Search

La leishmaniosis es una enfermedad muy importante para el ser humano pero su tratamiento es bastante difícil. Por esta razón muchos investigadores han venido buscando plantas que contengan componentes químicos activos contra esta parasitosis. En Costa Rica no se tienen estudios al respecto y por eso el objetivo de este estudio fue la búsqueda de componentes activos contra Leishmania sp. en plantas de Costa Rica; 67 especies de la Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB) fueron seleccionadas para realizar este trabajo. Para ello se prepararon extractos crudos hidro-alcohólicos de material fresco o desecado de raíz, tallo, hojas maduras o tiernas, flores y frutos inmaduros o maduros. Usando pruebas presuntivas y luego específicas, se analizó el efecto de tales extractos sobre una cepa de Leishmania (OCR). Se consideraron plantas promisorias solamente aquellas en que al menos una de sus partes presentara un CI50

La prevalencia de infecciones por Toxoplasma gondii en el ser humano es de 5-90% según la zona geográfica; en Costa Rica por ejemplo, la seroprevalencia es de un 58%, por lo que es importante comprender algunos procesos inmunológicos, propios en estas afectaciones parasitarias. Con el objeto de determinar si el Trypanosoma musculi ejerce procesos de inmunosupresión sobre Toxoplasma gondii se realizó un experimento en el que se inocularon ratones Swiss con T. musculi cuatro, cinco, seis y siete días previos a la infección con T. gondii, ocurriendo la inmunosupresión cuando la inoculación con T. musculi fue hecha cuatro días antes. Además, la cantidad de tripomastigotos inoculados no influyó en el proceso. Se probaron tres cepas de T. gondii aisladas de las heces de un gato casero (TFC), de un Leopardus pardalis (TLP), de un Leopardus wiedii y de la carne de un Bos taurus (TBT). La cepa TLP resultó ser muy patógena, matando a los animales en un tiempo corto, independientemente de la inoculación con T. musculi; para las otras cepas se mantuvo el patrón de inmunosupresión en los ratones. Se reporta entonces un modelo experimental de inmunosupresión, aspecto muy en boga en este momento, por su relación con enfermedades que inducen esta condición en el ser humano, especialmente a enfermedades como el cáncer y el SIDA. Este modelo es más fácil de aplicar experimentalmente que el correspondiente con T. lewisi previamente descrito, el cual usa ratas blancas de más difícil manejo que los ratones usados en este estudio.

La prevalencia de infecciones por Toxoplasma gondii en el ser humano es de 5-90% según la zona geográfica; en Costa Rica por ejemplo, la seroprevalencia es de un 58%, por lo que es importante comprender algunos procesos inmunológicos, propios en estas afectaciones parasitarias. Con el objeto de determinar si el Trypanosoma musculi ejerce procesos de inmunosupresión sobre Toxoplasma gondii se realizó un experimento en el que se inocularon ratones Swiss con T. musculi cuatro, cinco, seis y siete días previos a la infección con T. gondii, ocurriendo la inmunosupresión cuando la inoculación con T. musculi fue hecha cuatro días antes. Además, la cantidad de tripomastigotos inoculados no influyó en el proceso. Se probaron tres cepas de T. gondii aisladas de las heces de un gato casero (TFC), de un Leopardus pardalis (TLP), de un Leopardus wiedii y de la carne de un Bos taurus (TBT). La cepa TLP resultó ser muy patógena, matando a los animales en un tiempo corto, independientemente de la inoculación con T. musculi; para las otras cepas se mantuvo el patrón de inmunosupresión en los ratones. Se reporta entonces un modelo experimental de inmunosupresión, aspecto muy en boga en este momento, por su relación con enfermedades que inducen esta condición en el ser humano, especialmente a enfermedades como el cáncer y el SIDA. Este modelo es más fácil de aplicar experimentalmente que el correspondiente con T. lewisi previamente descrito, el cual usa ratas blancas de más difícil manejo que los ratones usados en este estudio.The immunosuppression caused by species of the gender Trypanosoma has been widely documented. The influence over experimental infections with Toxoplasma gondii is evident when using Trypanosoma lewisi, a natural parasite of white rats. We decided to test the effect of Trypanosoma musculi from mice, an organism with very similar biological characteristics to T. lewisi, to see if this trypanosomatid could induce a similar effect. Four groups of Swiss mice were inoculated with T. musculi previously to infection with T. gondii, and we determined the survival of the animals, as well as the number of cysts developed in the brain of survivors. We isolated and tested different strains of T. gondii from different sources. In a first experiment, the animals were previously inoculated with T. musculi at different times prior to the infection with Toxoplasma; this allowed us to determine that the immunosuppression process resulted more evident when T. musculi inoculation was made four days before. In a second experiment, we used different inoculi dose and found that it did not influenced the process. Furthermore, the results were negative when evaluating if the amount of the inoculated trypomastigote influenced the process. In order to demonstrate if there were differences in the immnosuppressive effect, related to Toxoplasma strains, groups of mice were inoculated with brain cysts of TFC, TLP, TLW and TBT strains. Excluding the TLP strain, that resulted to be very pathogenic regardless the previous inoculation with T. lewisi, the other strains kept the same pattern of immunosuppression in mice, whose survival time was shorter as the presence of cysts in the brain was higher. These observations were in agreement with an experi- mental immunosuppression model, associated with immunosuppressive diseases, specially cancer and AIDS.

