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Ingeniería de tejido ha sido definida como una ciencia interdisciplinaria cuyo fin es la síntesis de materiales que logren mejorar o a restaurar el tejido dañado con el fin de establecer terapias alternativas para tratamientos en caso de pérdida de tejido o fallas de órganos esenciales, ya que los trasplantes están frecuentemente limitados por la escasez de donantes y el alto riesgo de rechazo o transferencia de enfermedades. Por este motivo, el presente trabajo de tesis tiene como objetivo el desarrollo de hidrogeles basados en alginato de sodio que permitan la regeneración de tejido óseo y cartilaginoso. En una primera etapa de este trabajo, se extrajo alginato de sodio de la nervadura y lámina del alga parda Undaria pinnatifida. Junto con el polisacárido de origen comercial, los aislamientos fueron caracterizados fisicoquímicamente. Además, con el objetivo de minimizar su posible potencial inmunogénico, se utilizó un método de purificación simple que permitió disminuir impurezas tales como proteínas y polifenoles. Para evaluar el éxito de este proceso, se analizó la producción de un marcador de citotoxicidad y la morfología de un modelo de macrófagos en cultivo (RAW 264.7) en presencia de los distintos alginatos, observándose que el efecto tóxico inicial de las muestras crudas resultó prevenido sin producir cambios relevantes en las características fisicoquímicas del polímero. Además, al estudiar la capacidad osteogénica del polisacárido, se encontró que la proliferación y diferenciación de CPMO se vio favorecida con la purificación del mismo. Por otra parte, se procedió a la síntesis de hidrogeles de alginato entrecruzados iónicamente con estroncio con el fin de obtener materiales con actividad osteogénica y capacidad de liberación droga de manera localizada en el sitio de interés. Se lograron matrices de gran hinchamiento, pero con un porcentaje de degradabilidad muy alto, alcanzado luego de sólo 24 h, motivo por el cual se planteó un nuevo diseño para la fabricación de scaffolds a base de alginato. Posteriormente, se desarrollaron biomateriales a partir de la síntesis de redes poliméricas de HEMA-EGDMA semi-interpenetradas (SIPN) con alginato. Con este método se obtuvieron cuatro hidrogeles en los que se variaron las proporciones de iniciador y entrecruzante para obtener una familia de SIPN con propiedades versátiles (HA, HA-E0.5, HA-E0.25 y HA-A0.5), además de una matriz sin alginato (pHEMA) con el fin de evaluar el efecto producido por la incorporación del polisacárido al material. Estos fueron observados por SEM y se le realizaron pruebas de hinchamiento, degradación, pruebas mecánicas y medidas de ángulo de contacto. Se encontraron materiales con porosidad baja, pero con mejoras en la capacidad de hinchamiento y degradabilidad debida a la incorporación de alginato a la matriz polimérica. Además, se encontró que HA y HA-E0.25 presentaron propiedades mecánicas en el orden del tejido cartilaginoso. Por su parte, los estudios in vitro mostraron que los materiales con alginato exhibieron una muy buena biocompatibilidad. También se demostró la versatilidad de estos hidrogeles, ya que permitieron la adhesión y proliferación de tres tipos celulares distintos. Además, el agregado de alginato favoreció el desarrollo osteogénico de las células progenitoras de médula ósea (CPMO) y el crecimiento de condrocitos primarios, estabilizando el fenotipo condrogénico en el tiempo tanto con respecto a pHEMA como a las células crecidas en monocapa sobre el plato de cultivo estándar. Por su parte, también se evaluó la respuesta inmunogénica con RAW 264.7, encontrando que la incorporación del polisacárido a una red polimérica de HEMA-EGDMA previene un posible efecto citotóxico de pHEMA. Por último, se empleó un modelo in vivo para evaluar tres (pHEMA, HA y HA-E0.25) de nuestros biomateriales como sustitutos óseos. Se seleccionó un modelo de lesión en calota en roedores ampliamente utilizado por otros investigadores. En el defecto creado, se implantaron los hidrogeles con previa hidratación en PBS durante dos días. En la evaluación histológica realizada sobre los cortes teñidos con Hematoxilina-Eosina no se evidenció rechazo del material, observándose la formación de tejido conjuntivo denso y frentes de reosificación en HA y HA-E0.25. Sin embargo, no se apreció la penetración celular hacia el material, lo que indica que es necesario rediseñar la arquitectura de los scaffolds para aumentar su porosidad. En conjunto, estos resultados resultan muy prometedores en cuanto a la potencialidad de HA, HA-E0.5, HA-E0.25 y HA-E0.5 para ser utilizados como sustitutos biológicos en regeneración ósea y/o cartilaginosa., Facultad de Ciencias Exactas

