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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) The Brazilian bees are responsible for pollinating about 40-90% of native plants according to the ecosystem. Among the species found in Brazil is Melipona scutellaris, eussocial, able to perform pollination by vibration. However, bee populations have been affected by the use of pesticides, such as thiamethoxam, a neonicotinoid and systemic insecticide, that is, its target organ is the brain and it can reach nectar and pollen through the sap of the plant. When the resources are ingested, the active ingredient first comes into contact with the intestine, the organ responsible for digestion and absorption, and then passes into the hemolymph, reaching the Malpighi tubules responsible for their filtration and excretion, as well as the brain, organ target. Due to the importance of understanding the metabolic pathway of this compound, the objective of this work was to evaluate the effects of nanodoses of the insecticide thiamethoxam in the intestine, Malpighi tubules and the brain of M. scutellaris forages. For this, the bees were collected directly from the colonies and exposed, orally, to sublethal doses of thiamethoxam, LC50 = 0.0453 ng i.a./μL diet; LC50 / 10 = 0.00453 ng i.a./μL diet and LC50 / 100 = 0.000453 ng i.a./μL diet. Then, they were dissected after the start of the exposure times, 1, 4, 8 and 24h, and subjected to the Hematoxylin and Eosin (HE), HSP90 (Thermal Shock Protein) and Tunel (Cell Death Detection Kit) techniques. Through the HE technique it was possible to observe that the higher concentrations caused alterations in the cellular morphology in the three studied organs, such as increased cellular elimination, strongly stained nuclei, loss of cytoplasmic material and chromatin condensation. The HSP90 technique showed an increase in the expression of the heat shock protein according to the increase in concentration at certain times and a balance in its production between the three organs, that is, when the production increases in one organ it decreases in the Other, except for the analysis of the results for the highest concentration, of the longer time in the target organ, which suffered a fall, which may indicate cellular death, which was not evidenced by the Tunel technique in any organ. Thus, we conclude that nanodoses of the insecticide thiamethoxam cause morphological damage, increase the expression of heat shock proteins and can lead to death As abelhas brasileiras são responsáveis por polinizar cerca de 40-90% das plantas nativas de acordo com o ecossistema. Dentre as espécies encontradas no Brasil está Melipona scutellaris, eussocial, capaz de realizar polinização por vibração. Porém, as populações de abelhas têm sido afetadas pelo uso de agrotóxicos, como é o caso do tiametoxam, um inseticida neonicotinoide e sistêmico, ou seja, seu órgão alvo é o cérebro e ele pode chegar ao néctar e ao pólen através da seiva da planta. Quando os recursos são ingeridos, o ingrediente ativo entra em contato primeiramente com o intestino, órgão responsável pela digestão e absorção, e posteriormente passa na hemolinfa podendo atingir os túbulos de Malpighi, responsáveis por sua filtração e excreção, bem como o cérebro, seu órgão alvo. Devido à importância de se entender qual a via metabólica desse composto, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de nanodoses do inseticida tiametoxam no intestino, túbulos de Malpighi e cérebro de forrageiras de M. scutellaris. Para isso as abelhas foram coletadas diretamente das colônias e expostas, via oral, a doses subletais do tiametoxam, CL50= 0,0453 ng i.a./μL dieta; CL50/10= 0,00453 ng i.a./μL dieta e CL50/100= 0,000453 ng i.a./μL dieta. Em seguida foram dissecadas após os tempos de, 1, 4, 8 e 24h do início da exposição e submetidas as técnicas de Hematoxilina e Eosina (HE), HSP90 (proteína de choque térmico) e Tunel (kit para detecção de morte celular). Através da técnica de HE foi possível observar que as concentrações mais altas ocasionaram alterações na morfologia celular nos três órgãos estudados, como aumento da eliminação celular, núcleos fortemente corados, perda de material citoplasmático e condensação cromatínica. Já a técnica de HSP90 mostrou aumento na expressão da proteína de choque térmico de acordo com o aumento da concentração, em determinados tempos, e um equilíbrio na sua produção entre os três órgãos, ou seja, quando a produção aumenta em um órgão ela diminui no outro, com exceção da análise dos resultados para a maior concentração, do maior tempo no órgão alvo, que sofreu uma queda, o que pode indicar morte celular, a qual não foi evidenciada pela técnica de Tunel em nenhum órgão. Dessa forma concluímos que nanodoses do inseticida tiametoxam causam danos morfológicos, promovem aumento na expressão das proteínas de choque térmico e podem levar os indivíduos a morte

