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La ascariasis es una enfermedad causada por el nematodo A. lumbricoides afectando a 1 billón de personas en todo el mundo. En este trabajo se analiza la respuesta de anticuerpos IgA específicos frente a extractos de huevos de A. lumbricoides en el suero de niños de comunidades rurales del estado Miranda. Se evaluaron 100 niños entre 3 y 14 años de edad y se tomaron muestras de suero y el diagnóstico coproparasitológico. Según lo reportado fueron clasificados en: infectados solo por A. lumbricoides (Asc+), no infectados (NSOP), infectados con A. lumbricoides y otros parásitos (Asc+/OP+) e individuos no infectados por A. lumbricoides pero con otros parásitos intestinales (Asc-/OP+). El extracto fue probado por ELISA, Western Blot e inmunocitoquímica. El perfil electroforético del extracto mostró 7 bandas proteicas de 102, 92, 85, 65, 50, 45 y 30kDa. Por la ELISA, el 26% de los pacientes infectados por A. lumbricoides fueron seropositivos, mientras que el 56% en el grupo NSOP fueron seronegativos. El ensayo de inhibición con extracto de A. lumbricoides permitió identificar 3 bandas proteicas especificas reconocidas por la inmunoglobulina IgA de 92, 85 y 65 kDa diferentes a las reconocidas por el extracto de verme adulto. El nivel de anticuerpos fue significativamente mayor en los infectados que en los no infectados. La superficie de los huevos fue reconocida por la IgA en el suero de los individuos infectados. Estos resultados, indican que el huevo de Ascaris induce anticuerpos específicos contra proteínas que podrían ser utilizados como antígenos en pruebas serológicas que complementan el diagnóstico de Ascariasis. Ascariasis is a disease caused by the nematode A. lumbricoides affecting 1 billion people worldwide. In this study the specific response for IgA antibodies against extracts of A. lumbricoides eggs in the serum of children in rural areas of Miranda state. One hundred children were evaluated at ages 3 and 14 and were taken serum samples and diagnosis of stools. According to the reported, were classified into four groups: infected by A. lumbricoides (Asc +), uninfected (NSOP), infected A. lumbricoides and other parasite (Asc +/OP +); and individuals with other parasitic infections without A. lumbricoides (ASC/ OP+). The extract was tested by ELISA, Western blotting and immunocytochemestry. The electrophoretic profile showed 7 bands of 102, 92, 85, 65, 50, 45 and 30kDa. By ELISA, the 26% of patients in group A. lumbricoides were positive, while the 56% in the NSOP group were seronegative. Immune assay by inhibition with A. lumbricoides extract allowed identify three bands for the IgA antibodies of 92, 85 and 65 kDa different to the bands recognized by adult extracts of A. lumbricoiedes. The levels of antibodies were significantly higher in infected than non-infected children. In addition, the protein component on the surface of eggs was recognized by sera of infected individuals. These results indicate that eggs of Ascaris induce specific antibodies against proteins that could be used as antigens in serological diagnosis for complementing the diagnosis for Ascariasis.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:56:38Z No. of bitstreams: 1 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:56:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) Previous issue date: 2012-08-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) S0102-09352012000400021.pdf.txt: 27704 bytes, checksum: 955dff7a0523fb320a5406dd58e3cc62 (MD5) Previous issue date: 2012-08-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T15:13:11Z No. of bitstreams: 2 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) S0102-09352012000400021.pdf.txt: 27704 bytes, checksum: 955dff7a0523fb320a5406dd58e3cc62 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T15:13:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0102-09352012000400021.pdf: 565183 bytes, checksum: 8b19265d3d9a11ce0fc44b10af4a7995 (MD5) S0102-09352012000400021.pdf.txt: 27704 bytes, checksum: 955dff7a0523fb320a5406dd58e3cc62 (MD5) Previous issue date: 2012-08-01 Este estudo teve como objetivo produzir um antígeno (Ag) a partir de cultura de células de membrana sinovial caprina (MSC) infectadas com o vírus de artrite encefalite caprina (CAEV), pela técnica de microfiltração seriada, substituindo a ultracentrifugação em colchão de sacarose (UCCS) para utilização em ELISA indireto (ELISA-i). Amostras de 188 soros caprinos, que previamente foram testados pelo Western blot (WB) com Ag UCCS, foram submetidas à análise pelo ELISA-i com o novo antígeno produzido, que mostrou concordância de 92% em relação ao antígeno UCCS. A sensibilidade e a especificidade do ELISA em relação ao WB foram de 95,6% e 88,5%, respectivamente. A nova técnica, criada a partir de microfiltrações, mostrou-se efetiva e de baixo custo para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV em comparação ao antígeno ultracentrifugado, e constitui uma alternativa viável para produção de antígeno purificado de lentivírus de pequenos ruminantes. This study aimed to produce an antigen (Ag) from the culture of goat synovial membrane cells (MSC) infected by CAEV through serial microfiltering technique replacing ultra ultracentrifugation in sacarosis Mattress (UCCS) for the indirect diagnosis ELISA tests (i ELISA). Samples of 188 sera from goats previously examined by Western Blot (WB) with Ag UCCS were submitted to analysis by i ELISA with new antigen produced, demonstrating an accordance of 92% in relation to UCCS antigen. The specificity and sensitivity relating to WB were of 95,65% and 88, 5% respectively. The new technique created from the microfiltering is effective and with low cost for the serological antibodies diagnosis of CAEV comparing to the ultracentrifuged one, presenting, therefore, as a viable alternative for purified antigen of lentivirus in small ruminants. Universidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) Caprinos e Ovinos Universidade Estadual Paulista Faculdade de Agricultura e Ciências Veterinárias Universidade Estadual Paulista Faculdade de Agricultura e Ciências Veterinárias

