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Quase 6 milhões de crianças com até 5 anos morreram em 2015 (UNICEF), mais da metade por doenças infecciosas evitáveis pela vacinação. Outras enfermidades ainda não são combatidas por vacinas, como aquelas causadas por arbovírus. A Zika (ZIKV) é em geral uma doença branda, autolimitada, mas, na gravidez, pode levar à um espectro de malformações congênitas aos neonatos. Demonstramos que crianças nascidas de mulheres infectadas por ZIKV na gravidez apresentam baixa detecção de anticorpos neutralizantes (AbNeut) anti-ZIKV. Essas crianças são vacinadas de acordo com o Programa Nacional de Imunização, incluindo as vacinas tríplice viral (TV: Sarampo, Caxumba, Rubéola) e a do vírus Febre amarela (YFV). TV e YFV são vacinas de vírus vivos atenuados, administradas em duas doses até os 4 anos. Neste estudo, propomos avaliar a imunidade dessas crianças aos antígenos vacinais dos vírus sarampo (MeV) e rubéola e, YFV. O estudo consiste na coleta de sangue de 90 crianças de 4-5 anos, dispostas em três grupos: G1, sem alterações clínicas, nascidas de mães com qRT-PCR negativo de ZIKV; G2, assintomáticas nascidas de mães com ZIKV qRT-PCR+ ou com critério clínico-epidemiológico de Zika e; G3, com Síndrome da Zika Congênita nascidas de mães ZIKV qRT-PCR+ ou critério clínico-epidemiológico. A imunogenicidade está sendo avaliada pela dosagem dos anticorpos IgG anti-MeV e anti-rubéola (EuroImmun) e detecção de anticorpos neutralizantes (AbNeut) contra YFV por PRNT50. Até o momento, crianças do G1 (apenas n = 3) tomaram 2,7 ± 1,2 doses da TV há 34±19 meses; G2 (apenas n = 3) tomaram 2,6 ± 0,6 doses da TV há 37 ± 6 meses e, G3 (n = 16) tomaram 2,6 ± 0,8 doses da TV há 32 ± 5 meses. Os títulos de IgG anti-MeV foram de 391±314 UI/mL para G1 (2/3 positivos), 150 ± 106 UI/mL para G2 (todos negativos) e 3428 ± 10463 UI/mL para G3 (10/16 positivos). Os títulos de IgG anti-rubéola foram de 55 ± 38 UI/mL para G1 (todos positivos), 23 ± 18 UI/mL para G2 (2/3 positivos) e 35 ± 43 UI/mL para G3 (13/16 positivos). Para a vacina YFV, as G1 tomaram 1,3 ± 0,6 doses há 34 ± 24 meses; G2 tomaram duas doses há 9 ± 3 meses e G3 tomaram 1,3 ± 0,5 doses há 28 ± 18 meses. Os títulos de PRNT50 foram ≥ 320 para G1, de 160 a ≥ 320 para G2 e de 40 a ≥ 320 para G3. Todas as crianças apresentaram títulos de AbNeut anti-YFV. Parece haver diferença na imunogenicidade à TV em relação aos três grupos e imunogenicidade efetiva a vacina YFV em todas as crianças, que serão confirmados aumentando a disponibilidade das amostras.

A infecção pelo ZIKV durante a gestação pode levar ao desenvolvimento de anormalidade congênitas, conhecidas como Síndrome da Zika Congênita (SZC). Níveis elevados de citocinas relacionadas ao perfil Th17, como IL17, IL1β e IL6 foram demonstrados durante a infecção pelo ZIKV. Além disso, sabe-se que, durante a gestação, são detectados níveis elevados de TGFβ, o que poderia criar um ambiente favorável à diferenciação de células TCD4 naive em Th17. Sendo assim, recrutamos uma coorte composta por mulheres infectadas durante a gravidez e crianças expostas ao ZIKV por transmissão vertical e que desenvolveram ou não a SZC. Avaliamos mães infectadas pelo ZIKV durante a gestação (Mães, n = 21) e crianças nascidas (Crianças, n = 17) de mães que relataram rash cutâneo durante a gravidez. Como grupo controle, mulheres infectadas pelo ZIKV, mas fora do período gestacional, foram recrutadas (Mulheres, n = 6). Todos os doadores foram avaliados 2-3 anos após a infecção aguda por ZIKV. O diagnóstico da infecção por ZIKV nas mulheres adultas foi confirmado por qRT-PCR. Por citometria de fluxo, caracterizamos (1) subpopulações de células Th17, utilizando os marcadores CCR6, CXCR3 e CCR4 e o perfil de memória (CD45RA e CCR7); (2) frequência de células TCD4 IL-17A+ e TCD4 IL-17A+IFN-γ+ após estimulação in vitro com peptídeos do ZIKV (ZIKV MP). Além disso, quantificamos as citocinas IL17A, IL6 e TGFβ nos sobrenadantes de cultura após a estimulação in vitro com ZIKV MP por ELISA. Observamos maior frequência de células Th17 em Mães e Crianças e no grupo de Mulheres, as células CCR6+DN foram as mais frequentes. Detectamos níveis basais elevados de IL17A em Mães e Crianças; de IL6 em crianças; e TGFβ nas Mães. Após estimulação com ZIKV MP, foi observada redução na produção de IL17A e TGFβ no grupo de Mães, assim como uma diminuição na frequência de células T CD4 IL17A+ (Th17), especialmente naquelas que deram à luz bebês com SZC. Porém, um aumento nas células T CD4 IL17A+IFNγ+ (Th1Th17) foi detectado neste mesmo grupo e nos dois grupos de crianças, mas não no grupo Mulheres. Assim, sugerimos que ocorreu um priming de células Th1Th17 em Mães que deram à luz bebês com SZC e em Crianças, independente do desfecho seu clínico. De acordo com a literatura, células Th1Th17 são consideradas patogênicas, com tropismo para o sistema nervoso central. Desta forma, nossos dados encorajam uma profunda investigação sobre o possível envolvimento das células Th1Th17 no desenvolvimento da SZC.