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) This work aims to evaluate the perception of the different segments of the passion fruit production chain (Passifloraceae edulis) regarding the importance of bees. This agricultural culture is responsible for generating three to four direct jobs and seven to eight indirect jobs in the production chain. Although passion fruit produces hermaphrodite flowers, this plant has mechanisms that prevent self-fertilization - which necessitates the presence of pollinating biotic agents or artificial pollination. Knowing that the natural pollinators of this culture are medium to large bees, and to verify if people knew about it, 162 people were interviewed in 30 cities in Brazil, divided into five segments: Agricultural Input Sellers, Farmers, Primary and Secondary Buyers and Final Consumers. For the analyzes, response frequencies and correspondence analysis were used. It was verified that the Farmers and Input Sellers present greater knowledge about pollination and pollinators, perceive the bees in a positive way and know the importance of large bees for pollination of passionflower flowers. Although farmers know the importance of bees, few adopt friendly practices for these beings. Already the segments related to the sale and consumption of passion fruit have less knowledge about pollination and perceive the bees in a negative way. Respondents, in general, also observe a decline in the number of pollinators, and most believe that this deficit is related to the destruction of green areas, global warming, diseases that affect bees and the use of pesticides. Este trabalho busca avaliar qual a percepção dos diferentes segmentos da cadeia produtiva do maracujá (Passiflora spp) quanto à importância das abelhas. Esta cultura agrícola é responsável pela geração de três a quatro empregos diretos e de sete a oito empregos indiretos na cadeia produtiva. Embora o maracujá produza flores hermafroditas, esta planta conta com mecanismos que impedem a autofecundação – o que torna necessária a presença de agentes bióticos polinizadores ou polinização artificial. Sabendo-se que os polinizadores naturais desta cultura são abelhas de médio a grande porte e, para verificar também se as pessoas sabiam disso, foram entrevistadas, por meio de questionário estruturado, 162 pessoas em 30 cidades do Brasil, divididos em cinco seguimentos: Vendedores de Insumos Agrícolas, Agricultores, Compradores Primários e Secundários e Consumidores Finais. Para as análises, utilizou-se frequências de resposta e análise de correspondência. Verificou-se que os Agricultores e Vendedores de Insumos apresentam maior conhecimento quanto à polinização e polinizadores, percebem as abelhas de forma positiva e sabem da importância das abelhas de grande porte para polinização das flores do maracujá. Embora os Agricultores saibam da importância das abelhas, poucos adotam práticas amigáveis a estes seres. Já os segmentos ligados à venda e consumo do maracujá apresentam menor conhecimento sobre polinização e percebem as abelhas de forma negativa. Os entrevistados, de forma geral, também observam um declínio no número dos polinizadores, sendo que a maioria acredita que esse déficit esteja relacionado à destruição das áreas verdes, aquecimento global, doenças que afetam as abelhas e ao uso de agrotóxicos.

Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACYT) Bees are the most important pollinators of agricultural ecosystems by carrying out pollination of up to 90% of native plants and more than one third of cultivated plants. Studies conducted around the world have been demonstrating a phenomenon called CCD (Colony Collapse Disorder), whose causal agent several factors including diseases that affect this group. Among them, the varroa resulting from the Varroa destructor mite attack, is reported as pathogen major impact factor on the Apis mellifera. In view of this, the objective of this study was to test the efficiency of three methods to control V. destructor: alternative, obtained from the distillation of oregano (Origanum vulgare Linnaeus, 1753), thyme (Thymus vulgaris Linnaeus, 1753) and sugar beet (Beta vulgaris Linnaeus, 1753); biological, run base drones and larvae chemical, carried out with the application of active flumethrin principle. The results were evaluated by statistical analysis in R program to determine the differences between treatments and proposed mergers and select the best method of control. In the analysis, it was observed that the alternative method showed a significant difference by highlighting thyme distillation as more efficient because there is no significant killing of bees and cause the death of all the mites in a shorter time compared to the other distillates. The biological method hornets larvae base is also preferably effective due to mite in these individuals. In chemical control the use of the active ingredient flumethrin caused poisoning in bees, with diarrhea in the first 6 hours after application, and after 48 hours caused a mortality of 100%, which demonstrates be impractical to control the mite. As abelhas são os agentes polinizadores mais importantes dos agroecossistemas por realizarem a polinização de até 90% das plantas nativas e de mais de 1/3 das plantas cultivadas. Estudos desenvolvidos ao redor do mundo vêm demostrando um fenômeno chamado CCD (Colony Collapse Disorder), que tem como agente causal vários fatores incluindo as doenças que afetam este grupo. Dentre elas, a varroose, resultante do ataque do ácaro Varroa destructor, é o patógeno relatado como fator de grande impacto sobre a espécie Apis mellifera. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi testar a eficiência de três métodos para o controle de V. destructor: o alternativo, obtido a partir da destilação de orégano (Origanum vulgare Lineus, 1753), tomilho (Thymus vulgaris Lineus, 1753) e beterraba (Beta vulgaris Lineus, 1753); o biológico, executado a base de larvas de zangões e o químico, realizado com a aplicação do princípio ativo flumetrina. Os resultados foram avaliados por meio de análise estatística no programa R para determinar as diferenças entre os tratamentos e as concentrações propostas e selecionar o melhor método para controle. Nas análises, foi observado que o método alternativo apresentou diferença significativa, destacando as destilações de tomilho como mais eficientes por não haver morte significativa das abelhas, além de causar a morte de todos os ácaros em menor tempo comparado, aos outros destilados. O método biológico a base de larvas de zangões também é eficiente devido a preferência do ácaro por estes indivíduos. No controle químico o uso do ingrediente ativo flumetrina, causou intoxicação nas abelhas, com diarreia nas primeiras 6 horas após aplicação, e depois de 48 horas causou uma mortalidade de 100%, o que demostra ser inviável para o controle do ácaro.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Bees are social insects of fundamental importance to the environment, because they are responsible for pollinating more than 70% of existing agricultural crops in the world. Brazil is the country with the highest number of described species, with representatives of most families. Among representatives of the Apidae family, is the Melipona scutellaris specie, commonly known as "uruçu" or "uruçu do Nordeste”, it is easy to handling and very well adapted to the climate of the state of São Paulo. However, due to the intensive use of pesticides, native bees are suffering the consequences, because, although they are not the target of insecticides, are highly vulnerable to contamination. Among the insecticides developed in the 90s, the neonicotinoids and fipronil have been identified as the main substances involved in collapse, and were suspended in 2013 in the European Union for two years for best evaluation. These insecticides are often used simultaneously, so bees can be contaminated with both molecules. Due to this fact, the aim of this study was determine the median lethal time (LT50) of fipronil and imidacloprid insecticides separately and synergistically on forage bees of M. scutellaris. For this, was obtained only the LD50 and LC50 of imidacloprid, according to the rules of the OECD, because values of fipronil were established by Lourenço et al. (2012a, 2012b). The LD50 of imidacloprid obtained was 2.41 ng a.i. / bee (24 hours) and 1.29 ng a.i./ bee (48 hours). The LC50 value found was 2.01 ng a.i./μL diet (24 hours) and 0.81 ng a.i./μL diet (48 hours). These data indicate that M. scutellaris specie is more sensitive to the insecticide imidacloprid that A. mellifera africanized. From these values, was obtained the LT50 based on topical and oral contamination of fipronil and imidacloprid insecticides and also these substances acting together. The results showed that fipronil has LT50 greater than imidacloprid. When acted in combination to LT50 presented intermediate values between the LT50 fipronil and imidacloprid, isolated. Then, according to the values obtained, there was not synergy, but a decrease in the toxicity of imidacloprid. As abelhas são insetos sociais de fundamental importância ao meio ambiente já que são responsáveis pela polinização de mais de 70% das culturas agrícolas existentes no mundo. O Brasil é o país com maior número de espécies descritas, com representantes da maioria das famílias. Entre os representantes da família Apidae, está a espécie Melipona scutellaris, conhecida popularmente como “uruçu” ou “uruçu do nordeste”, abelha de fácil manejo e muito bem adaptada ao clima do estado de São Paulo. Porém, devido à intensa utilização de agrotóxicos, as abelhas nativas vêm sofrendo as consequências, já que, embora não sejam o alvo de inseticidas, são altamente vulneráveis à contaminação. Entre os inseticidas desenvolvidos na década de 90, o fipronil e os neonicotinóides têm sido apontados como as principais substâncias envolvidas nos colapsos, tendo sido suspensos em 2013 na União Europeia por dois anos para melhor avaliação. Esses inseticidas muitas vezes são utilizados simultaneamente, e por isso as abelhas podem ser expostas a ambas as moléculas. Devido a tal fato, o objetivo desse trabalho foi estabelecer o tempo letal médio (TL50) dos inseticidas fipronil e imidacloprido de forma isolada e de forma combinada sobre as abelhas forrageiras de M. scutellaris. Para isso, obteve-se a DL50 e CL50 apenas do imidacloprido, conforme as normas da OECD, já que para o fipronil esses valores foram estabelecidos por Lourenço et al. (2012a, 2012b). A DL50 do imidacloprido obtida foi 2,41 ng i.a./abelha, para 24 horas e 1,29 ng i.a./abelha, para 48 horas. O valor de CL50 desta mesma substância encontrado foi 2,01 ng i.a./μL dieta, para 24 horas e 0,81 ng i.a./μL dieta, para 48 horas. Esses dados indicam que a espécie M. scutellaris é mais sensível ao inseticida imidacloprido que A. mellifera africanizada. A partir desses valores, obtivemos a TL50 baseada na contaminação tópica e oral dos inseticidas fipronil e imidacloprido e também dessas substâncias agindo juntas. Os resultados apresentaram que o fipronil possui TL50 maior que o imidacloprido. Quando agiram de forma combinada a TL50 apresentou valores intermediários entre a TL50 do fipronil e do imidacloprido, isolados. Então, de acordo com os valores obtidos, não ocorreu sinergismo e sim uma diminuição da toxicidade apresentada pelo imidacloprido.

