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Aedes albopictus (Skuse) is a widespread mosquito, a vector of important human arboviruses, including Chikungunya, Dengue and Zika. It is an extremely difficult species to control even for the onset of resistances to chemicals insecticides, therefore ecofriendly products are urgently needed. In this study, the activity of Amaryllidaceae alkaloids and some of their semisynthetic derivatives, of 2-methoxy-1,4-naphthoquinone and two analogues, of cyclopaldic acid and epi-epoformin on the survival and development of Ae. albopictus larvae was evaluated. First-instar larval exposure for 24 and 48 h to cyclopaldic acid, resulted in mortality mean per-centage of 82.4 and 96.9 respectively, 1,2-O,O-diacetyllycorine 48h post-treatment caused 84.7% mortality. Larval and pupal duration were proved to decrease significantly when larvae were exposed to cyclopaldic acid, 1,2-O,O-diacetyllycorine and N-methyllycorine iodide. The mean number of third-instar larvae surviving to 2-methyl-1,4-naphthoquinone, 2-hydroxy-1,4-naphthoquinone and 2-methoxy-1,4-naphthoquinone was significantly lower than the number of correspondent control larvae over the time. This study indicated that 1,2-O,O’-diacetyllycorine, N-methyllycorine iodide, cyclopaldic acid and 1,4-naphthoquinone structural derivatives have good potential for developing bioinsecticides for mosquito control programs. The obtained results are of general interest due to the global importance of the seri-ous human diseases such a vector is able to spread.

The spotted-wing drosophila (SWD), Drosophila suzukii Matsumura (Diptera: Drosophilidae), native of Eastern Asia, is an invasive alien species in Europe and the Americas and is one of the main emerging pests of valuable crops, including soft fruits and wine grapes. The conventional approach to handle infestations of SWD involves the use of commercially available insecticides, but these do not seem able to ensure effective results; consequently, alternative strategies are strongly required. Mass trapping uses a high density of traps baited with a lure and is one of the most promising methods studied and tested so far. Consequently, an improvement in the bait composition is obligatory to guarantee reliable attractivity to SWD. This study was aimed precisely to investigate and improve upon one of the best attractant mixtures for SWD, the “Droskidrink” (DD). The goal of the work was centred on the exploitation of lactic acid bacteria as a biological catalyst in the production of organic volatile molecules attractive to SWD, thanks to the fermentation of sugars and organic acids present in the liquid bait. Strains of lactic acid bacteria were chosen because they are usually involved in the fermentation of wine and vinegar, historically the most attractive liquids for species of Drosophilidae. A series of preliminary field tests was coupled with laboratory tests to describe the behaviour and performance of various kinds of lactic acid bacteria, in this particular application. Afterwards, we focused our analysis on different biotypes of the bacterium Oenococcus oeni (Garvie) Dicks et al. that revealed a high resistance to stressful environmental conditions of the liquid bait and, at the same time, a promising attractive capacity to SWD. Attention was then moved to a new model of trap able to produce a synergistic effect between the trap and the liquid bait. Our results showed that the attractiveness of DD was greatly increased by the addition of O. oeni to the standard mixture. Malolactic fermentation due to O. oeni released volatile substances attractive to SWD. In particular, the new trap-bait combination provided excellent results, increasing the number of catches, especially with regard to female individuals and particularly during the cold seasons, when SWD has low population density. In addition, this new trap design is simpler and faster to service, compared to the traps used previously. The long-term goal is to accelerate research and technology transfer toward the development of mass trapping and attract-and-kill strategies based on the use of traps baited with this new attractant. Moreover, through the development of a trap utilizing the best characteristics identified in this study, we were able to obtain excellent levels of catches during the whole year. Il rapido incremento delle attività commerciali, il perpetuarsi delle migrazioni umane, il turismo, i trasporti e i viaggi sempre più celeri, nel corso dell’ultimo secolo hanno notevolmente favorito la diffusione di numerose specie invasive, che hanno superato barriere geografiche, anche considerevoli, in un ristretto arco