Paralelo à pandemia de COVID-19, Brasil continuou a enfrentar doenças tropicais como a Dengue. Mas, segundo os Boletins Epidemiológicos, os casos de Dengue no Brasil em 2020 foram subnotificados. O objetivo deste estudo é identificar a frequência de coinfecções por SARS-CoV-2 e DENV e avaliar a gravidade das coinfecções em relação às monoinfecções. Amostras de plasma de 143 pacientes COVID-19 de 2020, 15 doadores saudáveis e 15 pacientes com infecção por DENV de 2013 foram avaliados. Ensaios imunoenzimáticos utilizando testes comerciais foram realizados: Anti-SARS-CoV-2 IgA e IgG (Euroimmun), proteína NS1 do DENV (Platelia), anti-DENV IgM e IgG (Euroimmun). Dentre os doadores saudáveis foi detectado 75% de IgG anti-DENV; dentre os COVID-19, 75,9% IgA anti SARS-CoV-2, 66,7% IgG anti SARS-CoV-2, 80% IgG anti-DENV e por fim, IgM anti-DENV em 6 (4%) casos; dentre os casos confirmados de Dengue, IgA anti SARS-CoV-2 foi detectado em 1 caso (8,3%), IgG anti-SARS-CoV-2 em nenhum caso, NS1 de DENV em 41,7% e IgM anti-DENV em 33,3%. De acordo com o desfecho clínico, a presença ou não de sinais/sintomas no momento da coleta da amostras, os pacients COVID-19 foram reagrupados em brandos/moderados, graves, óbitos e aqueles já recuperados dos sinais/sintomas. Os 6 casos de COVID-19/Dengue também foram avaliados separadamente. Observamos que idosos são maioria em COVID-19 graves e óbitos; mulheres são maioria dos COVID-19 recuperados; tosse é mais frequente em COVID-19; cefaléia, mialgia/artralgia e vômito são mais frequentes na Dengue; pacientes COVID-19/Dengue foram aqueles com alterações vasculares. As DO IgA anti-SARS-CoV-2 foram mais elevadas nos COVID-19 graves, óbitos e COVID-19/Dengue comparados aos doadores saudáveis e pacientes Dengue; as DO IgG anti-SARS-CoV-2 foram mais elevadas nos COVID-19 comparados aos doadores saudáveis e pacientes Dengue; as DO IgA e IgG anti SARS-CoV-2 foram maiores nos COVID-19 óbitos comparado aos recuperados; COVID-19 recuperados ainda mantém níveis de detecção de IgA e IgG anti-SARS-CoV-2 detectáveis. Há diferenças clínicas, demográficas e de detecção de anticorpos anti-SARS-CoV-2 entre pacientes COVID-19 de acordo com o desfecho clínico e dias da doença. Até o momento, 6% de casos de COVID-19 com sugestiva infecção recente por DENV foram identificados. Os casos de coinfecção SARS-CoV-2/DENV estão sendo confirmados por RT-PCR DENV e esperamos a partir desses resultados, tirar mais conclusões.