Anticuerpos contra el virus de la diarrea viral bovina (VDVB) y antígeno del VDVB fueron evaluados en muestras de suero obtenidos en dos oportunidades, con intervalo de 30 días, en animales de 10 a 23 meses de edad (n = 148) de un establo de bovinos productores de leche que se encuentra en proceso de erradicación de la enfermedad de la diarrea viral bovina (DVB) desde 2002 . El establo está localizado en Santa Rita, Arequipa. Los anticuerpos y el antígeno viral se analizaron mediante las pruebas de neutralización viral y ELISA de captura, respectivamente. El 6.8% (10/148) de los animales presentaron anticuerpos contra el VDVB, existiendo un mayor número de animales con anticuerpos en el grupo etario de 19 a 23 meses de edad. Los títulos de anticuerpos variaron entre 8 a >256. No se detectaron animales portadores (PI) ni se encontró seroconversión en el segundo muestreo, lo que sugiere que los anticuerpos detectados correspondieron a infecciones pasadas; además, los resultados indican que la enfermedad de la DVB ha sido controlada en el hato., Antibodies against bovine viral diarrhea virus (BVDV) and antigen of BVDV wereevaluated in serum samples from cattle aged 10 to 23 months (n = 148) from a dairy herdwhere the disease eradication has been carrying out since 2002. The herd is located inSanta Rita, Arequipa, Perú, and samples were collected twice on a 30-day interval.Antibodies against BVDV and BVDV antigen were analyzed by viral neutralization andcapture ELISA tests respectively. Neutralising antibodies against BVDV were detected in6.8% (10/148) of animals, and most reactors were 19 to 23 months of age. The antibodytiter ranged from 8 to >256. None persistently infected (PI) animals were found. Theincidence of infection and seroconversion in the second set of samples was nill. Theseresults suggested that the antibodies against the BVD corresponded to residual antibodiesfrom previous infections. In addition, the results indicate the BVD infection has beencontrolled.

