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A prevalência da obesidade tem aumentado em todo mundo, afetando também mulheres em idade reprodutiva. Estudos têm demonstrado que o acúmulo excessivo de tecido adiposo resulta em prejuízos à reprodução feminina. O mecanismo pelo qual a obesidade diminui a fertilidade não está totalmente estabelecido. Atualmente, são propostas a condição inflamatória e a indução de estresse oxidativo como potenciais mecanismos de ação para as patologias relacionadas à obesidade. Adicionalmente, a angiotensina II (Ang II) é mais um fator que tem sido relacionado com alterações associadas à obesidade, e os efeitos deste peptídeo incluem ações pró-inflamatórias e pró-oxidativas. O presente estudo analizou o efeito da obesidade na ovulação e no metabolismo oxidativo ovariano, e a participação da Ang II como um possível modulador da formação de espécies reativas de oxigênio em ovários de ratas obesas e seus efeitos na ovulação. Foram utilizadas ratas submetidas a uma dieta hipercalórica composta por alimentos palatáveis, conhecida como dieta de cafeteria, a partir do desmame até a idade adulta, por um período de 17 semanas. Os animais foram divididos em grupos: CTL (controle), CTL LOS (controle + losartan), CAF (cafeteria) e CAF LOS (cafeteria + losartan). Avaliamos o consumo de alimentos e líquidos, o peso corporal, o peso da gordura abdominal e retroperitonial, a concentração de insulina plasmática, o número de oócitos, as atividades das enzimas antioxidantes (superóxido dismutase e catalase), concentração de peróxido de hidrogênio (H2O2) e parâmetros de dano oxidativo (lipoperoxidação e oxidação de proteínas). As fêmeas obesas do grupo CAF apresentaram maior consumo de energia e reduzido consumo de água e ração padrão, hiperinsulinemia, aumento das gorduras abdominal e retroperitonial, e aumento de peso corporal. A obesidade não reduziu significativamente a ovulação, mas aumentou a atividade das enzimas antioxidantes e a concentração de H2O2 no ovário. A administração do losartan, em ratas alimentadas com a dieta de cafeteria, reduziu a ingestão energética total, a concentração plasmática de insulina e o ganho de gordura abdominal, mas não evitou o desenvolvimento da obesidade. O losartan inibiu a atividade da enzima antioxidante superóxido dismutase no ovário das ratas obesas do grupo CAF, porém não alterou a atividade da enzima antioxidante catalase. Os resultados deste estudo demonstram que a obesidade resulta em alterações no metabolismo e sugerem a participação da Ang II na formação de espécies reativas de oxigênio no ovário. The prevalence of obesity has increased worldwide, also affecting women of reproductive age. Studies have shown that excessive accumulation of adipose tissue results in impaired female reproduction. The mechanism by which obesity reduces fertility is not fully established. Currently, proposals are the inflammatory condition and the induction of oxidative stress as a potential mechanism of action for diseases related to obesity. Additionally, angiotensin II (Ang II) is another factor that has been related to changes associated with obesity, and the effects of this peptide include pro-inflammatory and pro-oxidative actions. The present study considers the effect of obesity on ovulation and ovarian oxidative metabolism, and the participation of Ang II as a possible modulator of the formation of reactive oxygen species in ovaries of obese rats and their effects on ovulation. Female rats fed a diet consisting of high calorie foods palatable, known as cafeteria diet from weaning to adulthood, for a period of 17 weeks. The animals were divided into groups: Control (CTL) CTL LOS (control + losartan), CAF (cafeteria) and CAF LOS (losartan + cafeteria). We evaluate the consumption of food and fluids, body weight, abdominal and retroperitoneal fat weight, the plasma insulin concentration, the number of oocytes, the activities of antioxidant enzymes (superoxide dismutase and catalase), concentration of hydrogen peroxide (H2O2 ) and parameters of oxidative damage (lipid peroxidation and protein oxidation). The females of the CAF group had higher energy consumption and reduced consumption of water and standard chow, hyperinsulinemia, increased abdominal and retroperitoneal fat, and weight gain. Obesity not significantly reduced ovulation, but increased the activity of antioxidant enzymes and the concentration of H2O2 in the ovary. The administration of losartan in rats fed the cafeteria diet, reduced total energy intake, plasma insulin concentration and abdominal fat gain, but did not prevent the development of obesity. Losartan inhibited the activity of the antioxidant enzyme superoxide dismutase in the ovary of rats CAF group, but did not alter the activity of the catalase antioxidant enzyme. The results of this study demonstrate that the cafeteria diet results in changes in metabolism and suggests the involvement of Ang II in the formation of ROS in the ovary.

Endometriosis is defined as the presence of endometrial tissue (gland and stroma) outside the uterus. The objective of this study was to design a model of subcutaneous endometriosis in rats for the evaluation of the effect of drugs and the pathophysiology of endometriosis. Initially, female Wistar rats (Rattus norvergicus) were implanted subcutaneously with 4x4 mm uterine fragments to evaluate endometrioma growth after 1, 7, 14 and 21 days. Endometrial tissue implants were confirmed by histological analysis. The greatest relative weight gain was observed on the 14th day (wet weight 29.17 ± 6.79 mg%; dry weight 5.36 ± 0.97 mg%). Subsequently, animals were assigned to treatment groups and given either estradiol (2.5 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg sc), medroxyprogesterone acetate (0.5 mg/kg, 2 mg/kg, 5 mg/kg sc), triptorelin pamoate (0.18 mg/kg, 0.56 mg/kg sc) and acetylsalicylic acid (3 mg/kg gavage) on the fifth day following implantation. Wet and dry relative weight of the endometrioma were used as a indicator of growth for model of endometriosis. In the group treated with estradiol, the average wet weight and dry weight on the 14 th day following implantation was 36.62 ± 4.97 mg% and 3.97 ± 1 mg% (2.5 mg), 56.37 ± 20.19 mg% and 9.11 ± 3.85 mg% (5 mg), and 173.89 ± 69.53 mg% and 27.67 ± 10.27 mg% (10 mg), respectively. In the group treated with medroxyprogesterone acetate, the corresponding figures were 13.58 ± 2.53 mg% and 2.67 ± 0.5 mg% (0.5 mg), 14.29 ± 2.07 mg% and 3.71 ± 1.31 mg% (2 mg), and 15.33 ± 7.08 mg% and 2.68 ± 1.44 mg% (5 mg). In the group treated with triptorelin pamoate, the corresponding figures were 20.04 ± 4.02 mg% and 5.21 ± 1.54 mg% (0.18 mg), and 10.86 ± 1.88 mg% and 1.89 ± 0.29 mg% (0.56 mg). In the group treated with 3 mg acetylsalicylic acid, the corresponding figures were 12.81 ± 2.04 mg% and 2.09 ± 0.4 mg%. In the estradiol group, growth gain was dose-dependent: animals receiving 10 mg differed significantly from animals receiving lower doses and from untreated animals (p

A erva-mate (Ilex paraguariensis A.St.-Hil.) é uma espécie nativa da América do Sul, muito utilizada no preparo de bebidas estimulantes. As folhas e ramos utilizados no preparo destas bebidas não são consumidos na sua forma in natura ou bruta, ao contrário, eles passam por uma série de processamentos industriais como o sapeco, secagem, moagem e envelhecimento. As condições de processamento podem modificar as características sensoriais assim como podem influenciar diretamente a quantidade final de substâncias bioativas presentes na ervamate. As principais classes de compostos bioativos encontrados na erva-mate são as metilxantinas, os polifenóis e as saponinas. Essas substâncias são responsáveis por uma série de efeitos benéficos, como a atividade antioxidante, hipocolesterolemiante, anti-obesidade, anti-inflamatória e cardioprotetora. Porém, não foram encontrados na literatura, estudos que correlacionem a atividade da erva-mate sobre o metabolismo de proteínas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o metabolismo de aminoácidos e de lipídios em ratos tratados com extrato aquoso de erva-mate comercial e bruta. Foram utilizados 30 ratos Wistar machos divididos em três grupos: grupo controle (CTR): animais tratados com ração padrão e água ad libitum, grupo da erva-mate comercial (COM) e grupo da erva-mate bruta (BRU): animais tratados com ração padrão e extrato de erva-mate comercial ou bruta ad libitum, respectivamente. Além da captação do ácido aminoisobutírico (AIB-14C), da oxidação de Lalanina- 14C e da síntese de proteínas a partir de Leucina-14C, também foram avaliados o peso corporal, os níveis séricos de insulina, glicose, colesterol total, triglicerídeos, ureia, proteínas totais e os índices das gorduras retroperitoneal e epididimal e a respectiva atividade lipolítica desses tecidos. O tratamento com o extrato de erva-mate comercial aumentou significativamente a captação de AIB-14C no fígado. Ambos os tratamentos com extrato aquoso de erva-mate comercial e bruta reduziram drasticamente a síntese de proteínas no fígado e o peso das gorduras retroperitoneais e aumentaram os níveis de lipólise do tecido adiposo epididimal. Apenas o grupo COM reduziu significativamente o ganho de peso dos animais enquanto que apenas o grupo BRU reduziu os níveis séricos de triglicerídeos. Ambos os extratos COM ou BRU não modificaram o metabolismo de proteínas no músculo sóleo. Este trabalho demonstrou pela primeira vez que a erva-mate é capaz de interferir no metabolismo hepático de aminoácidos e no metabolismo de lipídeos, sem interferir no metabolismo de proteínas do músculo esquelético. Além disso, foi observado que alguns efeitos estão diretamente relacionados a proporção entre os compostos bioativos presentes nos extratos, visto que os extratos de erva-mate comercial e bruta diferiram em vários resultados. Yerba mate (Ilex paraguariensis A.St.-Hil.) is a native specie from South America, widely used in the preparation of stimulant drinks. The leaves and branches used in these drinks are not consumed in the natural or gross form, rather, they undergo a series of industrial processes such as singeing, drying, milling and aging. The processing conditions can modify the sensory characteristics and can directly influence the final amount of bioactive substances present in yerba mate. The major classes of bioactive compounds found in yerba mate are methylxanthines, polyphenols and saponins. These substances are responsible for a number of beneficial effects such as antioxidant activity, cholesterol lowering activity, anti-obesity, antiinflammatory and cardioprotective effects. However, weren’t found in the literature, studies that correlate the activity of yerba mate on proteins metabolism. The aim of this study was to evaluate the amino acids and lipids metabolism on rats treated with aqueous extract of commercial or gross yerba mate. We used 30 male Wistar rats divided into three groups: control water group (CW): animals treated with standard chow and water ad libitum, commercial mate group (CM) and gross mate group (GM): animals treated with standard chow and aqueous extract of commercial or gross yerba mate ad libitum, respectively. Beyond the uptake of aminoisobutiric acid (AIB-14C), the oxidation of L-alanine-14C and protein synthesis from Leucine-14C, were also evaluated body weight, seric levels of insulin, glucose, total cholesterol, triglycerides, urea, total protein and fat contents of retroperitoneal and epididymal and the lipolytic activity of these tissues. The treatment with the commercial yerba mate extract significantly increased uptake of AIB-14C in the liver. Both treatments with aqueous extract of commercial and gross yerba mate drastically reduced protein synthesis in the liver and retroperitoneal fat weight and increased levels of epididymal adipose tissue lipolysis. Only the CM group significantly reduced the weight gain of the animals while only the GM group reduced levels of seric triglycerides. Both extracts CM or GM did not change the protein metabolism in the soleus muscle. This study first demonstrated that yerba mate is able to interfere with the hepatic metabolism of amino acid and lipid metabolism, without interfering with protein metabolism in skeletal muscle. Moreover, it was observed that some effects are directly related to the ratio of bioactive compounds present in the extracts, whereas extracts of commercial yerba mate and gross yerba mate differed in several outcomes.

