Search

Tato diplomová práce je zaměřena na enkapsulaci probiotik a testování možností koenkapsulace s některými typy prebiotik. Teoretická část se zabývá probiotiky, jejich obecnou charakterizací a možností využití probiotických kultur ať už v potravinářském průmyslu jako doplňky stravy nebo v kosmetickém průmyslu. Dále jsou popsány prebiotika a jejich rozdělení, proces enkapsulace a jednotlivé techniky enkapsulace. V této části jsou také popsány vybrané metody, které byly využívány k analýze částic a enkapsulovaných složek. V experimentální části byla nejprve provedena charakterizace zvolených prebiotik, a to pomocí spektrofotometrických metod, tenkovrstevné chromatografie a vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Následně byla testována možnost kultivace probiotik s přídavkem prebiotika v nehydrolyzované i hydrolyzované formě. S využitím průtokového cytometru byla stanovená rovněž viabilita buněk. Na závěr byly probiotika společně s prebiotiky enkapsulovány do alginátových částic s využitím enkapsulátoru a po dobu 6 týdnů byla sledována jejcih dlouhodobá stabilita v modelovém prostředí. Částice byly také vystaveny působení umělé pankreatické, žaludeční a žlučové šťávy., This diploma thesis is focused on encapsulation probiotics and co-encapsulation with some types of prebiotics. In theoretical part is aimed to probiotics, their general characteristics and application of probiotics in food industry. There are described prebiotics and their classification, there is described principles of encapsulation and encapsulation techniques. Methods, which are used for analysis of particles and encapsulation components were introduced too. The experimental part describes methods of prebiotics characterization by high performance liquid chromatography, thin layer chromatography and spectrophotometric methods. Cultivation of probiotics with prebiotics - hydrolyzed and non-hydrolyzed wad tested. Using flow cytometry cell viability was measured too. Finally probiotics and prebiotics were encapsulated, mainly by encapsulator machine. Long-term stability of particles during 6 week storage was observed. The particles were exposed to effect of artificial intestinal, gastric and bile juices.

Probiotické bakterie mléčného kvašení a bifidobakterie jsou přirozenou součástí gastrointestinálního traktu a v současnosti velmi využívané v potravinářském průmyslu ve formě potravinových doplňků. Cílem diplomové práce byla molekulární identifikace bakterií rodu Lactobacillus a Bifidobacterium v komplexních matricích dvou potravinových doplňků. DNA byla izolována z hrubých lyzátů buněk pomocí magnetických částic P(HEMA-co-GMA). Izolovaná DNA byla amplifikována v rodově a druhově specifických PCR. Amplikony byly detekovány pomocí agarózové gelové elektroforézy. Výsledky byly porovnány s údaji deklarovanými výrobcem ve třech různých šaržích., Probiotic lactic acid bacteria and bifidobacteria are natural part of microflora of gastrointestinal tract. In the present, day they are grossly exploited in food processing industry. The aim of the work was molecular identification of bacteria of genus Lactobacillus and Bifidobacterium in complex matrices of two food additives. Total DNA was isolated from crude cell lysates by magnetic particles P(HEMA-co-GMA). Isolated DNA was amplified in genus-specific and species-specific PCRs. Amplicons were detected by agarose gel electrophoresis. Results were compared with declared specification given by producers in three different batches.

Baktérie mliečneho kvasenia sa prirodzene vyskytujú v gastrointektinálnom trakte človeka. Medzi najvýznamnejšie patria rody Lactobacillus a Bifidobacterium, ktoré obsahujú rad probiotických druhov. Probiotické druhy tvoria súčasť doplnkov stravy. Na presnú a rýchlu identifikáciu tohto rodu a jeho druhov sa využívajú DNA amplifikačné metódy. Cieľom tejto práce bola izolácia a purifikácia DNA z vybraných doplnkov stravy pomocou magnetického nosiča P(HEMA-co-GMA), pokrytého karboxylovými skupinami, v prítomnosti PEG 6000 (16%) a NaCl (2 M) (konečné koncentrácie). Na izoláciu boli použité hrubé lyzáty buniek. Zo 4 doplnkov stravy bol pripravený hrubý lyzát buniek pomocou lyzozýmu, SDS a proteinázy K. Bola uskutočnená optimalizácia množstva pridaného lyzozýmu: 6, 9, 10, 15, 20 a 25 mg/ml). Koncentrácia DNA vo vzorkách bola zmeraná spektrofotometricky. Izolovaná DNA bola použitá ako matrica pre PCR, a to pre PCR s univerzálnymi primermi (veľkosť PCR produktu: 466 bp), rodovo špecifickú PCR pre rod Lactobacillus, rod Bifidobacterium a druhovo špecifické PCR pre druh Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, pre skupinu Lactobacillus casei/paracasei, pre druh Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum a Bifidobacterium infantis. Amplifikované PCR produkty boli preukázané pomocou gélovej agarózovej elektroforézy. Výsledky boli porovnané s údajmi uvedenými výrobcami. Vo všetkých výrobkoch boli preukázané baktérie deklarovaných rodov., Lactic acid bacteria are natural habitants of human gastrointectinal tract. Among the most important are bacteria of genus Lactobacillus and genus Bifidobacterium that contain a lot of probiotic species. Probiotic species are used as food supplements. This work was focused on DNA separation from crude cell lysates of 4 food supplements using magnetic carrier P(HEMA-co-GMA) covered by carboxyl groups. DNA was reversible adsorbed to the carriers in the presence of PEG 6000 (16%) and NaCl (2 M) (final concentrations) and eluted into TE buffer. Lysis of cells from food supplements was performed by lysozyme, SDS and proteinase K. The amount of lysozyme was optimalized. Concentration of separated DNA was measured by spectrophotometric method. The amount of isolated DNA was suitable for PCR. Isolated DNA was used for PCR with universal primers, PCR specific for genus Lactobacillus and genus Bifidobacterium and for 9 different species-specific PCRs: Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei/paracasei, Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum and Bifidobacterium infantis. Amplicons were detected by agarose gel electrophoresis (1,8%). It was shown that DNA amplification methods are quick and precise for identification of studied species. The results of bacteria identification were compared with data provided by the manufacturer. In all food supplements, bacteria of genus Lactobacillus and Bifidobacterium were detected. However, only some species provided by manufacturer were identified by PCR in each tablet.