Treatment with the usual antimalarial drugs, have induced parasite resistance, reinforcing the need to finding natural antimalarial components that would be found on plants from the forest. Therefore, we decided to look for these components in Costa Rican plants from a protected forest area. Fresh and dry extracts of roots, bark, leaves, flowers and fruits of 25 plants from a biological reserve in Costa Rica, Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB), were studied in vitro for the presence of substances with antimalarial activity. By studying the inhibition of P. berghei schizogony, we assessed the antimalarial activity of several plant extracts: Aphelandra aurantiaca, A. tridentata (Acanthaceae); Xanthosoma undipes (Araceae); Iriartea deltoidea (Arecaceae); Neurolaena lobata (Asteraceae); Senna papillosa, Pterocarpus hayessi, Lonchocarpus pentaphyllus (Fabaceae); Nectandra membranacea, Persea povedae, Cinamomum chavarrianum (Lauraceae); Hampea appendiculata (Malvaceae); Ruagea glabra, Guarea glabra (Meliaceae); Psidium guajava (Myrtaceae); Bocconia frutescens (Papaveraceae); Piper friedrichsthalii (Piperaceae); Clematis dioica (Ranunculaceae); Prunus annularis (Rosaceae); Siparuna thecaphora (Siparunaceae); Solanum arboreum, Witheringia solanácea (Solanaceae); Ticodendrum incognitum (Ticodendraceae); Heliocarpus appendiculatus (Tiliaceae) and Myriocarpa longipes (Urticaceae). We used different parts of the plants as well as fresh and dried extracts for testing IC50. The solid content of the extracts ranged from 1-71.9μg/mL. The fresh extracts showed stronger activity than the dry ones. Since the plants showing the strongest antimalarial activity are very common in Central America, and some similar genera of these plants have shown positives results in South America, we considered important to present these findings for discussion. On the other hand, this is the first systematic study of this kind ever realized in a circumscribed and protected area of Costa Rica. Rev. Biol. Trop. 60 (2): 881-891. Epub 2012 June 01.

Treatment with the usual antimalarial drugs, have induced parasite resistance, reinforcing the need to finding natural antimalarial components that would be found on plants from the forest. Therefore, we decided to look for these components in Costa Rican plants from a protected forest area. Fresh and dry extracts of roots, bark, leaves, flowers and fruits of 25 plants from a biological reserve in Costa Rica, Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB), were studied in vitro for the presence of substances with antimalarial activity. By studying the inhibition of P. berghei schizogony, we assessed the antimalarial activity of several plant extracts: Aphelandra aurantiaca, A. tridentata (Acanthaceae); Xanthosoma undipes (Araceae); Iriartea deltoidea (Arecaceae); Neurolaena lobata (Asteraceae); Senna papillosa, Pterocarpus hayessi, Lonchocarpus pentaphyllus (Fabaceae); Nectandra membranacea, Persea povedae, Cinamomum chavarrianum (Lauraceae); Hampea appendiculata (Malvaceae); Ruagea glabra, Guarea glabra (Meliaceae); Psidium guajava (Myrtaceae); Bocconia frutescens (Papaveraceae); Piper friedrichsthalii (Piperaceae); Clematis dioica (Ranunculaceae); Prunus annularis (Rosaceae); Siparuna thecaphora (Siparunaceae); Solanum arboreum, Witheringia solanácea (Solanaceae); Ticodendrum incognitum (Ticodendraceae); Heliocarpus appendiculatus (Tiliaceae) and Myriocarpa longipes (Urticaceae). We used different parts of the plants as well as fresh and dried extracts for testing IC50. The solid content of the extracts ranged from 1-71.9μg/mL. The fresh extracts showed stronger activity than the dry ones. Since the plants showing the strongest antimalarial activity are very common in Central America, and some similar genera of these plants have shown positives results in South America, we considered important to present these findings for discussion. On the other hand, this is the first systematic study of this kind ever realized in a circumscribed and protected area of Costa Rica. Rev. Biol. Trop. 60 (2): 881-891. Epub 2012 June 01.El tratamiento con las drogas antimaláricas de uso común han inducido resistencia por parte del parásito, lo que obliga a buscar en las plantas de los bosques, componentes naturales con actividad en contra de esta enfermedad. Por lo tanto, decidimos buscar dichos componentes en plantas de una Reserva Forestal de Costa Rica. Extractos tanto frescos como secos de raíz, corteza, hojas, flores y frutos, de 25 plantas de la Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB), fueron estudiados in vitro en busca de sustancias con actividad antimalárica. Las plantas estudiadas fueron: Aphelandra aurantiaca, A. tridentata (Acanthaceae); Xanthosoma undipes (Araceae); Iriartea deltoidea (Arecaceae); Neurolaena lobata (Asteraceae); Senna papillosa, Pterocarpus hayessi, Lonchocarpus pentaphyllus (Fabaceae); Nectandra membranacea, Persea povedae, Cinamomum chavarrianum (Lauraceae); Hampea appendiculata (Malvaceae); Ruagea glabra, Guarea glabra (Meliaceae); Psidium guajava (Myrtaceae); Bocconia frutescens (Papaveraceae); Piper friedrichsthalii (Piperaceae); Clematis dioica (Ranunculaceae); Prunus annularis (Rosaceae); Siparuna thecaphora (Siparunaceae); Solanum arboreum, Witheringia solanacea (Solanaceae); Ticodendrum incognitum (Ticodendraceae); Heliocarpus appendiculatus (Tiliaceae) y Myriocarpa longipes (Urticaceae). Los extractos frescos y secos de las diferentes partes de las plantas fueron estudiadas y se determinó la IC50, el cual osciló entre 1-71.9mg/mL; los extractos frescos mostraron mayor actividad antimalárica. Las plantas que presentaron mayor actividad son muy comunes en Centroamérica y algunos géneros similares, aunque no las mismas especies, han sido encontrados positivos en América del Sur; por esta razón consideramos importante estos resultados como información y materia de discusión en este tema. Además este es el primer estudio sistemático de esta naturaleza realizado en un área boscosa circunscrita y protegida de Costa Rica.