Resumo: O vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV) é um lentivírus que causa uma enfermidade crônica que não possui tratamento ou vacinação como ferramenta de controle, sendo responsável por perdas econômicas significativas em todo mundo. O diagnóstico é principalmente baseado em exames sorológicos, onde os antígenos utilizados para o diagnóstico são compostos basicamente pelas proteínas estruturais p28 e gp135. Este estudo teve como objetivo produzir um antígeno (Ag) a partir de cultura de células de Membrana Sinovial Caprina (MSC) infectadas com CAEV, pela técnica de microfiltração seriada, substituindo a ultracentrifugação em colchão de sacarose ( Ag UCCS) para utilização em um ELISA indireto (ELISA-i). Amostras de 188 soros caprinos, que previamente foram testados pelo Western Blot (WB) com Ag UCCS, foram submetidos à análise pelo ELISA-i com o novo antígeno produzido, que mostrou uma concordância de 92% em relação ao antígeno UCCS. A sensibilidade e especificidade do ELISA em relação ao WB foram de 95,65% e 88,5% respectivamente. A nova técnica criada a partir de microfiltrações, mostrou-se efetiva para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV em comparação ao antígeno ultracentrifugado, apresentando-se, portanto, como uma alternativa viável para produção de antígeno purificado de lentivírus de pequenos ruminantes. Abstract: The caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) is a lentivirus which causes a chronic character disease that does not have treatment or vaccination as a control tool, being responsable for significant economical losses all over the world. The diagnosis is mainly based on serological exams, in which the antigens (Ag) used for diagnosis are basically composed by p28 and gp135 structural proteins. This study aimed to produce an antigen (Ag) from the culture of goat synovial membrane cells (MSC) infected by CAEV by serial microfiltering technique replacing ultracentrifugation in sacarosis Mattress (UCCS) for the indirect diagnosis ELISA tests (i-ELISA). Samples of 188 serum from goats, previously examined by Western Blot (WB) with Ag UCCS were submitted to analysis by i-ELISA with new antigen produced, demonstrating an accordance of 92% in relation to UCCS antigen. The specificity and sensitivity relating to WB were of 95.65% and 88.5% respectively. The new technique created from the microfiltering showed itself effective to the serological antibodies diagnosis of CAEV comparing to the ultracentrifuged one, presenting itself, therefore, as to viable alternative for purified antigen of lentivirus of small ruminants. Made available in DSpace on 2017-08-10T23:52:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TSProducaodeantigenoeseparacaodaproteina.pdf: 2169199 bytes, checksum: 6d04390361e255e1bca3f90ac6e22c38 (MD5) Previous issue date: 2012-07-13 Dissertação (Mestrado Acadêmico em Ciências Veterinária) - Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza. Orientadora: Maria Fátima da Silva Teixeira; Co-orientadora: Alice Andrioli Pinheiro, Embrapa Caprinos e Ovinos (CNPC).

A tuberculose (TB) causada pelo Mycobacterium tuberculosis, resulta em mais de dois milhões de óbitos anualmente. Segundo dados da OMS cerca de 30% da população mundial está infectada com o bacilo e 5% desses infectados desenvolvem a doença ativa. O Brasil juntamente com outros 21 países albergam 80% de todos os casos de TB no mundo. Devido às falhas existentes nos diagnósticos atuais, muitos estudos tentam descobrir antígenos do Mycobacterium tuberculosis que podem ser usados no ensaio ELISA, um teste de baixo custo. Esse teste seria de grande valia na identificação da tuberculose, principalmente em países em desenvolvimento endêmicos também para outras micobactérias como M. leprae, causador da hanseníase. Várias pesquisas têm identificado componentes do bacilo, como as proteínas secretadas pelas micobactérias em cultura, sob condições de estresse nutricional, mimetizando a situação vivida pelo bacilo no meio intracelular. Dessas proteínas são selecionadas aquelas imunodominantes que podem ser usadas como marcadores da doença. O objetivo desse trabalho foi avaliar o reconhecimento de duas dessas proteínas: os antígenos recombinantes MPT-51 e GlcB do M. tuberculosis, por anticorpos séricos da classe IgM e IgG de pacientes com tuberculose ativa, pelo método imunoenzimático indireto (ELISA). Foram adotados como critério de inclusão aqueles indivíduos de qualquer grupo que fossem HIV negativos, sem doenças crônicas ou uso de medicamentos imunossupressores e mulheres não gestantes. Quarenta e nove pacientes com tuberculose ativa foram selecionados e comparados com os grupos: controles saudáveis PPD não reatores e pacientes hansenianos portadores da forma Virchoviana, pareados por sexo e idade. Os pacientes com TB (0,810±0,319) mostraram maiores concentrações de IgM anti-MPT-51 que os seus respectivos controles: pacientes com hanseníase 0,454±0,195) e controles saudáveis (0,448±0,162), com diferença estatística, p=0,001 e p

O experimento foi realizado com o objetivo de aprimorar o esquema de padronização do teste ELISA para diagnóstico da cisticercose suína, utilizando diferentes modalidades de antígenos obtidos de larvas de Taenia crassiceps. Nos ensaios realizados com esta finalidade foram utilizados o antígeno total (T), de membrana (M) e líquido vesicular (V). Em face do menor desempenho do antígeno de membrana, o mesmo foi dispensado nos ensaios decisivos. As sensibilidades, para os antígenos V e T, foram de 86% e 79% e as especificidades de 97% e 96%, respectivamente. Diante destas altas taxas de desempenho, o teste ELISA pode ser empregado, com segurança, para aplicação no diagnóstico da cisticercose suína. Unitermos: cisticercose suína, Taenia crassiceps, ELISA, antígeno.

