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Apesar da micropropagação ser amplamente difundida e apresentar vantagens em relação aos métodos tradicionais de propagação, seu emprego em escala comercial na produção de mudas é limitado, principalmente, devido ao elevado custo para obtenção das mudas. O desenvolvimento de sistemas de micropropagação fotoautotrófica com o uso de luz natural surgem como possibilidades potenciais de aumentar a eficiência da micropropagação e auxiliar na redução dos custos, viabilizando-a comercialmente. No entanto, a micropropagação fotoautotrófica e o uso da luz natural carecem de estudos. No Brasil, pesquisas com o intuito de utilização da luz natural na micropropagação fotoautotrófica são praticamente inexistentes, apesar de haverem fortes razões para sua pesquisa e implementação, principalmente, pelo fato de o Brasil ser um país de clima tropical e subtropical, com grande disponibilidade de luz natural ao longo do ano, e por necessitar de novas tecnologias para o setor de produção de mudas. Esta revisão visa discutir aspectos relacionados à micropropagação fotoautotrófica e utilização da luz natural, como possibilidades para auxiliar a tornar a micropropagação um método de produção de mudas comercialmente viável.

O pré-requisito para se obter sucesso na transformação genética de plantas, e também para a multiplicação rápida do genótipo modificado pela micropropagação, é um protocolo de regeneração eficiente. Objetivou-se com este trabalho estudar a expressão do potencial morfogenético de fragmentos delgados de folhas de macieira e otimizar um protocolo de regeneração visando futuros trabalhos de transformação genética. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3 x 2 x 6, com três cultivares de macieira (Galaxy, Maxigala e Mastergala), dois tipos de explantes (fragmentos finos de folhas cortados no sentido transversal e longitudinal), e seis concentrações de thidiazuron (TDZ) no meio de cultura (0; 4,54; 9,08; 13,62; 18,16 e 22,7 µM), totalizando 36 tratamentos. Os sais e vitaminas do meio MS foram acrescidos de mio-inositol (100 mg.L-1), sacarose (30 g.L-1), ágar (6 g.L-1) e adicionados de 1,6 µM ácido naftalenoacético (ANA). Foram utilizados frascos com capacidade para 150 mL com 6 mL de meio de cultura. Os explantes foram obtidos de plantas cultivadas in vitro, em fase de multiplicação, 45 dias após a repicagem, e se constituíram de finos fragmentos da parte mediana de folhas, cortados no sentido transversal (comprimento de 8 a 10 mm) ou longitudinal (comprimento de 10 a 12 mm), ambos com largura aproximada de 1 mm. A porcentagem de regeneração, a intensidade de formação de calo e o número de brotos por explante foram avaliados aos 45 dias de cultivo. A partir dos resultados obtidos concluiu-se que a expressão do potencial morfogenético dos fragmentos delgados de folhas cortados no sentido transversal é maior do que o daqueles cortados no sentido longitudinal, e o seu cultivo em meio de cultura com 4,54 µM de TDZ, propicia, simultaneamente, elevada porcentagem de regeneração, maior número de brotos e menor intensidade de calo.The prerequisite to obtain success in the plants genetic transformation, and also for the fast multiplication of the modified genotype through the micropropagation, it is a efficient regeneration protocol. The objective of this work was to study the expression of the morphogenetic potential of thin fragments of apple tree leaves, and to optimize a regeneration protocol seeking futures works of genetic transformation. The completely randomized experimental design was used, in factorial outline 3 x 2 x 6, with three cultivate of apple tree (Galaxy, Maxigala and Mastergala), two explants types (thin fragments of leaves cut in the transversal and longitudinal direction), and six concentrations of thidiazuron (TDZ) in the culture medium (0; 4.54; 9.08; 13.62; 18.16 and 22.7 µM), totaling 36 treatments. The MS medium salts and vitamins were added of myo-inositol (100 mg.L-1), sucrose (30 g.L-1), agar (6 g.L-1) and 1.6 µM naphthaleneacetic acid (NAA). Flasks with capacity for 150 mL with 6 mL of culture medium were used. The explants were obtained of plants in vitro cultivated, in multiplication phase, 45 days after the inoculation, and they were constituted of fine fragments of the medium part of leaves, cut in the tranversal direction (length from 8 to 10 mm) or longitudinal (length from 10 to 12 mm), both with approximate width of 1 mm. The regeneration percentage, the intensity of callus formation and the number of shoots formed by explant were evaluated by the 45 days of cultivation. Starting from the obtained results it was ended that the expression of the morphogenetic potential of the thin fragments of leaf cut in the transversal direction is higher than those cut in the longitudinal direction, and its cultivation in culture medium with 4.54 µM of TDZ, propitiates, simultaneously, high regeneration percentage, great number of shoots formation and smaller callus intensity.