La deforestación de bosques tropicales está amenazando la biodiversidad de las especies de primates y su estado de salud, dependiente de un lugar ecológicamente equilibrado. Con el fin de evaluar esta relación, se analizó la presencia de parásitos en los intestinos de esta especie. El estudio se realizó en la Estación Biológica La Suerte (EBLS), Limón, Costa Rica. El grupo de monos capuchinos cariblancos (Cebus capucinus) fue observado entre marzo y diciembre de 2006. Se recolectaron 75 muestras de heces a las que se les identificó las plantas ingeridas, y se procesaron en el laboratorio para evaluar la prevalencia de parásitos. Moraceae fue la familia de plantas más reportada. Strongyloides spp. y acantocéfalos fueron los más comunes. La distribución positiva de las mismas fue similar independientemente del sexo y la edad. Microsporidios se reportaron mayoritariamente en heces asociadas con la familia Piperaceae. Fue encontrada una baja existencia de éstos parásitos en muestras asociadas con Myrtaceae en cuyo género Psidium, se han reportado compuestos activos antiparasitarios. La aparición de parásitos fue relativamente mayor en la EBLS, comparado con muestras de otras regiones más secas de Costa Rica. Por lo tanto, esa expresión parasitaria puede deberse al hecho de ser la EBLS una selva lluviosa, además de estar rodeada por zonas con actividades antrópicas. Se sugiere incrementar las investigaciones de parasitología de campo en primates neotropicales con el fin de entender plenamente las relaciones parásitos-hospederos, para en un largo plazo poder comprender los ecosistemas donde conviven, y en consecuencia, preservar la diversidad biológica.Intestinal parasites in white-faced capuchin monkeys Cebus capucinus Primates: Cebidae) inhabiting a protected area in the Limón province of Northeastern Costa Rica. Deforestation of tropical forests is threatening monkey biodiversity and their health status, dependent of an ecologically undisturbed area. To asses this relationship, we analyzed parasite occurrence in their intestines. The study was conducted at the Estación Biológica La Suerte (EBLS), Limón, Costa Rica. The group of white-faced capuchin monkeys (Cebus capucinus) was observed between March and December of 2006. A total of 75 feces samples were obtained. Once a sample was collected, the eaten plant type was identified to family and species level, and feces were processed in the laboratory to determine parasite incidence. Results showed that Moraceae was the most represented family in the samples. Among parasites, Strongyloides spp. and Acanthocephala were the most common. Positive prevalence of parasites was found similar and independent of sex and age of capuchin individuals. Microsporids were mainly reported in feces associated with Piperaceae. A low presence of these parasites was found in samples associated with Myrtaceae, with possible anti-parasite active components. The occurrence of parasites was relatively high in EBLS, when compared to other regions in Costa Rica. The higher occurrence of parasites observed in capuchins at EBLS may be due to the fact that this rain forest is surrounded by areas affected by human activities. We suggest the promotion of research in neotropical primates parasitology, for a better comprehension of the parasite-host relationship, and in a long term, being able to understand the ecosystems where they coexist, and consequently, preserve the biodiversity of the whole region. Rev. Biol. Trop. 58 (4): 1335-1346. Epub 2010 December 01.

La deforestación de bosques tropicales está amenazando la biodiversidad de las especies de primates y su estado de salud, dependiente de un lugar ecológicamente equilibrado. Con el fin de evaluar esta relación, se analizó la presencia de parásitos en los intestinos de esta especie. El estudio se realizó en la Estación Biológica La Suerte (EBLS), Limón, Costa Rica. El grupo de monos capuchinos cariblancos (Cebus capucinus) fue observado entre marzo y diciembre de 2006. Se recolectaron 75 muestras de heces a las que se les identificó las plantas ingeridas, y se procesaron en el laboratorio para evaluar la prevalencia de parásitos. Moraceae fue la familia de plantas más reportada. Strongyloides spp. y acantocéfalos fueron los más comunes. La distribución positiva de las mismas fue similar independientemente del sexo y la edad. Microsporidios se reportaron mayoritariamente en heces asociadas con la familia Piperaceae. Fue encontrada una baja existencia de éstos parásitos en muestras asociadas con Myrtaceae en cuyo género Psidium, se han reportado compuestos activos antiparasitarios. La aparición de parásitos fue relativamente mayor en la EBLS, comparado con muestras de otras regiones más secas de Costa Rica. Por lo tanto, esa expresión parasitaria puede deberse al hecho de ser la EBLS una selva lluviosa, además de estar rodeada por zonas con actividades antrópicas. Se sugiere incrementar las investigaciones de parasitología de campo en primates neotropicales con el fin de entender plenamente las relaciones parásitos-hospederos, para en un largo plazo poder comprender los ecosistemas donde conviven, y en consecuencia, preservar la diversidad biológica.