Na onemocnění celiakie a dalších onemocnění související s konzumací lepku nebyla doposud nalezena jiná léčba než celoživotní dieta, která je ovšem značně pro nemocného omezující. Navíc ne vždy je tuto dietu možné zcela dodržet, hlavně vlivem neúmyslného pozření lepku, přičemž nastávají zdravotní komplikace spojené s těmito onemocněními. Jako alternativa léčby je momentálně ve stádiu klinického testování vakcinace a stále více pozornosti se také věnuje enzymům, které by dokázaly rozštěpit imunosekvenční část lepku, konkrétně v jeho gliadinové části. V této práci byly zkoumány bakterie, které by mohly dokázat tuto sekvenci v gliadinu rozštěpit a tím snížit jeho koncentraci při detekci. Značná část testovaných bakterií se řadí mezi probiotika, aby bylo jejich případné budoucí použití pro člověka bezpečné. Pro získání dat se využilo poznatku, kdy s rostoucími bakteriemi roste přímo úměrně i zákal, který byl následně detekován na určení množství nárůstu bakteriální kultury. Pro samotný test na detekci gliadinu se využil kit RIDASCREEN® Gliadin competitive pracující na principu kompetitivní ELISA metody s protilátkami R5. Výsledkem práce bylo zjištění, že ze zkoumaných bakterií byla pouze bakterie Bacillus subtilis schopna štěpit gliadin. Bylo také změřeno, jaké množství gliadinu dokáže při různé koncentraci bakterie rozštěpit a dle dat bylo také vyhodnoceno, že pro větší množství rozštěpeného gliadinu je vhodné kulturu nejprve adaptovat na přítomnost gliadinu., No other treatment for celiac disease and other gluten-related disorders has been found so far except for a lifelong diet, which is significantly restrictive for the patient. Moreover, it is not always possible to adhere strictly to this diet, mainly due to random gluten ingestion, which leads to health complications associated with these diseases. Currently, vaccination is being tested as an alternative treatment, and there is also increasing attention paid to enzymes that could break down the immunogenic part of gluten, specifically in its gliadin component. This thesis examined bacteria that could potentially break down this sequence in gliadin and thereby reduce its concentration during detection. A considerable proportion of the tested bacteria belong to probiotics to ensure their future use for humans is safe. To obtain data, the fact was utilized that as bacteria grow, the turbidity increases proportionally, which was subsequently detected to determine the amount of bacterial growth. The RIDASCREEN® Gliadin competitive kit was used for the gliadin detection test, which works on the principle of a competitive ELISA method with R5 antibodies. The result of the study was the finding that only the bacteria Bacillus subtilis was able to break down gliadin among the examined bacteria. It was also measured how much gliadin the bacteria could break down at different concentrations, and according to the data, it was evaluated that it is appropriate to adapt the culture to the presence of gliadin for a greater amount of broken gliadin.

V současné době roste zájem o užívání probiotických výrobků a na trhu je jich celá řada. S rostoucím zájmem je kladen i větší důraz na identifikaci deklarovaných probiotických mikroorganismů. Přesná identifikace mikrobiálního složení je často nelehkým úkolem a je zapotřebí pokročilejších metod, zejména z oblasti molekulární diagnostiky. Diplomová práce byla zaměřena na ověření přítomnosti deklarovaných probiotických mikroorganismů v probiotických doplňcích stravy GS Laktobacily Forte 21, Biopron 9 Premium a Linex® Forte. DNA byla z komplexních matric izolována fenolovou extrakcí, komerčním kitem a magnetickými nosiči F79/L3-PLL v kvalitě vhodné pro PCR. Následně byla izolovaná DNA amplifikována polymerázovou řetězovou reakcí v reálném čase s využitím rodově a druhově specifických primerů. Specifický PCR produkt byl podroben agarózové gelové elektroforéze, přičemž druhová identifikace nebyla vždy v souladu s údaji deklarovanými výrobci. Další část práce se zabývala polymerázovou řetězovou reakcí s vysokorozlišovací analýzou křivek tání za účelem rozlišení bakteriálních kmenů patřících do skupiny Lactobacillus a za účelem identifikace probiotických mikroorganismů přítomných ve směsi v probiotických doplňcích stravy. Bylo testováno osm sad primerů (V1F HRM a V1R-HRM, CHAU-V3F a CHAU-V3R, CHAU-V6F a CHAU-V6R, LAC2 a LAC4, LAC1 a LAC2, P1V1 a P2V1, poxcDNAFw a poxPromRVC, poxcDNAFw a poxPromRVT). Jako nejvhodnější pro rozlišení bakteriálních kmenů rodu Lactobacillus byly vyhodnoceny tři dvojice primerů (V1F HRM a V1R-HRM, poxcDNAFw a poxPromRVC, poxcDNAFw a poxPromRVT)., Currently, there is a growing interest in the use of probiotic products, and there are many of them in the market. With the growing interest, greater emphasis is placed on the identification of declared probiotic microorganisms. Precise identification of microbial composition is often a difficult task and it requires more advanced methods especially in the field of molecular diagnostics. The diploma thesis was focused on the verification of the presence od declared probiotic microorganisms in probiotic food supplements GS Laktobacily Forte 21, Biopron 9 Premium and Linex® Forte. DNA was isolated from the complex matrices by phenol extraction, commercial kit and magnetic carriers F79/L3-PLL in the quality suitable for PCR. Subsequently, the isolated DNA was amplified by real-time polymerase chain reaction using genus- and species-specific primers. The specific PCR product was subjected to agarose gel electrophoresis, whereas species identification was not always in compliance with the data declared by producers. The next part of the thesis was focused on polymerase chain reaction with high-resolution melting analysis to distinguish bacterial strains belonging to the Lactobacillus group and to identify probiotic microorganisms present in the complex matrices of the probiotic food supplements. Eight primer sets were tested (V1F HRM a V1R-HRM, CHAU-V3F a CHAU-V3R, CHAU-V6F a CHAU-V6R, LAC2 a LAC4, LAC1 a LAC2, P1V1 a P2V1, poxcDNAFw a poxPromRVC, poxcDNAFw a poxPromRVT). Three primer pairs (V1F HRM a V1R-HRM, poxcDNAFw a poxPromRVC, poxcDNAFw a poxPromRVT) were evaluated as the most suitable for distinguishing Lactobacillus bacterial strains.