temporale. Questa tendenza è destinata ad aumentare ulteriormente, e le specie invasive provenienti da altri Paesi, prima sconosciute, sono da annoverare tre le principali minacce per la biodiversità e la produzione alimentare in tutto il mondo. Gli insetti rappresentano la maggioranza degli organismi viventi e, quindi, costituiscono larga parte del problema delle specie invasive, tanto che in molte aree, come Nord America, Australia, Asia e Sud Africa, gli insetti dannosi alloctoni sono considerati importanti quanto, e forse più, di quelli autoctoni. Tradizionalmente l’Europa ha subito danni meno ingenti da parte di insetti di provenienza esterna, tendenza che è notevolmente cambiata in anni recenti e che ha portato ad un interesse sempre maggiore nei confronti degli insetti alieni che hanno colonizzato il territorio comunitario. Drosophila suzukii Matsumura (Diptera: Drosophilidae), nota anche come moscerino dei piccoli frutti o spotted-wing drosophila (SWD), originaria del sud-est asiatico, è un fitofago di recente introduzione in Europa, Stati Uniti e Canada, ove i danni sono stati rinvenuti su numerose colture come ciliegio, vite, uva spina, lampone e frutti di bosco in genere, pesco, susino, cachi, pomodoro, olivo, gelso e nespolo, di cui attacca i frutti. Gli adulti di D. suzukii sono moscerini lunghi 2-3 mm, con occhi rossi, torace marrone chiaro o giallastro e strisce nere sull'addome. Sono caratterizzati da uno spiccato dimorfismo sessuale; i maschi mostrano, infatti, una macchia scura al margine anteriore di ogni ala, le femmine un grande ovipositore seghettato. Le uova sono bianco latte, oblunghe (0,5-0,7 x 0,2 mm) e con due filamenti ad un’estremità; dell’uovo, deposto sotto l’epicarpo, sono visibili dall’esterno solo i due filamenti sporgenti (ca. 0,4 mm) dalla cicatrice di ovideposizione. Le larve si sviluppano attraverso tre età, sono di colore bianco traslucido e vivono all’interno del frutto ospite, nutrendosi della polpa e dei microrganismi naturalmente presenti, causandone il deterioramento; le cicatrici di ovideposizione, infatti, consentono l’ingresso di patogeni, come batteri e funghi, che comportano la cascola precoce dei frutti danneggiati. I danni economici causati da D. suzukii sono stati stimati in circa 2 miliardi di dollari in America, oltre 4 miliardi in Europa e 500 milioni in Asia. Appare scontato pensare che gli insetticidi di sintesi possano rappresentare il mezzo principale per il controllo e la gestione di D. suzukii ma, data la novità rappresentata da questo fitofago, deve essere individuata, intanto, una soglia economica di danno. Insetticidi di sintesi quali organofosfati, piretroidi e spinosad, hanno dimostrato una certa efficacia contro D. suzukii; l’altra faccia della medaglia mostra come questi principi attivi ad ampio spettro di azione siano tossici per gli insetti utili, oltre che essere responsabili dell’aumento dei residui presenti nei frutti, con tutti i rischi conseguenti per la salute umana. Risultati incoraggianti sono attesi dall’uso di agenti di biocontrollo come funghi, batteri, virus e altri nemici naturali del carpofago, ovvero predatori e parassitoidi, che potrebbero essere usati per limitarne le popolazioni. Il metodo attualmente più utilizzato per il monitoraggio di D. suzukii è basato sull’impiego di trappole costituite da un bicchiere di plastica forato contenente aceto di sidro di mele, un tensioattivo e un pannello adesivo di colore giallo. Tali trappole sono inefficaci per un monitoraggio precoce di D. suzukii, le cui popolazioni raggiungono rapidamente densità tali da arrecare danni, in quanto progettate per catturare altri insetti, in particolare Drosophilidae. Al fine di mettere a punto strategie efficaci di cattura massale, sono necessari attrattivi altamente efficaci e selettivi. Per D. suzukii, osservazioni preliminari confermano che l’insetto adulto è richiamato dalla frutta lesionata e preferibilmente in stato di fermentazione, come suggerisce la naturale attrazione esercitata da una varietà di liquidi fermentati, tra cui vino, aceto, succhi di frutta e derivati, nonché dall’associazione, recentemente riportata, di questo insetto con una comunità di diverse specie di lieviti, come Hanseniaspora uvarum (Niehaus) Shehata et al. Allo stato attuale, le trappole più efficaci per catturare D. suzukii sono innescate con diversi tipi di aceto e vino, substrati entrambi derivanti dalla fermentazione mediata sia da lieviti che da batteri. Una delle esche liquide commerciali, il cosiddetto “Droskidrink”, ha fornito risultati promettenti sia nel monitoraggio di D. suzukii, condotto negli anni 2011-2013 in provincia di Trento, che in prove preliminari di cattura