Parasites have been investigated for some New World primates; however, very little is known about ectoparasites and specifically fur mites. In this study, Alouatta palliata, Cebus capucinus, Saimiri oerstedii, and Ateles geoffroyi monkeys from different areas of Costa Rica were searched for fur mites. A total of 276 monkeys were evaluated, and 51 of them were positive for mites of the family Atopomelidae. Listrocarpus alouattae was identified on 22.3% of A. palliata; Listrocarpus capucinus on 12.8% of C. capucinus; and Listrocarpus costaricensis on 36.8% of S. oerstedii; No fur mites were found on A. geoffroyi. Sex was not considered a determinant of mite infestation, but prevalence was significantly higher in the Central Volcanic Mountain Range Conservation Area for L. alouattae (p=0.01) and in the Central Pacific Conservation Area for L. capucinus (p=0.002). These primate fur mites are highly host-specific. Differences in the geographical distribution may be due to monkey behavior and history, as well as to environmental conditions. Rev. Biol. Trop. 57 (1-2): 353-360. Epub 2009 June 30.Muy poco se conoce sobre los ectoparásitos, específicamente de los ácaros del pelo, de primates del Nuevo Mundo. En este estudio se buscaron ácaros del pelo en monos Alouatta palliata, Cebus capucinus, Saimiri oerstedii y Ateles geoffroyi provenientes de diferentes áreas de Costa Rica. Se evaluaron 276 monos en total y 51 de ellos se encontraron positivos por ácaros de la familia Atopomelidae. Se identificó Listrocarpus alouattae en el 22.3% de los A. palliata, Listrocarpus capucinus en el 12.8% de los C. capucinus y Listrocarpus costaricensis en el 36.8% de los S. oerstedii. El sexo no fue un determinante de la infestación por ácaros, pero la prevalencia de L. alouattae fue significativamente mayor en el Área de Conservación Cordillera Volcánica Central (p=0.01) y la de L. capucinus fue mayor en el Área de Conservación Pacífico Central (p=0.002). Estos ácaros del pelo de primates son altamente específicos en relación con su hospedero. Las diferencias en la distribución geográfica podrían deberse al comportamiento e historia de los monos, así como a las condiciones ambientales.

El efecto inmunosupresor de la infección de T. lewisi sobre la multiplicación de T. gondii fue comparado en macrófagos peritoneales (MP) y alveolares (MA) de rata. El número de parásitos (taquizoitos) intracelulares (TI) fue contado por microscopía de luz. Los macrófagos alveolares y peritoneales (MP) de animales con 4 días de infección con T. lewisi muestran un aumento significativo en la multiplicación de T. gondii. A diferencia de los MP (que muestran un aumento en la multiplicación de T. gondii al cuarto día de infección con T. lewisi disminuyendo hacia el séptimo día), los MA mantienen un aumento en la multiplicación del parásito desde el cuarto, aumentando hacia el séptimo día de infección. Esta diferencia se puede deber a la ruta de infección utilizada para los experimentos que afectan directamente los MP donde se observa un efecto mayor y más temprano en comparación con los MA aislados de los pulmones, compartimiento afectado cuando la infección se vuelve sistémica entre el cuarto y sexto día de infección. La inmunidad contra T. gondii es similar entre ambas células fagocíticas, pero el tiempo de infección y el compartimiento donde se encuentren las células hace la diferencia en el tiempo de respuesta contra un parásito dado, en nuestro caso T. gondii. No hubo evidencia de que los sobrenadantes de cultivos de macrófagos provenientes de ratas infectadas ni el lisado de tripanosomas indujeran el efecto inmunosupresor.The immunosuppressant effect of T. lewisi (Kinetoplastidae) infection on the multiplication of Toxoplasma gondii (Sarcocystidae) on alveolar and peritoneal macrophages of the white rat. The immunosuppressant effect of T. lewisi infection on the multiplication of T. gondii was compared in peritoneal (MP) and alveolar macrophages (MA) of white rat. Two animal groups were infected with T. lewisi and sacrificed after four days and seven days post infection. A group without infection was maintained as a control. The number of intracellular parasites (tachyzoites) (IT) was counted by light microscopy, calculating the rate infection rate per 100 total cells (TC) and per infected cells (IC) for each group of phagocyte cells. The relation quotient IT, TC or IC multiplied percent, provided a statistical ratio (RE) of the relative number of parasites in both cellular types for each time interval. MA as well as MP obtained after 4 days showed a significant increase in the multiplication of T. gondii with respect to the control. Unlike the MP (which had an increase in the multiplication of T. gondii the fourth day of infection with T. lewisi diminishing towards the seventh day), the MA had an increase in the multiplication of the parasite from the fourth to the seventh day. This difference can be related to the route of infection used for the experiments, that affect the MP directly with a greater effect in comparison with the MA of the lungs. Lung compartment will be affected later, when the infection becomes systemic between the fourth and sixth day of infection. The immunity against T. gondii is similar between both phagocytes, but the time of infection and the compartment where the cells are located, makes the difference in the response time against T. gondii. Supernatants from macrophage cultures or T. lewisi by rat did not induced any immunosuppression. Rev. Biol. Trop. 57 (1-2): 13-22. Epub 2009 June 30.

