes de linfonodos mesentericos, pulmoes, rins e intestinos de 56 animais foram submetidos a imunoistoquimica com anticorpo policlonal anti-PCV2. Destes, amostras de 50 foram positivas. Os achados clinicos e macroscopicos desses animais foram compativeis com circovirose, mas a associacao de lesoes histologicas caracteristicas da doenca com a presenca do PCV2, demonstrada imunoistoquimicamente, foi diagnostica.

Entre os agentes etiologicos de mastite bovina, destacam-se as bacterias do genero Streptococcus e generos relacionados, como os Enterococcus . Esses microrganismos podem causar tanto mastite contagiosa, como e o caso de Streptococcus agalactiae , quanto mastite ambiental, causada pelas demais especies de Streptococcus e Enterococcus . Mudancas na taxonomia e nomenclatura deste grupo de microrganismos tem ocorrido nas ultimas duas decadas, resultado da aplicacao de tecnicas moleculares que auxiliam no processo de diferenciacao de generos e especies bacterianas. Alteracoes tambem tem ocorrido no padrao de infeccao intramamaria nos rebanhos leiteiros em que foram controladas as mastites causadas por agentes contagiosos. Nesses rebanhos, as infeccoes causadas por patogenos do ambiente sao atualmente o alvo dos programas de controle da mastite. O presente artigo apresenta uma revisao dos principais generos e especies bacterianas do grupo dos cocos gram-positivos catalasenegativos que ja foram relacionadas com infeccoes da glândula mamaria de bovinos. Esses incluem, alem dos generos mencionados acima, os generos Aerococcus , Lactococcus e Gemella ; e dentro do genero Streptococcus , as especies S. agalactiae , S. uberis , S. bovis , S. dysgalactiae , S. parauberis , S. equi , S. porcinus , S. canis , S. pluranimalium , S. parasanguinis e S. iniae.

Las neoplasias de la glándula mamaria representan el tumor más frecuente en perras enteras, siendo la edad media de aparición entre los 8 y 10 años. Las hormonas esteroides sexuales, principalmente estrógenos y progesterona, representan el principal factor de riesgo para su desarrollo, y la castración antes del segundo celo reduce el riesgo de aparición de esta neoplasia. Se ha demostrado la presencia de receptores a estrógenos (RE) y progesterona (RP) en los tumores mamarios caninos, siendo esta expresión mayor en tumores benignos comparada con tumores malignos. Sin embargo, la asociación de los RE y RP con factores clínico - patológicos, así como su valor pronóstico, se encuentran en discusión. Por otra parte, algunos estudios en humanos han revelado que además de las clásicas hormonas sexuales, otras hormonas parecen estar involucradas en el desarrollo y/o progresión de esta neoplasia. Así, se ha demostrado la presencia de los péptidos oxitocina y vasopresina, así como de sus receptores en líneas celulares de cáncer mamario humano y en carcinomas primarios de mama humanos. En la perra, al momento se desconoce la presencia de receptores a estas hormonas en los tumores mamarios caninos. La extirpación quirúrgica del tumor representa el tratamiento de elección para todas aquellas perras con neoplasias mamarias. Sin embargo, existe un elevado número de pacientes en los que la cirugía no es suficiente para lograr la curación, o pacientes en los que la realización de la cirugía no es posible, por lo que se hace necesaria la búsqueda de terapias adyuvantes a la cirugía o paliativas. Trabajos sobre líneas celulares de cáncer mamario humano, así como estudios in vivo sobre modelos murinos de cáncer mamario, han demostrado que la oxitocina y la desmopresina (análogo sintético de la hormona vasopresina) tienen la capacidad de modular el crecimiento de las células tumorales. En la perra, al momento se desconocen los efectos de estos péptidos sobre líneas de cáncer mamario canino. Por lo tanto, la presente tesis de doctorado tuvo como objetivo general aportar conocimientos acerca de la influencia del componente hormonal sobre el desarrollo de los tumores mamarios caninos, mediante el estudio de la población de receptores a hormonas esteroideas, oxitocina y vasopresina en el tejido mamario tumoral canino y la evaluación de los posibles efectos antitumorales de péptidos en una línea celular de cáncer mamario canino. En la primera parte de la tesis doctoral se realizó una caracterización clínica y patológica de los tumores mamarios caninos recolectados. El estudio reveló una edad promedio