Díky velkému pokroku ve vědě, medicíně a poznání člověk dosáhl v léčení vysoké úrovně. Nicméně, i v dnešní době se lidstvo snaží o návrat ke svým kořenům – přírodě a využít ji pro udržení svého pevného zdraví. Pojmem probiotika se myslí živé mikroorganismy, které jsou schopny usídlit se v lidském střevě a mít zde kladný vliv na udržení zdravé střevní mikrofóry, což se dále promítne pozitivními účinky na lidské zdraví obecně. Firma Valosun a.s. poskytla pro testování probiotický potravní doplněk pro děti, který byl vyzkoušen matkami s dětmi předškolního věku a těhotnými. Cílem našeho sociologického průzkumu, bylo zjistit, jaká je informovanost o problematice probiotik v této skupině, dále jak vnímají dotazované dostupnost probiotik a jaké jsou nejčastější důvody pro jejich užívání., With great advances in science, medicine and knowledge of a man at the high level of treatment. However, even today the humanity seeking to return to its roots - the nature and use it to maintain its good health. The term probiotics is meant by living organisms that are capable of resettling in the human intestine and have a positive impact on maintaining healthy intestinal microorganisms, which also reflected the positive effects on human health in general. Company Valosun a.s. provided for testing probiotický food supplement for children, which was tested mothers with children preschool age and pregnant. The aim of our sociological survey was to determine what is the awareness of the issue of probiotics in this group, the perception of the queried the availability of probiotics and what are the most common reasons for their use.

Tato práce pojednává o izolaci probiotické DNA z masných výrobků a jejím stanovení pomocí metod PCR. V práci je vyvinuta metoda homogenizace vzorků salámů kopistem, příprava hrubých lyzátů buněk salámů a izolace DNA z lyzátů buněk pomocí a magnetických mikročástic. DNA byla izolována z hrubých lyzátů salámů pomocí magnetických mikročástic. Izolovaná DNA pak byla amplifikována v rodově i druhově specifických PCR. V testovaných výrobcích byla prokázána přítomnost DNA domény Bacteria, rodů Lactobacillus a Bifidobacterium. V jednom výrobku byla prokázána DNA druhů Lactobacillus acidophilus a Bifidobacterium., This thesis deals with the isolation of probiotic DNA from meat products and its assesment by PCR methods. In this thesis is developed homogenization of samples of sausages with kopist, preparation of sausage cells lysates and isolation of DNA by using of magnetic microparticles. The DNA was isolated from sausage lysates by using magnetic microparticles. Isolated DNA was further amplified in genus and spesies-specific PCR methods. In tested products was proven presence of DNA of domain Bacteria, type Lactobacillus and Bifidobacterium. In one product was proven presence of species Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium animalis.

Napriek vysokej úrovni vedy a medicíny sa ľudia snažia vrátiť k prírode a využiť ju pre svoje zdravie. Napríklad sa snažia využiť probiotiká, čo sú živé kultúry, schopné usídliť sa v ľudskom čreve a tu vykonávať svoju činnosť. Teoretická časť bakalárskej práce sa zaoberá probiotickými baktériami, ich vlastnosťami ako aj vlastnosťami, ktoré sú dôležité pre potravinársky priemysel a hlavne sa zameriava na probiotiká využívané v detskej výžive. Experimentálna časť je zameraná na analýzu dvoch potravinových výrobkov pre deti (BioLac Baby a Probacílium+). Z týchto produktov bola vyizolovaná DNA metódou fenolovej extrakcie a pomocou magnetických nosičov. Celková izolovaná DNA z výrobkov bola amplifikovaná rodovo špecifickou PCR., Despite of the high level of science and medicine, people are trying to return to the nature and use it for their lives. For example, they are using probiotics, which are live cultures able to reside in the human intestine and there can start their role. The teoretical part of this bachelor thesis deals with probiotic bacteria, their properties and those properties which are important in the food industry and the main part focuses on the probiotics used in baby food. The experimental part of the thesis targets on an analysis of two probiotic supplements for children (BioLac Baby and Probacílium+). There was a DNA isolated from these two products by method of phenol extraction and using magnetic media. The whole DNA isolated from these products was amplificated by genus-specific PCR.

Teoretická část bakalářské práce je zaměřena na probiotika v mléčných výrobcích a zejména na molekulárně genetické metody využívané k analýze DNA. Pozornost je věnována především metodám stanovení bakteriálních buněk rodu Lactobacillus. Základní technikou je v současné době zejména polymerázová řetězová reakce (PCR), při které dochází k amplifikaci specifických úseků DNA pomocí krátkých oligonukleotidových primerů. V praktické části práce je izolována celková DNA z čisté bakteriální kultury a probiotického mléčného výrobku metodami fenolové extrakce a magnetické separace za využití magnetických nosičů P(GMA) pokrytých karboxylovými funkčními skupinami. Kvalita izolované DNA byla potvrzena amplifikací v PCR za použití primerů specifických pro doménu Bacteria, Lactobacillus a Biffidobacterium., The theoretical part of the thesis is focused on probiotics in dairy products. Thesis deals with molecular genetic methods, which are used to analyze DNA. Especially are discussed methods used for isolation bacterial cells belonging to genus Lactobacillus. The polymerase chain reaction (PCR) is the basic technique at present time. Short chain of oligonucleotide primers are used to amplification specific parts of DNA molecule chain. The practical part of the thesis is focused on the DNA from pure bacterial culture and probiotic dairy product. DNA was isolated using methods of phenol-chloroform extraction and magnetic separation. For magnetic separation was used magnetics particles covered with carbonyl functional groups. Quality of the DNA was confirmed by PCR amplification. Primers specific for domain Bacteria and genus Lactobacillus and Bifidobacterium was used.

V teoretické části práce se pojednává o současném stavu a výzkumu probiotik a prebiotik, jejich využitelnosti pro modulaci mikroflóry hostitele a jejich příznivých účincích na zdraví jedince. Dále je pojednáno o problematice účinnosti probiotických kmenů, která závisí na použité potravinové matrici a na řadě dalších faktorů. Experimentální je zaměřena na identifikaci vybraného bakteriálního kmene obsaženého v probiotickém výrobku. Bakteriální DNA byla z výrobku izolována metodou fenolové extrakce a pomocí magnetických nosičů s následnou analýzou získané DNA metodou polymerázové řetězové reakce (PCR)., Theoretical part of this thesis focuses on present state and research of probiotics and prebiotics, their use for microflora modulation of host and their beneficial effects on the health of individuals. Furthermore thesis deals with efficiency of probiotics strains, which depends on the food matrix and other various factors. The experimental part focuses on the identification of chosen bacterial strain, which is contained in probiotics product. It is realized due the isolation of bacterial DNA by phenol extraction and by use of magnetic particles and subsequent analysis of obtained DNA by polymerase chain reaction (PCR).