Extractos alcohólicos, hexánicos y diclorometánicos de 751 muestras de artrópodos fueron estudiados por la presencia de actividad antimalárica. En este trabajo se empleó un modelo murino usando el Plasmodium berghei, modelo que es biológicamente similar a la malaria humana. El estudio fue realizado determinando el efecto del extracto sobre el parásito por la inclusión o no del colorante azul de cresil brillante. Estimando como positivos aquellos extractos cuya actividad antimalárica se mostró en concentraciones no mayores de 50 mg, se encontró que los órdenes más promisorios fueron Lepidoptera (24.1%), Polydesmida (81.3%), Blattodea (25%) y Opiliones, entre otros. Las formas inmaduras de Lepidoptera fueron las más positivas, por lo que se analizaron las plantas hospederos de donde se alimentaban dichos organismos. Las familias de estas plantas eran Malvaceae, Acanthaceae, Rutaceae, Myrtaceae, Solanaceae, Fabaceae, Urticaceae, Anacardiaceae, Rosaceae, Asteraceae, Rubiaceae, Lauraceae y Caprifoliaceae. Especies de casi todas estas familias han sido reportadas con actividad antimalárica. En el caso de los órdenes Polydesmida, Opiliones y Blattodea, cuyas formas adultas presentaron alguna actividad contra P. berghei, encontramos que todos esos grupos se alimentan también de plantas. En el caso de Opiliones sus especies son predadores de lepidópteros, coleópteros, hemípteros fitófagos y otros artrópodos, además de que producen sustancias de defensas tales como alcoholes, cetonas y quinonas, entre otros, todo lo cual podría explicar la actividad encontrada. Algunas especies del Orden Polydesmida, también secretan ciertas sustancias químicas, las cuales podrían tener un efecto antiparasitario. Así, a través de este trabajo en artrópodos hemos llegado a identificar fuentes vegetales potenciales para componentes antimaláricos.Natural concentration of antimalaric components in Tropical arthropods (in vitro). Alcohol, hexane and dichlorometane extracts of 751 samples of Costa Rican arthropods were studied for the presence of antimalaric components. With Plasmodium berghei we set an in vitro model in which the effect of the extract was determined by staining of the parasites with cresil brilliant blue. Active extracts at concentration of 50 mg or less, were considered positive. Promissory extracts were found in the orders Lepidoptera (24.1%), Coleoptera (32.8%), Hemiptera (38.5%) and Polydesmida (81.3%). Since most of the Lepidoptera samples were in the immature stages, the relation with the host plant was analyzed. Cannaceae, Flacourtiaceae, Crisobalanaceae, Lauraceae, Fagaceae, Ulmaceae, Rosaceae, Asteraceae, Rubiaceae, Lauraceae and Caprifoliaceae were related with the Lepidoptera larvae, and an antimalaric effect has been reported in most of these families. In the orders Polydesmida, Opiliones and Blattodea, the extract from adults also had some important effect, probably because all of them fed on plants. Polydesmida and Opiliones have chemical substances that probably serve as defensive purposes; these chemicals could also have some antiparasitic effect. Therefore, the detection of antimalaric components in arthropod species led to the identification of plants with promissory antimalaric components. Rev. Biol. Trop. 56 (2): 473-485. Epub 2008 June 30.

Dos cepas de Trypanosoma cruzi, una originaria de Costa Rica (TCR-4) y otra de El Salvador (UES-1) fueron comparadas in vitro en cuanto a su infectividad y multiplicación en células miocárdicas de ratón blanco NGP, ratón C3H y rata Sprague Dowley con el fin de determinar la resistencia natural de las células de estos animales. Las células miocárdicas fueron cultivadas en cubreobjetos y posteriormente infectadas con tripomastigotos sanguíneos de la cepa respectiva en una relación de un parásito por célula miocárdica y posteriormente incubados a 37 ºC con 10 % de CO2 en atmósfera húmeda. Para determinar la capacidad infectante y multiplicación intracelular se analizaron muestras a las 24, 72, 96 y 120 h de infección, determinándose la curva de crecimiento y la tasa de multiplicación intracelular. Se encontró que las dos cepas fueron capaces de multiplicarse en las células miocárdicas de ratón C3H, muy poco en ratón NGP y prácticamente nada en rata, lo que sugiere una resistencia natural de las células de estos últimos dos animales. La cepa UES-1 tuvo una tasa de multiplicación e invasión mayor (p=0.001) sugiriendo por lo tanto una virulencia, al menos in vitro superior a la cepa TCR-4.In vitro growth kinetics of two Trypanosoma cruzi (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) clones in myocardial cells from rodents of different susceptibility. Two Trypanosoma cruzi isolates, TCR-4 from Costa Rica and UES-1 from El Salvador, were studied in vitro to compare their infectivity or resistance and intracellular replication in myocardial cells in three strains of mice and rats: NGP white mice, C3 H mice and Sprague Dowley rats. Myocardial cells were cultured on coverslips at 37 º C in a humid 10 % CO2 atmosphere and then infected at a ratio of one tripomastigote per cell. Samples were studied after 24, 72, 96 and 120 h of infection to determine parasite infection capacity and intracellular multiplication. Both parasites had the highest infection capacity in C3 H mice, followed by NGP mice cells with a very low infection rate. Lastly, almost no Trypanosoma cruzi multiplication was observed in Sprague Dowley rats, suggesting a strong natural resistance in this animal to both strains of the parasite. The UES-1 isolate presented higher multiplication and greater invasion than the TCR-4 strain, showing greater virulence of UES-1 in heart cells, at least in vitro. Rev. Biol. Trop. 55 (1): 121-126. Epub 2007 March. 31.

