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Dissertação de Doutoramento em Ciências do Meio Aquático apresentada ao Instituto de Ciências Biomédicas de Abel Salazar da Universidade do Porto

Orientador: Prof. Dr.André Martins Vaz-dos-Santos Coorientador: Prof. Dr. Alberto Teodorico Correia Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor Palotina, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura e Desenvolvimento Sustentável. Defesa : Palotina, 31/01/2022 Inclui referências: p. 47-54 Resumo: Os otólitos, concreções calcárias da orelha interna dos peixes, constituem uma ferram enta acurada para estudos de ciclo de vida dos peixes, em especial o crescimento e fatores que o afetam. Para descrever o ciclo de vida de três espécieschave em ambientes costeiros, Atherinella brasiliensis, Diapterus rhombeus e Eucinostom us argenteus, foram analisados materiais do acervo do Laboratório de Esclerocronologia da Universidade Federal do Paraná. Otólitos provenientes de coletas sazonais realizadas em um ecossistema costeiro subtropical, a baía do Araçá (23°48'58.90"S, 45°24'10.40"W ) foram analisados com técnicas de m orfometria linear, análise das razões de aspecto, idade e crescimento (análise microestrutural de anéis diários). Foram observadas duas fases de crescimento reportadas para as três espécies, com os modelos de crescimento Gompertz e von Bertalanffy descrevendo essas fases, respectivamente. Para A. brasiliensis, os pontos de mudança ocorreram em 88 mm Ct(comprimento total) e 131 mm Ct, correspondentes a idades de 230-240 diaspara a primeira fase e 600 dias para a segunda. Para D. rhombeus, os pontos identificados ocorreram em 144,69 mm Ct e 171,44 mm Ct com idades de 300-310 dias para primeira fase e 400-410 dias para a segunda. Para E. argenteus não se obteve resultado satisfatório na identificação de fases, porém foi possível observar através das razões de aspecto mudanças de padrão em dois pontos sendo em 20 e em 70 mm Ct, com as variações significativas para a razão de aspecto do o comprimento do otólito (H = 24,41, p = 0,01108) entre as classes 20 e 30 mm (p = 0,02083) e 70 e 80 mm (p = 0,004977). As taxas de crescimento obtidas com os modelos de Gompertz e von Bertalanffy indicaram crescimento rápido, com comprimentos máximos teóricos de 158,95 mm para A. brasiliensis, 243,01 mm para D. rhombeus e 198,47 mm para E. argenteus.Concluise os indivíduos das três espécies sãojovens, com duas fases de crescimento distintas, sendo a baía do Araçá utilizada para crescimento inicial e alimentação. Metodologicamente, os otólitos forneceram informação acurada para quantificar os processos do ciclo de vida em um ambiente costeiro. Abstract: Otoliths are carbonate calcium concretions of the inner ear of fishes. They constitute an accurate tool for studies of the life cycle of fishes, especially growth and related factors. To describe the life cycle of three key species in coastal environments, Atherinella brasiliensis, Diapterus rhombeus and Eucinostomus argenteus, otoliths from the collection of the Sclerochronology Laboratory of the Federal University of Parana were analyzed. Otoliths from seasonal samplings carried out in a subtropical coastal ecosystem, the Araga Bay (23°48'58.90"S, 45°24'10.40"W ) were analyzed using linear m orphometric techniques, analysis of aspect ratios, age and growth (microstructural analysis of daily rings). Two growth phases reported for the three species were observed, with the Gom pertz and von Bertalanffy growth models describing these phases, respectively. For A. brasiliensis, the change points occurred at 88 mm Ct (total length) and 131 mm Ct, corresponding to ages of 230-240 days for the first phase and 600 days for the second. For D. rhombeus, the identified points occurred at 144.69 mm Ct and 171.44 mm Ct with ages of 300-310 days for the first phase and 400-410 days for the second one. For E. argenteus, no satisfactory results were obtained in the identification of phases, but it was possible to observe, through the aspect ratios, pattern changes at two points, being at 20 and 70 mm Ct, with significant variations for the aspect ratio of the otolith length (H = 24.41, p = 0.01108) between classes 20 and30 mm (p = 0.02083) and 70 and 80 mm (p = 0.004977). The growth rates obtained with the Gompertz and von Bertalanffy models indicated rapid growth, with maximum theoretical lengths of 158.95 mm for A. brasiliensis, 243.01 mm for D. rhombeus, and 198.47 mm for E. argenteus. In summary, the individuals of the three species are young, with two distinct growth phases, with Araga Bay being used for initial growth and feeding. Methodologically, the otoliths provided accurate information to quantify life cycle processes in a coastal environment.

Submitted by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2021-02-02T11:21:53Z No. of bitstreams: 1 PPG_38785.pdf: 658161 bytes, checksum: 118193e8a7004bbcd86fe00002d4afd3 (MD5) Approved for entry into archive by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2021-02-02T11:59:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PPG_38785.pdf: 658161 bytes, checksum: 118193e8a7004bbcd86fe00002d4afd3 (MD5) Made available in DSpace on 2021-02-02T11:59:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PPG_38785.pdf: 658161 bytes, checksum: 118193e8a7004bbcd86fe00002d4afd3 (MD5) Previous issue date: 2020-12-18

Chelidonichthys lucerna, ou cabra-cabaço como é vulgarmente conhecida em Portugal, é uma espécie piscícola marinha e demersal pertencente à família Triglidae. Os indivíduos pertencentes a esta família são vulgarmente denominados como ruivos. Nas águas do Atlântico Nordeste existem oito espécies identificadas, embora apenas seis sejam frequentemente comercializadas, sendo C. lucerna uma dessas espécies. Esta espécie tem uma distribuição geográfica bastante ampla, sendo que pode ser encontrada no Oceano Atlântico, à exceção das regiões arquipelágicas da Madeira e dos Açores, e ainda nos mares Mediterrâneo e Negro. Ocorre em águas pouco profundas, entre os 20 m e os 300 m, e com temperaturas compreendidas entre os 8ºC e os 24ºC. Durante a primavera e o verão, encontram-se em águas mais rasas, mas no inverno migram para águas ligeiramente mais profundas. Esta espécie tem características morfológicas e merísticas marcantes, em particular a coloração das suas barbatanas, que a permitem distinguir das restantes espécies congenéricas. Relativamente à alimentação, C. lucerna apresenta um comportamento oportunista, alimentando-se de diferentes tipos de presa ao longo do ciclo de vida. Enquanto os juvenis desta espécie preferem alimentar-se de crustáceos, os organismos adultos alimentam-se preferencialmente de outros peixes. No início da maturação sexual, os indivíduos maiores tendem a migrar para maiores profundidades, alterando o seu regime alimentar. A alimentação também sofre alterações, dependendo da estação do ano, sendo que preferem alimentar-se de peixes no inverno e de crustáceos no verão. Não existem, contudo, diferenças registadas entre a alimentação de machos e fêmeas. C. lucerna é uma espécie de crescimento rápido e de vida relativamente longa. Geralmente, as fêmeas são maiores e mais velhas que os machos, sendo comum a ausência de machos nas classes de idade mais avançadas. Relativamente à reprodução, é comum que os machos atinjam a maturidade sexual mais cedo e com menor tamanho, até porque estes apresentam um crescimento mais rápido. Vários estudos apontam para uma época de reprodução bastante extensa, podendo ocorrer ao longo de todo ano, embora com picos de intensidade em épocas particulares, dependendo da localização geográfica. Em termos de proporção sexual é frequente ser encontrado um maior número de fêmeas em relação aos machos na coluna de água. Quanto à pesca, uma grande parte das espécies da família Triglidae é rejeitada ainda no mar, uma vez que têm um valor comercial reduzido. No entanto, dentro das espécies desta família, C. lucerna é a mais abundante e a que apresenta um maior valor comercial. Embora esta espécie não seja uma espécie-alvo de várias pescarias, é frequentemente uma captura acessória em arrastos de portas. Para a realização deste estudo, um total de 244 indivíduos foram considerados: 180 indivíduos amostrados bimensalmente, entre junho de 2018 e maio de 2019, e capturados pela frota artesanal a operar ao largo de Matosinhos, Nordeste de Portugal, com recurso a redes de emalhar e de arrasto de vara; mais 64 indivíduos provenientes de uma campanha do IPMA que teve lugar durante os meses de janeiro e fevereiro de 2019, capturados através de redes de arrasto de portas. Os indivíduos foram medidos (comprimento total), pesados (inteiros e eviscerados) e os seus índices gonadossomático e hepatossomático foram obtidos. Foi feita a estimativa de idades dos animais por leitura dos anéis de crescimento anual dos otólitos sagittae. Fez-se inicialmente a identificação macroscópica do sexo e estadio de desenvolvimento gonadal dos indivíduos, posteriormente confirmado com recurso a cortes histológicos. O comprimento total das fêmeas e machos variou entre 12,3 – 46,2 cm e 13,3 – 30,3 cm, respetivamente. A relação peso-comprimento foi definida separadamente para ambos os sexos, indicando um crescimento alométrico positivo para as fêmeas (W = 6,39 e -6 L 3,13) e um crescimento isométrico para os machos (W = 8,89 e -6 L 3,02). Um total de 225 otólitos foram lidos com sucesso e as idades dos peixes variaram entre 0 e 8 anos, sendo que para as fêmeas as idades variaram entre 0 e 8 anos, e para os machos as idades variaram entre 0 e 4 anos. As bordas dos otólitos também foram analisadas e foi possível verificar uma maior percentagem de bordas opacas nos meses de maio, julho e setembro (primavera-verão), enquanto que uma maior percentagem de bordas translúcidas foi verificada nos meses de novembro, janeiro, fevereiro e março (outono-inverno), sugerindo uma deposição anual dos annuli. Durante as amostragens, o número de fêmeas foi sempre superior ao número de machos, apresentando uma proporção sexual de 1.00:0.31. Apenas foi possível encontrar indivíduos imaturos nos meses de maio, julho e setembro. A época de reprodução foi estimada com base numa combinação entre a análise dos valores dos índices gonadossomático e hepatossomático, assim como a identificação do grau de desenvolvimento das gónadas dos indivíduos. Na costa norte portuguesa, a reprodução ocorre preferencialmente entre os meses de novembro e março, com um pico em janeiro. Também foi possível observar um maior número de estômagos vazios durante a época de reprodução, sugerindo que os indivíduos suspendem a sua alimentação na época pré-reprodutiva. O fator de condição parece ser influenciado pela época de reprodução e variou entre 0,80 e 0,89 para maio e setembro, respetivamente. Os parâmetros da equação de crescimento de von Bertalanffy apresentaram diferenças significativas entre machos e fêmeas, sendo estimados como L∞ = 33,3 cm e k = 0,42 anos-1 para machos e L∞ = 54,1 cm e k = 0,14 anos-1 para fêmeas. Os valores do comprimento (e idade) de primeira maturação também apresentaram diferenças entre machos e fêmeas, sendo estes estimados como 18,3 cm (e 0,61 anos) e 20,3 cm (e 0,71 anos) para fêmeas e machos, respetivamente. The tub gurnard, Chelidonichthys lucerna, is an important commercial marine demersal fish species belonging to the Triglidae family, which can be commonly found in the north-eastern Atlantic, in the Mediterranean Sea and in the Black Sea. Within the gurnards, C. lucerna is the most important species and the one with the greatest economic value in the Portuguese coast. In this study, age, growth, sex and gonadal maturation of Chelidonichthys lucerna were determined for the first time in a southern NE Atlantic region, in order to provide essential ecological data on the species. A total of 244 specimens of C. lucerna combined between bi-monthly artisanal fishery captures that took place between June 2018 and May 2019, and samples collected in January-February 2019 from a research survey, both in northern Portugal. Total length for males ranged from 13.3 to 30.3 cm and for females from 12.3 to 46.2 cm. The length-weigh relationship for males and females combined was defined as: W = 5.2 e -6 L 3.19, indicating a positive allometric growth. The maximum age observed was 4 for males and 8 for females. According to the variation of GSI values and through the histological gonadal development, it was possible to define a protracted spawning season from November to March, with a peak in January. The condition factor was related with the reproduction period and varied seasonally, with minimum and maximum values recorded in May and September, respectively. A high number of empty stomachs was also recorded during the reproduction period, suggesting a behavioural feeding regime change. The overall female to male sex-ratio observed was 1.00:0.31. The von Bertalanffy growth parameters were estimated as L∞ = 33.3 cm and k = 0.42 year-1 for males and as L∞ = 54.1 cm e k = 0.14 year-1 for females. Males mature at smaller lengths and younger ages (L50 = 18.2 cm, A50 = 0.61 years) than females (L50 = 20.3 cm, A50 = 0.71 years).