V teoretické části se pojednává o současném stavu a výzkumu rekombinantních probiotik, jejich využitelnosti v potravinářství a zdravotnictví. Dále se zabývá jejich příznivými účinky na zdraví jedince. Experimentální část je zaměřena na identifikaci určitého bakteriálního kmene v probiotických doplňcích stravy. Z těchto výrobků byla izolována DNA pomocí magnetických mikročástic a následně analyzována pomocí polymerázové řetězové reakce., Theoretical part of this thesis focuses on present state and research of recombinant probiotics and their use in food industry and health care. It also concentrates on their beneficial effects on the health of individuals. The experimental part focuses on the identification of specific bacterial strain in a probiotics food supplements. The DNA was isolated from these products by use of magnetic microparticles and obtained DNA was subsequently analysed through polymerase chain reaction.

Práce je rozdělena na dvě části, a to na teoretickou a experimentální část. V teoretické části práce je uvedena definice probiotik, zástupci těchto probiotických mikroorganismů a jejich využití v klinické praxi i v procesu fermentace. Dále jsou popsány mechanismy účinku probiotik v organismu. V experimentální části je analyzován komerční a domácí produkt makgeolli na přítomnost probiotik pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR)., The Bachelor’s thesis is divided into two parts, namely theoretical and experimental. The theoretical part provides a definition of probiotics, representatives of these probiotic microorganisms, and their use in clinical practice as well as in the fermentation process. Furthermore, the mechanisms of action of probiotics in the organism are described. In the experimental part, the presence of probiotics in commercial and homemade makgeolli products is analyzed using polymerase chain reaction (PCR).

Předmětem této bakalářské práce bylo prozkoumat antimikrobiální aktivitu probiotických bakterií a zjistit, jaký vliv na ni mají prebiotika a izoláty z rostlin. Probiotika jsou bakterie, které mají zdravotní benefity pro člověka. Jejich hlavní použití je v potravinářském průmyslu, jako startovacích kultur fermentace, kdy při tomto procesu produkují antimikrobiální látky, které podporují odolnost vůči patogenním bakteriím a prodlužují dobu trvanlivosti fermentovaných potravin. Díky jejich antimikrobiálním vlastnostem je vyvíjena snaha najít další využití těchto metabolických produktů v potravinářském průmyslu. Nicméně další uplatnění probiotik je velice limitující, protože se jedná o živé organismy. Postup, který by mohl napomoci využití živých probiotik, je jejich enkapsulace s prebiotiky. V experimentální části bakalářské práce byl sledován nárůst probiotik v komerčním médiu a v minimálním médiu. Minimální médium je vhodné pro izolaci, metabolických produktů, jako jsou kyselina mléčná a bakteriociny. Dále byl sledován vliv obohaceného média o kombinace prebiotika-inulinu a esenciálních olejů z oregana a tymiánu na produkci biomasy. V druhé části byla analyzována kyselina mléčná a antimikrobiální aktivita kultur v jednotlivých médiích a kultur v komerčním médiu s aditivy. Pomocí antimikrobiálních testů bylo prokázáno, že esenciální olej z tymiánu a inulin mají pozitivní vliv na antimikrobiální působení probiotik. Pomocí výsledků z první a druhé části měření bylo minimální médium prokázáno jako nevhodné pro kultivaci vybraných probiotik, protože nárůst a antimikrobiální aktivita izolátů z tohoto média byla velice nízká. V třetí části byly zhotoveny částice pomocí enkapsulace probiotik s prebiotiky a esenciálními oleji a byl sledován nárůst probiotické kultury z daných částic. Výsledkem bylo, že probiotika z částic se během 15 dní postupně uvolňovaly do média a narůstaly. Následně bylo navrženo využití těchto částic v potravinářském průmyslu a jejich další zkoumání., Subject of this bachelor thesis was to investigate the antimicrobial activity of selected probiotic strains and determine how the probiotic growth is affected probiotic growth by prebiotics and essential oils. Probiotics are bacteria, which positively affect human health. They are mainly used in food industry as fermentation starter cultures, where they produce antimicrobial compounds that support resistance to pathogenetic bacteria during the fermentation process. In general, fermentation process is used to prolong the shelf-life of foodstuff. However, the applications of probiotics are very limited in food or other industry because probiotics are living organisms, so at least the industry tries to use their metabolic products. The method of encapsulation could support the usage of probiotics in other unusual ways. In experimental part of this thesis, the growth of probiotics was studied in both commercial MRS broth and in minimal broth, which could help with isolation of bioactive metabolic products such as lactic acid and bacteriocins. Additionally, the effect of prebiotic-inulin and essential oils from oregano and thyme on probiotics growth was investigated. In the second part of thesis, the content of lactic acid was analysed and antimicrobial activity of selected probiotic strains and effect of additives on activity was tested. Antimicrobial test discovered that prebiotics and essential oil from thyme enhanced the antimicrobial activity of tested samples. Also, the minimal broth was shown to be unsustainable for cultivation of used probiotics because selected strains exhibited small production of biomass and very low antimicrobial activity. In the third part, the probiotic strain was encapsulated with prebiotic and essential oil into alginate particles. Bacterial growth from the particles in MRS broth was investigated over period of 15 days. Results of this measurement were that probiotics were gradually released from particles over the period. Subsequently th