Colheu-se sangue de sete suínos infectados com ovos de Taenia solium, semanalmente, durante 140 dias, para realizar ELISA no soro, utilizando antígeno de escólex (Es-Tso) de C. cellulosae. Em todos os animais, após o 21º dia pós-infecção, houve incremento significativo de anticorpos IgG, que assim se mantiveram até o final do experimento. A sensibilidade do ELISA variou entre 87,5 e 100%. À necropsia, foram identificados 238 cisticercos. Seis suínos apresentaram pelo menos um cisto no coração, língua ou masseter. Não se observou correlação entre concentração de anticorpos e número de cisticercos identificados.

Colheu-se sangue de sete suínos infectados com ovos de Taenia solium, semanalmente, durante 140 dias, para realizar ELISA no soro, utilizando antígeno de escólex (Es-Tso) de C. cellulosae. Em todos os animais, após o 21º dia pós-infecção, houve incremento significativo de anticorpos IgG, que assim se mantiveram até o final do experimento. A sensibilidade do ELISA variou entre 87,5 e 100%. À necropsia, foram identificados 238 cisticercos. Seis suínos apresentaram pelo menos um cisto no coração, língua ou masseter. Não se observou correlação entre concentração de anticorpos e número de cisticercos identificados. Blood samples from seven swines infected with eggs of Taenia solium, were collected weekly during a period of 140 days. The ELISA was carried out in serum, using antigen from Cysticercus cellulosae scolex (Es-Tso). The antibody levels for all animals significantly increased and maintained constant from the 21th day post-infection to the end of the experiment. The sensitivity of the ELISA test averaged between 87.5% and 100%. At the necropsy, 238 cysticerci were identified. Six swines presented at least one cysticercus in one of the organs: heart, tongue or masseter. No correlation between concentration of antibodies and number of identified cysticerci at necropsy, was observed.

p. 31-40 Submitted by RI Repositorio (repositorio@ufba.br) on 2011-07-17T22:11:20Z No. of bitstreams: 1 627-2423-2-PB.pdf: 306407 bytes, checksum: 54b5a0d9e9225d36881a2fbaf6e7c5b0 (MD5) Made available in DSpace on 2011-07-17T22:11:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 627-2423-2-PB.pdf: 306407 bytes, checksum: 54b5a0d9e9225d36881a2fbaf6e7c5b0 (MD5) Previous issue date: 2004 Este estudo comparou os resultados de testes ELISA para leishmaniose visceral canina (LVC) utilizando dois antígenos solúveis de Leishmania chagasi, um deles obtido pelo cultivo do parasito em meio sintético quimicamente definido para bactéria, e o outro em meio Schneider. Para avaliação dos ELISAs, foram utilizadas 177 amostras de soro, sendo 36 de cães com isolamento de Leishmania sp em amostras de aspirado esplênico, 71 de cães soronegativos para LVC e 70 amostras escolhidas aleatoriamente no banco de soros do Laboratório de Infectologia Veterinária da Universidade Federal da Bahia. Ao compararmos os resultados dos ELISAs para a população total, a concordância geral entre eles foi grande (kappa = 0,62). A concordância das subpopulações extremas entre os ELISAs, foi considerado excelente (kappa = 0,81). No entanto, a concordância foi reduzida entre as subpopulações próximas ao ponto de corte (kappa = 0,11). No presente estudo, apresentamos e discutimos alguns aspectos e diferenças na execução da técnica de ELISA que podem estar envolvidos na discordância entre os resultados encontrados. Salvador

São descritas as principais etapas de uma técnica simples e sensível para a pesquisa, na mesma placa, do antígeno, do anticorpo e de imunocomplexos específicos baseada no "Enzyme-Linked Immunosorbent Assay" (ELISA). A técnica se mostrou de grande utilidade na pesquisa do antígeno, do anticorpo e de imunocomplexos específicos no soro de pacientes com esquistossomose hépato-intestinal crônica. The main steps of a sensitive and quantitative technique for the simultaneous determination, in the same microplate, of antigen, antibody and specific immune complexes has been described. The assay involved principles of the double sandwich technique used in the "Enzyme-Linked Immunosorbent Assay" (ELISA). The technique proved to be useful for the estimation of antigen, antibody and specific immune complexes in sera of patients with human chronic hepato-intestinal schistosomiasis.