Se estudiaron las heces de 102 monos de la especie Alouatta palliata (monos aulladores o congos) de las siguientes regiones de Costa Rica. Valle Central: San Ramón (Alajuela); Pacífico Central: Isla Chira y Parque Manuel Antonio (Puntarenas); Pacífico Norte: Palo Verde, Playa Potrero, Nicoya (Guanacaste) y Caribe: Cahuita (Limón). Los animales capturados fueron anestesiados con dardos conteniendo Telazol®. La mayoría defecaron espontáneamente o se les estimulaba a defecar. Las muestras se estudiaron en el laboratorio en forma directa en solución salina (0.85%) y una solución de yodo o teñidas con hematoxilina para identificar los parásitos correspondientes. El material fue cultivado en el medio de Dobell para determinar la presencia de amebas y flagelados. Se encontraron helmintos de los géneros Trypanoxyuris, Strongyloides y Controrchis y protozoarios de los géneros Endolimax, Entamoeba, Trichomonas y Giardia. Los porcentajes de infección por protozoarios oscilaron entre 16.7% y 80% y se encontraron helmintos en un 3.4% a un 80% de los animales de acuerdo con la zona estudiada. No se encontraron diferencias importantes de parasitosis relacionadas con el sexo pero si existió mayor infección en los animales más jóvenes. Se establece la relación entre los índices de infección y algunos parámetros tales como las áreas estudiadas, el peso de los animales y el contacto con el ser humano.Intestinal parasites in howler monkeys Alouatta palliata (Primates: Cebidae) of Costa Rica. Fecal samples of 102 howler monkeys (Alouatta palliata) from several sites of Costa Rica were studied for intestinal parasites. The zones studied were: Central Valley (San Ramón, Alajuela), Central Pacific (Chomes and Manuel Antonio National Park, Puntarenas), North Pacific (Palo Verde Park and Playa Potrero, Guanacaste), Chira Island in the Nicoya Gulf and Caribean area (Cahuita, Limón). Animals were anesthetized with dards containing Telazol in order to collect the fecal material; some monkeys defecated spontaneously and others by direct stimulation. Samples were studied in saline solution (0.85%) and a Iodine solution, or stained with Haematoxylin. The material was also cultured in Dobell culture medium to determine the presence of amoeba and flagellates. Strongyloides, Controrchis, Trypanoxyuris genera were found in 3.4% of the samples. In addition 16.7% to 80% of the animals showed protozoa infection with Endolimax, Entamoeba, Trichomonas and Giardia. It is discussed the relationships of parasite infection with environmental conditions, animal population and human presence, specially in the monkey conservation programs point of view. Rev. Biol. Trop. 53(3-4): 437-445. Epub 2005 Oct 3.

La presencia de Cyclospora sp., Cryptosporidium sp., microsporidios y los niveles de coliformes fecales fueron determinados en lechuga, apio, cilantro, fresas y moras adquiridas en ferias del Agricultor del Valle Central de Costa Rica, con el fin de establecer el riesgo de transmisión de estos microorganismos y otros patógenos a partir del consumo de productos crudos. Durante el Segundo semestre del 2001 y primero del 2002, 50 muestras de cada producto fueron evaluadas, 25 durante la estación seca y 25 durante la estación lluviosa y provenientes de cinco diferentes ferias del Agricultor. El recuento de coliformes fecales fue realizado de acuerdo a la técnica recomendada por Vanderzant & Splittstoesser. La determinación de parásitos fue hecha utilizando las tinciones de Ziehl Nielsen y Weber a partir de un sedimento obtenido por el lavado de los productos mencionados, usando agua peptonada estéril 0,1% y centrifugando a 900 G por 15 min. 100% de las muestras de vegetales presentaron coliformes fecales, y la mayor prevalencia fue obtenida durante la estación lluviosa. A pesar de que todos los vegetales presentaron coliformes fecales en altas concentraciones, la lechuga y cilantro presentaron diferencias estadísticamente significativas entre la estación lluviosa y la seca, siendo mayor durante la estación lluviosa. No se detectó coliformes fecales en fresas y moras probablemente debido a su bajo pH. Todos los productos evaluados presentaron, aunque sea una vez, Cyclospora sp., Cryptosporidium sp. y microsporidios, demostrando el riesgo que representan para la Salud Pública. Cryptosporidium sp. estuvo presente en todos los productos excepto fresas. Los microsporidios fueron aislados de todos los productos excepto moras y Cyclospora sp. únicamente fue aislado de lechuga durante la estación seca. Los resultados demuestran la importancia de introducir en el país las Buenas Prácticas Agrícolas, especialmente debido a la resistencia de Cyclospora sp. y Cryptosporidium sp. a agentes desinfectantes.Prevalence of Cyclospora sp., Cryptosporidium sp, microsporidia and fecal coliform determination in fresh fruit and vegetables consumed in Costa Rica. The presence of Cyclospora sp., Cryptosporidium sp. and microsporidia and the levels of fecal coliforms were determined in lettuce, parsley, cilantro, strawberries and blackberries acquired in local agricultural markets of the Central Valley of Costa Rica, in order to establish the possible transmission risk of these microorganisms and other pathogens from the consumption of these raw products. During the second semester of 2001 and the first of 2002, 50 different samples of each product, 25 taken in the dry season and 25 in the rainy season and coming from five different local agricultural markets were evaluated. The fecal coliforms count was done according to the technique recommended by Vanderzant & Splittstoesser. The parasite determination was done using Zielh Nielsen and Weber staining techniques from a sediment obtained through the rinse of the mentioned products, using sterile peptonated water 0,1% and centrifuging at 900 G for 15 min. One hundred per cent of vegetable samples had fecal coliforms and the greatest prevalence was obtained during the rainy season. Although all vegetables presented fecal coliforms in high concentrations, lettuce and cilantro presented statistical difference between rainy and dry season, being greater during the rainy season. Fecal coliforms were not detected in strawberries and blackberries probablydue to its low pH. All products evaluated presented, at least once, Cryptosporidium sp., Cyclospora sp. and microsporidia, showing the risk they represent to Public Health. Cryptosporidium was present in all products but strawberries. Microsporidia was present in all products except blackberries and Cyclospora was only isolated from lettuce during the dry season. These results show the importance of introducing in the country Good Agricultural Practices, especially due to the resistance of Cryptosporidium and Cyclospora to disinfecting agents.