Bakalářská práce se zabývá vlivem lékařských hub a dalších prebiotik na růst a biologickou aktivitu probiotických bakterií. Vybrané rody bakterií mléčného kvašení Bifidobacterium a Lactobacillus produkují antimikrobiální látky bakteriociny a jejich produkce je závislá na kultivačních podmínkách a dostupných zdrojích živin. Teoretická rešerše popisuje a charakterizuje probiotické bakterie, jejich metabolismus a význam pro lidské zdraví. Podobným způsobem se teoretická část věnuje prebiotikům a jejich vybraným zástupcům, kterými jsou čtyři druhy lékařských hub, mikroskopická řasa rodu Chlorella, rezistentní škrob, buněčná biomasa kvasinky Saccharomyces cerevisiae a doplňky stravy jako inulin a psyllium. V rámci experimentální části byly připraveny z těchto prebiotik extrakty třemi různými způsoby – varem, louhováním a hydrolýzou. Získané extrakty byly charakterizovány z hlediska obsahu makronutrientů, jako byly sacharidy a bílkoviny. Na základě růstu čtyř druhů bakterií mléčného kvašení kultivovaných ve standardním médiu a jejich produkce antimikrobiálních látek byl pro kultivaci v prebiotických extraktech vybrán kmen Bifidobacter bifidum. Po stanovení nárůstu probiotické biomasy v médiích s prebiotiky byly kultury odstředěny a v bakteriálním supernatantu byl stanoven obsah proteinů. V lyofilizovaných probiotických extraktech byl stanoven obsah kyseliny mléčné vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií, a nakonec proběhlo stanovení antimikrobiální aktivity bujónovou diluční metodou a resazurinovým testem viability. Výsledky antimikrobiálních testů byly srovnány s antimikrobiální aktivitou kyseliny mléčné o stejné koncentraci, v jaké byla obsažena v probiotických extraktech. Pro nejvyšší obsah makronutrientů v prebiotických extraktech je nejvhodnější metodou extrakce var. Pro nerozpustné polysacharidy typu rezistentního škrobu je vhodná hydrolýza, ovšem ta vyžaduje následnou úpravu extraktu, aby poskytoval vhodné podmínky pro kultivaci. Extrakty připraveny varem nejvíce, The bachelor thesis deals with the influence of medicinal mushrooms and other prebiotics on the growth and biological activity of probiotic bacteria. Selected genera of lactic acid bacteria Bifidobacterium and Lactobacillus can produce antimicrobial substances bacteriocins and their production depends on cultivation conditions and available nutrient sources. The theoretical review describes and characterizes probiotic bacteria, their metabolism and importance for human health. Similarly, the theoretical section focuses on prebiotics and their selected representatives, which are four species of medicinal fungi, the microscopic algae Chlorella, resistant starch, the cell biomass of the yeast Saccharomyces cerevisiae and dietary supplements such as inulin and psyllium. In the experimental part, extracts were prepared from these prebiotics by three different methods - boiling, macerating and hydrolysis. The obtained extracts were characterized in terms of macronutrient content such as carbohydrates and proteins. Based on the growth of four species of lactic acid bacteria cultured in standard medium and their production of antimicrobial substances, a strain of B. bifidum was selected for cultivation in the presence of prebiotic extracts. After determining the increase in probiotic biomass in the prebiotic extracts, the cultures were centrifuged, and the protein content of the bacterial supernatant was determined. The lactic acid content of the lyophilized probiotic extracts was determined by high-performance liquid chromatography, and finally, the antimicrobial activity was determined by broth dilution method and resazurin viability assay. The results of the antimicrobial tests were compared with the antimicrobial activity of lactic acid at the same concentration as that contained in the probiotic extracts. For the highest macronutrient content of the prebiotic extracts, extraction by boiling was the most suitable method. For insoluble polysaccharides such as resistant s

Cílem bakalářské práce bylo bylo zkoumat možnosti identifikace probiotických mikroorganismů pomocí molekulárně diagnostických technik, jako je PCR a HRM-PCR, v komerčně dostupném výrobku – Probiolact Forte 12. V teoretické části byla provedena literární rešerše zaměřená na probiotika nové generaci. V praktické části byla provedena kultivace mikroorganismu obsažených vjedné tobolce vtekutém mediu a na tuhém media. Byla provedena izolace DNA pomocí komerčního kitů NucleoSpin Microbial DNA dle pokynu výrobce. Čistota a koncentrace izolované DNA byly ověřeny pomocí spektrofotometrické analýzy. Kidentifikace DNA byly použité primery pro specifickou PCR analýzu DNA domény Bycteria a jednotlivých rodů a druhů, jejichž přítomnost výrobce vpreparátu deklaruje. Výsledky PCR analýzy potvrdily přítomnost cílové DNA, tedy bakteriálních rodů a druhů ve preparátu, dle tvrzení výrobce., The aim of the bachelor thesis was to examine the possibilities of identifying probiotic microorganisms using molecular diagnostic techniques such as PCR and HRM-PCR in a commercially available product – Probiolact Forte 12. In the theoretical part, a literature review focused on next-generation probiotics was conducted. In the practical part, cultivation of microorganisms contained in one capsule in liquid medium and solid media was performed. DNA isolation was carried out using the NucleoSpin Microbial DNA commercial kit according to the manufacturer's instructions. The purity and concentration of isolated DNA were verified using spectrophotometric analysis. Primers for specific PCR analysis of DNA domains Bacteria and individual genera and species, whose presence the manufacturer declares in the preparation, were used for DNA identification. The results of the PCR analysis confirmed the presence of the target DNA, i.e., bacterial genera and species in the preparation, as claimed by the manufacturer.

Tato bakalářská práce se zaměřuje na ověření přítomnosti probiotických bakterií v kosmetickém přípravku pomocí techniky polymerázové řetězové reakce (PCR). Teoretická část poskytuje přehled o probiotikách, jejich aplikaci v kosmetice a vlivu na stav pokožky. Dále jsou zde popsány nejčastěji používané molekulárně-biologické metody identifikace probiotických organismů. V praktické části se práce zaměřuje na izolaci bakteriální DNA z kosmetického přípravku a její následnou amplifikaci metodou PCR. Amplifikované produkty byly analyzovány pomocí elektroforézy na agarózovém gelu a detekovány UV zářením. Výsledky ukázaly přítomnost bakterií rodů Lactobacillus a Bifidobacterium, avšak nebyla potvrzena přítomnost bakterií rodu Lactococcus, které byly deklarovány výrobcem spolu s výše uvedenými rody., This bachelor thesis focuses on the verification of the presence of probiotic bacteria in a cosmetic product using the polymerase chain reaction (PCR) technique. The theoretical part provides an overview of probiotics, their application in cosmetics and their effect on skin condition. Furthermore, the most commonly used molecular biological methods for the identification of probiotic organisms are described. In the practical part, the work focuses on the isolation of bacterial DNA from cosmetic products and its subsequent amplification by PCR. The amplified products were analyzed by agarose gel electrophoresis and detected by UV irradiation. The results showed the presence of bacteria of the genera Lactobacillus and Bifidobacterium, but the presence of bacteria of the genus Lactococcus, which were declared by the manufacturer together with the above genera, was not confirmed.

