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Brachiaria spp. are important sources of forage for ruminants in Brazil, due to the easy cultivation, good resistance to drought, good adaptation to different soils and low maintenance cost. However, the ingestion of this grass has been related to photosensitization outbreaks in cattle and sheep with significant economic losses. The hepatotoxic effects related to the ingestion of grass are the formation of crystals and foamy macrophages due to the accumulation of toxic metabolites. The use of cattle and sheep in experiments involving the plant presents several obstacles in the ethical, economic and animal management. The objective of this study was to evaluate the sensitivity of rabbits as an experimental model for B. decumbens poisoning. Two experiments were carried out. In Experiment 1 four rabbits received the fresh plant in daily doses of 10, 20, 40 and 80g/kg body weight for 120 days. In Experiment 2 three rabbits received the fresh plant in amounts of 500g daily with duration of 210 days. The animals of Experiment 1 showed no clinical signs and no macroscopic and microscopic changes characteristic of B. decumbens poisoning. In Experiment 2 the animals also showed no clinical signs or significant macroscopic alterations. Histological analysis showed isolated foamy macrophages or present in random groups of cells in the liver and mesenteric lymph nodes. Samples of liver and mesenteric lymph nodes of the rabbits of Experiment 2 were submitted to the lectin-histochemistry technique. The WGA, sWGA and RCA lectins showed reactivity in foamy macrophages in both organs. This is the first study of our knowledge that demonstrates histopathological lesions caused expetimentally by Brachiaria spp. in rabbits, demonstrating its potential as an animal model. RESUMO: Brachiaria ssp. são importantes fontes de forragem para ruminantes no Brasil, devido ao fácil cultivo, boa resistência a seca, boa adaptação a diferentes solos e baixo custo de manutenção. Entretanto, a ingestão desta gramínea está relacionada a surtos de fotossensibilização, em bovinos e ovinos, principalmente, ocasionando prejuízos econômicos significativos. Os efeitos hepatotóxicos relacionados à ingestão da gramínea são a formação de cristais e macrófagos espumosos causados pelo acúmulo de metabólitos tóxicos. A utilização de bovinos e ovinos em experimentos envolvendo a planta apresenta vários empecilhos, tanto no âmbito ético, econômico e no manejo dos animais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a sensibilidade de coelhos como modelo experimental para intoxicação por B. decumbens. No presente estudo foram realizados dois experimentos. O Experimento 1 utilizou quatro coelhos que receberam a planta fresca em doses diárias de 10, 20, 40 e 80 g/Kg de peso vivo durante 120 dias. O Experimento 2 utilizou três coelhos recebendo a planta fresca em quantidades de 500g diárias por animal com duração de 210 dias. No Experimento 1, os animais não apresentaram sinais clínicos e nem alterações macroscópicas e microscópicas características de intoxicação por B. decumbens. No Experimento 2 os animais também não apresentaram sinais clínicos e alterações macroscópicas significativas. Na análise histológica observou-se presença de macrófagos espumosos isolados ou em grupos aleatórios de células no fígado e nos linfonodos mesentéricos. Amostras de fígado e linfonodos mesentéricos dos animais do Experimento 2 foram submetidos à técnica de lectino-histoquímica. As lectinas WGA, sWGA e RCA apresentaram reatividade em macrófagos espumosos nos dois órgãos. Este é o primeiro trabalho de nosso conhecimento que demonstra lesões histopatológicas por Brachiaria spp conduzido de forma experimental em coelhos, demonstrando seu potencial como modelo animal nesse campo de estudo.

Helminth parasites have been studied as potential accumulators for different pollutants. Echinostoma paraensei is a foodborne trematode whose vertebrate host, the rodent Nectomys squamipes, is naturally exposed to environmental pesticides. However, little information exists regarding the pesticide’s effects on helminths. This study investigated the morphological effects on the trematode, E. paraensei, after experimental Roundup® herbicide exposure, in concentrations below those recommended for agricultural use. After two hours of exposure, scanning electron microscopy (SEM) showed changes to the tegument, such as furrowing, shrinkage, peeling, spines loss on the peristomic collar, and histopathological evidence of altered cells in the cecum and acinus vitelline glands with vacuoles and structural changes to the muscular layers. Glycidic content was decreased, primarily in the connective tissue. As E. paraensei is an intestinal parasite of the semi-aquatic wild rodent, N. squamipes, it is predisposed to pesticide exposure resulting from agricultural practices. Therefore, we emphasize the need to evaluate its impact on helminth parasites, due to their pivotal role in regulating host populations. Resumo Helmintos parasitos tem sido estudados como acumuladores potenciais para diferentes poluentes. O trematódeo E. paraensei tem como hospedeiro vertebrado o roedor Nectomys squamipes naturalmente exposto a pesticidas no meio ambiente. No entanto, pouca informação está disponível sobre os efeitos dos pesticidas em helmintos parasitos. O presente estudo investigou, em condições experimentais, os efeitos morfológicos no trematódeo E. paraensei após a exposição ao herbicida Roundup®, em concentrações abaixo das recomendadas para a utilização agrícola. A microscopia eletrônica de varredura (MEV) mostrou após duas horas de exposição, alterações no tegumento, como enrugamento, contração e descamação com perda de espinhos no colar peristômico e análise histopatológica evidenciou células do ceco alteradas, as glândulas vitelínicas com vacúolos e mudanças estruturais nas camadas musculares. Diminuição do conteúdo glicídico, principalmente no tecido conjuntivo, também foi observado. Considerando a predisposição à exposição a pesticidas agrícolas de N. squamipes infectado por E. paraensei, são necessários estudos para avaliar o impacto de tais resíduos frente aos helmintos e seus hospedeiros.

The aim of this research was to study the development of the lung in Galea spixii , by gross anatomy, histological analysis and immunohistochemical techniques. Totally, 8 fetuses were used and allocated into three groups of age: Group I (33-35 days), Group II (38-40 days), and Group III (43-45 days) with given crown-rump - CR lenghts. According to the gross morphology, there were no differences in relation to the lung morphology among groups. In relation to lung maturation, the Group I showed early formation of the bronchi and bronchioles, which were richly surrounded by mesenchyme and small blood vessels, typical features of the pseudoglandular stage. Individuals from Group II showed higher amounts of tubular formations in the lung parenchyma and reduced mesenchyme, reaching the canalicular stage. The lung from individuals of the Group III was completely formed, reaching the alveolar phase. In the immunohistochemical analysis, the lung of individuals from both Groups I and II were positive for Pcna, Oct-4, and VEGF. In contrast, there was not labbeling on samples from Group III. Thus, the G. spixii lung anatomy resembles the agouti ( Dasyprocta sp.) lung, in relation to the number of lobes and fissures. In regard to the lung development, G. spixii showed more similarity with the human fetal lung, since both are born in the stage of the alveolar phase, different to other rodent species. RESUMO: Buscou-se estudar o desenvolvimento do pulmão do preá ( Galea spixii ) com ênfase nas características macroscópicas, histológicas e imunohistoquimicas, bem como acompanhar a proliferação celular. Para tanto, foram utilizados 8 fetos, os quais, de acordo com o tamanho (crown-rump - CR), foram divididos em 3 grupos: Grupo I (33-35 dias), Grupo II (38-40 dias) e Grupo III (43-45 dias). Macroscopicamente, não houve diferenças quanto à morfologia do pulmão entre os grupos. Em relação à maturação pulmonar, no grupo I, observou-se o início da formação dos brônquios e bronquíolos, os quais estavam rodeados por grande quantidade de mesênquima e vasos sanguíneos de pequeno calibre, caracterizando o estágio pseudoglandular. Os indivíduos do Grupo II apresentaram maior quantidade de formações tubulares no parênquima pulmonar, assim como redução da quantidade de mesênquima, atingindo, dessa forma, a fase canalicular. No Grupo III, os pulmões apresentaram-se completamente formados, atingindo a fase alveolar. Nas análises de imunohistoquimica, os pulmões dos indivíduos dos Grupos I e II apresentaram marcação para Pcna, Oct-4 e VEGF. Por outro lado, não houve marcação no Grupo III. A anatomia do pulmão do preá se assemelha ao pulmão da cutia ( Dasyprocta sp.) quanto ao número de lobos e fissuras. No que se refere ao desenvolvimento pulmonar, o pulmão do preá apresentou maior similaridade com o pulmão de fetos humanos, visto que ambos, ao nascer, encontram-se na fase alveolar, contrário a outras espécies de roedores.

The present study aimed to establish a methodology capable to cause intestinal ischemia and reperfusion injuries, to perform clamping of the jejunal segment of the extramural peri-intestinal marginal artery branch. For this, 37, 10-week-old male New Zealand breed rabbits were used. One rabbit was used to establish the anatomic references for the procedure and was not part of the six experimental groups; the rest were allocated into six experimental groups: Sham group, negative control, subjected only to midline celiotomy; group I1H undergoing vascular occlusion for an hour; group I2H submitted to vascular occlusion for two hours; group I1H/R2H undergoing vascular occlusion for one hour followed by two hours of reperfusion; group I2H/R1H undergoing vascular occlusion for two hours, followed by reperfusion for one hour, and group I2H/R5H undergoing vascular occlusion for two hours followed by reperfusion for five hours. The rabbits were evaluated for the macroscopic aspects (color and peristalsis) of the jejunal segment, as well as the histological aspect, checking for presence or absence of mucosal destruction, edema, hemorrhaging, lymphatic vessel dilatation, and the presence of polymorphonuclear cells. It was observed that the macroscopic and histopathological lesions accentuated in larger employed ischemia and reperfusion times. Rabbits subjected to ischemia for two hours followed by reperfusion for five hours (I2H/R5H) made up the experimental group which was easily reproducible and showed moderate intestinal injury, different from the other groups. RESUMO O presente estudo objetivou estabelecer uma metodologia capaz de causar lesões de isquemia e reperfusão intestinal, realizando clipagem de um ramo de artéria marginal peri-intestinal extramural em segmento jejunal. Para tal foram utilizados 37 coelhos da raça Nova Zelândia, machos, de 10 semanas de idade, alocados em seis grupos experimentais: grupo Sham, controle negativo, submetido apenas a celiotomia mediana; grupo I1H submetido à oclusão vascular por uma hora; grupo I2H submetido a oclusão vascular por duas horas; grupo I1H/R2H submetido a oclusão vascular por uma hora, seguida de reperfusão por duas horas; grupo I2H/R1H submetido a oclusão vascular por duas horas, seguida de reperfusão por uma hora e grupo I2H/R5H submetido a oclusão vascular por duas horas seguida de reperfusão por cincos horas. Os animais foram avaliados quanto o aspecto macroscópico (coloração e peristaltismo) do segmento jejunal e quanto ao aspecto histopatológico, verificando presença ou ausência de destruição de mucosa, edema, hemorragia, dilatação de vasos linfáticos e presença de polimorfonucleares. Observou-se que as lesões macroscópicas e histopatológicas se acentuaram nos maiores tempos de isquemia e reperfusão empregados. Os animais submetidos à isquemia durante duas horas, seguida de reperfusão por cinco horas (I2H/R5H) compuseram o grupo experimental de fácil reprodução e foram os que apresentaram uma lesão intestinal moderada, diferentes dos demais grupos.