Submitted by Ana Moreira (anadsmoreira@ufp.pt) on 2020-05-05T11:08:33Z No. of bitstreams: 1 TD_Rogério Santos da Cunha.pdf: 7298986 bytes, checksum: c5c0fae3561933b73e9925a0ffb7405a (MD5) Approved for entry into archive by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2020-07-01T16:00:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TD_Rogério Santos da Cunha.pdf: 7298986 bytes, checksum: c5c0fae3561933b73e9925a0ffb7405a (MD5) Made available in DSpace on 2020-07-01T16:00:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TD_Rogério Santos da Cunha.pdf: 7298986 bytes, checksum: c5c0fae3561933b73e9925a0ffb7405a (MD5) Previous issue date: 2020-03-05

Lipid-regulating drugs are one of the most prescribed medications around the world, to control human cholesterol levels, to more than 20 million patients. Due to their wide usage, pharmaceuticals can be discarded, metabolized and excreted into the environment, potentially affecting aquatic organisms. Despite this increasing use of lipid-regulating drugs, particularly simvastatin and clofibric acid, are not fully characterized and understood in terms of their potential toxicological effects at the environmental level, therefore being necessary to investigate them. Therefore, it emerges a new concern on their effects related to the potential environmental impact, particularly in the aquatic environment. This work intended to characterize the toxicity due to an acute (120 hours post-fertilization) and chronical (60 days) exposure to antihyperlipidemic drugs, namely simvastatin (92.45, 184.9, 369.8, 739.6 and 1479.2 ng L-1) and clofibric acid (10.35, 20.7, 41.4, 82.8 and 165.6 μg L-1), in the freshwater species of zebrafish (Danio rerio). The concentrations hereby selected were implemented in both exposures. The analysis of effects focused on the histological observation of tissues in individuals, concerning sex determination and maturation stages of gonads, behavior (small and large distance, total distance and swimming time), biomarkers of oxidative stress (superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase), biotransformation (glutathione S-transferases) and lipid peroxidation (thiobarbituric acid reactive substances). In terms of acute exposure, it was observed behavioral alterations in both compounds, simvastatin caused hyperactivity and clofibric acid provoked hypoactivity in all behavioral parameters. Moreover, it was observed a significant decrease in all biomarkers in individuals exposed to simvastatin from 184.9 to 1479.2 ng L-1, except for catalase, for which no significant differences were found. Glutathione peroxidase selenium-dependent activity also showed a significant increase at 92.45 ng L-1. On the other hand, in individuals exposed to clofibric acid, there was a significant increase in all biomarkers, typically from 41.4 to 165.6 μg L-1. However, in catalase and glutathione S-transferases, in the highest concentration, the activity was significantly decreased. This study suggests that the chronic exposure of Danio rerio to simvastatin and clofibric acid does not interfere with the sex ratio and maturation stages of individuals. As antioxidant defenses are important in terms of the capacity of the organism to overcome oxidative stress, along with effects in locomotion, it can affect the metabolism or even the survival of organisms. Therefore, further studies in terms of mode of action of these two compounds, including reproductive disruption effects in longer exposures, are required to observe and characterize the long-term effects of simvastatin and clofibric acid in the aquatic compartment and its organisms. Os antihiperlipidémicos são dos fármacos mais prescritos no mundo para o controlo dos níveis de colesterol, a mais de 20 milhões de pacientes. Devido ao seu amplo uso, os fármacos podem ser descartados, metabolizados e excretados no ambiente, potencialmente afetando organismos aquáticos. Apesar desta ampla utilização de antihiperlipidémicos, particularmente a sinvastatina e o ácido clofíbrico, os seus potenciais efeitos toxicológicos ao nível ambiental não estão totalmente caracterizados e compreendidos, sendo assim necessário investigá-los. Portanto, surge uma nova preocupação quanto ao seu potencial impacto ambiental, particularmente no ambiente aquático. Este trabalho visa caracterizar a toxicidade decorrente da exposição aguda (120 horas pós-fertilização) e crónica (60 dias) a drogas antihiperlipidémicas, nomeadamente sinvastatina (92.45, 184.9, 369.8, 739.6 e 1479.2 ng L-1) e ácido clofíbrico (10.35, 20.7, 41.4, 82.8 e 165.6 μg L-1), na espécie de peixe de água doce peixe-zebra (Danio rerio). As concentrações selecionadas foram implementadas em ambas as exposições. A análise dos efeitos incidiu sobre a observação histológica de tecidos dos indivíduos, no que diz respeito à determinação do sexo e dos estádios de maturação das gónadas, comportamento (movimentos curtos e longos, tempo de natação e distância total de natação), e biomarcadores de stress oxidativo (superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase), biotransformação (glutationa S-transferases) e peroxidação lipídica (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico). No caso da exposição aguda, foram observadas alterações de comportamento em animais expostos a ambos os compostos, sendo que a sinvastatina originou hiperatividade e o ácido clofíbrico provocou hipoatividade em todos os parâmetros comportamentais. Para além disso, foi observada a inibição significativa em todos os biomarcadores em indivíduos expostos a sinvastatina em concentrações de 184.9 a 1479.2 ng L-1, exceto na catalase, parâmetro para o qual não foram reportadas diferenças significativas. A atividade da glutationa peroxidase selénio dependente também aumentou significativamente para níveis de 92.45 ng L-1. Por outro lado, em indivíduos expostos a ácido clofíbrico, houve um aumento significativo em todos os biomarcadores, geralmente em peixes expostos a concentrações de 41.4 a 165.6 μg L-1. No entanto, no caso da catalase e das glutationa S-transferases, na concentração mais elevada, a atividade diminuiu significativamente. Este estudo sugere que as exposições crónicas de Danio rerio a sinvastatina e ácido clofíbrico não interferem na proporção de sexo e nos estádios de maturação dos indivíduos. Como as defesas antioxidantes são importantes relativamente à capacidade do organismo no combate ao stress oxidativo, juntamente com efeitos a nível da locomoção, podem afetar o metabolismo ou até mesmo a sobrevivência dos organismos. Assim, terão de ser investigados o modo de ação destes dois compostos, incluindo os efeitos ao nível da disrupção reprodutiva em exposições mais prolongadas, de forma a observar e caracterizar os efeitos a longo-prazo da sinvastatina e do ácido clofíbrico no compartimento aquático e nos seus organismos. This work was partially supported by Strategic Funding UID/Multi/04423/2019 through national funds provided by FCT and European Regional Development Fund (ERDF), in the framework of the programme PT2020. Thanks are due to ECO-R-pharmplast - Ecotoxicity of realistic combinations of pharmaceutical drugs and microplastics in marine ecosystems, Fundação para a Ciência e a Tecnologia, FCT (reference POCI-01-0145-FEDER-029203). Thanks are also due for the financial support to CESAM (UID/AMB/50017/2019), to FCT/MEC through national funds, and the co-funding by the FEDER, within the PT2020 Partnership Agreement and Compete 2020. Mestrado em Biologia Marinha Aplicada