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:33:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-25. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:57Z : No. of bitstreams: 1 000832708_20170225.pdf: 185166 bytes, checksum: 03d714a9483efdb12391afe44d94377d (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-03T11:01:34Z: 000832708_20170225.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-03T11:02:42Z : No. of bitstreams: 1 000832708.pdf: 940445 bytes, checksum: 83c176e5777a5bb9d647ba70aa10ea1b (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Os diplópodos configuram-se como organismos do solo ecologicamente importantes, mas também como espécies economicamente ameaçadoras em áreas rurais e urbanas quando ocorrem explosões populacionais; assim tais organismos configuram-se ora como alvo ora como vítima da ação de agroquímicos. Nesse sentido, alguns inseticidas, tal como a deltametrina, têm sido aplicados com o intuito de controlar a invasão de diplópodos nas residências. Tal inseticida é genericamente caracterizado por ter ação no sistema nervoso, no entanto, os efeitos deste sobre diplópodos ainda não foram analisados. Adicionalmente, existem poucos estudos sobre a morfologia e estrutura do sistema nervoso de diplópodos. Sendo assim, o presente trabalho objetivou primeiramente elucidar a anatomia e morfologia do sistema nervoso da espécie Gymnostreptus olivaceus por meio da observação durante a dissecção em estereomicroscópio e de análise histológica, histoquímica e citoquímica. Observou-se que o sistema nervoso dessa espécie é composto por um cérebro e um cordão nervoso, envolvidos por perineuro, lamela neural e mais externamente por um envoltório celular externo que foi descrito pela primeira vez em Diplopoda. Foram descritos os detalhes histológicos observados em cada estrutura que compõe o sistema nervoso da espécie. Além disso, uma formulação comercial do inseticida deltametrina foi aplicada com o intuito de avaliar a efetividade da utilização popular de tal inseticida no combate a infestações de diplópodos. Para a observação de efeitos neurotóxicos causados pelo inseticida foi utilizada a marcação de sinapsina avaliada por microscopia confocal. Foram aplicadas topicamente em indivíduos da espécie G. olivaceus, quatro concentrações de deltametrina; a menor concentração baseou-se nas recomendações do fabricante para o combate de outros artrópodes, enquanto as demais concentrações corresponderam a um quinto da DL50... Diplopods are ecologically important soil organisms that may also act as economically damaging species in urban and rural areas when their populations undergo outbreaks. They are, therefore, sometimes targetedfor agrochemicals action. Thus, some insecticides (e.g., deltamethrin) have been applied in order to control diplopods home invasions and crop attacks. Deltamethrin is characterized by its action on the nervous system; however, its effects on diplopods have yet to be analyzed. Additionally, there are few studies on the morphology and structure of the nervous system of diplopods. The present study aimed to elucidate the anatomy and morphology of the nervous system of the species Gymnostreptus olivaceus through direct observation during dissection under a stereomicroscope and by histological, histochemical, and cytochemical analyses. It was observed that the nervous system of the species consists of a brain and ventral nerve cord that are both wrapped by a perineurium, a neural lamella, and, more externally, by an external cell sheath that was first described in Diplopoda. Histological details were described for each of this species' nervous system structures. Furthermore, a commercial formulation of deltamethrin was applied to evaluate the effectiveness of the popular use of this insecticide to combat diplopods infestations. In order to observe neurotoxic effects caused by the insecticide, a synapsin labeling was used and assessed by confocal microscopy. Four concentrations of deltamethrin were applied topically to G. olivaceus individuals; the lowest concentration was based on the manufacturer's recommendations for controlling other arthropods, while the other concentrations correspond to one fifth of the LD50 previously established for the species, the LD50 itself, and twice the LD50. Death numbers were evaluated and synapsin levels were assessed in the brain at 12, 24 and 48 hours after insecticide treatment. The insecticide was... FAPESP: 2012/24562-5

Financiadora de Estudos e Projetos Africanized Apis mellifera bees Linnaeus, 1758 (Hymenoptera: Apidae), although not native to Brazil, is very important both for the environment and for the economy. However, with the growth of food production and biofuels, there was an expansion of the areas of monoculture consequently was increased also the use of fertilizers and pesticides. Although some insecticides such a fipronil (used in sugar cane) and dimethoate (standard substance in larval tests standardized by the Organization for Economic Cooperation and Development and used in cotton crops), are toxic to bees. Thus the present study aimed to evaluate the biological and histological effects of toxicity of pesticides in the ontogenetic development of Africanized A. mellifera. For this, worker larvae of 1st instar were collected from healthy colonies of the apiary located in the rural town of Piedade/SP and transferred to sterile polystyrene cells, which contained larval diet. After the transfer, the cells were maintained at a temperature of 34±2° C and RH 85±5%, the larvae fed daily from 1st to 5th day. On day 4, were prepared with three different concentrations (20, 5 and 0.5 ng a.i./μL) fipronil and dimethoate a concentration (200 ng a.i./μL) was added 1 μL of each concentration prepared (isolated) under integument of the larva, called acute treatment. The results showed that there was no larval mortality (72 hours) significantly between groups (p>0.20), exposed to fipronil and control, but the pupae rate anomalous (p0.20) expostos com fipronil e o controle, porém na taxa de pupas anômalas (p