[ES] La rodilla es una de las articulaciones del cuerpo humano más propensa a sufrir una lesión debido a la compleja anatomía que presenta y a la alta carga que soporta. A pesar de las investigaciones desarrolladas hasta el momento, no se conoce por completo el comportamiento mecánico del tejido blando y el origen de sus lesiones. El modelado de las estructuras de la rodilla mediante el Método de Elementos Finitos (MEF) resulta una herramienta capaz de proporcionar información acerca de las propiedades mecánicas de los tejidos biológicos. En este proyecto se han empleado imágenes de resonancia magnética (RM) de rodilla humana para el desarrollo de modelos biomecánicos de cartílago y meniscos a partir de la segmentación manual de dichos tejidos. La fiabilidad de estos modelos depende de la descripción matemática asignada al comportamiento de los tejidos y de las condiciones de contorno impuestas sobre los mismos. En este caso emplearemos los modelos isotrópicos hiperelásticos de Arruda-Boyce y Neo- Hookean con el fin de comparar la distribución de cargas y desplazamiento entre sujetos sanos, sujetos que presentan degeneración del tejido blando y sujetos con fractura de menisco o degeneración severa del cartílago. Se simula la carga que es ejercida por el peso del cuerpo sobre el cartílago y los efectos de distribución de la carga de los meniscos en los sujetos empleando el Análisis por Elementos Finitos (AEF)., [EN] Knee is one of the joints in the human body most likely to suffer an injury due to its complex anatomy and the high load that it support. In spite of the investigations developed until now, the mechanical behavior of the soft tissue and the origin of its injuries are not completely known. The modeling of knee structures by means of the Finite Element Method (FEM) results in a tool capable of providing information about the mechanical properties of biological tissues. In this project, magnetic resonance imaging (MRI) of the human knee has been used to develop biomechanical models of cartilage and menisci based on the manual segmentation of these tissues. The accuracy of these models depends on the mathematical description assigned to the behavior of the tissues and the constraints imposed on them. In this case we will use the hyperelastic isotropic models of Arruda-Boyce and NeoHookean in order to compare the distribution of loads and displacement among healthy subjects, subjects with soft tissue degeneration and subjects with meniscus fracture or severe cartilage degeneration. The load that is exercised by the weight of the body on the cartilage and the effects of stress distribution of the tension of the menisci on the subjects are simulated using Finite Element Analysis (FEA), [CAT/VA] El genoll és una de les articulacions del cos humà més propensa a patir una lesió a causa de la complexa anatomia que presenta i a l'alta càrrega que suporta. Malgrat les investigacions desenvolupades fins al moment, no es coneix per complet el comportament mecànic del teixit tou i l'origen de les seues lesions. El modelatge de les estructures del genoll mitjançant el Mètode d'Elements Finits (MEF) resulta una eina capaç de proporcionar informació sobre les propietats mecàniques dels teixits biològics. En aquest projecte s'han emprat imatges de ressonància magnètica (RM) de genoll humà per al desenvolupament de models biomecànicos de cartílag i meniscos a partir de la segmentació manual d'aquests teixits. La fiabilitat d'aquests models depén de la descripció matemàtica assignada al comportament dels teixits i de les condicions de contorn imposades sobre aquests. En aquest cas emprarem els models isotròpics hiperelàsticos de Arruda-Boyce i Neo- Hookean amb la finalitat de comparar la distribució de càrregues i desplaçament entre subjectes sans, subjectes que presenten degeneració del teixit bla i subjectes amb fractura de menisc o degeneració severa del cartílag. Se simula la càrrega que és exercida pel pes del cos sobre el cartílag i els efectes de distribució de la càrrega dels meniscos en els subjectes emprant l'Anàlisi per Elements Finits (AEF).

Resultados de investigación In addition to its structural role in skeletogenesis, the extracellular matrix (ECM), particularly basement membrane proteins, facilitates communication with intracellular signaling pathways and cell to cell interactions to control differentiation, proliferation, migration and survival. Alterations in extracellular proteins cause a number of skeletal disorders and one attributed mechanism results from the deleterious effects of mutated proteins on ECM structure. Yet, the consequences of abnormal ECM on cellular communication remains less well understood. Herein, we describe an unclassified form of bent bone dysplasia caused by recessively inherited mutations in LAMA5, the gene encoding the alpha-5 laminin basement membrane protein. This finding uncovered a mechanism of disease driven by ECM-cell interactions between alpha-5-containing laminins, and integrin- mediated focal adhesion signaling, particularly in cartilage. Loss of LAMA5 altered b1 integrin signaling through the non-canonical kinase PYK2 and the skeletal enriched SRC kinase FYN. Loss of LAMA5 negatively impacted the actin cytoskeleton, vinculin localization, and WNT signaling, tying focal adhesion molecules to key skeletal signaling molecules. This newly described mechanism reveals that a LAMA5-b1 Integrin-PYK2-FYN focal adhesion complex regulatesskeletogenesis and, when dysregulated, produces a distinct skeletal disorder. Universidad de Málaga. Campus de Excelencia Internacional Andalucía Tech

Objective: To compare the efficacy of the score technique of the tibial dyschondroplasia lesions with a quantification technique in broiler chickens, in search of a better objectivity and reliability of the diagnosis. Materials and methods: 384 male one-day-old chickens were raised until day 36. A total of 192 chickens were sampled, 96 at day 21 and 96 at day 36; the tibial dyschondroplasia disorder was evaluated by comparing two techniques: 1. Qualitative evaluation of the score of tibial dyschondroplasia and, 2. Quantitative measurement of the percentage of area with tibial dyschondroplasia as an alternative test. Results: the Score test of TD lesions had a sensitivity of 83% and 100% with a specificity of 55% and 54% for day 21 and day 36 respectively, and a positive predictive value of 60% for day 21 and of 66% for day 36, while the negative predictive value was 80% and 100% for days 21 and 36. Conclusions: The evaluated alternative test proved to be an effective and efficient method of quantification of tibial dyschondroplasia in broiler chickens, offering more objectivity than the traditional macroscopic test. Resumen Objetivo: Comparar la eficacia de la técnica de score de las lesiones de discondroplasia tibial con una técnica de cuantificación en pollos de engorde, en búsqueda de una mejor objetividad y confiabilidad del diagnóstico. Materiales y métodos: Se criaron 384 pollos machos, de un día de edad, los cuales fueron criados hasta el día 36. Fue muestreado un total de 192 pollos, 96 al día 21 y 96 al día 36 de edad de las aves, a las cuales se les evaluó el estado de discondroplasia tibial comparando dos técnicas: 1. Evaluación Cualitativa del Score de discondroplasia tibial y, 2. Medición Cuantitativa del porcentaje de área con discondroplasia tibial como prueba alterna. Resultados: Se obtuvo que la prueba del Score de las lesiones de DT tuvo una sensibilidad del 83% y del 100% con una especificidad del 55% y 54% para el día 21 y 36 de edad respectivamente; y un valor predictivo positivo para el día 21 del 60% y para el día 36 del 66%, mientras que el valor predictivo negativo fue del 80% y del 100% para los días 21 y 36 de edad. Conclusiones: La prueba alterna evaluada, demostró ser un método eficaz y eficiente de cuantificación de discondroplasia tibial en pollos de engorde, ofreciendo mayor objetividad que la prueba macroscópica tradicional.