Tannery is a highly polluting activity due to the waste generated by bovine skin processing. Although there are several studies highlighting the health issues faced by workers exposed to tannery effluent, there are no records of experiments testing the neurobehavioral effects resulting from direct contact with this pollutant. Thus, the aim of the current study is to assess the possible neurobehavioral effects of dermal exposure to tannery effluent on male Swiss mice. Animals were divided in three groups, which were subjected to the same experimental time period and conditions: effluent group - animals in direct contact with tannery effluent (for 20 days); control group - animals in contact with pure water; and dry-control group - animals not exposed to water or to tannery effluent. Neurobehavioral tests started on the 17th experimental day. Results of the elevated plus-maze test (anxiety prediction) showed no anxiogenic or anxiolytic effects, memory deficit or depressive symptoms on animals exposed to tannery effluent. Thus, the current results do not support the hypothesis that male Swiss mice dermal exposure to tannery effluents for the same time period and experimental conditions leads to neurobehavioral changes. Therefore, the herein adopted exposure protocol was not good to study the effects of dermal exposure to tannery effluent on the chosen experimental model. Resumo As indústrias de curtumes são uma das atividades mais poluentes devido, sobretudo, aos resíduos produzidos durante o processamento da pele bovina. Embora estudos tenham indicado danos à saúde dos trabalhadores expostos aos efluentes de curtumes, os efeitos comportamentais resultantes do contato direto com esse poluente ainda não foram adequadamente descritos. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar os possíveis efeitos comportamentais que a exposição dérmica ao efluente de curtume pode causar em machos de camundongos Swiss. Para isso, os animais foram distribuídos em três grupos: grupo efluente, em que os animais foram colocados em contato direto com efluente de curtume (por 20 dias); grupo controle com água, em que os animais foram colocados em contato com água, no mesmo período e condições do grupo anterior, e grupo controle seco, em que os animais não foram expostos à água ou efluente de curtume. Ao final do período experimental os animais foram submetidos ao teste do labirinto em cruz elevado (LCE), teste de reconhecimento de objeto e nado forçado. Nossos resultados não revelam efeitos ansiolíticos ou ansiogênico pelo teste do LCE, déficit de memória (pelo teste de reconhecimento de objetos) ou efeito depressivo ou antidepressivo (pelo teste do nado forçado) nos animais expostos ao efluente de curtume. Assim, conclui-se que a exposição dérmica à efluente de curtume, em curto período de tempo, não causa alterações neurocomportamentais em machos de camundongos Swiss. Logo, estudos que simulam o trabalho em condições de insalubridade de muitos trabalhadores de indústrias de curtume, que entram em contato direto com esses resíduos líquidos em períodos prolongados (crônicos), são fortemente sugeridos.

Objetivos: O objetivo desta investigação foi o desenvolvimento e validação experimental de um modelo digital, que permita o estudo das tensões e deformações geradas nos diferentes componentes de uma reabilitação oral fixa sobre implantes curtos. O modelo obtido foi então usado para simular uma situação clinica. Métodos: Um modelo numérico foi criado considerando a região posterior da mandibula. A sua materialização permitiu obter dez amostras do protótipo experimental. Sete delas foram sujeitas a ensaios estáticos de compressão até à falência. Nas restantes três, os ensaios foram interrompidos com forças gradualmente crescentes, estabelecendo a sequência pela qual os componentes se deformaram. O modelo numérico foi também sujeito a uma simulação com elementos finitos, usando o software Abaqus, em condições semelhantes à simulação experimental. Resultados: O padrão de tensões obtido no modelo numérico foi similar à localização das fraturas no modelo experimental. A sequência segundo a qual a tensão de cedência foi alcançada em cada parte do modelo numérico foi a mesma encontrada quando o ensaio estático se interrompeu (por esta ordem: resina, prótese, implantes e parafusos). Estes resultados permitiram considerar o modelo válido. A simulação de uma situação clínica, com o modelo validado, revelou que o osso cortical, em vestibular da plataforma dos implantes, é a região mais débil da reabilitação. Conclusões: Esta investigação permitiu o desenvolvimento e a validação de um modelo que permite o estudo de reabilitações fixas sobre implantes curtos. Clinicamente é importante realçar que o osso cortical é a zona que apresenta tensões e deformações mais elevadas. (Rev Port Estomatol Med Dent Cir Maxilofac. 2017;58(2):79-90), Objectives: This research intended to develop and validate a digital model that could be used to study the stresses and strains created in the different components involved in oral fixed rehabilitations with short implants. The validated model was then used to simulate a clinical- like situation. Methods: A digital model was created considering the posterior areas of the mandible. Its materialization obtained ten specimens of the experimental prototype. Seven of them were static compressive tested until failure and, for the other three, the tests were progressively interrupted, to allow the establishment of a damage sequence. On the numerical model a finite element analysis was performed with Abaqus software, under similar conditions to the experimental situation. Results: The stress pattern on the FEA and the failure location on the static test were similar. The sequence in which each part reached the yield strength was the same as that observed on the interrupted static test (resin, prosthetic framework, implants and implant screws, in this order). Due to these results, the model was considered valid. A clinical-like simulation with the validated model showed that buccal cortical bone, around the implants platform, is the weakest part of such a rehabilitation. Conclusions: This research allowed the development and validation of a computer-aided design model that can be used to study an oral fixed rehabilitation supported by short implants. For clinical purposes, it is important to refer that the highest stress and strain values were found on the cortical bone around the buccal aspect of the implants.

Several distinct stimuli can be used to reproduce histological and functional features of human emphysema, a leading cause of disability and death. Since cigarette smoke is the main cause of emphysema in humans, experimental researches have attempted to reproduce this situation. However, this is an expensive and cumbersome method of emphysema induction, and simpler, more efficacious alternatives have been sought. Among these approaches, elastolytic enzymes have been widely used to reproduce some characteristics of human cigarette smoke-induced disease, such as: augmentation of airspaces, inflammatory cell influx into the lungs, and systemic inflammation. Nevertheless, the use of elastase-induced emphysema models is still controversial, since the disease pathways involved in elastase induction may differ from those occurring in smoke-induced emphysema. This indicates that the choice of an emphysema model may impact the results of new therapies or drugs being tested. The aim of this review is to compare the mechanisms of disease induction in smoke and elastase emphysema models, to describe the differences among various elastase models, and to establish the advantages and disadvantages of elastase-induced emphysema models. More studies are required to shed light on the mechanisms of elastase-induced emphysema.Diversos estímulos podem ser utilizados para reproduzir características histológicas e funcionais do enfisema humano, uma das principais causas de incapacidade e morte. Uma vez que a fumaça de cigarro é a principal causa de enfisema em humanos, estudos experimentais têm tentado reproduzir esta situação. No entanto, esse é um método dispendioso e complicado para a indução do enfisema e, alternativas mais simples e eficazes, têm sido pesquisadas. Entre essas abordagens, enzimas elastolíticas vêm sendo amplamente utilizadas para reproduzir algumas das características do enfisema humano, tais como: aumento dos espaços aéreos, influxo de células inflamatórias nos pulmões e inflamação sistêmica. Entretanto, o uso de modelos de enfisema induzido por elastase permanece controverso, uma vez que as vias de ação da doença envolvidas na indução com elastase podem diferir das que ocorrem no enfisema induzido pelo fumo. Isso indica que a escolha de um modelo de enfisema pode influenciar os resultados de novas terapias ou drogas a serem testadas. O objetivo desta revisão é comparar os mecanismos da indução da doença em modelos de enfisema por fumaça e elastase, descrever as diferenças entre os vários modelos de elastase e, estabelecer as vantagens e desvantagens dos modelos de enfisema por elastase. Mais estudos são necessários para elucidar os mecanismos relacionados ao enfisema induzido por elastase.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:50:56Z No. of bitstreams: 1 S0100-736X2011000100007.pdf: 3278844 bytes, checksum: f9e09c4b9efeeba682c205596d3fbfcd (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:50:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0100-736X2011000100007.pdf: 3278844 bytes, checksum: f9e09c4b9efeeba682c205596d3fbfcd (MD5) Previous issue date: 2011-01-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T18:18:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-736X2011000100007.pdf: 3278844 bytes, checksum: f9e09c4b9efeeba682c205596d3fbfcd (MD5) S0100-736X2011000100007.pdf.txt: 70398 bytes, checksum: ee986a3b54e2b3c4f50d9521b40a7a02 (MD5) Previous issue date: 2011-01-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:33:47Z No. of bitstreams: 2 S0100-736X2011000100007.pdf: 3278844 bytes, checksum: f9e09c4b9efeeba682c205596d3fbfcd (MD5) S0100-736X2011000100007.pdf.txt: 70398 bytes, checksum: ee986a3b54e2b3c4f50d9521b40a7a02 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:33:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-736X2011000100007.pdf: 3278844 bytes, checksum: f9e09c4b9efeeba682c205596d3fbfcd (MD5) S0100-736X2011000100007.pdf.txt: 70398 bytes, checksum: ee986a3b54e2b3c4f50d9521b40a7a02 (MD5) Previous issue date: 2011-01-01 O presente trabalho teve como objetivos avaliar os sinais clínicos, as concentrações do sulfeto de hidrogênio ruminal e as alterações anatomopatológicas associadas à intoxicação experimental por enxofre em bovinos. Foram utilizados dez bezerros mestiços leiteiros, sendo que quatro bovinos ingeriram ração sem sulfato de sódio (G1) e seis consumiram ração com sulfato de sódio (G2). Exames clínicos (temperatura retal, frequência cardíaca e respiratória e motricidade ruminal) e laboratoriais (hemograma, fibrinogênio, proteína plasmática, pH do fluido ruminal, concentração do sulfeto de hidrogênio ruminal, líquido cerebrospinal e histopatológico) foram realizados. A temperatura retal, frequência cardíaca, hemograma, fibrinogênio, proteína plasmática, pH do fluido ruminal e os valores do líquido cerebrospinal estavam dentro dos valores de referência para a espécie. Taquipnéia, hipomotricidade ruminal e elevados valores de sulfeto de hidrogênio ruminal foram observados nos bezerros do grupo G2. Um bezerro do grupo G2 apresentou sinais neurológicos e lesões histopatológicas de PEM. Dois animais de cada grupo foram eutanasiados. Lesões microscópicas foram observadas nos bezerros do G2. Histologicamente as alterações observadas foram necrose neuronal cortical e lesões hemorrágicas nos núcleos basais, tálamo, mesencéfalo, ponte e bulbo. O protocolo experimental constituído por uma dieta rica em carboidrato de alta fermentação, baixa quantidade de fibra efetiva e altos níveis de enxofre (0,52%) ocasionou alterações clinicas e histológicas e elevadas concentrações de sulfeto de hidrogênio ruminal compatíveis com quadro de intoxicação por enxofre. The aims of this study were to evaluate the clinical signs, the ruminal hydrogen sulfide concentration and the histological lesions induced by sulfur toxicosis in cattle. Ten crossbred calves were fed an experimental diet, four without sodium sulfate (G1) and six with (G2). The calves were submitted to clinical (rectal temperature, cardiac and respiratory rate and ruminal motricity) and laboratorial (hemogram, fibrinogen, total plasma protein, ruminal fluid pH, ruminal hydrogen sulfide concentration, cerebrospinal fluid and histopathological) evaluations. Rectal temperature, cardiac rate, hemogram, fibrinogen, total plasma protein, ruminal fluid pH and cerebrospinal fluid values were within normal reference ranges in animals from both groups. Ruminal hypomotricity and increased respiratory rate and ruminal hydrogen sulfide concentration occurred in G2 animals. One out of six calves in G2 developed neurological signs and lesions of PEM. Two calves of each Group were euthanized. Microscopic lesions of PEM were observed in G2 animals. Histologically there were cortical neuronal necrosis and hemorrhagic lesions in basal nuclei, thalamus, midbrain, pons and medulla oblongata. The experimental model consisting of a diet with high carbohydrate and low in long fiber content with high sulfur concentrations (0.52%) resulted in clinical and histological abnormalities and high ruminal hydrogen sulfide concentration consistent with sulpur toxicosis in cattle. Universidade Federal de Goiás (UFG) Escola de Veterinária Depto Medicina Veterinária Universidade Estadual Paulista Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Clínica Veterinária Universidade Estadual Paulista Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Clínica Veterinária