Financiadora de Estudos e Projetos It is estimated that approximately 73 % of the world crops are pollinated by a bees. The constant alteration of habitats has led to the decline of pollinators, which may reflect limitations in the quantity and quality of the fruits and seeds grown, becoming one of the biggest problems when it comes to agricultural production. Studies with agricultural crops and their pollinators may contribute in seeking proposals that combine agriculture and conservation of forest fragments. The general objective of this work was to study aspects of Solanum lycopersicum L. hybrid Pizzadoro pollination. The specific objectives were: 1) verify if the floral morphology influences the behavior of the pollinator visits, 2) evaluate the richness of pollinating bees and pollinators at different distances from the Legal Reserve area, 3) compare the efficiency of three species of bees pollination in two treatments: spontaneous self-pollination, and pollination under natural conditions. The study was conducted on a conventional tomato cultivation in the municipality of Estiva Gerbi, Sao Paulo. Flowers were collected and observed under a stereomicroscope and scanning electron microscope. Efficiency was compared between Apis mellifera, Augochloropsis sp. and Exomalopsis sp. by Spears index. Observations and sampling were made in situ at 50, 100 and 150 meters from the Legal Reserve. It was found that the anther dehiscence is longitudinal and that the efficiency of pollination by A. mellifera (0.72) was similar to Exomalopsis sp. (0.85) and greater than Augochloropsis sp. (0.22). It is considered that the success of A. mellifera is associated with the floral morphology. Eleven species of insects, of which 7 were considered pollinators were found. Fifty eight floral visits were recorded, out of which 24 in quadrant A (50 m), 13 in B (100 m) and 21 in C (150 m), with A. mellifera dominant with 62.1% of visits, followed by Augochloropsis sp. and Oxaea flavescens both with 10.3%, Exomalopsis sp. with 6.9 %, Allograpta sp. with 5.2 % ,Bombus sp. with 3.4 % and Xylocopa sp. 1.7 %. The data indicates that the Legal Reserve played a key role in providing pollinators for tomato crops and therefore emphasizes the need for conservation and restoration of forest fragments to assist in increasing crop production. Estima-se que aproximadamente 73% das plantas cultivadas mundialmente sejam polinizadas por alguma espécie de abelha. A constante alteração de habitats vem provocando o declínio de polinizadores, que pode refletir em limitações na quantidade e qualidade dos frutos e sementes cultivados, constituindo-se em um dos maiores problemas quando se trata de produção agrícola. Estudos com culturas agrícolas e seus polinizadores podem contribuir na busca de propostas que conciliem agricultura e conservação de fragmentos florestais. O objetivo geral do presente trabalho foi estudar aspectos relacionados com polinização de Solanum lycopersicum L. híbrido Pizzadoro. Os objetivos específicos foram: 1) verificar se a morfologia floral influencia no comportamento de visita do polinizador; 2) avaliar a riqueza de abelhas polinizadoras e visitantes florais em diferentes distâncias da área de Reserva Legal; 3) comparar a eficiência de três espécies de abelhas na polinização em dois tratamentos: kautopolinização espontânea, e a polinização em condições naturais. O estudo foi realizado numa área de cultivo convencional de tomate no município de Estiva Gerbi, São Paulo. Foram coletadas flores e observadas em estereomicroscópio e microscópio eletrônico de varredura. Foi comparada a eficiência de Apis mellifera, Augochloropsis sp. e Exomalopsis sp. pelo teste de Kruskal-Wallis. Observações e coletas foram feitas in situ a 50, 100 e 150 metros da RL. Verificou-se que a deiscência da antera é do tipo longitudinal e que não houve diferença entre as espécies de abelhas, ou seja, o número de sementes produzidas não depende da espécie de abelha. Considera-se que o sucesso de A. mellifera esteja associado à morfologia floral. Foram encontradas 11 espécies de insetos, das quais 7 foram consideradas polinizadoras. Foram registradas 58 visitas florais; dessas, 24 no quadrante A (50 m), 13 no B (100 m) e 21 no C (150 m), sendo A. mellifera dominante com 62,1% das visitas, seguida de Augochloropsis sp. e Oxaea flavescens ambos com 10,3%, Exomalopsis sp. com 6,9%, Allograpta sp. com 5,2%, Bombus sp. com 3,4% e Xylocopa sp. com 1,7%. Os dados indicam que a RL desempenhou um papel fundamental no fornecimento de polinizadores para a cultura de tomate e, por isso, enfatiza-se a necessidade de conservação e restauração de fragmentos florestais para auxiliar no aumento da produção da cultura.