Objetivo: Comparar la eficacia de la técnica de score de las lesiones de discondroplasia tibial con una técnica de cuantificación en pollos de engorde, en búsqueda de una mejor objetividad y confiabilidad del diagnóstico. Materiales y métodos: Se criaron 384 pollos machos, de un día de edad, los cuales fueron criados hasta el día 36. Fue muestreado un total de 192 pollos, 96 al día 21 y 96 al día 36 de edad de las aves, a las cuales se les evaluó el estado de discondroplasia tibial comparando dos técnicas: 1. Evaluación Cualitativa del Score de discondroplasia tibial y, 2. Medición Cuantitativa del porcentaje de área con discondroplasia tibial como prueba alterna. Resultados: Se obtuvo que la prueba del Score de las lesiones de DT tuvo una sensibilidad del 83% y del 100% con una especificidad del 55% y 54% para el día 21 y 36 de edad respectivamente; y un valor predictivo positivo para el día 21 del 60% y para el día 36 del 66%, mientras que el valor predictivo negativo fue del 80% y del 100% para los días 21 y 36 de edad. Conclusiones: La prueba alterna evaluada, demostró ser un método eficaz y eficiente de cuantificación de discondroplasia tibial en pollos de engorde, ofreciendo mayor objetividad que la prueba macroscópica tradicional. Objective: To compare the efficacy of the score technique of the tibial dyschondroplasia lesions with a quantification technique in broiler chickens, in search of a better objectivity and reliability of the diagnosis. Materials and methods: 384 male one-day-old chickens were raised until day 36. A total of 192 chickens were sampled, 96 at day 21 and 96 at day 36; the tibial dyschondroplasia disorder was evaluated by comparing two techniques: 1. Qualitative evaluation of the score of tibial dyschondroplasia and, 2. Quantitative measurement of the percentage of area with tibial dyschondroplasia as an alternative test. Results: the Score test of TD lesions had a sensitivity of 83% and 100% with a specificity of 55% and 54% for day 21 and day 36 respectively, and a positive predictive value of 60% for day 21 and of 66% for day 36, while the negative predictive value was 80% and 100% for days 21 and 36. Conclusions: The evaluated alternative test proved to be an effective and efficient method of quantification of tibial dyschondroplasia in broiler chickens, offering more objectivity than the traditional macroscopic test.

El xoc femoroacetabular (XFA), com un canvi en la morfologia de l’fèmur proximal o l’acetàbul, produeix una alteració mecànica en l’articulació del maluc que pot iniciar el procés degeneratiu i finalment l’osteoartritis. Hi ha dos problemes seriosos associats amb XFA; La delaminació condral, que passa amb més freqüència amb el cap no esfèrica de l’fèmur (tipus CAM) a causa de les forces de tall repetides, i el dany labral que és més freqüent amb la sobrecobertura acetabular (tipus pinça) a causa de les forces de compressió repetides. El propòsit d’aquest estudi va ser avaluar els resultats a curt i mitjà termini de l’ús de la bastida a força de quitosà amb microfractura durant el tractament artroscòpic de XFA i lesions condrals acetabulares associades en pacients joves actius. Els casos inclosos tenien malucs no artrítiques no displàsiques a l’edat de 18 a 55 anys. El tractament artroscòpic va consistir en la resecció de la deformitat de Cam (femoroplastia), la resecció de la deformitat de la pinça (acetabuloplastia), la reparació de l’labrum estripat i el maneig de l’cartílag acetabular segons el grau de dany. Les lesions de cartílag de gruix parcial es van tractar mitjançant desbridament superficial. Lesions acetabulares petites de gruix complet (

[ES] Objetivos: Las vías aéreas cumplen un papel muy importante en el organismo ya que son las responsables tanto de llevar el aire a los pulmones como de acondicionarlo. El cartílago tiene una función esencial de soporte mientras que la mucosa respiratoria es la encargada del aclaramiento mucociliar. Enfermedades como la estenosis afectan a estas estructuras impidiendo la correcta realización de sus funciones y resultando en graves consecuencias para quienes las sufren, además de que los tratamientos actuales no son efectivos. Las técnicas de ingeniería tisular son prometedoras para la reconstrucción de este tipo de defectos, por ello en este trabajo se plantea el uso del ácido poliláctico como soporte en estrategias de regeneración del cartílago y la mucosa de las vías aéreas. Metodología: En primer lugar, se caracterizó la estructura, citotoxicidad y propiedades mecánicas de los soportes de ácido poliláctico. Posteriormente, se sembraron condrocitos primarios sobre scaffolds de ácido poliláctico impresos en 3D con y sin hidrogeles, y se evaluó mediante marcaje fluorescente la morfología y la expresión de colágeno de tipo I, de tipo II y agrecano. También se sembraron células epiteliales primarias y las líneas celulares A549 y H460 sobre membranas electrohiladas de ácido poli-L-láctico con y sin colágeno, y se analizó mediante fluorescencia la proliferación y morfología, así como la expresión de genes relacionados con la mucosa respiratoria (CDH1, CK20 y MUC5AC) mediante Real Time PCR. Resultados: Los soportes de ácido poliláctico resultaron ser no citotóxicos además de que mostraron propiedades mecánicas similares a los de la tráquea, con un Módulo de Young de entre 2,6 ± 0,1 y 3,6 ± 0,2 MPa según el espesor. Por otra parte, los condrocitos sembrados en los scaffolds de PLA expresaron proteínas propias del cartílago hialino como colágeno II y agrecano principalmente cuando se combinó el scaffold con el hidrogel de alginato y agarosa. Además, las células epiteliales mostraron una proliferación adecuada tapizando las membranas con y sin colágeno, y en el caso de las A549 y las células epiteliales primarias, mostraron expresión de CDH1, lo que significa que sí que tienen características de epitelio. Conclusiones: Los resultados obtenidos permiten concluir que el uso de ácido poliláctico como soporte para condrocitos y células epiteliales presenta una potencial capacidad para la regeneración de vías aéreas., [EN] Objectives: The airways play a very important role in the organism since they are responsible for both carrying the air to the lungs and conditioning it. Cartilage has an essential support function while the respiratory mucosa is responsible for mucociliary clearance. Diseases such as stenosis affect these structures, preventing the proper performance of their functions and resulting in serious consequences for those who suffer them, in addition to the fact that current treatments are not effective. Tissue engineering techniques are promising for the reconstruction of this type of defects, so in this project the use of polylactic acid as a support in regeneration strategies of the cartilage and the mucosa of the airways is considered. Methodology: Firstly, the structure, cytotoxicity and mechanical properties of the polylactic acid supports were characterized. Subsequently, primary chondrocytes were seeded on 3D printed polylactic acid scaffolds with and without hydrogels, and the morphology and expression of type I, type II and aggrecan collagen was evaluated by fluorescent labeling. Primary epithelial cells and the A549 and H460 cell lines were also seeded onto electrohilated membranes of poly-L-lactic acid with and without collagen, and proliferation and morphology were analyzed by fluorescence, as well as the expression of genes related to the respiratory mucosa ( CDH1, CK20 and MUC5AC) by Real Time PCR. Results: The polylactic acid scaffolds were found to be non-cytotoxic, in addition to showing mechanical properties similar to those of the trachea, with a Young's modulus between 2.6 ± 0.1 and 3.6 ± 0.2 MPa depending on the thickness. On the other hand, the chondrocytes grown in the PLA scaffolds expressed hyaline cartilage proteins such as collagen II and aggrecan mainly when the scaffold was combined with the alginate and agarose hydrogel. In addition, the epithelial cells showed an adequate proliferation on membranes with and without collagen, and in the case of the A549 and the primary epithelial cells, they showed expression of CDH1, which means that they do have epithelial characteristics. Conclusions: The results obtained allow us to conclude that the use of polylactic acid as a scaffold for chondrocytes and epithelial cells presents a potential capacity for the regeneration of airways.