Para estabelecer um modelo experimental para o estudo da etiologia, patologia e patogênese da polioencefalomalacia (PEM) em bovinos, a condição foi induzida em quatro novilhos pela administração oral de amprólio nas doses diárias de 500 e 350mg/kg de peso vivo, respectivamente por 22 e 26-28 dias. Todos os bovinos morreram espontaneamente ou foram eutanasiados in extremis após um curso clínico de 4-7 dias. Três bovinos que receberam 1.000mg/kg de amprólio e dois que receberam 500mg/kg morreram espontaneamente com quadro clínico agudo a subagudo sem desenvolverem sinais e lesões de PEM. Nos novilhos que PEM foi reproduzida, os sinais neurológicos incluíram marcada apatia, incoordenação, posição de cavalete, quedas ocasionais, hiperexcitabilidade, tremores musculares, cegueira, bruxismo, estrabismo, nistagmo, midríase, opistótono, decúbito lateral e movimentos de pedalagem. Os principais achados de necropsia eram restritos ao encéfalo e consistiam de tumefação, achatamento, amolecimento e amarelamento das circunvoluções cerebrais. Histologicamente, havia necrose neuronal segmentar e laminar (neurônios vermelhos) associada a edema, tumefação endotelial, separação das lâminas de neurônios do córtex telencefálico ou entre as substâncias cinzenta e branca e infiltração moderada a acentuada de macrófagos espumosos. Essas alterações eram mais acentuadas nos lobos telencefálicos frontal, parietal e occipital. Adicionalmente, lesões similares e moderadas foram detectadas no mesencéfalo e hipocampo. A necrose neuronal e o edema afetaram uniformemente as camadas de neurônios da substância cinzenta dos lobos telencefálicos frontal, parietal e occipital. Esse modelo experimental de PEM com administração oral de amprólio parece ser útil para o estudo da doença em bovinos, conforme observado anteriormente em ovinos. In order to establish an experimental model for the study of the etiology, pathology, and pathogenesis of polioencephalomalacia (PEM) in cattle, the condition was induced into four steers by oral administration of amprolium at daily doses of 500 and 350mg per kg of body weight respectively for 22 and 26-28 days. All steers died spontaneously or were euthanized in extremis after being sick for 4-7 days. Three steers that received the drug at 1,000mg/kg and two that received 500mg/kg died spontaneously with acute or subacute clinical signs and without lesions and signs of PEM. In those steers in which PEM was reproduced, the neurological signs included marked apathy, incoordination, sawhorse stance, occasional falls, hyperexcitability, muscle tremors, blindness, grinding of teeth, strabismus, nystagmus, mydriasis, opisthotonus, and lateral recumbency with paddling movements. Main gross lesions were restricted to the brain and included swelling, flattening, softening and yellow discoloration of the cerebral circumvolutions. Histologically, there was segmental laminar neuronal necrosis (red neurons) associated with edema, swelling of endothelial cells, cleavage of laminar neuronal layers or between gray and white matter and moderate to severe infiltration by foamy macrophages (gitter cells). These changes were more marked in the frontal, parietal and occipital telencephalic lobes. Additionally, similar and moderate lesions were detected in the midbrain and hippocampus. Neuronal necrosis and edema affected uniformly the neurons layers of the grey matter of the frontal, parietal and occipital lobes. This experimental model of PEM with oral administration of amprolium may be useful for the study in cattle, as previously observed in sheep.

O objetivo deste estudo foi avaliar um novo modelo de lesão no ligamento suspensório (LS). Sob anestesia geral, um punch para biópsia cutânea de 0,6cm de diâmetro foi utilizado para criar uma lesão no centro do LS de ambos os membros torácicos e pélvicos, em seis equinos. Todos os animais se recuperam da cirurgia sem nenhuma complicação importante. Realizaram-se avaliações clínicas e ultrassonográficas no período pós-operatório. Durante as primeiras duas semanas, no local da lesão, houve redução no edema de leve para discreto e da dor de discreta para ausente. As lesões foram facilmente observadas ao exame ultrassonográfico 72 horas após a cirurgia como áreas anecoicas homogêneas, representando uma média (± erro padrão) de 33,5±5% da área do LS. Não houve alteração significativa na área de lesão durante as primeiras duas semanas (P=0,77). Concluiu-se que o modelo proposto foi eficiente para promover lesões controladas e homogêneas simultaneamente nos quatro LS, sem causar desconforto importante aos equinos. Esses achados, associados à possibilidade de se avaliar previamente o LS por meio de biópsia, demonstram que esse modelo de indução de lesões ligamentosas se apresenta com um método útil, principalmente se aplicado ao estudo de terapias destinadas a melhorar o processo de reparo do LS.

Neosporosis is a parasitic disease caused by the protozoan Neospora caninum which results in major economic losses for cattle breeding due to abortion and other reproductive disorders. Gerbils (Meriones unguiculatus) are commonly used as experimental models for neosporosis due to their high susceptibility to N. caninum infection, both by oocysts ingestion as by tachyzoites/bradyzoites parenteral inoculation. However, the risk of transmission by tachyzoites ingestion is not fully elucidated. In this study, infection of neonate gerbils by N. caninum (NC-1 strain) tachyzoites inoculated by the oral route and the parasite distribution in gerbils' tissues were evaluated by protozoan DNA detection. Seventeen neonate gerbils, aged 4-5 days, were inoculated with 4x105 tachyzoites by the oral route and one gerbil was kept as uninfected control. N. caninum DNA was detected in 100% of the inoculated gerbils, showing that the oral route is effective as a potential route of infection of neonates by N. caninum tachyzoites. N. caninum DNA was reported in all organs evaluated (heart, lungs, kidneys, liver, spleen and brain), with different frequencies. These results showed systemically distributed infection of neonate gerbils after oral inoculation of tachyzoites.

Objetivo: Com a finalidade de estabelecer uma linha de pesquisa em cirurgia redutora de volume pulmonar, foi proposta a reprodução de um modelo experimental de enfisema em ratos através da instilação intratraqueal de papaína. Métodos: Foi feita a instilação orotraqueal de papaína (20mg/kg) dissolvida em 3,5ml/kg de solução fisiológica a 0,9%. Após 40 dias da instilação, os animais foram submetidos a mecânica ventilatória, com medidas de elastância e resistência do sistema respiratório, e sacrificados com retirada dos pulmões. O tecido pulmonar dos animais foi analisado qualitativamente com coloração de hematoxilina-eosina e submetido à análise morfométrica com medida do diâmetro alveolar médio. O tecido pulmonar foi também submetido à coloração de resorcina-fucsina, para identificação de fibras elásticas, que foram quantificadas em septos alveolares através de análise digital de imagem. Resultados: A análise histológica dos pulmões dos animais submetidos à instilação de papaína mostrou um enfisema pan-acinar, com rotura de septos alveolares e hiperdistensão alveolar. A análise morfométrica revelou médias superiores de diâmetro alveolar médio nos pulmões dos animais submetidos à papaína (149,08mim e 100,56mim), em comparação com o grupo de solução fisiológica (64,08mim e 75,90mim). A quantificação de fibras elásticas de septos alveolares de animais tratados com papaína foi 70% menor do que a de animais submetidos à solução fisiológica. A mecânica ventilatória não mostrou diferença na resistência do sistema respiratório de animais submetidos à papaína ou à solução fisiológica. Já no caso da elastância do sistema respiratório, esta foi menor nos animais do grupo com papaína, em comparação com o grupo com solução fisiológica, demonstrando comportamento funcional do grupo com papaína compatível com enfisema pulmonar, apresentando diminuição da capacidade de recolhimento elástico do tecido pulmonar. Conclusão: Foi possível reproduzir um modelo experimental de enfisema pulmonar pan-acinar em ratos, através da instilação de papaína pela árvore respiratória, com comprovação funcional e morfológica. Objective: The reproduction of an experimental emphysema model in rats by intratracheal instillation of papain was proposed for the evaluation of lung volume reduction surgeries. Method: The study used orotracheal instillation of papain (20 mg/kg) dissolved in 0.9% saline solution. Forty days after instillation, animals underwent mechanical ventilation. Elastance and resistance of the respiratory system were measured, and the rats were sacrificed by having their lungs removed. The pulmonary tissue of the animals was qualitatively analyzed with hematoxylin-eosin staining and submitted to morphometric analysis for the measurement of the mean alveolar diameter. The pulmonary tissue was also subjected to resorcin-fuchsin staining for the identification of elastic fibers, which were quantified in alveolar septa by digital imaging. Results: In the animals instilled with papain, the histological analysis of the lungs showed pan-acinar emphysema, with rupture of alveolar septa and hyperdistention. Morphometric analysis showed higher mean values for mean alveolar diameter in the lungs of the animals submitted to papain (149.08 mm and 100.56 mm) as compared to the group receiving saline solution (64.08 mm and 75.90 mm). The quantification of elastic fibers of alveolar septa of papain-treated animals was 70% lower than in the animals receiving saline solution. Mechanic ventilation did not show differences in respiratory system resistance of animals receiving papain or saline solution. Respiratory system elastance was lower in the group receiving papain than in the group receiving saline solution, showing a functional status compatible with pulmonary emphysema, with decreased elasticity of the pulmonary tissue. Conclusion: The reproduction of an experimental model of pan-acinar pulmonary emphysema in rats was achieved by papain instillation through the respiratory tree with functional and morphologic evidences.