massale. L’obiettivo principale di questo lavoro, pertanto, è stato quello di studiare alcuni aspetti poco noti di D. suzukii, in particolare quelli inerenti la percezione di stimoli di varia natura e il riconoscimento di substrati di interesse per la messa a punto di esche innovative e altamente efficaci da utilizzare nel monitoraggio e in strategie di controllo del carpofago. In particolare, gli studi sono stati indirizzati alla caratterizzazione di parametri biologici, fisici e chimici utili per valutare l’efficacia in campo dell’attrattivo noto come “Droskidrink”, l’esca commerciale raccomandata contro D. suzukii anche in pieno campo. Le prove di campo sono state condotte nella regione Trentino-Alto Adige, dove il fitofago ha recentemente causato danni ingenti. La ricerca ha sviluppato un nuovo tipo di esca, in cui l’attrattivo commerciale “Droskidrink” è risultato fortemente potenziato nella sua azione grazie all’associazione con microrganismi in grado di rilasciare sostanze volatili biologicamente attive su D. suzukii. Gli studi sono proseguiti presso l’Oregon State University, dove è stata saggiata la funzionalità della trappola innescata con il nuovo attrattivo anche in ambienti ecologicamente diversi, con l’intento di accelerare la ricerca e il trasferimento tecnologico di nuovi metodi ecosostenibili di controllo di D. suzukii basati, ad esempio, su tecniche di cattura massale. Nel presente lavoro è stato possibile dimostrare l’importanza dei microrganismi, in particolare batteri lattici, e più propriamente ceppi appartenenti alla specie Oenococcus oeni (Garvie) Dicks et al., nel miglioramento della capacità di cattura del “Droskidrink”, dovuto a sostanze prodotte durante la fermentazione malolattica. Gli studi compiuti hanno anche condotto alla messa a punto di un nuovo modello di trappola che sembra agire in modo sinergico con la miscela attrattiva utilizzata e che, tra l’altro, è in grado di ridurre i tempi necessari per la quantificazione e la determinazione degli individui catturati. Interessante è risultata la capacità di questo nuovo modello di trappola di catturare un consistente numero di individui, specialmente di sesso femminile, in periodi caratterizzati da temperature al limite della sopravvivenza di D. suzukii, ovvero in presenza di basse densità di popolazione del carpofago. Questi risultati permettono di ipotizzare una buona efficacia dell’applicazione precoce delle tecniche di cattura massale o di lotta attratticida, che potrebbero condurre, come auspicato, ad una significativa riduzione del numero di individui presenti in campo al momento della comparsa dei frutti adatti all’ovideposizione. Dottorato di ricerca in Difesa e qualità delle produzioni agro-alimentari e forestali (XXVIII ciclo)

In this study we report the effects of fungal metabolites isolated from cultures of the fungus Trichoderma citrinoviride ITEM 4484 on the feeding preference of the aphid Rhopalosiphum padi, a major pest of cereal crops. Different phagodeterrent metabolites were purified by a combination of direct and reverse phase column chromatography and thin-layer chromatography. Chemical investigations, by spectroscopic and chemical methods, led to the identification of different long chain primary alcohols (LCOHs) of the general formula R-OH, wherein R is a long, unbranched, unsubstituted, linear aliphatic group. LCOHs have been reported as components of lepidopteran pheromone blends, but their phagodeterrent effect to aphids is herein reported for the first time. The effects of LCOHs on R. padi were studied by behavioral and electrophysiological bioassays. Feeding preference tests that were carried out with winged and wingless morphs of R. padi showed that LCOHs had high phagodeterrent activity and restrained aphids from settling on treated leaves at a concentration as low as 0.15 mM (0.036 g/l). The results of different electrophysiological analyses indicated that taste receptor neurons located on the aphid tarsomeres were involved in the LCOHs perception. Behavioral assays carried out with some commercial agrochemicals, including azadirachtin A, pyrethrum and a mineral oil-based product, in combination with 1-hexadecanol, the LCOH most abundantly produced by T. citrinoviride ITEM 4484, showed that these different active principles could be applied together, resulting in a useful increase of the phagodeterrent effect. The data shown indicate that these compounds can be profitably utilized for novel applications in biotechnical control of aphid pests. Furthermore, the tested LCOHs have no chiral centers and therefore can be obtained with good yield and at low cost through chemical synthesis, as well as from natural sources.