Introdução: Os ovos de Zebrafish que não são fertilizados podem ser uma fonte de alimento para o peixe. O objetivo deste estudo é avaliar a influência do acesso aos ovos de Zebrafish no Índice de Massa Corporal, níveis séricos de colesterol e triglicérides e acúmulo de gordura no hepatócito. Materiais e métodos: Zebrafish adultos de ambos sexos foram divididos em dois grupos: grupo 1 com acesso livre aos próprios ovos e grupo 2 com o fundo do aquário coberto de bolas de vidro para evitar o acesso aos ovos por duas semanas. Para a coleta de sangue, ambos os grupos foram mantidos em jejum pelo período de 24 horas antes da coleta. O IMC foi medido em gramas por centímetro quadrado (g/cm²). Para coletar as amostras sanguíneas, os animais foram anestesiados e uma incisão, anterior a cauda, foi realizada para acessar a veia dorsal. Uma pipeta automática foi utilizada para coletar o sangue que foi centrifugado obtendo soro para análises. Os níveis séricos de triglicérides e colesterol foram analisados com testes colorimétricos. O fígado foi coletado para análise histológica. O n utilizado foi 4 para cada grupo. Para as análises bioquímicas foram utilizados pools de 10 peixes. Resultados: Os resultados estão expressos em média ± erro padrão. Não houve diferença significativa no IMC (grupo 1 0,037 ± 0,009 g/cm² e grupo 2 0,035 ± 0,008 g/cm²) nem nos níveis de colesterol (colesterol total: grupo 1 362 ± 73 mg/dL e grupo 2 357 ± 23 mg/dL; HDL – colesterol: grupo 1 91,22 ± 1,79 grupo 2 72,14 ± 2,89; LDL – colesterol: grupo 1 55,68 ± 10,88 grupo 2 44,18 ± 9,84 ). No entanto, houve diferença significativa nos níveis de triglicérides séricos (grupo 1 457 ± 43 mg/dL e grupo 2 292 ± 111 mg/dL P=0,03). Não foi observado acúmulo de lipídeos nos hepatócitos. Conclusões: O acesso aos próprios ovos alterou os níveis de triglicérides sem modificar os níveis de colesterol, alterar o IMC nem acumular gordura nos hepatócitos. Introduction: The Zebrafish eggs that are not fertilized can be a food source for the fish. The aim of this study was to measure the influence of accessing eggs in Body Mass Index, cholesterol and triglycerides serum levels and lipid accumulation in hepatocyte of Zebrafish. Material and Methods: Adult Zebrafish of both genders were divided into two groups: group 1 free access to their own eggs and group 2 with the bottom of the aquarium filled with glass balls to prevent them to access their eggs for two weeks. To the blood collection, both groups were kept fasting for 24 hours before the blood collection. The body mass index (BMI) was measure in gram per square centimeter (g/cm²). To collect the blood samples, animals were anesthetized and an incision was made before the tail to access the dorsal vein. We used an automatic pipette to collect the blood. It was centrifuged and serum was obtained for analysis. Triglycerides and cholesterol seric levels were analyzed with colorimetric tests. The liver was collected to histological analysis. The n used was 4 for each group. Pools with serum of 10 animals were used to biochemical analysis. Results: The results are expressed in mean ± standard error. There was no significant difference in BMI (group 1 0,037 ± 0,009 g/cm² and group 2 0,035 ± 0,008 g/cm²) neither in cholesterol levels (total cholesterol: group 1 362 ± 73 mg/dL and group 2 357 ± 23 mg/dL; HDL – cholesterol: group 1 91,22 ± 1,79 group 2 72,14 ± 2,89; LDL – cholesterol: group 1 55,68 ± 10,88 group 2 44,18 ± 9,84 ). However, there was a significant difference in triglycerides levels (group 1 457 ± 43 mg/dL and group 2 292 ± 111 mg/dL P=0,03). Lipid accumulation was not observed in hepatocytes. Conclusion: Having access to eggs seams to influence the Zebrafish´s triglycerides serum levels without modifying the BMI and cholesterol serum levels neither lipid accumulation in hepatocytes.

A cada ano um grande número de pessoas perde a função do diafragma tornando-se dependentes de ventilação mecânica. As principais causas são o trauma raquimedular da região cervical e as doenças neuromusculares. Desenvolvemos um modelo experimental para avaliar o desempenho da estimulação elétrica do diafragma em coelhos com eletrodos monocanais implantados diretamente neste músculo. Foram aplicadas diferentes intensidades de correntes (10, 16, 20 e 26 mA), as quais geraram volumes correntes acima dos valores basais, mostrando que este modelo é eficaz para estudar o desempenho do diafragma sob diferentes tipos de estimulação elétrica. Every year, a large number of individuals become dependent on mechanical ventilation because of a loss of diaphragm function. The most common causes are cervical spinal trauma and neuromuscular diseases. We have developed an experimental model to evaluate the performance of electrical stimulation of the diaphragm in rabbits using single-channel electrodes implanted directly into the muscle. Various current intensities (10, 16, 20, and 26 mA) produced tidal volumes above the baseline value, showing that this model is effective for the study of diaphragm performance at different levels of electrical stimulation.

A prevalência de sobrepeso e de obesidade constitui um sério problema de saúde mundial, abrangendo todas as faixas etárias, incluindo crianças. Neste aspecto, observa-se uma importante relação entre a obesidade materna e a obesidade infantil, a qual tende a persistir na idade adulta. Entretanto, ainda não está claro o impacto dos diferentes fatores que podem influenciar o desenvolvimento da obesidade infantil, tais como as modificações no ambiente intrauterino e no ambiente neonatal. A Angiotensina II (ang II) tem sido relacionada a alterações patológicas associadas à obesidade como hipertensão arterial sistêmica e diabetes mellitus tipo 2 (DM 2). O presente estudo analisou as consequências do consumo materno de dieta de cafeteria, ofertado em diferentes fases da reprodução, sobre aspectos endócrinos, metabólicos e reprodutivos da prole de ratas Wistar. Para isso, ratas foram alimentadas com ração padrão (grupo controle PAD) ou com dieta de cafeteria (grupo CAF) durante dez semanas a partir do desmame. No primeiro dia de gestação, estes grupos foram subdivididos: metade do grupo controle passou a receber dieta de cafeteria até o final da lactação (grupo PAD/CAF) e metade do grupo cafeteria passou a receber ração padrão até o final da lactação (grupo CAF/PAD). Após o desmame dos filhotes, foram analisados, nas mães, o peso corporal, o conteúdo de gordura abdominal, as concentrações plasmáticas de insulina, leptina, angiotensina II, prolactina, triglicerídeos, colesterol total e glicose. Na prole do sexo masculino, quando adutlos, foram avaliados os mesmos parâmetros, acrescido de dosagens plasmáticas de LH, FSH e testosterona e da análise do comportamento sexual. Nas ratas, foi demonstrado que o consumo de dieta de cafeteria produziu aumento de peso corporal, de gordura abdominal, e das concentrações de insulina, leptina, ang II e triglicerídeos. Em associação, observamos aumento do cuidado maternal. Ao contrário, a suspensão da dieta durante a gestação/lactação reverteu estes efeitos (grupo CAF/PAD). As proles das ratas que consumiram dieta de cafeteria durante a gestação/lactação apresentaram, quando adultas, aumento do conteúdo de gordura abdominal, de insulina, de leptina e de triglicerídeos. Estes achados foram mais pronunciados na prole das ratas que receberam dieta de cafeteria desde o desmame até o final da lactação. Entretanto, foi observado que as proles de todas as ratas que, em algum momento foram expostas à dieta de cafeteria, apresentaram modificações nas concentrações dos hormônios reprodutivos, associado à inibição do comportamento sexual. O bloqueio dos receptores AT1 para ang II, através da administração de losartan na água de beber das mães dos 4 diferentes grupos, preveniu o aumento de gordura corporal e as demais alterações observadas com o consumo desta dieta. Também houve a normalização dos diferentes parâmetros do comportamento maternal. Deste modo, foram prevenidas as repercussões negativas da obesidade materna sobre a prole, de modo que os descendentes, quando adultos, não apresentaram o aumento de gordura abdominal e as demais alterações endócrinas e metabólicas previamente descritas. Ainda, houve a normalização dos diferentes parâmetros do comportamento sexual, em associação ao restabelecimento das concentrações fisiológicas dos hormônios reprodutivos. Os resultados deste estudo demonstram que o desencadeamento da obesidade infantil parece ser resultante do somatório de diferentes fatores, incluindo a obesidade materna e a modificação do ambiente neonatal, representado pelo aumento do cuidado maternal. Além disso, a administração do antagonista losartan em ratas submetidas à dieta de cafeteria a partir do desmame, previne a obesidade e suas modificações associadas. Consequentemente, é possível prevenir os diversos efeitos negativos observados nos seus descendentes. Overweight and obesity are a major public health problem all over the world, reaching all the age groups, including children. In this respect, it is noted an important relation between maternal and childhood obesity, tending to persist in adulthood. However it is not clear the impact of different factors influencing the development of childhood obesity, such as the changes in the intrauterine and neonatal environment. Angiotensin II (ang II) has been related to pathological alterations associated with obesity such as hypertension and type 2 diabetes mellitus (DM2).This study analyzed the consequences of the maternal consumption of cafeteria diet, offered in different phases of reproduction on endocrine, metabolic and reproductive aspects in the offspring of Wistar rats. For that, rats were fed standard chow (PAD control group) for 10 weeks since weaning. On the first day of gestation, the groups were subdivided: half of the control group was given cafeteria diet until the end of lactation (PAD/CAF group) and half of the cafeteria diet group was given standard chow until the end of lactation (CAF/PAD group). After pups weaning, it was analyzed the body weight, content of abdominal fat, plasma concentration of insulin, leptin, angiotensin II, prolactin, triglycerides, total cholesterol and glucose in mothers. In the male rat offspring, when adults, the same parameters plus plasma doses of LH, FSH and testosterone were evaluated as well as the sexual behavior. In female rats, it was demonstrated that the consumption of cafeteria diet produced increase of body weight, abdominal fat, and insulin, leptin, ang II and triglycerides concentrations, being also observed increase of maternal care. Offspring of female rats, which had fed cafeteria diet during gestation/lactation, presented, when adult, increase of abdominal fat content, insulin, leptin, and triglycerides. These findings were more pronounced in the offspring of female rats receiving cafeteria diet since weaning until the end of lactation. However, it was observed that the offspring of all the female rats, which at some moment had received cafeteria diet, presented modifications in the reproductive hormone concentrations, together with inhibiton of sexual behavior. AngII AT1 receptor blockade, through Losartan administration in the drinking water of mothers in the four different groups, avoided the increase of body weight and the other alterations observed with the consumption of that diet. There was also normalization of different parameters of maternal behavior. Thus, it was prevented the negative repercussions of maternal obesity on the offspring, so that the descendents, when adults, did not present increase of abdominal fat and other endocrine and metabolic alterations previously described. Still, there was also the normalization of different parameters of sexual behavior in association with the restoration of physiological concentrations of reproductive hormones. The results of this study has shown that the onset of childhood obesity seems to be the result of the sum of different factors, including maternal obesity and the modification of neonatal environment, represented by the increase of maternal care. Furthermore, the administration of the antagonist Losartan in female rats submitted to cafeteria diet since weaning, prevents the obesity and its associated modifications. Consequently, it is possible to prevent many adverse negative effects observed in their descendents.

The tendon diseases are major causes of injury in athletes undergoing excessive training. The tendinosis is one of these lesions and is characterized histologically for a hyper cellularity and increased deposition of type III collagen. There are several possible models of tendinosis induction in animals, being most effective in the mechanical reproduction of the events involved in this process. Because the driving characteristic of the hind legs, one incline of the treadmill used in the 10 degrees (acclivity) induction is necessary. The running speed, which the animals were submitted in previous models, is a factor difficult to reproduce. There is need for standardization of model induction Achilles tendinosis, reproducible. The purpose is to define and validate a model for the induction of Achilles tendinosis in rats. We used twelve male Wistar rats randomly divided into experimental group and control group. The experimental group ran on a treadmill for rats with acclivity of 10 degrees, five times per week, daily during 70 minutes at a speed of 18 m / min for a period of 12 weeks. After the protocol, the animals were sacrificad and Achilles tendons were removed left and right, fixed and processed. We have twelve tendons in each group (n=12). After preparing slides using stains of Hematoxylin-Eosin and Picrosirius Red, histomorphometric analysis was performed of the same. The cell density increased in the experimental group compared to control, 626.08 ± 18.37 versus 445.08 ± 16.48, 615.67 in field 1 and ± 13.51 versus 460.00 ± 27.49, field 2, with p < 0.05 . There was a greater deposition of type III collagen in the experimental groups (50, 55 ± 4.002 versus 9.59 ± 0.435 with p < 0.001). It can be observed that the proposed model is effective to develop a degenerative tendinosis type Achilles tendon injury. As doenças do tendão são importantes causas de lesão em indivíduos submetidos a treinamento excessivo. A tendinose é uma dessas lesões e caracteriza-se histologicamente pela hipercelularidade e aumento do colágeno tipo III. Diversos são os modelos possíveis de indução de tendinose em animais, sendo o mecânico o mais eficaz na reprodução dos eventos envolvidos nesse processo. Devido a característica propulsora das patas traseiras, é necessário um aclive de 10o na esteira utilizada na indução. A velocidade de corrida a qual foram submetidas as cobaias em modelos anteriores é um fator de difícil reprodução. Há, portanto, a necessidade da padronização de um método mais reprodutível. A pesquisa tem como objetivo definir e validar um modelo de indução de tendinose de Aquiles em ratos. Foram utilizados doze ratos machos Wistar divididos aleatoriamente em Grupo experimental e Grupo controle. O grupo experimental correu em uma esteira para ratos com aclive de 10o , cinco vezes por semana, durante 70 minutos diários, com velocidade de 18 m/min, por um periodo de 12 semanas. Após o protocolo, os animais foram submetidos à eutanásia e os tendões de Aquiles direito e esquerdo foram removidos, fixados e processados, tendo o grupo experimental 12 tendões (n=12) e o grupo controle 12 tendões (n=12). Após a preparação de lâminas utilizando as colorações de Hematoxilina-Eosina, Picrosirius Red, foi realizada a análise histomorfométrica das mesmas. A densidade celular aumentou no grupo experimental em relação ao controle, 626,08 ± 18,37 versus 445,08 ± 16,48, no campo 1 e 615,67 ± 13,51 versus 460,00 ± 27,49, no campo 2, com p < 0,05. Houve maior deposição de colágeno tipo III nos grupos experimentais (50, 55 ± 4,002 versus 9,59 ± 0,435 com p

We hypothesized that the route of administration would impact the beneficial effects of bone marrow-derived mononuclear cell (BMDMC) therapy on the remodelling process of asthma. C57BL/6 mice were randomly assigned to two main groups. In the OVA group, mice were sensitized and challenged with ovalbumin, while the control group received saline using the same protocol. Twenty-four hours before the first challenge, control and OVA animals were further randomized into three subgroups to receive saline (SAL), BMDMCs intravenously (2 × 10 6 ), or BMDMCs intratracheally (2 × 10 6 ). The following changes were induced by BMDMC therapy in OVA mice regardless of administration route: reduction in resistive and viscoelastic pressures, static elastance, eosinophil infiltration, collagen fibre content in airways and lung parenchyma; and reduction in the levels of interleukin (IL)-4, IL-13, transforming growth factor-β and vascular endothelial growth factor. In conclusion, BMDMC modulated inflammatory and remodelling processes regardless of administration route in this experimental model of allergic asthma.