Cílem této bakalářské práce byla optimalizace a vývoj probiotického doplňku stravy s atraktivním vzhledem a s obsahem aktivní složky, jako je prebiotikum nebo „superpotravina“, které mají za úkol obohatit výrobek o zdraví prospěšné látky. V teoretické části se práce zaměřuje na objasnění problematiky probiotik a jejich enkapsulace, na používaná prebiotika a na screening na trhu dostupných probiotických doplňků stravy pro děti. V praktické části se práce zaměřuje na optimalizaci složení nového probiotického doplňku stravy, připraveny byly polysacharidové částice ve tvaru medvídka. Nejprve bylo optimalizováno základní složení, jako nejvhodnější byly vybrány alginát-agarové částice. Dále byla provedena optimalizace přídavku výživově cenných složek. Byly připraveny částice s obsahem inulinu, aceroly, chia vlákniny, jakon sirupu a směsi chlorelly a spiruliny. Další část práce byla zaměřena na stanovení viability probiotických bakterií Lactobacillus acidophilus a Bifidobacterium breve v různých formách, které byly podrobeny modelovému trávení. Nejvyšší viabilita buněk byla po trávení zaznamenána v případě, kdy byly lyofilizované buňky enkapsulovány do polysacharidové částice. Všechny připravené částice byly na závěr podrobeny senzorické analýze., This bachelor thesis is focused on optimization and development of probiotic food supplement with attractive look and active ingredient, like prebiotic or “superfood”, which are there for afford useful substances for organism. In the theoretical part is focused on probiotics and its encapsulation, also on prebiotics, which are used for work and screening probiotics food supplements in our market. The practical part is focused on optimization of composition of new probiotic food supplement, polysaccharide particles in the shape of a teddy bear were prepared. At first, the basic composition was optimized, as the best alginate-agar particles were determined. Addition of nutritionally valuable ingredients was also optimized. Particles with inulin, acerola, chia fiber, yacon syrup, chlorella and spirulina were prepared. Another part of this work was focused on the determination of the viability of probiotic bacteria Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium breve in various forms and after exposed to model digestion. The highest viability of the cells was measured after encapsulation of lyophilized cells into a polysaccharide particle. Prepared particles were finally subjected to a sensory analysis.

Probiotické bakterie byly tradičně používány v potravinářském průmyslu, avšak v současnosti jsou také široce aplikovány k prevenci a léčbě různých onemocnění. Rostoucí počet důkazů o účinnosti bakterií rodu Lactobacillus v ústní dutině vedl k aplikaci probiotických kmenů tohoto rodu v ústních vodách a jiných produktech osobní hygieny. V rámci této bakalářské práci DNA byla izolována dvěma metodami, následně kvantifikovaná spektrofotometricky a amplifikována pomocí konvenční PCR. Výsledky polymerázové řetězové reakce byly detekovány prostřednictvím gelové elektroforézy. Přítomnost bakterií probiotických druhů Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus plantarum a Lactobacillus pentosus byla ověřená., Probiotic bacteria have traditionally been used in the food industry, but their applications have now expanded to the prevention and treatment of various diseases. Increasing evidence supports the efficacy of bacteria of the genus Lactobacillus in the oral cavity has led to the application of probiotic strains of this genus in mouthwashes and other personal care products. In this bachelor thesis, DNA was isolated by two methods, then quantified spectrophotometrically and amplified via conventional PCR. The results of the polymerase chain reaction were detected by gel electrophoresis. The presence of probiotic bacteria species Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus plantarum and Lactobacillus pentosus was confirmed.

Probiotika jsou prospěšné mikroorganismy, které při správném podávání schopny přinášet hostiteli zdravotní benefity, například podporu trávení a posílení imunitního systému. Jejich účinnost a přínosy závisí na konkrétním kmenu mikroorganismu. Proto je velmi důležitě mít metody rychlé a spolehlivé pro identifikaci MO. Tyto kmeny jsou často z rodů Lactobacillus, Bifidobacterium, a představují přirozené hostiteli gastrointestinálního traktu. Tato bakalářská práce se zaměřuje na identifikaci probiotických bakterií v komerčně dostupném doplňku stravy Linex® Forte pomocí molekulárně biologických metod, především polymerázové řetězové reakce (PCR). Cílem bylo ověřit přítomnost deklarovaných probiotických kultur Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium animalis, a porovnat výsledky s údaji uvedenými výrobcem. K tímto účelům byly použity dvě metody izolace DNA: fenolchloroformová extrakce a komerční purifikační kit OMNI International. Následně byla izolovaná DNA analyzována pomocí doménově, rodově a druhově specifické PCR. Výsledky ukazují, že použité metody jsou vhodné pro identifikaci probiotických bakterií a potvrzují jejich přítomnost ve vybraném výrobku., Probiotics are beneficial microorganisms that, when administered properly, can provide health benefits to the host, such as aiding digestion and boosting the immune system. Their effectiveness and benefits depend on the specific strain of microorganism. These strains are often from the genera Lactobacillus, Bifidobacterium, and represent natural hosts of the gastrointestinal tract. This bachelor thesis focuses on the identification of probiotic bacteria in a commercially available dietary supplement Linex® Forte using molecular biological methods, mainly polymerase chain reaction (PCR). The aim was to verify the presence of the claimed probiotic cultures of Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium animalis, and to compare the results with the manufacturer's claims. Therefore, two DNA isolation methods were used: phenolchloroform extraction and the commercial purification kit OMNI International. The isolated DNA was then analyzed by domain, genus and species-specific PCR. The results show that the methods used are suitable for the identification of probiotic bacteria and confirm their presence in the selected product.