L’attività di ricerca, svolta con approccio multidisciplinare, ha riguardato l’interazione tra tartufo e ambiente, in particolare il rapporto tra tartufo, insetti ad esso infeudati, piante simbionti e comunità vegetale, secondo il modello Tuber aestivum Vitt. (Tartufo nero estivo) - Quercus pubescens Willd. (roverella) - Leiodes cinnamomea (Panzer). Il rapporto tra tartufo e comunità vegetale è stato analizzato conducendo rilievi fitosociologici in una tartufaia a T. aestivum, per mettere in relazione la presenza della micorriza, e delle sostanze emesse, con la presenza/assenza di particolari specie vegetali. Dall’analisi fitosociologica è emerso che alcune forme biologiche (Terofite ed Emicriptofite) sono dominanti nell’ambiente delle tartufaie. Nella zona della bruciata mancano Geofite e Fanerofite. Le Fanerofite, tuttavia, sono le prime forme biologiche a ricomparire nella zona di ricolonizzazione, dove la pressione allelopatica esercitata dalle sostanze emesse dal micelio inizia a diminuire. Le Geofite sono invece le ultime forme biologiche a ricomparire; potrebbero essere le più sensibili alla pressione allelopatica: risultano, pertanto, candidate come “piante indicatrici”. Per lo studio del rapporto tra tartufo e piante simbionti, è stato condotto un’analisi dei composti volatili (VOCs) emessi da Q. pubescens, pianta ospite di T. aestivum, con la finalità di valutare eventuali variazioni nell’emissione di VOCs da parte di piante micorrizate rispetto a quelle non micorrizate. Estrazioni di VOCs sono state effettuate da foglie di roverella, micorrizate e non micorrizate con T. aestivum. Sono state condotte, inoltre, estrazioni di VOCs da carpofori di T. aestivum, T. magnatum, T. borchii, T. melanosporum, T. mesentericum, T. uncinatum, T. brumale, al fine di determinare, nelle diverse specie, eventuali differenze di VOCs in termini qualitativi e quantitativi. I dati delle analisi chimiche evidenziano differenze nel profilo dei VOCs emessi sia dai carpofori di Tuber spp., che delle piantine di Q. pubescens micorrizate e non micorrizate. Le indagini sui VOCs sono proseguite mettendo a punto un protocollo di micropropagazione che ha permesso di ottenere piantine di Q. pubescens successivamente sottoposte a micorrizazione in vitro, utilizzando simbionti arbuscolari (Glomus intraradices Schenck and Smith). È stato calcolato un indice di micorrizazione che si è attestato intorno a valori del 20%. Dalle piantine micorrizate con questo protocollo, è stata realizzata un’ulteriore estrazione di VOCs, con successiva caratterizzazione chimica. Lo studio dell’interazione tra tartufo ed entomofauna ha valutato l’attività biologica dei VOCs emessi da piante micorrizate e da carpofori sul coleottero L. cinnamomea, particolarmente dannoso al tartufo. Gli estratti di foglie di Q. pubescens micorrizata e non, come pure gli estratti dai carpofori, sono stati utilizzati come stimoli in un biosaggio comportamentale a due-scelte, del tipo “a caduta”. Sono state osservate le risposte comportamentali di femmine di L. cinnamomea, esposte a dosi crescenti degli estratti (da 0,01 µg/µl a 100 µg/µl + estratto tal quale), a confronto con il solvente (esano). I dati evidenziano come alcuni estratti da carpoforo (T. mesentericum, T. borchii, T. melanosporum) abbiano elicitato una risposta comportamentale positiva da parte delle femmine saggiate, che hanno preferito gli estratti rispetto al controllo. Analogo risultato si è osservato con gli estratti di Q. pubescens micorrizata rispetto sia al controllo (esano) che allo stesso estratto di pianta non micorrizata. Sono state registrate, inoltre, mediante tecnica elettroantennografica (EAG), le risposte di L. cinnamomea a 13 composti volatili, identificati nello spazio di testa di diverse specie di Tuber, calcolando le curve dose-risposta (5 dosi, da 0,01 µg/µl a 100 