The induced colorectal carcinogenesis in rodents has a long history and currently uses the substances 1,2-dimethylhydrazine and azoxymethane. Objective: The aim of this study was to compare the inductive effect of the substances azoxymethane and 1,2-dimethylhydrazine in colorectal carcinogenesis. Method: 30 randomly chosen male Wistar rats were divided into four groups. G1 group was treated with 1,2-dimethylhydrazine and C1 was its control group; G2 group was treated azoxymethane and C2 was its control group. The animals were weekly weighed until euthanasia, when their intestines were removed, processed and analyzed by an experienced pathologist. Results: Among the control groups (C1 and C2) no histologic changes were observed; moderate dysplasia was detected in G2 group; hyperplasia, mild dysplasia, severe dysplasia and carcinoma were observed in G1 group. When this study compared the cost of the substances, 1,2-dimethylhydrazine was more than 50 times less expensive than azoxymethane. Conclusion: Azoxymethane is able to promote histological changes consistent with colorectal carcinogenesis. 1,2-Dimethylhydrazine produced neoplasia and dysplasia, and, compared to the azoxymethane, was more efficient in the induction of colorectal cancer. Resumo: A carcinogênese colorretal induzida em roedores tem longa história e utiliza, atualmente, as substâncias 1,2 dimetil-hidrazina (DMH) e azoximetano (AOM). Objetivo: Comparar o efeito indutivo das substâncias AOM e DMH para o câncer colorretal (CCR). Método: 30 ratos Wistar machos foram randomizados em quatro grupos. O grupo G1 foi inoculado com DMH, o grupo C1 foi seu controle; G2 recebeu o AOM e C2 foi seu controle. Os animais foram pesados semanalmente até a eutanásia, quando tiveram seus intestinos retirados, processados e analisados por um patologista experiente. Resultados: Os animais dos grupos de controle apresentaram tecido colorretal normal e os animais do grupo G2 apresentaram um padrão de displasia moderada. Nas lâminas do grupo G1, foram encontradas regiões de hiperplasia, displasia leve, displasia grave, e carcinoma. Comparado o custo das substâncias AOM e DMH, este último teve um preço mais de 50 vezes menor ao do AOM. Conclusão: AOM é capaz de promover alterações histológicas compatíveis com a carcinogênese colorretal. DMH produziu neoplasia e displasia grave e, comparada ao AOM, foi mais eficiente na indução do câncer colorretal. Keywords: Colorectal cancer, Experimental model, Carcinogenesis, Azoxymethane, 1,2-Dimethylhydrazine, Palavras-chave: Câncer colorretal, Modelo experimental, Carcinogênese, Azoximetano, 1,2-Dimetil-hidrazina

Para obtener un modelo experimental de ateroesclerosis aórtica, se suministraron tres dosis de colesterol dietético (0,62; 0,93 y 1,24 g/día) durante 60 días a conejos neozelandeses machos adultos. Se evaluaron los niveles séricos de colesterol, colesterol-HDL y LDL, aspartato aminotransferasa (AST) y alanin aminotransferasa (ALT), así como el desarrollo de ateroesclerosis en aorta. El incremento en la dosis de 0,62 a 0,93 g/día de colesterol ocasionó un aumento significativo (p≤0,05) en la colesterolemia (de 6,79 ±2,34 a 9,51 ±0,10 g/l), principalmente por incremento del colesterol-LDL. La dosis de 1,24 g/día no indujo aumento adicional de la colesterolemia comparado con la dosis de 0,93 g/ día. La colesterolemia fue muy variable entre los conejos que recibieron 0,62 g/día; las dosis mayores de colesterol redujeron esta variabilidad. Las actividades ALT y AST permanecieron normales hasta el día 30 de la experiencia, incrementándose significativamente en el día 60 (p≤0,05) en los grupos que recibieron 0,93 y 1,24 g/día, asociadas a degeneración grasa hepática. Las tres dosis de colesterol indujeron áreas sudanofílicas de extensión variable en aorta. Las lesiones en aorta se caracterizaron por un incremento focal del espesor intimal causado por la infiltración de macrófagos espumosos y músculo liso, entremezclados en proporción variable con depósitos de matriz extracelular. En conclusión, se confirma la sensibilidad del conejo neozelandés a desarrollar hipercolesterolemia y lesiones ateroescleróticas en un corto período de tiempo con una dieta rica en colesterol. La dosis de 0,93 g/día durante 60 días fue la que indujo una respuesta hipercolesterolémica con menor variabilidad entre los conejos y lesiones ateroescleróticas bien desarrolladas. El modelo experimental de ateroesclerosis temprana permitirá estudiar el efecto ateroprotector de diferentes medicamentos y alimentos funcionales. To obtain an experimental model of aortic atherosclerosis, male adult New Zealand rabbits were fed with three doses of dietary cholesterol (0.62, 0.93 and 1.24 g/day) for 60 days. Serum cholesterol, HDL and LDL-cholesterol, aspartate aminotransferase (AST), alanin aminotransferase (ALT) and the development of atherosclerosis in aorta, were evaluated. Increased dietary cholesterol from 0.62 to 0.93 g/day resulted in a significant increase (p≤0.05) in serum cholesterol (from 6.79 ±2.34 to 9.51 ±0.10 g/l), due mainly to the increase in LDL-cholesterol. The dose of 1.24 g/day did not induce further increase in cholesterolemia compared to the dose of 0.93 g/day. Serum cholesterol was highly variable among rabbits that received 0.62 g/day, this variability was reduced with the highest dose of cholesterol. ALT and AST activities remained normal until day 30 of experience, increasing significantly at day 60 (p≤0.05) in the groups receiving cholesterol at the doses of 0.93 and 1.24 g/day, associated with liver fatty degeneration. All doses of cholesterol induced aortic sudanophilic lesion areas of variable surface. Aortic lesions were characterized by a focal increase in intima thickening caused by infiltration of foamy macrophages and smooth muscle mixed in variable proportions with extracellular matrix deposition. In conclusion, the sensitivity of the New Zealand rabbit to develop hypercholesterolemia and atherosclerotic lesions in a short period of time when consuming a high cholesterol diet, is confirmed. The dose of 0.93 g/day for 60 days caused a lower variability in the hypercholesterolemic response among rabbits with significant development of atherosclerotic lesions. This model of early atherosclerosis will allow the study of the atheroprotective effects of different medicines and functional foods. Fil: Lértora, W. J.. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; Argentina Fil: Billordo, G. I.. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; Argentina Fil: Mussart, Norma Beatriz. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Catugno, M. S.. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; Argentina Fil: Sanchez Negrette, M.. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; Argentina

Coelhos são susceptíveis à infecção pelo herpes-vírus bovino tipo 5 (BHV-5) e freqüentemente desenvolvem enfermidade neurológica aguda fatal após inoculação intranasal. A cinética da invasão do sistema nervoso central (SNC) de coelhos pelo BHV-5 foi estudada através de pesquisa de vírus em secções do SNC a diferentes intervalos pós-inoculação. Após inoculação intranasal, o vírus foi inicialmente detectado no bulbo olfatório às 48h, seguido do córtex olfatório às 48/72h. Às 72/96h o vírus foi detectado também no gânglio trigêmeo, ponte e córtex cerebral. Dois experimentos foram realizados para avaliar a importância do sistema olfatório na invasão do SNC de coelhos pelo BHV-5. No primeiro experimento, coelhos foram inoculados com duas amostras do BHV-5 no saco conjuntival. Coelhos inoculados por essa via também desenvolveram a enfermidade neurológica, porém com menor freqüência com curso clínico tardio. No segundo experimento, doze coelhos foram submetidos à ablação cirúrgica do bulbo olfatório e posteriormente inoculados com o BHV-5 pela via intranasal. Onze de 12 coelhos controle (91,6%), não submetidos à cirurgia, desenvolveram a doença neurológica, contra quatro de 12 (33,3%) dos animals submetidos à remoção cirúrgica do bulbo olfatório. Esses resultados demonstram que o sistema olfatório constitui-se na principal via de acesso do BHV-5 ao encéfalo de coelhos após inoculação intranasal. No entanto, o desenvolvimento de infecção neurológica em coelhos inoculados pela via conjuntival e em coelhos sem o bulbo olfatório indica que o BHV-5 pode utilizar outras vias para invadir o SNC, provavelmente as fibras sensoriais e autonômicas que compõe o nervo trigêmeo. Os efeitos da imunização com vírus homólogo (BHV-5) e heterólogo (BHV-1) na proteção à infecção neurológica foram investigados. Cinco entre 10 coelhos (50%) imunizados com o BHV-5 apresentaram sinais neurológicos discretos e transitórios e um morreu após o desafio com o BHV-5. Curiosamente, o grau de proteção foi superior nos coelhos imunizados com o BHV-1: apenas dois animais apresentaram sinais clínicos passageiros e recuperaram-se. Portanto, proteção da enfermidade neurológica pelo BHV-5 em coelhos pode ser obtida por imunização com o BHV-5 ou BHV-1, provavelmente devido à extensa reatividade sorológica cruzada entre esses vírus. Estudos adicionais em coelhos podem auxiliar no esclarecimento da patogênese e resposta imunológica a infecção pelo BHV-5.

