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A Uncaria tomentosa (Unha-de-Gato) é usada amplamente pela população brasileira por ser de fácil aquisição, logo, a compreensão dos seus efeitos toxicológicos contribui para evitar ação nociva ocasionada por seus constituintes. A toxicidade dessas substâncias pode ser analisada por vários métodos que utilizam modelos in vitro, in vivo, ex vivo e in silico. Nesse contexto, buscou-se avaliar a toxicidade da Uncaria tomentosa. O presente estudo tratou-se de uma pesquisa do tipo revisão integrativa da literatura, na qual foram selecionados artigos nas bases de dados PubMed/Medline, LILACS, Science Direct e SciELO, durante o período de agosto de 2002 a agosto de 2022. Os resultados apontam que Uncaria tomentosa não é genotóxica, mas é citotóxica, tanto nas análises realizadas com seus extratos aquosos e hidroetanólico (água e etanol), quanto suas substâncias obtidas a partir do isolamento dos extratos como alcalóides e glicosídeos, avaliados em diversos modelos de estudo como células humanas não neoplásicas e neoplásicas, Drosophila melanogaster, células de ratos Wistar, células de camundongos e zebrafish (Danio rerio). Além de sua possível ação antimutagênica e antigenotóxica, apresentando atividade de proteção a danos ao DNA possivelmente relacionada com suas substâncias como alcalóides e glicosídeos presentes nos extratos que podem desempenhar papel antioxidante de maneira isolada ou com efeito sinérgico, combatendo os radicais livres. Portanto, Uncaria tomentosa apresenta um uso seguro quanto sua toxicidade. Uncaria tomentosa (Cat's Claw) is widely used by the Brazilian population because it is easy to acquire, so understanding its toxicological effects helps to avoid harmful action caused by its constituents. The toxicity of these substances can be analyzed by several methods that use in vitro, in vivo, ex vivo and in silico models. In this context, we sought to evaluate the toxicity of Uncaria tomentosa. The present study was an integrative literature review, in which articles were selected from the PubMed/Medline, LILACS, Science Direct and SciELO databases, during the period from August 2002 to August 2022. The results point out that Uncaria tomentosa is not genotoxic, but is cytotoxic, both in the analyzes carried out with its aqueous and hydroethanolic extracts (water and ethanol), and its substances obtained from the isolation of extracts such as alkaloids and glycosides, evaluated in several study models such as non-neoplastic and neoplastic human cells, Drosophila melanogaster, cells from Wistar rats, cells from mice and zebrafish (Danio rerio). In addition to its possible antimutagenic and antigenotoxic action, it has a protective activity against DNA damage possibly related to its substances such as alkaloids and glycosides present in the extracts that can play an antioxidant role in isolation or with a synergistic effect, fighting free radicals. Therefore, Uncaria tomentosa presents a safe use regarding its toxicity. La Uncaria tomentosa (Uña de Gato) es ampliamente utilizada por la población brasileña porque es fácil de adquirir, por lo que conocer sus efectos toxicológicos ayuda a evitar la acción nociva causada por sus componentes. La toxicidad de estas sustancias puede analizarse por varios métodos que utilizan modelos in vitro, in vivo, ex vivo e in silico. En este contexto, buscamos evaluar la toxicidad de Uncaria tomentosa. El presente estudio fue una revisión integrativa de la literatura, en la que se seleccionaron artículos de las bases de datos PubMed/Medline, LILACS, Science Direct y SciELO, durante el período de agosto de 2002 a agosto de 2022. Los resultados apuntan que la Uncaria tomentosa no es genotóxica, pero es citotóxico, tanto en los análisis realizados con sus extractos acuosos e hidroetanólicos (agua y etanol), como sus sustancias obtenidas del aislamiento de extractos como alcaloides y glucósidos, evaluados en varios modelos de estudio como humanos no neoplásicos y neoplásicos células de Drosophila melanogaster, células de rata Wistar, células de ratón y pez cebra (Danio rerio). Además de su posible acción antimutagénica y antigenotóxica, tiene una actividad protectora frente al daño del ADN posiblemente relacionado con sus sustancias como los alcaloides y glucósidos presentes en los extractos que pueden desempeñar un papel antioxidante de forma aislada o con efecto sinérgico, combatiendo los radicales libres. Por lo tanto, Uncaria tomentosa presenta un uso seguro en cuanto a su toxicidad.

As nanopartículas de óxido de ferro (IONPs) representam uma classe de nanomateriais magnéticos e biocompatíveis que têm sido amplamente utilizados em pesquisas e aplicações médicas, como estudos de hipertermia, como agentes de contraste para ressonância magnética, biossensores, entre outros. Entretanto, sua aplicação depende de fatores como, morfologia, tamanho e propriedade de superfície estejam ajustados. As IONPs podem ser obtidas por diferentes métodos de síntese, no entanto, a coprecipitação química representa uma rota de síntese mais simples, fácil e rápida, na qual soluções aquosas de precursores contendo íons ferro (Fe3+) e ferroso (Fe2+) são alcalinizadas sob controle de temperatura e pH. Este estudo propõe sintetizar nanopartículas de óxido de ferro pelo método de coprecipitação química e estabilizá-las com citrato de sódio (IONPs-CIT) e hidróxido de tetrametilamônio (IONPs-TMAOH). Além disso, caracterizar o diâmetro hidrodinâmico e o Potencial Zeta das amostras por espalhamento dinâmico da luz. A citotoxicidade das IONPs-CIT na linhagem celular MDA-MB-468 foi avaliada através da análise da atividade mitocondrial. Iron oxide nanoparticles (IONPs) represents a class of magnetic and biocompatible nanomaterials that have been widely used in research and medical applications, such as hyperthermia studies, as contrast agents for magnetic resonance imaging, biosensors, among others. However, their application depends on factors as surface properties, size, and morphology being appropriately balanced. IONPs can be obtained by different synthesis methods, however, chemical coprecipitation represents a simpler, easier and faster route, in which aqueous solutions of precursors containing iron (Fe3+) and ferrous (Fe2+) ions are alkalized under control of temperature and pH. This study proposes to synthesize iron oxide nanoparticles by the chemical coprecipitation method and to stabilize them with sodium citrate (IONPs-CIT) and tetramethylammonium hydroxide (IONPs-TMAOH). Furthermore, to characterize the hydrodynamic diameter and the Zeta Potential of the samples by Dynamic Light Scattering. The cytotoxicity of IONPs- CIT in the MDA-MB-468 cell line was evaluated through the analysis of mitochondrial activity. Las nanopartículas de óxido de hierro (IONPs) representan una clase de nanomateriales magnéticos y biocompatibles que han sido ampliamente utilizados en investigación y aplicaciones médicas, tales como estudios de hipertermia, agentes de contraste para resonancia magnética, biosensores, entre otros. Sin embargo, su aplicación depende de un balance apropiado en factores como la morfología, el tamaño y las propiedades superficiales. Los IONP se pueden obtener por diferentes métodos de síntesis, sin embargo, la coprecipitación química representa una ruta más simple, fácil y rápida, en la cual se alcalinizan soluciones acuosas de precursores que contienen iones de hierro (Fe3+) y ferroso (Fe2+) bajo control de la temperatura y el pH. Este estudio propone sintetizar nanopartículas de óxido de hierro por el método de coprecipitación química y estabilizarlas con citrato de sodio (IONPs-CIT) e hidróxido de tetrametilamonio (IONPs-TMAOH). Además, caracterizar el diámetro hidrodinámico y el Potencial Zeta de las síntesis de Dispersión Dinámica de Luz. La citotoxicidad de IONPs-CIT en la línea celular MDA-MB-468 se evaluó mediante el análisis de la actividad mitocondrial.

The aim of the present study was to evaluate the cytotoxic potential of a new complex of silver(I) with furosemide (Ag-FSE) over a panel of tumor and non-tumor human cells, as well as its genotoxicological safety. According to the results obtained, cell line derived from colorectal adenocarcinoma (Caco-2) was the most sensitive to the Ag-FSE complex, and among the non-tumor cells was the non-transforming fibroblasts known as GM07492A, which stimulated the characterization of cytotoxic properties against these cells. In addition to interfering with the cellular metabolic profile (evidenced by the resazurin method), Ag-FSE alters the integrity of cell membranes (results obtained by the Trypan blue assay) regardless of the cell line evaluated. However, interference with clonogenic capacity is dependent on the cell being tested; the cytotoxic activity evaluated by the clonogenic survival assay was evidenced against Caco-2 cells, but not against GM07492A cells. Furthermore, Ag-FSE did not induce an increase in the extent of DNA damage detectable by the comet assay, nor in the frequency of micronuclei compared to the negative control, demonstrating the absence of genotoxicity under the experimental conditions used. The data of the present study provide information on various biological aspects of the Ag-FSE complex and help in the generation of new drug candidates with potential to impact the health area, targeting cancer treatment. El objetivo del presente estudio fue evaluar el potencial citotóxico de un nuevo complejo de plata(I) con furosemida (Ag-FSE) en un panel de células tumorales y no tumorales humanas, así como su seguridad genotoxicológica. De acuerdo con los resultados obtenidos, la línea celular derivada del adenocarcinoma colorrectal (Caco-2) fue la más sensible al complejo Ag-FSE, y entre las células no tumorales se encontraban los fibroblastos no transformantes conocidos como GM07492A, lo que estimuló la caracterización. de las propiedades citotóxicas contra estas células. Además de interferir con el perfil metabólico celular (evidenciado por el método de resazurina), Ag-FSE altera la integridad de las membranas celulares (resultados obtenidos por el ensayo de azul de tripano) independientemente del linaje celular evaluado. Sin embargo, la interferencia con la capacidad clonogénica depende de la célula que se esté analizando; la actividad citotóxica evaluada por el ensayo de supervivencia clonogénica se evidenció frente a las células Caco-2, pero no frente a las células GM07492A. Además, Ag-FSE no indujo un aumento en la extensión del daño del ADN detectable por el ensayo Comet, ni en la frecuencia de micronúcleos en relación con el control negativo, lo que demuestra la ausencia de genotoxicidad en las condiciones experimentales utilizadas. Los datos del presente estudio brindan información sobre varios aspectos biológicos del complejo Ag-FSE y ayudan en la generación de nuevos candidatos a fármacos con potencial impacto en el área de la salud, con miras al tratamiento del cáncer. O objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial citotóxico de um novo complexo de prata(I) com furosemida (Ag-FSE) sobre um painel de células humanas tumorais e não tumorais, bem como sua segurança genotoxicológica. De acordo com os resultados obtidos, a linhagem celular derivada do adenocarcinoma colorretal (Caco-2) foi a mais sensível ao complexo Ag-FSE, e dentre as células não tumorais foram fibroblastos não transformantes conhecidos como GM07492A, o que estimulou a caracterização das propriedades citotóxicas contra essas células. Além de interferir no perfil metabólico celular (evidenciado pelo método da resazurina), Ag-FSE altera a integridade das membranas celulares (resultados obtidos pelo ensaio do azul de Trypan) independentemente da linhagem celular avaliada. No entanto, a interferência na capacidade clonogênica depende da célula que está sendo testada; a atividade citotóxica avaliada pelo ensaio de sobrevivência clonogênica foi evidenciada contra células Caco-2, mas não contra células GM07492A. Além disso, Ag-FSE não induziu aumento na extensão do dano ao DNA detectável pelo ensaio Cometa, nem na frequência de micronúcleos em relação ao controle negativo, demonstrando ausência de genotoxicidade nas condições experimentais utilizadas. Os dados do presente estudo fornecem informações sobre diversos aspectos biológicos do complexo Ag-FSE e auxiliam na geração de novos candidatos a fármacos com potencial de impacto na área da saúde, visando o tratamento do câncer.

Objective: To evaluate the cytotoxic effects of carbamide peroxide (CP) and hydrogen peroxide (HP) bleaching agents, and their manifestations on teeth. Methods: A literature review was performed on the Pubmed database, using the following descriptors: tooth whitening, cytotoxicity, hydrogen peroxide, carbamide peroxide and pulpal reaction. 29 articles were selected. Review: The most commonly used tooth whitening gels are CP and HP, which achieve the same results at different application times. The inappropriate use of bleaching agents may cause adverse effects, such as cytotoxicity in the pulp tissue, causing from an inflammatory reaction to pulp necrosis, where dental sensitivity was the most common manifestation. HP in higher concentrations is indicated for office techniques, and implies a greater possibility of cytotoxic effect on the pulp tissue, especially if associated with the use of light source, and should also consider the thickness of the dentin in the dental element. Conclusion: Among the different bleaching agents, the use of CP (10%) in home bleaching will result in less cytotoxic effects on teeth, with effective bleaching action, and HP (17.5%) in office bleaching is less cytotoxic when compared to the conventional HP method (35%). Objetivo: evaluar los efectos citotóxicos de los agentes blanqueadores peróxido de carbamida (PC) y peróxido de hidrógeno (HP), y sus manifestaciones en los dientes. Métodos: Se realizó una revisión bibliográfica en la base de datos Pubmed, utilizando como descriptores: blanqueamiento dental, citotoxicidad, peróxido de hidrógeno, peróxido de carbamida y reacción pulpar, y se seleccionaron 29 artículos. Revisión: Los geles blanqueadores dentales más utilizados son el PC y el PH, que consiguen los mismos resultados en diferentes tiempos de aplicación. El uso inadecuado de agentes blanqueadores puede causar efectos adversos, como citotoxicidad en el tejido pulpar, causando desde una reacción inflamatoria hasta necrosis pulpar, donde la sensibilidad dental fue la manifestación más común. El PH en concentraciones más altas está indicado para técnicas de consultorio, e implica una mayor posibilidad de efecto citotóxico sobre el tejido pulpar, especialmente si se asocia con el uso de la fuente de luz, y también debe considerar el espesor de la dentina en el elemento dental. Conclusión: Entre los diferentes agentes blanqueadores, el uso de PC (10%) en el blanqueo domiciliario tendrá menos efectos citotóxicos en los dientes, con una acción blanqueadora eficaz, y el PH (17,5%) en el blanqueo en la consulta es menos citotóxico en comparación con el método convencional PH (35%). Objetivo: avaliar os efeitos citotóxicos dos agentes clareadores Peróxido de carbamida (PC) e peróxido de hidrogênio (PH), e suas manifestações nos dentes. Métodos: Foi feita uma revisão de literatura na base de dados Pubmed, utilizando como descritores: clareamento dental, citotoxicidade, peróxido de hidrogênio, peróxido de carbamida e reação pulpar, sendo selecionados 29 artigos. Revisão: Os géis clareadores mais utilizados para o clareamento dental são o PC e o PH, que alcançam os mesmos resultados em diferentes tempos de aplicação. O uso inadequado dos agentes clareadores pode ocasionar efeitos adversos, como citotoxicidade no tecido pulpar, ocasionando desde uma reação inflamatória até uma necrose pulpar, onde a sensibilidade dental foi a manifestação mais encontrada. O PH em concentrações mais elevadas é indicado para técnicas de consultório, e implica maior possibilidade de efeito citotóxico ao tecido pulpar, principalmente se for associado a uso de fonte de luz, devendo também se considerar a espessura da dentina no elemento dental. Conclusão: Entre os diferentes agentes clareadores, o uso do PC (10%) em clareamento caseiro, resultará em menos efeitos citotóxicos nos dentes, com eficaz ação clareadora, e o PH (17,5%) em clareamento de consultório é menos citotóxico quando comparado ao método convencional PH (35%).