Vaena M.L.H.T., Andrade B.G.A., Souza D.B., Oliveira A.L.A., Marques R.G. & Atallah F.A. [Historical aspects of animal experimental surgery and its importance in the development of surgery]. Aspectos históricos da cirurgia experimental animal e sua importância no desenvolvimento da cirurgia. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 35(Supl. 1):101-106, 2013. Curso de Pós-Graduação em Ciência Animal, Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias, Universidade Estadual Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Av. Alberto Lamego, 2000, Parque Califórnia, Campos dos Goytacazes, RJ 28013-602, Brasil. E-mail: fabiane-vet@hotmail.com An analysis of the historical evolution demonstrates how the use of animal models in experimental surgery played a fundamental role in the development of surgery and consolidation of scientific knowledge. Despite of the justified ethical and growing concern about reducing the unnecessary use of animals in scientific experiments, this review points out the benefits from the use of animals in scientific research, particularly in the field of surgery., Uma análise da evolução histórica demonstra como o uso de modelos animais em cirurgia experimental contribuiu de maneira fundamental para o desenvolvimento da cirurgia e consolidação do conhecimento científico. Apesar da crescente e justificada preocupação ética para reduzir a utilização desnecessária de animais na experimentação científica, esta revisão pontua os benefícios advindos do emprego de animais na investigação científica, em especial no campo da cirurgia.

As rãs são usadas como modelos experimentais alternativos no estudo da nocicepção, tanto pela simplicidade do seu tecido nervoso como por permitirem uma abordagem filogenética sobre o tema. Um desses modelos é a secção do nervo isquiático (SNI), o qual simula os sintomas clínicos do “membro fantasma”, uma condição que ocorre nos humanos após amputação ou secção completa da medula espinal. Em mamíferos, a SNI aumenta o metabolismo da glicose no sistema nervoso central, e o lactato é uma fonte energética para as células nervosas. Porém é desconhecido se essa é a situação em gânglio da raiz dorsal (GRD). Como a glicose é o principal substrato energético para o tecido nervoso de rãs, e a concentração plasmática de lactato está aumentada nesses animais em distintas situações, a rã-touro Lithobates catesbeianus foi usada para demonstrar os efeitos da SNI sobre a captação de 1-[14C] 2-deoxi-D-glicose (14C-2-DG), na presença e ausência de lactato, em GRD e medula espinal. Foram demonstrados ainda os efeitos dessa condição experimental sobre a formação de 14CO2 a partir de 14C-glicose e 14C-L-lactato, e a concentração plasmática de glicose e lactato. A captação de 3-O-[14C] metil-D-glicose (14C-3-OMG) foi usada para demonstrar a relação tecido/meio estável da glicose nessas condições. A captação de 14C-2-DG aumentou três dias após a SNI, sem qualquer alteração na captação de 14C-3-OMG. O aumento foi reduzido quando o lactato foi acrescentado ao meio de incubação. A taxa de oxidação da glicose e do lactato não modificou após SNI, mas houve redução na concentração plasmática de glicose e lactato. Assim, a SNI aumenta o metabolismo da glicose no GRD e medula espinal de rãs. Os efeitos do lactato sobre essa captação sugerem o uso da glicose na via glicolítica após a SNI. Frogs have been used as an alternative model to study pain mechanisms because the simplicity of their nervous tissue and the phylogenetic aspect of this question. One of these models is the sciatic nerve transection (SNT), which mimics the clinical symptoms of “phantom limb”, a condition that arises in humans after amputation or transverse spinal lesions. In mammals, the SNT increases glucose metabolism in the central nervous system, and the lactate generated appears to serve as an energy source for nerve cells. An answerable question is whether there is elevated glucose uptake in the dorsal root ganglia (DRG) after peripheral axotomy. As glucose is the major energy substrate for frog nervous tissue, and these animals accumulate lactic acid under some conditions, bullfrogs Lithobates catesbeianus were used to demonstrate the effect of SNT on DRG and spinal cord 1-[14C] 2-deoxy-D-glucose (14C-2-DG) uptake in the presence and absence of lactate. We also investigated the effect of this condition on the formation of 14CO2 from 14C-glucose and 14C-L-lactate, and plasmatic glucose and lactate levels. The 3-O-[14C] methyl-D-glucose (14C-3-OMG) uptake was used to demonstrate the steady-state tissue/medium glucose distribution ratio under these conditions. Three days after SNT, 14C-2-DG uptake increased, but 14C-3-OMG uptake remained steady. The increase in 14C-2-DG uptake was lower when lactate was added to the incubation medium. No change was found in glucose and lactate oxidation after SNT, but lactate and glucose levels in the blood were reduced. Thus, our results showed that SNT increased the glucose metabolism in the frog DRG and spinal cord. The effect of lactate on this uptake suggests that glucose is used in glycolytic pathways after SNT.

Objective To evaluate the effects of hyperprolactinemia on the sulfated glycosaminoglycans (GAGs) of the murine uterus. Design Experimental research. Setting University biochemistry laboratory. Animal(s) Eighty female mice were divided into two groups of 40 animals each and treated with 0.2 mL of saline solution (controls, Ctr) and 200 μg of metoclopramide (experimental, HPrl). Treatments lasted for 50 consecutive days. The animals were divided into four subgroups of 10 animals each per treatment (Ctr and HPrl) and sacrificed according to the phase of the estrous cycle. The uterine horns were removed for biochemical analyses, and blood samples were collected for hormone measurements. Intervention(s) Induced hyperprolactinemia. Main Outcome Measure(s) To quantify the sulfated GAGs, and PRL and sex steroid levels. Result(s) The endometrium during the estrus phase was significantly thicker in the HPrl animals than in the Ctr mice. The levels of chondroitin and dermatan sulfate were significantly increased in the HPrl group than in the Ctr group during all phases except metestrus. The amounts of heparan sulfate were lower during estrus and diestrus and higher in the metestrus phase in HPrl than in Ctr animals. Serum PRL levels were increased whereas the levels of E 2 and P were decreased in all phases in the HPrl group than in the Ctr group. Conclusion(s) The hyperprolactinemia changed the amounts of uterine sulfated GAGs. Our data suggest that these changes may not be correlated with ovarian steroid levels.

PURPOSE: Create and validate a proposed animal model for training in sentinel lymph node biopsy of the stomach. METHODS: In thirty-two rabbits, through a laparotomy, they received a subserosal injection of 0.1 ml of phytate labeled with technetium-99m (0.2 mCi) in the anterior wall of the gastric corpus, followed by 0.2 ml of Blue Patent V® 2.5%, through the same puncture site. Suspicious lymph nodes were searched in vivo at five, ten and 20 minutes, both visually (Blue Patent stained lymph nodes) and with a manual gamma radiation detector (to detect suspected radioactive lymph nodes). After 20 minutes, was performed resection of these for further evaluation of radioactivity (ex vivo) and histological study. RESULTS: Lymph nodes were identified in 30 rabbits (Average of 2.2 lymph nodes per animal). Of the 90 suspected lymph nodes that occurred in the study, 70 cases (77.8%) were histologically confirmed for lymphoid tissue. Of these, the majority were located in the periesophageal region of the gastric fundus. The sample presented a mortality rate of 6.25% and nine complications related to the method, which interfered in the identification of the lymph nodes. CONCLUSION: The animal model for sentinel node biopsy in rabbit stomachs proved to be feasible, with low complexity and reproduced the difficulties encountered for gastric lymph node biopsy in humans, being adequate for surgical training. OBJETIVO: Criar e validar uma proposta de modelo animal para o treinamento em pesquisa de linfonodos sentinelas no estômago. MÉTODOS: Em trinta e dois coelhos, mediante laparotomia, foi injetado na subserosa da parede anterior do corpo gástrico, 0,1 ml de fitato marcado com tecnécio-99m (0,2 mCi), seguido pelo mesmo orifício, de 0,2 ml de Azul Patente V® 2,5%. A cavidade abdominal foi avaliada, in vivo, por meio de inspeção para pesquisa de suspeitas de linfonodos azuis e com detector manual de radiação gamma aos cinco, dez e 20 minutos para pesquisa de suspeitas de linfonodos radioativas. Após 20 minutos, foi realizada a ressecção dessas para posterior avaliação da radioactividade (ex vivo) e estudo histológico. RESULTADOS: Foram identificados linfonodos em 30 coelhos (Média de 2,2 linfonodos por animal). Das 90 suspeitas de linfonodos ocorridas no estudo, em 70 casos (77,8%) obteve-se confirmação histológica para tecido linfóide. Destas, a maioria estava localizada na região periesofágica do fundo gástrico. A amostra apresentou taxa de mortalidade de 6,25% e nove intercorrências relacionadas ao método, que interferiram na identificação dos linfonodos. CONCLUSÃO: O modelo animal para pesquisa de linfonodos sentinelas em estômago de coelhos mostrou-se factível, pouco complexo e reproduziu as dificuldades encontradas para a pesquisa de linfonodos gástricos em humanos, sendo adequado para o treinamento cirúrgico.

Sleep deprivation is a condition that is more and more observed in modern society bringing various neurobehavioral effects, being anxious states one of the main problems. Many studies have successfully demonstrated the relationship between sleep deprivation and anxiety in clinical research. As to basic experimentation, various models have been efficiently used in order to evaluate an anxious behavior. However, the same efficacy is not found on basic studies that deal with the relationship between paradoxical sleep and anxiety. The great majority of studies which approach this matter in animal models do not present results that may be applied to clinical practice and this is basically due to two reasons: inconsistency among results and lack of replicability as related to clinical studies. It has to be emphasized that the use of animal models is extremely useful, mainly under experimental conditions which cannot be ethically or plausibly be approached in human beings. So, the present theoretical assay tries to evaluate in a brief and critical manner the applicability of animal models in sleep deprivation under a translational perspective. A privação de sono é uma condição cada vez mais observada na sociedade moderna, resultando em diversos efeitos neurocomportamentais. Um dos principais efeitos comportamentais dessa condição é a proeminência de estados ansiosos. Diversos estudos têm demonstrado, com sucesso, a relação entre privação de sono e ansiedade na pesquisa clínica. Quanto à experimentação básica, diversos modelos têm sido eficientemente empregados na avaliação do comportamento do tipo ansioso. Todavia, a mesma eficácia não é encontrada nos estudos básicos, que abordam a relação entre privação de sono paradoxal e ansiedade. A maioria dos estudos que aborda essa relação em modelos animais não apresenta resultados passíveis de extrapolação à prática clínica, e isso se deve basicamente a dois motivos: inconsistência entre resultados e falta de replicabilidade em relação a estudos clínicos. Ressalta-se que o uso de modelo animais é extremamente útil, sobretudo em condições experimentais que não podem ser ética ou plausivelmente abordadas em seres humanos. Desse modo, o presente ensaio teórico busca avaliar, de modo sucinto e crítico, a aplicabilidade dos modelos animais de privação de sono, sob uma perspectiva translacional.

INTRODUÇÃO: Os ferimentos descolantes de membros inferiores geralmente se caracterizam como lesões graves e apresentam dificuldades na decisão quanto ao tratamento cirúrgico mais adequado a ser instituído, se reposicionamento do retalho avulsionado ao leito da ferida ou ressecção do retalho, seguido de seu adelgaçamento e enxertia de pele. O propósito deste estudo foi desenvolver um modelo experimental de avulsão de retalhos cutâneos em membros inferiores de ratos e observar a viabilidade do retalho após seu reposicionamento ao leito de origem, com a finalidade de melhor estudar as alterações relacionadas ao ferimento e de testar modalidades terapêuticas em retalhos avulsionados. MÉTODO: Foram utilizados 90 ratos Wistar machos, subdivididos em 4 grupos experimentais. Foi delineado um modelo de avulsão de retalhos no membro inferior do rato, baseado em 4 pedículos diferentes: pedículo de fluxo proximal (G1), pedículo de fluxo distal (G2), pedículo de fluxo lateral (G3) e pedículo de fluxo medial (G4). RESULTADOS: A comparação entre as médias de área de necrose do retalho desenluvado evidenciou diferença estatística significativa entre os 4 grupos estudados (P < 0,0001). CONCLUSÕES: O grupo com pedículo de fluxo distal (G2) apresentou maior área de necrose em relação à área total do retalho, sendo o mais adequado para testar agentes terapêuticos no retalho avulsionado. BACKGROUND: The purpose of this study was to develop an experimental model for degloving injuries of the hind limbs of rats and observe flap viability after its relocation to the wound bed to better study the changes related to the injury and to test the therapeutic modalities in avulsed flaps. METHODS: Ninety male Wistar rats were divided into 4 experimental groups. A flap avulsion model on the lower limb of a rats was established, using 4 different pedicles: proximal flow pedicled flap (G1), distal flow pedicled flap (G2), lateral flow pedicled flap (G3), and medial flow pedicled flap (G4). RESULTS: Comparison between the mean necrotic area of the degloved flap showed statistically significant differences among the 4 groups (P < 0.0001). CONCLUSIONS: The group with the distal flow pedicled flap (G2) showed a higher necrotic area relative to the total flap area and it is the most suitable group for testing therapeutic agents in avulsed flaps.

