Search

Bu çalışmada, hızlı göz hareketleri (REM) uyku yoksunluğunun öğrenme ve bellek üzerine bilinen olumsuz etkilerine karşı farklı dozlarda sitidin 5-difosfokolin (CDP-kolin) uygulamasının etkileri incelenmiştir. Wistar albino cinsi erkek sıçanlar (n=72, 200-300 g, 8-12 haftalık) randomize olarak 12 gruba ayrılarak uygun kafeslerde takip edilmiştir.`Flower pot` tekniği kullanılarak hayvanlar 4 gün boyunca 6.5 cm çapında bir platform üzerinde bırakılarak uyku yoksunluğu, 13 cm çapında platform üzerinde bırakılarak ortam kontrol grupları oluşturulmuştur. Morris su tankı testi ile dört gün boyunca günde iki kez eğitim fazı, 5. gün probe fazı gerçekleştirilmiştir. Morris su tankı testlerinden 30 dakika önce sıçanlara intraperitoneal olarak serum fizyolojik veya 100 µmol/kg, 300 µmol/kg, 600 µmol/kg dozunda CDP-kolin enjeksiyonu yapılmıştır. Davranış deneylerinin ardından hayvanlar dekapite edilip hipokampus bölgelerinden elde edilen homojenatlarda; Western-blot yöntemiyle fosforile siklik adenozin monofosfat yanıt elemanı bağımlı protein (pCREB), total kalsiyum kalmodulin bağımlı kinaz II (tCaMKII) ve β-Tubulin proteinlerinin analizleri yapılmıştır.Çalışmamızda REM uyku yoksunluğunun öğrenme parametreleri üzerine etkisi olmadığı, bellek parametrelerini ise olumsuz yönde etkileyebileceği gözlemlenmiştir. CDP-kolin tedavisinin bozulan bellek üzerine olumlu yönde etki edebileceği saptanmıştır. Ayrıca uyku yoksunluğu oluşturmak için kullanılan model nedeniyle hayvanların maruz kaldığı stresin öğrenme ve bellek parametrelerini etkileyebileceği ve CDP-kolinin stres üzerine olumlu etkilerinin olabileceği gözlenmiştir. Western blot analizleri sonucunda ise total CaMKII oranı değişmezken, pCREB oranı uyku yoksunluğuna bağlı anlamlı olarak azalmıştır. Anahtar Kelimeler: REM uyku yoksunluğu, Morris su tankı, öğrenme, bellek, CDP-kolin In this study, the effects of various doses of cytidine diphosphocholine (CDP-choline) on the well known negative effects of Rapid Eye Movements (REM) sleep deprivation on learning and memory were investigated. Male Wistar albino rats (n=72, 200-300 g, 8-12 weeks old) were randomized to 12 groups and placed in appropriate cages.Sleep deprivation or environmental control was induced by placing rats on a platform with 6.5 cm or 13 cm diameter, respectively, for 4 days according to `Flower pot` method. Learning parameters were tested for 4 consecutive days (trial phase) and on the 5th day (probe phase) memory parameters were tested in Morris Water Maze. 30 minutes before the Morris water maze experiments saline or 100 µmol/kg, 300 µmol/kg, 600 µmol/kg doses of CDP-choline were administered intraperitoneally. After behavioral tests rats were decapitated and then phosphorylated cyclic adenosine monophosphate response element binding (pCREB), total Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II (tCaMKII) and β-tubulin proteins were analyzed in hippocampus homogenates using Western-blot technique.In our study, we observed that selective REM sleep deprivation had no effect on learning parameters but may impaire memory parameters. We determined that CDP-choline can reduce the impairment in memory parameters. It has been observed that the model used to generate sleep deprivation may cause stress therefore affects the learning and memory parameters and CDP-choline may have positive effects on stress. Western blot analyzes revealed that, the ratio of total CaMKII was unchanged while the rate of pCREB was decreased as a result of sleep deprivation.Key Words: REM sleep deprivation, Morris water maze, learning, memory, CDP-choline 137