µg/µl). I dati indicano che gli adulti del micofago sono in grado di percepire, con diversa intensità, la maggior parte dei composti saggiati, e che l’ampiezza della risposta è dipendente dalla dose somministrata. The research activity, which has been conducted with a multidisciplinary approach, aimed to study the interactions between mycorrhizae and environment, with a focus on the relationship among truffle, mycophagous insects, host plants and plant community, following the study model Tuber aestivum Vitt. (black truffle) - Quercus pubescens Willd. - Leiodes cinnamomea (Panzer). The relationship between truffle and plant community has been analyzed performing phytosociological investigations in a T. aestivum plantation, to correlate the presence of mycorrhiza, and of its emitted compounds, to the presence/absence of plant species. Data from this phytosociological analysis showed that some plant groups (Therophyitae and Hemicriptophytae) are dominating plant species in truffle environments. In the brûlè area, Geophytae and Phanerophytae are missing. The last ones, however, are the first plant species to recovery in the re-colonization area, where the allelopathic pressure of the mycorrhizal volatile compounds starts to decrease. Moreover, Geophytae are the last plant species to recovery; they could be the most sensitive to allelopathic pressure and are supposed to serve as “indicator plants”. The relationship between truffle and symbiotic host plants has been investigated studying the volatile organic compounds (VOCs) emitted by Q. pubescens, a typical T. aestivum host plant, with the aim to evaluate differences in the VOCs emitted by mycorrhized plants versus not-mycorrhized ones. VOCs extractions have been performed by leaves of mycorrhized and not-mycorrhized Q. pubescens. VOCs extractions have also been conducted by fruit bodies of T. aestivum, T. magnatum, T. borchii, T. melanosporum, T. mesentericum, T. uncinatum, T. brumale, to determine if there are differences in VOCs quantity and quality in the different truffle species. Data from GC-MS analisys show differences in the VOCs profiles emitted from Tuber spp. fruit bodies, as well as from mycorrhized and not-mycorrhized Q. pubescens plants. VOCs investigations have been followed by a micropropagation protocol, which allowed to obtain Q. pubescens cloned plants to be mycorrhized in vitro with arbuscular mycorrhizae (Glomus intraradices Schenck and Smith). The mycorrhizazion index calculated was around 20%. From the in vitro mycorrhized plants, the emitted VOCs have been extracted and chemically analized. The relationship between truffle and insects aimed to evaluate the biological activity of VOCs released by mycorrhized plants and truffle fruit bodies on the mycophagous beetle L. cinnamomea. Extracts from mycorrhized and not-mycorrhized Q. pubescens leaves, as well as from Tuber spp. body fruits, have been tested as stimuli in a behavioural two-choice pitfall bioassay. The behavioural responses of L. cinnamomea females were observed, when exposed to increasing doses of the extracts (from 0.01 µg/µl to 100 µg/µl + pure extract) compared to the solvent (hexane). Recorded results show how some fruit body extracts (T. mesentericum, T. borchii, T. melanosporum) were able to elicit a positive behavioural responses by females, which preferred the extracts as opposed to the solvent control. The same result has been observed in response to the mycorrhized Q. pubescens leaves extract, compared both with the control (hexane) and the not- mycorrhized Q. pubescens extract. Electroantennographic (EAG) responses of L. cinnamomea have also been recorded, stimulating the insects’ antennae with increasing doses (5 doses, from 0.01 µg/µl to 100 µg/µl) of 13 volatile compounds, previously identified in several Tuber species’ headspace. From the calculated dose-response EAG curves, we can observe that L. cinnamomea adults are able to perceive, with differential intensity, most of the tested compounds, showing a response amplitude directly depending on the supplied dose. Dottorato di ricerca in Difesa e qualità delle produzioni agro-alimentari e forestali (XXIV ciclo)