Objective: To analyze the scientific literature that deals with the possible cytotoxicity developed by the use of ivermectin in patients with COVID-19: an integrative review. Methods: This is an integrative literature review, designed as an observational, cross-sectional and qualitative study, data collection was carried out from recent literary and scientific sources, from the year 2020 to the year 2022. Results: Ivermectin is metabolized in the liver, has a half-life four times longer than other drugs, and has great hepatoxic potential. Scientific evidence for its use was based on in vitro research, which shows insufficient results to determine its safety and efficacy. It was found that 05 days of treatment with ivermectin was a safe time to show effective results, with a dose of 0.4 - 0.6mg/kg per day. The interactions of ante - COVID 19 drug candidates with hepatic transporters were identified, these drugs have multiple inhibitory effects on hepatic membrane transporters and can cause toxicity and affect pharmacokinetics. Conclusion: The imprecision of data on the therapeutic use of ivermectiva is evidenced, together with low quality information for clinical guidance, with regard to use, dosage and duration of treatment. As for the possible cytotoxic effect of Ivermectin in patients with covid-19, there were no clinical studies to show such a result, however, its use is contraindicated due to the scarcity of data. Therefore, further randomized clinical trials are needed to determine the level of toxicity of ivermectin in the treatment of SARS-CoV-2. Objetivo: Analizar la literatura científica que trata sobre la posible citotoxicidad desarrollada por el uso de ivermectina en pacientes con COVID-19: una revisión integradora. Métodos: Se trata de una revisión integrativa de la literatura, diseñada como un estudio observacional, transversal y cualitativo, la recolección de datos se realizó de fuentes literarias y científicas recientes, desde el año 2020 hasta el año 2022. Resultados: La ivermectina se metaboliza en el hígado, tiene una vida media cuatro veces más larga que otras drogas, y tiene un gran potencial hepatotóxico. La evidencia científica para su uso se basó en investigaciones in vitro, que muestran resultados insuficientes para determinar su seguridad y eficacia. Se encontró que 05 días de tratamiento con ivermectina fue un tiempo seguro para mostrar resultados efectivos, con una dosis de 0,4 - 0,6 mg/kg por día. Se identificaron las interacciones de los candidatos a fármacos antI-COVID 19 con los transportadores hepáticos, estos fármacos tienen múltiples efectos inhibitorios sobre los transportadores de la membrana hepática y pueden causar toxicidad y afectar la farmacocinética. Conclusión: Se evidencia la imprecisión de los datos sobre el uso terapéutico de la ivermectiva, junto con información de baja calidad para la orientación clínica, en cuanto a uso, dosis y duración del tratamiento. En cuanto al posible efecto citotóxico de la Ivermectina en pacientes con COVID-19, no existen estudios clínicos que demuestren tal resultado, sin embargo, su uso está contraindicado por la escasez de datos. Por lo tanto, se necesitan más ensayos clínicos aleatorios para determinar el nivel de toxicidad de la ivermectina en el tratamiento del SARS-CoV-2. Objetivo: Analisar a literatura científica que trata da possível citotoxicidade desenvolvida pelo uso de ivermectina em pacientes com COVID-19: uma revisão integrativa. Métodos: Trata-se de uma revisão integrativa de literatura, delineado como um estudo observacional, transversal e qualitativo, realizou-se a coleta de dados a partir de fontes literárias e cientificas recentes, do ano de 2020 até o ano de 2022. Resultados: A metabolização da ivermectina ocorre no fígado, apresenta uma meia vida média de quatro vezes maior do que outros fármacos, grande potencial hepatóxico. As comprovações cientificas para sua utilização, se deram com base em pesquisa in vitro, o que apresenta resultados insuficientes para determinar sua segurança e eficácia. Constatou-se que 05 dias de tratamento com ivermectina, era um tempo seguro para apresentar resultados eficazes, com uma dose de 0,4 - 0,6mg/kg por dia. Identificou-se as interações de candidatos a medicamentos ante – COVID 19 com transportadores hepáticos, esses fármacos, têm múltiplos efeitos inibitórios nos transportadores de membrana hepática e podem causar toxicidade e afetar a farmacocinética. Conclusão: Evidencia-se a imprecisão de dados sobre o uso terapêutico da ivermectiva, juntamente a informações de baixa qualidade para orientação clínica, no que diz respeito ao uso, dosagem e duração do tratamento. Quanto ao possível efeito citotóxico da Ivermectina em pacientes com covid-19, não teve estudos clínicos para evidenciar tal resultado, porém, o seu uso é contraindicado devido à escassez de dados. Portanto, a realização de mais ensaios clínicos randomizados são necessários para determinar o nível de toxicidade da ivermectina no tratamento da SARS-CoV-2.

Copaiba oil extracted from the trunk of Copaifera langsdorffii Desf. and flaxseed oil extracted from the seeds of Linum usitatissimum L., are widely used for the prevention and treatment of many diseases, including cancer. The aim of this study was to assess the antimutagenic effect of these oils against the damage-inducing agent cyclophosphamide, in Rattus norvegicus treated in vivo, by gavage, using cytotoxicity and chromosomal alteration test. The animals were submitted to a single dose of copaiba oil and of flaxseed oil in the simultaneous treatment, pre-treatment and pos-treatment for 24 hours. None of these treatments presented cytotoxic effect. Treatments both oils and cyclophosphamide have significantly reduced the chromosomal damage caused by the clastogen. In groups treated with copaiba oil the reduction percentage was 77% for the simultaneous treatment, 83% for the pre-treatment and 75% for the pos-treatment, whereas in those treated with flaxseed oil was 94% for the pre-treatment and 96% for the simultaneous and pos-treatment. These results indicate that the both oils are not mutagenic, in contrast, they present antimutagenic activity against this clastogenic agent, which represents a protective effect on the cells against the drug that has damaged the genetic material. Aceite de copaiba extraído del tronco de Copaifera langsdorffii Desf. y el aceite de linaza extraído de las semillas de Linum usitatissimum L., son ampliamente utilizados para la prevención y tratamiento de diversas enfermedades, entre ellas el cáncer. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto antimutagénico de estos aceites contra el agente inductor de daño ciclofosfamida, en Rattus norvegicus tratados in vivo por sonda, mediante ensayos de citotoxicidad y alteración cromosómica. Los animales fueron sometidos a una dosis única de aceite de copaiba y aceite de linaza en el tratamiento simultáneo, pretratamiento y postratamiento durante 24 horas. Ninguno de estos tratamientos mostró un efecto citotóxico. Los tratamientos con aceites asociados a ciclofosfamida redujeron significativamente el daño cromosómico causado por el clastógeno. En los grupos tratados con aceite de copaiba, el porcentaje de reducción fue del 77% para el tratamiento simultáneo, del 83% para el pretratamiento y del 75% para el postratamiento, mientras que en los tratados con aceite de linaza fue del 94% para el pretratamiento y 96% para tratamiento simultáneo y post-tratamiento. Estos resultados indican que ambos aceites no son mutagénicos, por el contrario, tienen actividad antimutagénica frente a este agente clastogénico, lo que representa un efecto protector de las células frente al fármaco que dañó el material genético. O óleo de copaíba extraído do tronco de Copaifera langsdorffii Desf. e o óleo de linhaça extraído das sementes de Linum usitatissimum L., são amplamente utilizados para a prevenção e tratamento de diversas doenças, incluindo o câncer. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antimutagênico desses óleos contra o agente indutor de danos ciclofosfamida, em Rattus norvegicus tratado in vivo, por gavagem, por meio dos ensaios de citotoxicidade e de alteração cromossômica. Os animais foram submetidos a uma única dose de óleo de copaíba e de óleo de linhaça no tratamento simultâneo, pré-tratamento e pós-tratamento por 24 horas. Nenhum desses tratamentos apresentou efeito citotóxico. Os tratamentos com óleos associados com a ciclofosfamida reduziram significativamente os danos cromossômicos causados pelo clastógeno. Nos grupos tratados com óleo de copaíba o percentual de redução foi de 77% para o tratamento simultâneo, 83% para o pré-tratamento e 75% para o pós-tratamento, enquanto nos tratados com óleo de linhaça foi de 94% para o pré-tratamento e 96 % para o tratamento simultâneo e pós-tratamento. Esses resultados sugerem que ambos os óleos não são mutagênicos, ao contrário, apresentam atividade antimutagênica contra este agente clastogênico, o que representa um efeito protetor sobre as células frente o fármaco que danificou o material genético.

Fungal infections have become frequently in recent years. Dermatophytosis, sporotrichosis and candidiasis stand out. Due to the resistance to available drugs and with a view to diversifying the pharmaceutical field, the study was carried out using the bagasse of O. europaea. Studies related to olive trees do not address bagasse, which represents a potential economic alternative to its discarded tons by the industry. The objective of this work was to evaluate the in vitro sensitivity profile of fungal isolates against aqueous extracts of O. europeae bagasse. To test the cellular toxicity of the extracts and to determine the presence and amount of the main phenolic compounds. No antifungal activity of these aqueous extracts was observed against the isolates of dermatophytes and Sporothrix brasiliensis. The Candida spp. tested for in vitro susceptibility, two were sensitive to bagasse decoction extract from a concentration of 50mg/ml of DEC 10'. In the toxicity of the olive pomace decoction, concentrations from 12.5 mg/ml allowed at least 50% of the MDBK cells to remain viable. Concentrations from 3.13 to 0.78 mg/ml were safe, as 100% cell viability occurred. Of the hydroxytyrosol (HPLC) compounds, the concentration varied from 8 x10-4 to 34 x10-4 mg/ml in INF 10' and from 11 x10-4 to 81 x10-4 mg/ml in DEC 10'. For oleuropein, the DEC 10' extracts varied their concentration from 87 x10-3 to 7 x10-3 mg/ml, while for INF 10' the values ​​were from 23 x10-3 mg/ml to not detected in some varieties. Las infecciones fúngicas se han vuelto cada vez más frecuentes en los últimos años. Destacan las dermatofitosis, esporotricosis y candidiasis. Debido a la resistencia a los fármacos disponibles y con el fin de diversificar el campo farmacéutico, el estudio se realizó utilizando bagazo de O. europaea. Los estudios relacionados con el olivo no abordan el bagazo, que representa una potencial alternativa económica por sus toneladas descartadas por la industria. El objetivo de este trabajo fue evaluar el perfil de sensibilidad in vitro de aislados fúngicos frente a extractos acuosos de bagazo de O. Europeae. Testar la toxicidad celular de los extractos utilizados y determinar la presencia y cantidad de los principales compuestos fenólicos. No se observó actividad antifúngica de estos extractos acuosos frente a los aislados de dermatofitos y Sporothrix brasiliensis. De la Candida spp. probados para susceptibilidad in vitro, dos fueron sensibles al extracto de decocción de bagazo a partir de una concentración de 50 mg/ml de DEC 10'. En la toxicidad de la decocción de orujo de oliva, concentraciones a partir de 12,5 mg/ml permitieron que al menos el 50% de las células MDBK permanecieran viables. Las concentraciones de 3,13 a 0,78 mg/ml fueron seguras, ya que se produjo una viabilidad celular del 100%. De los compuestos de hidroxitirosol (HPLC), la concentración varió de 8 x10-4 a 34 x10-4 mg/ml en INF 10' y de 11 x10-4 a 81 x10-4 mg/ml en DEC 10'. Para la oleuropeína, los extractos de DEC 10' variaron su concentración de 87 x10-3 a 7 x10-3 mg/ml, mientras que para INF 10' los valores fueron de 23 x10-3 mg/ml hasta no detectarse en algunas variedades. As infecções fúngicas tem se tornado cada vez mais frequentes nos últimos anos. Destacam-se as dermatofitoses, esporotricoses e candidoses. Em função da resistência aos fármacos disponíveis e tendo em vista diversificar o âmbito farmacêutico, realizou-se o estudo a partir do bagaço de O. europaea. Estudos relacionados à oliveira não abordam o bagaço que representa potencial alternativa econômica devido a suas toneladas descartadas pela indústria. Objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil sensibilidade in vitro de isolados fúngicos frente extratos aquosos de bagaço de O. europeae. Testar toxicidade celular dos extratos utilizados e determinar presença e quantidade dos compostos fenólicos (oleuropeína e hidroxitirosol). Não foi observado atividade antifúngica desses extratos aquosos diante dos isolados de dermatófitos e Sporothrix brasiliensis. Dos isolados de Candida spp. testados para susceptibilidade, dois foram sensíveis ao extrato de decocção do bagaço a partir da concentração 50 mg/ml de DEC 10’. Na toxicidade da decocção do bagaço de oliveira, observou-se concentrações a partir de 12,5 mg/ml permitiram que pelo menos 50% das células MDBK se mantivessem viáveis. As concentrações de 3,13 até 0,78 mg/ml foram seguras, pois ocorreu 100% de viabilidade celular. Dos compostos (CLAE) hidroxitirosol variou a concentração de 8 x10-4 a 34 x10-4 mg/ml em INF 10’ e de 11 x10-4 a 81 x10-4 mg/ml em DEC 10’. Para oleuropeína, os extratos DEC 10’ variaram sua concentração de 87 x10-3 a 7 x10-3 mg/ml, já para INF 10’ os valores foram de 23 x10-3 mg/ml a não detectado em algumas variedades.

This integrative review aims to present botanical, phytochemical and cytotoxic information about plant species commonly used. As a strategy to search for articles, the databases of Latin American and Caribbean Literature in Health Sciences (LILACS), Scientific Electronic Library Online (SCIELO), Science Direct, and Google Scholar were used. selected works in Portuguese, English and Spanish. After reading the abstract, studies that met the requirements of the topic addressed were included. Works that, after reading in full, did not directly address the proposed theme were excluded. Records of the use of medicinal plants dating back to 1500 BC were observed. Associated with this, the "Green Pharmacopoeia", from 1926, was the first official Brazilian document with botanical descriptions of some medicinal plants. Concerning the families Moraceae, Asteraceae, Theaceae, Malvaceae, Junglandaceae, Celastraceae and Illiciaceae, the most abundant worldwide was the Asteraceae with about 1,600 genera and 23,000 species, while Theaceae, with about 10 genera and 195 species, was the least found . It was observed that the cytotoxicity assays, in vitro, both by direct and indirect methods, are configured as a tool to assess the toxicity of medicinal plants and some biological activities. In this context, in vitro cytotoxicity assays are a preliminary tool to assess the toxicity and biological activity of a medicinal plant. Esta revisión integradora tiene como objetivo presentar información botánica, fitoquímica y citotóxica sobre las especies de plantas de uso común. Como estrategia de búsqueda de artículos se utilizaron las bases de datos de Literatura Latinoamericana y Caribeña en Ciencias de la Salud (LILACS), Scientific Electronic Library Online (SCIELO), Science Direct y Google Scholar, trabajos seleccionados en portugués, inglés y español. Luego de la lectura del resumen, se incluyeron los estudios que cumplieron con los requisitos del tema abordado. Se excluyeron los trabajos que, después de leerlos íntegramente, no abordaran directamente el tema propuesto. Se observaron registros de uso de plantas medicinales que datan del 1500 aC Asociado a esto, la "Farmacopea Verde", de 1926, fue el primer documento oficial brasileño con descripciones botánicas de algunas plantas medicinales. En cuanto a las familias Moraceae, Asteraceae, Theaceae, Malvaceae, Junglandaceae, Celastraceae e Illiciaceae, la más abundante a nivel mundial fue la Asteraceae con cerca de 1.600 géneros y 23.000 especies, mientras que Theaceae, con cerca de 10 géneros y 195 especies, fue la menos encontrada. Se observó que los ensayos de citotoxicidad, in vitro, tanto por métodos directos como indirectos, se configuran como una herramienta para evaluar la toxicidad de plantas medicinales y algunas actividades biológicas. En este contexto, los ensayos de citotoxicidad in vitro son una herramienta preliminar para evaluar la toxicidad y la actividad biológica de una planta medicinal. A presente revisão integrativa tem por objetivo apresentar informações botânicas, fitoquímicas e citotóxicas sobre espécies vegetais usadas popularmente. Como estratégia para busca de artigos, utilizaram-se as bases de dados de Literatura Latino-americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS), a Scientific Electronic Library Online (SCIELO), a Science Direct, e o Google Scholar, e, foram selecionados trabalhos nos idiomas português, inglês e espanhol. Após a leitura do resumo, foram incluídos estudos que atendiam aos requisitos do tema abordado. Foram excluídos os trabalhos que, após leitura na íntegra não abordaram diretamente a temática proposta. Observaram-se registros do uso de plantas medicinais datados desde 1500 A.C, associado a isso, a "Farmacopeia Verde", de 1926, foi o primeiro documento oficial brasileiro com descrições botânicas de algumas plantas medicinais. Referente às famílias Moraceae, Asteraceae, Theaceae, Malvaceae, Junglandaceae, Celastraceae e Illiciaceae, a mais abundante mundialmente foi a Asteraceae com cerca de 1.600 gêneros e 23.000 espécies, enquanto a Theaceae, com cerca de 10 gêneros e 195 espécies, foi a menos encontrada. Observou-se que os ensaios de citotoxicidade, in vitro, tanto por métodos direto quanto indiretos, configuram-se como uma ferramenta para avaliar toxicidade das plantas medicinais e algumas atividades biológicas. Nesse contexto, os ensaios de citotoxicidade in vitro é uma ferramenta preliminar para avaliar a toxicidade e atividade biológica de uma planta medicinal.

