Guma, Fatima C.R, Mello, Tanira G, Mermelstein, Claudia S, Fortuna, Vitor A, Wofchuk, Susana T, Gottfried, Carmem, Guaragna, Regina M, Costa, Manoel L, and Borojevic, Radovan
Hepatic stellate cells are intralobular connective tissue cells expressing the myofibroblast or the lipocyte phenotypes. They participate in homeostasis of the liver extracellular matrix, repair, regeneration, and fibrosis under the former phenotype, and control the retinol metabolism, storage, and release under the latter one. They are heterogeneous in terms of their tissue distribution, function, and expression of cytoskeletal proteins. We have studied the expressions of intermediate filaments in the cloned GRX cell line representative of murine hepatic stellate cells, by immunolabeling, reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), immunoprecipitation and Western blots. GRX cells expressed vimentin, desmin, glial fibrillary acidic protein (GFAP), and smooth muscle α actin (SM-αA). Vimentin, desmin, and SM-αA were expressed in all cultures. GFAP showed a heterogeneous intensity of expression and did not form a filamentous cytoskeletal network, showing a distinct punctuate cytoplasmic distribution. When activated by inflammatory mediators, GRX cells increased expression of desmin and GFAP. Retinol-mediated induction of the lipocyte phenotype elicited a strong decrease of intermediate filament protein expression and the collapse of the filamentous structure of the cytoskeleton. Quiescent hepatic stellate precursors can respond to physiologic or pathologic stimuli, expressing activated myofibroblast or lipocyte phenotypes with distinct patterns of cytoskeleton structure, metabolic function, and interaction with the tissue environment.Key words: intermediate filaments, desmin, glial fibrillary acidic protein, GFAP, hepatic stellate cells, liver.Les cellules périsinusoïdales hépatiques sont des cellules conjonctives intralobulaires pouvant prendre la forme de myofibroblastes ou de lipocytes. Sous forme de myofibroblastes, elles participent à la régénération et au développement des fibroses hépatiques; sous forme de lipocytes, elles règlent le métabolisme, le stockage et la libération du rétinol. Elles sont hétérogènes quant à leur distribution tissulaire, leur fonction et leur expression de protéines du cytosquelette. Nous avons étudié l'expression de protéines des filaments intermédiaires dans la lignée cellulaire GRX, représentative de cellules périsinusoïdales hépatiques de souris, par immunomarquage, RT-PCR, immunoprécipitation et transfert Western. Les cellules GRX produisent la vimentine, la desmine, la protéine fibrillaire acide gliale (GFAP) et l'actine α de muscle lisse (SM-αA). La vimentine, la desmine et la SM-αA sont présentes dans toutes les cultures. Le taux d'expression de la GFAP varie. La GFAP ne forme pas de réseaux fibrillaires, mais elle a une distribution ponctuelle dans le cytoplasme. Sous l'influence de médiateurs de l'inflammation, l'expression de la desmine et de la GFAP augmente dans les cellules GRX. L'induction du phénotype lipocytaire par le rétinol est associée à une diminution des filaments intermédiaires et à une désorganisation de leur structure. Les cellules périsinusoïdales hépatiques résidentes peuvent donc répondre à des stimuli physiologiques et pathologiques par des modifications de l'organisation de leur cytosquelette, associées aux modifications de leur fonction métabolique et de leur interaction avec les tissus adjacents.Mots clés : filaments intermédiaires, desmine, protéine fibrillaire acide gliale, GFAP, cellules périsinusoïdales hépatiques, foie.[Traduit par la Rédaction] [ABSTRACT FROM AUTHOR]