En este estudio se presenta un modelo in vitro de cultivo de fibroblastos de piel de hámster, ratón y rata hecho con el propósito de determinar diferencias en cuanto a la susceptibilidad a la infección por dos especies del género Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae). Se realizó además un estudio ultraestructural por microscopía electrónica de transmisión con el fin de establecer si las formas intracelulares observadas correspondían a multiplicación interna o a fagocitosis múltiple. Se estudió la multiplicación de los parásitos en los fibroblastos de las tres especies de roedores infectados tanto por Leishmania infantum como por L. mexicana (cepa OCR) y las diferencias entre las tres fueron estadísticamente significativas (p< 0.05). Se observó la reproducción del parásito en las células de hámster y ratón no así en las de rata, razón por la cual a este último animal se le consideró refractario a la infección. Con base en lo anterior se sugiere que la afinidad de un protozoario por las células de un individuo así como la resistencia al ambiente intracelular pueden depender de la constitución genética de este. El análisis ultraestructural demostró la reproducción de los amastigotos dentro de vacuolas parasitóforas por lo que se descarta que la presencia de estos se deba a su transformación luego de la entrada al fibroblasto. Se sugiere entonces que dichas células podrían servir para la supervivencia del parásito y la permanencia de este parásito en los animales infectadosInfection and multiplication of Leishmania infantum and L. mexicana inside of skin fibroblasts from hamsters, mice and rats was achieved. This process was demonstrated either by counting parasites inside the stained cells or by electronic microscopy studies. In addition multiplication rate differences in the cells from these rodent species were determined, for L. infantum as well as for L. mexicana. Parasite development in hamsters and mice fibroblasts was evident but there was not multiplication in rat cells showing that apparently they are refractory to Leishmania infection. These results suggest that the parasite affinity for each animal, as well as any intracellular environment resistance, could involve genetic factors in the parasite multiplication. On the other hand, presence of amastigote multiplication inside of parasitophorus vacuole, showed by electronic microscopy images, probes a true parasite transformation. Therefore it is suggested that fibroblasts could work as host cells for parasite survival and permanency in the infected animals

The infection and multiplication of Toxoplasma gondii and Trypanosoma cruzi were compared in primary cultures of white rat, mouse and hamster astrocytes. These cells were cultured on cover slides and infected with T. gondii tachyzoites or T. cruzi blood trypomastigotes. Results show that hamster astrocytes are more susceptible to the multiplication of both parasites than rat and mouse cells. There was no statistical difference between the T. gondii infection in rat and mouse astrocytes (pSe comparó la infección y multiplicación de Toxoplasma gondii y Trypanosoma cruzi en cultivos celulares primarios de astrocitos, a partir de células de cerebro de rata blanca, ratón y hámster. Las células fueron cultivadas en cubreobjetos e infectadas con taquizoitos de T. gondii o tripomastigotos sanguíneos de T. cruzi. Los resultados muestran que los astrocitos de hámster son más susceptibles que los de rata y ratón a la multiplicación de ambos parásitos. No se encontró diferencia estadísticamente significativa entre la infección por T. gondii en los astrocitos de ratón y rata (p

Treatment of toxoplasmosis usually causes secondary effects. It is important to find active substances extracted from natural organisms. In this work we studied some arthropod extracts that have effect against Toxoplasma multiplication inside mouse macrophages. After studying 382 extracts, 23 were selected on the basis of the activity and we found that 13 extracts from orders Polydesmida, Lepidoptera, Orthoptera and Hymenoptera exerted an important inhibition of Toxoplasma multiplication.

Peritoneal macrophages from Wistar rats, inoculated and non-inoculated with 10(6) T. lewisi trypomastigotes, were cultured and infected with 10(6) T. gondii tachyzoites. Multiplication rates of this parasite were studied after 1, 24 and 48 h of infection but there were not significant differences between the number of parasites found inside of macrophages coming, either from T. lewisi infected or non infected rats. On the other hand, in vivo studies of Toxoplasma multiplication inside peritoneal macrophages, showed that there is an increase of parasite number in cells from T. lewisi infected rats, as compared with those macrophages from non infected rats. This effect was statistically significant and was more evident after four days of infection. Therefore, it has been demonstrated that in vivo, but not in vitro T. lewisi infections, causes an important decrease of the natural resistance to T. gondii of the white rats, which is manifested by the major invasion and multiplication of the parasite inside of peritoneal macrophages.