Zaměřením této diplomové práce je optimalizace kultivace houby korálovce ježatého (hericium erinaceus) na obilných substrátech s následnou fermentací probiotickými bakteriemi. Teoretická část práce se zabývá popisem korálovce ježatého, jeho nutriční hodnoty, biologických účinků, využití a kultivace. Dále je uveden přehled nutriční hodnoty použitých obilných substrátů, charakteristika probiotik, jejich biologických účinků a metabolismu. Nakonec byla zařazena kapitola věnující se popisu tradičního postupu koji fermentace. V experimentální části byla optimalizována kultivace korálovce ježatého na sedmi obilných substrátech – ječných kroupách, kukuřičné krupici, pšeničných otrubách, pohance, amarantu, quinoe bílé a červené. Pomocí spektrofotometrických metod byl v samotných obilných substrátech a substrátech obohacených o mycelium stanoven obsah ve vodě rozpustných proteinů, celkových sacharidů, celkových fenolických látek, flavonoidů a antioxidační aktivity. Dále byl u vzorků stanoven obsah mastných kyselin metodou plynové chromatografie a lipofilních látek pomocí vysoce účinné kapalinové chromatografie. Obilné substráty obohacené o mycelium měly zvýšenou antioxidační aktivitu a koncentraci ve vodě rozpustných proteinů, fenolických látek, flavonoidů a lipidů. Mimo to byla analýzou pomocí vysoce účinné kapalinové chromatografie zjištěna zvýšená koncentrace tokoferolů, ubichinonu a ergosterolu. Pro fermentaci probiotickými bakteriemi Lactobacillus rhamnosus byly vybrány substráty s bohatým růstem mycelia – ječné kroupy, kukuřičná krupice, quinoa červená a amarant. Po ukončení fermentačního procesu byly zopakovány spektrofotometrické metody a stanovena koncentrace kyseliny mléčné pomocí vysoce účinné kapalinové chromatografie. U vzorků s probiotiky se mírně zvýšila jejich antioxidační aktivita, koncentrace fenolických látek, flavonoidů a proteinů rozpustných ve vodě. Koncentrace kyseliny mléčné u kontrolních vzorků a vzorků s probiotiky se téměř nelišila. Ze získaných výs, The focus of this diploma thesis is to optimize cultivation of the hericium erinaceus mushroom on cereal substrates with subsequent fermentation with probiotic bacteria. Theoretical part of this thesis focuses on description of the mushroom hericium erinaceus and its nutritional value, biological properties, other uses and cultivation. Furthermore, an overview of the nutritional value of the used cereal substrates is provided, along with the characterization of probiotics, their biological effects, and metabolism. Finally, a chapter dedicated to the description of the traditional koji fermentation process was included. In the experimental part, the cultivation of hericium erinaceus was optimized on seven cereal substrates – barley groats, cornmeal, wheat bran, buckwheat, amaranth, white and red quinoa. Using spectrophotometric methods, the content of water soluble proteins, total carbohydrates, total phenolic compounds, flavonoids, and antioxidant activity was determined in the cereal substrates themselves and substrates enriched with mycelium. Furthermore, the content of fatty acids was determined in the samples using the gass chromatography method and lipophilic compounds were analyzed using high performance liquid chromatography. Cereal substrates enriched with mycelium showed increased antioxidant activity and concentrations of water soluble proteins, phenolic compounds, flavonoids, and lipids. Moreover, elevated concentrations of tocopherols, ubiquinone, and ergosterol were detected through high performance liquid chromatography analysis. Substrates with abundant mycelial growth, such as barley groats, cornmeal, red quinoa, and amaranth, were selected for fermentation with probiotic bacteria Lactobacillus rhamnosus. After the fermentation process, spectrophotometric methods were repeated, and the concentration of lactic acid was determined using high performance liquid chromatography. Samples with probiotics showed a slight increase in their antioxidant activit

Diplomová práce pojednává o problematice probiotických mikroorganismů aplikovaných prostřednictvím doplňků stravy. Pozitivní efekt na zdraví jedince je znám již delší dobu, vyplývají však na povrch i spekulace o možných negativních dopadech na zdraví konzumenta. V této souvislosti je nutné přesně definovat požadavky na probiotika v potravinách a zhodnotit jejich bezpečnost. Bez těchto postupů nelze na trh uvádět nové probiotické doplňky stravy. Každý kmen probiotické bakterie je třeba testovat jednotlivě na každou vlastnost. Jedním ze základních testů, který je používán při hodnocení probiotik je schopnost rezistence vůči podmínkám gastrointestinálního traktu člověka. Cílem praktické části diplomové práce je testování in vitro rezistence probiotických bakterií vůči prostředí, které simuluje gastrointestinální trakt člověka. Umělá žaludeční a duodenální šťáva byla sestavena dle Československého lékopisu. Odolnost probiotických bakterií zvyšuje forma, ve které je probiotikum distribuováno do těla člověka. V rámci in vitro testu byly také testovány lékové formy užívané v souvislosti s probiotickými bakteriemi., The thesis deals with a theme of probiotic mikroorganisms which are aplicated as a dietary supplement. Health benefit on the host have been known for a long time, however, there might be some negative effects affecting a consumer. In connection with this observation defining requirements and evaluating of safety of probiotics in food was necessary. The new probiotic dietary supplement can not be expanded on the market without these processes. Every strain must be tested separately on each property. The ability of rezistance against conditions inside human gastrointestinal tract belongs to the most basic tests. The aim of the practical part is testing this ability of rezistance in vitro by simulated conditions. The model of gastrointestinal juices was designed according to the Czechoslovak codex. The form contributes to the higher rezistance of probiotics within implementing to the host. Also a dosage form of probiotics was involved to a in vitro testing.

Tato diplomová práce se zabývá studiem probiotických bakterií, a to se zaměřením na dětskou výživu. Navrhuje probiotický doplněk stravy s optimalizovanou probiotickou směsí složenou z kmenu z rodu Lactobacillus a především z rodu Bifidobacterium, která by byla nejvhodnější pro dětské spotřebitele. Teoretická část práce se zaměřuje na charakterizaci probiotických bakterií, složení dětského traktu a na screeningu probiotických a želatinových doplňků stravy již uvedených na trhu. V experimentální části práce pak byly probiotické bakterie podrobeny modelovému trávení, kdy na základě výsledků byly vytvořeny vhodné směsi z kmenů, které měly nejnižší snížení viability po trávení. Jako nejvhodnější směs byla zvolena směs o složení Bifidobacterium breve CCM 7825T, Bifidobacterium longum CCM 4990 a Lactobacillus casei CCM 4798. Následná optimalizovaná metoda PCR v reálném čase navíc prokázala přítomnost všech kmenů přidaných do směsi i po modelovém trávení. Na závěr byl ze zjištěných údajů navržen probiotický doplněk stravy ve formě alginát-agarového medvídku pro děti od tří let, který byl podroben senzorické analýze. Navržený probiotický přípravek byl navíc obohacen o další výživové složky, produkt tak obsahuje aktivní látky obsažené v Chlorelle a Spirulině a vyšší obsah omega 3 a 6 mastných kyselin z konopného oleje., This Diploma thesis deals with probiotic bacterias for children nutrition. It proposes a probiotic food supplement with a probiotic blend composed of a strain of the genus Lactobacillus and of the genus Bifidobacterium, which would be most suitable for infant consumers. The theoretical part is focused on probiotics, constitution of the children´s ganstrointestinal tract and screening of probiotic and gelatine supplements which are already sold on the market. In the experimental part, probiotic bacteria were subjected to model digestion, whereby mixtures of strains having the lowest reduction in viability after digestion were blend based on the results. The blend of Bifidobacterium breve CCM 7825T, Bifidobacterium longum CCM 4990 and Lactobacillus casei CCM 4798 was chosen as the most suitable blend of the lowest viability reduction. PCR in real time was demonstrated the presence of all strains added to the blend after model digestion. Finally, from the data was suggested a more comprehensive probiotic food supplement in the form of an alginate-agar gummy-bear for children over three years of age. The probiotic food supplement was subjected to sensory analysis too. The proposed probiotic food supplement also contained Chlorella and Spirulina active compounds and higher content of omega 3 and 6 fatty acids in hemp oil.

