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O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do diluente com dimetilsulfóxido (DMSO) sobre a estrutura e funcionalidade do espermatozóide de tambaqui Colossoma macropomum criopreservado. O sêmen foi diluído 1/9 (v/v) em Beltsville Thawing Solution acrescido de 5, 10, 15 e 20% de DMSO. Após dois minutos foi congelado em botijão dry shipper (-76°C/12h), sendo armazenado em botijão de NL (-196°C). Após 15 dias o sêmen criopreservado foi avaliado quanto às taxas de motilidade, latência, fertilização, eclosão, integridade de membrana e de DNA, funcionalidade mitocondrial e viabilidade. As taxas de fertilização e eclosão com 10% DMSO não diferiram (P > 0,05) do sêmen fresco. Os diluentes com 5 e 10% de DMSO foram superiores (P < 0,05), nas avaliações de motilidade, latência e integridade de DNA do espermatozóide, às concentrações 15 e 20%. Entretanto, a viabilidade celular nas concentrações 5 e 10% de DMSO foi inferior (P < 0,05) à obtida com 20% de DMSO, enquanto com 15% de DMSO não diferiu (P > 0,05) das demais concentrações. Considerando os resultados in vivo e in vitro, nas condições experimentais relatadas, o DMSO na concentração de 10% foi associado à melhor manutenção da qualidade de sêmen criopreservado de Tambaqui. The objective of this study was to evaluate the effect of an extender including dimethylsulfoxide (DMSO) on the structure and functionality of frozen sperm of tambaqui Colossoma macropomum. Sperm was extended 1/9 (v/v) in Beltsville Thawing Solution including 5%, 10%, 15% and 20% DMSO. After two minutes, sperm was frozen in dry shipper (-76 °C/12h) and subsequently stored in liquid nitrogen (-196 °C). After 15 days, sperm was evaluated according to: motility; latency period; fertilization and hatching rates; membrane and DNA integrity; mitochondrial functionality, and viability. Fertilization and hatching rates with 10% DMSO did not differ from those with fresh sperm (P > 0.05). Extenders including 5% and 10% DMSO presented greater (P < 0.05) sperm motility, latency period and DNA integrity than extenders including 15% and 20% DMSO. However, sperm viability with 5% and 10% DMSO was lower (P < 0.05) than with 20% DMSO, but for the extender with 15% DMSO, sperm viability was similar to that with other concentrations (P > 0.05). Considering those results, the extender with 10% DMSO was associated with improved quality of frozen sperm of Tambaqui.

Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2010-10-08T16:03:20Z No. of bitstreams: 1 Theriogenology - Bianchi et al 2008 - Congelamento de sêmen suíno com amidas.pdf: 275366 bytes, checksum: ad7c4c69d8e1462e723c5ec2fd192bd4 (MD5) Made available in DSpace on 2010-10-08T16:03:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Theriogenology - Bianchi et al 2008 - Congelamento de sêmen suíno com amidas.pdf: 275366 bytes, checksum: ad7c4c69d8e1462e723c5ec2fd192bd4 (MD5) Previous issue date: 2008 Two experiments were conducted to evaluate the use of amides as cryoprotectants and two centrifugation temperatures (15 or 24 8C) in boar semen cryopreservation protocols. Semen was diluted in BTS, cooled centrifuged, added to cooling extenders, followed by the addition of various cryoprotectants. In experiment 1, mean ( S.E.M.) sperm motility for 5% dimethylformamide (DMF; 50.6 1.9%) and 5% dimethylacetamide (DMA; 53.8 1.7%) were superior (P < 0.05) to 5% methylformamide (MF;43.2 2.4%) and 3% glycerol (GLY; 38.1 2.3%), with no significant difference between MF and GLY. Sperm membrane integrity was higher (P < 0.05) for DMA than for MF or GLY (50.9 1.9, 43.3 2.5, and 34.5 2.8%, respectively). Sperm membrane integrity was higher in DMF (47.9 2.1%) than in glycerol (34.5 2.8%, P < 0.05), but was similar to other treatments (P > 0.05). In experiment 2, we tested MF, DMF, and DMA at 3, 5, and 7%. Sperm motility and membrane integrity were higher for 5% DMA (53.8 1.7 and 50.9 1.9%) and 5% DMF (50.6 1.9 and 47.9 2.1%), in comparison with 7% DMF and all MF concentrations (P < 0.05). For sperm motility and membrane integrity, 5% DMA exceeded (P < 0.05) 3% DM, with greater membrane integrity than 3% DMF (P < 0.05). In both experiments, sperm motility and membrane integrity were superior at 15 8C versus 24 8C (P < 0.05), with no interaction between centrifugation temperature and treatments (P > 0.05). In conclusion, boar semen was successfully cryopreserved by replacement of glycerol with amides (especially 5% DMA) and centrifugation at 15 8C, with benefits for post-thaw sperm motility and membrane integrity.

Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2019-07-26T14:01:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_lucia_pereira_dias.pdf: 525744 bytes, checksum: a977151dc3f14f974f90bf4a414ecf5a (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2019-07-29T17:41:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_lucia_pereira_dias.pdf: 525744 bytes, checksum: a977151dc3f14f974f90bf4a414ecf5a (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2019-07-29T17:41:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_lucia_pereira_dias.pdf: 525744 bytes, checksum: a977151dc3f14f974f90bf4a414ecf5a (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-10 Sem bolsa O espermatozoide suíno é uma célula metabolicamente ativa, que necessita de aporte energético, na forma de adenosina trifosfato (ATP), para manter sua homeostase. A partir da hidrólise do ATP em adenosina monofosfato, é sinalizada a atividade motora para o movimento flagelar. Contudo, quando o espermatozoide da espécie suína é submetido a processos tecnológicos de conservação de sêmen, como a criopreservação, há gastos energéticos acima do normalmente esperado, com perdas na concentração de células viáveis, promovendo baixa motilidade espermática diminuindo sua qualidade seminal. Estruturas celulares como, membrana plasmática, mitocôndria e acrossoma podem ser afetadas negativamente pelas crioinjurias que sofrem as células devido aos processos de congelamento/descongelamento da criopreservação.O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da adição de ATP exógeno, em diferentes concentrações, no diluente de congelamento de sêmen suíno, através da análise de cinética e estruturas celulares. O estudo foi realizado a partir de 23 amostras de doses inseminantes de ejaculados suíno ((n=23), provenientes de uma central de inseminação. Na metodologia da criopreservação foram utilizados diluentes de resfriamento, Lactose-11% (80%) e gema de ovo (20%), e de congelamento com 89,5% do DR + 1,5% Equex-Paste® e 9% de Glicerol. No diluente de congelamento foi adicionado o ATP exógeno (Adenosine5’-triphosphate disodiumsalthydrate -Sigma-Aldrich®) nas concentrações T1 (C), T2 (0,025mM), T3 (0,25mM), T4 (2,5mM) e T5 (25,0 mM). As palhetas obtiveram um volume total de 0,5mL em cada com concentração de 500x106 espermatozoides. Foram descongeladas em banhomaria (37°C) e realizada a leitura da cinética no sistema CASA (Computer Assisted Sperm Analysis Sperm Vision 3.5) em três tempos, e as estruturas celulares pelo Citometro de fluxo (Attune® Cytometer). Os resultados apresentaram-se variados, porém, ficou evidenciado que o tratamento com 0,25mM de ATP foi o mais satisfatório no descongelamento (tempo zero) para a cinética espermática (motilidade total e progressiva), enquanto que o tratamento com 25mM foi o que apresentou menor desempenho, porém este, obteve um resultado melhor nos tempos de uma e 2 horas após o descongelamento. Pig spermatozoa is a metabolically active cell, which requires energy input, in the form of adenosine triphosphate (ATP), to maintain its homeostasis. From the hydrolysis of ATP in adenosine monophosphate, motor activity is signaled for flagellar movement. However, when the spermatozoa of the swine species are subjected to technological processes of semen conservation, such as cryopreservation, there are energy expenditures above the normally expected, with losses in the concentration of viable cells, promoting low sperm motility reducing their seminal quality. Cellular structures such as plasma membrane, mitochondria, and acrosome may be negatively affected by the cryoinjurias that undergo the cells due to the freeze / thaw processes of cryopreservation. The objective of this study was to evaluate the effects of the addition of exogenous ATP, in different concentrations, in the swine semen freezing diluent, through kinetic analysis and cellular structures. In the cryopreservation methodology, diluents of cooling, Lactose-11% (80%) and egg yolk were used. The study was performed from 23 samples of inseminating doses of porcine ejaculates (n = 23) from an insemination center. (20%) and freezing with 89.5% of DR + 1.5% Equex-Paste® and 9% Glycerol. In the freezing diluent, exogenous ATP (Adenosine 5'-triphosphate disodiumsalthydrate - Sigma-Aldrich (0.25 mM), T4 (2.5 mM) and T5 (25.0 mM). The vals obtained a total volume of 0.5 mL each Concentration of 500x106 spermatozoa, were thawed in a water bath (37 °C) and the kinetics were read in the three-phase Computer Assisted Sperm Analysis (SpermVision 3.5) system and the cell structures by the Flow Cytometer (Attune® Cytometer) The results were varied, however, it was evidenced that the treatment with 0.25 mM of ATP was the most satisfactory (Total time and progressive motility), while the treatment with 25mM was the one that presented the lowest performance, but this one, obtained a better result in the times of one and two hours after the thawing.