Duchenne muscular dystrophy (DMD), a lethal X-linked disorder, is the most common and severe form of muscular dystrophies, affecting 1 in 3,500 male births. Mutations in the DMD gene lead to the absence of muscle dystrophin and a progressive degeneration of skeletal muscle. The possibility to treat DMD through cell therapy has been widely investigated. We have previously shown that human adipose-derived stromal cells (hASCs) injected systemically in SJL mice are able to reach and engraft in the host muscle, express human muscle proteins, and ameliorate the functional performance of injected animals without any immunosuppression. However, before starting clinical trials in humans many questions still need to be addressed in preclinical studies, in particular in larger animal models, when available. The best animal model to address these questions is the golden retriever muscular dystrophy (GRMD) dog that reproduces the full spectrum of human DMD. Affected animals carry a mutation that predicts a premature termination codon in exon 8 and a peptide that is 5% the size of normal dystrophin. These dogs present clinical signs within the first weeks and most of them do not survive beyond age two. Here we show the results of local and intravenous injections of hASCs into GRMD dogs, without immunosuppression. We observed that hASCs injected systemically into the dog cephalic vein are able to reach, engraft, and express human dystrophin in the host GRMD dystrophic muscle up to 6 months after transplantation. Most importantly, we demonstrated that injecting a huge quantity of human mesenchymal cells in a large-animal model, without immunosuppression, is a safe procedure, which may have important applications for future therapy in patients with different forms of muscular dystrophies.

Emphysema is a chronic obstructive pulmonary disease characterized abnormal dilatation of alveolar spaces, which impairs alveolar gas exchange, compromising the physical capacity of a patient due to airflow limitations. Here we tested the effects of G-CSF administration in pulmonary tissue and exercise capacity in emphysematous mice. C57Bl/6 female mice were treated with elastase intratracheally to induce emphysema. Their exercise capacities were evaluated in a treadmill. Lung histological sections were prepared to evaluate mean linear intercept measurement. Emphysematous mice were treated with G-CSF (3 cycles of 200 mg/kg/day for 5 consecutive days, with 7-day intervals) or saline and submitted to a third evaluation 8 weeks after treatment. Values of run distance and linear intercept measurement were expressed as mean SD and compared applying a paired t-test. Effects of treatment on these parameters were analyzed applying a Repeated Measures ANOVA, followed by Tukey’s post hoc analysis. p < 0.05 was considered statistically significant. Twenty eight days later, animals ran significantly less in a treadmill compared to normal mice (549.7 181.2 m and 821.7 131.3 m, respectively; p < 0.01). Treatment with G-CSF significantly increased the exercise capacity of emphysematous mice (719.6 200.5 m), whereas saline treatment had no effect on distance run (595.8 178.5 m). The PCR cytokines genes analysis did not detect difference between experimental groups. Morphometric analyses in the lung showed that saline-treated mice had a mean linear intercept significantly higher (p < 0.01) when compared to mice treated with G-CSF, which did not significantly differ from that of normal mice. Treatment with G-CSF promoted the recovery of exercise capacity and regeneration of alveolar structural alterations in emphysematous mice.

CONTEXT: With the cooperation of surgeons and the engineering division of the company Bhio supply© (EsteioRS, Brazil), a permanent single port was developed. AIMS: An experimental study assessed the safety and effi cacy of the device using a swine laparoscopic appendectomy model (right salpingo-oophorectomy). SETTINGS AND DESIGN: Experimental randomised study. MATERIALS AND METHODS: A total of 20 pigs were randomised for the conventional laparoscopic (CL) three-trocar technique or the single Centry port (CPort) with two working channels, aided by a transparietal thread. Operative times, surgical complications, CO2 use, and pneumoperitoneal pressure were checked. Pressure and chromopertubation tests assessed the ligatures. STATISTICAL ANALYSIS USED: For quantitative outcomes, the Fisher’s exact test analysed the samples to compare the surgeons in each group, the ANOVA test for parametric data (volume and pressure) and the Student’s t-test for analysis of the fascial incision length. The binaries and isolated occurrence events were described in percentages. RESULTS: For all cases, pneumoperitoneum was maintained. The CPort group, however, resulted in higher CO2 use (26.18 l; standard deviation [SD] ± 11.09) than CL group (5.69 l; SD ± 2.44) (P < 0.01). The mean pressure in CPort group (6.604 mmHg, SD ± 1.793) was comparatively lower than in CL group (7.382 mmHg, SD ± 1.833) (P = 0.363). There was no statistical difference between operative times, ligature safety or adverse surgical events between the different groups and surgeons. CONCLUSION: The surgical technique used with the single port showed no differences in safety and effi cacy. Though it does require more CO2 use, its working dynamics did not lead to increased operative times. The results were similar between the two surgeons in the study, suggesting that they can be reproduced.

PURPOSE: To evaluate the influence of the anesthetic regimen on anesthetic recovery, survival, and blood glucose levels following a 90% partial hepatectomy in rats. METHODS: Thirty adult male Wistar rats were divided into two groups according to their anesthetic regimens: intraperitoneal ketamine and xylazine or inhaled isoflurane. In order to prevent hypoglycemia, glucose was administered intraperitoneally and glucose (20%) was added to the drinking water. RESULTS: Anesthetic recovery time was longer in the ketamine and xylazine group. The survival rate after 72 hours was lower (log rank=0.0001) in the ketamine and xylazine group (0.0%) than in the isoflurane group (26.7%). The blood glucose after six hours was lower (p=0.017) in the ketamine and xylazine group (63±31.7 mg/dL) than in the isoflurane group (98±21.2 mg/dL). The prolonged anesthesia recovery time associated with ketamine and xylazine decreased the survival rate and blood glucose levels after 90% hepatectomy. CONCLUSION: Isoflurane anesthesia reduced the recovery time and incidence of hypoglycemia and increased the survival rate in the early hours, providing a therapeutic window that is suitable for experimental studies. OBJETIVO: Avaliar a influência do regime anestésico sobre a recuperação anestésica, a sobrevida em 72 horas e a glicemia após hepatectomia parcial de 90% em ratos. MÉTODOS: Trinta ratos Wistar machos adultos foram distribuídos em dois grupos conforme o regime anestésico: combinação de ketamina e xilazina intraperitoneal ou isoflurano inalatório. Para prevenção de hipoglicemia foi administrada glicose intraperitoneal e adicionado glicose (20%) na água de beber. RESULTADOS: A recuperação anestésica no grupo ketamina e xilazina foi mais prolongada. Durante primeira hora após hepatectomia, nenhum rato anestesiado com ketamina e xilazina despertou. Todos do grupo isoflurano estavam ativos minutos após final da cirurgia. A sobrevida em 72 horas foi menor (Log rank=0,0001) no grupo ketamina e xilazina (0,0%) que no grupo isoflurano (26,7%). Glicemia em 6 horas do grupo ketamina e xilazina (63±31,7 mg/dL) foi menor (p=0,017) que no grupo isoflurano (98 ±21,2 mg/dL). Prolongado tempo de recuperação anestésica com ketamina e xilazina diminuiu sobrevida e glicemia após hepatectomia 90%. CONCLUSÃO: Anestesia com isoflurano reduziu tempo de recuperação e hipoglicemia, além de aumentar a sobrevida nas primeiras horas, possibilitando uma janela terapêutica adequada para estudos experimentais.

Dissertação de mestrado em Patologia Experimental, apresentada à Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra A Metanfetamina (MA) é uma droga psicostimulante ilícita consumida em todo o mundo, sendo a segunda droga mais consumida, logo a seguir ao cannabis. Vários estudos mostraram que o consumo de MA provoca lesões neurodegenerativas no estriado, nos locais pré e pós-sinápticos. A exposição à MA leva à lesão de marcadores terminais dopaminérgicos, como a TH (tirosina hidroxilase), que implica depleção da DA e 5-HT, e aumento do marcador astrocitário GFAP (Proteína Glial Fibrilar Ácida). O propósito deste estudo foi demonstrar a influência do exercício físico na neuroprotecção do estriado, usando um modelo de toxicidade por MA, em murganhos de estirpe C57BL/6. Os animais foram divididos em quatro grupos, dois com prática de exercício físico (MA+ Ex e SAL+Ex) e dois sedentários (MA+Sed e SAL+Sed). O exercício físico consistia na prática de corrida em “Treadmill” durante 8 semanas, 5 dias por semana, a uma velocidade de 30cm/s, durante 30 minutos (com 5 minutos de aquecimento e 5 minutos de arrefecimento a 20cm/s), sem inclinação. Os animais foram administrados intraperitonealmente com uma injeção única de MA (30mg/Kg) ou uma solução salina (NACl 0,9%) e sacrificados, por decapitação, 72 horas depois. Os estriados foram dissecados em gelo e guardados a -80ºC. Foi feita a quantificação dos níveis de DA (e seus metabolitos) e 5-HT, através do método HPLC (Cromatografia Liquida de Alta Eficiência), e a determinação da expressão de TH (marcador da perda de neurónios dopaminérgicos) e GFAP (marcador astrocitário) através da técnica Western Blotting. Foi verificado que a MA produziu neurodegenerescência dos terminais dopaminérgicos, através da diminuição dos valores estriatais da DA e seus metabolitos, bem como da enzima TH. O aumento dos níveis estriatais da proteína GFAP também sugere neurotoxicidade e o contributo da MA na neuroinflamação. No entanto, os grupos de exercício físico não mostraram alterações comparativamente com os grupos sedentários. Em conclusão, os resultados sugerem que o exercício físico moderado não protegeu da neurodegenerescência produzida pela toxicidade por MA. The Methamphetamine (MA) is a psychostimulant illicit drug, consumed worldwide and it is the second most consumed drug, immediately after cannabis. Several studies have shown that consumption of MA causes neurodegenerative damages in the striatum, at pre-and postsynaptic sites. Exposure to MA leads to the injury of the dopaminergic terminals markers such as TH (tyrosine hydroxylase), which implies depletion of DA (dopamine) and 5-HT (serotonin), and increased the astrocyte marker, GFAP (glial fibrillary acidic protein). The purpose of this study is to demonstrate the influence of exercise on the neuroprotection of striatum, using a model of MA toxicity, in mice of strain C57BL / 6. The animals were divided into four groups, two with physical exercise (MA + Ex and SAL+Ex) and two sedentary (MA+Sed and SAL+Sed). The exercise training consisted of running on a treadmill, for 8 weeks, 5 days a week, at a velocity of 30cm/s, for 30 minutes (with 5 minutes warm-up and 5 minutes cooling, to 20 cm/s), without sloping. The animals were injected intraperitoneally with a single-dose of METH (30mg/Kg) or with saline solution (0.9% NaCl) and sacrificed by decapitation 72h post-treatment. Striata were dissected on ice and stored at - 80º. It was made the quantification of the DA levels (and its metabolites) and 5-HT, through the HPLC (High Performance Liquid Chromatography) method, and the determination of the expression of TH (marker of dopaminergic neuron loss) and GFAP (astrocyte marker) using the Western Blotting technique. It was found that METH produced neurodegeneration of the dopaminergic terminals, through the decreasing of the values of striatal DA and its metabolites as well as enzyme TH. The increased of striatal levels on GFAP protein, also suggests neurotoxicity, and the contribution of the MA in neuroinflammation. However, groups of physical exercise showed no changes compared to sedentary. In conclusion, the results suggest that moderate exercise did not protect the neurodegeneration produced by MA toxicity

Resumo: Objetivos: Desenvolver um modelo animal de neovascularização retiniana através de uma ou duas injeções do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) 165 na cavidade vítrea de coelhos. Avaliar esse modelo com angiografia fluorescente (AF), tomografia de coerência óptica (OCT) e análise histopatológica. Materais e métodos: Doze coelhos foram divididos em três grupos. Grupo I (n=3) recebeu injeção intra-vítrea de 0.1 mL de solução salina balanceada (grupo controle). Grupo II (n=6) recebeu 10 ?g de VEGF no dia 0; grupo III foi aplicado 10 ?g de VEGF no dia 0 e 7. O acompanhamento (dia 0,3,7,14,21,28) incluiu fotografia colorida do fundo de olho, AF, OCT e exame histopatológico. Os olhos foram removidos e corados com hematoxilina e eosina (HE). Resultados: Os animais do grupo I (controle) não apresentaram alterações no globo ocular durante os 28 dias de acompanhamento. Por outro lado os olhos do grupo II (uma injeção de VEGF) demonstraram após 72 horas da aplicação dilatação e tortuosidade dos capliares retinianos, já a neovascularização foi detectada no dia 7 e regrediu na segunda semana. No grupo III (duas injeções de VEGF) o vazamento dos capilares retinianos e a neovascularização se acentuaram até o dia 14 e ao final do acompanhamento tanto a histologia como o OCT evidenciaram o descolamento de retina tracional. O estudo histopatológico demonstrou um aumento no tamanho do calibre dos vasos tanto do grupo II e III ao se comparar com o controle. Conclusão: Os resultados demonstram um modelo animal eficiente e confiável de neovascularização de retina pela AF, OCT e histopatologia. Uma injeção de angiogênico desenvolve a neovascularização de retina que regride após sete dias, já duas aplicações desenvolvem uma neovascularização mais intensa, que após quatro semanas evolui para o descolamento de retina.