The white-footed tamarin (Saguinus leucopus) is an endangered endemic primate of Colombia, mainly due to the deforestation of its habitat and illegal trade, which generates a high incidence of these animals in wildlife care centres. Musculoskeletal system disorders in S. leucopus are one of the most common diseases and therefore the aim of this study was to contribute to the morphologic studies with a morphometric, anatomic and radiographic description of the scapula in this species to provide a basis for medical interventions, surgical approaches, radiologic diagnoses and comparative functions of this bone. Gross dissections of each scapular region were made in eight specimens without a diagnosis of osteomuscular disease. These specimens died from natural cases in the wildlife care centres of the Corporacion Autonoma Regional de Caldas (CORPORCALDAS); after necropsy their carcasses were fixed with 10% formaldehyde, 5% mineral oil and 1% phenic acid in these centres over the course of at least 1 week. X-rays of the scapula were taken in the small animal clinic of the Universidad del Tolima, and morphometric data of the scapulae were obtained with a digital calliper. The scapula of the white-footed tamarin was a flat triangular bone with a deep scapular notch in its cranial margin, where there was a cranial transverse scapular ligament that was absent in two specimens. The coracoid process was highly developed, medially covering the humeral joint. The dorsal margin was covered by the scapular cartilage, which was highly developed in the caudal angle. In the dorsal fourth of the caudal margin, there was a surface from which the m. teres major originated. The lateral surface had a scapular spine with a long hamatus process of the acromion until the lateral part of the humeral joint. The infraspinatus fossa was wider than the supraspinous fossa. On the costal surface, the subscapular fossa was formed by three subscapular lines and one subscapular ridge, the latter helping to form the surface for the m. teres major. In the two radiographic views, caudocranial to the scapula and dorsoventral to the thorax, the scapular spine, acromion, coracoid process, scapular incisura, supraglenoid tubercle, caudal margin, subscapular ridge, and the joints with the clavicle and the humerus could be observed. The scapula of the white-footed tamarin presented bony reliefs that share characteristics with other primates but also with domestic mammals due to its quadrupedal locomotion, which allowed us to correlate its morphologic adaptation with its quadrupedal arboreal displacement.

ResumenEl cartílago es un tejido sensible propenso a la degeneración con la práctica continua de deporte y el proceso de envejecimiento, con baja capacidad de auto-reparación. Las enfermedades articulares degenerativas están entre las más profundamente invalidantes y limitantes en cuanto actividades diarias y calidad de vida. Las terapias biológicas se han vuelto disponibles para potencialmente tratar artrosis y lesiones condrales focales. Sin embargo, aun no hay manera eficiente de regenerar cartílago hialino nativo. Las terapias con células madre y la bioingeniería constituyen un terreno prometedor, el cual puede transformar los paradigmas en ortopedia. Esta revisión provee una visión en conjunto del corriente estado de las terapias con células madres y progenitoras. Resumimos opciones de células expandidas en cultivo y además, cuatro fuentes frecuentes de células madre adultas: medula ósea, tejido adiposo, tejido sinovial y sangre venosa periférica, junto a estudios clínicos reportando su eficacia. El propósito de esta revisión es resumir el potencial reportado de terapias con células madre adultas enfocándonos en lesiones condrales focales y artrosis.AbstractCartilage is a sensitive tissue prone to damage with the continuous practice of sports and ageing process, holding a low self repairing capacity. Degenerative joint diseases are among the most disabling and limiting in regards to life quality and daily activities. Biological therapies have become available to potentially treat osteoarthritis and focal chondral defects. However, there is still no efficient way to regenerate native hyaline cartilage. Stem cell therapy and bioengineering is a promising field which can transform the paradigms in orthopaedics. This review provides an overall view of the current state of biological therapies with stem and progenitor cells. We summarize cell therapy options with culture expanded cells and also four common sources of adult stem cells: bone marrow, adipose tissue, synovium and peripheral venous blood, along with clinical studies reporting their effectiveness. The purpose of this review is to summarize adult stem cells approaches for the treatment of focal chondral lesions and osteoarthritis.

Resumen Introducción: el cartílago es un tejido conectivo especializado ampliamente estudiado por sus componentes mecánicos y su aporte para el funcionamiento articular. El entendimiento de su rol requiere necesariamente del abordaje del comportamiento biomecánico. Objetivo: realizar una revisión de literatura acerca de la biomecánica del cartílago articular y sus respuestas a las fuerzas aplicadas. Materiales y Métodos: se realizó una búsqueda bibliográfica en las bases de datos Pubmed, Scielo, Science Direct y Google académico de artículos publicados entre los años 1998 y 2017, con los términos: "Cartilage Biomechanic", "Cartilage Fisiology", y "Cartilage Histology". Se encontraron 55 artículos, 44 en idioma inglés y 11 en idioma español, los cuales contenían información relevante a cerca de la biomecánica del cartílago articular. Resultados: en este artículo se resume un conjunto de conceptos derivados de estudios experimentales y otras revisiones de tema, abordando actualizaciones en cuanto a la histología, la fisiología y las diferentes respuestas mecánicas ante distintos estímulos como lo son la anisotropía, la viscoelasticidad la histéresis, fluencia, entre otros. Conclusiones: el cartílago articular es un tejido conectivo trifásico que permite el soporte y transmisión de cargas gracias a la mecanotransducción. El abordaje y comprensión de la biomecánica de los tejidos se hace necesaria para la prescripción del ejercicio en condiciones aparentemente normales y patológicas. MÉD.UIS. 2018;31(3):47-56. Abstract Background: cartilage is a specialized connective tissue widely studied for its mechanical components and its contribution to joint functioning. The understanding of cartilage role necessarily requires an approach of biomechanical behavior. Objective: to perform a literature review about the biomechanics of the articular cartilage and its responses to applied forces. Materials and Methods: a bibliographic search was conducted in Pubmed, Scielo, Science Direct and Google academic databases, of articles published between 1998 and 2017, with the terms: "Cartilage Biomechanic", "Cartilage Physiology", and "Cartilage Histology". 55 articles were found, 44 in English and 11 in Spanish, which contained relevant information about the biomechanics of articular cartilage. Results: this article summarizes a set of concepts derived from experimental studies and other reviews of the topic, addressing updates regarding histology, physiology and different mechanical responses to different stimuli such as anisotropy, viscoelasticity, hysteresis and fluency. Conclusions: the articular cartilage is a three-phase connective tissue that allows the support and transmission of loads thanks to the mechanotransduction. The approach and understanding of the biomechanics of the tissues is necessary for the prescription of exercise in apparently normal and pathological conditions. MÉD.UIS. 2018;31(3):47-56.