O objetivo deste trabalho foi obter um protocolo de regeneração de brotações in vitro a partir de explantes de pereira (Pyrus communis L.) cultivar Carrick, visando a programas de transformação genética. Para tanto, utilizaram-se três tipos de explantes (ápice caulinar, folha e entrenó) que permaneceram durante 0, 10, 20, 30 ou 40 dias em meio de indução e, posteriormente, foram transferidos para meio de proliferação com 8,9 ou 13,3µM de thidiazuron (TDZ). Aos 85 dias após o início do experimento, observou-se que o explante ápice caulinar apresentou maior capacidade de regeneração de brotações quando comparado ao explante entrenó, enquanto o explante folha não mostrou capacidade de regenerar brotações. Verificou-se também que, inoculando o explante diretamente em meio de proliferação sem auxina, houve uma maior percentagem de regeneração e que, aumentando o tempo de permanência dos explantes em meio de indução, diminuiu a percentagem de regeneração de brotações. A concentração de thidiazuron (TDZ) no meio de proliferação não afetou a capacidade de regeneração de brotações.The objective of this work was to obtain a shooting regeneration protocol from explants of pear tree (Pyrus communis L.) Carrick cultivar, aiming at genetic transformation programs. Three types of explants (caulinary tip, leaf and entrenode) were used. They were left for 0, 10, 20, 30 or 40 days in induction medium, and afterwards they were transferred to proliferation medium with 8.9 or 13.3µM of TDZ. At 85 days after the beginning of the experiment, it was noted that the caulinary tip explant showed higher capacity of shooting regeneration when compared to entrenode explants, while the leaf explant was not able to regenerate. It was also observed that inoculating the explant directly in proliferation medium without auxin resulted in a higher percentage of regeneration, and increasing the period of time that the explants remained in induction medium lowered the percentage of regeneration of shoots. The TDZ concentration in the proliferation medium did not affect the capacity of shooting regeneration.

Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen é uma das espécies de ginseng brasileiro usada popularmente como planta medicinal. Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito de doses (15, 30, 45 e 60 g.L-1) e fontes de carboidratos (sacarose, frutose, glicose, maltose e lactose) no crescimento dessas plantas cultivadas in vitro. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado com 15 repetições por tratamento. A parcela experimental consistiu de um tubo de ensaio contendo 10 mL de meio MS e um segmento nodal de 1,0 cm de comprimento e sem folhas. Os parâmetros avaliados aos 41 dias após a inoculação foram o número de brotações, o número total de segmentos nodais por plântula, a altura média das brotações, a altura da maior brotação, a massa fresca e seca da parte aérea e a massa seca das raízes. A melhor fonte de carbono para o crescimento in vitro da P. glomerata foi a sacarose, e a lactose é inapropriada. O número total de segmentos nodais, altura média das brotações, altura da maior brotação, massa fresca e seca da parte aérea e a massa seca de raízes aumentam pelo acréscimo das doses de sacarose, e em 30, 45 e 60 g.L-1 foram significativamente maiores do que aquelas proporcionadas pelas demais fontes de carbono.Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen is one of the brazilian ginseng species used as medicinal plant. The aim of this work was to evaluate the effect of carbohydrate concentration (15, 30, 45, and 60 g.L-1) and source (sucrose, fructose, glucose, maltose, and lactose) on the growth of plants grown in vitro. An entirely random statistical design with 15 replications per treatment was used. The experimental unity consisted of a test tube containing 10 mL of MS medium and 1-node segment of 1,0cm length and without leaves. After 41 days of the inoculation the growth parameters analyzed were sprout number, total number of nodal segment per seedling, average length of sprouts, length of the highest sprout, fresh and dry matter weight of aerial parts, and root dry matter weight. The best carbohydrate source for growth of P. glomerata in vitro cultured plants was sucrose, and lactose was found unsuitable. The total number of nodal segment per seedling, average length of sprouts, length of the highest sprout, fresh and dry matter weight of aerial parts, and root dry matter weight increase by sucrose concentrations, and at 30, 45 and 60 g.L-1 all parameters were significantly higher than those obtained by other carbon sources.