Financiadora de Estudos e Projetos Melipona scutellaris bee, known as "uruçu" belong to the tribe Meliponini, popularly called stingless bees. This bee is endemic in northeastern Brazil and is distinguished by its ease of domestication and management, significant honey production and potential for pollination in greenhouses and open field. The insecticide fipronil acts on the insect nervous system by blocking the chloride channels through of the receptors gamma-aminobutyric acid (GABA) and glutamate (GluCl). Widely used in Brazil and more than 70 countries is considered highly toxic to bees, which is why its use was banned in France in 2004. Toxicological studies of pesticides to bees use mostly as a model species A. mellifera bee, which sublethal doses of fipronil can cause behavioral changes related to core tasks for the colony, such as feeding and foraging. However, differences in susceptibility between species of bees to insecticides may expose native bees there is a greater risk. The aim of this study was to determine the topical LD50 and oral LC50 of insecticide fipronil for stingless bee M. scutellaris and evaluate the effects of fipronil sublethal doses and concentrations in the locomotor activity and in the Proboscis Extension Reflex (PER) these bees. Foragers were collected in the output of three different colonies, consisting of three repetitions with ten bees each and they were placed in plastic pots of 250 mL. Bees subjected to topical treatments were anesthetized with CO2 and received 1.0 μL insecticide solution on pronotum with previously established doses (0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 5.0 ng of fipronil / μL solution), applied with a repetitive automatic micropipette. Bees subjected to oral contamination received sucrose solution contaminated with concentrations of fipronil determined previously (0.0, 0.005, 0.01, 0.03, 0.05, and 0.5 ng a.i./ μL sucrose solution) for 24 hours. The insecticide fipronil was considered highly toxic to these bees, both topically and orally. The topical intoxication resulted in a LD50 (48 hours) was 0.41 ng / bee (4.1 ng / g bee). The oral contamination resulted in a LC50 (48 hours) was 0.011 ng / μL of sucrose solution or, considering the amount of food they forage M. scutellaris consume daily in an oral LD50 of 0.6 ng a.i. / bee. The topic sublethal dose 0.05 ng a.i./bee and oral sublethal concentration 0.0011 ng a.i./ μL sucrose solution were cause significant changes for the locomotor activity these bees. The PER don't was a functional methodology for M. scutellaris bees. Results show that the bee M. scutellaris is more sensitive to fipronil than A. mellifera and that fipronil sublethal dose and concentrations affected the locomotor activity these bees. A abelha Melipona scutellaris, conhecida como uruçu , pertencem à tribo Meliponini, popularmente chamadas de abelhas sem ferrão. Essa abelha é endêmica do nordeste brasileiro e se destaca por sua fácil domesticação e manejo, expressiva produção de mel e potencial para polinização em ambientes protegidos e campo aberto. O inseticida fipronil atua no sistema nervoso dos insetos bloqueando os canais de cloro através dos receptores ácido gama-aminobutírico (GABA) e glutamato (GluCl). Amplamente usado no Brasil e em mais de 70 países é considerado altamente tóxico para abelhas, motivo pelo qual seu uso foi proibido na França em 2004. Estudos toxicológicos de inseticidas para abelhas utilizam em sua grande maioria como espécie modelo a abelha A. mellifera, na qual doses subletais de fipronil causam alterações comportamentais relacionadas a tarefas fundamentais para a colônia, como alimentação e forrageamento. No entanto, diferenças quanto à suscetibilidade entre as espécies de abelhas aos inseticidas poderiam estar expondo as abelhas nativas a um maior risco. O objetivo desse trabalho foi determinar a DL50 tópica e a CL50 oral do inseticida fipronil para abelhas sem ferrão M. scutellaris e avaliar os efeitos das doses e concentrações subletais desse inseticida na atividade locomotora e no Reflexo de Extensão da Probóscide (REP) dessas abelhas. As forrageiras foram coletadas na saída de três colmeias diferentes, consistindo em três repetições formadas por dez abelhas cada e colocadas em potes plásticos de 250 mL. Abelhas submetidas aos tratamentos tópicos foram anestesiadas com CO2 e receberam 1.0 μL de solução de inseticida no pronoto com doses previamente estabelecidas (0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 e 5.0 ng de fipronil/μL de solução), aplicadas com uma micropipeta automática repetitiva. Abelhas submetidas aos tratamentos de contaminação oral receberam solução de sacarose com as concentrações de fipronil determinadas anteriormente (0.0, 0.005, 0.01, 0.03, 0.05, e 0.5) durante 24 horas. O inseticida fipronil foi considerado altamente tóxico para essas abelhas, tanto por via tópica como oral. A intoxicação tópica resultou em uma DL50 (48 horas) de 0.41 ng i.a./abelha (4.1 ng i.a./g de abelha). A contaminação oral resultou em uma CL50 (48 horas) de 0.011 ng i.a./μL de solução de sacarose ou, considerando a quantidade de alimento que as forrageiras de M. scutellaris consomem por dia, em uma DL50 oral de 0.6 ng i.a./abelha. A dose subletal tópica de 0.05 ng i.a./abelha e a concentração subletal oral de 0.0011 ng i.a. /μL de solução de sacarose causaram alterações significativas para a atividade locomotora dessas abelhas. O REP não foi uma metodologia funcional para abelhas M. scutellaris. Os resultados mostram que a abelha M. scutellaris é mais sensível ao fipronil que A. mellifera e que doses e concentrações subletais desse inseticida afetam a atividade locomotora dessas abelhas.