O aumento populacional, urbanização e atividades industriais e agrícolas têm aumentado o aporte de poluentes em ecossistemas aquáticos. Para avaliar a qualidade da água e os efeitos dos poluentes na biota utiliza-se o biomonitoramento. Uma espécie de peixe nativa, vivípara e de pequeno porte potencialmente utilizável como biomonitora e modelo ecotoxicológico para espécies dulcículas e estuarinas no país é a Jenynsia multidentata (Anablepidae, Ciprinodontiforme). Como a reprodução é uma das funções biológicas que podem ser afetadas pela poluição, e a qualidade dos espermatozoides pode contribuir para o sucesso reprodutivo, testes que avaliem sua qualidade produzem bioindicadores sensíveis e seguros de poluição aquática. Um dos parâmetros utilizados para medir a qualidade espermática é a motilidade, sendo esta influenciada principalmente pela osmolalidade do meio. Como não se encontrou estudos determinando a osmolalidade ideal para a J. multidentata, foi testado os efeitos de diferentes osmolalidades (240-460 mOsm/kg) da Solução Balanceada de Hanks (HBSS), na motilidade e outros parâmetros de qualidade espermática (potencial de membrana mitocondrial e integridade de membrana plasmática e DNA) em J. multidentata. Além disso, foi coletado sangue da artéria caudal e medida a osmolalidade plasmática. A osmolalidade plasmática em J. multidentata foi de 326 ± 3,9 mOsm/Kg. Osmolalidades entre 240 e 320 ativaram mais de 50% dos espermatozoides, sendo que as taxas de motilidade mais constantes e duradouras foram entre 300 e 320 mOsm/Kg (isosmoticidade), por até 7 dias. As maiores taxas de integridade de membrana foram entre 280-360 mOsm/Kg, potencial de membrana mitocondrial 300-460 mOsm/Kg, e as maiores taxas de integridade de DNA entre 260-380 mOsm/Kg no 4° dia de avaliação. Em 4 dias de avaliação, tanto a hipo (240 mOsm/Kg) ou hiperosmolalidade (460 mOsm/Kg) apresentaram as menores taxas de motilidade, integridade de membrana plasmática e integridade de DNA. O potencial de membrana mitocondrial foi reduzido somente na hipo-osmolalidade (240 mOsm/Kg) que também foi mais prejudicial a integridade de membrana plasmática. É provável que o estresse oxidativo gerado pelo choque osmótico seja um dos fatores que está reduzindo a qualidade espermática em meio não isosmótico, como relatada em mamíferos. Tendo definido a osmolalidade adequada do meio de armazenamento, foram avaliado os efeitos do cobre na reprodução em machos de J. multidentata. O cobre é um metal essencial para os seres vivos, mas em concentrações elevadas torna-se tóxico. Uma das características conhecidas do cobre é a sua capacidade de provocar estresse oxidativo, e por suas características intrínsecas, os espermatozoides são suscetíveis a danos oxidativos. Como os mecanismos de toxicidade do cobre no sistema reprodutivo em peixes não estão elucidados, é possível que o estresse oxidativo seja um desses mecanismos. Sendo assim, avaliou-se os efeitos de concentrações ambientalmente de cobre presentes nos ecossistemas aquáticos de água doce (0, 4.5, 9 e 18 µg L-1), de forma aguda (4 dias) e crônica (21 dias), em parâmetros de qualidade espermática (motilidade, potencial de membrana mitocondrial e integridade de membrana plasmática e DNA) e espermatogênese (concentração espermática) em J. multidentata. O ensaio bioquímico de lipoperoxidação foi utilizado como marcador de estresse oxidativo. Verificou-se aumento significativo (0,4907 µmol TMP/mg de peso seco) (p