Orientador: Prof. Dr. Alberto Teodorico Correia Coorientadores: Prof. Dr. Henry Louis Spach, Prof. Dr. Felippe Alexandre Daros Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Terra, Centro de Estudos do Mar, Programa de Pós-Graduação em Sistemas Costeiros e Oceânicos. Defesa : Curitiba, 27/03/2019 Inclui referências Resumo: Na presente tese foram investigas características da história de vida do paru, Chaetodipterus faber, no Sul do Brasil e a estrutura do estoque pesqueiro nas principais áreas de pesca da espécie no Oceano Atlântico Sudoeste. Os resultados mais importantes desta tese foram: (1) próximo ao seu limite sul de distribuição C. faber tem uma longevidade de 17 anos; (2) o dimorfismo sexual no crescimento não foi evidente e a razão sexual (machos: fêmeas) foi de 1: 1,17; (3) a espécie apresenta crescimento assintótico que se ajusta a função crescimento de von Bertalanffy, onde os parâmetros estimados para todos os indivíduos coletados aos 25°S (Estado do Paraná) foram: L = 508,81 mm, k = 0,22 ano-1 e t0 = -0,05 ano; (5) a espécie apresenta uma estratégia de desova parcelada com pico reprodutivo entre outubro e janeiro em latitudes subtropicais (25°S); (6) regiões estuarinas são importantes para a reprodução da espécie que, aparentemente, forma agregações reprodutivas nestas áreas; (7) as fêmeas gastam aproximadamente seis meses a mais que os machos para atingir a maturidade e são capazes de desovar pouco antes do seu segundo aniversário; (8) a forma e a química dos otólitos revelaram que a conectividade entre a população de C. faber na região do Espírito Santo (20°S) com as populações do sul (> 22°S) é limitada; (9) a presença de grupos semi-discretos espacialmente estruturados foi evidente entre 23°S e 27°S (Rio de Janeiro e Santa Catarina); (10) as razões de Sr/Ca e Mn/Ca ao longo dos marcos cronológicos nos otólitos de C. faber indica que a maioria dos indivíduos usa as regiões estuarinas na fase juvenil e migra para águas costeiras de maiores salinidades na fase adulta. Para fins de manejo pesqueiro, os nossos resultados sugerem que o defeso durante o pico reprodutivo e a proibição das capturas de indivíduos menores que 25 cm de comprimento total podem ser usados para a gestão do estoque de C. faber no Sul do Brasil; As unidades populacionais de C. faber na costa Sudeste e Sul do Brasil devem ser consideradas como diferentes estoques para fins de gestão pesqueira. No entanto, o grau de mistura e a contribuição que cada unidade populacional identificada recebe de fontes distantes de recrutamento são desconhecidas e exigem estudos adicionais. Por fim, os resultados reforçam a importância da conservação dos sistemas estuarinos que contribuem expressivamente para a manutenção das populações de C. faber no Oceano Atlântico Sudoeste. Abstract: In this doctoral thesis some life-history traits of Atlantic spadefish, Chaetodipterus faber, in southern Brazil and the stock structure in the main fishery areas of the species in the Southwest Atlantic Ocean were investigated. The most important findings of this thesis were: (1) C. faber has a 17-year longevity close to its southern distributional limit; (2) sexual growth dimorphism was not evident and the male:female sex ratio was 1:1.17; (3) the species displayed asymptotic growth. Fitted von Bertalanffy growth function estimates for all individuals collected at 25°S (Paraná State) were L = 508.81 mm, k= 0.22 year-1, and t0= - 0.05 year; (4) the species is a batch spawner with a main reproduction period from October to January in subtropical latitudes at 25°S; (5) estuarine areas are important for C. faber reproduction that most likely exhibits a seasonal movement for spawning aggregation purposes; (6) females mature approximately 6 months later than males and are capable of spawning just prior to two years old; (7) the otolith shape and chemistry signatures indicated that connectivity between the population of C. faber in the Espírito Santo region (20°S) with the southern populations (>22°S) is limited; (9) the presence of spatially structured semidiscrete groups between 23°S and 27°S (Rio de Janeiro and Santa Catarina states) was evidenced; (8) the Sr/Ca and Mn/Ca ratios along chronological landmarks within the C. faber otoliths indicated that most individuals use the estuarine regions in the juvenile stage and thereafter migrate as adults to the open sea. To management proposes, the hereby results suggest that fishery closures during the spawning season and fishing size restrictions should be used to manage the C. faber stock in southern Brazil; The population-units should be regarded as different stocks for fisheries management purposes. However, at present, the degree of intermixing and the contribution that each local population identified receives from distant recruitment sources is unknown and demands further studies. Moreover, the current data reinforce the importance of estuarine systems conservation that plays a significant contribution as a nursery area for C. faber in southeastern-south Brazil.

Orientador: Prof. Dr. Henry Louis Spach Coorientador: Dr. Alberto Teodorico Correia Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas - Zoologia. Defesa : Curitiba, 25/03/2019 Inclui referências Resumo: Ambientes recifais constituem complexas comunidades, sustentam uma alta produção primária e possuem alta diversidade de espécies, como as assembleias de peixes recifais. O conhecimento acerca da ecologia dos peixes é fundamental na elaboração de estratégias de conservação e manejo, havendo necessidade de estudos ecológicos para grande parte das espécies do oceano Atlântico Sul. Conhecemos pouco sobre as estruturas populacionais e os níveis de conectividade entre elas, rotas migratórias, conectividade entre as zonas de desova, e respectivas zonas de recrutamento, crescimento e reprodução. Pomacentridae está entre as famílias de peixes recifais mais ricas em espécies, sendo o sargentinho, Abudefduf saxatilis, uma espécie comum, abundante e com ampla distribuição no oceano Atlântico. Estudos ecológicos com o uso de razões isotópicas, química elementar, forma e microestrutura dos otólitos vem sendo utilizados para estudos populacionais com peixes marinhos, permitindo uma compreensão ampla e sistêmica do ciclo de vida dos peixes. Estas metodologias têm se mostrado eficazes e complementares aos estudos de genética molecular, nomeadamente com recurso ao DNA mitocondrial, uma vez que as espécies marinhas costeiras, com uma fase larval longa e elevada dispersão dos indivíduos, não têm padrões genéticos de diferenciação espacial, consequência do elevado fluxo gênico. Diante deste cenário, os objetivos deste trabalho foram; (i) Analisar as assinaturas químicas elementares e forma de otólitos sagittae de A. saxatilis, em pequena escala, entre as ilhas do Arquipélago dos Tamboretes, no estado de Santa Catarina (Capítulo I); (ii) Analisar as assinaturas químicas elementares e forma de otólitos sagittae de A. saxatilis, em média escala, entre três ilhas costeiras do sudeste-sul do Brasil (Capítulo I); (iii) Analisar a estrutura populacional de A. saxatilis ao longo da costa Brasileira, através da forma e razões isotópicas de carbono (?13C) e oxigênio (?18O) de otólitos sagittae (Capítulo II); e, (iv) Analisar a microestrutura de otólitos sagittae de recrutas recém assentados de A. saxatilis (Capítulo III). Análises combinadas de microquímica e forma dos otólitos indicam haver separação populacional entre recifes distantes, resultado suportado por uma alta porcentagem da discriminante entre pontos separados ( 70km), indicando subpopulações entre a Ilha de Bom Abrigo (SP), Ilha da Galheta (PR) e a Ilha da Paz (SC). As assinaturas isotópicas e a forma dos otólitos podem ser utilizadas como ferramentas úteis para estudar a estrutura populacional de peixes não-migratórios e associados a recifes. Os resultados indicaram uma estrutura populacional segregada entre a região nordeste, a região sudeste-sul e ilhas oceânicas. Analisar os otólitos de indivíduos selvagens e recém assentados de A. saxatilis tem por objetivo descrever os estágios iniciais de vida da espécie. Os resultados mostraram que o período de desenvolvimento larval dura em média 11,7 dias (entre 9 e 15 dias) e três zonas de crescimento foram observadas nos otólitos dos indivíduos coletados, representando alguns eventos da história de vida durante a fase larval: as marcas de eclosão e assentamento (fase larval pelágica) e pós-assentamento (recrutas e juvenis). Os resultados desta pesquisa podem ser utilizados como base para futuros estudos ecológicos com A. saxatilis e para outras espécies de peixes recifais territorialistas, auxiliando políticas públicas estratégias de manejo e a justificar e direcionar recursos às ações de conservação da biodiversidade marinha. Palavras-chave: peixes recifais; conectividade de habitats; sagittae; química elementar; razões isotópicas; forma; microestrutura. Abstract: Reef environments are complex communities, sustain a high primary production and have a high diversity of species, such as reef fish assemblages. The knowledge about fish ecology is fundamental in the design of conservation and management strategies, and ecological studies are necessary for most species in the South Atlantic Ocean. We know little about population structures and the levels of connectivity between them, migratory routes, connectivity between spawning sites, and their recruitment, growth and reproduction. Pomacentridae is among the richest reef fish families, and the seargent major, Abudefduf saxatilis, is a common and abundant species, and widely distributed in the Atlantic Ocean. Ecological studies using isotopic ratios, elemental chemistry, shape and microstructure of otoliths have been used for population studies with marine fish, allowing a broad and systemic understanding of the fish life cycle. These methodologies have been shown to be effective and complementary to molecular genetics studies, especially with mitochondrial DNA, since the coastal marine species, with a long larval phase and high dispersion of the individuals do not have genetic patterns of spatial differentiation, as a consequence of the high gene flow. In this scenario, the objectives of this study are: (i) Analyze the elemental chemical signatures and shape of A. saxatilis sagittae otoliths, on a small scale, between the islands of the Tamboretes Archipelago, in the state of Santa Catarina (Chapter I); (ii) Analyze the elemental chemical signatures and shape of A. saxatilis sagittae otoliths, on a medium scale, between three coastal islands of south Brazil (Chapter I); (iii) Analyze the population structure of A. saxatilis along the Brazilian coast, through the shape and isotopic carbon (?13C) and oxygen (?18O) ratios of otoliths sagittae (Chapter II); and (iv) Analyze the microstructure of sagittae otoliths of newly settled A. saxatilis (Chapter III). Combined microchemistry and shape otolith analysis indicate that there is a population separation between distant reefs, a result supported by a high percentage of the discriminant between sample areas ( 70km), indicating subpopulations between the Islands of Bom Abrigo (SP), Galheta (PR) and Paz (SC). Isotopic signatures and shape of otoliths can be used as useful tools for studying the population structure of non-migratory and reef-associated fish. The results indicated a segregated population structure between the northeast region, south region and the oceanic islands. Analyzing the otoliths of wild and newly settled individuals of A. saxatilis is aimed describing the initial stages of the apecies. The results showed that the larval development period lasts on average 11.7 days (range 9-15 days) and three growth zones were observed in the the otoliths of the individuals collected, representing some events in the life history during the larval phase: hatching and settlement (pelagic larval stage) and post-settlement (recruits and juveniles). The results of this research can be used as a basis for future ecological studies with A. saxatilis and for others territorial reef fish, helping public policies management strategies and to justify and direct resources to actions of biodiversity marine conservation. Keywords: reef fish; habitat connectivity; otolith; sagittae; elemental chemistry; isotopic ratios; shape; microstructure.