Halophytes are salt-tolerant plants, enriched in metabolic compounds with several industrial applications. Batis maritima is a halophyte with occurrence in tropical and subtropical zones and the present work aimed to investigate B. maritima leaves extract for biotechnology and bioprospecting approaches. The present study evaluated the phytochemical profile, the role of acetylcholinesterase, and protective activities from B. maritima. The phytochemical screening highlighted the presence of phenolic compounds, anthracenes, and saponins. The metal content analysis revealed sodium (Na) as the most abundant salt (1 g/kg), followed by Al (0.35 g/kg), and several other elements in lower concentrations. Further, DPPH and TAC methodologies showed an significant antioxidant activity (IC50 5.17 ± 0.05 μg/mL and 0.45 ± 0.08 mg.AAEm, respectively). A metal chelating activity was also observed, with IC50 25.76 ± 0.3 μg/mL. Additionally, B. maritima aqueous extract disclosed an anticholinesterase inhibitory effect in a dose-dependent manner (IC50 = 0.0023 mg/mL). Haemolysis assay did not reveal any toxic effects. On the other hand, the cytotoxicity assay, using murine fibroblasts cells (NIH-3T3), showed a decrease in cell viability at high concentrations. Los halófitos son plantas tolerantes a la sal, enriquecidas en compuestos metabólicos con varias aplicaciones industriales. Batis maritima es un halófito con presencia en zonas tropicales y subtropicales y el presente trabajo tuvo como objetivo investigar el extracto de hojas de B. maritima para enfoques de biotecnología y bioprospección. El presente estudio evaluó el perfil fitoquímico, el papel frente a la acetilcolinesterasa y las actividades protectoras de B. maritima. El cribado fitoquímico destacó la presencia de compuestos fenólicos, antracenos y saponinas. El análisis del contenido de metales reveló que el sodio (Na) es la sal más abundante (1 g/kg), seguida del Al (0,35 g/kg) y varios otros elementos en menor concentración. Además, las metodologías DPPH y TAC mostraron una actividad antioxidante significativa (IC50 5.17 ± 0.05 μg/mL y 0.45 ± 0.08 mg.AAEm, respectivamente). También se observó una actividad quelante de metales, con IC50 = 25,760 ± 0,3 μg / mL. Además, el extracto acuoso de B. maritima reveló un efecto anticolinesterasa de una manera dependiente de la dosis (IC50 = 0,0023 mg / ml). El ensayo de hemólisis no reveló ningún efecto tóxico. Por otro lado, el ensayo de citotoxicidad, utilizando células de fibroblastos murinos (NIH-3T3), mostró una disminución de la viabilidad celular. Halófitas são plantas tolerantes a salinidade, ricas em metabolitos com aplicação em diversas indústrias. Batis maritima é uma halófita com ocorrência em zonas tropicais e subtropicais, o presente trabalho objetivou investigar o extrato das folhas de B. maritima em uma abordagem de bioprospecção e biotecnológica. O presente estudo avaliou o perfil fitoquímico, o potencial efeito sobre a enzima acetilcolinesterase, além de propriedades protetivas de B. maritima. A análise fitoquímica evidenciou a presença de compostos fenólicos, antracenos e saponinas. O conteúdo de metal revelou o Sódio (Na) como o sal mais abundante (1g/Kg), seguido pelo alumínio (Al;0,35 g/Kg), e diversos outros elementos em concentrações menores. As metodologias de DPPH e Capacidade Antioxidante Total indicou efeito antioxidante significativo (IC50 5,17 ± 0,05 μg/mL e 0,45 ± 0,08 mg.AAEm, respectivamente). A atividade quelante de metal também foi observada, com um IC50­ de 25,76 ± 0,3 μg/mL. Além disso, o extrato aquoso de B. maritima apresentou efeito inibitório sobre a acetilcolinesterase de forma dose-dependente com IC50 de 0,0023 mg/mL. O ensaio de hemólise não revelou efeitos tóxicos, por outro lado, o ensaio de citotoxicidade, utilizando células da linhagem NIH-3T3, evidenciou uma diminuição da viabilidade celular em concentrações elevadas do extrato.

Introduction: over the years, plant species have become a therapeutic alternative for a large part of the population, even with limited scientific research that ensures their effectiveness and safety. Among these, there is the Crescentia cujete, an arboreal species, with great distribution in the Northeast of Brazil. Known as the local population as a coité or gourd tree, it is used for different therapeutic purposes, such as analgesic, anti-tumor, spasmolytic and some gynecological disorders. Objective: to evaluate the possible cytotoxicity and to carry out the phytochemical characterization of the hydroalcoholic extract of Crescentia cujete. Methodology: the extract was obtained through homogenization with hydroalcoholic solution. The evaluation of cytotoxicity was based on the methodologies of erythrocyte osmotic fragility and lethality against Artemia salina L. Results: The presence of promising phytochemicals such as tannins, saponins and coumarins were detected. The cytotoxic assays showed CL50 1186.77μg / mL, considered low cytotoxic potential compared to Artemia salina L. regarding hemolytic activity, the extract obtained a percentage of 60.67%. Conclusion: therefore, it is encouraged to carry out new research in vivo and in vitro that seeks to characterize its toxic potential, as well as further studies for the quantification of phytochemicals for possible application in the development and discovery of drugs. Introducción: a lo largo de los años, las especies vegetales se han convertido en alternativas terapéuticas para gran parte de la población, incluso con escasas investigaciones científicas para asegurar su eficacia y seguridad. Entre estos, se encuentra la Crescentia cujete, una especie arbórea con amplia distribución en el Nordeste de Brasil. Conocida como población local como coité o jícara, se utiliza para diferentes fines terapéuticos, como analgésicos, antitumorales, espasmolíticos y algunos trastornos ginecológicos. Objetivo: evaluar la posible citotoxicidad y realizar la caracterización fitoquímica del extracto hidroalcohólico de Crescentia cujete. Metodología: el extracto se obtuvo mediante homogeneización con una solución hidroalcohólica. La evaluación de la citotoxicidad se basó en las metodologías de fragilidad osmótica y letalidad eritrocitaria frente a Artemia salina L. Resultados: se detectó la presencia de fitoquímicos prometedores como taninos, saponinas y cumarinas. Los ensayos citotóxicos arrojaron CL50 1186.77μg / mL, considerado bajo potencial citotóxico contra Artemia salina L. en cuanto al porcentaje hemolítico, el extracto obtuvo un porcentaje de 60.67%. Conclusión: por tanto, fomenta la realización de nuevas investigaciones in vivo e in vitro que busquen caracterizar su potencial tóxico, así como estudios adicionales para cuantificar compuestos fitoquímicos para su posible aplicación en el desarrollo y descubrimiento de fármacos. Introdução: com passar dos anos as espécies vegetais passaram a ser alternativas terapêuticas para grande parte da população, mesmo com restritas pesquisas científicas que assegurem sua eficácia e segurança. Dentre essas, encontra-se a Crescentia cujete, uma espécie arbórea, com grande distribuição no Nordeste do Brasil. Conhecida população local como coité ou árvore de cabaça, é utilizada para diferentes finalidades terapêuticas, como analgésico, antitumoral, espasmolítica e alguns distúrbios ginecológicos. Objetivo: avaliar a possível citotoxicidade e realizar a caracterização fitoquímica do extrato hidroalcoólico da Crescentia cujete. Metodologia: o extrato foi obtido através de homogeneização com solução hidroalcoólica. A avaliação da citotoxicidade se baseou nas metodologias de fragilidade osmótica eritrocitária e letalidade frente à Artemia salina L. Resultados: foram detectados a presença de promissores fitoquímicos como taninos, saponinas e cumarinas. Os ensaios citotóxicos demonstraram CL50 1186,77μg/mL, considerado baixo potencial citotóxico frente à Artemia salina L. quanto ao percentual hemolítico, o extrato obteve percentual de 60,67%. Conclusão: portanto, fomenta-se a realização de novas pesquisas in vivo e in vitro que busque caracterizar seu potencial tóxico, como também mais estudos para quantificação dos compostos fitoquímicos para possível aplicação no desenvolvimento e descoberta de fármacos.

This study investigated the action of the hydroalcohol extract Arrabidaea chica (AchE) against C. albicans, as well as its effect on cytotoxicity in fibroblasts and keratinocytes and changes in the physical/mechanical properties of PPMA resin. The susceptibility of C. albicans to AchE was assessed using the MIC and MFC. For the susceptibility test, C. albicans biofilms were developed in PMMA acrylic resin disc for 48 hours and immersed in 5 groups, phosphate-saline buffer, NaoCl 1% or in AchE at CIM, 5xCIM or 10xCIM. The cytotoxicity of AchE (10, 50 and 100 µg /mL) in fibroblasts and keratinocytes was evaluated by MTT, with distilled water and NaOCl l% used as controls. For evaluation of physical/mechanical properties, discs were immersed in the 5 already described groups. The discs were incubated and the testes were performed after 0, 7, 14, 21 and 28 days of immersion. Surface roughness, color change and flexural strength were verified. AchE was considered a strong inhibitor and with bactericidal potential. At 10 µg/mL it did not show cytotoxicity compared to the control group. Other experimental groups were cytotoxic, however, with lower values when compared to NaOCl 1%. There were no significant differences in group-independent physical/mechanical properties or time taken. AchE, when used in high concentrations, was cytotoxic and, regardless of the tools used, it did not interfere with the physical/mechanical properties of PMMA resins. Este estudio investigó la acción del extracto de hidroalcohol Arrabidaea chica (AchE) contra C. albicans, así como su efecto sobre la citotoxicidad en fibroblastos y queratinocitos y cambios en las propiedades físico-mecánicas de la resina de PMMA. La susceptibilidad de C. albicans a AchE se evaluó utilizando la CIM y CFM. Para la prueba de susceptibilidad, se desarrollaron biopelículas de C. albicans en disco de resina acrílica de PMMA durante 48 horas y se sumergieron en 5 grupos, tampón fosfato-salino, NaOCl 1% o en AchE en CIM, 5xCIM o 10xCIM. La citotoxicidad de AchE (10, 50 y 100 µg/mL) en fibroblastos y queratinocitos se evaluó mediante MTT, con agua destilada y NaOCl 1% como controles. Para la evaluación de las propiedades físicas/mecánicas (rugosidad de la superficie, coloración y resistencia a la flexión), los discos se sumergieron en los 5 grupos ya descritos. Los discos se incubaron y los testes se realizaron a los 0, 7, 14, 21 y 28 días de inmersión. AcHE se consideró un inhibidor fuerte y con potencial bactericida. A 10 µg/mL no mostró citotoxicidad, en comparación con el grupo de control. Otros grupos experimentales fueron citotóxicos, sin embargo, con valores bajos en comparación con NaOCl 1%. No hubo diferencias significativas en las propiedades físicas/mecánicas independientes del grupo o en el tiempo empleado. AchE, cuando se usó en alta concentración, fue citotóxico en células de fibroblastos y queratinocitos y, independientemente de las concentraciones utilizadas, no interfirió con las propiedades físicas/mecánicas de las resinas de PMMA. Este estudo investigou a ação do extrato hidroalcoóde Arrabidaea chica (AchE) contra C. albicans, bem como seu efeito na citotoxicidade em fibroblastos e queratinócitos e alterações nas propriedades físico/mecânicas de resina de PMMA. A susceptibilidade da C. albicans ao AchE foi avaliada por meio da CIM e CFM. Para os testes de suscetibilidade, biofilmes de C. albicans foram desenvolvidos em disco de resina acrílica de PMMA por 48 horas e imersos em 5 grupos, tampão fosfato-salino, hipoclorito de sódio 1% ou em AchE na CIM, 5xCIM ou 10xCIM. A citotoxicidade do AchE (10, 50 e 100 µg/m) em fibroblastos e queratinócitos foi avaliada pelo método MTT sendo a água destilada e NaOCl l% utilizados como controles. Para avaliação das propriedades físico/mecânicas (rugosidade superficial, alteração de cor e resistência flexural), discos foram imersos nos 5 grupos já descritos. Os discos foram incubados e os testes foram realizados após 0, 7, 14, 21 e 28 dias de imersão. O AcHE foi considerado um forte inibidor e com potencial bactericida. A 10 µg/mL não apresentou citotoxicidade, comparando-se ao grupo controle. Demais grupos experimentais foram citotóxicos, porém, com valores menores quando comparados ao NaOCl 1%. Não houve diferenças significativas nas propriedades físico/mecânicas independente do grupo ou tempo avaliados. O AchE, quando utilizado em altas concentrações, foi citotóxico em células fibroblastos e queratinócitos e, independente das concentrações utilizadas, não interferiu nas propriedades físico/mecânicas das resinas PMMA.

Jaboticaba and pequi fruits contain bioactive compounds, such as polyphenols, which present antioxidant actions; however, the molecular mechanisms by which these effects are achieved are not fully elucidated. In the present study, mouse muscle cells (C2C12), induced or not by oxidative stress with hydrogen peroxide (H2O2), were treated with jaboticaba peel extract (JPE) and pequi aqueous extract (PAE) in order to evaluate their influence on expression of the following antioxidant enzymes: catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione s-transferase (GST) and glutathione peroxidase 1 (GPX1). Treatments with JPE (150 µg gallic acid equivalents mL-1 extract) and PAE (30 µg GAE mL-1 extract) increased CAT and GST mRNAs expression in muscle cells. In cells induced by oxidative stress with addition of H2O2, peroxide detoxification action attributed to the GST enzyme was verified. The extracts beneficial effects may be due to the synergistic activities of their various phenolic compounds and other constituents. Los frutos de jaboticaba y pequi contienen compuestos bioactivos, como polifenoles, que presentan acciones antioxidantes; sin embargo, los mecanismos moleculares mediante los cuales se logran estos efectos no están completamente aclarados. En el presente estudio, células de músculo de ratón (C2C12), inducidas o no por estrés oxidativo con peróxido de hidrógeno (H2O2), fueron tratadas con extracto de piel de jaboticaba (JPE) y extracto acuoso de pequi (PAE) para evaluar su influencia en la expresión de las siguientes enzimas antioxidantes: catalasa (CAT), superóxido dismutasa (SOD), glutatión s-transferasa (GST) y glutatión peroxidasa 1 (GPX1). Los tratamientos con JPE (150 µg equivalente de ácido gálico mL-1 extracto) y PAE (30 µg GAE mL-1 extracto) aumentaron la expresión de ARNm de CAT y GST en las células musculares. En células inducidas por estrés oxidativo con adición de H2O2, se verificó la acción de desintoxicación del peróxido atribuida a la enzima GST. Los efectos beneficiosos de los extractos pueden deberse a las actividades sinérgicas de sus diversos compuestos fenólicos y otros constituyentes. Frutos de jabuticaba e pequi contêm compostos bioativos, como polifenóis, que apresentam ação antioxidante; entretanto, os mecanismos moleculares pelos quais esses efeitos são alcançados não estão totalmente elucidados. No presente estudo, células musculares de camundongo (C2C12), induzidas ou não por estresse oxidativo com peróxido de hidrogênio (H2O2), foram tratadas com extrato de casca de jabuticaba (JPE) e extrato aquoso de pequi (PAE) para avaliar sua influência na expressão das seguintes enzimas antioxidantes: catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), glutationa s-transferase (GST) e glutationa peroxidase 1 (GPX1). Os tratamentos com JPE (150 µg equivalentes de ácido gálico mL-1 extrato) e PAE (30 µg GAE mL-1 extrato) aumentaram a expressão de mRNAs de CAT e GST em células musculares. Em células induzidas por estresse oxidativo com adição de H2O2, verificou-se a ação de desintoxicação do peróxido atribuída à enzima GST. Os efeitos benéficos dos extratos podem ser devido às atividades sinérgicas de seus diversos compostos fenólicos e outros constituintes.