PURPOSE: To evaluate histologically the integration process of cellulose gel produced by Zoogloea sp when implanted into rabbits' eviscerated eyes. METHODS: This experimental study employed 36 eyes of 18 rabbits subjected to evisceration of their right eyes. The sclerocorneal bag was sutured and filled with biopolymer from sugar cane in the gel state. All animals were clinically examined by biomicroscopy until the day of their sacrifice which occurred on the 7th, 30th, 60th, 90th, 120th, or 240th day. The eyeballs obtained, including the left eyes considered controls were sent for histopathological study by optical macroscopy and microscopy. Tissue staining techniques used included hematoxylin-eosin, Masson trichrome (with aniline), Gomori trichrome, Van Gienson, Picrosirius red, and periodic acid-Schiff (PAS). RESULTS: No clinical signs of infection, allergy, toxicity, or extrusion were observed throughout the experiment. The corneas were relatively preserved. Macroscopic examination revealed a decrease of ~ 8% in the volume of the bulbs implanted with the biopolymer. After cutting, the sclerocorneal bag was solid, compact, elastic, and resistant to traction, with a smooth and whitish surface, and showed no signs of necrosis or liquefaction. The episcleral tissues were somewhat hypertrophied. The histological preparations studied in different colors revealed an initial lymphoplasmacytic infiltration, replaced by a fibroblastic response and proliferation of histiocytes, along with formation of giant cells. Few polymorphonuclearneutrophils and eosinophils were also found. Neovascularization and collagen deposition were present in all animals starting from day 30; although on the 240th day of the experiment the chronic inflammatory response, neovascularization and collagen deposition had not yet reached the center of the implant. CONCLUSION: In this model, the cellulose gel produced by Zoogloea sp proved to be biocompatible and integrated into the orbits. Morphometric, immunohistochemical and biodegradability studies should be performed in the future. OBJETIVOS: Avaliar histologicamente o processo de integração do gel da celulose produzida pela Zoogloe asp implantado em olhos eviscerados de coelhos. MÉTODOS: Estudo experimental utilizando 36 olhos de 18 coelhos. Todos eles tiveram seus olhos direitos eviscerados. A bolsa escleral foi suturada e preenchida com biopolimero da cana de açúcar, no estado gel. Todos os animais foram examinados clinicamente, sob biomicroscopia, até o dia de seus sacrifícios e enucleações que aconteceram no 7º, 30º, 60º,90º,120º e 240º dia. Os bulbos obtidos, inclusive os esquerdos, considerados controles, foram encaminhados para estudo histopatológicos de macroscopia e microscopia óptica. As colorações pela hematoxilina-eosina, tricômio de Masson (com anilina), tricômio de Gomori, Van Gienson e Picrosirius red e ácido periódico de Schiff (PAS) foram usadas. RESULTADOS: Durante o experimento não foram observados sinais clínicos de infecção, alergias, intoxicação ou extrusão. As córneas apresentavam-se relativamente preservadas. Exame macroscópico revelou uma diminuição de aproximadamente 8% no volume dos bulbos nos quais o biopolímero foi implantado. O corte do saco escleral mostrou um conteúdo sólido, compacto, elástico, resistente à tração, com superfície lisa e brancacenta. Não foram observados sinais de necrose, ou liquefação. O tecido epiescleral estava algo hipertrofiado. As preparações histológicas estudadas, nas diversas colorações, revelaram uma infiltração linfomonomorfonuclear inicial, substituída posteriormente por uma resposta fibroblástica e proliferação de histiócitos com formação de células multinucleadas gigantes. Foram também encontrados poucos polimorfonucleares neutrófilos e eosinófilos. A partir do 30º dia houve proliferação vascular e deposição de calágeno em todos os espécimes estudados, embora, no 240º dia do experimento, a resposta inflamatória crônica, a neovascularização e a deposição do colágeno não tinham ainda atingido o centro do implante. CONCLUSÃO: Neste modelo, o gel da celulose produzido pela Zoogloea sp, mostrou-se biocompatível e integrado às órbitas. Estudos morfométrico, imuno-histoquímico e de biodegradabilidade devem ser realizados futuramente.

Made available in DSpace on 2013-08-28T14:09:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 WOS000306687700090.pdf: 141400 bytes, checksum: 41b50410cc0558fe568f834ce2b9577a (MD5) Made available in DSpace on 2013-09-30T18:40:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 WOS000306687700090.pdf: 141400 bytes, checksum: 41b50410cc0558fe568f834ce2b9577a (MD5) WOS000306687700090.pdf.txt: 37081 bytes, checksum: bdfe065e7a523b5cf4259fe56d5437d8 (MD5) Previous issue date: 2012-07-23 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:50:50Z No. of bitstreams: 2 WOS000306687700090.pdf: 141400 bytes, checksum: 41b50410cc0558fe568f834ce2b9577a (MD5) WOS000306687700090.pdf.txt: 37081 bytes, checksum: bdfe065e7a523b5cf4259fe56d5437d8 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:50:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 WOS000306687700090.pdf: 141400 bytes, checksum: 41b50410cc0558fe568f834ce2b9577a (MD5) WOS000306687700090.pdf.txt: 37081 bytes, checksum: bdfe065e7a523b5cf4259fe56d5437d8 (MD5) Previous issue date: 2012-07-23 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP Introduction: Micronutrient deficiency is observed in heart failure patients. Taurine, for example, represents 50% of total free amino acids in the heart, and in vivo studies have linked taurine deficiency with cardiomyopathy.Methods: Thirty-four male Wistar rats (body weight = 100 g) were weighed and randomly assigned to one of two groups: Control (C) or taurine-deficient (T (-)). Beta-alanine at a concentration of 3% was added to the animals' water to induce taurine deficiency in the T (-) group. on day 30, the rats were individually submitted to echocardiography; morphometrical and histopathological evaluation and metalloproteinase activity, oxidative stress and inflammation evaluation were performed. Tissue samples were collected to determine the taurine concentration in the heart.Results: Taurine deficiency led to decreases in: ventricular wall thickness, left ventricle dry weight, myocyte sectional area, left ventricle posterior wall thickness and ventricular geometry. With regard to heart function, the velocity of the A wave, the ratio between the E and A wave, the ejection fraction, fractional shortening and cardiac output values were decreased in T () rats, suggesting abnormal diastolic and systolic function. Increased fibrosis, inflammation and increased activation of metalloproteinases were not observed. Oxidative stress was increased in deficient animals.Conclusions: These data suggest that taurine deficiency promotes structural and functional cardiac alterations with unique characteristics. Univ Estadual Paulista UNESP, Fac Med Botucatu, Dept Internal Med, Botucatu, SP, Brazil Univ Estadual Paulista UNESP, Inst Biociencias Botucatu, Dept Microbiol & Immunol, Botucatu, SP, Brazil Univ Estadual Paulista UNESP, Inst Biociencias Botucatu, Dept Chem & Biochem, Botucatu, SP, Brazil Univ São Paulo FMRP USP, Fac Med Ribeirao Preto, Dept Internal Med, Ribeirao Preto, SP, Brazil Univ Estadual Paulista UNESP, Fac Med Botucatu, Dept Internal Med, Botucatu, SP, Brazil Univ Estadual Paulista UNESP, Inst Biociencias Botucatu, Dept Microbiol & Immunol, Botucatu, SP, Brazil Univ Estadual Paulista UNESP, Inst Biociencias Botucatu, Dept Chem & Biochem, Botucatu, SP, Brazil

OBJETIVO: Revisar e sistematizar o conhecimento científico do modelo experimental em queimadura da pele em ratos. MÉTODOS: Revisão da literatura foi realizada de 2008 a Janeiro de 2011 na PubMed, EMBASE e LILACS. Os descritores usados foram: modelo animal, queimadura e ratos. 221 estudos foram identificados e 116 foram selecionados. RESULTADOS: Foi encontrado que: 54/86 (62,7%) tinham queimadura de terceiro grau; 55/73 (75,3%) estudaram o dorso; 45/78 (57.6%) usaram líquido aquecido e 27/78 (35,9%) usaram instrumento incandescente; 39/78 (50%) estudaram efeitos sistêmicos; 22/71 (31%) usaram ketamina associada a xilazina; 61/64 (95,3%) realizaram depilação com equipamento apropriado; 36/72 (50%) usaram microscopia; mais de 50% não descreveram uso de analgésicos ou antibióticos durante o período pós-operatório; em 42/116 (36,2%) foi realizada reposição hídrica pós-operatória; e o intervalo de tempo após a queimadura e a análise variou de 7s a quatro semanas. Aspectos legais sobre experimentos em queimaduras foram discutidos. CONCLUSÃO: Líquido aquecido foi o principal método para induzir queimadura de terceiro grau no dorso do animal, com anestesia usando quetamina e xilazina, após depilação, avaliados por microscopia, sem uso de analgesia ou antibióticos. Os estudos não são reprodutíveis. PURPOSE: To revise and systematize scientific knowledge of the experimental model for cutaneous burns in rats. METHODS: A bibliographical review from 2008 up to January 2011 in PubMed, EMBASE and LILACS was undertaken. Were used the keywords: animal models, burns and rats. 221 studies were identified, and 116 were selected. RESULTS: It was found that: 54/86 (62.7%) had third degree burns; 55/73 (75.3%) studied the back; 45/78 (57.6%) used heated water and 27/78 (35.9%) incandescent instruments; 39/78 (50%) studied systemic effects; 22/71 (31%) used ketamine associated with xylazine; 61/64 (95.3%) performed depilation with appropriate equipment; 36/72 (50%) used microscopy; more than 50% did not describe analgesia or antibiotics during the postoperative period; in 42/116 (36.2%) postoperative fluid therapy was performed; and the time interval after the burn, up to the beginning of the results analysis varied from 7s up to four weeks. Legislation issues on burn experiments are discussed. CONCLUSION: The hot water was the main method to induce burns those of third degree on the back, with anesthesia using ketamine and xylazine, after depilation. These were evaluated microscopically, without using analgesia or an antibiotic during the postoperative period. The studies were not very reproducible. UNIFESP-EPM UNIFESP, EPM SciELO

Atualmente, os ratos são os animais de laboratório mais usados para investigar a osteoporose. Apresentamos um método eficiente de ooforectomia e o comparamos com dois outros comumente utilizados para indução experimental de osteoporose (incisão cutânea dorsal na linha média e abordagem dorsolateral dupla). Ratas Wistar de 12 semanas de idade foram divididas em três grupos. No grupo A, a ooforectomia foi precedida por uma única incisão cutânea dorsal na linha média de 3 cm de comprimento; no grupo B, por incisões dorsolaterais duplas de aproximadamente 1 cm de comprimento cada; e no grupo C, por uma única incisão ventral transversal de 0,4-0,6 cm na região abdominal média. Os pesos corporais médios dos animais nos grupos A, B e C foram 258,12 ± 0,54 g, 255,78 ± 0,42 g e 254,55 ± 1,69 g, respectivamente. Houve diferenças significativas quanto à duração (em minutos) da cirurgia nos grupos B (9,65 ± 0,86) e C (7,55 ± 0,11;P < 0,001) em comparação à do grupo A (15,52 ± 0,30), e no grupo B (P < 0,01) em comparação à do grupo C. Os tempos de cicatrização da ferida (em dias) nos grupos B (9,22 ± 0,67) e C (8,01 ± 0,93) foram significativamente menores que aquele no grupo A (11,58 ± 1,2;P < 0,001), sendo tal tempo no grupo C discretamente menor que no grupo B. A cirurgia, como conduzida no grupo C, foi tecnicamente mais fácil, consumiu menos tempo e apresentou cicatrização mais rápida de ferida. Rats are currently the most used laboratory animals to investigate osteoporosis. We report an efficient method of ovariectomy and compared this method with the two other operative methods of ovariectomy (i.e., midline dorsal skin incision and double dorsolateral approach, which are used commonly for inducing experimental osteoporosis. Female Wistar rats, 12 weeks old, were divided into three groups. Ovariectomy was preceded by a single midline dorsal skin incision, 3 cm long, in the group A; double dorsolateral incisions, approximately 1 cm long, in the group B; and a single ventral transverse incision of 0.4-0.6 cm at the middle abdominal region in the group C. Animals in groups A, B, and C had a mean weight of 258.12 ± 0.54 g, 255.78 ± 0.42 g, and 254.55 ± 1.69 g, respectively. There were significant differences in the duration (in minutes) of surgery in the groups B (9.65 ± 0.86) and C (7.55 ± 0.11, P < 0.001) when compared to the group A (15.52 ± 0.30) and in the group B (P < 0.01) when compared to the group C. Wound healing time (in days) for groups B (9.22 ± 0.67) and C (8.01 ± 0.93) was significantly shorter than that for group A (11.58 ± 1.2, P < 0.001), with the wound healing time for group C being slightly shorter than that for group B. The surgery, as conducted in the group C, was technically easier, less time consuming and showed less wound healing duration.