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Submitted by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2017-05-10T16:41:11Z No. of bitstreams: 1 PPG_22164.pdf: 1797072 bytes, checksum: 2f97459f36beaf02ab7d854975ccfbf5 (MD5) Approved for entry into archive by halves@ufp.pt (halves@ufp.pt) on 2017-05-10T16:45:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PPG_22164.pdf: 1797072 bytes, checksum: 2f97459f36beaf02ab7d854975ccfbf5 (MD5) Made available in DSpace on 2017-05-10T16:45:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PPG_22164.pdf: 1797072 bytes, checksum: 2f97459f36beaf02ab7d854975ccfbf5 (MD5) Previous issue date: 2016-11-30

Trabalho Complementar apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de licenciada em Ciências da Nutrição Relatório de Estágio apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de licenciada em Ciências da Nutrição O presente trabalho teve como objetivo realizar uma análise do estado da arte sobre os benefícios do consumo regular de pescado na saúde humana. São apresentados e discutidos alguns pontos-chave relacionados com o consumo de pescado, como por exemplo qual o papel dos ácidos gordos da série ómega-3 na saúde humana. Esta dissertação teve como base uma revisão bibliográfica dos trabalhos científicos existentes na literatura atual, e que focam a influência do pescado na saúde humana. Como motores de pesquisa foram usadas as plataformas PubMed e ScienceDirect. Os artigos foram selecionados através do uso de distintas palavras-chave: Saúde, Pescado e Benefícios. Com este trabalho foi possível caracterizar com detalhe a componente nutricional passível de ser fornecida através do consumo de pescado. Particular ênfase é dada ao facto do pescado fornecer uma dieta rica e equilibrada em proteínas, lípidos, vitaminas e minerais. O impacto do consumo de pescado na saúde assume as mais diversas formas. Em particular o ómega-3, existente no pescado, são essenciais para o adequado crescimento e desenvolvimento dos seres humanos, em particular para mitigar os efeitos de doenças crónicas. É apresentada, com base em diferentes fontes, a dosagem ideal de ómega-3, tendo em linha de conta os diferentes tipos de pescado. A especificidade do consumo de pescado para mitigar o efeito de patologias crónicas é discutido e particularizado para aquelas com maior prevalência, como por exemplo a doença cardiovascular. Não menos importante é o impacto que os ómega-3 têm sobre o período de gestação e nos primeiros anos de vida, sendo por isso dedicada uma secção deste trabalho à discussão do tema, na qual é identificada uma clara influência deste constituinte nos períodos em causa. Por último é enfatizada a influência do consumo de pescado no saudável envelhecimento da população. Em suma parece existir um claro benefício do consumo programado de pescado na saúde do ser humano. Fundamentada em diferentes fontes e estudos, é identificável uma clara vantagem no consumo das doses recomendadas de pescado desde o período da gestação, passando pelos primeiros anos de vida, até ao estágio de envelhecimento do ser humano. Estes benefícios, em particular associados à existência de ómega-3 e outros constituintes como por exemplo o selénio, são facilmente traduzíveis no mitigar dos efeitos de diferentes patologias crónicas que podem afetar o ser humano, e até na melhoria das capacidades cognitivas nos primeiros tempos de vida. The main purpose of this work was to perform an analysis of the benefits of the regular fish consumption on human health. Some key aspects related to the seafood consumption, such as omega-3's role in human health are presented and further discussed. It was based on a literature review of scientific papers focusing on the influence of fish consumption on human health. PubMed and ScienceDirect platforms were the main research engine sources used. The scientific papers were selected through the use of different keywords, such as: health, seafood and benefits. It was possible to characterize the nutritional component that can be provided through fish consumption, and particular emphasis is given to the fish's ability to provide a balanced diet on proteins, lipids, vitamins and minerals. The impact of fish consumption on health assumes the most diverse forms. In particular omega-3, existing in fish, is essential for proper growth and development of humans. Based on different sources, the optimal dosage of omega-3, considering the different types of seafood, was defined. The specificity of the fish consumption to mitigate the effect of chronic pathologies, such as the cardiovascular disease, is also discussed. The impact that the omega-3 has over the period of pregnancy and the first years of life is of high relevance, and a section is therefore dedicated to the discussion of this topic. Finally, it is emphasized the influence of fish consumption in a healthy ageing. In summary a clear benefit in a balanced fish consumption for the health improvement of human beings was found. Based on different sources and studies, a clear advantage in the consumption of recommended doses of seafood since pregnancy, through the first years of life to the aging stage of the human being was identifiable. These benefits, particularly related to the existence of omega-3 and other constituents, such as selenium, are important to mitigate the effects of various chronic diseases that may unsettle humans, and even in improving the cognitive skills during the first years of life. N/A