A lesão de isquemia e reperfusão hepáticas que ocorre no transplante de fígado não está completamente elucidada. Vários modelos experimentais com objetivo de estudos fisiopatológico e de modulação farmacológica desta condição têm sido propostos. Um desses modelos, proposto para cães, compreende a isquemia de 30% da massa hepática com descompressão portal translobar através dos restantes 70% de parênquima hepático. No presente trabalho, 10 cães foram submetidos à desvascularização de uma maior massa hepática (70%), seguida de reperfusão, com descompressão venosa esplâncnica através dos lobos caudado e lateral direito (30%) (Grupo Teste), durante o período de isquemia. Dez outros cães foram submetidos à operação simulada (Grupo Controle). Os resultados indicaram com um grau de confiança de 95% que: 1. Durante o período de isquemia verificou-se estabilização da PAM e da PVC, elevação da pressão portal (PP) semelhante à desenvolvida com o uso de "bypass", diminuição significativa da temperatura corporal(TC) sem atingir níveis médios aquém de 36oC, ausência de acidose metabólica ou aumento dos níveis de enzimas (AST, ALT e DL), presença de necrose hepática (NH) e queda do conteúdo de glicogênio hepático (CGH); 2. Após a reperfusão do fígado constatou-se queda da PAM, ausência de diferenças significativas de PVC , permanência de níveis elevados de PP, decréscimo da TC, presença de acidose metabólica (¯ pH, ¯ DB), aumento significativo e progressivo de aminotransferases (AST, ALT), desidrogenase láctica (DL) e necrose hepática (NH), bem como declínio progressivo do conteúdo de glicogênio hepático (CGH). Os resultados sugerem que o modelo proposto pode ser útil para estudos de fisiopatologia e de modulação farmacológica da lesão de isquemia e reperfusão do fígado, utilizando uma maior massa hepática. Hepatic ischaemia and reperfusion injury, as seen during hepatic transplantation, has not been completely understood. Several experimental models have been proposed for studies on pathophysiology and modulation of such condition. Recently, in dogs, partial hepatic devascularization (30%) with splancnic venous decompression using translobar venous route of intact lobes (70%) has been proposed. Inthe present paper , a larger hepatic mass (70%) has been devascularized in 10 dogs submitted to splancnic venous decompression through caudate and right lateral lobes (30%), during the ischaemic period( Test Group), followed by reperfusion. Ten others animals were submitted to a sham operation( Control Group). The results indicated, with a confidence level of 95% that: 1. During the period of ischaemia it was demonstrated maintenance of MAP and CVP levels, elevation of PP values similar to that seen with bypass, core temperature (CT) decrease that never reached limits under the mean value of 36oC, absence of metabolic acidosis or elevation of enzyme levels (AST, ALT and DL), occurrence of hepatic necrosis (HN) and fall in hepatic glycogen content (HGC); 2. After reperfusion, reduced values of MAP, absence of significant differences in CVP levels, persistent elevations of PP, progressive decreases in CT levels, presence of metabolic acidosis (¯ pH, ¯ DB), progressive elevations of aminotranspherases (AST, ALT) , lactic dehidrogenase (LD) and hepatic necrosis (HN), and progressive decline of hepatic glycogen content (HGC) were verified. These results suggest that the proposed model may be useful for studies on pathophysiology and pharmacologic modulation of liver ischaemia and reperfusion injury , using a larger hepatic mass.

This article describes the main aspects of bovine herpesvirus type-5 (BHV-5) neurologic infection and disease in rabbits, a candidate animal model for studying BHV-5 neuropathogenesis. Intranasal inoculation of weanling rabbits with a Brazilian BHV-5 isolate produced neurological disease and death in 78.8% (26/33) of the animals. Neurological signs started as early as 5 days post-inoculation and lasted from 10-12 hours up to several days. Most animals evolved to a moribund state or death within 24 (69.2%) to 48 hours (88.5%). Neurological disease was characterized by excitability or depression, tremors, bruxism, walking or running in circles, backward arching of the head and body, incoordination, backward and sideways falling, paddling, profound depression and death. Moderate levels of infectivity were detected in several areas of the brain, most consistently in the ventro-lateral hemisphere (in 16 out of 20 animals), anterior cerebrum (15/20), midbrain (11/20), dorso-lateral hemisphere (10/20) and pons (12/26). Infectious virus was also recovered from the olfactory bulb (9/20), medulla oblongata (10/26), cerebellum (7/20), posterior cerebrum (5/20) and trigeminal ganglia (4/20). No gross lesions were observed. Microscopic lesions were mild and consisted of non-suppurative meningitis, mononuclear perivascular cuffing and focal gliosis. These changes were observed most consistently in the ventro-lateral hemisphere and anterior cerebrum. Passive immunity partially protected rabbits from BHV-5-induced encephalitis. Rabbits born to immunized dams showed a significative delay in the onset of clinical disease and reduced morbidity and mortality rates compared to rabbits born to unvaccinated dams. These results demonstrate that BHV-5-induced neurological disease can consistently be reproduced in rabbits and point towards the use of this species as an animal model to study BHV-5 neuropathogenesis. Este artigo descreve os principais aspectos da infecção e enfermidade neurológica pelo herpesvírus bovino tipo 5 (HVB-5) em coelhos. Inoculação intranasal de coelhos recém-desmamados com uma amostra brasileira do HVB-5 produziu enfermidade neurológica e mortalidade em 78,8% (26/33) dos animais inoculados. Os sinais neurológicos iniciaram a partir do 50 dia pós-inoculação e persistiram por 10-12 horas até vários dias. A maioria dos animais evoluiu clinicamente até um estado moribundo ou morte em 24h (69,2%) a 48h (88,5%). A enfermidade neurológica caracterizou-se por crises de excitabilidade/depressão, tremores, bruxismo, andar/correr em círculos, queda para o lado e para trás, arqueamento do pescoço e corpo para trás, incoordenação, movimentos de pedalagem, depressão profunda e morte. Níveis moderados de infectividade foram detectados em várias áreas do encéfalo, principalmente no hemisfério ventro-lateral (em 16 de 20 animais), cérebro anterior (15/20), pedúnculo cerebral (11/20), hemisfério dorso-lateral (10/20) e ponte (12/26). O vírus foi também detectado no bulbo olfatório(9/20), bulbo(10/26), cerebelo (7/20), cérebro posterior (5/20) e gânglio trigêmeo (4/20). Alterações macroscópicas não foram observadas. As lesões microscópicas foram discretas e consistiram de meningite multifocal, infiltrado inflamatório mononuclear perivascular e gliose focal. Essas alterações foram observadas principalmente no córtex ventro-lateral e cérebro anterior. Imunidade passiva protegeu parcialmente os animais da enfermidade neurológica. Coelhos filhos de mães imunizadas com o HVB-5 apresentaram um retardamento no início dos sinais clínicos e taxas reduzidas de morbidade e mortalidade quando comparados com coelhos filhos de mães não imunizadas. Esses resultados demonstram que a enfermidade neurológica causada pelo HVB-5 pode ser consistentemente reproduzida em coelhos e apontam para uma possível utilização dessa espécie como modelo experimental para estudar a neuropatogênese do HVB-5.

PURPOSE. To evaluate the relationship between oxidative stress arkers and increased intraocular pressure in experimental laucoma. METHODS. In vivo chemiluminescence (CL), total antioxidant apacity (TRAP), nitrite concentration (NC), and lipid peroxidation arkers (TBARS) were evaluated. Wistar rats (n = 18 for ach time point) underwent operation, and two episcleral eins were cauterized. ESULTS. Decreases of 22%, 35%, and 27% at 7, 15, and 30 days nd an increase of 22% at 60 days in CL were observed in laucomatous eyes. In optic nerve, TBARS values were 6.9 ± 0.5 nmol/mg protein (7 days), 9.4 ± 0.4 nmol/mg protein (15 ays), 18.0 ±1.2 nmol/mg protein (30 days), and 43.1 ± 5.3 nmol/mg protein (60 days) (control, 6.2 ± 0.4 nmol/mg protein; P < 0.001). NC was 37.0 ± 1.8 μM (7 days), 31.4 ± 1.2 μM (15 days), 39.6 ± 1.3 μM (30 days), and 40.0 ± 1.3 μM (60 days) (control, 21.1 ± 1.7 μM; P < 0.001). In glaucomatous vitreous humor, TRAP decreased by 42% at 15 days and 78% at 60 days (control, 414 ± 29 μM; P < 0.001). In glaucomatous aqueous humor, TRAP values were 75 ± 7 μM (7 days), 54 ±4 μM (15 days), 25 ± 4 μM (30 days), and 50 ± 3 μM (60 days) (control, 90 ±10 μM; P < 0.001). CONCLUSIONS. Reactive species were increased in glaucoma, as evidenced by the increases in CL, TBARS, and NC. The decrease in the antioxidant levels may be a consequence of an increase in oxidative processes. Fil: Ferreira, Sandra María. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica. Cátedra de Química General e Inorgánica; Argentina Fil: Fabián Lerner, S.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica. Cátedra de Química General e Inorgánica; Argentina Fil: Brunzini, Ricardo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica. Cátedra de Química General e Inorgánica; Argentina Fil: Reides, Claudia Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica. Cátedra de Química General e Inorgánica; Argentina Fil: Evelson, Pablo Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina Fil: Llesuy, Susana Francisca. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina

Background: The use of animals in biomedical research is of great importance. It is fundamental for the development and improvement of new practices and technologies. The selection of the species must take into consideration the practicality of handling and the suitability for the experiment, and it must have low operational costs. Swine are important as an experimental model in several experiment areas, because the functionality of many of their organic systems is developed similarly as it is in humans. Swine are animals that become easily stressed. For that reason, their conditioning is necessary to allow the obtainment of data that is closer to normal parameters. This study aims at reporting the physiological values obtained from awake swine, under normal conditions and minimum stress. Materials, Methods & Results: The animals were maintained under ideal environmental conditions, and they were always handled and conditioned by the same persons. Twenty crossbred swine were evaluated, aged between 60 and 90 days and with a body mass ranging between 17 and 25 kg. The parameters considered were cardiac frequency (FC), emoglobin oxygen saturation (pulse oxymetry – SPO 2 ), respiratory frequency (fR), end tidal carbon dioxide (ETCO 2 ), systolic (PAM), diastolic (PAD) and mean (PAM) arterial pressure and arterial blood gas values – pH, arterial pressure of CO 2 (PACO 2 ), arterial pressure of O 2 (PAO 2 ), total CO 2 (TCO 2 ), base excess (EB), bicarbonate (HCO 3 ) and O 2 saturation (SATO 2 ). The experiment was developed in compliance with the Standards of Animal Ethics and Welfare recommended by the National Council on the Control of Animal Experiments and with Law 11.794 of October 2008, being further approved by the Ethics Committee of the Hospital de Clinicas de Porto Alegre. To obtain the FC, fR, ETCO 2 and SPO 2 values, 20 animal samples were used. FC presented mean values (± standard deviation) of 134 ± 20.67 beats per minute (bpm), showing a maximum value of 180 bpm and a minimum of 103 bpm. The mean fR was 24.5 ± 5.61 breaths per minute (bpm), with a maximum value of 34 bpm and a minimum of 14 bpm, and SPO 2 was 96 ± 2.10 %. Moreover, the values obtained in the analysis of exhaled gases showed a ETCO 2 at 44.6 ± 5.41 mmHg, with a maximum value of 53 mmHg and minimum value of 34 mmHg. The arterial pressure was obtained from 19 animals, yielding the following values: 135.8 ± 16.29 mmHg for systolic pressure, 81.6 ± 14.10 mmHg for diastolic pressure and 103.3 ± 12.65 mmHg for mean pressure. Samples from 18 animals were used to measure the arterial blood gas. The values obtained were as follows: 7.497 ± 0.019 for Mean pH , 41.7 ± 6.95 mmHg for partial O 2 pressure, 90.65 ± 2.5 mmHg for partial CO 2 pressure, 32.8 ± 2.18 mmol/L for total CO 2 , 7.57 ± 1.9 mmol/L for base excess, 31.5 ± 2.12 mmol/L for bicarbonate and 97.55 ± 0.64 for oxygen saturation. Discussion : The animals seemed submissive and able to be conditioned and therefore it was easy to obtain basal values. These data were slightly different from the values obtained in other studies, thus becoming more reliable to be used as parameters in exsperiments employing this species. There seem to be interspecies differences when one intends to make a comparison with human beings. Values such as O 2 concentration in arterial blood are normally lower in swine, possibly due to a lower hemoglobin concentration and a higher body temperature in the species. Despite some differences, there are many physiological similarities with human beings, which allows for the conclusion that swine is a great species to be employed in the biomedical research.

Vários aspectos da biologia do herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) têm sido estudados em coelhos, que desenvolvem infecção aguda e doença neurológica após inoculação experimental. A infecção aguda é seguida pelo estabelecimento de infecção latente, que pode ser reativada natural ou artificialmente. Os primeiros experimentos nesta espécie estabeleceram um protocolo de inoculação e monitoramento da infecção, e caracterizaram os principais aspectos virológicos, clínicos e patológicos da infecção aguda. A patogenia da infecção aguda, desde a replicação viral nos sítios de inoculação, vias e cinética de transporte viral até o encéfalo, distribuição e replicação viral no sistema nervoso central (SNC), tropismo celular e tecidual, manifestações clínicas e patologia no SNC foram detalhadamente estudados nestes animais. Posteriormente, vários aspectos biológicos e moleculares da infecção latente também foram elucidados a partir de inoculações de coelhos. Os coelhos também têm sido utilizados para estudar o fenótipo (neuroinvasividade, neurovirulência) de isolados de campo e de cepas vacinais recombinantes, proteção por imunidade passiva, proteção vacinal, eficácia de drogas anti-virais e terapêuticas de suporte da infecção neurológica. Este modelo experimental também foi utilizado para o estudo da origem e distribuição dos estímulos elétricos produzidos durante as convulsões – uma característica da infecção neurológica pelo BoHV-5 –, e para testes de medicamentos anti-convulsivantes. Ressalvadas as diferenças que certamente existem entre bovinos - os hospedeiros naturais - e coelhos, as observações oriundas deste modelo experimental tem contribuído sobremaneira para o conhecimento da biologia do BoHV-5. O presente trabalho apresenta uma coletânea de resultados e observações, publicadas ou não pelo grupo, ao longo de mais de uma década, envolvendo inoculações de coelhos para estudar diversos aspectos da infecção pelo BoHV-5. Several aspects of the biology of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) have been studied in rabbits, which develop acute infection and neurological disease upon experimental inoculation. The acute infection is followed by the establishment of latent infection, which can be naturally or artificially reactivated. The first experiments in rabbits established a protocol for virus inoculation and monitoring the infection, and characterized the main virological, clinical and pathological aspects of the acute infection. The pathogenesis of acute infection, from the initial viral replication at site of inoculation, pathways and kinetics of viral transport to the brain, distribution and virus replication in the central nervous system (CNS), cellular and tissue tropism, clinical signs and CNS pathology have been extensively studied using this animal model. Subsequently, several biological and molecular aspects of latent BoHV-5 infection have also been elucidated upon inoculation of rabbits. Rabbits have also been used to investigate the phenotype (neuroinvasiveness, neurogrowth) of field isolates and recombinant vaccine candidates, protection by passive immunity, vaccine protection, the efficacy of anti-viral drugs and support therapies for neurological disease. This animal model was also used to investigate the origin and distribution of electric impulses involved in seizures - a hallmark of BoHV-5 induced neurological infection - and also to test the efficacy of anti-convulsivants. In spite of the possible differences between rabbits and cattle - the natural host of the virus - the observations taken from this experimental model have greatly contributed to the knowledge of the biology of BoHV-5 infection. The present article presents a review of the main published and unpublished results and observations by our group, comprising more than a decade of studies on the pathogenesis of BoHV-5 infection in the rabbit model.

No presente trabalho foi elaborada uma técnica para protocolo de colheita de medula óssea (MO) (10ml. kg-1), do osso femoral, para isolamento, quantificação e viabilidade da fração total de células mononucleares (CM). Para tanto, 40 cães machos ou fêmeas, sem raça definida, com idade aproximada de dois anos, pesando em torno de 10kg, foram submetidos a procedimento asséptico em ambiente cirúrgico para colheita de MO. Para a obtenção de uma quantidade suficiente de CM, durante o procedimento foi utilizada a agulha tipo Steis anatômica, que favoreceu a colheita de volume sangüíneo em menor espaço de tempo e não danificou a viabilidade celular. Também foi utilizado o Kit Bone Marrow collection, que teve a finalidade de filtrar as espículas ósseas, mantendo a integridade das CM colhidas durante o período decorrido para o acondiconamento do sangue. Durante o período da colheita de MO, os animais foram submetidos à collheita de sangue periférico (pré, trans e pós-operatório) para avaliações hematológicas e sofreram autotransfusão sangüínea para suprir a queda acentuada de hemoglobina ocorrida nos primeiros momentos da coletaheita. O total de MO colhida e filtrada foi colocado lentamente sob gradiente de densidade Histopaque (1.077g ml-1). O material foi centrifugado a 440 x g por 30 minutos e o anel de células foi colhido, lavado e centrifugado três vezes em meio contendo solução salina 0,9%, DMEM e soro sangüíneo autólogo estéril. Foi realizada a contagem do anel celular em câmara de Neubauer e foi verificada sua viabilidade utilizando corante vital. Neste estudo foi verificado que no volume de MO colhido foi possível obter a média de 2,57 x 10(6) (± 1,56) CM kg-1 e a viabilidade celular foi superior a 90% (96,72 ± 2,9%). Conclui-se que a técnica de colheita de MO com agulha Steis com lavagem celular no meio contendo soro autólogo e Kit Bone Marrow e agulha Steis com lavagem celular no meio contendo soro autólogo permite obter um número ideal e indicado de CM viáveis. Esse número pode ser aplicado diretamente em lesões teciduais com objetivo de potencializar o processo de regeneração. In the present research a new protocol to harvest 10ml kg-1 femoral bone marrow (BM) was developed to allow isolation, quantification and to test the mononuclear cell (MC) fraction viability. Forty male or female stray dogs, aging and weighting around two years old and 10kg respectively, were submitted to aseptic bone marrow harvest in a surgical environment. To achieve an ideal cell count of MC, an anatomical Steis needle was used during the procedure, which favored the indicated volume harvest in a shorter period of time without interfering cellular viability. A bone marrow collection kit was also used to filter bone fragments while maintaining harvested MC integrity during blood packaging. Meanwhile BM harvesting was conducted, animals peripheral blood collection was performed (pre, trans and post-operatory) to hematological evaluations and autologous blood transfusion was made to overcome the increased hemoglobin fall that takes place in the initial harvesting moments. The harvested and filtered BM was slowly placed over a Histopaque density gradient (1.077g ml-1). The material was centrifuged at 440g x for 30 minutes. The cellular ring was harvested, washed and three times centrifuged in saline 0.9%, DMEM and autologous sterile serum. Cellular ring count was conducted in neubauer chamber and its viability was performed with vital dye. In this study was possible to notice that with the harvested BM volume an average of 2.57 x 10(6) (± 1.56) MC kg-1 was obtained and the cell viability was over 90% (96.72 ± 2.9%). It was concluded that the bone marrow kit and Steis needle with autologous serum cellular wash BM harvesting technique allow an ideal MC number isolation which can be administered in tissue lesions to enhance the regeneration process.