An in vivo model to study the antimalaric effect of plant extracts is described. White mice (25-30g body weight) are treated subcutaneously with 0.6ml of the diluted extract starting seven days before P. berghei infection; treatment continues until death or for 30 days. Simultaneously 0.2ml of the extract are applied per os starting three days before infection. In a test of the model, treated and non-treated animals differed in body weight, survival time, haematocrite, parasitemia development, and spleen or liver weight of recent dead or killed mice.

An in vivo model to study the antimalaric effect of plant extracts is described. White mice (25-30g body weight) are treated subcutaneously with 0.6ml of the diluted extract starting seven days before P. berghei infection; treatment continues until death or for 30 days. Simultaneously 0.2ml of the extract are applied per os starting three days before infection. In a test of the model, treated and non-treated animals differed in body weight, survival time, haematocrite, parasitemia development, and spleen or liver weight of recent dead or killed mice.

La fauna helmintológica de ejemplares de Sigmodon hispidus capturados en Costa Rica, varió de acuerdo a la región de procedencia. En las ratas provenientes de una zona extensa del Pacífico seco, (Guanacaste) que ofrecía una dieta variada, se encontraron 6 especies de nemátodos y 2 especies de céstodos. En las provenientes de la Meseta Central, (Alajuela) que disfrutaban de una dieta única y abundante, se aislaron solamente dos especies: una de ellas, Angiostrongylus costaricensis, de gran importancia en salud humana, estuvo presente en el 42% de las ratas de esa región.The helminthological fauna of the cotton rat, Sigmodon hispidus in a tropical environment varies according to habitat and feeding behavior. Six species of nematodes (Longistriata adunca, Trichostrongylus sigmodontis, Strongyloides sigmodontis, Litomosoides carinii, Monodontus sp. and Protospirura sp.) and two species of cestodes (Hymenolepis diminuta and Raillietina sp.) were found in rats from extensive dry lands in Guanacaste where hot temperatures and heterogeneous diet are the rule. Only two species of nematodes (Longistriata adunca and Angiostrongylus costaricensis) were found in rats collected in a humid pineapple plantation in the Central Plateau (Alajuela) where mild temperatures predominate. A. costaricensis, a metastrongylid of medical importance, was found in 42% of them.

White rats were inoculated with 10(6) trypomastigotes of Trypanosoma lewisi, simultaneously or two days before and after inoculation with 10(5) oocysts of T. gondii. A greater number of cysts was found in the brain of the animals having concomitant inoculations, as compared with rats inoculated with either one of the two parasites. An apparent immunosuppressive effect is likely. Since both organisms can be found in rat, it is possible that infections with T. lewisi, could make this rodent another intermediate host for Toxoplasma infections.

Cotton rats (Sigmodon hispidus) were collected from Ojo de Agua, Alajuela (N=74) and Cañas, Guanacaste (N=29). Feces had 31 E. sigmodontis, nine E. tuskegeensis, eight E. roperi, three E. webbae and two Eimeria sp. This is the first report of these coccidian parasites for Costa Rica.

La presencia de Cyclospora sp., Cryptosporidium sp., microsporidios y los niveles de coliformes fecales fueron determinados en lechuga, apio, cilantro, fresas y moras adquiridas en ferias del Agricultor del Valle Central de Costa Rica, con el fin de establecer el riesgo de transmisión de estos microorganismos y otros patógenos a partir del consumo de productos crudos. Durante el Segundo semestre del 2001 y primero del 2002, 50 muestras de cada producto fueron evaluadas, 25 durante la estación seca y 25 durante la estación lluviosa y provenientes de cinco diferentes ferias del Agricultor. El recuento de coliformes fecales fue realizado de acuerdo a la técnica recomendada por Vanderzant & Splittstoesser. La determinación de parásitos fue hecha utilizando las tinciones de Ziehl Nielsen y Weber a partir de un sedimento obtenido por el lavado de los productos mencionados, usando agua peptonada estéril 0,1% y centrifugando a 900 G por 15 min. 100% de las muestras de vegetales presentaron coliformes fecales, y la mayor prevalencia fue obtenida durante la estación lluviosa. A pesar de que todos los vegetales presentaron coliformes fecales en altas concentraciones, la lechuga y cilantro presentaron diferencias estadísticamente significativas entre la estación lluviosa y la seca, siendo mayor durante la estación lluviosa. No se detectó coliformes fecales en fresas y moras probablemente debido a su bajo pH. Todos los productos evaluados presentaron, aunque sea una vez, Cyclospora sp., Cryptosporidium sp. y microsporidios, demostrando el riesgo que representan para la Salud Pública. Cryptosporidium sp. estuvo presente en todos los productos excepto fresas. Los microsporidios fueron aislados de todos los productos excepto moras y Cyclospora sp. únicamente fue aislado de lechuga durante la estación seca. Los resultados demuestran la importancia de introducir en el país las Buenas Prácticas Agrícolas, especialmente debido a la resistencia de Cyclospora sp. y Cryptosporidium sp. a agentes desinfectantes.