Orientador : Henry Louis Spach Coorientador : Alberto Teodorico Correia Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia e Conservação. Defesa: Curitiba, 25/10/2016 Inclui referências : f. 35-42 Resumo: O robalo-peva (Centropomus parallelus) é uma espécie importante para a pesca comercial e recreativa no Brasil. Um estudo recente demonstrou que os juvenis desta espécie conseguem habitar ambientes de salinidade distinta ao longo do seu ciclo de vida. Contudo, uma vez que o conhecimento dos padrões migratórios e utilização do habitat por indivíduos são fundamentais na tomada de medidas adequadas para a conservação e manejo de uma espécie, é importante determinar se os indivíduos adultos desta espécie, sujeitos à exploração pesqueira, apresentam a mesma plasticidade ambiental. Nesse sentido, noventa adultos de robalo-peva foram coletados entre outubro de 2015 e março 2016 por meio da pesca por arpão e anzol no Complexo Estuarino de Paranaguá, Estado do Paraná, sul do Brasil. Três pontos de amostragem foram selecionados de acordo com um gradiente de salinidade conhecido: rio Cachoeira (ambiente oligohalino), rio Faisqueira (ambiente mesohalino) e Ponta do Poço (ambiente polialino). Os padrões de movimento foram inferidos a partir das concentrações de Sr:Ca e Ba:Ca obtidas ao longo do raio dos otólitos com o auxílio de uma microssonda de elétrons. A idade dos indivíduos foi estimada a partir da leitura dos anéis de crescimento anuais dos otólitos. Os dados sugerem oito diferentes padrões migratórios que mostram uma elevada plasticidade e adaptação ambiental a gradientes de salinidade distintos. Além disso, os dados também mostram que a maioria dos padrões migratórios incluem estuários como área de ocupação, isso evidencia a importância deste ambiente para a espécie, provavelmente devido à maior disponibilidade de alimentos e menor predação. Portanto a conservação desta espécie exige a preservação de ambientes de água doce e marinhos mas, principalmente, dos estuários, permitindo, desta forma, a conectividade entre habitats. Palavras-chave: Centropomidae; microquímica de otólitos; conectividade entre habitats; gradiente de salinidade; conservação e manejo de recursos pesqueiros Abstract: The fat snook (Centropomus parallelus) is a species of importance to the commercial and recreational fisheries in Brazil. A recent study demonstrated that the early juveniles of this species can live in differently salinity environments throughout their lifecycle. Understanding of migratory patterns and habitat use by individuals are essential in the context of taking appropriate measures for the conservation and rational management of a species. Thus, it must be determined if the adults of this species, commercially exploited, have the same observed environmental plasticity. With this purpose ninety C. parallelus adults were collected between October 2015 and March 2016 using hook and spear fishing in Paranaguá Estuarine Complex, State of Paraná, South of Brazil. Three sampling sites were selected according to a known salinity gradient: Cachoeira River (oligohaline environment), Faisqueira River (mesohaline environment) and Ponta do Poço (polyhaline environment). The movement patterns were inferred from Sr:Ca and Ba:Ca concentrations recorded along the otoliths radius using a electron micro probe analyzer. The age of the individuals was estimated from the reading of the annual growth rings of otoliths. The data suggest eight different migration patterns that show a high plasticity and environmental adaptation to different salinity gradients. Furthermore, the data also show that almost migratory patterns include estuaries as an occupation area, suggesting the importance of these areas for the species, presumably due to the availability of food and lower predation pressure. Therefore the conservation of this species requires the preservation of freshwater and marine environments, but mainly estuaries, which allows the connectivity between habitats. Keywords: Centropomidae; otoliths microchemistry; habitat connectivity; salinity gradient; conservation and rational management

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Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Submitted by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2016-04-08T15:05:08Z No. of bitstreams: 1 PPG_23436.pdf: 1593452 bytes, checksum: 5545df6048a8367681446f31a2e46185 (MD5) Approved for entry into archive by csousa@ufp.pt (csousa@ufp.pt) on 2016-04-08T17:33:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PPG_23436.pdf: 1593452 bytes, checksum: 5545df6048a8367681446f31a2e46185 (MD5) Made available in DSpace on 2016-04-08T17:33:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PPG_23436.pdf: 1593452 bytes, checksum: 5545df6048a8367681446f31a2e46185 (MD5) Previous issue date: 2015

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Prevê-se que as questões relacionados com o consumo, acesso e escassez de água potável constituirão uma das preocupações primordiais para a sociedade global no século XXI. Esse problema coloca-se, em parte, devido à crescente contaminação do compartimento aquático por via das atividades antrópicas. Existe uma contribuição importante dos fármacos (e seus metabolitos) utlizados na medicina humana, veterinária e nalgumas práticas agropecuárias, por via da sua chegada através de efluentes doméstico e industriais, não eficazmente tratados nas estações de tratamento de águas residuais (ETAR). São quatro as classes terapêuticas que merecem destaque: antiinflamatórios não esteroides, antidislipidémicos, antibióticos e antidepressivos/ansiolíticos. Este Projeto de Pós-Graduação teve como objetivo elaborar uma revisão bibliográfica atual sobre os diferentes métodos de eliminação de fármacos e metabolitos dos efluentes domésticos e industriais aquando da sua chegada à ETAR. Estes processos são geralmente métodos convencionais, como é o caso das lamas ativadas, ou métodos de remoção avançados, servindo como exemplo os leitos construídos de macrófitas (LCM). A escolha do processo deverá ser função do tipo de efluentes a tratar e, não menos importante, do custo que esse tratamento impõe. Segundo alguns estudos, os processos que obtiveram melhores resultados na eliminação de anti-inflamatórios não esteroides nas ETAR foram a utilização do processo de Foto- Fenton (remoção completa) e os processos avançados de oxidação (taxa de remoção de 80%). No grupo de fármacos antidislipidémicos, o processo que obteve melhor resultado no tratamento da água foi o Jet mixed separator. Na remoção específica de antibióticos, tanto os métodos convencionais como os métodos avançados de remoção obtiveram resultados semelhantes (taxa de remoção de 58%), sendo os primeiros mais implementados. No que diz respeito aos fármacos antidepressivos e ansiolíticos, o processo avançado utilizando carvão ativado atingiu taxas de remoção de cerca de 99%. It is predicted that questions regarding water consumption, access and shortage will be one of the major concerns to the global society in the 21st century. These problems are related, at least partially, to the growing contamination of the aquatic compartment by men related activities. There is an important contribution of drugs (and its metabolites) used in human and veterinary medicine and in some agropecuary activities, due to their arrival in domestic and industrial effluents not properly treated in wastewater treatment plants (WWTP). There are four therapeutic classes worth mentioning: non-steroid antiinflammatory drugs, anti-dysplipidemic drugs, antibiotics, antidepressants and anxiolytics. This Post-Graduation Project goal is to perform a bibliographic review about effluent drugs and metabolites elimination methods in residual water treatment plants. These processes may be conventional methods, such as activated sludge, or advanced removal methods, such as floating macrophyte plants (FMP). The adopted process is selected depending on the type of effluents to treat and its finantial costs. According to some studies, the processes with the best removal rate of non-steroidal anti-inflammatory drug in the treatment plant were Photo-Fenton process (complete removal) and advanced oxidation processes (removal rate of 80%). In the group of antidysplipidemic drugs, the process that obtained better results was jet mixed separator. In the specific removal of antibiotics, conventional methods and advanced removal methods yielded similar results (removal rate of 58%), the former being more implemented. Regarding the group of antidepressants and anxiolytics, advanced process using activated carbon had a removal rate of 99%.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Atualmente a poluição e contaminação do meio aquático devido à crescente descarga de efluentes domésticos, industriais ou agrícolas, intencionais ou acidentais, é um assunto relevante de Saúde Pública, sendo alvo de vários estudos e debates na comunidade científica e civil. Os fármacos, em função do seu elevado consumo e ineficaz remoção pelas estações de tratamento de águas residuais, são continuamente libertados para o compartimento aquático sob a sua forma original ou de metabolito secundário. Os fármacos utilizados na saúde humana, prática veterinária e aquacultura, possuem características físico-químicas que lhes conferem elevada persistência ambiental exercendo, frequentemente, toxicidade em organismos não-alvo ao nível de vários níveis tróficos. A sua acumulação no ambiente aquático tem demonstrado ser capaz de induzir mudanças patológicas nos peixes, a mais numerosa classe de vertebrados deste compartimento. Assim, o estudo dos efeitos toxicológicos na saúde do ecossistema reveste-se de uma importância primordial, pelo que a caracterização e quantificação deste risco é fundamental. Os peixes são o alvo deste trabalho pois são considerados espécies sentinelas, sendo utilizados como indicadores primários da qualidade da água, permitindo uma avaliação dos efeitos causados pela exposição continuada e concentrações sub-letais de xenobióticos, em particular aos fármacos. A histologia é considerada uma ferramenta sensível e útil para a determinação do estado de saúde dos peixes, registando os efeitos da exposição aguda ou crónica destes organismos aos xenobióticos aquáticos. Neste trabalho fez-se uma revisão bibliográfica sobre os efeitos histopatológicos de alguns fármacos ao nível dos principais órgãos afetados nos peixes (e.g. fígado, rim e gónadas). Nowadays, pollution and contamination of the aquatic environment as a consequence of human activities is a major concern in what regards public health, as shown by the increasing number of scientific studies and debate within the scientific community. Several drugs used in human health, in light of their intensive use and deficient treatment, are continuously discharged to the environment, ultimately ending in aquatic compartments, either in their native form or as metabolites. A relevant number of drugs used in human health, veterinarian medicine or aquaculture display physical and chemical characteristics that confer them high environmental persistence, which frequently results in toxicity phenomena in non-target organisms across several trophic levels. Their accumulation in aquatic environments has been increasingly associated with pathological alterations in fish, the most representative class of vertebrates in the aquatic environment. Thus, the toxicological impact of these molecules in aquatic and human health are of pivotal importance, with the characterization and quantification of these risks being essential. In this work the organisms under study will be fish, as they are used as early markers of water quality, hence allowing the evaluation of the effects triggered by xenobiotics, in particular pharmaceuticals. Histopatholoy is a sensitive and useful tool for determining the health status of fish, being used for following the effects of acute or chronic exposition of fish to aquatic xenobiotics. In this work, a literature review focusing on the histopathological effects of some drugs on fish will be presented, with particular emphasis on the most relevant organs affected (e.g. liver, kidney and gonads), with special emphasis on gills.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Atualmente, o estudo de nanopartículas (NPs) metálicas é cada vez mais comum dentro da comunidade científica. Contudo, os dados sobre ecotoxicologia relativos as NPs de dióxido de cério (CeO2) é escassa. Este trabalho é um estudo experimental sobre os possíveis efeitos toxicológicos das NPs de CeO2 nas brânquias de Oncorhynchus mykiss (truta arco-íris). Uma exposição aguda semi-contínua foi realizada e os espécimes da truta arco-íris foram expostas a três concentrações de NPs de CeO2 (0.25, 2.50, ou 25.00 mg/L), incluindo um grupo controlo (não exposto) durante 96 horas. A exposição a NPs de CeO2 causou determinadas patologias nas brânquias, incluindo aneurismas, elevação epitelial e hiperplasia. A percentagem de lamelas secundárias disponíveis para a troca gasosa (PAGE), não evidenciou diferenças significativas. A exposição a NPs de CeO2 causou diferenças estatísticas na catalase (CAT) que mostram um aumento da atividade enzimática nas concentrações 2.50 e 25.00 mg/L. No que diz respeito ao teste as substâncias reactivas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), estas apresentaram uma diminuição do valor nas duas concentrações mais elevadas e um aumento na concentração mais baixa. Atividade da Glutationa S-transferase (GST) exibiu um aumento nas duas concentrações mais elevadas e uma diminuição no menor. Nenhuma diferença significativa foi observada na atividade da Na+/K+-ATPase. Por sua vez, os resultados do ensaio dos cometas revelou uma tendência crescente com diferenças significativas. Declaro que os resultados sugerem que as NPs de CeO2 causaram danos genéticos, alterações nos tecidos e aumento da atividade da CAT nas brânquias de uma forma dose-efeito. At present the study of metallic nanoparticles (NPs) is increasingly common within the scientific community. However ecotoxicology data about cerium dioxide (CeO2) NPs is scarce. This work is an experimental study about the possible toxicological effects of the CeO2 NPs in the gills of Oncorhynchus mykiss (rainbow trout). A semi-continuous acute test was conducted and rainbow trout individuals were exposed to three CeO2 NPs concentrations (0.25, 2.50, or 25.00 mg/L), including a control (unexposed) group for 96 hours. Exposure to CeO2 NPs caused some gill pathologies including aneurisms, epithelial lifting and hyperplasia. The percentage of secondary lamellae available for gas exchange (PAGE) revealed however no significant differences. Exposure to CeO2 NPs caused statistical differences in the catalase (CAT) showing an increase of the enzymatic activity in the 2.50 and 25.00 mg/L concentrations. With regard to thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) test, showed a decrease value at the two higher concentrations, and an increase at the lowest concentration. Glutathione S-transferase activity (GST) exhibited an increase at the two higher concentrations and a decrease at the lowest. No significant differences were observed in Na+/K+-ATPase activity. In turn, comets assay results revealed an increasing trend with significant differences. The hereby results suggest that CeO2 NP caused genetic damage, tissue alterations and enhances CAT activity on gills in a dose-effect manner.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Atualmente o uso de detergentes tem originado maior preocupação, quer a nível científico, quer a nível do ecossistema, uma vez que afetam o meio aquático na medida em que este é o destinatário final destes compostos. Foram realizados vários estudos que demonstram os efeitos nefastos que estes compostos têm a nível do compartimento aquático. Estes efeitos, podem provocar alterações nos organismos que nele habitam, como sejam alterações a nível do stress oxidativo, dano no DNA, bem como alterações bioquímicas e morfológicas nos vários tecidos e órgãos. Este trabalho teve como objetivo principal avaliar os efeitos provocados nas brânquias de Oncorhynchus mykiss (n.v. truta arco-íris) decorrentes da exposição crónica (28 dias) a diferentes concentrações de cloreto de benzalcónio. Os biomarcadores utilizados para essa avaliação foram a quantificação da atividade da enzima catalase, e avaliação de efeitos genotóxicos através do ensaio dos cometas. Os resultados obtidos para a catalase nas concentrações [0,583] e [1,050] mg/L e as concentrações [0,100], [0,180], [0,324], [0,583] e [1,050] mg/L no ensaio dos cometas demonstraram que o cloreto de benzalcónio apresenta ser uma ameaça direta para o organismo teste utilizado. Foi possível observar que nas concentrações mais altas se registou indução de stress oxidativo e em todas as concentrações danos celulares ao nível do DNA. Com a realização deste estudo, foi possível demonstrar que o cloreto de benzalcónio representa uma ameaça direta para os organismos aquáticos principalmente no que diz respeito a efeitos genotóxicos. At present the use of emerging compounds, such as detergents, has increased causing a growing concern in the public opinion and scientific community, since it affects the aquatic environment and the live-organisms that live here. Different studies have shown several adverse effects on aquatic species such as changes in oxidative stress levels, and DNA damage, as well as morphological and biochemical alterations in various tissues and organs. This study was designed to evaluate the effects in the gills of Oncorhynchus mykiss (rainbow truits) resulting from a chronic exposure (28 days) to different concentrations of benzalkonium chloride. The biomarkers used were catalase activity and the comet assay. The results for catalase concentrations [0.583] and [1.050] mg / L and concentrations [0.100] [0.180] [0.324] [0.583] and [1.050] mg / L in the comets test showed the benzalkonium chloride has to be a direct threat to the test organism used. The assessment of other hypothetical alterations should be assessed in the future using other set of biomarkers. With this study, we demonstrated that benzalkonium chloride is a direct threat to aquatic organisms, especially with respect to genotoxic effects.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Submitted by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2014-01-15T16:50:31Z No. of bitstreams: 1 RitaGomes.TeseMestrado.FINAL.pdf: 1991518 bytes, checksum: 1f266da1cde64dc48aeeba52364cd9e9 (MD5) Approved for entry into archive by csousa@ufp.pt (csousa@ufp.pt) on 2014-01-16T10:11:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RitaGomes.TeseMestrado.FINAL.pdf: 1991518 bytes, checksum: 1f266da1cde64dc48aeeba52364cd9e9 (MD5) Made available in DSpace on 2014-01-16T10:11:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RitaGomes.TeseMestrado.FINAL.pdf: 1991518 bytes, checksum: 1f266da1cde64dc48aeeba52364cd9e9 (MD5) Previous issue date: 2013

