51. Evaluation of techniques for cryopreservation of white shrimp, Litopenaeus schmitti (Crustacea, Dendrobranchiata, Penaeidae)
- Author
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Chaves, Tha?s Castelo Branco, Oshiro, Lidia Miyako Yoshii, Mello, Marco Roberto Bourg de, Peixoto, Silvio, and Soares, Roberta
- Subjects
Glycerol ,Agentes Crioprotetores ,Marine Shrimp ,Espermatoz?ide ,Freezing ,Glicerol ,Camar?o Marinho ,Congela??o ,Zootecnia ,Sperm ,Cryoprotectants - Abstract
Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2020-07-24T14:24:10Z No. of bitstreams: 1 2010 - Tha?s Castelo Branco Chaves.pdf: 421771 bytes, checksum: 8c4ab746c503868710a4bbc3ccb496c1 (MD5) Made available in DSpace on 2020-07-24T14:24:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010 - Tha?s Castelo Branco Chaves.pdf: 421771 bytes, checksum: 8c4ab746c503868710a4bbc3ccb496c1 (MD5) Previous issue date: 2010-04-29 Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior, CAPES, Brasil. The white shrimp L. schmitti is regarded as one of the most promising species for aquaculture in Brazil. This study was to evaluate techniques for sperm cryopreservation of L. schmitti, using two cryoprotectants, glycerol and DMSO and the influence of time of freezing on sperm viability. The experiment was divided into two phases where, in the first phase experiment was conducted on a randomly designed with two cryoprotectants (Glycerol and DMSO), two concentrations (5 and 10%), and two balance periods (10 and 30 minutes) with 4 replicates. In the second phase, the experiment was conducted in completely randomized design with a split plot design, evaluating two dilutions of glycerol (5 and 10%) in three periods of cryopreservation (24 hours, 15 and 30 days), and each treatment with 6 replicates. The results of the toxicity test to cryoprotective agents showed no significant difference between treatments in both Glycerol and DMSO concentrations, nor between the two balance periods tested, getting rates of sperm viability up to 97.42% after exposure to them. According to the results of the first stage and other favorable characteristics, the Glycerol was selected as cryoprotectant agent for the second phase. The results of the second phase indicated no significant difference between the concentrations of Glycerol at 5 and 10%, with no effect on sperm viability over the 30 days of cryopreservation. However, there was significant difference in survival over time for maintenance in nitrogen, where we observed a survival average of 50.7% at 24 hours, 42.78% after 15 days and 16.26% after 30 days of cryopreservation. Therefore, the cryoprotectants Glycerol and DMSO at 5 and 10% in exposure times of 10 and 30 minutes, not proved to be toxic to sperm of Litopenaeus schmitti. However, the storage time of the spermatic mass significantly reduced the viability of sperm between the 15th and 30th day of cryopreservation, in liquid nitrogen. This result is due to the oscillations observed in the cooling rate (0,5oC.min-1), which probably influenced the high mortality of sperm cells, observed in this phase. Thus, this result suggests the need to repeat this second phase, and the use of another gradual freezing equipment for comparison. O camar?o branco L. schmitti ? considerado como uma das esp?cies mais promissoras para aq?icultura no Brasil. Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar t?cnicas de criopreserva??o do s?men de L. schmitti, utilizando dois agentes crioprotetores, Glicerol e DMSO e a influ?ncia do tempo de congelamento sobre a viabilidade esperm?tica. O experimento foi dividido em duas fases experimentais onde, na primeira fase o experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualisado com dois crioprotetores (Glicerol e DMSO), duas concentra??es (5 e 10%), e dois tempos de equil?brio (10 e 30 minutos), com 4 repeti??es por tratamento. Na segunda fase o experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualisado com esquema de parcela subdividida, onde foram avaliadas duas dilui??es do Glicerol (5 e 10%) em tr?s tempos de criopreserva??o (24 horas, 15 e 30 dias), e cada tratamento com 6 repeti??es. Os resultados do teste de toxicidade aos agentes crioprotetores n?o apresentaram diferen?a significativa entre os tratamentos, Glicerol e DMSO nas duas concentra??es e nem entre os dois tempos de equil?brio testados, obtendo-se taxas de viabilidade esperm?tica de at? 97,42% ap?s exposi??o aos mesmos. De acordo com os resultados da primeira fase e outras caracter?sticas favor?veis, o Glicerol foi selecionado como agente crioprotetor para a segunda fase experimental. Os resultados da segunda fase n?o indicaram diferen?a significativa entre as concentra??es do Glicerol a 5 e 10%, n?o havendo influ?ncia sobre a viabilidade esperm?tica ao longo dos 30 dias de criopreserva??o. Entretanto, observou-se diferen?a significativa para a sobreviv?ncia ao longo do tempo de manuten??o em nitrog?nio, onde observou-se uma m?dia de sobreviv?ncia de 50,7% com 24 horas, 42,78% ap?s 15 dias e 16,26% ap?s 30 dias de criopreserva??o. Portanto, os crioprotetores Glicerol e DMSO a 5 e 10 %, nos tempos de exposi??o de 10 e 30 minutos, n?o demonstraram serem t?xicos aos espermatoz?ides de Litopenaeus schmitti. No entanto, o tempo de estocagem da massa esperm?tica reduziu significativamente a viabilidade dos espermatoz?ides entre o 15o e o 30o dia de criopreserva??o em nitrog?nio l?quido. Esse resultado se deve ?s oscila??es verificadas na velocidade de resfriamento (0,5oC. Min-1), que possivelmente influenciou a alta mortalidade das c?lulas esperm?ticas, observada nesta fase experimental. Assim, este resultado sugere a necessidade de repetir essa segunda fase experimental, bem como a utiliza??o de outro equipamento de congela??o gradual para compara??o.
- Published
- 2010