O presente trabalho avaliou o efeito de diferentes níveis de BAP (0; 2; 4; 6; 8 e 10miM) e de AIB (0; 0,5 e 1miM) na multiplicação in vitro da amoreira-preta cv. Tupy. O meio utilizado foi o MS suplementado com 100mg.-1 de mio-inositol, 30g.-1 de sacarose e 6g.-1 de ágar. Após a inoculação, as culturas foram mantidas em sala de cultura com 16 horas de fotoperíodo, temperatura de 25 ± 2ºC e radiação de 25µmoles.m-2.s-1. O número de gemas e o número de brotações foram avaliados com intervalo semanal, num total de quatro avaliações, e, na última avaliação, considerou-se a altura da brotação, bem como foi determinada a taxa de multiplicação. O maior número de gemas foi obtido com 2miM de BAP e, na ausência de AIB, enquanto o maior número de brotações foi atingido, até a terceira semana de cultivo, com 2 e 4miM de BAP. Para altura das brotações, tanto na ausência como no nível de 1miM de AIB, o aumento nas concentrações de BAP resultou na diminuição do comprimento das brotações linearmente. Observou-se, de modo geral, com o aumento dos níveis de BAP, para todas as doses de AIB, uma redução na altura das brotações. A concentração de 1miM de AIB associado com BAP influenciou negativamente a taxa de multiplicação, até a concentração de 5,9miM de BAP. Quando utilizado isoladamente, o BAP promoveu aumento na taxa de multiplicação até o nível de 5,1miM. O AIB a 0,5miM, em todos os níveis de BAP, não influenciou significativamente na taxa de multiplicação.

O trabalho objetivou determinar o melhor tipo de explante e a melhor época de coleta destes, visando ao estabelecimento de cultivo in vitro da pereira. No experimento I, gemas e meristemas de pereira das cultivares Carrick e Garber foram isoladas 28 dias após o início da brotação das plantas matrizes. No experimento II, meristemas das cultivares Carrick, Garber e Smith foram isolados aos 28, 35, 42, 49 e 56 dias após o início da brotação. O meio de cultura utilizado foi o MS, acrescido de BAP (4,44miM), ANA (0,054miM) e AG3 (0,29miM). Após a inoculação, os explantes foram submetidos ao escuro sob temperatura de 25 ± 2ºC por um período de 4 dias e, em seguida, transferidos para sala de crescimento com 16 horas de fotoperíodo com radiação de 25µmoes.m-2.s-1 e temperatura de 25 ± 2ºC. Os resultados permitiram concluir que, para o estabelecimento in vitro da cultivar Carrick, foi possível a utilização de gemas ou meristemas. Já para a cultivar Garber, o melhor explante foi o meristema; as épocas de isolamento dos meristemas mostraram comportamento linear para a percentagem de estabelecimento, obtendo-se 92,9% de estabelecimento nos meristemas isolados aos 56 dias após o início da brotação.

O objetivo deste trabalho foi determinar um possível tipo de luz mais ativo que a luz branca, de forma a aumentar a eficiência da multiplicação in vitro de framboeseira 'Batum', em relação ao número de brotos, de folhas e a taxa de multiplicação. Para isso, os tratamentos consistiram em cinco diferentes tipos de luz sob os quais os explantes cresceram (branca - testemunha, vermelha, amarela, azul e verde), fornecidas por meio da modificação do espectro luminoso das lâmpadas fluorescentes brancas-frias, utilizando filtros coloridos de acetato celulose, do tipo Lee Filters (Walworth Ind. Estate, Andover, England). O meio de cultura constituiu-se dos sais e vitaminas de MS, adicionado de mioinositol (100mgL-1), sacarose (30gL-1), ágar (6gL-1) e de BAP (4,44µM). A eficiência da multiplicação in vitro de framboeseira 'Batum', em relação às variáveis analisadas, aumentou com a utilização da luz verde. A luz vermelha também incrementou o número médio de brotos; no entanto, sua morfologia foi modificada, com uma menor expansão das folhas, os brotos finos e os entrenós alongados.The aim of this work was to determine a possible light type more active than the white light, in way to increase the efficiency of the in vitro multiplication of raspberry 'Batum', in relation to the shoots and leaves number, and the multiplication rate. For that, the treatments consisted of five different light types (white - control, red, yellow, blue and green), under which the explants grew, supplied through the modification of the luminous spectrum of the white-cold fluorescent lamps, using colored filters of acetate cellulose, Lee Filters type (Walworth Ind. Estate, Andover, England). The culture medium was constituted of MS salts and vitamins, added of myo-inositol (100mgL-1), sucrose (30gL-1), agar (6gL-1) and BAP (4.44µM). The efficiency of the in vitro multiplication of raspberry 'Batum', in relation to the analyzed variables, increased with the use of green light. The red light also increased the shoots mean number, however, its morphology was modified, with a smaller leaves expansion, thin shoots and prolonged internodes.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito do ácido naftalenoacético (ANA) e do carvão ativado no enraizamento in vitro de pereira (Pyrus comunis L.) cv. Carrick. Para tanto, microestacas de pereira com aproximadamente 0,8 a 1cm de comprimento foram utilizadas como explantes. Os tratamentos constituíram-se de três concentração de ANA no meio de cultura (0; 3,2 e 6,4mM) e de duas concentração de carvão ativado (0 e 1%). A partir dos resultados obtidos no experimento, conclui-se que o ANA nas concentrações de 3,2 e 6,4mM e na ausência de carvão ativado no meio de cultura, possibilitou um melhor enraizamento de pereira cv. Carrick.