Fungi are a prolific source of biologically active metabolites, including a wide range of clinically important drugs. Therefore, this study aims to evaluate the antimicrobial and cytotoxic activity of secondary metabolites extracted from fungal mycelia isolated from freshwater samples in the state of Amazonas. Mycelial extracts from 12 fungal were used, extracted with MeOH/AcOEt (1:1) according to the criteria established by Souza et al. (2004). For antimicrobial activity, the extracts were tested against the pathogens Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus feacalis, Candida albicans and C. tropicalis. To identify the minimum inhibitory dosage (MID) the microdilution method was used. To perform the cytotoxicity assay, the VERO strain (ATCC® CCL-81TM) was used. The assays were determined by the Alamar Blue method according to Ahmed et al. (1994). The tested extracts did not show antibacterial activity. Five extracts (41.7%), obtained from the fungi Aspergillus - 1283, Chrysoporther - 1169, Diaporther – 1203, Fusarium – 1085, and Trichoderma, showed antifungal activity against C. albicans. Diaporther extract (8.3%) - 1203 was active against C. tropicalis. In the cytotoxicity assay, 58.3% of the evaluated extracts showed no significant toxic effect. Five extracts, Cladosporium - 1135, Chrysoporther - 1169, Cytospora - 1098, Fusarium - 1085, and Talaromyces - 1244, showed cytotoxic potential, exhibiting viability lower than 70%. The results obtained suggest that mycelial extracts of fungi isolated from water samples from the Amazon region have potential against yeasts of medical interest. Only two of the active extracts were revealed potentially cytotoxic. Los hongos son una fuente prolífica de metabolitos biológicamente activos, incluida una amplia gama de fármacos clínicamente importantes. Así, el objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antimicrobiana y citotóxica de metabolitos secundários extraídos de micelios fúngicos aislados de muestras de agua en el estado de Amazonas. Se utilizaron extractos miceliales de 12 hongos, extraídos con MeOH/ AcOEt (1:1) según los criterios establecidos por Souza et al. (2004). En la prueba antimicrobiana, los extractos fueron evaluados frente a los patógenos Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus feacalis, Candida albicans y C. tropicalis. Para identificar la dosis mínima inhibitoria (MID) se utilizó el método de microdilución. Para realizar el ensayo de citotoxicidad se utilizó la cepa VERO (ATCC® CCL-81TM). Los ensayos se determinaron mediante el método Alamar Blue según Ahmed et al. (1994). Los extractos probados no mostraron actividad antibacteriana. Cinco (41,7%) extractos obtenidos de los hongos Aspergillus - 1283, Chrysoporther - 1169, Diaporther – 1203, Fusarium - 1085 y Trichoderma, mostraron actividad antifúngica contra C. albicans y un extracto (8,3%) del hongo Diaporther - 1203 fue activo contra C. tropicalis. En el ensayo de citotoxicidad, el 58,3% de los extractos evaluados no mostraron ningún efecto tóxico significativo y cinco extractos, Cladosporium - 1135, Chrysoporther - 1169, Cytospora - 1098, Fusarium - 1085 y Talaromyces - 1244, mostraron potencial citotóxico com una viabilidad inferior al 70%. Los resultados obtenidos sugieren que extractos miceliales de hongos aislados de muestras de agua de la región amazónica tienen potencial contra levaduras de interés médico. Solo dos de los extractos activos fueron potencialmente citotóxicos. Os fungos são uma fonte prolífica de metabólitos biologicamente ativos, incluindo uma ampla gama de drogas clinicamente importantes. Portanto, este estudo tem como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e citotóxica de metabólitos secundários extraídos de micélios fúngicos isolados de amostras de água doce do estado do Amazonas. Foram utilizados extratos miceliais de 12 fungos, extraídos com MeOH/ AcOEt (1:1) de acordo com os critérios estabelecidos por Souza et al. (2004). Para atividade antimicrobiana, os extratos foram testados contra os patógenos Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus feacalis, Candida albicans e C. tropicalis. Para identificar a dosagem inibitória mínima (MID) foi utilizado o método de microdiluição. Para a realização do ensaio de citotoxicidade, foi utilizada a cepa VERO (ATCC® CCL-81TM). Os ensaios foram determinados pelo método Alamar Blue de acordo com Ahmed et al. (1994). Os extratos testados não apresentaram atividade antibacteriana. Cinco extratos (41,7%), obtidos dos fungos Aspergillus - 1283, Chrysoporther - 1169, Diaporther - 1203, Fusarium - 1085 e Trichoderma, apresentaram atividade antifúngica contra C. albicans. O extrato de Diaporther (8,3%) - 1203 foi ativo contra C. tropicalis. No ensaio de citotoxicidade, 58,3% dos extratos avaliados não apresentaram efeito tóxico significativo e cinco extratos, Cladosporium - 1135, Chrysoporther - 1169, Cytospora - 1098, Fusarium - 1085 e Talaromyces - 1244, apresentaram potencial citotóxico exibindo viabilidade menor que 70%. Os resultados obtidos sugerem que extratos miceliais de fungos isolados de amostras de água da região amazônica apresentam potencial contra leveduras de interesse médico. Apenas dois dos extratos ativos foram potencialmente citotóxicos.

Introduction: Libidibia Ferrea is a plant with proven therapeutic properties for the prevention and treatment of oral diseases. Objective: To evaluate an orabase source of Libidibia ferrea for cytotoxicity. Methodologys: The hemolysis test was performed using the qualitative assessment method of free hemoglobin and the fibroblast cell culture test using the Alamar Blue method. The stem bark extract, base vehicle, its adjuvants and orabase base were tested. Results: No hemolysis test either the stem bark extract or the above and its components did not dissipate hemolysis when visually evaluating the supernatant from each well. In the Alamar Blue test, it did not show toxicity in any of the tested solutions. Conclusion: Based on the results, the stem bark extract and the orabase base of Libidibia ferrea L. were not toxic when tested in red blood cells and fibroblast cell cultures. Introducción: Libidibia Ferrea es una planta con probadas propiedades terapéuticas para la prevención y el tratamiento de enfermedades bucodentales. Objetivo: evaluar una fuente de orabasa de Libidibia ferrea para la citotoxicidad. Metodología: La prueba de hemólisis se realizó mediante el método de evaluación cualitativa de hemoglobina libre y la prueba de cultivo celular de fibroblastos mediante el método Alamar Blue. Se ensayaron el extracto de corteza del tallo, el vehículo base, sus adyuvantes y la base de orabasa. Resultados: No se realizó prueba de hemólisis ni el extracto de corteza del tallo ni lo anterior y sus componentes no disiparon la hemólisis al evaluar visualmente el sobrenadante de cada pocillo. En la prueba de Alamar Blue, no mostró toxicidad en ninguna de las soluciones probadas. Conclusión: Según los resultados, el extracto de corteza de tallo y la base de orabasa de Libidibia ferrea L. no fueron tóxicos cuando se probaron en cultivos de glóbulos rojos y fibroblastos. A Libidibia Ferrea é uma planta que possui inúmeras propriedades terapêuticas comprovadas para prevenção e tratamento de afecções bucais. Objetivo: Avaliar uma formulação em orabase de Libidibia ferrea quanto a citotoxicidade. Metodologia: O teste de hemólise foi realizado através do método de avaliação qualitativa de hemoglobina livre e o teste de cultura de células de fibroblastos através do método de Alamar Blue. Foram testados o extrato da casca do caule, veículo da formulação, seus adjuvantes e a formulação orabase. Resultados: No teste de hemólise tanto o extrato da casca do caule quanto a formulação e seus componentes não apresentaram hemólise ao avaliar visualmente o sobrenadante de cada poço. No teste de Alamar Blue não apresentou toxicidade em nenhuma das soluções testadas. Conclusão: Baseado nos resultados, o extrato da casca do caule e a formulação em orabase de Libidibia ferrea L. não foram tóxicos quando testados em hemácias e cultura de células de fibroblastos.

The objectives of this study were to evaluate the intracellular activity of the essential oil of Origanum majorana (MARJ) in Madin Darby Bovine Kidney (MDBK) and murine metastatic melanoma (B16F10) and elucidate your chemical composition. Through flow cytometry parameters were analyzed membrane fluidity (F), reactive oxygen species (ROS), DNA fragmentation index (IFD), mitochondrial membrane potential (MMP), cell cycle, plasma membrane lipoperoxidation (LPO), cell viability, necrosis and apoptosis of cell lines treated with MARJ at concentrations of 0.25, 0.5 and 1 mg/mL for 24 hours. The composition of MARJ was determined by gas chromatography, and its major components were terpenes: hydrated cis-sabinene, 4-terpineol and gamma-terpinene. The results showed that all MARJ concentrations reduced ROS, LPO and S phase cells of the MDBK lineage. In B16F10 cells, MARJ treatments reduced ROS and cells in G2 phase, increasing cells in S phase. Concentrations of 0.5 and 1 mg/mL caused a reduction in F and 0.5 mg/mL increased the MMP in the MDBK lineage, while LPO was reduced at the concentration of 0.5 mg/mL in the B16F10 cells. The results of the evaluations of ROS production, plasma membrane integrity and LPO indicated antioxidant activity in the cells studied. Through cell cycle analysis, it was possible to observe that MARJ exerted an antiproliferative effect on melanoma cells, being able to interrupt the multiplication of this cell type. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la actividad intracelular del aceite esencial de Origanum majorana (MARJ) en linajes de Madin Darby Bovine Kidney (MDBK) y melanoma metastásico murino (B16F10) y dilucidar su composición química. Mediante citometría de flujo se analizaron parámetros de fluidez de membrana (F), especies reactivas de oxígeno (ERO), índice de fragmentación del ADN (IFA), potencial de membrana mitocondrial (PMM), ciclo celular, lipoperoxidación de la membrana plasmática (LPO), viabilidad celular, necrosis y apoptosis de linajes celulares tratadas con MARJ a concentraciones de 0,25, 0,5 y 1 mg/mL durante 24 horas. La composición de MARJ se determinó por cromatografía de gases, y sus componentes principales fueron terpenos: cis-sabineno hidratado, 4-terpineol y gamma-terpineno. Los resultados mostraron que todas las concentraciones de MARJ redujeron ERO, LPO y células de fase S del linaje MDBK. En las células B16F10, los tratamientos MARJ redujeron ERO y células en fase G2, aumentando las células en fase S. Concentraciones de 0.5 y 1 mg/mL provocaron una reducción en F y 0.5 mg/mL aumentaron las PMM en el linaje MDBK, mientras que la LPO se redujo a la concentración de 0,5 mg/mL en las células B16F10. Los resultados de las evaluaciones de producción de ERO, integridad de la membrana plasmática y LPO indicaron actividad antioxidante en las células estudiadas. A través del análisis del ciclo celular, se pudo observar que MARJ ejercía un efecto antiproliferativo sobre las células del melanoma, pudiendo interrumpir la multiplicación de este tipo celular. Os objetivos desse estudo foram avaliar a atividade intracelular do óleo essencial de Origanum majorana (MARJ) nas linhagens Madin Darby Bovine Kidney (MDBK) e de melanoma metastático murino (B16F10) e elucidar a sua composição química. Através da citometria de fluxo foram analisados os parâmetros fluidez de membrana (F), espécies reativas de oxigênio (ERO), índice de fragmentação de DNA (IFD), potencial de membrana mitocondrial (PMM), ciclo celular, lipoperoxidação da membrana plasmática (LPO), viabilidade celular, necrose e apoptose das linhagens celulares tratadas com MARJ nas concentrações de 0,25, 0,5 e 1 mg/mL por 24 horas. A composição do MARJ foi determinada através de cromatografia gasosa, sendo seus componentes majoritários os terpenos: cis-sabineno hidratado, 4-terpineol e gama-terpineno. Os resultados mostraram que todas as concentrações de MARJ reduziram ERO, LPO e as células em fase S da linhagem MDBK. Nas células B16F10, os tratamentos com MARJ reduziram ERO e as células em fase G2, aumentando as células na fase S. As concentrações de 0,5 e 1 mg/mL causaram redução na F e 0,5 mg/mL aumentou o PMM na linhagem MDBK, enquanto LPO foi reduzida na concentração de 0,5 mg/mL nas células B16F10. Os resultados das avaliações da produção de ERO, da integridade da membrana plasmática e de LPO indicaram atividade antioxidante nas linhagens estudadas. Através da análise do ciclo celular foi possível observar que MARJ exerceu efeito antiproliferativo sobre as células de melanoma, sendo capaz de interromper a multiplicação desse tipo celular.

Biopesticides are used as an alternative to synthetic chemical pesticides application. Formulations based on Bacillus thuringiensis (Bt) spores are widely used, however, little is known about their effects on aquatic biota. The aim of the study was to evaluate the genotoxic and histopathological effects of a sublethal concentration of a commercial Bt-based biopesticide on Oreochromis niloticus. The fish were divided (n = 10) into a control group (CG) and an exposed group (GBt) at a concentration of 60 mg L-1 of the biopesticide Dipel® WP for 48 hours. After exposure, blood, gill, liver and kidney samples were collected for analysis of toxicity biomarkers. The results demonstrate that an acute exposure to Bt induces the increase of erythrocyte nuclei with segmented morphology. No micronucleus induction was observed. Histopathological analysis showed that within 48 hours of exposure, in GBt, there was a decrease in the frequency of hypertrophied hepatocytes. However, the biopesticide did not compromise tissue morphology in acute toxicity. Pesticides in general are constantly applied and usage regulations are not widely followed, our results suggest that sublethal concentrations can induce effects when exposed acutely. Biopesticides based on Bt in low concentrations appear to be less toxic to fish. Los bioplaguicidas se utilizan como alternativa a la aplicación de pesticidas químicos sintéticos. Las formulaciones basadas en esporas de Bacillus thuringiensis (Bt) se utilizan ampliamente, sin embargo, se sabe poco acerca de sus efectos sobre la biota acuática. El objetivo del estudio fue evaluar los efectos genotóxicos e histopatológicos de una concentración subletal de un bioplaguicida comercial basado en Bt sobre Oreochromis niloticus. Los peces se dividieron (n = 10) en un grupo de control (CG) y un grupo expuesto (GBt) a una concentración de 60 mg L-1 del biopesticida Dipel® WP durante 48 horas. Después de la exposición, se recolectaron muestras de sangre, branquias, hígado y riñón para analizar los biomarcadores de toxicidad. Los resultados demuestran que una exposición aguda a Bt induce el aumento de núcleos de eritrocitos con morfología segmentada. No se observó inducción de micronúcleos. Los análisis histopatológicos mostraron que dentro de las 48 horas posteriores a la exposición, en GBt, hubo una disminución en la frecuencia de hepatocitos hipertrofiados. Sin embargo, el bioplaguicida no comprometió la morfología del tejido en la toxicidad aguda. Los pesticidas en general se aplican constantemente y las regulaciones de uso no se siguen ampliamente, por lo que nuestros resultados sugieren quelas concentraciones subletales pueden inducir efectos cuando se exponen de forma aguda. Los bioplaguicidas basados en Bt en concentraciones bajas parecen ser menos tóxicos para los peces. Os biopesticidas são usados como uma alternativa ao uso de pesticidas químicos sintéticos. As formulações que contêm esporos de Bacillus thuringiensis (Bt) são amplamente utilizados, entretanto, pouco se sabe dos efeitos na biota aquática. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos genotóxicos e histopatológicos de uma concentração subletal de um biopesticida comercial à base de Bt em Oreochromis niloticus. Os peixes foram divididos (n = 10) em um grupo controle (GC) e um grupo exposto (GBt) na concentração de 60 mg L-1 do biopesticida Dipel® WP por 48 horas. Após a exposição, amostras de sangue, brânquias, fígado e rim foram coletadas para análise de biomarcadores de toxicidade. Os resultados demonstram que uma exposição aguda ao Bt induz o aumento de núcleos eritrocitários com morfologia segmentada. Não foi observado a indução de micronúcleos. As análises histopatológicas demonstraram que em 48 horas de exposição, no GBt, houve uma diminuição na frequência de hepatócitos hipertrofiados. Entretanto, o biopesticida não comprometeu a morfologia dos tecidos em toxicidade aguda. Os pesticidas de modo geral, são aplicados constantemente e regulamentações de uso não são amplamente seguidas, assim, nossos resultados sugerem que concentrações subletais podem induzir efeitos quando expostos de modo agudo. Os biopesticidas à base de Bt em baixas concentrações parecem ser pouco tóxicos aos peixes.