Financiadora de Estudos e Projetos The most widely used in forest restoration projects is heterogeneous planting seedlings. This methodology was used in an area of one hectare in the restoration process implemented in 2009 on the campus of UFSCar Macaw. High values are invested in financial forest restoration especially when there is a need for planting seedlings, so the assessment and monitoring of restoration projects are legitimate concerns. Considering the importance of awareness of the availability of floral resources and ecological areas restored, and the importance of bees as pollinators in natural and agricultural areas, the overall objective of this study was to identify the pattern of flowering in the area in the restoration process, considering the period of three years after establishment. The specific objective was to evaluate the use of woody species by the community of bees visiting the flowers. To assess the availability of floral resources utilized a method of presence and absence and intensity index Fournier. Observations were made on flowers to collect the bees. It was built a network of qualitative interaction between species. This work was divided into two chapters, the first chapter deals with the characterization of the flowering phenology and plant species studied. The second chapter presents the richness of bee floral visitors observed during 2011 and describes the resources acquired by them at the time of visit, and presents the network of interactions among species. The phenological study enables to visualize the availability of flowers at certain times of the year, seven species were found planted with flowering, the period with greater timing and intensity was between January and March, the hottest season of the year and wet. There was a flowering woody species regenerating in the Solanum lycocarpum that in the colder months and dry was important for maintaining flowers in the area. We identified 20 species of bees that collected nectar and pollen. The network of interaction was 42.5% connectance and shown to be nested with heterogeny and indices T equal to 13.80 and NODF equal to 64.9. The two approaches are very important tools for monitoring and evaluating the availability of floral resources for bees visiting areas in the process of forest restoration. A técnica mais utilizada em projetos de restauração florestal é o plantio heterogêneo de mudas. Essa metodologia foi utilizada em uma área com um hectare em processo de restauração implantada em 2009 no campus da UFSCar de Araras. Altos valores financeiros são investidos na restauração florestal principalmente quando existe a necessidade de plantio de mudas, assim a avaliação e o monitoramento dos projetos de restauração são preocupações legitimas. Considerando a importância do conhecimento da disponibilidade dos recursos florais e das interações ecológicas nas áreas restauradas, e a importância das abelhas como polinizadoras nas áreas naturais e culturas agrícolas, o objetivo geral deste trabalho foi identificar o padrão de floração na área em processo de restauração, considerando o período de três anos após o estabelecimento. O objetivo específico foi avaliar a utilização das espécies lenhosas pela comunidade de abelhas visitantes florais. Para avaliar a disponibilidade de recursos florais utilizou-se método de presença e ausência e índice de intensidade de Fournier. Foram realizadas observações nas flores para coleta das abelhas visitantes. Foi construída a rede de interação qualitativa entre as espécies. Este trabalho foi dividido em dois capítulos, o primeiro capítulo aborda a fenologia e a caracterização da floração das espécies vegetais estudadas. O segundo capítulo apresenta a riqueza de abelhas visitantes florais observadas durante o ano de 2011 e descreve os recursos adquiridos por elas no momento da visita, e apresenta a rede de interação entre as espécies. O estudo fenológico permitiu visualizar a disponibilidade de recursos florais em determinados períodos do ano, foram observados sete espécies plantadas com floração, o período com maior sincronismo e intensidade foi entre janeiro e março na estação mais quente e úmida do ano. Observou-se uma espécie lenhosa regenerante em florescimento, a Solanum lycocarpum, que nos meses mais frios e secos foi importante para manutenção de flores na área. Foram identificadas 20 espécies de abelhas visitantes que coletaram néctar e pólen. A rede de interação teve 42,5% de conectância e demonstrou-se ser aninhada e heterogenia com índices T igual a 13,80 e NODF igual a 64,9. As duas metodologias se mostraram importantes ferramentas para monitoramento e avaliação de disponibilidade de recursos florais para abelhas visitantes em áreas em processo de restauração florestal.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-25Bitstream added on 2014-06-13T20:10:19Z : No. of bitstreams: 1 jacob_cro_me_rcla.pdf: 1789232 bytes, checksum: 4d1aeb62cf1a6763869b8890da8b652a (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Recentemente as abelhas têm sido devidamente valorizadas como importantes polinizadoras de flores silvestres e cultivadas. A densidade populacional de muitos polinizadores tem diminuído devido, principalmente, à intensificação agrícola e ao uso de pesticidas, prejudicando os serviços de polinização. A metodologia clássica para estimar a toxicidade dos produtos químicos para insetos é determinar a dose letal média (DL50) ou a concentração letal média (CL50), podendo então estabelecer doses que sejam mais seguras aos organismos não-alvo ou benéficos. Além dos efeitos de toxicidade aguda, levando a morte das abelhas, doses subletais dos inseticidas podem provocar alterações comportamentais e fisiológicas nos indivíduos, que ao longo do tempo acarretarão em sérios prejuízos na manutenção da colônia. Um dos inseticidas amplamente utilizado é o fipronil, este atua ligando-se aos receptores do ácido gama-aminobutírico (GABA), interrompendo os canais de cloro, resultando na perda de sinalização inibitória neural. Na literatura pode-se encontrar diversos trabalhos que utilizam como modelo principal a abelha Apis mellifera, porém, é importante ressaltar a diversidade existente entre as abelhas nativas no Brasil, os meliponíneos, e sua participação na conservação da biodiversidade, assim como na