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Atualmente, existem diversos grupos de agentes biocidas que podem ser utilizados em diferentes áreas, como por exemplo higiene, desinfeção, ação antiparasitária e anti-incrustantes, verificando-se assim um maior recurso à sua utilização pelo homem. Os compostos biocidas apresentam diversos usos, incorporando sobretudo tintas anti-incrustantes. O piritionato de zinco (bis (1 hidroxi -2 (1H)-piridetionato-o,s) - (T-4) zinco) classifica-se como um biocida metálico, e possui ação bactericida, algicida e fungicida. Tem sido formulado em tintas anti-incrustantes, que protegem as superfícies que se encontram expostas a um ambiente aquático, evitando assim a formação de biofilmes. Devido à sua ação biológica tem sido também utilizado para fins cosméticos, como em champôs para o tratamento da caspa e seborreia. As alterações fisiológicas em organismos aquáticos decorrentes da presença de compostos poluentes nos diversos compartimentos ambientais são hoje em dia tema de pesquisa, em face das alterações eventualmente causadas que podem ter variadas consequências deletérias ao nível dos indivíduos e dos ecossistemas. Os dados existentes recolhidos em estudos de monitorização destes compostos demonstram a presença sistemática dos mesmos em compartimentos aquáticos. No presente trabalho avaliou-se a potencial ecotoxicidade do piritionato de zinco em termos de stress oxidativo (catalase, GSTs e TBARS), neurotoxicidade (acetilcolinesterase) e danos histopatológicos no fígado e nas brânquias do peixe dulçaquícola Gambusia holbrooki, após uma exposição aguda (96 h) ao composto. O piritionato de zinco esteve na base do aparecimento de alterações histopatológicas, quer nas brânquias quer no fígado, dos organismos expostos. No entanto não se obteve nenhum resultado significativamente diferente na determinação dos índices patológicos. Relativamente aos biomarcadores testados, apenas a atividade das GSTs poderá indicar a ocorrência de efeitos pro-oxidantes, visto que para as outras enzimas utilizadas para avaliação de stress oxidativo não se obtiveram resultados significativamente diferentes do grupo controlo. At the present time, diverse biocidal agents can be used in distinct areas, such as hygiene, disinfection, antiparasitic activity, and antifouling effect, being increasingly used by humans. Biocidal compounds can be employed in a large set of applications, such as antifouling paints. Zinc pyrithione ritionato de (bis (1 hidroxi -2 (1H)-piridetionato-o,s) - (T-4) zinco) is a metallic biocide, with bactericide, algicide and fungicide activity. It has been formulated in antifouling paints, that protect surfaces exposed to the aquatic environment from the instalation of a biofilm. It has also been used in cosmetics, such as anti-dandruff shampoos. Physiological alterations in aquatic organisms exposed to pollutants in different environmental compartments have been theme of research, to diagnose deleterious effects at the individual and ecosystems levels. Already reported data show the systematic presence of these substances in the aquatic compartment. The present work intended to assess the potential ecotoxicity elicited by zinc pyrithione in terms of oxidative stress (activity of catalase, GSTs and TBARS levels), neurotoxicity (acetylcholinesteras activity), and histopathological damage in liver and gills of the freshwater fish Gambusia holbrooki, after an acute (96h) exposure to the compounds. Zinc pyrithione was capable of causing histopathological alterations, both in liver and gills of exposed organisms. However, pathological indexes were not altered. In terms of oxidative stress biomarkers, only the activity of GSTs may indicate the ocurrence of pro-oxidative effects, since the other enzymes were not responsive.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas A presença de fármacos nos ecossistemas aquáticos tem sido frequentemente reportada. Os organismos aquáticos, principalmente os peixes, na presença de xenobióticos ativam mecanismos de defesa, como alterações das enzimas antioxidantes e modificações tecidulares, que visam minimizar e/ou compensar os danos tóxicos que resultam frequentemente destas interações. O ácido salicílico (AS) é um fármaco usado na medicina humana devido à sua ação analgésica, anti-inflamatória e antipirética, bem como devido à sua atividade em termos da agregação plaquetária, entre outros usos clínicos e cosméticos. De modo a determinar os potenciais efeitos ecotoxicológicos causados pelo AS, utilizou-se um modelo animal de água doce (truta comum, (Salmo trutta fario)) cronicamente expostas (28 dias) a este composto, avaliando as possíveis alterações enzimáticas e histológicas causadas, tanto ao nível do fígado como das brânquias. A exposição foi realizada sobre condições controladas laboratorialmente, testando três concentrações diferentes, e ecologicamente relevantes, de ácido salicílico. No final do ensaio, uma avaliação qualitativa e semi-quantitativa da arquitetura do tecido hepático e branquial foi realizada, assim como uma avaliação quantitativa das lamelas brânquiais. O stress oxidativo foi quantificado através da determinação da atividade das isoenzimas glutationa-S-transferases (GSTs), glutationa redutase (GRed), da glutationa peroxidase total e selénio dependente (GPx) e da catalase (CAT). Uma determinação dos danos lipoperoxidativos foi realizada através da quantificação dos níveis de peroxidação lipídica (ensaio dos TBARS) no fígado. Os dados obtidos demonstraram a ocorrência de stress oxidativo, evidenciada através do aumento da atividade da GPx e GRed no fígado, e alterações histopatológicas significativas nas brânquias do organismo-teste, sugerindo uma relação causa-efeito com os níveis de ácido salicílico na água. No fígado, apesar de terem sido observadas algumas lesões tecidulares, a análise semi-quantitativa sugere que as mesmas não modificaram significativamente a capacidade de sobrevivência do organismo. The presence of pharmaceutical drugs in aquatic ecosystems has been widely reported. Aquatic organisms, namely fishes, in the presence of xenobiotics, display specific defense mechanisms, such as antioxidant enzymes and tissue alterations. Salicylic acid (SA) is used in human medicine as an analgesic and antipyretic drug and shows also an activity in terms of platelet aggregation, among other clinical and cosmetic uses. In order to assess the ecotoxicological effects potentially elicited by SA, in a freshwater animal model, brown trout individuals (Salmo trutta fario) were chronically exposed (28 days) to this compound, in order to evaluate any enzymatic and histological damage caused by salicylic acid, in gills and liver. The experiment was carried out under laboratory-controlled conditions, with ecologically relevant salicylic acid concentrations. After the exposure period, a qualitative and semi-qualitative evaluation of the gills and liver architecture was performed, and also a quantitative evaluation of various lamellar structures. Oxidative stress was quantified trough the determination of glutathione S-transferases (GSTs), glutathione reductase (GRed), total and selenium-dependent glutathione peroxidase (GPx) and catalase (CAT) activities. The index of lipid peroxidative damage was also assessed by the quantification of TBARS in the liver. The data obtained showed increasing levels of oxidative stress, evidence by an increased activity of GPx and GRed in the liver, and also histological changes in gills of the test-organism, suggesting a close cause-effect relationship with the levels of salicylic acid in water. In liver, despite certain observable tissue lesions, the semi-quantitative analysis suggests that they do not significantly alter the survival capacity of the organism.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Submitted by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2014-01-16T10:12:29Z No. of bitstreams: 1 JoaoCostaCampos.TeseMestrado.FINAL.pdf: 3016447 bytes, checksum: 371183cb4753661c2a1d702ce39a6c3f (MD5) Approved for entry into archive by csousa@ufp.pt (csousa@ufp.pt) on 2014-01-16T10:14:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JoaoCostaCampos.TeseMestrado.FINAL.pdf: 3016447 bytes, checksum: 371183cb4753661c2a1d702ce39a6c3f (MD5) Made available in DSpace on 2014-01-16T10:14:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoaoCostaCampos.TeseMestrado.FINAL.pdf: 3016447 bytes, checksum: 371183cb4753661c2a1d702ce39a6c3f (MD5) Previous issue date: 2013