de aparición de esta neoplasia de 9,4 años, indicando que ocurre mayormente en perras de edad media a adulta. Asimismo, la mayor parte de las perras se encontraban enteras al momento del diagnóstico, lo cual brinda mayor sustento al rol fundamental que tienen las hormonas esteroides sexuales en el desarrollo de los tumores mamarios. El análisis histológico mostró que el 60% de las neoplasias fue de naturaleza maligna, siendo el carcinoma túbulo-papilar el más frecuentemente diagnosticado. El restante 40% de los tumores fue de naturaleza benigna, siendo el adenoma (simple y complejo) el tipo más comúnmente hallado. El estudio inmunohistoquímico del receptor a estrógenos α (REα) permitió visualizar una mayor expresión en tumores benignos en comparación con malignos. Asimismo, en el grupo de tumores malignos, se observó una mayor expresión en carcinomas del tipo túbulo-papilar, así como en carcinomas de Grado Histológico de Malignidad (GHM) I. Estos resultados dan mayor sustento a la hipótesis de que la presencia del REα se pierde conforme el tumor progresa hacia la malignidad, y que su expresión en tumores malignos se relaciona con características de baja malignidad tumoral. También se estudió la expresión del receptor a estrógenos β (REβ), observándose que su expresión ocurrió de manera similar tanto en tumores mamarios benignos como malignos. Dado que no se observó asociación alguna con los factores de valor pronóstico analizados para tumores malignos, en la presente tesis no se pudo establecer su rol en las neoplasias mamarias en caninos. Además, se estudió la presencia del RP en tumores mamarios benignos y malignos, observándose una baja expresión en ambos tipos tumorales. Cuando se evaluó su asociación con los factores clínico-patológicos, se observó una mayor expresión del RP en perras que se encontraban en estadíos clínicos IV y V, permitiendo sugerir que los agentes antiprogestágenos podrían ser de utilidad en casos de cáncer mamario avanzado. Por otro lado, en la segunda parte de la presente tesis se demostró la presencia del receptor a oxitocina (ROT) en los tumores mamarios caninos analizados, hallazgo que representa el primer reporte acerca de la expresión de este receptor en esta neoplasia en la especia canina. El ROT se expresó tanto en tumores benignos como malignos, y en estos últimos, su expresión fue mayor en carcinomas de GHM I y II, y tendió a ser mayor en los tumores malignos positivos para el REα. Sin bien se necesitan mayores estudios al respecto, se podría especular que, al igual que ocurre con otros receptores a hormonas, la presencia del ROT en el tumor estaría asociada con factores indicadores de buen pronóstico. Del mismo modo, los resultados del estudio inmunohistoquímico para el receptor a vasopresina V2 (RAVP V2) revelaron que el total de los tumores mamarios caninos analizados resultaron positivos a este receptor, siendo su expresión elevada en todos los casos. Para nuestro conocimiento, esta es la primera vez que se reporta la presencia de este receptor en las neoplasias mamarias en caninos, y reviste importancia a la hora de utilizar moléculas como la desmopresina, con efectos antitumorales y antimetastásicos conocidos, cuyas acciones se ejercen a través del RAVP V2. Considerando la necesidad de investigar nuevas y más eficaces alternativas terapéuticas para el tratamiento de los tumores mamarios en caninos, en la tercera parte de la presente tesis se evaluó la capacidad antitumoral de los péptidos oxitocina y desmopresina sobre una línea celular de cáncer mamario canino. De forma previa a la realización de los ensayos in vitro, se evaluó la presencia del receptor a oxitocina y vasopresina V2 en la línea celular CMT-U27 de cáncer mamario canino, ya que son los sitios de unión para ejercer su acción que utilizan la oxitocina y la desmopresina, respectivamente. Las células tumorales mostraron expresión para ambos receptores, lo cual demuestra que esta línea celular es óptima para evaluar el efecto de estos péptidos. En el ensayo in vitro se observó que la administración de oxitocina a dosis 1000 nM inhibió la proliferación de la línea CMT-U27, lo cual coincide con reportes previos en humanos, y permite sugerir que esta hormona ejerce efectos moduladores del crecimiento de las células tumorales. Por último, se demostró que la desmopresina (1000 nM) ejerció un efecto inhibidor del crecimiento de la línea celular CMT-U27. Por tanto, la observación de una alta expresión del ROT y RAVP V2 en los tumores mamarios caninos, sumado al efecto antiproliferativo que ejercieron la oxitocina y desmopresina en una línea celular de cáncer mamario canino, permiten recomendar que se considere a estos compuestos como una opción interesante para el tratamiento de los tumores mamarios caninos, y resulta de utilidad para continuar investigando péptidos análogos a ellos con mayor capacidad antiproliferativa. Fil: Benavente, Micaela Andrea. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Aba, Marcelo Alfredo. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Bianchi, Carolina Paula. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Mammary gland tumors are the most frequent cancer described in female dogs, and the reported median age of occurrence ranges from 8 to 10 years. Ovarian steroid hormones, mainly estrogens and progesterone represent the main risk factor for the development of this neoplasm, and this idea is supported by the protective effect of ovariectomy. The presence of estrogen (ER) and progesterone receptors (PR) in canine mammary tumors has been described in several studies. Moreover, the expression of ER and PR is significantly higher in benign tumors compared with malignant ones. Nevertheless, information on the role of steroid hormone receptors and prognosis is inconsistent. Besides, some studies in humans have shown that apart from estrogens and progesterone, other hormones seem to be involved in the development and progression of mammary tumors. Thus, it has been demonstrated that the hormones oxytocin (OT) and vasopressin (AVP) are present in cancerous human breast tissue. Moreover, oxytocin receptor and V2 vasopressin receptor have been detected in primary breast carcinomas and in breast carcinoma cell lines. To the best of our knowledge, there are no studies regarding the expression of oxytocin receptor (OTR) and V2 vasopressin receptor (V2 AVPR) in canine mammary tumors. Surgical excision is the first-line treatment of canine mammary tumors. However, in dogs with highly malignant mammary tumors, the probability of tumor recurrence after surgery is elevated, so adjuvant therapy is recommended. Moreover, there are some patients in which surgery is not possible, so it is important to develop palliative therapies. Studies in human breast cancer cells have shown that OT and desmopressin (a synthetic analog of AVP) can modulate cell proliferation. The antitumor properties of both peptides have also been shown in experimental mouse models of breast cancer. In the bitch, the effects of these peptides on canine mammary cancer cells lines are not known. Thus, the main objective of the present thesis was to increase the knowledge of hormonal influences in the development of canine mammary tumors, by studying the presence of estrogens, progesterone, oxytocin and vasopressin receptors in canine mammary tumor tissues, and evaluating the effects of OT and desmopressin on cell proliferation using a canine mammary cancer cell line. In the first part of the present study, clinical and pathological features of 65 canine mammary tumors were evaluated. The results indicate that the mean age at which the mammary gland tumor was first recognized was 9.4 years. Regarding reproductive status, 76.9 % of the dogs were intact, giving further support to the idea that ovarian sexual steroid hormones are the main risk factor for the appearance of this neoplasm. Histology of the mammary gland tumors revealed that 60% of them were malignant, and 40% were benign. Among malignant tumors, tubulopapillary carcinomas were the most frequent tumor type, and among benign tumors, adenomas (simple and complex) were the most commonly diagnosed. Regarding immunohistochemical analysis, the present study showed that ERα expression was greater in benign than in malignant tumors. Furthermore, in the group of malignant tumors, a higher ERα expression was observed in tubulopapillary carcinomas and in Grade I tumors. These observations support the hypothesis that progression towards malignancy is accompanied by a decrease in hormonal steroid dependency, and suggest that ER expression is associated with clinicopathological characteristics of low malignant potential. Besides, in the present study ERβ expression was observed in both benign and malignant