OBJETIVO: Comparar o 2-octil cianoacrilato com o fio de "nylon" no fechamento da pele em ratos. MÉTODOS: Vinte e cinco ratos da linhagem Wistar, foram submetidos à incisão de 3 cm de cada lado do abdome. A síntese foi feita utilizando em um dos lados o "nylon" 4.0, pontos intradérmicos, e do outro o 2-octil cianoacrilato. Após sete dias, o fio foi removido e as incisões, analisadas quanto às complicações. Após 40 dias, o resultado da cicatriz foi avaliado. Os ratos foram sacrificados, as cicatrizes foram ressecadas, fixadas e enviadas ao patologista, sem informação sobre qual o método utilizado. RESULTADOS: Houve dois óbitos durante a anestesia e um tardio. O tempo de operação foi de 136 segundos com a cola e 176 segundos, com o "nylon" (P=0,003). Dentre as 50 operações realizadas, as complicações foram: um hematoma com cada método (P=0,80), quinze deiscências da cola contra 11 do "nylon" (P=0,20), sete cicatrizes de aspecto ruim ou razoável da cola contra quatro do "nylon" (P=0,30), três infecções na cola contra duas (P=0,40). Ao exame patológico, a mediana da largura da cicatriz foi de 1.119 micra com a cola e 1.800 com o "nylon" (P=0,40). A espessura foi de 1.795 contra 1.705 micra (P=0,40). CONCLUSÃO: O 2-octil cianoacrilato apresentou o mesmo aspecto cicatricial, a mesma resistência e as mesmas complicações que a sutura com o "nylon" 4.0, porém permitindo redução no tempo cirúrgico. BACKGROUND: Tissue adhesive 2-octyl cyanoacrylate was developed to have more strength, less inflammatory reaction, and less histotoxicity than its shorter-chain derivates. METHODS: To evaluate the use of 2-octil cyanoacrylate in comparison with "nylon" suture in skin closure of rats. Methods: Twenty-five female Wistar rats were submitted to a 3cm surgical incision in each side of the abdomen. The wound was closed with intradermic suture using "nylon" 4-0 in one side, and 2-octil cyanoacrylate on the other side. After 7 days the thread was removed and the wound was checked for complications. After 40 days the wound aspect was clinically evaluated. The rats were sacrificed; the scars were resected, and sent to the pathologist without the information of which closing method was used. RESULTS: There were 2 deaths during anesthesia or few days after surgery. The mean surgical time was 136 seconds with the adhesive and 176 with "nylon" (P=0.003). The complications were: one hematoma in each method (P=0.8), fifteen wound dehiscence with the adhesive and 11 with "nylon" (P=0.2), seven scars with a bad or fair aspect with adhesive and 4 with "nylon" (P=0.3), three infections with adhesive and 2 with "nylon" 2 (P=0.4). Histological examination showed median scar width of 1.119 micron with the adhesive and 1.800 with "nylon" (P=0.7). The mean thickness was 1.795 in the adhesive group versus 1.705 micron (P=0.7). CONCLUSION: Surgical adhesive showed the same aesthetical results, the same strength, and the same complications as for "nylon" 4.0 sutures, but the adhesive decreased the surgical time.

Malignant brain tumor experimental models tend to employ cells that are immunologically compatible with the receptor animal. In this study, we have proposed an experimental model of encephalic tumor development by injecting C6 cells into athymic Rowett rats, aiming at reaching a model which more closely resembles to the human glioma tumor. In our model, we observed micro-infiltration of tumor cell clusters in the vicinity of the main tumor mass, and of more distal isolated tumor cells immersed in normal encephalic parenchyma. This degree of infiltration is superior to that usually observed in other C6 models. Modelos experimentais de tumores cerebrais malignos geralmente utilizam células imunologicamente compatíveis com o animal receptor. Neste estudo apresentamos um modelo experimental baseado na inoculação de células C6 em ratos atímicos Rowett, visando obter um tumor que se assemelhe mais àqueles observados nos seres humanos. Neste modelo observamos microinfiltração de ilhotas de células na periferia da massa tumoral principal e nas áreas mais distantes, células tumorais isoladas no tecido cerebral normal. Este grau de infiltração é superior àquele observado em outros modelos utilizando as células C6.

O presente trabalho relata a avaliação de cobaias como modelo para testes de imunogenicidade de vacinas inativadas contra o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e o vírus da diarréia viral bovina (BVDV). Para isso, cobaias (n=60) e bovinos (n=10) foram imunizados duas vezes, com intervalo de 28 dias, com uma vacina experimental contendo antígenos dos dois vírus, e testados para anticorpos neutralizantes 28 dias após a segunda dose. Os bovinos foram vacinados com a dose recomendada para a espécie (5mL); as cobaias foram distribuídas em seis grupos e imunizadas com doses fracionadas (0,005mL a 1,6mL). Os grupos de cobaias imunizadas com doses equivalentes a 1/16 (0,320mL) e 1/8 (0,640mL) da dose bovina desenvolveram títulos médios geométricos (GMTs) de 6,46 e 7,56, respectivamente, estatisticamente semelhantes aos dos bovinos (GMT=8) (P>0,05). Uma alta correlação dose-resposta (R²=0,95) foi observada entre as doses vacinais e os títulos de anticorpos neutralizantes anti-BoHV-1 nos grupos de cobaias. Por outro lado, não foi possível o estabelecimento de uma dose vacinal que induzisse em cobaias uma resposta neutralizante anti-BVDV em níveis semelhantes à induzida em bovinos. Apenas as cobaias imunizadas com as doses maiores (0,640 e 1,6mL) desenvolveram títulos neutralizantes de magnitude moderada (GMTs de 8 e 9, respectivamente), porém estatisticamente inferiores ao GMT dos bovinos (GMT=34,9) (P0.05). A high correlation (R²=0.95) was observed between the antigen dose and the VN titer developed by all guinea pig groups. On the other hand, it was not possible to establish an antigen dose that induces in guinea pigs a serological response to BVDV equivalent to that induced in calves. Only the two groups given the highest antigen doses developed a consistent anti - BVDV neutralizing response, yet with VN titers (GMT= 8 and 9, respectively) significantly lower (P

PURPOSE: To test the possibility of obtaining a practical and stable model of hyperinsulinemia and hyperglycemia in hamsters, substituting the drinking water by 10% or 20% fructose solutions for a period of 2, 4, or 6 months. METHODS: Male hamsters were divided into 3 main groups, further divided in 3 subgroups: Two months: Group Ia control (n = 51) received filtered water, Group Ib (n = 49) received 10% fructose solution instead of water, Group Ic (n=8) received 20% fructose solution instead of water. Four months: Group IIa control (n=8), Group IIb 10% fructose (n = 7), Group IIc 20% fructose (FIIc, n = 7). Six months: Group IIIa control (n = 6), Group IIIb 10% Fructose (n = 6), Group IIIc 20% Fructose (n = 5). All groups were fed with the same laboratory diet. The animals were weighed every 2 weeks during the study period. On the final day of each experiment (61st, 121st, and 181st day after the beginning of the study, respectively), the animals were weighed and anesthetized for blood collection to determine plasma glucose and insulin after at least a 12-h fast. Ten animals of group Ia and 10 of group Ib were evaluated to determine changes in macromolecular permeability induced by ischemia/reperfusion as measured in the cheek pouch microcirculation. RESULTS: Compared to controls, the animals that drank the 10% or 20% fructose solution had significantly greater weight gain (P < .001), fasting plasma glucose (P < .001) Reperfusion, after 30 min ischemia, resulted in an immediate but reversible increase in postcapillary leakage (L) of 89.0 ± 2.0 L/cm² (group Ia - controls), and 116.5 ± 4.8 L/cm² (group Ib 10% fructose), P < .001.These results suggest that chronic administration of either 10% or 20% fructose solutions could be used to experimentally induce a stable hamster model of hyperinsulinemia and hyperglycemia. CONCLUSION: The model might facilitate the study of basic mechanisms of hyperglycemia and hyperinsulinemia affecting the microvasculature as demonstrated by the findings regarding ischemia/reperfusion after only 2 months of treatment. OBJETIVO: Testar a possibilidade de obtenção de um modelo prático e estável de hiperinsulinemia e hiperglicemia em hamsters substituindo a água de beber por soluções de frutose a 10% ou 20% por um período de dois, quatro ou seis meses. MÉTODOS: Hamsters machos foram divididos em 3 grupos e cada grupo subdividido em 3 subgrupos. Dois meses: Grupo Ia-controle (n=51), recebeu água filtrada, Grupo Ib-(n=49), recebeu solução de frutose a 10% ao invés de água e Grupo Ic-( n=8), recebeu solução de frutose a 20% ao invés de água. Quatro meses: Grupo IIa - controle (n=8), Grupo IIb - 10% frutose (n=7) e Grupo IIc - 20% frutose (n=7). Seis meses: Grupo IIIa - controle (n=6), Grupo IIIb - 10% frutose (n=6) e Grupo IIIc - 20% frutose (n=5). Todos os animais foram alimentados com a mesma dieta padrão de laboratório. Os animais foram pesados a cada 2 semanas durante o período do estudo. No dia do final do experimento (61º, 121º e 181º dia, respectivamente, após o início do estudo), os animais foram pesados e anestesiados para coleta de sangue para determinação da glicose e da insulina sérica, após jejum de pelo menos 12 h. Em 10 animais do grupo Ia e em 10 do grupo Ib avaliamos, na microcirculação da bolsa da bochecha, a variação da permeabilidade a macromoléculas induzida por isquemia/reperfusão. RESULTADOS: Comparados ao grupo controle, os animais que beberam soluções de frutose a 10 ou 20% tiveram um aumento significativo de massa corporal (p

PURPOSE: The aim of this research was to study the effects of treatment with melatonin and N-acetilserotonin in the development of pilocarpina model of epilepsy in adult male rats. METHODS: Part I - The animals were divided in 4 groups: SALINE - animals that received only saline; SE - animals submitted to status epilepticus (SE); NAS + SE - animals that received pre-treatment with N-acetylserotonin and were submitted to SE and MEL + SE - animals that received pre-treatment with melatonin and were submitted to SE. Part II - The animals were divided in 6 groups: SALINE - animals that received only saline; SE - animals submitted to status epilepticus (SE); PX + SE - animals submitted to pinealectomy and to SE 7 days later; SH + SE - animals submitted to sham-surgery and to SE 7 days later; SE + NAS - animals submitted to SE and treated with N-acetylserotonin (2,5 mg/kg), 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 12 h, 24 h, 36 h and 48 h after the SE and SE + MEL - animals submitted to SE and treated with melatonin (2,5 mg/kg), 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 12 h, 24 h, 36 h and 48 h after the SE. Following the treatment the animals were continuously video-recorded for 60 days. The behavioral parameters were observed: latency for the SE in minutes, latency for the first spontaneous seizures (ie, duration of the silent period), number of spontaneous seizures during the chronic period and mortality. Five animals per group were perfused for neo-Timm assay. RESULTS: Part I - The animals treated with melatonin and N-acetylserotonin presented an increased of latency for the status epilepticus and decreased number of spontaneous seizures during the chronic period when compared to SE group. The mortality was reduced 100% in animals treated with melatonin and theses animals presented a minor mossy fibers sprouting. Part II - The latency for the first spontaneous seizures and mortality were similar in all groups. The animals treated with melatonin presented a decreased number of spontaneous seizures during the chronic period when compared to PX + SE group and a minor mossy fibers sprouting when compared to SE, SH + SE and PX + SE groups. CONCLUSION: Our data show that the melatonin and N-acetylserotonin have an important neuroprotector effect in the epileptogenesis and in the control of seizures during the chronic period of the pilocarpina model of epilepsy induced by pilocarpina. Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina UNIFESP, EPM SciELO