[Resumen] El sulfuro de hidrógeno (H2S), compuesto activo de las aguas mineromedicinales sulfuradas, ha demostrado ser un protector tisular en varias patologías. Nuestros resultados previos demostraron que NaSH y GYY4137, dos compuestos sintéticos que producen H2S, presentan efectos anti-inflamatorios y anti-catabólicos en condrocitos procedentes de pacientes con artrosis (OA) estimulados con interleuquina 1β (IL1β). En el presente trabajo se investigó si estos mismos compuestos inhiben también los procesos catabólicos directamente en cartílago humano artrósico.

RESUMEN El cartílago articular es un tejido vulnerable a las lesiones de diferente etiología; siendo uno de los más afectados, el cartílago de la rodilla. Aunque la mayoría de los tratamientos convencionales reducen los síntomas, generalmente conducen a la formación de fibrocartílago; el cual, posee características diferentes a las del cartílago hialino de las articulaciones. Son pocas las aproximaciones terapéuticas que promueven el reemplazo del tejido dañado por cartílago hialino funcional; las más exitosas son las denominadas terapias avanzadas, que aplican células y productos de ingeniería de tejidos con el fin de estimular la regeneración del cartílago. La mayoría de ellas se basan en colocar soportes hechos con biomateriales de diferente origen, que sembrados o no con células exógenas o endógenas, reemplazan al cartílago dañado y promueven su regeneración. Este trabajo revisa algunas de las aproximaciones terapéuticas enfocadas en la regeneración del cartílago articular de rodilla; así como, los biomateriales más empleados en la elaboración de soportes para terapia celular e ingeniería de tejido cartilaginoso. ABSTRACT The articular cartilage is prone to suffer lesions of different etiology, being the articular cartilage lesions of the knee the most common. Although most conventional treatments reduce symptoms they lead to the production of fibrocartilage, which has different characteristics than the hyaline cartilage of the joint. There are few therapeutic approaches that promote the replacement of damaged tissue by functional hyaline cartilage. Among them are the so-called advanced therapies, which use cells and tissue engineering products to promote cartilage regeneration. Most of them are based on scaffolds made of different biomaterials, which seeded or not with endogenous or exogenous cells, can be used as cartilage artificial replacement to improve joint function. This paper reviews some therapeutic approaches focused on the regeneration of articular cartilage of the knee and the biomaterials used to develop scaffolds for cell therapy and tissue engineering of cartilage.

El cartílago articular es un tejido vulnerable a las lesiones de diferente etiología; siendo uno de los más afectados, el cartílago de la rodilla. Aunque la mayoría de los tratamientos convencionales reducen los síntomas, generalmente conducen a la formación de fibrocartílago; el cual, posee características diferentes a las del cartílago hialino de las articulaciones. Son pocas las aproximaciones terapéuticas que promueven el reemplazo del tejido dañado por cartílago hialino funcional; las más exitosas son las denominadas terapias avanzadas, que aplican células y productos de ingeniería de tejidos con el fin de estimular la regeneración del cartílago. La mayoría de ellas se basan en colocar soportes hechos con biomateriales de diferente origen, que sembrados o no con células exógenas o endógenas, reemplazan al cartílago dañado y promueven su regeneración. Este trabajo revisa algunas de las aproximaciones terapéuticas enfocadas en la regeneración del cartílago articular de rodilla; así como, los biomateriales más empleados en la elaboración de soportes para terapia celular e ingeniería de tejido cartilaginoso. The articular cartilage is prone to suffer lesions of different etiology, being the articular cartilage lesions of the knee the most common. Although most conventional treatments reduce symptoms they lead to the production of fibrocartilage, which has different characteristics than the hyaline cartilage of the joint. There are few therapeutic approaches that promote the replacement of damaged tissue by functional hyaline cartilage. Among them are the so-called advanced therapies, which use cells and tissue engineering products to promote cartilage regeneration. Most of them are based on scaffolds made of different biomaterials, which seeded or not with endogenous or exogenous cells, can be used as cartilage artificial replacement to improve joint function. This paper reviews some therapeutic approaches focused on the regeneration of articular cartilage of the knee and the biomaterials used to develop scaffolds for cell therapy and tissue engineering of cartilage.