mammary tumors and no significant differences were found between them. In malignant tumors, no significant association was observed between ERβ expression and prognostic factor, so its significance could not be elucidated in the present thesis. Regarding PR expression, the present study also revealed that there was no significant difference in PR expression between benign and malignant tumors. However, in the group of malignant tumors, a higher PR expression was detected in clinical stages IV and V, suggesting that antiprogestins may be a useful therapy for bitches with advanced mammary cancer. Besides, in the second part of the present thesis it was demonstrated that OTR is present in both benign and malignant tumors. To the best of our knowledge, this is the first report regarding OTR expression in canine mammary tumors. In malignant tumors, OTR expression was higher in Grade I and II carcinomas, and showed a tendency to be higher in ERα positive tumors. Although further research is needed, the present results could indicate that OTR expression in malignant tumors is associated with good prognostic factors. In a similar way, immunohistochemistry revealed that all the analyzed mammary tumors expressed the V2 AVPR, with high Total Scores in both benign and malignant types. These findings represent the first report regarding V2 AVPR expression in canine mammary tumors, and suggest that desmopressin, a peptide with antitumor properties, could be an interesting option for the treatment of V2 AVPR expressing mammary tumors. Considering the need for new strategies for the treatment of canine mammary tumors, in the third part of the present thesis the antitumor effects of peptides oxytocin and desmopressin were investigated in vitro. In a preliminary study, the presence of OTR and V2 AVPR were demonstrated in the canine mammary cancer cell lines CMT-U27, which indicates that this cell line is a useful in vitro model to evaluate the effects of these peptides. The in vitro assay revealed a growth inhibitory effect with OT at 1000 nM, which is in accordance with previous studies in humans, and suggests that this hormone has growth-modulatory effects in neoplastic mammary cells. Finally, desmopressin (1000 nM) induced a significantly inhibition of CMT-U27 proliferation. In conclusion, the results indicate that peptides oxytocin and desmopressin should be considered as promising compounds for the treatment of dogs with mammary tumors.

Aedes (Stegomyia) albopictus (Skuse, 1894), conocido comúnmente como mosquito tigre asiático, está reconocido como una de las especies más invasivas del mundo. Se registró por primera vez en España en 2004, cerca de la ciudad de Barcelona. Desde entonces, su distribución en nuestro país ha ido en aumento. Dado su papel como vector en los recientes brotes de arbovirus reemergentes en Europa y la creciente introducción de patógenos en España por viajeros, el Ministerio de Sanidad estableció un Plan Nacional de Vigilancia Entomológica. En el presente trabajo de tesis se han caracterizado las poblaciones de mosquito tigre en España en el periodo 2011-2016.En primer lugar, se ha estudiado su distribución, principalmente mediante la colocación de trampas de oviposición. Se ha observado una aceleración del proceso de ocupación del territorio por esta especie y se ha identificado su periodo anual de actividad en distintos municipios españoles.En segundo lugar, se ha realizado un estudio genético de las poblaciones detectadas durante los últimos años de dispersión por el país. Mediante la utilización de dos marcadores moleculares (COI e ITS2), se ha podido determinar que existe una gran variabilidad genética poblacional en España y que la expansión geográfica ha tenido lugar tras múltiples y continuados procesos de colonización desde distintos orígenes, tanto nacionales como internacionales. Concretamente, los análisis de historia demográfica de la especie sugieren que la dispersión por España, ha tenido lugar a nivel local mediante procesos naturales y acelerada de manera artificial a escala nacional. Finalmente, dado que actualmente se trata de realizar un manejo integrado de los vectores, se han realizado pruebas de susceptibilidad de Ae. albopictus a la aplicación de distintas cepas de Metarhizium anisopliae y Beauveria bassiana, que han mostrado su potencial como agentes de control biológico de esta especie.