Coelhos têm sido utilizados como modelo para o estudo da neuropatogenia da infecção pelo herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5), um importante agente de doença neurológica em bovinos. O sistema olfatório tem sido apontado como a principal via de acesso do vírus ao cérebro após replicação na cavidade nasal. Para investigar a importância da via olfatória na patogenia da infecção neurológica pelo BHV-5, foi elaborada e avaliada uma técnica operatória de craniotomia transfrontal para remoção dos bulbos olfatórios (BOs), definindo-se as órbitas como referência anatômica. Foram utilizados 45 coelhos com 30 dias de idade, sendo 23 submetidos à ablação cirúrgica dos BOs e posteriormente inoculados pela via intranasal (IN) ou no saco conjuntival (IC) com o BHV-5. Após incisões de pele, tecido subcutâneo e periósteo, a craniotomia foi realizada em um ponto eqüidistante entre os cantos mediais dos olhos, com uma broca sulcada de 3mm acoplada a uma perfuratriz elétrica de baixa rotação. A remoção dos BOs foi realizada com uma sonda uretral n°6 acoplada a um aspirador. O estudo macroscópico de três animais após a cirurgia comprovou que o procedimento foi eficiente na remoção total dos BOs. Isso também foi comprovado pela interrupção do acesso do vírus ao córtex cerebral: apenas um animal (1/11 ou 9,1%) no grupo submetido à ablação dos BOs com inoculação IN desenvolveu enfermidade neurológica, contra 100% (10/10) dos coelhos controle. Conclui-se que a técnica de craniotomia transfrontal utilizando a órbita como referência anatômica permite o acesso adequado para localização e remoção dos BOs e pode ser utilizada em estudos de patogenia de infecções por vírus neurotrópicos que exijam a interrupção completa da via olfatória. Rabbits have been used as animal models to study the pathogenesis of neurological infection by bovine herpesvirus type 5 (BHV-5), an important agent of meningoencephalitis in cattle. The olfactory system has been implicated as the main pathway for the virus to reach the brain after replication in the nasal mucosa. To investigate the role of the olfactory route in the pathogenesis of neurological infection, a technique of transfrontal craniotomy for ablation of the main olfactory bulbs (MOBs), using the eyes as the anatomic reference was developed and evaluated. Using this technique, twenty three 30 days-old rabbits were submitted to surgical ablation of the MOBs and subsequently inoculated with BHV-5. After skin, subcutaneous tissue and periosteum incisions, the craniotomy was performed in a point equidistant to the medial corner of the eyes, with a 3 mm drill coupled to a low intensity elyptic drilling machine. The removal of the MOB's tissue was performed by using a number 6 uretral probe coupled to a surgical vaccum pump. The anatomic references used were appropriate in allowing an adequate and easy access to the MOBs. Necropsy performed in three animals after the surgery demonstrated that the surgical procedure was efficient in completely removing the MOB tissue. This was also demonstrated by the interruption of the access of the virus to the brain after intranasal inoculation: only one animal (1/11) in the bulbectomized group developed neurological infection and disease, against 100% (10/10) of the control group. The transfrontal craniotomy using the eyes as the anatomical reference allowed for an adequate access for localization and removal of the MOBs in rabbits. This techique may be used in studies of viral pathogenesis requiring the complete interruption of the olfactory connection to the brain.

Resumen Objetivo Los objetivos de este estudio son la comparacion de la eficacia y la eficiencia entre dos tecnicas endourologicas para el tratamiento de estenosis ureterales en modelo animal, asi como la valoracion histologica de la cicatrizacion ureteral. Material y metodos Se emplearon 10 animales de la sp. porcina. A los que se les sometio a un modelo experimental de estenosis ureteral. Transcurridas 4 semanas se realiza el diagnostico de la obstruccion urinaria. Dividimos a los animales en 2 grupos: -Grupo I. (5 animales), endoureterotomia con balon hasta la ruptura ureteral. -Grupo II (5 animales), tratamiento mediante Acucise®. Se disponen cateteres doble pigtail durante 3 semanas. Realizandose el seguimiento a las 4 semanas de la extraccion de los mismos. Resultados Todos los animales del estudio mostraron signos de obstruccion urinaria tras 4 semanas de la ligadura ureteral. De los 10 animales, uno de cada grupo necesito una segunda aplicacion de la tecnica en la misma sesion. Encontramos en el Grupo I, la migracion en sentido vesical de un cateter ureteral que provoca la restenosis. Tras la valoracion de los resultados determinamos que el porcentaje de exito es de un 80% en el grupo I y de un 100% en el II. Conclusiones A la vista de los resultados obtenidos en nuestro estudio las dos tecnicas se muestran efectivas, aunque el Acucise® se mostro mas eficiente. No encontramos evidencias histologicas que avalen los estudios de cicatrizacion de Davis tras la endoureterotomia.

Estudou-se a recuperação de larvas na fase crônica de camundongos infectados por Toxocara canis, bem como a presença de anticorpos anti-Toxocara após tratamento com ivermectina, mebendazol ou tiabendazol, durante cinco dias consecutivos. Os animais foram sangrados pelo plexo retroorbitário entre 30 e 270 dias após a infecção (DPI). Os soros foram processados pela técnica de enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) para pesquisa de anticorpos da imunoglobulina da classe G (IgG), utilizando antígeno ES de T. canis. Aos 270 DPI, os animais foram sacrificados para recuperação de larvas no sistema nervoso central, no fígado, nos pulmões e músculos. Os resultados do teste imunoenzimático indicam que, aos 20 dias após tratamento (50 DPI), o nível de anticorpos anti-Toxocara IgG aumentou nos três grupos tratados, mantendo-se elevado ao longo do experimento até o 270º DPI. Em relação aos animais infectados e não-tratados, observou-se decréscimo significativo no número de larvas recuperadas nos animais dos três grupos tratados, não se conseguindo a cura parasitológica. Com este estudo conclui-se que as três drogas utilizadas no experimento têm eficácia similar.

Although sentinel node procedure has been used world wide, there are many aspects to be defined and better standardized. This study address if the experimental model in rats is appropriate for sentinel node biopsy. In this model, the lymph nodes are showed by lymphoscintigraphy, they are dyed by patent blue and identified by intraoperative gamma probe detection. It isn’t necessary to use magnification for the procedure. The model demonstrated that sentinel node biopsy in rats is feasible. So, besides allowing researches in this field, the model is useful for training and diffusing this technique. Embora os procedimentos de biópsia de linfonodo sentinela estejam sendo reproduzidos em diversos centros oncológicos, existem muitos aspectos a serem melhor definidos e padronizados. Este trabalho tem por objetivo verificar se o modelo experimental em rato é apropriado para o procedimento de biópsia de linfonodo sentinela. No modelo experimental em rato, os linfonodos se mostram evidenciados na linfocintilografia pré-operatória, são corados pelo azul patente, captam o radiofármaco, são mensurados pelo detector portátil de radiação gama intra-operatória, e podem ser dissecados a olho nu em ratos adultos, permitindo identificação do linfonodo sentinela. O modelo demonstrou que a realização de biópsia de linfonodo sentinela em ratos é factível. Isto tem um grande significado, pois, além de permitir pesquisas relacionadas a este neste tema, ele se presta também para o ensinamento do procedimento, contribuindo para a divulgação da técnica.

Objetivo: divulgar a metodologia da indução de endometriose experimental em animais de laboratório. Método: utilizamos ratas albinas, virgens, adultas de aproximadamente três meses de idade, que foram inicialmente anestesiadas pelo éter etílico. Aberta a cavidade abdominal, identificamos os cornos uterinos e retiramos um fragmento de aproximadamente 4 cm do corno uterino direito. Esse fragmento foi mergulhado em solução fisiológica e sob lupa estereoscópica foi separado o endométrio do miométrio e feitos retângulos de aproximadamente 4 por 5 mm. Esses foram fixados por meio de fio de sutura, sobre vasos sangüíneos visíveis a olho nu, na parede lateral do abdômen, tomando-se sempre o cuidado de manter a porção do endométrio livre voltada para a luz da cavidade abdominal. Após 21 dias os animais foram novamente operados para verificarmos o tamanho dos implantes e para retirada do endométrio ectópico para análise histológica. Resultados: macroscopicamente observamos crescimento significativo dos implantes endometriais. Ao exame microscópico pudemos observar a presença de epitélio glandular e estroma semelhantes ao do endométrio tópico. Conclusões: o modelo utilizado reproduz a doença, em ratas, sendo método auxiliar de valia para estudar esta afecção, principalmente a ação de medicamentos sobre esses implantes. Purpose: to demonstrate the experimental endometriosis induction in animals. Method: we used adult female Wistar rats weighing 200 - 250 g anesthetized with ethyl ether to open the abdominal cavity. After identifying the uterine horns, we removed an approximately 4 cm fragment from the right uterine horn. This fragment was placed in physiological saline and, with the aid of a stereoscopic magnifying glass, the endometrium was separated from the myometrium and cut into rectangles of approximately 4 x 5 mm. These rectangles were fastened to the lateral abdominal wall near great blood vessels, taking care that the free portion of the endometrium was directed towards the lumen of the abdominal cavity. After 21 days the animals were again operated to observe the size of the implants and to remove the ectopic endometrium for microscopic analysis. Results: we macroscopically observed a significant growth of the endometrial implants. Microscopic examination showed presence of glandular epithelium and stroma similar to topic epithelium. Conclusion: this model reproduces endometriosis in the female rat allowing a better study of this pathology, mainly the action of drugs on these implants. Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina UNIFESP, EPM SciELO

This research characterizes the acute and chronic phases of Chagas ' disease in hamster through parasitological and histopathological studies. The acute phase was achieved with 44 young hamsters injected intraperitoneally with 100.000 blood trypomastigotes of Benedito and Y strains of T. cruzi. The chronic phase was induced in 46 hamsters injected intraperitoneally with 35.000 trypomastigotes ofVicentina, Benedito and Y strains. Animals were sacrificed at regular intervals of 24 hours of acute phase and from the 3rd to the 10th month of infection ofchronic phase. In the acute phase, parasites were easily recoveredfrom all animals and there was an inflammatory reaction characterized by mononuclear and polymorphous leukocyte infiltration of variable degree in the majority of tissues and organs, specially in the connective loose and fatty tissues, smooth muscle myocardium and skeletal muscle. In the chronic phase the lesions occurred in the same tissues and organs, but the inflammatory response was less severe and characterized by mononuclear infiltration mainly with focal or zonalfibrosis in the myocardiun. In 50% of infected animals parasites were found inmyocardiun and recoveredfrom pericardic, peritoneal and ascitic fluids in some animals. Signs of heart failure, sudden death and enlargement of bowel were observed regularly. We concluded that the hamster is an useful model for Chagas' disease studies.