Introduction: plant based medicines holds important contributions to society since ancient times. Its use must be conducted cautiously, in addition, efficiency should be proven and toxicity should be measured to avoid adverse post-consumer reactions. Therefore, the Cissus sicyoides that is popularly known as cipó-pucá, insulina vegetal, uva brava and cortina japonesa, is used for presenting antidiabetic, anti-inflammatory, antimicrobial, and antidiarrheal activities among others. Therefore, scientific tests are necessary to evaluate possible cytotoxicity and biological activities. Objective: to evaluate the possible toxicity, phytochemical characterization and biological potentials of the plant. Methodology: The study was carried out through phytochemical analysis and free radical elimination trials, in vitro photo protective activity, hemolytic activity and cytotoxicity against Artemia salina. Results: the phytochemical analysis was positive for alkaloids, flavonoids, saponins, polyphenois (hydrolysable tannins), terpenes and steroids. However, cytotoxicity trails show low LC 50 bioactivity against Artemia Salina L. and elevated hemolytic activity. As for spectrophotometric absorption aspects, a photo protective potential was evidenced. Conclusion: farther studies are suggested to determine other biological potentials, possibly contributing to the development of new drugs, where they can be applied in therapeutic activities involving cytotoxicity, such as antitumor and antimicrobial. Introducción: las hierbas medicinales han hecho importantes contribuciones a la sociedad desde la antigüedad. El uso debe realizarse con precaución, además se debe demostrar la efectividad y medir la toxicidad para que no se presenten reacciones adversas después del consumo. Por ello, se utiliza Cissus sicyoides, que popularmente se conoce como liana, insulina vegetal, uva silvestre y cortina japonesa, por tener actividad antidiabética, antiinflamatoria, antimicrobiana, antidiarreica, entre otras. Por tanto, las pruebas científicas son necesarias para evaluar la posible citotoxicidad y las actividades biológicas. Objetivo: evaluar la posible toxicidad, caracterización fitoquímica y potenciales biológicos de Cissus sicyoides. Metodología: el estudio se llevó a cabo mediante análisis fitoquímico (CCD) y pruebas de captación de radicales libres (DPPH), actividad fotoprotectora in vitro, actividad hemolítica y citotoxicidad frente a Artemia salina. Resultados: el análisis fitoquímico fue positivo para alcaloides, flavonoides, saponinas, polifenoles (taninos hidrolizables), terpenos y esteroides. Sin embargo, los ensayos de citotoxicidad muestran una LC50 de baja bioactividad en comparación con Artemia Salina L. y una alta actividad hemolítica. En cuanto a los espectros de absorción espectrofotométrica, se evidenció un potencial fotoprotector. Conclusión: se sugiere realizar más estudios para que se puedan determinar otros potenciales biológicos, para eventualmente contribuir al desarrollo de nuevos fármacos, donde se pueda aplicar en actividades terapéuticas que involucren citotoxicidad, como antitumoral y antimicrobiana. Introdução: os medicamentos à base de plantas detêm de importantes contribuições a sociedade desde a antiguidade. O uso deve ser conduzido de maneira cautelosa, além disso a eficácia deve comprovada e a toxicidade deve ser mensurada para que não haja reações adversas pós-consumo. Diante disso, a Cissus sicyoides que é popularmente conhecida como cipó-pucá, insulina vegetal, uva brava e cortina japonesa, é utilizada por apresentar atividade antidiabética, anti-inflamatória, antimicrobiana, antidiarreica, entre outros. Com isso, são necessários ensaios científicos com objetivo de avaliar possíveis citotoxicidade e atividades biológicas. Objetivo: avaliar a possível toxicidade, caracterização fitoquímica e potenciais biológicos da Cissus sicyoides. Metodologia: o estudo foi realizado através de análise fitoquímica (CCD) e ensaios de eliminação de radicais livre (DPPH), atividade foto protetora in vitro, atividade hemolítica e citotoxicidade frente Artemia salina. Resultados: a análise fitoquímica foi positiva para alcaloides, flavonoides, saponinas, polifenóis (taninos hidrolisáveis), terpenos e esteroides. Entretanto, os ensaios de citotoxicidade mostram CL50 baixa bioatividade frente Artemia Salina e elevada atividade hemolítica. Quanto aos espectros de absorção espectrofotométrica foi evidenciado um potencial fotoprotetor. Conclusão: sugere-se a realização de novos estudos para que possa determinar outros potenciais biológicos, para possivelmente contribuir no desenvolvimento de novos fármacos, onde pode ser aplicada em atividades terapêuticas que envolvem citotoxicidade, como antitumoral e antimicrobiano.

Essential oils are an important natural source of pesticides and can be suitable used in ectoparasite control. The goal of this paper was to investigate the chemical composition of the volatile oils obtained from leaves and stems of Philodendron meridionale Buturi & Sakur by gas chromatography/mass spectrometry and to evaluate their insecticidal effect against Ctenocephalides felis Bouché adult insects and their cytotoxicity on human Jurkat leukemic T-cells by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5diphenyltetrazoluim bromide (MTT) reduction method. The main compound was ent-kaur-16-ene at concentrations of 20.78 and 22.46% for volatile oils from leaves and stems, respectively. These volatile oils provided insecticidal effect against C. felis with an average knockdown time of 9.61 and 7.35 min for fumigant test performed with the leaves and stems samples, respectively. Considering the topical application, these P. meridionale volatile oils extracted from leaves and stems demonstrated average knockdown values of 14.70 and 20.0 min, respectively. A very low cytotoxic effect of 9.48 and 11.32% was observed for P. meridionale volatile oils from leaves and stems even at the highest tested concentration of 400 μg.mL-1, respectively. Therefore, it is possible to propose a biological selectivity to the volatile oils under study, which guarantees, at the same time, effect against this insect with no evident damage to human biological system. Los aceites esenciales son una importante fuente natural de pesticidas y pueden usarse de manera adecuada en el control de ectoparásitos. El objetivo de este trabajo fue investigar la composición química de los aceites volátiles obtenidos de hojas y tallos de Philodendron meridionale Buturi & Sakur por cromatografía de gases / espectrometría de masas y evaluar su efecto insecticida contra insectos adultos Ctenocephalides felis Bouché y su citotoxicidad em línea celular Jurkat - células-T leucêmicas humanos- por el método de reducción de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5difeniltetrazoluim (MTT). El compuesto principal fue ent-kaur-16-eno en concentraciones de 20,78 y 22,46% para aceites volátiles de hojas y tallos, respectivamente. Estos aceites volátiles proporcionaron un efecto insecticida contra C. felis con un tiempo de remoción promedio de 9,61 y 7,35 min para la prueba de fumigante realizada con las muestras de hojas y tallos, respectivamente. Considerando la aplicación tópica, estos aceites volátiles de P. meridionale extraídos de hojas y tallos mostraron valores promedio de caída de 14,70 y 20,0 min, respectivamente. Se observó un efecto citotóxico muy bajo de 9,48 y 11,32% para los aceites volátiles de P. meridionale de hojas y tallos, incluso a la concentración más alta probada de 400 μg.mL-1, respectivamente. Por tanto, es posible proponer una selectividad biológica a los aceites volátiles en estudio, lo que garantiza, al mismo tiempo, efecto contra este insecto sin daño evidente al sistema biológico humano. Os óleos essenciais são uma importante fonte natural de pesticidas e podem ser usados de forma adequada no controle de ectoparasitas. O objetivo deste trabalho foi investigar a composição química dos óleos voláteis obtidos de folhas e caules de Philodendron meridionale Buturi & Sakur por cromatografia gasosa / espectrometria de massa e avaliar seu efeito inseticida contra insetos adultos Ctenocephalides felis Bouché e sua citotoxicidade em linhagem celular Jurkat - células T leucêmicas humanas - pelo método de redução de brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazoluim (MTT). O principal composto majoritário foi o ent-kaur-16-eno em concentrações de 20,78 e 22,46% para óleos voláteis de folhas e caules, respectivamente. Esses óleos voláteis proporcionaram efeito inseticida contra C. felis com um tempo médio de remoção de 9,61 e 7,35 min para o teste de fumigação realizado com as amostras de folhas e caules, respectivamente. Considerando a aplicação tópica, esses óleos voláteis de P. meridionale extraídos de folhas e caules apresentaram valores médios de queda de 14,70 e 20,0 min, respectivamente. Um efeito citotóxico muito baixo de 9,48 e 11,32% foi observado para os óleos voláteis de P. meridionale de folhas e caules, mesmo na maior concentração testada de 400 μg.mL-1, respectivamente. Portanto, é possível propor uma seletividade biológica aos óleos voláteis em estudo, o que garante, ao mesmo tempo, um efeito contra este inseto sem danos evidentes ao sistema biológico humano.

[Resumo] A síntese de novos receptores moleculares no eido da química supramolecular experimentou un gran auxe nos últimos anos debido ás súas potenciais aplicacións biolóxicas. En especial, os sistemas receptor-substrato presentan unha serie de características interesantes para a súa aplicación en sistemas de liberación controlada de fármacos, que van dende a súa capacidade de autoensamblaxe ata a resposta a estímulos. Sen embargo, para o seu uso en biomedicina é necesario que amosen unha boa biocompatibilidade. Trala síntese do ciclofano tetracatiónico red box – derivado do coñecido blue box – e os bos resultados obtidos no estudo de complexos de inclusión, prevese un elevado potencial no campo biomédico para este receptor. Neste traballo, como unha aproximación inicial ás posibles aplicacións da red box, levouse a cabo unha avaliación da súa biocompatibilidade en dúas liñas celulares – unha normal e unha tumoral –,e estimouse de xeito indirecto a cantidade internalizada mediante medidas de absorbancia. Os resultados obtidos amosaron que o macrociclo presenta unha toxicidade relativamente baixa en ambas liñas, cunha maior sensibilidade na liña non tumoral. [Resumen] experimentado un gran auge en los últimos años debido a sus potenciales aplicaciones biológicas. En particular, los sistemas receptor-sustrato presentan una serie de características interesantes para su aplicación en sistemas de liberación controlada de fármacos, que van desde su capacidad de autoensamblaje hasta la respuesta a estímulos. Sin embargo, para su uso en biomedicina es necesario que muestren una buena biocompatibilidad. Tras la síntesis del ciclofano tetracatiónico red box- derivada de la conocida blue box - y los buenos resultados obtenidos en el estudio de los complejos de inclusión, se prevé un alto potencial en el campo biomédico para este receptor. En este trabajo, como aproximación inicial a las posibles aplicaciones de la red box , se realizó una evaluación de su biocompatibilidad en dos líneas celulares, una normal y una tumoral, y se estimó indirectamente la cantidad internalizada mediante medidas de absorbancia. Los resultados obtenidos mostraron que el macrociclo presenta una toxicidad relativamente baja en ambas líneas, con una mayor sensibilidad en la línea no tumoral. [Abstract] The synthesis of new molecular receptors in the field of supramolecular chemistry has experienced a great boom in recent years due to their potential biological applications. In particular, host-guest systems present a number of interesting features for their application in controlled drug delivery systems, ranging from their self-assembly capacity to their stimuli responsivness. However, for their use in biomedicine it is necessary that they show good biocompatibility. After the synthesis of the tetracathionic cyclophane red box - derived from the well-known blue box - and the good results obtained in the study of inclusion complexes, a high potential in the biomedical field is foreseen for this receptor. In this work, as an initial approach to the possible applications of the red box, an evaluation of its biocompatibility was carried out in two cell lines, one normal and one tumor, and the amount internalized was indirectly estimated by absorbance measurements. The results obtained showed that the macrocycle exhibits a relatively low toxicity in both lines, with a higher sensitivity in the non-tumor line. Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2020/2021

[Resumen] En la actualidad, el autoensamblaje de moléculas a través de interacciones covalentes se ha postulado como una herramienta de gran utilidad para la síntesis de nuevos receptores moleculares, que son de gran interés en biomedicina por su versatilidad y múltiples aplicaciones. Específicamente, los complejos host-guest resultan especialmente interesantes, ya que pueden responder a estímulos externos como cambios en el medio celular externo y ser modulados para su utilización como sistemas de liberación controlada de fármacos. Entre estos compuestos, destaca el macrociclo red box cuya capacidad aceptora puede ser modulada mediante reacciones redox y cambios de pH, con el fin de maximizar su potencial como vehículo de liberación controlada de fármacos en aplicaciones biomédicas. Como primer paso para evaluar el potencial de la red box como sistema de liberación de fármacos, en el presente estudio se evaluó su biocompatibilidad mediante la realización de ensayos biológicos basados en medidas de la viabilidad celular y citotoxicidad en una línea celular normal (HFF-1) y otra tumoral (HeLa). Además, para confirmar que el macrociclo es capaz de atravesar la membrana plasmática, se llevó a cabo un estudio de internalización celular. Los resultados mostraron que la red box afectó en mayor medida a la viabilidad y proliferación celular de la línea no tumoral, lo cual podría estar relacionado con la mayor velocidad de división de las células cancerosas y/o una mayor permeabilidad al compuesto de la línea no tumoral. Asimismo, el estudio preliminar de internalización celular en células HeLa reveló la entrada de un pequeño porcentaje de red box en el interior de las células siendo mayor a las 24 h de exposición. [Resumo] Na actualidade, a autoensamblaxe de moléculas a través de interaccións covalentes postulouse como unha ferramenta de gran utilidade para a síntese de novos receptores moleculares, que son de gran interese en biomedicina pola súa versatilidade e múltiples aplicacións. Especificamente, os complexos host-guest resultan especialmente interesantes, xa que poden responder a estímulos externos, coma cambios no medio celular externo e ser modulados para a súa utilización como sistemas de liberación controlada de fármacos. Entre estes compostos, destaca o macrociclo red box cuxa capacidade aceptora pode ser modulada mediante reaccións redox e cambios de pH, co fin de maximizar o seu potencial como vehículo de liberación controlada de fármacos en aplicacións biomédicas. Como primeiro paso para avaliar o potencial da red box como sistema de liberación de fármacos, no presente estudo avaliouse a súa biocompatibilidade mediante a realización de ensaios biolóxicos baseados en medidas da viabilidade celular e citotoxicidade nunha liña celular normal (HFF-1) e outra tumoral (HeLa). Ademais, para confirmar que o macrociclo é capaz de atravesar a membrana plasmática, levouse a cabo un estudo de internalización celular. Os resultados mostraron que a red box afectou en maior medida á viabilidade e proliferación celular da liña non tumoral, o cal podería estar relacionado coa maior velocidade de división das células cancerosas e/ou unha maior permeabilidade ao composto da liña non tumoral. Así mesmo, o estudo preliminar de internalización celular en células HeLa revelou a entrada dun pequeno porcentaxe de red box no interior das células sendo maior ás 24 h de exposición. [Abstract] Nowadays, self-assembly of molecules through covalent interactions has been postulated as a very useful tool for the synthesis of new molecular receptors, being of great interest in biomedicine due to their versatility and multiple applications. Specifically, hostguest complexes are especially interesting, since they can respond to external stimuli as those from the external cellular environment and be modulated for their use as controlled drug delivery systems. Among these compounds, the macrocycle red box, whose acceptor capacity can be modulated by redox reactions and changes in pH to maximize its potential as a vehicle for controlled drug delivery in biomedical applications, is of great interest. As a first step to evaluate its potential as a drug delivery system, in the present study the biocompatibility of red box was evaluated by conducting biological assays based on measurements of cell viability and cytotoxicity in a normal cell (HFF-1) and in a tumor cell (HeLa) lines. Furthermore, to confirm the macrocycle capability to cross the cell membrane, a cell internalization study was carried out. The results showed that the red box affected the cell viability and proliferation of the non-tumor line to a greater extent, which could be related to the higher division rate of cancer cells and/or the major permeability to the compound of the non-tumor line. Likewise, the preliminary study of cellular internalization in HeLa cells revealed the entry of a small percentage of red box inside the cells, being higher after 24 h of exposure. Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2020/2021

[Abstract] Emerging contaminants (EC), such as pharmaceuticals, pose a potential risk in aquatic environments since their presence in water media can induce toxic effects onto the environment’s biota. This kind of compounds, not completely degraded after their use/application, can easily reach different water bodies, like lakes or oceans, given that many water treatment systems cannot efficiently eliminate them nowadays. Thus, it is of great concern the potential negative effect these compounds can cause on representative organisms of these environments, such as microalgae, given their essential role on the trophic net as primary productors. In recent years, advance oxidation processes (AOP) have been researched as promising mechanisms of remediation and elimination of these emerging contaminants from aquatic environments. In the present study several experiments were carried out in order to test the possible toxic effect of the antibiotic and emerging contaminant sulfamethoxazole (SMX) on the freshwater microalga Raphidocelis subcapitata. For that, several parameters, like proliferation, viability, vitality, photosystem II’s quantum yield, oxidative stress, and potential of cytoplasmic and mitochondrial membrane were monitored through flow cytometry (FCM). The effective concentration of SMX that induces a 10% inhibition on the growth of the microalga was calculated (EC10). Furthermore, the toxicity of photolyzed SMX (PLSMX), obtained after exposure of SMX solutions at their EC10 to UV light, was also studied by monitoring of the same parameters. The results obtained demonstrated that exposure to both compounds, pure and photolyzed, significantly induces (p