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas O interesse crescente dos estudos ecotoxicológicos nas várias classes farmacoterapêuticas tem sido o reflexo da frequente deteção destes compostos nos ecossistemas aquáticos. Esta exposição pode resultar em alterações adaptativas dos indivíduos expostos, como modificações a nível tecidular ou ativação de mecanismos antioxidantes, podendo estas ser monitorizadas de modo a determinar o impacto destes compostos nos organismos e respetivos ecossistemas. Dentro destes compostos destacam-se os antibióticos como sendo um grupo largamente utilizado na medicina humana e veterinária, resultando na sua frequente deteção nos compartimentos aquático. A tetraciclina é o antibiótico com a segunda maior taxa de deteção a nível ambiental, sendo utilizado largamente para o tratamento de patologias em humanos e animais. Na medicina veterinária, o uso dos antibióticos é ainda alargado ao tratamento profilático de infeções e promotor de crescimento. Com o interesse de determinar os potenciais efeitos ecotoxicológicos da tetraciclina em peixes, efetuou-se uma exposição aguda (96 h) de Gambusia holbrooki a concentrações crescentes deste composto (5, 50 e 500 ng/l) e pesquisou-se eventuais modificações tecidulares das brânquias e do fígado, bem como alterações da atividade das enzimas antioxidantes e a existência de danos lipoperoxidativos. O estudo da atividade enzimática permitiu averiguar quanto à presença de uma resposta de stress oxidativo (atividades das enzimas glutationa-S-transferases no fígado e nas brânquias, e a catalase no fígado), e neurotoxicidade (atividade da acetilcolinesterase no tecido nervoso). A quantificação de TBARS no músculo permitiu determinar a ocorrência de danos lipoperoxidativos. Os resultados obtidos sugerem uma relação causa-efeito entre a concentração de tetraciclina usada e as alterações histológicas nas brânquias e a atividade enzimática alterada, nomeadamente nas enzimas catalase no fígado e glutationa-S-transferases nas brânquias, sugerindo assim que este composto tem uma atividade pro-oxidante. Assim, nas brânquias as células poderão já ter entrado em stress oxidativo, o que levou a alterações histopatológicas detetáveis. No entanto, ao nível do fígado, e nas concentrações utilizadas no presente estudo, não foram observados danos histológicos significativos. The increasing number of ecotoxicological studies performed with several drugs is a natural consequence of the increasingly frequent detection of these compounds in the aquatic ecosystems. This exposure can result in adaptive changes of individuals, such as tissue alterations or activation of antioxidant mechanisms, which can be monitored to determine the impact of these compounds on the aquatic organisms and ecosystems. Antibiotics stand out as a group widely used in human and veterinary clinic, resulting in its detection in the aquatic environment. Tetracycline is the antibiotic with the second highest level of detection in the environment. It is widely used for human and veterinary treatment of infections, and as a prophylactic treatment of infections and growth promoter on animals. To determine the potential ecotoxicological effects of tetracycline on fish, Gambusia holbrooki individuals were exposed during 96 h to increasing concentrations of this compound (5, 50 and 500 ng/l) and histological alterations in gills and liver, changes in antioxidant enzyme activity and lipoperoxidative damage were recorded. The enzymatic study allowed assessing the presence of an oxidative stress response (glutathione S-transferases in the liver and gills, and catalase in the liver) and neurotoxicity (head acetylcholinesterase). The quantification of TBARS in muscle also allowed the assessment of lipoperoxidative damage. The results indicate a cause-effect relationship between the concentration of tetracycline used and the detected histological and enzymatic alterations in the liver and gills, suggesting that this compound has a pro-oxidative activity.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Submitted by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2014-11-20T13:08:58Z No. of bitstreams: 1 PPG_20185.pdf: 665523 bytes, checksum: 845d4ecdd70370f481e4724c2b7d2919 (MD5) Approved for entry into archive by csousa@ufp.pt (csousa@ufp.pt) on 2014-11-20T13:12:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PPG_20185.pdf: 665523 bytes, checksum: 845d4ecdd70370f481e4724c2b7d2919 (MD5) Made available in DSpace on 2014-11-20T13:12:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PPG_20185.pdf: 665523 bytes, checksum: 845d4ecdd70370f481e4724c2b7d2919 (MD5) Previous issue date: 2013