The purpose of this study was to establish if there was any difference in the GAGs content between loaded and unloaded surfaces of the joint. Furthermore, the results were compared between macroscopically healthy and damaged joints. Cartilage sampleswere obtained from two different zones of the equine etacarpophalangeal joint (metacarpal condyles). Samples were collected fromthe loaded surface of macroscopically healthy joints (N1; n=10) and from macroscopically damaged cartilage (P1; n=10). Additionally,cartilage samples were collected from unloaded areas at the most dorso-proximal zone of the joint in macroscopically healthy joints(N2; n=10) and from the macroscopically pathological joints but without damaged cartilage on the site of sampling (P2; n=10). TheGAGs were extracted from 100 mg of cartilage of each sample and quantified through the safranine - O method that measured thetotal anionic charges, and through the carbazole method that measured the uronic acid content. Both methods measured the GAGscontent, showing no differences between intra-joint zones (1 and 2), but when the GAGs content was compared between healthy andpathological joints, both methods showed a significantly decreased GAGs content in the damaged joints (1 and 2). These results showthat the whole articular cartilage could be affected in a chronic pathological process and is not only a local process occurring in themacroscopically damaged cartilage associated with the loaded area., El propósito de este estudio fue establecer la existencia de alguna diferencia en el contenido de GAG entre lassuperficies articulares que soportan y no soportan peso, comparando articulaciones metacarpofalángicas equinas macroscópicamentesanas y dañadas. Las muestras de cartílago se obtuvieron desde la superficie de apoyo de articulaciones macroscópicamente sanas(N1; n=10) y de aquellas macroscópicamente dañadas (P1; n=10). Adicionalmente, en una localización dorsoproximal se obtuvieronmuestras de la superficie del cartílago sin apoyo, desde articulaciones sanas (N2; n=10) y dañadas (P2; n=10). Los GAG fueronextraídos desde 100 mg de cartílago de cada muestra y cuantificados mediante el método safranina-O que mide la carga aniónica totaly por el método del carbazol que mide el contenido de ácido urónico. Ambos métodos fueron capaces de medir el contenido de GAGno encontrándose diferencias entre zonas intraarticulación (1 y 2). Al comparar el contenido de GAG entre articulaciones sanas ydañadas, ambos métodos evidenciaron una disminución significativa de GAG en las articulaciones dañadas (1 y 2). Estos resultadosmuestran que en un proceso patológico articular crónico se afecta el cartílago en su conjunto y no solo aquellas zonas que muestranlesiones macroscópicas al soportar mayor impacto mecánico.

El cartílago es un tipo de tejido conectivo especializado, que se caracteriza por estar constituido por condrocitos y una matriz extracelular (MEC) altamente especializada, cuya composición rica en fibras colágenas, fibras elásticas, glicosaminoglicanos, proteoglicanos y glicoproteínas, le confieren sus propiedades biomecánicas y su elevada hidratación. Histológicamente, existen tres tipos de cartílago en la especie humana, los cuales se diferencian por la composición de la MEC. Estas variedades son, el cartílago hialino, localizado en las articulaciones sinoviales, en el cartílago de crecimiento de los huesos largos, y en la porción conductora de la vía aérea. El cartílago elástico, que constituye el esqueleto de algunas vísceras, el cual es especialmente importante en el pabellón auricular y conducto auditivo externo y el cartílago fibroso que se localiza en los discos intervertebrales, sínfisis púbica y en la articulación temporomandibular En el área maxilofacial, tema de especial interés en esta Tesis Doctoral, se localizan los tres tipos de tejido cartilaginoso, el cartílago hialino en el septum nasal, el cartílago elástico en el conducto auditivo externo y pabellón auricular y el fibrocartílago en el disco de la articulación temporomandibular. El tejido cartilaginoso en sus distintas variedades, se ve afectado por múltiples patologías neoplásicas, congénitas, osteodegenerativas, autoinmunes, traumatismos y diversos síndromes. En el caso del cartílago elástico, tipo de cartílago estudiado en la presente Tesis Doctoral, la patología más frecuente que lo afecta es la microtia, una patología congénita que afecta al pabellón auricular. Actualmente, aunque existen diversas alternativas terapéuticas para el tratamiento de este tipo de lesiones del pabellón auricular, los resultados no son del todo satisfactorios ni duraderos en el tiempo, requiriendo múltiples intervenciones quirúrgicas con su amplia gama de complicaciones, por lo cual, la generación de un sustituto adecuado de cartílago elástico para uso clínico, continua siendo un desafío. En la presente Tesis Doctoral se estudió la generación mediante técnicas de Ingeniería Tisular, de un modelo de cartílago elástico artificial humano utilizando condrocitos humanos derivados de cartílago elástico (CHDCE), encapsulados en un biomaterial, un hidrogel compuesto de fibrina-agarosa nanoestructurado., Tesis Univ. Granada. Programa Oficial de Doctorado en Biomedicina, Esta Tesis Doctoral ha sido realizada en los laboratorios del Grupo de Ingeniería Tisular del Departamento de Histología de la Universidad de Granada y financiada por el proyecto de investigación PI-0653-2013 de la Consejería de Salud de la Junta de Andalucía, por el proyecto de investigación GREIB PP2012-P109 (Proyectos de investigación precompetitivos del plan propio) de la Universidad de Granada y del Vicerrectorado de Política e Investigación.

El plasma rico en plaquetas es usado como tratamiento de artropatías en caballos. Sin embargo, existe escasa información in vitro acerca del mecanismo de acción de esta sustancia y sus efectos en el cartílago sano de estos animales. Los objetivos del estudio fueron: (1) evaluar los efectos a las 48 y 96h de dos concentraciones de sobrenadantes de gel rico en plaquetas y leucocitos (L-PRG) y gel rico en plaquetas puro (P-PRG) sobre la producción/degradación de factor de crecimiento derivado de plaquetas isoforma BB, factor de crecimiento transformante beta-1, factor de necrosis tumoral alfa, interleucina (IL) 4 (IL-4) y antagonista del receptor de la IL-1 (IL-1ra) en explantes de cartílago (EC) equino normales; y (2) estudiar posibles correlaciones de estas moléculas con los tipos de tratamientos evaluados. Se cultivaron EC de seis caballos clínicamente sanos durante 96h con sobrenadantes de L-PRG y P-PRG en concentraciones del 25 y 50%, respectivamente. Los medios de cultivo se cambiaron cada 48h y se utilizaron para la determinación, por ELISA, de las moléculas. Los sobrenadantes de L-PRG y P-PRG en ambas concentraciones influyeron en el perfil antiinflamatorio molecular de los grupos de EC cultivados con estas sustancias. El sobrenadante de L-PRG al 50% produjo los efectos proinflamatorios más robustos en comparación con el grupo control y los grupos de EC cultivados con los demás tratamientos. Los sobrenadantes de ambos geles indujeron efectos proinflamatorios en EC normales., Platelet-rich plasma is used as a treatment of arthropathies in horses. However, there is lack of in vitro information about the mechanism of action of this substance and its effects on healthy cartilage of these animals. The aims were: (1) to evaluate the effects at 48 and 96h of two concentrations (25 and 50%) of leukocyte- and platelet-rich gel (L-PRG) and pure platelet rich gel (P-PRG) supernatants on the production/degradation in normal cartilage explants (CEs) of platelet-derived growth factor isoform BB, transforming growth factor beta-1, tumour necrosis factor alpha, interleukin (IL) 4 (IL-4), and IL-1 receptor antagonist (IL-1ra); and (2) to study possible correlations of these molecules with their respective PRG supernatant treatments. CEs from six horses were cultured for 96h with L-PRG and P-PRG supernatants at 25 and 50% concentrations, respectively. CE culture media were changed each 48h and used for determination, by ELISA, of the molecules. L-PRG and P-PRG supernatants at 25 and 50% concentrations influenced the molecular anti-inflammatory profile of CE groups cultured with these substances. 50% L-PRG supernatant produced the most robust pro-inflammatory effects when compared to the CE control group and the CE group treated with the other PRG supernatant concentrations. In general, PRG supernatants induced pro-inflammatory effects in normal CEs.