polinização de áreas de cultivo, o que torna extremamente importante estudos com essa abelha. Com a finalidade de entender como o fipronil interfere morfo e fisiologicamente em abelhas sem ferrão, a região de interesse deste estudo foram os corpos pedunculados, já que estes são centros cerebrais complexos e tidos como local de convergência multisensorial. Para auxiliar no mapeamento metabólico, utilizou-se como marcador a enzima citocromo oxidase e a enzima caspase-3, técnicas utilizadas na observação de atividade neural... A few decades the bees are considered an important indicator of high environmental sensitivity, and appreciated as important pollinators of wildflowers and cultivated. The population density of many pollinators have declined to harmful levels to pollination services manly due to agricultural intensification and the use of pesticides. The classic methodology of estimating the effects of chemicals for insects is to determine the median lethal dose (LD50) or median lethal concentration (LC50) that can then establish doses that do not harm non-target organisms or beneficial. Besides the effects of acute toxicity, leading to death bees, sublethal doses of insecticides can cause physiological and behavior changes of individuals over time, resulting in serious harm to maintain the colony. One of the widely used insecticides is fipronil, its acts by binding to gamma-aminobutyric acid (GABA) disrupting chloride channels, resulting in loss of inhibitory neural signaling. In the literature one can find several works using as main bee model Apis mellifera, however, it is important to highlight the diversity of Brazilian native bees, the stingless bees, and their participation in biodiversity conversation, as well as in the pollination of cultivated land. In order to understand how fipronil affect morpho and physiologically the stingless bee S. postica, the region of interest in this study were the mushroom bodies, since these are complex brain centers and used as a place of multisensory convergence. This work established the contact LD50 and Ingestion LC50 to the fipronil insecticide for foragers workers stingless bee Scaptotrigona postica in 0.54ng/bee and 0.24ng/μL of the food after 24 hours, respectively, confirming the high toxicity of this phenylpyrazole, in the groups submitted to contact contamination, were identify morphological... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-25Bitstream added on 2014-06-13T19:28:36Z : No. of bitstreams: 1 soares_hm_me_rcla.pdf: 1634705 bytes, checksum: cb8fd31115869e473fe89f6849a83cbb (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Em todo o mundo o declínio de colônias de Apis mellifera é motivo de preocupação, por isso muitos trabalhos tem mostrado os efeitos adversos de inseticidas para esta espécie. Estudos toxicológicos são raros para as abelhas sem ferrão, embora o Brasil possua grande diversidade de meliponíneos. O inseticida imidacloprido é agonista da acetilcolina e age nos receptores nicotínicos de acetilcolina dos insetos provocando, em doses subletais, deficiência na aprendizagem e na formação de memória. Este trabalho determinou a toxicidade do imidacloprido para a espécie sem ferrão Scaptotrigona postica, através da dose letal média (DL50) tópica e da concentração letal média (CL50) de ingestão. A DL50 tópica foi de 25,20 (24 horas) e 24,46 (48 horas) ng i.a./μL/abelha e a CL50 de ingestão foi 42,50 (24 horas) e 14,28 (48 horas) ng i.a./μL dieta. A partir dos resultados de CL50, duas concentrações subletais, a concentração letal e uma concentração acima da letal foram escolhidas para realização das análises dos efeitos citotóxicos do imidacloprido sobre os corpos pedunculados, o ventrículo e os túbulos de Malpighi. Sintomas de intoxicação como hiperexcitação, paralisia e desorientação foram notados para as abelhas que tiveram sua dieta contaminada com imidacloprido. Nos corpos pedunculados de abelhas tratadas observou-se dilatação dos espaços intercelulares, marcação significativa de caspase-3 e alterações celulares como condensação cromatínica e degeneração mitocondrial que podem estar relacionados com o processo de morte celular por apoptose. Embora alterações metabólicas não tenham sido notadas no órgão alvo do imidacloprido, o cérebro, os órgãos que participam de sua metabolização e excreção, o ventrículo e os túbulos de Malpighi respectivamente, tiveram seu metabolismo aumentado... The decline of Apis mellifera colonies has become a concern worldwide. Several studies have shown the negative effects of insecticides on this species. Toxicological studies on stingless bees, on the other hand, are rare despite the great diversity of meliponines in Brazil. The insecticide imidacloprid acts agonistically on nicotinic acetylcholine receptors of insects. In sublethal doses, this compound impairs learning performance and memory formation in insects. This study determined the toxicity of imidacloprid for the stingless bee Scaptotrigona postica, based on the median lethal dose (LD50) by topical application and median lethal concentration (LC50) by ingestion. The topical LD50 was 25.20 (24 hours) and 24.46 (48 hours) ng i.a./μL/bee and the ingestion LC50 was 42.50 (24 hours) and 14.28 (48 hours) ng i.a./μL diet. Based on the results of LC50 two sublethal concentrations, the lethal concentration, and a concentration above the lethal concentration were chosen for the analysis of the cytotoxic effects of imidacloprid on the mushroom bodies, midgut, and Malpighian tubules of Scaptotrigona postica. Symptoms of intoxication, such as hyperexcitation, paralysis, and disorientation, were observed in bees fed a diet with imidacloprid. The mushroom bodies of treated bees exhibited dilated intercellular spaces, staining for caspase-3, and cellular alterations, such as chromatin condensation and mitochondrial degeneration, that could be associated with the cell death process by apoptosis. Although metabolic changes were not observed in the target organ of imidacloprid, the brain, the organs involved in its metabolization and excretion, the midgut and Malphigian tubules, respectively, exhibited increased metabolism in the attempt to inactivate the toxic compound present in the organism. The morphological alterations, such as the... (Complete abstract click electronic access below)