OBJETIVO: Descrever um modelo experimental de lesão de isquemia/reperfusão hepática com manifestações sistêmicas, representadas pelo envolvimento pulmonar, que possa ser utilizado por aqueles que pretendem compreender esse fenômeno. MÉTODOS: Ratos Wistar machos (200-250g) foram usados. Quatorze foram alocados em dois grupos, sendo G1 com oito submetidos somente à laparotomia e G2, seis à isquemia e reperfusão hepática. As funções hepática (aminotransferases séricas, respiração mitocondrial, histologia) e pulmonar (teste do azul de Evans) foram analisadas. RESULTADOS: houve diferença estatística significativa entre G1 e G2 ao se comparar valores de AST (24,3 ± 108 e 5406 ± 2263), ALT (88,5 ± 28,5 e 5169 ± 2690), razão de controle respiratório (3,41 ± 0,17 e 1,91 ± 0,55) e relação ADP/O (1,93 ± 0,03 e 1,45 ± 0,27), lesões histológicas (necrose, células inflamatórias, hemorragia, microesteatose) e teste do azul de Evans (194,31 ± 53 e 491,8 ± 141). CONCLUSÃO: O modelo mostrou-se útil para o estudo de lesão de isquemia/reperfusão hepática. OBJECTIVE: To describe an experimental model of hepatic ischemia/reperfusion injury with systemic manifestations, represented by pulmonary involvement, which may be used by those who intend to comprehend this phenomenon. METHODS: Fourteen Male Wistar rats (200-250g) were allocated to two groups, G1 with eight rats submitted only to laparotomy and G2, six rats submitted to hepatic ischemia and reperfusion. Hepatic (serum aminotransferases, mitochondrial respiration, histology) and pulmonary (Evans blue test) functions were analyzed. RESULTS: There was a statistically significant difference (p< 0.05) between G1 and G2 comparing values of AST (24,3 ± 108 and 5406 ± 2263), ALT (88,5 ± 28,5 and 5169 ± 2690), respiratory control ratio (3,41 ± 0,17 and 1,91 ± 0,55) and ADP/O relation (1,93 ± 0,03 and 1,45 ± 0,27), histological lesions (necrosis, inflammatory cells, hemorrhage, microsteatosis) and Evans blue test (194,31 ± 53 and 491,8 ± 141). CONCLUSION: The model has proven useful to study hepatic I/R injury.

PURPOSE: To describe technical aspects of a new experimental model that simulates a non heart beating organ donor. METHODS: Landrace pigs were operated on and cardiac arrest was obtained by means of myocardial infarction and interruption of ventilator support. RESULTS: Mean cardiac frequency, systolic and diastolic blood pressure levels, central venous pressure, oxygen saturation and concentration of expired CO2 dropout occurred at seven minutes after cardiac arrest. CONCLUSION: The procedure was easily reproduced and a homogeneous circulatory failure could de obtained by the end of seven minutes. The model is suitable for further studies regarding abdominal organ transplantation. OBJETIVO: Descrever os aspectos técnicos de um novo modelo experimental que simula um doador de órgãos após a parada cardíaca. MÉTODOS: Suínos da raça Landrace foram operados e a parada cardíaca foi obtida por meio de infarto do miocárdio e interrupção do suporte ventilatório. RESULTADOS: Freqüência cardíaca, pressão arterial sistólica e diastólica, pressão venosa central, saturação de oxigênio e concentração parcial de CO2 são consistentes com falência hemodinâmica ao final de sete minutos. CONCLUSÕES: O procedimento foi facilmente executado e uma falência circulatória pode ser obtida ao final de sete minutos. Este modelo é adequado para estudos posteriores com respeito a preservação e tranplantes de órgãos abdominais.

"Conferencia lida na Sociedade de Medicina de Porto Alegre, em 24 de julho de 1925."Continua no v. 5, n. 4, dez. 1926, p. 93-97.

OBJECTIVE: The aim of the current study was to monitor the migration of superparamagnetic iron oxide nanoparticle (SPION)-labeled C6 cells, which were used to induce glioblastoma tumor growth in an animal model, over time using magnetic resonance imaging (MRI), with the goal of aiding in tumor prognosis and therapy. METHODS: Two groups of male Wistar rats were used for the tumor induction model. In the first group (n=3), the tumors were induced via the injection of SPION-labeled C6 cells. In the second group (n=3), the tumors were induced via the injection of unlabeled C6 cells. Prussian Blue staining was performed to analyze the SPION distribution within the C6 cells in vitro. Tumor-inducing C6 cells were injected into the right frontal cortex, and subsequent tumor monitoring and SPION detection were performed using T2- and T2*-weighted MRI at a 2T field strength. In addition, cancerous tissue was histologically analyzed after performing the MRI studies. RESULTS: The in vitro qualitative evaluation demonstrated adequate distribution and satisfactory cell labeling of the SPIONs. At 14 or 21 days after C6 injection, a SPION-induced T2- and T2*-weighted MRI signal reduction was observed within the lesion located in the left frontal lobe on parasagittal topography. Moreover, histological staining of the tumor tissue with Prussian Blue revealed a broad distribution of SPIONs within the C6 cells. CONCLUSION: MRI analyses exhibit potential for monitoring the tumor growth of C6 cells efficiently labeled with SPIONs. OBJETIVO: Realizar monitoramento temporal por imagem por ressonância magnética da migração de células C6 marcadas com nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro utilizadas na indução de tumor de glioblastoma no modelo animal, com o intuito de auxiliar no prognóstico e na terapêutica de tumores. MÉTODOS: Para o modelo animal de indução de tumor, foram utilizados ratos Wistar machos, divididos em dois grupos. No primeiro grupo (n=3), o tumor foi induzido por células C6 marcadas com nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro e, no segundo grupo, (n=3) o tumor foi induzido por C6 não marcadas. Foi realizada análise in vitro da distribuição intracelular das nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro nas células C6 mediante coloração de azul da prússia. As células C6 para a indução de tumor foram implantadas no córtex frontal direito. Posteriormente, foram realizados o monitoramento tumoral e a detecção das nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro por sequências de imagem por ressonância magnética ponderadas em T2 e T2*, em campo de 2T. Após os estudos de imagem por ressonância magnética, o tecido tumoral foi submetido à análise histológica. RESULTADOS: A avaliação qualitativa do estudo in vitro mostrou boa distribuição e satisfatória marcação celular com nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro. No monitoramento realizado por imagem por ressonância magnética, foi observada, no 14º e 21º dia, redução do sinal em T2 e T2*, induzida pelas nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro, na lesão localizada no lobo frontal esquerdo em topografia parassagital. Por meio da marcação com azul da prússia, a análise histológica do tecido tumoral revelou que, nas células C6, ainda encontramos uma vasta distribuição das nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro. CONCLUSÃO: A imagem por ressonância magnética apresenta-se com alto potencial para o monitoramento das células C6 marcadas eficientemente com nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro na avaliação do crescimento tumoral.

A utilizacao de animais em experimentos cientificos e descrita desde o seculo V a.C. Avancos cientificos na area da saude sao atribuidos a modelos animais. O status moral dos animais sempre foi debatido. Objetivos: Este artigo visa a revisao historica e resumo da legislacao atual, para orientar pesquisadores ao utilizar modelos animais na pesquisa em otorrinolaringologia. Material e Metodos: Pesquisa na base de dados Medline. Resultados: no Brasil, por muitos anos nao havia regulamentacao para o uso de animais em experimentacao. Eram seguidas normas de organizacoes nacionais e internacionais. Recentemente, foi sancionada a lei no 11.794/08, que estabelece procedimentos para o uso cientifico de animais. Na otorrinolaringologia, os estudos com laringe utilizaram coelho, porco, cachorro, cobaias (Cavia porcellus) e camundongo; estudos para face coelho, rato e cachorro; rinoplastia com coelho; e orelha interna com ratos e cobaias (albinas). Conclusoes: Os pesquisadores envolvidos em trabalhos cientificos com animais devem conhecer os principios da lei no 11.794/08 e pesquisar quais animais sao apropriados para cada subarea estudada seus modelos com maior aplicabilidade. Os otorrinolaringologistas, especialmente aqueles que se dedicam a pesquisa, necessitam estar sempre atentos para o respeito as regras eticas de utilizacao de animais em seus estudos.

Várias técnicas têm sido empregadas para a criação de esfíncteres artificiais no intestino para controle da velocidade do trânsito intestinal e prevenção de refluxo coloileal. A realização de seromiotomias duplas circunferenciais para substituir a valva ileocecal foi realizada por Rena et al. em 20 pacientes e mostrou resultados 5 clínicos satisfatórios. A proposta deste trabalho experimental é analisar, por meio de biologia molecular, a diversidade microbiota da região do íleo terminal e do colo proximal de ratos antes e depois da ressecção da válvula ileocecal com a reconstrução do trânsito com anastomose ileocólica término-terminal isolada ou associada à criação de esfíncter artificial pela técnica de Rena. Quatorze ratos foram 10 operados e colhidos conteúdo do íleo e do colo processadas como amostras controle. Após a ressecção da junção ileocecocólica, o trânsito foi reconstruído com anastomose ileocólica término-terminal. Em sete animais acrescentou-se a criação um esfíncter artificial a montante da anastomose. Os animais foram assistidos por 20 dias e reoperados para colheita de conteúdo intraluminar do íleo e do colo e 15 processamento de novas amostras. Das amostras foi extraído o ácido desoxirribonucléico (DNA) para Reação em Cadeia da Polimerase e Eletroforese em Gel com Gradiente de Desnaturação (PCR-DGGE). O gel com os padrões de bandas eletroforéticas geradas das amostras de DNA de bactérias totais foram submetidos ao programa BIONUMERICS para análise da similaridade pelo 20 coeficiente de Dice e da diversidade da microbiota pelo Índice de Shannon-Weaver. O dendograma do coeficiente de Dice de todas as amostras não estabeleceu correlação para segmentos ileais ou colônicos e as amostras-controle dos respectivos animais. Os valores do índice de Shannon-Weaver ficou limitado entre 2,11 e 2,93, com variações para os diversos segmentos nos dois grupos. A média 25 deste índice foi maior no segmento ileal (2,61) e do colo (2,57) dos animais com a criação do esfíncter artificial e do colo (2,63) nos animais sem criação de esfíncter artificial em relação à amostra controle (2,38, 2,39 e 2,36, respectivamente). Um número maior de amostras ileais apresentou valores mais elevados comparativamente com amostras do colo a despeito do fato de a concentração 30 microbiana ser descrita e considerada maior no colo. A ausência da junção ileocecal influenciou as variações da diversidade em todos os segmentos. Com a criação de novo esfíncter a diversidade aumentou nos segmentos tanto ileal quanto do colo. As variações encontradas podem se justificar em função de o comportamento da distribuição da microbiota no trato digestório ter características peculiares e receber influência de fatores locais e sistêmicos determinando a continuidade do presente estudo em relação à quantificação e especificidade de bactérias. Several techniques have been employed for the creation of artificial bowel sphincters to control the speed of intestinal transit and prevent coloileal reflux. Dual circumferential seromyotomy to replace the ileocecal valve was performed by Rena at al. in 20 patients and showed satisfactory clinical results. The purpose of this 5 experimental work is to analyze, through molecular biology, the microbial diversity in the terminal ileum and proximal colon of rats before and after resection of the ileocecal valve. Then, the reconstruction of end to end ileocolic anastomosis was conducted in one group while an artificial sphincter was added in the other group, using the technique developed by Rena. Fourteen rats were operated and samples of 10 their ileum and colon contents were collected and processed as controls. After resection of the ileocecocolic junction, transit was reconstructed by end to end ileocolic anastomosis. In seven animals, an artificial sphincter was created upstream of the anastomosis. The animals were monitored for 20 days and reoperated to allow the collection of intraluminal content of the ileum and colon and processing of new 15 samples. Deoxyribonucleic Acid (DNA) was extracted from the samples for Polymerase Chain Reaction and Gel Electrophoresis with Denaturing Gradient PCR-DGGE. The electrophoretic band patterns generated from DNA samples of total bacteria were submitted to the BIONUMERICS software system for similarity analysis using "Dice" coefficient and diversity analysis of the microbiota by Shannon-Weaver 20 Index. The dendrogram generated from the "Dice" coefficient of all samples did not establish a correlation for ileal or colonic segments and samples of the respective control animals. The values of the Shannon-Weaver index was limited to between 2.11 and 2.93, with variations for different segments in both groups. The average of the index was higher in the ileum segment (2.61) and colon (2.57) in animals with an 25 artificial sphincter and in the colon (2.63) in animals without an artificial sphincter, compared to the control sample (2.38, 2.39 and 2.36, respectively). A larger amount of samples showed higher diversity values compared with colon samples, although microbial concentration is described and considered to be greater in the colon. The absence of the ileocecal junction affected diversity changes in all segments. With the 30 creation of a new sphincter, diversity increased in both segments (ileum and colon). The observed variations can be explained by the peculiar characteristics of the distribution behavior of the microflora in the digestive tract and the effect of local and systemic factors, which requires the continuity of this study focusing on quantification and specificity of bacteria.