Producción Científica, Over the last decades, novel therapeutic tools for osteochondral regeneration have arisen from the combination of mesenchymal stromal cells (MSCs) and highly specialized smart biomaterials, such as hydrogel-forming elastin-like recombinamers (ELRs), which could serve as cell-carriers. Herein, we evaluate the delivery of xenogeneic human MSCs (hMSCs) within an injectable ELR-based hydrogel carrier for osteochondral regeneration in rabbits. First, a critical-size osteochondral defect was created in the femora of the animals and subsequently filled with the ELR-based hydrogel alone or with embedded hMSCs. Regeneration outcomes were evaluated after three months by gross assessment, magnetic resonance imaging and computed tomography, showing complete filling of the defect and the de novo formation of hyaline-like cartilage and subchondral bone in the hMSC-treated knees. Furthermore, histological sectioning and staining of every sample confirmed regeneration of the full cartilage thickness and early subchondral bone repair, which was more similar to the native cartilage in the case of the cell-loaded ELR-based hydrogel. Overall histological differences between the two groups were assessed semi-quantitatively using the Wakitani scale and found to be statistically significant (p, Ministerio de Economía, Industria y Competitividad (Project (MAT2016-78903-R, MAT2016-9 79435-R, MAT2013-42473-R, MAT2013-41723-R and MAT2012-38043), Junta de Castilla y León (programa de apoyo a proyectos de investigación – Ref. VA244U13, VA313U14 and GRS/516/A/10)

La mano humana se ha usado como un modelo insustituible para el desarrollo de diferentes manos robóticas, debido a su impresionante complejidad y versatilidad en la manipulación de objetos y ajustes posicionales de acuerdo a la ejecución de patrones funcionales. Las manos antropomórficas han sido ampliamente investigadas por su similitud inherente a la mano humana y, potencialmente, puede traer una gran variedad de beneficios a los campos de prótesis de mano, robots humanoides, robots médicos y exploración espacial. Este trabajo de grado está enmarcado en la línea de investigación de protocolos de diseño de prótesis, para diseñar e implementar un dedo antropomórfico de tres grados de libertad. El diseño integrara consideraciones anatómicas, las cuales se emularan con materiales alternativos que cumplan las características biológicas de la mano. Modelado de manera que se inspira en la anatomía natural de la mano, con el fin de realizar los diferentes agarres de la mano. A partir de esto, se logró diseñar una mano virtual que emule la taxonomía de agarres y un dedo antropomórfico de tres grados de libertad. Se realizaron los cálculos pertinentes de la cinemática directa, inversa y dinámica con el fin de conocer el rango de acción y puntos del efector final y obtener un sistema de control del dedo antropomórfico. El diseño del dedo antropomórfico con materiales alternativos espera crear una nueva visión en la construcción de estos y enmarcar un nuevo panorama en futuras investigaciones. Para el desarrollo de este trabajo se utilizaron herramientas virtuales de simulación para comprobar la aproximación del dedo antropomórfico a un dedo humano respecto a sus movimientos. The human hand has been used as an irreplaceable model for the development of different robotic hands, because of its impressive complexity and versatility in handling objects and positional adjustments according to the execution of functional patterns. Anthropomorphic hands have been widely investigated for their inherent similarity to the human hand and potentially can bring a variety of benefits to the fields of prosthetic hand, humanoid robots, medical robots and space exploration. This degree work is framed in the research protocol prosthetic design, to design and implement an anthropomorphic finger that has three degrees of freedom. The design integrates anatomical considerations, which are emulated with alternative materials that meet the biological characteristics of the hand. Modeled so it can be inspired by the natural anatomy of the hand, in order to perform the different hand grips. From this, it was possible to design a virtual hand that emulates the taxonomy grips of an anthropomorphic finger and the three degrees of freedom. The relevant calculations of direct kinematics, inverse and dynamics in order to know the range of action and points of the end effector and obtain a control for the anthropomorphic finger. The design of using alternative materials for the anthropomorphic finger hopes to create a new vision in building new models and frame a new panorama in future research. For the development of this work virtual simulation tools were used to test the anthropomorphic approach of a human finger about the range of movements. Pregrado

In long bones the growth plate is a cartilaginous structure located between the epiphysis and the diaphysis. This structure regulates longitudinal growth and helps determine the structure of mature bone through the process of endochondral ossification. During human growth the femur's proximal growth plate experiences changes in its morphology that may be related to its mechanical environment. Thus, in order to test this hypothesis from a computational perspective, a finite element analysis on a proximal femur was performed on which we modeled different physeal geometries corresponding to the shapes acquired for this structure in a child between the ages of five to eleven. Results show augmented Von Mises stress values with increasing irregularities in physeal geometry, whereas displacement decreased with increased irregularities in the growth plate's morphology. Such observations suggest that growth plate's shape changes follows a possible mechanical adaptation on imposed loads to sustain a person's increasing body mass during growth. Growth plate stress depends on growth plate shape.Growth plate stress tends to decrease in concave growth plate shapes, corresponding to late stages in puberty.Relative displacement increases in concave growth plate shapes.Mechanical environment drives changes in growth plate shape.