(Capitolo I) Dryocosmus kuriphilus è uno dei principali fitofagi per Castanea spp. Indagini comportamentali, chimiche ed elettrofisiologiche sono state eseguite al fine di determinare il ruolo dei volatili della pianta nella localizzazione dell’ospite da parte del cinipide telitoco. Biosaggi in olfattometro ad Y hanno mostrato che gli adulti sono significativamente attratti da materiale vegetale di C. sativa dopo un’ora dal loro lesionamento. Gli odori emessi da piantine, rametti intatti e rametti con un danno meccanico recente non sono risultate attrattivi. Il materiale vegetale della pianta non ospite Prunus laurocerasus ha un’azione repellente sul cinipide. Sono stati identificati quattordici componenti, principalmente green leaf volatiles, nello spazio di testa della pianta ospite tramite gas cromatografia abbinata a spettrometria di massa. Tutte le sostanze stimolano risposte EAG dose-dipendenti negli adulti. Una miscela sintetica comprendente tutti i composti identificati negli stessi rapporti che si ritrovano nella pianta ospite induce risposte significativamente positive nei biosaggi in olfattometro ad Y. Il presente studio fornisce informazioni preliminari per l’identificazione degli attrattivi della pianta ospite di D. kuriphilus che potrebbe contribuire a sviluppare un sistema di controllo e di monitoraggio basati sull’utilizzo di semiochimici. (Capitolo II) L’adattamento sensoriale misurato come una riduzione nella risposta elettroantennografica (EAG) delle antenne dei maschi è stato proposto come uno dei meccanismi di confusione sessuale mediata da feromoni in Grapholita molesta (Busck) (Lepidoptera: Tortricidae). E’ stata rilevata una riduzione nella risposta EAG nella specie dopo una prolungata esposizione al componente principale del feromone (Z)-8-dodecen-1-il acetato (Z8-12:OAc) ad una concentrazione aerea di 1 ng/m3 pari a quella misurata in frutteti trattati con il feromone per generare confusione. Comunque l’effetto sulla loro abilità di orientamento verso femmine vergini in fase di richiamo poste in un tunnel di volo è molto limitato. Gli esperimenti sono stati intrapresi per determinare se l’esposizione al componente principale del feromone in combinazione con i due componenti secondari biologicamente attivi, (E)-8-dodecen-1-il acetato (E8-12:OAc) e (Z)-8-dodecen-1-olo (Z8-12:OH) induce livelli maggiori di adattamento sensoriale ed ha un’influenza maggiore sul comportamento sessuale dei maschi. L’esposizione delle antenne ad un componente della miscela feromonica induce adattamento sensoriale non solo verso lo stesso ma anche verso le altre due sostanze (adattamento incrociato). La media percentuale di adattamento sensoriale ad un componente del feromone risulta essere simile dopo 15 min di esposizione a 1 ng/m3 aria di Z8-12:OAc od a 1 ng/m3 aria di una miscela 1:1:1 o 93:6:1 di Z8-12:OAc, E8-12:OAc e Z8-12:OH. L’esposizione di maschi ad 1 ng/m3aria di Z8-12:OAc od alle due miscele di Z8-12:OAc, E8-12:OAc e Z8-12:OH per 15 min non ha prodotto effetti sull’abilità dei maschi di orientarsi verso una femmina vergine in fase di richiamo in un tunnel di volo. Nel presente studio sono stati studiati i meccanismi operativi di confusione sessuale tramite l’impiego di feromoni di G.molesta. (Chapter I) Dryocosmus kuriphilus is one of the most damaging pests of Castanea spp. Behavioral, chemical, and electrophysiological investigations were employed to examine the role of plant volatiles for host location by this thelytokuos cynipid. Y-tube olfactometer