Bu çalışmada öğrenme sonrası uyku sırasında bellek konsolidasyonu için kritik zaman periyodunun belirlenmesi ve bu periyotta yapılan REM uyku yoksunluğunun plastisiteyle ilişkili genlerin ve ilgili mikroRNA (miRNA)'ların ekspresyonuna etkisinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Çalışmada 2-3 aylık 60 adet Balb/c türü erkek fareler her grupta 10'ar adet olacak şekilde 6 gruba ayrıldı. AK ve BK; kontrol grupları, A1 ve B1; son denemeden hemen sonra 3 saat REM uyku yoksunluğu grupları, A2 ve B2; son denemeden 3 saat sonra 3 saat REM uyku yoksunluğu grupları olarak belirlendi. Uzamsal öğrenme ve bellek performansları Morris su labirent testiyle ölçüldü. REM uykusu modifiye çoklu platform metodu kullanılarak elimine edildi. BK, B1 ve B2 grupları öğrenme denemeleri ve uyku yoksunluğu paradigmaları uygulandıktan sonra 4. günün sonunda dekapite edilerek hipokampusları çıkarıldı. Hipokampal BDNF, CAMK II, CREB, Zif268, Tomozin, REST mRNA'ları ve miR-132, miR-124, miR-9, miR-182, miR-219 ve miR-325 ekspresyonları Kantitatif Real Time PCR ile ölçüldü. AK ve A1 gruplarında toplam alınan yol uzunluğu ve platforma çıkma süresinde azalma görülürken, bu değerler A2 grubunda arttı (p0.05). B1 grubunda hipokampal miR-182 ve miR-132, miR-219, miR-124, miR-9 ve miR-325 düzeylerindeki azalmalar anlamlıydı (p

Uykusuzluğun ağrı algısını arttırdığı ve hiperaljeziye yol açtığı bilinmektedir. Diğeryandan ağrılı sendromlar da uyku kalitesini bozmakta ve uykusuzluğa neden olarak bir kısırdöngü oluşturmaktadır. Bu çalışmada sıçanlarda REM uyku yoksunluğuna bağlı hiperaljezimodelinde melatoninin antinosiseptif etkileri araştırılmıştır. Toplam 40 adet sıçan modifiyeplatform yöntemi ile 72 saat uykusuz bırakılarak 4 gruba ayrıldı. Birinci gruba plasebo, 2, 3ve 4.gruplara sırasıyla 50, 100 ve 200 mg/kg melatonin intraperitoneal yolla uygulandı. Ağrıeşiği ölçümleri hot-plate ve tail-flick yöntemleri ile uykusuzluk öncesi (0.saat), uykusuzluksonrası (72.saat) ve ilaç uygulamasından 1 saat sonra (73.saat) olmak üzere toplam 3 kezyapıldı. REM uykusuzluğu tüm sıçanlarda ağrı eşiğinde anlamlı azalmaya neden oldu(hotplate 3,69±1,64'e karşı 1,54±0,23 ve tail-flick 7,65±3,83'ye karşı 4,44±1,79 her ikisi içinp