The growth plate is a cartilaginous tissue located in the metaphysis of long bones that is responsible for their longitudinal growth. Such process is regulated in part by mechanical factors. In order to establish possible associations between specific mechanical stresses and biological responses in normal and pathological conditions, here it is presented a combined computational and experimental approach to this issues. Thus, initially we analyzed the mechanical environment within the growth plate at different developmental stages under physiological conditions, using finite element analysis. Then a mechanobiological model of cellular behavior within the growth plate was formulated, integrating biochemical, structural and mechanical factors. Finally, growth plate pathology was studied histologically in a genetic chondrodysplasia (MPS VI). and the potential effects of the observed abnormalities were explored using in silico modeling. Our results suggest that mechanical stimulation may play different roles during bone development. In addition, for the first time, it was described histologically the progression of the growth plate involvement in the rat model of MPSVI mainly characterized by loss of columnar arrangement. Moreover, it was evidenced that structural abnormalities observed in MPS VI growth plates rather than mechanical alterations may be an important factor contribution to skeletal pathology in this disease. This project is the first step towards the development of newr methodological approaches involving combined experimental and computational approaches to study growth plate behavior in physiological and pathological scenarios. Furthermore, results derived from this work will help elucidate mechanical events taking place within the growth plate and epiphysis during long bone growth. Additionally, the information generated may be useful to formulate h>potheses regarding mechanical influences on biological events taking place in normal and MPS bone growth. Doctor en Ciencias Biológicas Doctorado

espanolObjetivos: El objetivo del presente estudio era determinar si los condrocitos aislados de cinco pacientes ancianos (edad media 63 anos) con artrosis (grado 3) mantienen su proliferacion y potencial condrogenico. El aislamiento y cultivo de condrocitos fueron llevados a cabo de acuerdo a los estandares de buenas practicas de laboratorio. Metodos: Los condrocitos fueron aislados de una biopsia de cartilago mediante digestion enzimatica. El cultivo fue llevado a cabo en un ambiente controlado (sala blanca). La caracterizacion del fenotipo de los condrocitos se logro mediante analisis de citometria de flujo. Resultados: Tras tres semanas de cultivo se podian observar estructuras poligonales propias de los condrocitos, pero tambien se observaba morfologia de tipo fibroblasto en el cultivo. El analisis de la citometria de flujo revelo que el fenotipo de los condrocitos cultivados tras el primer pasaje era positivo para CD44 (98,92%), CD90 (97,11%) y negativo para el marcador hematopoyetico CD45 (0,10%). Conclusiones: Los condrocitos articulares humanos obtenidos de cinco pacientes ancianos con artrosis mantenian un fenotipo condrocitario y podrian ser potencialmente utilizados para la implantacion autologa. Las condiciones para el cultivo fueron establecidas de acuerdo a los estandares de buenas practicas de laboratorio para asi minimizar el riesgo de contaminacion celular in vitro. EnglishObjectives: The objective of the present study was to determine if chondrocytes isolated from human cartilage of five elderly patients (middle age 63) with osteoarthritis (stage 3) maintain their proliferation and chondrogenic potential. Isolation and cultivation of chondrocytes was performed according to good laboratory practice (GLP) standards. Methods: Chondrocytes were isolated from cartilage biopsy by enzymatic digestion. Cultivation of cells was performed in a controlled environment (cleanroom). Phenotype characterization of chondrocytes was achieved by flow cytometry analysis. Results: Three weeks after cultivation polygonal structures typical for chondrocytes were observed, but spindle/fibroblast like morphology was also detected in culture. Flow cytometric analysis showed that chondrocytes were positive for CD44 (98,35% ± 0,50), CD90 (97,15% ± 0,13) after first passage (P1) and the cells were negative for hematopoietic marker CD45 (0,21% ± 0,11). Conclusions: Human articular chondrocytes obtained from five elderly patients with osteoarthritis maintained a chondrocyte phenotype and could be potentially used for autologous implantation. We have standardized the conditions for cultivation according to GLP standards to minimize the risk of in vitro cell contamination.

[Resumen] OBJETIVO: Desarrollar un modelo in vitro de reparación de lesiones de cartílago articular humano basado en la capacidad de diferenciación condrogénica de las células mesenquimales estromales aisladas de médula ósea humana (CMEs-MOh) cultivadas sobre soportes de colágeno tipo I (Col I). METODOLOGÍA: Se aislaron CMEs-MOh a partir de biopsias de cadera. Estas células se caracterizaron morfológicamente y funcionalmente in vitro. Posteriormente, las CMEs-MOh se cultivaron sobre soportes de Col I donde, una vez comprobado que las células crecían sobre él, se introdujeron en los modelos de reparación in vitro para su cultivo en medio de diferenciación condrogénico. La valoración de la reparación se realizó empleando técnicas histológicas e inmunohistoquímicas y la escala de la International Cartilage Repair Society (ICRS) II modificada. RESULTADOS: A partir de médula ósea (MO) de cadera, se obtuvieron CMEs-MOh. La caracterización morfológica y funcional in vitro de estas células puso de manifiesto que se trataba de células mesenquimales estromales. Las CMEs-MOh fueron capaces de crecer, diferenciarse y formar un neotejido en el modelo de reparación, obteniendo una reparación de cartílago articular del 54%, denominada “fibrocartílago”. CONCLUSIONES: Se consiguió obtener y aislar CMEs-MOh a partir de biopsias de cadera. El análisis morfológico y la capacidad de diferenciación adipogénica, osteogénica y condrogénica, permite considerar a las células aisladas como CMEs-MOh. Estas células, cultivadas sobre Col I, tienen capacidad de crecer, diferenciarse a células con características similares a condrocitos y producir un neotejido en el interior de las lesiones de cartílago articular. [Abstract] AIM: To develop an in vitro model of human cartilage repair based on the chondrogenic potential of mesenchymal stromal cells, isolated from human bone marrow (CMEs-MOh), cultured on type I collagen (Col I) scaffolds. METHODOLOGY: CMEs-MOh were isolated from hip biopsies. These cells were characterized morphologically and functionally in vitro. Subsequently, CMEs-MOh were cultured on Col I scaffolds where, once it had been verified that the cells grew on them, they were introduced inside the in vitro repair model and cultured in chondrogenic medium. The evaluation of repair was performed using histological and inmunochemistry techniques and the modified International Cartilage Repair Society (ICRS) II scale. RESULTS: CMEs-MOh were obtained from hip bone marrow. Morphological, and functionally characterization of these cells demonstrated that they were CMEs. These cells were able to grow, differentiate and synthesize a neotissue in the in vitro repair model, obtaining a cartilage repair of 54%, denominated “fibrocartilage”. CONCLUSIONS: CMEs-MOh were obtained and isolated from hip biopsies. The morphological and adipogenic, osteogenic and chondrogenic differentiation analysis, allow to consider these cells as CMEs-MOh. Cells isolated from human bone marrow, grew on Col I, differentiated to chondrocyte-like cells and synthesized a cartilage-like neotissue, inside the lesions of the in vitro cartilage repair model. Traballo fin de mestrado (UDC.CIE). Biotecnoloxía avanzada. Curso 2015/2016