Chikungunya virus (CHIKV) vertical transmission occurs due to maternal viremia in the prepartum. Clinical presentation in neonates can be varied; however, the consequences of intrauterine exposure on the immune response are unclear. Thus, we aimed to analyze inflammatory alterations in children exposed to maternal CHIKV infection. This is a cross-sectional study that included children exposed to maternal CHIKV infection (confirmed by RT-qPCR and/or IgM). Circulant immune mediators were analyzed by a multiplex assay. RESULTS: We included 33 children, with a mean age of 3 ± 2.9 months-old, and 19 (57.6%) were male. Only one child presented neurological alterations. CHIKV-exposed infants showed elevated levels of MIP-1α, MIP-1β, and CCL-2 (p < 0.05). Pro-inflammatory cytokines such as TNFα, IL-6, and IL-7 (p < 0.0001) were also increased. In addition, lower levels of PDGF-BB and GM-CSF were observed in the same group (p < 0.0001). Principal component (PC) analysis highlighted a distinction in the inflammatory profile between groups, where PC explained 56.6% of the alterations. Our findings suggest that maternal exposure to CHIKV can affect the circulating levels of pro-inflammatory cytokines during the infants’ first year of life. The long-term clinical consequences of these findings should be investigated.

In 2015, ZIKV infection attracted international attention during an epidemic in the Americas, when neurological disorders were reported in infants who had their mothers exposed to ZIKV during pregnancy. World Health Organization (WHO) epidemiological data show that 5 to 15% of neonates exposed to ZIKV in the uterus have complications included in abnormalities related to Congenital Zika Syndrome (CZS). The risk of complications after birth is not well documented, however, clinical evidence shows that 6% of infants exposed to ZIKV during pregnancy have complications present at birth, and this rate rises to 14% when medical monitoring is performed in all exposed infants, regardless of birth condition. Thus, the evaluation and monitoring of all exposed infants are of foremost importance as the development of late complications has been increasingly supported by clinical evidence. The identification of changes in protein profile of infants exposed to ZIKV without CZS could provide valuable findings to better understand molecular changes in this cohort. Here, we use a shotgun-proteomics approach to investigate alterations in the serum of infants without CZS symptoms but exposed to intrauterine ZIKV (ZIKV) compared to unexposed controls (CTRL). A complex pattern of differentially expressed proteins was identified, highlighting the dysregulation of proteins involved in axon orientation, visual phototransduction, and global protease activity in children exposed to ZIKV without CZS. These data support the importance of monitoring children exposed to ZIKV during gestation and without early CZS symptoms. Our study is the first to assess molecular evidence of possible late disorders in children victims of the ZIKV outbreak in the Americas. We emphasize the importance of medical monitoring of symptomatic and asymptomatic children, as apparently unexplained late neurological and eye disorders may be due to intrauterine ZIKV exposure.

High levels of T helper 17 cell (Th17)-related cytokines have been shown in acute Zika virus (ZIKV) infection. We hypothesized that the high levels of Th17-related cytokines, associated with a regulatory environment during pregnancy, create a favorable milieu for the differentiation of CD4+Th17 cells. We present data from a cross-sectional study on mothers who confirmed ZIKV infection by qRT-PCR and their children. We also recruited non-pregnant women infected with ZIKV in the same period. ZIKV infection occurred between 2015 and 2017. We collected samples for this study between 2018 and 2019, years after the initial infection. We highlight that, after in vitro stimulation with ZIKV CD4 megapool (ZIKV MP), we found a lower frequency of IL-17-producing CD4+ T cells (Th17), especially in the mothers, confirmed by the decrease in IL-17 production in the supernatant. However, a higher frequency of CD4+ IL-17+ IFN-γ+ T cells (Th1Th17) responding to the ZIKV MP was observed in the cells of the mothers and children but not in those of the non-pregnant women. Our data indicate that the priming of CD4 T cells of the Th1Th17 phenotype occurred preferentially in the mothers who gave birth to children with CZS and in the children.

Introduction: Human cytomegalovirus is a major cause of morbidity in kidney transplant patients. Objectives: We aimed to study viral replication and serological response in the first months post kidney transplant in patients undergoing universal prophylaxis or preemptive therapy and correlate the findings with the clinical course of Human cytomegalovirus infection. Patients and methods: Independent from the clinical strategy adopted for managing Human cytomegalovirus infection, prophylaxis versus preemptive therapy, the pp65 antigenemia assay and serological response were assessed on the day of transplantation, and then weekly during the first three months of post-transplant. Results: From the 32 transplant recipients, 16 were positive for pp65 antigenemia, with a similar incidence rate in each group. There were no positive results in the first three weeks of monitoring; the positivity rate peaked at week eight. There was a trend for a higher and earlier frequency of positivity in the universal prophylaxis group in which the course of the Human cytomegalovirus infection was also more severe. Despite the differences in clinical picture and in the initial immunosuppressant schedule, the serological response was similar in both groups. Conclusion: Routine monitoring during the first three post-transplant months has a positive impact on the early detection of Human cytomegalovirus viral replication allowing for timely treatment in order to reduce morbidity of the disease. The strategy of universal therapy employing intravenous ganciclovir was associated to a worse clinical course of the Human cytomegalovirus infection suggesting that the use of >10 cells/2 × 105 leukocytes as a cut-off in this setting may be inappropriate. Keywords: Cytomegalovirus, pp65 antigenemia, Kidney transplant, Universal prophylaxis, Preemptive therapy