Uyku ve ağrı birbirini etkileyen süreçlerdir. Uykusuz kalan bireylerde ağrı algısında artış ve ağrı eşiğinde düşme görülürken, ağrılı durumlarda da uyku kalitesi bozulmakta ve uyku etkinliği azalmaktadır. Klinikte önemli bir kısır döngü oluşturan ve hasta tedavilerini de olumsuz etkileyen uyku-ağrı etkileşiminin mekanizması çözülebilmiş değildir. Bu çalışmada REM uykusuzluk modelinde kanabinoid WIN55 ile kanabinoid reseptör antagonistleri AM251 ve SR144528 kullanılarak uyku/ağrı ilişkisinde kanabinoid sisteminin rolünün ortaya konulması amaçlanmıştır. Her grupta 10 adet olmak üzere 6 grupta toplam 60 adet balb/c türü fare modifiye saksı modelinde 72 saat süreyle uykusuz bırakılmış ve uykusuzluğun başlangıcında (0.saat), sonunda (72.saat) ve ilaç uygulamasından 30 ve 60 dakika sonra sıcak zemin (hotplate) ve kuyruk çekme (tail-flick) yöntemleri ile ağrı eşiği ölçümleri yapılmıştır. Grupların ilaç uygulaması aşağıdaki şekildedir: Grup 1 kontrol grubuna intraperitoneal ilaçların çözücüsü (%78 fizyolojik serum + %1 Etanol + %1 Tween 80+%20 DMSO) injeksiyonu yapılmıştır. Grup 2 (Kanabinoid agonist grubu)'ye intraperitoneal kanabinoid agonisti (WIN 55,212,2) injeksiyonu yapılmıştır. Grup 3 (Kanabinoid CB1 reseptör antagonisti + agonist grubu)'teki farelere i.p. kanabinoid CB1 reseptör antagonisti (AM251) yapılmıştır. 20 dk sonrasında kanabinoid agonisti olan (WIN 55,212,2) injeksiyonu yapılmıştır. Grup 4 (Kanabinoid CB2 reseptör antagonisti + agonist grubu)'teki farelere i.p. kanabinoid CB2 reseptör antagonisti (SR144528) yapılmıştır. 20 dk sonrasında kanabinoid agonisti olan (WIN 55,212,2) injeksiyonu yapılmıştır. Grup 5 (Kanabinoid CB1 reseptör antagonisti grubu)'teki farelere i.p. kanabinoid CB1 reseptör antagonisti (AM251) yapılmıştır. Grup 6 (Kanabinoid CB2 reseptör antagonisti grubu)'daki farelere i.p. kanabinoid CB2 reseptör antagonisti (SR144528) yapılmıştır. Sleep and pain are interrelated phenomena. While patients with sleep loss experience increased pain perception and lower pain threshold, painful conditions impair sleep quality and reduce sleep efficiency. The mechanism of sleep-pain interaction which pose an important vicious cycle in clinics and negatively affect patient treatments, has not yet been elucidated. In this study, we aimed to investigate the role of cannabinoid system in sleep/pain relationship by using cannabinoid WIN55 and cannabinoid receptor antagonists AM251 and SR144528 in REM deprivation model. Sixty balb/c mice were subjected to 72 hours REM sleep deprivation by modified flower-pot technique and were evaluated in 6 groups. Pain assessments were performed by hotplate and tailflick methods at the 0 (baseline), 72 (after sleep deprivation) and 73. (after drug administration) hours. Group 1 (control group) received i.p. vehicle (78% saline+1% Ethanol+1% Tween 80+20% DMSO). Group 2 (Cannabinoid agonist group) received i.p. cannabinoid agonist (WIN 55,212,2). Group 3 (Cannabinoid CB1 receptor antagonist + agonist group) received i.p. cannabinoid CB1 receptor antagonist (AM251) followed by WIN55 after 20 min. Group 4 (Cannabinoid CB2 receptor antagonist + agonist group) received i.p. cannabinoid CB2 receptor antagonist (SR144528) followed by WIN 55,212,2 after 20 min. Group 5 (Cannabinoid CB1 receptor antagonist group) received i.p. cannabinoid CB1 receptor antagonist (AM251). Group 6 (Cannabinoid CB2 receptor antagonist group) received i.p. cannabinoid CB2 receptor antagonist (SR144528). 55

Sıçanlarda uyku bozukluklarının hipokampüs aracılı öğrenme ve hafıza işlevleri üzerine etkisinin araştırılmasıBu çalışmada, uyku bozuklukluklarının hipokampüs aracılı öğrenme ve bellek üzerindeki etkileri araştırılmıştır. Ağırlıkları 320-360 gr olan Sprague Dawley cinsi toplam 48 adet erkek sıçan, 4 gruba ayrılmıştır. Kontrol grubu (K) (n=12), REM Deprivasyonu Grubu (RD) (n=12), Total Uyku Deprivasyonu Grubu (SD) (n=12) ve Uyku Yoksunluğu Grubu (SF) (n=12). Sıçanlara günde 4 kez 5 gün boyunca, Morris su labirenti (Morris Water Maze) düzeneğinde yüzdürme eğitimi verildi (öğrenme dönemi); 6. günden sonra uyku bozuklukları uygulanmaya başlandı ve SD grubu 3 gün, RD ve SF gruplarında 7 gün boyunca uyku bozuklukları oluşturuldu. Günlük düzenekteki platform çıkarılarak hayvanlara 60 sn süreyle probe testi ve ardından platform testi yapıldı. SD grubunda başlangıç günü ve 3. gün, RD ve SF grubuna başlangıç günü ve 7. günde görünür platform testi (visible test) yapıldı. Bellek parametresi olarak, Platformun bulunduğu kadranda (2. Kadran, hedef hadran) yüzülen süre (sn), Platformun bulunduğu kadranda (2. Kadran, hedef hadran) yüzülen mesafe (cm), Sıçanların yüzdüğü ortalama hız (cm/sn), Sıçanların yüzdüğü toplam mesafe (cm), Dış kadranda yüzülen süre (sn) değerlendirilmiş ve tüm gruplarda bellek parametrelerinde istatistiksel olarak anlamlı bozulmalar saptanmıştır (p