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas A ocorrência de fármacos no meio ambiente aquático é um assunto de atual e particular interesse para a comunidade científica. Diversos compostos de cariz farmacológico têm sido detetados em efluentes de estações de tratamento de águas residuais e consequentemente no compartimento aquático por todo o mundo. Alguns dos efeitos adversos causados por fármacos no compartimento aquático incluem toxicidade, desenvolvimento de resistência em bactérias patogénicas, genotoxicidade e desregulação endócrina. Num contexto de análise do risco ambiental, a utilização de diversos biomarcadores promete ser um indicador sensível que demonstra que o composto tóxico entrou no organismo, começou a ser distribuido nos tecidos/órgãos e está a começar a produzir efeitos tóxicos críticos. O objetivo deste trabalho foi identificar as consequências ambientais, e eventualmente de saúde pública, que resultam da contaminação do compartimento aquático por via de compostos farmacológicos inapropriamente libertados para o meio aquático, ou lixiviados nos esgotos domésticos como metabólitos secundários humanos, bem como referenciar formas de detetar os efeitos causados nos seres vivos fruto da exposição a estes compostos antrópicos. Particular ênfase foi dada a utilização dos biomarcadores enquanto ferramenta de análise ecotoxicológica. The occurrence of pharmaceuticals in the aquatic environment is a subject of current and particular interest to the scientific community. Several pharmacological compounds have been detected in wastewater treatment stations for wastewater and consequently in the aquatic compartment worldwide. Some of the adverse effects caused by these chemicals in the aquatic compartment include toxicity, development of resistance in pathogenic bacteria, genotoxicity and endocrine disruption. In the context of environmental risk analysis, the use of various biomarkers promises could be a sensitive indicator which shows that the toxic compound after entering the organism, and being distributed in tissues/organs, is starting to produce critical toxic effects. The aim of this study was to identify the environmental problems and public health issues, that result from contamination of the aquatic compartment via the direct release of pharmacological compounds into the water, or through human secondary metabolites in usually found in wastewater. Particular emphasis was given to the use of biomarkers as ecotoxicological analysis tools.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas O presente trabalho de pós-graduação trata-se de uma pesquisa profunda e atual sobre relação entre as características estruturais das linhagens celulares que constituem a superfície interna do tubo digestivo, mais precisamente ao nível da mucosa gástrica, e o seu reflexo a nível fisiológico. De uma forma geral a superfície interna do estômago é constituída por um epitélio simples colunar que sofre invaginações em direção à lâmina própria, originando numerosas pregas que aumentam significativamente a sua área de contacto – as fossetas gástricas. Na base destas podemos encontrar as glândulas estomacais, cuja região mais apical é essencialmente constituída por células mucosas superficiais, e à medida que se dirige do lúmen para a periferia podem ser visualizados os restantes tipos celulares que as compõem, entre as quais as células-fonte, mucosas do colo, principais, parietais e enteroendócrinas – as quais são mantidas e controladas por um conjunto alargado de mediadores nervosos, endócrinos e parácrinos. Um dado importante a ser retido, e que tem sido alvo de diversas investigações nos últimos anos, é o facto destas linhagens celulares estarem vulgarmente associadas com padrões anormais de diferenciação celular, e como tal, a sua forte predisposição para o desenvolvimento e progressão do cancro gástrico, que é um problema global de saúde pública e que infelizmente afeta milhares de pessoas todos os anos. O conhecimento científico atual acerca das relações morfo-funcionais que se estabelecem ao nível das diferentes linhagens celulares gástricas e a sua posterior tradução ao nível de processos histopatológicos é abordado. Contrariamente ao que seria expectável, pois o modelo biológico tratado é o Homem, muito ainda existe para desvendar acerca da funcionalidade e regulação destas células. The present work represents the State-of-Art on the knowledge about the relationship between the structural characteristics of the cell lines which form the inner surface of the digestive tract, more precisely regarding the gastric mucosa, and its repercussion at physiological level. Generally the inner surface of the stomach is formed by a simple columnar epithelium which suffers invaginations toward the lamina propria, originating numerous folds that significantly increase its contact area - the gastric pits. In the base of these glands we find the gastric glands, whose most apical region are formed mainly by surface mucous cells. But as it goes from the lumen towards the periphery, other types of cells also exist, including stem cell, mucous neck cells, chief cells, parietal cells and enteroendocrine cells. These last ones are maintained and controlled by a large number of nervous and endocrine/paracrine mediators. An important point to be retained, which has been the subject of many investigations in recent years, is the fact that these cell lines are commonly associated with abnormal patterns of cell differentiation, showing a strong predisposition to the development and progression of gastric cancer, which is a health global public problem and unfortunately affects worldwide thousands of people every year. The current scientific knowledge about the morpho-functional relationships that are established at the level of different gastric cell lines and their subsequent repercussion at the level of histopathologic processes is discussed here. Unlike what would be expected, once the biological model is the Man, there is still much to uncover about the function and regulation of these cells.

Dissertação apresentada à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Engenharia e Gestão Ambiental A degradação dos sistemas aquáticos é resultado das actividades antropogénicas que aumentam continuamente as pressões sobre o meio ambiente, através da introdução de compostos xenobióticos de origem industrial, agrícola e doméstica no biota. O presente estudo recorreu à utilização de uma bateria de biomarcadores enzimáticos e histopatológicos, ferramentas importantes na detecção precoce de efeitos causados pela contaminação química, para avaliar o estado dos organismos presentes na Barrinha de Esmoriz. O objectivo do presente estudo foi biomonitorizar e avaliar os efeitos da contaminação química na Barrinha de Esmoriz, um sistema estuarino, em peixes (Gambusia holbrooki e Anguilla anguilla) através da quantificação das actividades das enzimas acetilcolinesterase (AChE), catalase (CAT), glutationa-S-transferases (GSTs) e lactato desidrogenase (LDH), e da análise de alterações em tecidos biológicos, como as brânquias e o fígado. Para isso, foi seleccionado o Rio Minho como local de referência e a Pateira de Fermentelos como um local com diferente tipologia de contaminado, de modo a detectar as respostas à presença de contaminantes nos biomarcadores seleccionados. Os resultados sugerem a existência de contaminação na Barrinha de Esmoriz, observável pela inibição da actividade da enzima AChE, em ambas as espécies analisadas, onde os indivíduos analisados revelaram perturbações no sistema de neurotransmissão. Quanto à actividade das enzimas CAT e as GSTs, os indivíduos de A. anguilla da Barrinha de Esmoriz apresentaram sinais indicativos da ocorrência de stress oxidativo. No entanto, o mesmo não foi observado nos indivíduos de G. holbrooki. A inibição da actividade da enzima LDH, nos indivíduos de ambas as espécies, evidencia que estes estão sob stress químico, reflectido por alterações da actividade respiratória tecidular. Aparentemente, as alterações verificadas nas actividades nos biomarcadores enzimáticos podem ter sido causados pela exposição a agentes metálicos. Os biomarcadores histopatológicos reforçam este cenário, pois é possível observar uma tendência nos índices patológicos das brânquias e do fígado, com uma crescente incidência de patologias nos órgãos-alvo analisados. O grau de severidade das lesões observadas é leve a moderado, sugerindo que podem ser reversíveis, eliminando o agente causador. Os dados indicam de forma clara que existe um cenário de contaminação na Barrinha de Esmoriz e com danos observáveis em G. holbrooki e A. anguilla. The degradation of aquatic systems is a result of anthropogenic activities that continually increase the pressures on the environment by introducing xenobiotic compounds from industrial, agricultural and domestic sources. This study used a battery of enzymatic and histopathological biomarkers, as an important tool for early detection of effects caused by contamination, to assess contamination effects in Barrinha of Esmoriz. The purpose of this study was biomonitoring and evaluating the effects of chemical contamination in the Barrinha of Esmoriz, an estuarine system, in two fish species (Gambusia holbrooki and Anguilla anguilla) by quantifying the activities of enzymes, such as acetylcholinesterase (AChE), catalase (CAT), glutathione-Stransferases (GSTs) and lactate dehydrogenase (LDH), and also by analyzing the alterations in biological tissues, namely liver and gills. Therefore, Minho River was selected as the reference site, and Pateira de Fermentelos was a third location with different pattern of anthropogenic contamination. The obtained results suggest the existence of contamination in Barrinha de Esmoriz, observable in the inhibition of AChE activity in both analyzed species; individuals of this estuarine lagoon revealed disturbances in neurotransmission. Considering CAT and GSTs enzyme activities, it is possible to suggest that individuals of A. anguilla of Barrinha the Esmoriz showed signs of oxidative stress. However, this was not observed in individuals of G. holbrooki. The inhibition of LDH activity in individuals of both species, suggested that these were under chemical stress. Apparently, the changes in enzyme activities may have been related to metal exposure. The results obtained for histological biomarkers reinforced this scenario, since it was possible to observe a trend in the rates of pathological alterations in gill and liver tissue. The relevance of the lesions was considered of minor to moderate importance, and may be reversible. The here obtained serie of data clearly indicate that there is a scenario of chemical contamination in Barrinha the Esmoriz, with the occurrence of potential damages, observable in both G. holbrooki and A. anguilla.

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas Submitted by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2013-04-12T10:43:06Z No. of bitstreams: 1 Linhagens celulares da mucosa gástrica - estrutura e função .pdf: 2117840 bytes, checksum: c59090f9fc751d24b3cfb7db8f7bac5f (MD5) Approved for entry into archive by csousa@ufp.pt (csousa@ufp.pt) on 2013-04-12T11:48:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Linhagens celulares da mucosa gástrica - estrutura e função .pdf: 2117840 bytes, checksum: c59090f9fc751d24b3cfb7db8f7bac5f (MD5) Made available in DSpace on 2013-04-12T11:48:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Linhagens celulares da mucosa gástrica - estrutura e função .pdf: 2117840 bytes, checksum: c59090f9fc751d24b3cfb7db8f7bac5f (MD5) Previous issue date: 2012