O objetivo desta tese foi analisar os efeitos do exercício físico sobre o comportamento motor, a expressão de tirosina hidroxilase na subtsância nigra, a sensibilidade mecânica e nociceptiva, a morfologia do nervo sural e a expressão de peptídeo relacionado ao gene da calcitonina no corno dorsal da medula espinal de ratos adultos machos e diabéticos induzidos por estreptozotocina. Para isso foram realizados três experimentos. No primeiro, foi realizado protocolo de oito semanas de treinamento em esteira em animais não diabéticos e diabéticos. Foi analisado o comportamento motor, pelo uso do teste do rotarod e campo aberto e a expressão de TH na substância nigra e área tegmental ventral desses animais. Os animais diabéticos sedentários apresentaram déficits motores e diminuição na reatividade à tirosina hidroxilase (TH) na substância nigra e área tegmental ventral. As alterações motoras e reatividade à TH na substância nigra foram prevenidas nos animais diabéticos treinados. No segundo experimento os animais diabéticos sedentários apresentaram diminuição no limiar sensorial mecânico, avaliado pelos filamentos de von Frey, bem como diminuição da área e diâmetro das fibras mielinizadas, aumento da densidade de fibras e área ocupada pelo tecido conjuntivo, diminuição da espessura da bainha de mielina e aumento da relação g no nervo sural. Essas alterações não foram vistas nos animais diabéticos treinados. Ainda, o nervo sural dos animais diabéticos apresentou maior porcentagem de fibras mielinizadas pequenas e menor porcentagem de fibras mielinizadas de pequeno diâmetro quando comparado aos animais controles e diabéticos treinados. No terceiro experimento demonstramos que os animais diabéticos induzidos por estreptozotocina apresentaram diminuição da sensibilidade nociceptiva, avaliada pelo teste do tail flick, assim como diminuição da expressão do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina no corno dorsal da medula espinal. Por outro lado, os animais diabéticos treinados não mostraram alterações na sensibilidade mecânica e na expressão do mesmo peptídeo. Estes dados demonstram que o exercício físico em esteira em ratos diabéticos é capaz de prevenir alterações no comportamento motor e sensorial, assim como as alterações morfológicas no nervo sural, na expressão de tirosina hidroxilase na substância nigra e do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina no corno dorsal da medula espinal. The aim of this thesis was to study the effects of treadmill training on the motor and sensitive behavior, the tyrosine hydroxylase immunoreactivity in the substantia nigra, the mechanical and nociceptive sensitivity, the sural nerve morphology and the calcitonin gene-related peptide immunoreactivity in the dorsal horn of the spinal cord from diabetic rats induced by streptozotocin. For this, we made three experiments. In the first, an eight weeks treadmill training protocol was made in diabetic and non diabetic animals. Was analyzed the motor behavior using rotarod and open field tests and the immunoreactivity to tyrosine hydroxylase (TH) in the substantia nigra and ventral tegmental area of these animals. Sedentary diabetic animals showed motor deficits and a decrease in the TH immunoreactivity in the substantia nigra and in the ventral tegmental area. Treadmill training in diabetic animals prevented the motor deficits and the decrease in the tyrosine hydroxylase reactivity. In the second experiment, sedentary diabetic animals showed a reduction in the mechanical sensitivity threshold, analyzed using von Frey filaments. Also, diabetic animals showed a decreased in the area and in diameter of the myelinated fibers, an increased in the fibers density and in the area occupied by connective tissue, a decreased myelin sheat thickness and an increased g ratio in the sural nerve. These alterations were not seen in trained diabetic animals. In addition, the sural nerve of the sedentary diabetic animals had a higher percentage of small myelinated fibers and a lower percentage of large diameter myelinated fibres than the control and trained diabetic animals. Moreover, in the third experiment we showed that the diabetic animals induced by streptozotocin had a decrease in the nociceptive sensitivity, analyzed using the tail flick test. These animals showed a decrease in the calcitonin gene-related peptide immunoreactivity in the dorsal horn of the spinal cord. Furthermore, these decreased in the nociceptive sensitivity and in the peptide immunoreactivity were not seen in the trained diabetic rats These data showed that treadmill training in diabetic rats is able to prevent alterations in the motor and sensitive behavior. Also, exercise is able to prevent the morphological alterations in the sural nerve, the decrease in the TH immunoreactivity in the substantia nigra and the decrease in the calcitonin gene-related peptide immunoreactivity in the dorsal horn of the spinal cord.

Dissertação de mestrado em Medicina (Patologia Experimental), apresentada à Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra A metanfetamina (MA) é uma droga ilícita com propriedades psicoestimulantes altamente viciante, cujo uso aumentou por todo mundo. Estudos anteriores demonstraram que uma única injecção de metanfetamina causa neurotoxicidade devido a alterações corticais dopaminérgicas e serotoninérgicas nos murganhos. Sabe-se que o exercício exerce efeitos neuroprotetores e melhora a recuperação neuronal em diversos distúrbios cerebrais. Assim, o objetivo deste estudo foi descobrir se o exercício físico protege contra a neurotoxicidade causada pela MA no córtex frontal. 24 murganhos adultos C57BL/6 foram divididos em 4 grupos: 1) Salino + sedentário; 2) Metanfetamina + sedentário; 3) Salino + exercício; 4) Metanfetamina + exercício. Os grupos foram submetidos à prática regular de exercício num tapete rolante (5dias/semana) durante 8 semanas. Após o período de exercício, os animais foram injectados com uma dose única de metanfetamina (30mg/kg, intraperitonealmente) ou com solução salina (NaCl 0,9%) e sacrificados por deslocamento cervical três dias após a injecção. O córtex frontal foi recolhido para análise da expressão de proteína glial fibrilar ácida (GFAP) e da tirosina hidroxilase (TH), para determinação dos níveis totais de dopamina (DA), e dos seus metabolitos (DOPAC e HVA) e da serotonina (5-HT). As monoaminas foram quantificadas por HPLC-ED, e os níveis de proteína enzimática foram analisados pela técnica de Western Blot. O protocolo de exercício utilizado não afetou a depleção dos marcadores dopaminérgicos e serotoninérgicos causados pela MA (DA, DOPAC, HVA, TH e 5-HT). Os níveis de serotonina no grupo salino + exercício apresentou um aumento, quando comparado com o grupo controlo. O treino no tapete rolante causou um aumento nos níveis de GFAP no grupo injetado com MA. Em conclusão, este trabalho demonstra que este protocolo de exercício não só não é neuroprotetor como potencia a neurotoxicidade induzida pela MA no córtex frontal Methamphetamine (MA) is an illicit drug with highly addictive psycostimulant properties, which use have increased worldwide. Previous studies have shown that a single high-methamphetamine injection causes neurotoxicity due to cortical dopaminergic and serotonergic changes in mice. It is known that exercise exerts neuroprotective effects and improves neuronal recovery in several brain disorders. Thus, the aim of this study was to discover if exercise could be neuroprotective towards methamphetamine-induced neurotoxicity in the frontal cortex. 24 adult house mice C57BL/6 were divided in 4 groups: 1) Saline + sedentary; 2) Methamphetamine + sedentary; 3) Saline + exercise; 4) Methamphetamine + exercise. The exercise groups were submitted to regular exercise in treadmill (5days/week) for 8weeks. After exercise period the animals were injected a single dose of methamphetamine (30mg/kg, intraperitoneally) or saline (NaCl 0,9%) and sacrificed by cervical dislocation 3days after the injection. The frontal cortex was collected for analysis of the expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and the tyrosine hydroxylase (TH), for the determination of the total levels of dopamine (DA), and it’s metabolites (DOPAC and HVA), and of serotonin (5-HT). The monoamines were quantified by HPLC-ED, and enzymatic protein levels were analyzed by Western Blot technique. The exercise protocol used did not affect the depletion of dopaminergic and serotonergic markers caused by MA (DA, DOPAC, HVA, 5-HT and TH). Serotonin levels in group saline + exercise showed an increase compared with the control group. The workout on the treadmill caused an increase in GFAP levels in the group injected with MA. In conclusion, this study demonstrates that this exercise protocol is not only non-neuroprotective and enhances MA-induced neurotoxicity in the frontal cortex.

Objetivo: O objetivo deste experimento foi avaliar o gradiente de pressão de pulso após o implante de triplo stent no tratamento endovascular do aneurisma de aorta em suínos. Métodos: Estudo prospectivo realizado no Centro de Cirurgia Experimental e Biotério da Universidade Estadual de Ciências da Saúde de Alagoas, utilizando suínos híbridos, fêmeas, portadores de aneurisma de aorta abdominal infrarrenal produzidos com bolsa de pericárdio bovino. Os animais foram submetidos ao implante de triplo stent, seguido da medida das pressões intra-stent e intra-saco aneurismático após 30 minutos. A variável primária foi o gradiente de pressão de pulso após o implante do triplo stent. Resultados: O tempo médio cirúrgico foi de 190 minutos. Após implante dos stents, a pressão de pulso foi menor no saco aneurismático, quando comparada com a medida intra-stent. O implante do triplo stent associou-se a um gradiente médio de pressão de pulso de 34%. A pressão diastólica apresentou gradiente mínimo após o procedimento, observando-se em alguns casos, maior pressão diastólica no interior do saco aneurismático quando comparada com os valores intra-stent. Conclusão: A avaliação do gradiente médio de pressão de pulso após o implante do triplo stent no tratamento endovascular do aneurisma de aorta em suínos, sugere que o triplo stent apresenta resultados semelhantes, pelo menos em curto prazo, àqueles encontrados na literatura com o uso de endopróteses. Objective: The objective of this study was to evaluate the pressure gradient after triple layer stenting in the endovascular treatment of aortic aneurysms in swines. Methods: An experimental study conducted at the Bioterium and Center for Experimental Surgery of Universidade Estadual de Ciências da Saúde de Alagoas, using hybrid swines, females, with infrarenal abdominal aortic aneurysms produced with bovine pericardium sacs. The animals underwent triple layer stenting, which was followed by the measurement of intrastent and intrasac pressure after 30 minutes. The primary variable was the pulse pressure gradient after stent deployment. Results: The average surgery time was 190 minutes. The pulse pressure was lower in the aneurysm sac than intra-stent. The stent deployment was associated with a mean pulse pressure gradient of 34%. The diastolic pressure gradient presented after the procedure was irrelevant, with a higher intrasac than intra -stent diastolic pressure observing in some cases. Conclusion: The evaluation of the mean pulse pressure gradient after triple stent implantation in the endovascular treatment of aortic aneurysms in swines suggests that the use of triple stent shows similar results, at least in the short term, to those found in the literature with the use of endoprostheses.

Dissertação de mestrado em Patologia Experimental), apresentada à Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra Epilepsy is a disease that presents complex problems of analysis, research and therapeutic. Nowadays, the antiepileptic therapeutic is the result of research that, begining at 1980, has developed, as the mechanisms of the neurobiology of epilepsy are better known. In spite of the evolution in pharmacological therapeutic and even neurocirurgical, 25 - 30% of the epileptic disorders are refractory at actual conventional therapeutics. This put the challenge of the resort of complementary therapeutics as helpers of the actual therapeutics schemes. Among those therapeutics, the Acupuncture has been used with evident results in epileptic syndromes, namely in those with seizures simptomatology. The aim of this study is to assess if the acupuncture has any interference in the neutralization of the epileptic seizures. In this study, were used Wistar male rats with eight week aged. The animals were subjected to a seizures induction protocol with Pentilenotetrazol (PTZ). In one of the protocols (A protocol), was made any treatment; in one another, B protocol, was used the acupuncture at the acupoints: 06 PC, 03 SI, 06 SP, 03 LIV, 34 GB, 14 GV, 16 VG and Yintang; in the third protocol (C protocol) was done intraperitoneal administration of physiological saline. The animals were observed during the thirty minutes following PTZ administration and the animal behaviour was registered in video. The analisys of the observations let us to conclude that acupuncture, at the acupoints used, interfered with the temporal profile of the clinical picture and in the majority of the cases, it was efficient. A epilepsia é uma doença que nos coloca problemas complexos de análise, investigação e terapêutica. Na actualidade, a terapêutica antiepiléptica é o resultado de investigação que a partir de 1980 se tem desenvolvido à medida que se vão conhecendo melhor os mecanismos da neurobiologia da epilepsia. Apesar da evolução na terapêutica farmacológica e até neurocirúrgica, 25-30% das epilepsias são refractárias às actuais terapêuticas convencionais. Isto coloca o desafio do recurso a terapêuticas complementares como auxiliares dos esquemas terapêuticos actuais. Uma dessas terapêuticas, a Acupunctura, tem sido utilizada com aparentes resultados nos quadros epilépticos, nomeadamente, nos de expressão convulsiva. O objectivo deste trabalho é avaliar se a acupunctura tem alguma interferência na neutralização da sintomatologia convulsiva da epilepsia. Neste estudo utilizaram-se ratos Wistar, machos, com 8 semanas de idade. Os animais foram submetidos a um protocolo de indução de convulsões com Pentilenotetrazol (PTZ). Num protocolo (protocolo A) não foi efectuado qualquer tratamento, noutro, protocolo B, foi feita a acupunctura, fazendo a punctura de 06PE, 03ID, 06BP, 03FI, 34VB, 14DU, 16DU, Yintang e num terceiro protocolo (protocolo C), foi feita a administração de soro fisiológico, por via intraperitoneal. Os animais foram observados durante os 30 minutos imediatos à administração de PTZ, e foi feito o respectivo registo em vídeo. A análise das observações permitiram concluir que a acupunctura, nos pontos utilizados, interferiu com o perfil temporal do quadro clínico, sendo na maioria dos casos eficiente.