Objetivou-se avaliar o efeito da orientação do explante, vertical ou horizontal, no meio de cultura, na multiplicação in vitro, do porta-enxerto de macieira cv. Marubakaido. O meio de cultura utilizado foi o MS com N (nitrogênio) reduzido a ¾ da concentração original, 100mg.L-1 de mio-inositol, 40g.L-1 de sacarose e 6g.L-1 de ágar, suplementado com 4,44mM de BAP (6-benzilaminopurina) e 0,2ml.L-1 de PPM TM ("Plant Preservative Mixture"). Segmentos caulinares com duas gemas e o ápice excisado foram utilizados como explantes. Após a inoculação, os frascos com os explantes foram incubados a 16 horas de fotoperíodo, à temperatura de 25±2ºC, com radiação de 25µmoles.m-2.s-1. O número de brotações, o número de gemas por explante, a taxa de multiplicação e a altura da brotação maior foram avaliados aos quarenta dias de cultivo. O maior número de brotações, o maior número de gemas e a maior taxa de multiplicação foram obtidos com o explante na orientação horizontal no meio de cultura. Não houve diferença significativa quanto à orientação vertical e horizontal do explante no meio de cultura para a altura da brotação maior.The aim of this study was evaluate the effect of the vertical and the horizontal orientation of the explant in the culture medium, in the in vitro multiplication, for the apple rootstock cv. Marubakaido. The culture medium used was the MS with N reduced to ¾ of the original concentration, myo-inositol (100mg.L-1), sucrose (40g.L-1) and agar (6g.L-1), suplemented with BAP (4.44mM) and PPM TM (0.2ml.L-1). Stem segments with two buds and the apex excised were used as explants. After the inoculation, the flasks with the explants were incubated at 16 hour of photoperiod, 25±2ºC temperature, with irradiation of 25µmoles.m-2.s-1. The number of shoots and buds, the rate of multiplication and the height of the larger shoot were evaluated after 40 days of cultivation. The highests shoot number, number of buds and the largest rate of multiplication were obtaineds with the explant in the horizontal orientation in the culture medium. There were not significant difference with vertical and horizontal orientation of the explant in the culture medium for the height of the larger shoot.

O trabalho objetivou comparar dois tipos de explantes (gema apical e gema axilar) do porta-enxerto de macieira 'EM-9' e o tempo de permanência destes explantes no meio de cultura de indução (20, 30 e 40 dias), na capacidade de regeneração in vitro de brotações. O meio de cultura de indução de regeneração constituiu-se dos sais de MS, suplementado com mio-inositol (100 mg.L-1), sacarose (30 g.L-1), ágar (6,0 g.L-1), BAP (4,44 µM) e ANA (0,54 µM). Transcorrido o tempo de permanência no meio de cultura de indução de regeneração, os explantes foram transferidos para meio de cultura de multiplicação, de constituição semelhante ao meio de indução, porém sem a presença de auxina. A partir dos resultados obtidos, concluiu-se que as gemas apicais e axilares do porta-enxerto de macieira 'EM-9', não diferem quanto à capacidade de regeneração in vitro de brotações e, o tempo de permanência das gemas no meio de indução de regeneração, apenas mostrou diferenças para o comprimento médio das brotações, obtendo-se o maior valor com 30 dias.