[Resumen]: Los contaminantes emergentes, como los aditivos de plásticos, representan un problema medioambiental en los ecosistemas acuáticos. Particularmente preocupante es la evidencia de que sus habitantes, como las microalgas, se encuentran expuestos, no a un único compuesto, si no a mezclas heterogéneas de contaminantes, siendo además habitual que se produzcan descargas repetidas en aguas costeras cercanas a núcleos urbanos y/o industriales. En base a esto, en el presente trabajo se estudió la potencial citotoxicidad sobre la microalga marina Dunaliella tertiolecta de una mezcla de 5 retardantes de llama organofosforados (TiBP, TnBP, TCPP (Σisómeros), TDCPP y TPPO), diseñados como aditivos alternativos de menor toxicidad a los utilizados en los últimos años. Para ello, se expusieron cultivos de la microalga a concentraciones de 8 (EC25) y 16 (EC50) μg/mL analizando mediante citometría de flujo diferentes biomarcadores de toxicidad (viabilidad, vitalidad, niveles intracelulares de ROS, pH intracelular, potencial de membrana mitocondrial y potencial de membrana citoplasmática). Los ensayos se realizaron con una primera exposición a 8 μg/mL de la mezcla de OPRFs, analizando los resultados a las 3 y 48 horas. Además, se estudió la retirada de los 5 contaminantes del medio por parte de D. tertiolecta, cuantificándolos mediante microextracción líquido-líquido asistida por vórtice realizando la separación y detección con cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas de triple cuadrupolo con inyección con temperatura programada (VALLME-PTV-GC-MS-MS). Finalmente, para simular una nueva descarga de contaminantes, los cultivos previamente tratados a 8 μg/mL de la mezcla se sometieron a una segunda exposición de 48h a 16 μg/mL, repitiéndose los análisis referidos. Los resultados obtenidos muestran que la exposición a la mezcla de 5 OPRFs provoca citotoxicidad sobre la microalga D. tertiolecta, afectando significativamente a todos los biomarcadores ensayados y el análisis de los niveles intracelulares de ROS ha sido el más afectado. Además, la retirada de los compuestos del medio de cultivo microalgal se observa ya a las 3 horas de la exposición a la mezcla de contaminantes, siendo los clorados (TCPP y TDCPP) los que presentan una menor retirada. Por último, una segunda exposición a la mezcla de contaminantes produce una toxicidad más severa en las células microalgales reexpuestas en comparación con las alteraciones registradas en las microalgas expuestas por primera vez. [Resumo]: Os contaminantes emerxentes, como os aditivos de plásticos, representan un problema medioambiental nos ecosistemas acuáticos. Particularmente preocupante é a evidencia de que os seus habitantes, como as microalgas, encóntranse expostos, non a un único composto, se non a mesturas heteroxéneas de contaminantes, sendo ademais habitual que se produzan descargas repetidas en augas costeiras próximas a núcleos urbanos e/ou industriais. En base a isto, no presente traballo estudouse a potencial citotoxicidade sobre a microalga mariña Dunaliella tertiolecta de unha mestura de 5 retardantes de chama organofosforados (TiBP, TnBP, TCPP (Σisómeros), TDCPP e TPPO), deseñados como aditivos alternativos de menor toxicidade aos utilizados nos últimos anos. Para elo, expuxéronse cultivos de la microalga a concentracións de 8 (EC25) y 16 (EC50) μg/mL analizando mediante citometría de fluxo diferentes biomarcadores de toxicidade (viabilidade, vitalidade, niveis intracelulares de ROS, pH intracelular, potencial de membrana mitocondrial e potencial de membrana citoplasmática). Os ensaios se realizaron cunha primeira exposición a 8 μg/mL da mestura de OPRFs, analizando os resultados ás 3 e 48 horas. Ademais, estudouse a retirada dos 5 contaminantes do medio por parte de D. tertiolecta, cuantificándoos mediante microextracción líquido-líquido asistida por vórtice realizando a separación e detección con cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas de triplo cuadrupolo con inxección con temperatura programada (VALLME-PTV-GC-MS-MS). Finalmente, para simular una nova descarga de contaminantes, os cultivos previamente tratados a 8 μg/mL da mestura sometéronse a unha segunda exposición de 48h a 16 μg/mL, repetíndose los análises referidos. Os resultados obtidos mostran que la exposición á mestura de 5 OPRFs provoca citotoxicidade sobre a microalga D. tertiolecta, afectando significativamente a todos os biomarcadores ensaiados e o análise dos niveis intracelulares de ROS foi o máis afectado. Ademais, a retirada dos compostos do medio de cultivo microalgal observase xa ás 3 horas de la exposición á mestura de contaminantes, sendo os clorados (TCPP e TDCPP) os que presentan unha menor retirada. Por último, unha segunda exposición á mestura de contaminantes produce unha toxicidade más severa nas células microalgais reexpostas en comparación coas alteracións rexistradas nas microalgas expostas por primeira vez. [Abstract]: Emerging contaminants, such as plastic additives, represent an environmental problem in aquatic ecosystems. Of particular concern is the evidence that their inhabitants, such as microalgae, are exposed, not to a single compound, but to heterogeneous mixtures of pollutants, and repeated discharges are common in coastal waters near urban and/or industrial centers. Based on this, in the present work the potential cytotoxicity on the marine microalga Dunaliella tertiolecta of a mixture of 5 organic phosphorus flame retardant (TiBP, TnBP, TCPP (Σisomers), TDCPP and TPPO), designed as alternative additives of lower toxicity to those used in recent years, was studied. For this purpose, cultures of the microalgae were exposed to concentrations of 8 (EC25) and 16 (EC50) μg/mL analyzing by flow cytometry different biomarkers of toxicity (viability, vitality, intracellular ROS levels, intracellular pH, mitochondrial membrane potential and cytoplasmic membrane potential). The assays were performed with a first exposure to 8 μg/mL of the OPRFs mixture, analyzing the results at 3 and 48 hours. In addition, the removal of the 5 contaminants from the medium by D. tertiolecta was studied, quantifying them by vortex-assisted liquidliquid microextraction performing separation and detection with programmable temperature vaporize-gas chromatography-mass spectrometry of triple quadrupole (VALLME-PTV-GC-MS-MS). Finally, to simulate a new contaminant discharge, the cultures previously treated at 8 μg/mL of the mixture were subjected to a second 48h exposure at 16 μg/mL, repeating the referred analyses. The results obtained show that exposure to the mixture of 5 OPRFs causes cytotoxicity on the microalga D. tertiolecta, significantly affecting all biomarkers tested and being the analysis of intracellular ROS levels the most affected. In addition, the removal of compounds from the microalgal culture medium is observed as early as 3 hours after exposure to the contaminant mixture, with chlorinated compounds (TCPP and TDCPP) showing the least removal. Finally, a second exposure to the contaminant mixture produces a more severe toxicity in the re-exposed microalgal cells compared to the alterations recorded in the microalgae exposed for the first time. Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2020/2021

Introduction: The knowledge about the biology of obesity and apoptosis induction of adipose-derived stem cells (ADSCs) may support in the development of new therapies. Objective: The present research aimed to investigate the toxicogenic effect of all-trans retinoic acid (ATRA) as well as its influence in the adipogenic differentiation and expression of genes related to DNA damage, cell cycle and thermogenesis. Methodology: Cell cultures of human adipose-derived stem cells were treated for 12 hours with ATRA (20.75 μM) and were performed the adipogenic differentiation, comet assay, micronucleous, cell death, cell cycle and qPCR. Results: The ATRA treatment decreased the capacity of adipogenic differentiation of ADSCs. The comet assay demonstrated increase in nucleoid frequency with genomic damage and scoring. However, these damages were not fixed at the chromosome level, since the tail moment was not significant. The treatment with ATRA increased cytotoxicity and increased cell death by apoptosis. The relative expression of CHEK-1, CHEK-2, CDC25A, CDC25C, ATM and ATR decreased and only UCP1 increased significantly. Conclusion: The results of the present study demonstrate that the use of ATRA induces genomic damage in ADSCs, although it was eliminated in the apoptosis process. Therefore, administration of ATRA in ADSCs did not cause chromosomal instability, which suggests toxicogenic safety. Also it was considered that ATRA might active the browning effect. Thus, this compound is considered a promising candidate for the development of novel therapies for the treatment of obesity and / or localized fat by the use of mesotherapy. Introducción: El conocimiento sobre la biología de la obesidad y la inducción de apoptosis de células madre derivadas del tejido adiposo humano puede ayudar en el desarrollo de nuevas terapias. Objetivo: La presente investigación tuvo como objetivo investigar el efecto toxicogenético del ácido transretinoico (ATRA), así como su influencia en la diferenciación adipogénica y la expresión de genes relacionados con el daño del ADN, el ciclo celular y la termogénesis. Metodología: Los cultivos celulares de células madre se trataron durante 12 horas con ATRA (20.75 μM) y se realizó diferenciación adipogénica, ensayo cometa, micronúcleo, muerte celular, ciclo celular y qPCR. Resultados: El tratamiento con ATRA disminuyó la capacidad de diferenciación adipogénica de las células madre. El ensayo del cometa demostró un aumento en la frecuencia de nucleoides con daño genómico. Sin embargo, estos daños no se fijaron a nivel cromosómico, ya que el momento de la cola no fue significativo. El tratamiento con ATRA aumentó la citotoxicidad y aumentó la muerte celular por apoptosis. La expresión relativa de CHEK-1, CHEK-2, CDC25A, CDC25C, ATM y ATR disminuyó y solo UCP1 aumentó significativamente. Conclusión: Los resultados del presente estudio demuestran que el uso de ATRA induce daño genómico en células madre, pero se elimina con el proceso de apoptosis. La administración de ATRA no causó inestabilidad cromosómica, lo que sugiere seguridad toxicogenética. También se consideró que ATRA puede activar el efecto de oscurecimiento de estas células. Así, este compuesto se considera un candidato prometedor para el desarrollo de nuevas terapias para el tratamiento de la obesidad y/o grasa localizada mediante el uso de mesoterapia. Introdução: O conhecimento sobre a biologia da obesidade e indução de apoptose de células-tronco derivadas do tecido adiposo humano pode auxiliar no desenvolvimento de novas terapias. Objetivo: A presente pesquisa teve como objetivo investigar o efeito toxicogenético do ácido all-trans retinóico (ATRA), bem como sua influência na diferenciação adipogênica e expressão de genes relacionados a danos no DNA, ciclo celular e termogênese. Metodologia: Culturas celulares de células-tronco foram tratadas por 12 horas com ATRA (20,75 μM) e foram realizadas a diferenciação adipogênica, ensaio cometa, micronúcleo, morte celular, ciclo celular e qPCR. Resultados: O tratamento com ATRA diminuiu a capacidade de diferenciação adipogênica das células-tronco. O ensaio do cometa demonstrou aumento na frequência de nucleóides com dano genômico. No entanto, esses danos não foram fixados no nível cromossômico, uma vez que o momento de cauda não foi significativo. O tratamento com ATRA aumentou a citotoxicidade e aumentou a morte celular por apoptose. A expressão relativa de CHEK-1, CHEK-2, CDC25A, CDC25C, ATM e ATR diminuiu e apenas UCP1 aumentou significativamente. Conclusão: Os resultados do presente estudo demonstram que o uso de ATRA induz danos genômicos em células-tronco, porém são eliminados com o processo de apoptose. A administração de ATRA não causou instabilidade cromossômica, o que sugere segurança toxicogenética. Também foi considerado que o ATRA pode ativar o efeito de escurecimento dessas células. Assim, este composto é considerado um candidato promissor para o desenvolvimento de novas terapias para o tratamento da obesidade e/ou gordura localizada pelo uso da mesoterapia.

This study reviews the use of Apocynaceae species for cancer and tumor treatment in the Amazon. Databases and books were searched for ethnobotanical and phytochemical evaluations of the cytotoxic and anticancer activities of Apocynaceae species. The literature reports the use of several Amazonian species, such as Asclepias curassavica, Himatanthus articulates, and Macoubea sprucei, in treating tumors and cancers. Phytochemical studies on A. curassavica and H. articulatus have shown their chemical compositions to be variable, possessing cardenolides, iridoids, flavonoids, steroids, and terpenes. Most of the species have not been subjected to in vitro experiments for anticancer activity, and the evaluated species showed moderate-to-weak responses or were inactive. Other studies have shown that iridoids, flavonoids, and steroids are promising as antitumor treatments. The following action mechanisms have been attributed to iridoids: topoisomerase I-DNA complex stabilization, cellular cytoskeleton alteration, and induction of apoptosis. The activities of flavonoids have been reported to include apoptosis induction in liver tumor cells. Some authors suggest that flavonoids reduce oxidative stress cellular response which reduces mitochondrial dysfunction and cell death. In summary, Apocynaceae species appear to be promising as a source for antitumor agents; however, further studies are required to confirm their antitumor activities and to better elucidate the underlying mechanisms involved. Este estudio revisa el uso de especies de Apocynaceae para el tratamiento del cáncer y tumores en la Amazonía. Se buscaron bases de datos y libros para realizar evaluaciones etnobotánicas y fitoquímicas de las actividades citotóxicas y anticancerígenas de las especies de Apocynaceae. La literatura reporta el uso de varias especies amazónicas, como Asclepias curassavica, Himatanthus articulate y Macoubea sprucei, en el tratamiento de tumores y cánceres. Los estudios fitoquímicos sobre A. curassavica y H. articulatus han demostrado que sus composiciones químicas son variables y poseen cardenólidos, iridoides, flavonoides, esteroides y terpenos. La mayoría de las especies no se han sometido a experimentos in vitro para determinar la actividad anticancerosa, y las especies evaluadas mostraron respuestas de moderadas a débiles o estuvieron inactivas. Otros estudios han demostrado que los iridoides, flavonoides y esteroides son prometedores como tratamientos antitumorales. Se han atribuido a los iridoides los siguientes mecanismos de acción: estabilización del complejo topoisomerasa I-ADN, alteración del citoesqueleto celular e inducción de apoptosis. Se ha informado que las actividades de los flavonoides incluyen la inducción de apoptosis en células tumorales hepáticas. Algunos autores sugieren que los flavonoides reducen la respuesta celular al estrés oxidativo, lo que reduce la disfunción mitocondrial y la muerte celular. En resumen, las especies de Apocynaceae parecen prometedoras como fuente de agentes antitumorales; sin embargo, se requieren más estudios para confirmar sus actividades antitumorales y para dilucidar mejor los mecanismos subyacentes involucrados. Este estudo revisa o uso de espécies de Apocynaceae para o tratamento de câncer e tumores na Amazônia. Bancos de dados e livros foram pesquisados para avaliações etnobotânicas e fitoquímicas das atividades citotóxicas e anticâncer de espécies de Apocynaceae. A literatura relata o uso de várias espécies amazônicas, como Asclepias curassavica, Himatanthus articulatus e Macoubea sprucei, no tratamento de tumores e cânceres. Estudos fitoquímicos em A. curassavica e H. articulatus mostraram que suas composições químicas são variáveis, possuindo cardenolideos, iridoides, flavonoides, esteroides e terpenos. A maioria das espécies não foi submetida a experimentos in vitro para atividade anticâncer, e as espécies avaliadas apresentaram respostas moderadas a fracas ou eram inativas. Outros estudos mostraram que iridoides, flavonoides e esteroides são promissores nos tratamentos antitumorais. Os seguintes mecanismos de ação foram atribuídos aos iridóides: estabilização do complexo topoisomerase I-DNA, alteração do citoesqueleto celular e indução de apoptose. Foi relatado que as atividades dos flavonoides incluem a indução de apoptose em células tumorais do fígado. Alguns autores sugerem que os flavonoides reduzem a resposta celular ao estresse oxidativo, o que reduz a disfunção mitocondrial e a morte celular. Em resumo, as espécies Apocynaceae parecem ser promissoras como fonte de agentes antitumorais; no entanto, mais estudos são necessários para confirmar suas atividades antitumorais e para melhor elucidar os mecanismos subjacentes envolvidos.