Uyku ve öğrenme-bellek süreçlerinin birbiriyle ilişkili olduğunu ve REM uyku yoksunluğunun öğrenme süreçlerine olumsuz etkisi olduğunu bildiren çok sayıda çalışma vardır. Ancak, bu çalışmaların sonuçları arasında bir takım çelişkiler bulunmaktadır.Bu nedenle sunulan bu çalışmada genç ve genç erişkin erkek sıçanlarda uzun süreli REM uyku yoksunluğunun öğrenme ve bellek üzerine olan etkisi araştırıldı.Çalışma; 30'u 4 aylık, 30'u 8 aylık olmak üzere 60 Wistar Albino cinsi erkek sıçanla ve her yaş için uyku yoksunluğu (n=10), ortam kontrol (n=10) ve kafes kontrol (n=10) grupları oluşturularak gerçekleştirildi. Uyku yoksunluğu grubundaki sıçanlar 21 gün süreyle her gün 18 saat boyunca; 14 adet dar platform içeren su tankı şeklindeki düzenekte barındırılarak uyanık bırakıldılar. Ortam kontrol grubu sıçanlar aynı süre ile geniş platformlu su tankı düzeneğinde, kafes kontrol grubu sıçanlar da standart sıçan kafeslerinde barındırıldı. Deney süresince her haftanın ilk gününde ve 21. gün sonunda sıçanların vücut ağırlığı ölçüldü. Uyku yoksunluğu uygulaması sonunda kaçma platformu içeren Morris su tankı içinde dört ardışık gün her günde 4 yüzdürme yaptırılarak öğrenme periyodu ve beşinci gün platform kaldırılıp 2 dakika olacak şekilde bir kez yüzdürülerek öğrenme ve bellek test edildi.Öğrenme periyodunda sıçanın Morris su tankında platformu bulana kadar kat ettiği toplam yol uzunluğu, platformu bulma süresi, yüzme hızı; test periyodunda ise platformun kaldırıldığı hedef kadranda geçirilen sürenin tankta geçirilen toplam sürenin %' si cinsinden değerleri ve yüzme hızı istatistiksel olarak analiz edildi. Anlamlılık için olasılık düzeyi p

Bu çalışmada 96 saat süreyle REM uyku yoksunluğu oluşturulmuş sıçanlarda gelişen hiperaljeziye WIN 55 adlı kanabinoid maddenin etkileri araştırılarak uyku ve ağrı arasındaki ilişkinin nörokimyasal mekanizmasının açıklanmasına katkı sağlanması amaçlanmıştır. Çalışmada, kırk adet wistar albino sıçan (200-220 gr.) kullanıldı. Denekler her grupta 10 hayvan olmak üzere toplam 4 grup (Grup 1/REM yoksunluğu+Placebo Kontrol, Grup 2/REM yoksunluğu+WIN 55 (1 mg/kg), Grup 3/REM yoksunluğu+WIN 55 (3 mg/kg), Grup 4/REM yoksunluğu+WIN 55 (10 mg/kg)) altında toplanıp, önceden belirlediğimiz yöntemle numaralandırılarak kafeslere dağıtıldı. Tüm hayvanların ağırlık ve başlangıç ağrı eşiği ölçümleri (?sıcak levha? testi kullanılarak) yapıldı. Dört grupta da ?çok platformlu modifiye yöntem? ile REM uyku yoksunluğu oluşturuldu. Daha sonra Grup 1'e DMSO %50 ve Grup 2'ye 1 mg/kg, Grup 3'e 3 mg/kg, Grup 4'e 10 mg/kg WIN 55,212-2 injeksiyonu intraperitoneal yoldan (5 mL/kg) uygulandı. İlaç uygulamasından 60 dakika sonra sıcak levha testi ile tüm hayvanlarda ağrı eşiği ölçümleri tekrarlandı. Deney süresince hayvanlar özel kafeslerde tutularak, beslenmeleri için ad libitum standart yem ve musluk suyu verildi. Ağrı eşiği ölçümlerinin normal dağılıma uygunluğu Kolmogorov-Smirnov testi ile, Gruplar arasında ağrı eşiği ortalamaları arasındaki fark ANOVA testi ile değerlendirildi. Ayrıca post-hoc Tukey testi kullanıldı. P