Diplomová práce pojednává o enkapsulaci přírodních extraktů. V teoretické části jsou popsány metody enkapsulace, materiály používané pro přípravu částic a aplikace enkapsulačních technik v potravinářství. V rámci experimentální části práce byly charakterizovány vybrané přírodní extrakty získané z propolisu, zeleného ječmene a probiotik. Tyto látky byly enkapsulovány do alginátu a chitosanu. Bylo vytvořeno 25 typů částic, u kterých byla analyzována dlouhodobá stabilita ve 3 modelových typech fyziologického prostředí a ve čtyřech různých modelových potravinách. U vybraných typů částic byla sledována stabilita též ve čtyřech druzích reálných mléčných potravin. Míra stability částic byla v případě přírodních extraktů sledována spektrofotometricky stanovením množství uvolněných polyfenolů, bílkovin, chlorofylů a celkové antioxidační aktivity. U probiotických kultur byly použity techniky optické a fluorescenční mikroskopie. Přírodní extrakty propolisu a ječmene byly podrobeny testu antimikrobiálního účinku, u propolisu byly doplněny i cytotoxické testy. Jako nejlepší obalový materiál u propolisu byla navržena směs agar-chitosan, jež prokazovala optimální stabilitu v modelových podmínkách trávicího traktu i v modelových potravinách. Lipozomy byly v této práci vyhodnoceny jako nestabilní a nevhodné pro další aplikaci. V případě práškového ječmene byl jako obalový materiál zvolen škrob-alginát (poměr 1:4) a agar-chitosan, přičemž druhý typ vykazoval vyšší stabilitu z pohledu uvolněných bílkovin. Tento druhý typ byl vhodný i pro čerstvý ječmen. Pro enkapsulaci probiotických kultur byl zvolen alginát, případně alginát ve směsi se škrobem, a to díky porozitě a možnosti difúze živin. Nejlepších výsledků u reálných potravin bylo dosaženo aplikací probiotických částic do mléka. V Koenkapsulace práškového ječmene a probiotik nevedla k inhibici růstu kultur. Rovněž nebyl potvrzen antimikrobiální účinek propolisu ani ječmene, stejně jako cytotoxický efektu propolisu., This diploma thesis deals with encapsulation of natural extracts. In the theoretical part the methods of encapsulation, materials for particle preparation, as well as application of encapsulation techniques in food industry were described. In experimental part selected natural extracts of propolis, green barley and probiotics were characterized. There substances were encapsulated into alginate and chitosan. In the total of 25 types of prepared particles long-term stability in some model physiological conditions as well as in four different model foods was evaluated. Additionally, stability of selected particles in several real milk-based products was followed too. The stability of particles was determined spectroptohometrically. In natural extract a content of polyphenols, proteins, chlorophylls, as well as total antioxidant activity were analysed. To analysis of probiotics optical and fluorescence microscopy were used. In propolis and green barley antimicrobial activity was tested too. Moreover, in the sample of propolis also cytotoxic assay was applied. Agar-chitosan was chosen as the best shell material for propolis due to its optimal stability in model physiological conditions as well as model foods. Liposomes were evaluated as unstable and were not recommended for further application. As the suitable shell material for powdered green barley starch-alginate (rate 1:4) and agar-chitosan were proposed, while the second one showed better stability for released proteins. Agar-chitosan shell material was usable for fresh green barley too. For probiotics encapsulation alginate or alginate-starch were chosen because of their porosity and possibility of nutrients diffusion. In real foods the best results were reached with application of probiotic particles into milk. Coencapsulation of powdered barley and probiotics did not confirm inhibition of culture growth. Neither the antimicrobial effect of propolis and barley nor the cytotoxic effect of propolis were confirmed.

Probiotiká sú živé mikroorganizmy, ktoré, ak sú podávané v adekvátnych množstvách, majú priaznivé účinky na zdravie hostiteľa. Používajú sa najmä ako súčasť špecifických mliečnych výrobkov a tiež ako doplnky stravy vo forme tabliet, toboliek, dražé alebo sirupov. Najznámejšie probiotické mikroorganizmy sú baktérie rodu Lactobacillus a Bifidobacterium patriace do skupiny baktérií mliečneho kvasenia. Na hodnotenie probiotických prípravkov sa využíva široká škála metód mikrobiologickej analýzy potravín. Tieto metódy možno rozdeliť na kvantitatívne, určené na stanovenie počtu mikroorganizmov v produkte a kvalitatívne, ktoré sú schopné detekovať prítomnosť alebo absenciu daného mikroorganizmu. Obidva typy metód majú veľký význam pri kontrole účinnosti probiotických prípravkov., Probiotics are live microorganisms, that when administered in adequate amount confer a health benefit on the host. They are used as part of specific milk products and either as dietary supplements in form of tablets, capsules, coated pills and sirups. The most famous probiotic microorganisms are bacteria of Lactobacillus and Bifidobacterium genus, that belong in group of lactic acid bacteria. For the assessment of probiotic preparations is used broad range of methods for the microbial analysis of foods. These methods can be separated on quantitative, that enumerate amount of microorganisms in product and qualitative, that are capable detect presence or absence of certain microorganisms. Both types of the methods have large importance in control of the efficiency probiotic preparations.