Canine osteosarcoma is the most common bone tumor in dogs. It has an intense metastatic capacity, and the patient survival rate is low in this disease. Curcumin, the most important compound derived from the plant Curcuma longa L., has been widely studied and has shown considerable antineoplastic effects against many tumors. This study aims to identify the activation of specific proteins of apoptosis pathways, tumor survival, and poor prognosis of this disease in D-17 osteosarcoma cells. For this, the cells were cultured and treated with curcumin at concentrations of 20μM, 50 μM, and 100 μM in prepared and fixed slides. Subsequently, we performed the immunocytochemical analysis with anti-caspase3, anti-JNK, anti-AMPK, anti-p53, anti-AKT, and anti-mTOR antibodies. Curcumin activated the cell-death proteins caspase-3, JNK, and AMPK, reduced the expression of the mutated p53 protein, and did not alter the AKT and mTOR proteins in canine osteosarcoma cells in vitro. Thus, curcumin induces extrinsic apoptosis mediated by caspase, JNK, and cAMP/AMPK in canine osteosarcoma cells. Besides, it has the potential to improve the tumor prognosis of this disease by inactivating the mutated p53. However, it does not interfere with AKT/mTOR expression, related to tumor proliferation and survival. Such results will serve as a basis for future studies that analyze the effect of curcumin in vivo on this disease. El osteosarcoma canino es el tumor óseo más común en perros. Tiene una intensa capacidad metastásica y la supervivencia del paciente es baja en esta enfermedad. La curcumina, el compuesto más importante derivado de la planta Curcuma longa L., ha sido ampliamente estudiado y ha mostrado efectos antineoplásicos considerables contra varios tumores. Este estudio tiene como objetivo identificar la activación de proteínas específicas de las vías de apoptosis, supervivencia tumoral y mal pronóstico de esta enfermedad en células OSC del linaje D-17. Para ello, las células se cultivaron y trataron con curcumina a concentraciones de 20 μM, 50 μM y 100 μM en portaobjetos, que se prepararon y fijaron. Posteriormente, se realizó la técnica de inmunocitoquímica con anticuerpos anti-caspasa3, anti-JNK, anti-AMPK, anti-p53, anti-AKT y anti-mTOR. Se observó que la curcumina activó en células de osteosarcoma canino in vitro las proteínas de muerte celular caspasa-3, JNK y AMPK, redujo la expresión de la proteína p53 mutada y no alteró las proteínas AKT y mTOR. Así, se encontró que la curcumina promueve la apoptosis extrínseca mediada por caspasa, JNK y cAMP / AMPK en células de osteosarcoma canino. Además, tiene el potencial de mejorar el pronóstico tumoral de esta enfermedad al inactivar el p53 mutado. Sin embargo, no interfiere con la expresión de AKT / mTOR, relacionada con la proliferación y supervivencia tumoral. Tales resultados servirán de base para futuros estudios que analicen el efecto de la curcumina in vivo sobre esta enfermedad. O osteossarcoma canino é o tumor ósseo mais comum em cães. Ele apresenta intensa capacidade metastásica e a sobrevida do paciente é baixa nessa doença. A curcumina, o composto mais importante derivado da planta Curcuma longa L., tem sido amplamente estudada e mostrou efeitos antineoplásicos consideráveis contra vários tumores. Este estudo tem por objetivo identificar a ativação de proteínas específicas de vias de apoptose, sobrevivência tumoral e mau prognóstico dessa doença em células OSC da linhagem D-17. Para isso, as células foram cultivadas e tratadas com a curcumina nas concentrações de 20μM, 50 μM e 100 μM em lâminas, que foram preparadas e fixadas. Posteriormente, foi realizada a técnica de imucitoquímica, com os anticorpos anti-caspase3, anti-JNK, anti-AMPK, anti-p53, anti-AKT e anti-mTOR. Foi observado que a curcumina ativou em células de osteossarcoma canino in vitro as proteínas de morte celular caspase-3, JNK e AMPK, reduziu a expressão da proteína p53 mutada e não alterou as proteínas AKT e mTOR. Assim, verificou-se que a curcumina promove apoptose extrínseca mediada por caspase, JNK e cAMP/AMPK em células de osteossarcoma canino. Além disso, tem o potencial de melhorar o prognóstico tumoral dessa doença por inativação da p53 mutada. No entanto, ela não interfere na expressão de AKT/mTOR, relacionado a proliferação e sobrevivência tumoral. Tais resultados servirão de base para estudos futuros que analisem o efeito da curcumina in vivo nessa doença.

The objective of this work was to evaluate the antiparasitic potential and cytotoxic effect of extracts by the leaves and roots of S. tuberosa. The results show that the extracts of S. tuberosa have low antipromastigote activity against strains of L. braziliensis, since there was no action at concentrations ≤ 500 µg/mL. While for L. infantum there was a significant action of the hydroalcoholic extract of the roots against promastigote forms, since there was 29.33 ± 1.94% of mortality for the treatment of 1000 µg/mL. The same extract showed antiepimastigote action against T. cruzi at a concentration ≥ 1000 µg/mL. Despite the low antiparasitic activities, it is possible to observe that the extracts of S. tuberosa have no cytotoxic action, except the hydroalcoholic extract of the roots. In this extract there was a total of 27.85 ± 2.41% of cytotoxicity against fibroblastic cells, in the highest concentration evaluated (1000 µg/mL). El objetivo de este trabajo fue evaluar el potencial antiparasitario y efecto citotóxico de extractos de hojas y raíces de S. tuberosa. Los resultados muestran que los extractos de S. tuberosa tienen baja actividad antipromastigota contra cepas de L. braziliensis, ya que no hubo acción a concentraciones ≤ 500 µg/mL. Mientras que para L. infantum hubo una acción significativa del extracto hidroalcohólico de las raíces contra las formas de promastigote, ya que hubo 29.33 ± 1.94% de mortalidad para el tratamiento de 1000 µg / mL. El mismo extracto mostró acción antiepimastigota contra T. cruzi a una concentración ≥ 1000 µg/mL. A pesar de las bajas actividades antiparasitarias, es posible observar que los extractos de S. tuberosa no tienen acción citotóxica, excepto el extracto hidroalcohólico de las raíces. En este extracto hubo un total de 27.85 ± 2.41% de citotoxicidad contra células fibroblásticas, en la concentración más alta evaluada (1000 µg/mL). O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antiparasitário e o efeito citotóxico de extratos de folhas e raízes de S. tuberosa. Os resultados mostram que os extratos de S. tuberosa apresentam baixa atividade antipromastigota contra cepas de L. braziliensis, uma vez que não houve ação em concentrações ≤ 500 µg/mL. Já para L. infantum houve uma ação significativa do extrato hidroalcoólico das raízes contra as formas promastigotas, já que houve 29,33 ± 1,94% de mortalidade para o tratamento de 1000 µg/mL. O mesmo extrato apresentou ação antiepimastigota contra T. cruzi na concentração ≥ 1000 µg/mL. Apesar da baixa atividade antiparasitária, é possível observar que os extratos de S. tuberosa não apresentam ação citotóxica, exceto o extrato hidroalcoólico das raízes. Neste extrato houve um total de 27,85 ± 2,41% de citotoxicidade contra células fibroblásticas, na maior concentração avaliada (1000 µg/mL).

[Resumo]: As actividades humanas xeran multitude de compostos contaminantes que acaban chegando ás augas, provocando efectos negativos sobre os ecosistemas acuáticos, os organismos que habitan neles e sobre a nosa saúde. Estes pódense clasificar en prioritarios, como a atrazina (ATZ), un herbicida cuxa presenza no ambiente está regulada por lei; e emerxentes, como a benzofenona-3 (BP-3), o bisfenol A (BPA) e a oxitetraciclina (OTC), que se corresponden con un filtro solar, un aditivo químico e un antibiótico, respectivamente, os cales non dispoñen dunha lexislación que rexa a súa presenza no medio. No presente traballo estudarase a resposta da microalga de auga doce, "Chlamydomonas reinhardtii", a estes catro compostos tras 24 h de exposición, para poder determinar se existe unha resposta universal por parte desta a tódolos contaminantes citados. Para isto, examináronse distintos parámetros en relación aos posibles efectos citotóxicos provocados, tales como: crecemento celular, propiedades intrínsecas das células, viabilidade e vitalidade celular, potencial de membrana citoplasmática, produción de ROS, peroxidación lipídica e rendemento ou eficacia fotosintética. Os resultados evidenciaron a toxicidade dos catro contaminantes ensaiados sobre a microalga, desencadeando a mesma resposta para os parámetros: taxa de crecemento, fluorescencia da clorofila a, vitalidade celular, potencial de membrana e rendemento fotosintético. Ademais, pódense diferenciar dous grupos de contaminantes, por un lado o BP-3 e o BPA, que afectaron a tódolos parámetros cun mesmo patrón de resposta, e por outro a OTC e a ATZ, que mostraron un patrón de resposta moi similar entre elas e uns niveis de viabilidade e ROS sen alteracións respecto aos controis. [Resumen]: Las actividades humanas generan multitud de compuestos contaminantes que acaban llegando a las aguas, provocando efectos negativos sobre los ecosistemas acuáticos, los organismos que habitan en ellos y sobre nuestra salud. Estos se pueden clasificar en prioritarios, como la atrazina (ATZ), un herbicida cuya presencia en el ambiente está regulada por ley; y emergentes, como la benzofenona-3 (BP-3), el bisfenol A (BPA) y la oxitetraciclina (OTC), que se corresponden con un filtro solar, un aditivo químico y un antibiótico, respectivamente, que no disponen de una legislación que rija su presencia en el medio. En el presente trabajo se estudiará la respuesta de la microalga de agua dulce, "Chlamydomonas reinhardtii", a estos cuatro compuestos tras 24 h de exposición, para poder determinar si existe una respuesta universal por parte de ésta a todos los contaminantes citados. Para esto se examinaron distintos parámetros en relación a los posibles efectos citotóxicos provocados, tales como: crecimiento celular, propiedades intrínsecas de las células, viabilidad y vitalidad celular, potencial de membrana citoplasmática, producción de ROS, peroxidación lipídica y rendimiento o eficacia fotosintética. Los resultados evidenciaron la toxicidad de los cuatro contaminantes ensayados sobre la microalga, desencadenando la misma respuesta par los parámetros: tasa de crecimiento, fluorescencia de la clorofila a, vitalidad celular, potencial de membrana y rendimiento fotosintético. Además, se pueden diferenciar dos grupos de contaminantes, por un lado el BP-3 y el BPA, que afectaron a todos los parámetros con un mismo patrón de respuesta, y por otro la OTC y la ATZ, que mostraron un patrón de respuesta muy similar entre ellas y unos niveles de viabilidad y ROS sin alteraciones con respecto a los controles. [Abstract]: Human activities generate a multitude of polluting compounds that end up reaching the waters, causing negative effects on aquatic ecosystems, on the organisms that inhabit them and on our health. These can be classified as priority pollutants, such as atrazine (ATZ), a herbicide whose presence in the environment is regulated by law; and emerging pollutants, such as benzophenone-3 (BP-3), bisphenol A (BPA) and oxytetracycline (OTC), which correspond to a sunscreen, a chemical additive and an antibiotic, respectively, that do not have legislation governing its presence in the environment. In this paper we will study the response of the freshwater microalga, "Chlamydomonas reinhardtii", to these four compounds after 24 hours of exposure, in order to determine if there is a universal response by the latter to all the pollutants aforementioned. For this purpose, different parameters have been examined in relation to the possible cytotoxic effects caused, such as: cell growth, intrinsic cell properties, cell viability and vitality, cytoplasmic membrane potential, ROS production, lipid peroxidation and photosynthetic performance or efficiency. The results proved the toxicity of the four pollutants tested on the microalgae, triggering the same response for the parameters: growth rate, chlorophyll a fluorescence, cell vitality, membrane potential and photosynthetic performance. In addition, two groups of pollutants can be distinguished. On the one hand the BP-3 and the BPA, which affected all the parameters with the same response pattern, and on the other the OTC and the ATZ, which showed a similar response pattern and levels of viability and ROS without alterations with respect to controls. Ministerio de Ciencia y Universidades; CTM2017-88668-R Traballo fin de mestrado (UDC.CIE). Biotecnoloxía avanzada. Curso 2019/2020

Traballo Fin de Grao en Veterinaria. Curso 2019/2020 Los azaspirácidos son ficotoxinas marinas producidas por dinoflagelados del fitoplancton pertenecientes principalmente a los géneros Azadinium y Amphidoma. Este grupo de toxinas marinas, identificado por primera vez a finales del pasado siglo, comprende en la actualidad más de 60 análogos químicos, que pueden acumularse en la cadena trófica produciendo intoxicaciones alimentarias en humanos. Actualmente, el mecanismo de acción de estas toxinas se desconoce por completo, si bien múltiples estudios llevados a cabo durante losúltimos años, han demostrado que estas toxinas producían efectos citotóxicos in vitro y provocaban cambios en la morfología celular, afectando principalmente al citoesqueleto de actina. En este trabajo se han estudiado los efectos in vitro de dos de los principales análogos de los azaspirácidos, cuyos límites en productos pesqueros están regulados en la legislación europea vigente, empleando dos modelos de líneas celulares humanas (células embrionarias de riñón y células de neuroblastoma). Los resultados obtenidos en este trabajo, empleando dos ensayos de citotoxicidad diferentes, sugieren que los principales efectos celulares de los azaspirácidos están relacionados con alteraciones en la adhesión celular y en la actividad metabólica, así como con modificaciones en la estructura del citoesqueleto celular. No obstante,se necesitan estudios adicionales para dilucidar completamente el mecanismo de acción de esteamplio grupo de toxinas marinas. Os azaspirácidos son ficotoxinas mariñas producidas por dinoflaxelados do fitoplancto pertencentes principalmente aos xéneros Azadinium e Amphidoma. Este grupo de toxinas mariñas, identificado por primeira vez a finais do século pasado, actualmente comprende máis de 60 análogos químicos, que poden acumularse na cadea trófica producindo intoxicacións alimentarias en humanos. Actualmente, o mecanismo de acción destas toxinas descoñecese por completo, aínda que, múltiples estudos realizados nos últimos anos, demostraron que estas toxinas producían efectos citotóxicos in vitro e provocaban cambios na morfoloxía celular, afectando principalmente ao citoesqueleto de actina. Neste traballo estudáronse os efectos in vitro de dous dos principais análogos dos azaspirácidos, con límites nos productos da pesca regulados na lexislación europea vixente, utilizando dous modelos de liñas celulares humanas (células embrionarias de ril e células de neuroblastoma). Os resultados obtidos neste traballo, emprengando dous ensaios de citotoxicidade diferentes, suxiren que os principais efectos celulares dos azaspirácidos están relacionados con alteracións na adhesión celular e na actividade metabólica, así como con modificacións na estrutura do citoesqueleto celular. Non obstante, son necesarios estudos adicionais para dilucidar completamente o mecanismo de acción deste amplo grupo de toxinas mariñas. Azaspiracids are marine phycotoxins produced by phytoplankton dinoflagellates belonging mainly to the Azadinium and Amphidoma genera. This group of marine toxins, first identified at the end of the last century, currently comprises more than 60 chemical analogues, which can accumulate in the trophic chain, causing human food intoxications. Currently, the mechanism of action of these toxins is completely unknown, although multiple studies performed in recent years, have shown that these toxins produced cytotoxic effects in vitro and caused changes in cell morphology, mainly affecting the actin cytoskeleton. In this work we have studied the in vitro effects of two of the main analogues of azaspiracids, whose limits in fishery products are regulated in the current European legislation, using two models of human cell lines (kidney embryonic cells and neuroblastoma cells). The results presented in this work, using two different cytotoxicity assays, suggests that the main effects of azaspiracids are related to alterations in cell adhesion and metabolic activity, as well as with modifications in the structure of the actin cytoskeleton. However, additional studies are needed to fully elucidate the mechanism of action of this broad group of marine toxins.