Introdução: Estresse crônico na vida adulta aumenta ansiedade e a utilização do alimento palatável “confortante” (comfort food) como forma de inibir sintomas de ansiedade, que parece ser mediado pela alteração do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA). O objetivo deste trabalho foi verificar se o estresse no período neonatal pode afetar ansiedade, comportamento alimentar e a resposta ao estresse em ratas fêmeas adultas. Métodos: A partir do segundo dia de vida, ninhadas de ratos Wistar e suas genitoras foram submetidas à redução de material para confeccionar o ninho (intervenção). Na vida adulta, a ansiedade foi mensurada usando o teste de supressão alimentar pela novidade (NSFT), e a resposta neuroendócrina a 20 minutos de estresse por contenção foi verificada pela mensuração dos níveis plasmáticos de corticosterona e ACTH basal e imediatamente, 20, 40 e 70 minutos após o fim do estresse. Em outro subgrupo de animais, também submetidos à intervenção neonatal, o consumo basal de ração padrão assim como a preferência alimentar por alimento palatável, rico em gordura (34%) e açúcar (20%), foram mensuradas em um sistema computadorizado de consumo alimentar contínuo (BioDaq, Research Diets®) de ratas que receberam somente ração regular e nos animais expostos aos dois tipos de alimento (dieta regular e palatável) durante 30 dias. O ganho peso dos animais foi acompanhado semanalmente. Ao final do tratamento, os níveis de T3 e a gordura abdominal foram mensurados. Resultados: As genitoras do grupo intervenção apresentaram cuidado materno com menos variabilidade e menor qualidade quando comparadas às genitoras controles. O estresse na vida precoce aumentou a ansiedade na vida adulta no NSFT teste (latência para comer alimento doce em um novo ambiente (p=0.005), diminuiu o consumo de ração ao retornar para caixa-moradia (p=0.045), assim como aumentou os níveis de corticosterona em resposta ao estresse agudo por contenção (p=0.020). Nenhuma diferença foi encontrada níveis e ACTH em resposta ao estresse (p=0,282). O consumo de ração padrão diferiu entre os grupos somente no ciclo escuro, sendo menor no grupo intervenção (p=0.047). Ao ser exposto cronicamente à dieta palatável o grupo intervenção neonatal prefere este tipo de alimento quando tem opção de escolha (dieta palatável + dieta regular) (p=0.008) diminuindo o consumo de dieta regular. O ganho de peso durante primeiras 72h (p=0,417) e ao longo das 4 semanas (0,474) de exposição às dietas não foi diferente entre os grupos, assim como não houve diferença no percentual de gordura abdominal (p=0,166). No teste de preferência com todos os grupos, enquanto o grupo controle que recebeu cronicamente dieta palatável demonstrou uma diminuição na preferência por esse tipo de dieta comparado ao grupo controle exposto somente a dieta regular, os animais expostos a estresse precoce não demonstraram redução na preferência após exposição crônica (p

Orientadores: Luiz Roberto Lopes, Celso Dario Ramos Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Introdução - Com os estudos de Gould et al. (1960), Cabanas (1977) e Morton et al. (1992), estabeleceu-se o conceito da pesquisa do linfonodo sentinela. Esse se baseia na teoria de que ao identificar a presença ou ausência de metástase no primeiro linfonodo que recebe a drenagem linfática a partir do tumor (sentinela), poderia representar o estado de acometimento dos outros linfonodos. Isto evitaria a realização desnecessária de linfadenectomias. Com o passar dos anos, foi consagrada para ser aplicada em casos de melanoma e câncer de mama. Nesta última década, tenta-se estender os princípios da utilização da pesquisa de linfonodo sentinela para os cânceres do aparelho digestivo. Entretanto, no caso do estômago, existem algumas dificuldades, como: presença de sistema de drenagem linfática multidirecional, ocorrência de metástases saltatórias e identificação de mais de um linfonodo sentinela por indivíduo. Objetivo - Criar e padronizar um modelo animal para o treinamento de pesquisa de linfonodos sentinelas em estômago. Método - Trinta e dois coelhos, saudáveis, foram submetidos à anestesia exclusivamente intramuscular. Por meio de laparotomia, foi injetado na subserosa da parede anterior do corpo gástrico, 0,1 ml de fitato marcado com tecnécio-99m (0,2 mCi), em seguida pelo mesmo orifício, de 0,2 ml de Azul Patente V® 2,5%. A cavidade abdominal foi avaliada, "in vivo", para pesquisa de suspeitas de linfonodos azuis (corados em azul) e com detector manual de radiação gamma aos 5, 10 e 20 minutos para detecção de suspeitas de linfonodos radioativos (radioatividade identificada superior a 10X o valor apresentado pelo fundo). Após 20 minutos, realizou-se ressecção e exérese total do estômago, baço e suspeitas de linfonodos, para posterior avaliação da radioatividade "ex vivo". A seguir, encaminharam-se as suspeitas de linfonodos para estudo histológico para identificação de tecido linfóide. Resultados - Foram identificados linfonodos em 30 coelhos (93,75%) com média de 2,2 por animal. Das 90 suspeitas de linfonodos detectadas, em 70 casos (77,77%) obteve-se confirmação histológica para tecido linfóide. Dessas, a maioria foi identificada e localizada na região entre o esôfago e o fundo gástrico durante a avaliação "in vivo" aos 5 minutos. Dois coelhos faleceram durante os experimentos (Taxa de mortalidade = 6,25%). Conclusão - O modelo experimental em coelhos para pesquisa de linfonodos sentinelas em estômago por métodos combinados foi factível, de fácil execução e baixa mortalidade, podendo ser usado para treinamento Abstract: Introduction - The concept of sentinel lymph node was established by the studies of Gould et al. (1960), Cabanas (1977) and Morton et al. (1992). It is based on the theory that, whenever the presence or absence of metastasis is identified in the first lymph node that receives the lymphatic drainage from the tumor (sentinel) the status of involvement of other lymph nodes might be infered. This could avoid the performance of unnecessary lymphadenectomies. Over the years, its use was consecrated by its application in melanoma and breast cancer. In the last decade, attempts have been made to extend the principles of sentinel lymph node investigation to cancers of the digestive tract. In the case of stomach cancer, additional difficulties were found, such as multiple and aberrant lymphatic routes, the occurrence of skip metastasis and the possible identification of more than one sentinel lymph node in the same patient. Aim - To develop and evaluate an animal model for training sentinel lymph node navigation in the stomach. Methods - Thirtytwo healthy rabbits, were prepped and given intramuscular anesthesia. Through a formal laparotomy, they received a subserosal injection of 0.1 ml of phytate labeled with technetium-99m (0.2 mCi) in the anterior wall of the gastric corpus, followed by 0.2 ml of Blue Patent ® V 2.5%, through the same puncture site. Suspicious lymph nodes were searched in-vivo at 5, 10 and 20 minutes, both visually (Blue Patent stained lymph nodes) and with a manual gamma radiation detector (to detect suspected radioactive lymph nodes, displaying radioactivity levels over 10X the value displayed by the background). En-block resection of the stomach, spleen, visible limph nodes and local fat tissue was then performed and the specimen was assessed "ex vivo" for radioactivity. Suspected lymph nodes were sent for histological study to evaluate the presence of lymphoid tissue. Results - Radiolabeled or stained lymph nodes were identified in 30 rabbits (93.75%) with an average of 2.2 specimens per animal; of the 90 suspicious lymph nodes detected, histology confirmed lymphoid tissue in 70 cases (77.77%). Most lymph nodes were identified at the 5-minute in-vivo evaluation and their most common location was found to be in the region between the esophagus and the gastric fundus. Two rabbits died during the procedure resulting in a 6.25% mortality. Conclusion - The rabbit model proved adequate for training in sentinel node navigation in the stomach by combined methods (dye and radiocolloid) being easy to execute and associated with low mortality Doutorado Fisiopatologia Cirúrgica Doutor em Ciências

Introdução e Objetivo: Sabe-se que o estresse crônico induz hiperalgesia de longa duração. Prévios estudos de nosso grupo demonstraram que o tratamento com a eletroestimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC) anódica foi eficaz no tratamento de dor inflamatória crônica, porém pouco se sabe sobre os mecanismos de ação desta técnica. Neste estudo avaliamos o efeito do estresse crônico e do tratamento com ETCC anódica diária por 8 dias na hiperalgesia/alodinia e nos níveis séricos de corticosterona, interleucina 1β, níveis de TNFα em hipocampo e BDNF em medula espinhal e tronco cerebral de ratos. Métodos e Resultados: Foram utilizados 48 ratos machos Wistar com 60 dias de vida divididos em quatro grupos: controle (C), estresse (E), estresse+ETCC (EN) e estresse+SHAM (ES). O modelo de estresse crônico por restrição foi aplicado por 11 semanas (1h/dia/5dias/sem). Após este tratamento foi avaliada a resposta nociceptiva utilizando os testes de von Frey e da Placa Quente, após verificar o estabelecimento da hiperalgesia/alodinia foi então iniciado o tratamento com ETCC anódica/20 min/dia (500µA)/8 dias. Os animais foram eutanasiados por decapitação, o soro e as estruturas foram coletados para posterior análise por ELISA. Após 11 semanas de estresse diário os animais apresentaram diminuição do limiar de dor em ambos os testes (von Frey- C: 65,71±3,36g; E: 47,88±2,22g, Student’s t test, P = 0,000; C=12 e S=29] Placa quente- C: 7,00±0,59; S: 3,15±0,19, Student’s t test, P= 0,00; C=13 e E=32). Após o final do tratamento de ETCC anódica – o grupo EN apresentou aumento do limiar de dor imediatamente após a última sessão somente na Placa-quente (C: 5,00±0.49s; E: 2,80±0,24s; ES: 2,75±0,25s; EN: 4,77±0,61s; ANOVA de uma via/Tukey’s test, P=0.000, n=9-12/grupo) e 24hs após, a ETCC aumentou o limiar nociceptivo em ambos os testes (von Frey C: 65.9±3.28s; E: 47.04±2.59g; ES: 48.57±3.80g; EN: 63,26±3,62g; Placa quente- C: 4,92±0,51s; E: 2,54±0,15s; ES: 2,41±0,28s; EN: 4,00±0,33s; ANOVA de uma via/Tukey’s test, P=0,000; n= 9-12/grupo para ambos os testes). Não foi observada diferença estatisticamente significativa nos níveis séricos de corticosterona (C: 385,90±171,54 nmol/L; E: 295,73±158,72 nmol/L; ES: 418,02 ±89,90 nmol/L; EN: 424,85±102,17 nmol/L; ANOVA de uma via/Tukey’s test, P>0,05, n=6-7) e interleucina 1 β (C: 46,76±4,93 pg/L; E: 51,22±11,85 pg/L; ES: 58,38±7,45 pg/L; EN: 42,21±3,90 pg/L; ANOVA de uma via/Tukey’s test, P>0,05, n=3-6) entre os grupos, As análises neuroquímicas mostraram diminuição significativa nos níveis de TNFα em hipocampo no grupo EN em relação aos demais grupos (C: 128,76±28,65 pg/L; E:126,77±13,00 pg/L; ES: 123,26±5,22 pg/L; EN:52,50±2,00 pg/L ANOVA de uma via/Tukey’s test, P≤0,05, n=3-4), E, diminuição significativa nos níveis de BDNF em medula no grupo E em relação aos grupos C e EN (C:78,9+6,5; E:49,9+4,2; ES: 67,4+3,8; EN:77,4+4,5 - ANOVA de uma via, P0.05, n=6-7) and interleukin 1β levels in serum(C: 46.76±4.93 pg/L; S: 51.22±11.85 pg/L; SS: 58.38±7.45 pg/L; SN: 42.21±3.90 pg/L; one-way ANOVA /Tukey’s test, P>0.05, n=3-6) between groups. The SN group presented a significant decreased of TNFα in hippocampus in relation to the others groups(C: 128.76±28.65 pg/L; E:126.77±13,00 pg/L; ES: 123.26±5.22 pg/L; EN:52.50±2.00 pg/L one-way ANOVA /Tukey’s test, P

OBJECTIVE: The aim of the present study was to determine the impedance of Wistar rats treated with high-fat and high-sucrose diets and correlate their biochemical and anthropometric parameters with chemical analysis of the carcass. METHODS: Twenty-four male Wistar rats were fed a standard (AIN-93), high-fat (50% fat) or high-sucrose (59% of sucrose) diet for 4 weeks. Abdominal and thoracic circumference and body length were measured. Bioelectrical impedance analysis was used to determine resistance and reactance. Final body composition was determined by chemical analysis. RESULTS: Higher fat intake led to a high percentage of liver fat and cholesterol and low total body water in the High-Fat group, but these changes in the biochemical profile were not reflected by the anthropometric measurements or bioelectrical impedance analysis variables. Anthropometric and bioelectrical impedance analysis changes were not observed in the High-Sucrose group. However, a positive association was found between body fat and three anthropometric variables: body mass index, Lee index and abdominal circumference. CONCLUSION: Bioelectrical impedance analysis did not prove to be sensitive for detecting changes in body composition, but body mass index, Lee index and abdominal circumference can be used for estimating the body composition of rats.