bioassays showed that adult wasps are significantly attracted by C. sativa twigs with at least 1-hr-old mechanical damage. Odors of undamaged host seedlings, intact twigs, and twigs with a fresh mechanical damage were not attractive. Wasps were repelled by plant materials of the non-host Prunus laurocerasus. Fourteen compounds, mainly general green leaf volatiles, were identified in the head-space of attractive host plant twigs by gas chromatography coupled to mass spectrometry. All compounds elicited dose-dependent antennal responses in adult wasps. A synthetic blend comprising all identified compounds in the same ratio as in the attractive host source induced significant positive responses in Y-tube olfactometer bioassays. The study gives a basis for future identification of host plant attractants that could contribute to semiochemical-based monitoring and management practices of this pest. (Chapter II) Sensory adaptation measured as a reduction in electroantennogram (EAG) response of male antennae has been proposed as one of several mechanisms of sex pheromone-mediated mating disruption in the oriental fruit moth, Grapholita molesta (Busck) (Lepidoptera: Tortricidae). A reduction in EAG response occurred in this species after prolonged exposure to its main pheromone compound (Z)-8-dodecen-1-yl acetate (Z8-12:OAc) at the aerial concentration of 1 ng/m3 measured in orchards treated with pheromone for disruption. The prolonged exposure of males to this aerial concentration of Z8-12:OAc, however, had only a small effect on their ability to orientate by flight to virgin calling females in a flight tunnel. Experiments were undertaken to determine if exposure to the main pheromone compound in combination with the two biologically active minor compounds of this species, (E)-8-dodecen-1-yl acetate (E8-12:OAc) and (Z)-8-dodecen-1-ol (Z8-12:OH) would induce greater levels of sensory adaptation and have a greater effect on male sexual behaviour. The exposure of male antennae to one of the three pheromone compounds induced sensory adaptation to this compound and to the other two pheromone compounds demonstrating cross adaptation. Average percentage sensory adaptation to a pheromone compound was similar after 15 min of exposure to 1 ng/m3 air of Z8-12:OAc, or to 1 ng/m3 air of a 1:1:1 or 93:6:1 blend of Z8-12:OAc, E8-12:OAc and Z8-12:OH. The exposure of male G. molesta to 1 ng m3/air of Z8-12:OAc or the two ratios of Z8-12:OAc, E8-12:OAc and Z8-12:OH for 15 min had no effect on the ability of males to orientate by flight to a virgin calling female in a flight tunnel. The implications of the results for the operative mechanisms of sex pheromone-mediated mating disruption of this species are discussed. Dottorato di ricerca in Difesa e qualità delle produzioni agro-alimentari e forestali (XXIV ciclo)

We report the effects of some bisorbicillinoids isolated from biomass of the fungus Trichoderma citrinoviride on settling and feeding preference of the aphid Schizaphis graminum. Purification of the fungal metabolites was carried out by a combination of column chromatography and thin-layer chromatography using direct and reverse phases. Chemical identification was performed by spectroscopic methods including nuclear magnetic resonance and mass spectrometry. The identified bisorbicillinoids appeared to be bislongiquinolide, its 16,17-dihydro derivative, trichodimerol, and dihydrotrichodimerol. A feeding preference test with alate morphs of S. graminum was used to identify the active fractions. Among the four bisorbicillinoids, dihydrotrichodimerol and bislongiquinolide influenced aphid feeding preference, restraining specimens from settling on leaves treated with metabolites. Taste neurons sensitive to these compounds, particularly to bislongiquinolide, were located on tarsi of the S. graminum alate morphs.