[Resumo]: As actividades humanas xeran multitude de compostos contaminantes que acaban chegando ás augas, provocando efectos negativos sobre os ecosistemas acuáticos, os organismos que habitan neles e sobre a nosa saúde. Estes pódense clasificar en prioritarios, como a atrazina (ATZ), un herbicida cuxa presenza no ambiente está regulada por lei; e emerxentes, como a benzofenona-3 (BP-3), o bisfenol A (BPA) e a oxitetraciclina (OTC), que se corresponden con un filtro solar, un aditivo químico e un antibiótico, respectivamente, os cales non dispoñen dunha lexislación que rexa a súa presenza no medio. No presente traballo estudarase a resposta da microalga de auga doce, "Chlamydomonas reinhardtii", a estes catro compostos tras 24 h de exposición, para poder determinar se existe unha resposta universal por parte desta a tódolos contaminantes citados. Para isto, examináronse distintos parámetros en relación aos posibles efectos citotóxicos provocados, tales como: crecemento celular, propiedades intrínsecas das células, viabilidade e vitalidade celular, potencial de membrana citoplasmática, produción de ROS, peroxidación lipídica e rendemento ou eficacia fotosintética. Os resultados evidenciaron a toxicidade dos catro contaminantes ensaiados sobre a microalga, desencadeando a mesma resposta para os parámetros: taxa de crecemento, fluorescencia da clorofila a, vitalidade celular, potencial de membrana e rendemento fotosintético. Ademais, pódense diferenciar dous grupos de contaminantes, por un lado o BP-3 e o BPA, que afectaron a tódolos parámetros cun mesmo patrón de resposta, e por outro a OTC e a ATZ, que mostraron un patrón de resposta moi similar entre elas e uns niveis de viabilidade e ROS sen alteracións respecto aos controis. [Resumen]: Las actividades humanas generan multitud de compuestos contaminantes que acaban llegando a las aguas, provocando efectos negativos sobre los ecosistemas acuáticos, los organismos que habitan en ellos y sobre nuestra salud. Estos se pueden clasificar en prioritarios, como la atrazina (ATZ), un herbicida cuya presencia en el ambiente está regulada por ley; y emergentes, como la benzofenona-3 (BP-3), el bisfenol A (BPA) y la oxitetraciclina (OTC), que se corresponden con un filtro solar, un aditivo químico y un antibiótico, respectivamente, que no disponen de una legislación que rija su presencia en el medio. En el presente trabajo se estudiará la respuesta de la microalga de agua dulce, "Chlamydomonas reinhardtii", a estos cuatro compuestos tras 24 h de exposición, para poder determinar si existe una respuesta universal por parte de ésta a todos los contaminantes citados. Para esto se examinaron distintos parámetros en relación a los posibles efectos citotóxicos provocados, tales como: crecimiento celular, propiedades intrínsecas de las células, viabilidad y vitalidad celular, potencial de membrana citoplasmática, producción de ROS, peroxidación lipídica y rendimiento o eficacia fotosintética. Los resultados evidenciaron la toxicidad de los cuatro contaminantes ensayados sobre la microalga, desencadenando la misma respuesta par los parámetros: tasa de crecimiento, fluorescencia de la clorofila a, vitalidad celular, potencial de membrana y rendimiento fotosintético. Además, se pueden diferenciar dos grupos de contaminantes, por un lado el BP-3 y el BPA, que afectaron a todos los parámetros con un mismo patrón de respuesta, y por otro la OTC y la ATZ, que mostraron un patrón de respuesta muy similar entre ellas y unos niveles de viabilidad y ROS sin alteraciones con respecto a los controles. [Abstract]: Human activities generate a multitude of polluting compounds that end up reaching the waters, causing negative effects on aquatic ecosystems, on the organisms that inhabit them and on our health. These can be classified as priority pollutants, such as atrazine (ATZ), a herbicide whose presence in the environment is regulated by law; and emerging pollutants, such as benzophenone-3 (BP-3), bisphenol A (BPA) and oxytetracycline (OTC), which correspond to a sunscreen, a chemical additive and an antibiotic, respectively, that do not have legislation governing its presence in the environment. In this paper we will study the response of the freshwater microalga, "Chlamydomonas reinhardtii", to these four compounds after 24 hours of exposure, in order to determine if there is a universal response by the latter to all the pollutants aforementioned. For this purpose, different parameters have been examined in relation to the possible cytotoxic effects caused, such as: cell growth, intrinsic cell properties, cell viability and vitality, cytoplasmic membrane potential, ROS production, lipid peroxidation and photosynthetic performance or efficiency. The results proved the toxicity of the four pollutants tested on the microalgae, triggering the same response for the parameters: growth rate, chlorophyll a fluorescence, cell vitality, membrane potential and photosynthetic performance. In addition, two groups of pollutants can be distinguished. On the one hand the BP-3 and the BPA, which affected all the parameters with the same response pattern, and on the other the OTC and the ATZ, which showed a similar response pattern and levels of viability and ROS without alterations with respect to controls. Ministerio de Ciencia y Universidades; CTM2017-88668-R Traballo fin de mestrado (UDC.CIE). Biotecnoloxía avanzada. Curso 2019/2020

Platonia insignis Mart. is a vegetable of the Clusiaceae Lindl., family that is popularly known as “bacuri” in Brazil. It is widely used in folk medicine to treat human diarrheas and inflammatory diseases. It has antiparasitic activity, antioxidant, anticarcinogenic action, in addition to vasorelaxant potential. The present study investigates the leishmanicidal, cytotoxic and genotoxic activities in different biological systems, as well as the chemical constituents of hexane extract from P. insignis seeds. The analysis of the non-volatile constituents was analyzed by GC/MS. A total of sixteen main constituents were detected in the saponifiable material (fatty acid methyl esters, ethyl ester, alcohols and hydrocarbons). In unsaponifiable fraction, nineteen constituents were detected, including a series of n-alkanes and prenylated xanthones gamma-mangostin as main component (70.23% of the total components). The results indicated that the seed hexane extract significantly inhibits the growth of promastigote forms of Leishmania amazonensis (IC50), displayed a significant toxicity against Artemia salina Leach and cytotoxicity and genotoxicity in V79 cell lines. Platonia insignis Mart. es un vegetal miembro de la familia Clusiaceae Lindl., que se conoce popularmente como "bacuri" en Brasil. Se usa ampliamente en la medicina popular para tratar las diarreas humanas y las enfermedades inflamatorias. Tiene actividad antiparasitaria, antioxidante, acción anticancerígena, además de potencial vasorrelajante. El presente estudio investiga las actividades leishmanicidas, citotóxicas y genotóxicas en diferentes sistemas biológicos, así como los componentes químicos del extracto de hexano de semillas de P. insignis. El análisis de los constituyentes no volátiles fue analizado por GC/MS. Se detectaron un total de dieciséis componentes principales en el material saponificable (ésteres metílicos de ácidos grasos, ésteres etílicos, alcoholes e hidrocarburos). En la fracción insaponificable se detectaron diecinueve constituyentes, entre ellos una serie de n-alcanos y xantonas preniladas gamma-mangostina como componente principal (70,23% del total de componentes). Los resultados indicaron que el extracto de semilla de hexano inhibe significativamente el crecimiento de formas promastigotas de Leishmania amazonensis (IC50), mostró una toxicidad significativa contra Artemia salina Leach y citotoxicidad y genotoxicidad en líneas celulares V79. Platonia insignis Mart. é um vegetal da família Clusiaceae Lindl., popularmente conhecida como “bacuri” no Brasil. É amplamente utilizado na medicina popular para tratar diarreias humanas e doenças inflamatórias. Possui atividade antiparasitária, ação antioxidante, anticarcinogênica, além de potencial vasorrelaxante. O presente estudo investiga as atividades leishmanicida, citotóxica e genotóxica em diferentes sistemas biológicos, bem como os constituintes químicos do extrato hexânico de sementes de P. insignis. A análise dos constituintes não voláteis foi analisada por CG/EM. Um total de dezesseis constituintes principais foram detectados no material saponificável (ésteres metílicos de ácidos graxos, éster etílico, álcoois e hidrocarbonetos). Na fração insaponificável, dezenove constituintes foram detectados, incluindo uma série de n-alcanos e xantonas preniladas gama-mangostina como componente principal (70,23% dos componentes totais). Os resultados indicaram que o extrato de hexano da semente inibe significativamente o crescimento das formas promastigotas de Leishmania amazonensis (CI50), apresentou toxicidade significativa contra Artemia salina Leach e citotoxicidade e genotoxicidade em linhagens celulares V79.

Reactive Black 5 (RB5) is an azo dye widely used in the textile industry because of its high chemical stability. Since it does not entirely fix on the fabrics, it pollutes water sources. In this work, the decolorization of aqueous solutions with RB5 was performed by heterogeneous photocatalysis with TiO2/UV. The reaction was carried out in an aluminum photoreactor equipped with five lamps. The effect of TiO2 (0.1, 0.175, and 0.25 g L-1), RB5 concentration (50, 75, and 100 mg L-1), and pH (3, 7, and 11) was evaluated for 14 h, using a Box–Behnken experimental statistical design. Complete decolorization of RB5 was obtained at 14 h, employing 0.175 g L-1 TiO2, 50 mg L-1 RB5, and pH 3. A 98.44% of decolorization was achieved in 10 h (0.25 g L-1 of TiO2, 50 mg L-1 of RB5, and pH 7). The highest decolorization percentage of RB5 (99.51%) was obtained at 10 h of exposure to UV light, using 0.5 g L-1 of TiO2, 50 mg L-1 of the dye, and a pH of 3. Cytotoxicity tests on the HepG2 cell line indicated that photocatalytic degradation of RB5 did not generate cytotoxic byproducts. El Negro Remazol B (NRB) es un colorante azoico, usado en la industria textil por su estabilidad química. Este tinte no se fija al 100%, ocasionando contaminación en el agua. En este trabajo se evaluó la decoloración de soluciones acuosas con NRB mediante fotocatálisis heterogénea con TiO2/UV. La reacción se realizó en un fotorreactor de aluminio equipado con cinco lámparas. El efecto de la concentración de TiO2 (0,1; 0,175 y 0,25 g L-1), y NRB (50, 75 y 100 mg L-1) y el pH (3, 7 y 11) fue evaluado durante 14 h, tomando un diseño estadístico experimental Box-Behnken. La decoloración completa del NRB se obtuvo después de 14 h (0,175 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 de NRB, y pH 3). Se alcanzó un 98,44% de decoloración después de 10 h (0,25 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 de NRB, y pH 7). Se encontró que el mejor porcentaje de decoloración del NRB (99,51%) se obtuvo a las 10 h de exposición a luz UV, utilizando 0,5 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 del colorante y un pH de 3. Los ensayos de citotoxicidad sobre la línea celular HepG2 indicaron que la degradación fotocatalítica del NRB no generó subproductos citotóxicos. O Negro Remazol B (RNB) é um corante azoico usado na indústria têxtil pela sua estabilidade química. O corante não é fixo no tecido em 100%, então contamina as fontes de água. Neste trabalho, avaliou-se a descoloração de soluções aquosas com RNB por meio de fotocatálise heterogênea com TiO2/UV. A reação foi feita no fotoreactor de alumínio com cinco lâmpadas. O efeito da concentração de TiO2 (0,1; 0,175 e 0,25 g L-1), RNB (50, 75 e 100 mg L-1) e pH (3, 7 e 11) foi avaliado durante 14 h utilizando o modelo estatístico Box-Behnken. Ás 14 h, foi atingida a descoloração completa do RNB (pH 3; 0,175 g L-1 de TiO2 e 50 mg L-1 de RNB). Utilizando 0,25 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 de RNB e pH 7, obteve-se descoloração de 98,44% em 10 h. Encontrou-se que a melhor porcentagem de descoloração do RNB (91,51%) foi obtida com 10 h de exposição à luz UV usando 0,5 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 do corante e pH de 3. Adicionalmente, os testes de citotoxicidade na linha celular HepG2 mostraram que a degradação fotocatalítica do RNB não gerou subprodutos citotóxicos.

Stemodia maritima L., is a shrub of the Plantaginaceae family, with some biological activities already described, such as: larvicide, antimicrobial, and anti-inflammatory. Thus, the objective of this work was to evaluate the antioxidant, and gastroprotective activities of the ethyl acetate extract from S. maritima. The phytochemical profile was investigated through the quantification of total phenolic compounds, flavonoids, and CCD analysis. The toxicity of the extract was performed through cell viability using L929 line cell, and acute toxicity by the OECD Guide 423. The antioxidant activity was analyzed by the methods of reduction of the ferric ion (FRAP), total antioxidant activity (TAA), and the gastroprotective activity by the absolute ethanol-induced gastric ulcer model, with analysis of NO, MDA, GSH and MPO levels in the stomach tissues. In the phytochemical profile it was possible to identify the presence of flavonoids, triterpenes, steroids, mono, and sesquiterpenes. The extract was not cytotoxic against L929 lineage, maintaining cell viability above 70% at the doses tested, and in acute toxicity it did not show physiological changes indicative of toxicity compared to the control group. The extract presented antioxidant activity of 157.3 ± 9.7 mg equivalent of Trolox/g of extract in the FRAP method, and 50.0 ± 1.1 % by TAA. The ethyl acetate extract of S. maritima, at the doses tested, reduced the ulcerative lesion index compared to the injured control group, increased the levels of NO and GSH, and was able to decrease the concentrations of MDA and MPO, enhancing their gastroprotective activity. Stemodia maritima L., es un arbusto de la familia Plantaginaceae, con algunas actividades biológicas ya descritas, tales como: larvicidas, antimicrobianas y antiinflamatorias. Así que, el objetivo de este trabajo fue evaluar las actividades antioxidantes y gastroprotectoras del extracto de acetato de etilo de S. marítima. El perfil fitoquímico se investigó a través de la dosificación de compuestos fenólicos totales, flavonoides y análisis de CCD. La toxicidad del extracto se realizó a través de la viabilidad celular con L929 y toxicidad aguda utilizando la Guía 423 de la OCDE. La actividad antioxidante se analizó mediante los métodos de reducción del ion férrico (FRAP) y la actividad antioxidante total (AAT), y la actividad gastroprotectora por el modelo de úlcera gástrica inducida por etanol absoluto, con evaluación de niveles de NO, MDA, GSH y MPO de los tejidos estomacales. En el perfil fitoquímico fue posible identificar flavonoides, triterpenos, esteroides, mono y sesquiterpenos. El extracto no fue citotóxico contra el linaje L929, manteniendo la viabilidad celular por encima del 70% en las dosis probadas y en la toxicidad aguda no mostró cambios fisiológicos que indicaran toxicidad en comparación con el control. El extracto presentó una actividad antioxidante de 157,3 ± 9,74 mg equivalentes de Trolox/g de extracto en el método FRAP y 50,0 ± 1,1 % por AAT. El extracto de acetato de etilo de S. maritima, a las dosis probadas, redujo el índice de lesión ulcerosa en relación con el grupo control lesionado, aumentó los niveles de NO y GSH y fue capaz de disminuir las concentraciones de MDA y MPO, destacando su actividad gastroprotectora. Stemodia maritima L., é um arbusto da família Plantaginaceae, com algumas atividades biológicas já descritas, como: larvicida, antimicrobiana e anti-inflamatória. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades antioxidante e gastroprotetora do extrato acetato de etila de S. maritima. O perfil fitoquímico foi investigado através da dosagem de compostos fenólicos totais, flavonoides e análise por CCD. A toxicidade do extrato foi feita por meio da análise de viabilidade celular com linhagem L929 e a toxicidade aguda pelo Guia OECD 423. A atividade antioxidante foi analisada pelos métodos de redução do íon férrico (FRAP) e atividade antioxidante total (AAT), e a atividade gastroprotetora pelo modelo de úlcera gástrica induzida por etanol absoluto, com avaliação dos níveis de NO, MDA, GSH e MPO nos tecidos dos estômagos. No perfil fitoquímico foi possível identificar a presença de flavonoides, triterpenos, esteroides, mono e sesquiterpenos. O extrato não foi citotóxico frente à linhagem L929, mantendo a viabilidade celular acima de 70% nas doses testadas, e na toxicidade aguda não apresentou alterações fisiológicas indicativas de toxicidade em comparação com o grupo controle. O extrato apresentou atividade antioxidante de 157,3 ± 9,7 mg equivalente de Trolox/g de extrato no método de FRAP, e de 50,0 ± 1,1 % pelo AAT. O extrato acetato de etila de S. maritima, nas doses testadas, reduziu o índice de lesão ulcerativa em relação ao grupo controle lesionado, aumentou os níveis de NO e GSH e foi capaz de diminuir as concentrações de MDA e MPO, acentuando sua atividade gastroprotetora.

Bacteria of Streptomyces genus are a promising source of biologically active products, with applications in medicine, industry and agriculture. Therefore, the objective of this work was to evaluate the cytotoxic, antioxidant and antimicrobial activities of fermented rice extract and their semipurified fractions from Streptomyces spp. isolated of the rhizosphere of Paullinia cupana, Amazon-Brazil. For this, a bioguided study was carried out by the cytotoxic activity with methanolic extract of Streptomyces sp. ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) partitioned with n-hexane, ethyl acetate and 2-butanol. The antioxidant activity was analyzed using the DPPH, ABTS and phosphomolybdenum methods, while the antimicrobial activity was investigated by microdilution method to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against species of bacteria and yeast. In the cytotoxicity test, the butanolic phase (FbuOH-12H) presented IC50 of 1.1 µg/mL against MOLT-4, with cell death probably by apoptosis, but did not cause cytotoxicity on peripheral blood mononuclear cell (PBMC) or human erythrocytes. Chemical prospecting detected the presence of saponins and reducing sugars on 2-butanol fraction (FBuOH-12H), which can be related to cytotoxicity. On the antioxidant activity by ABTS, the partition with ethyl acetate (FAcOEt-12H) showed antioxidant capacity of 1161.7 ± 0.04 µM of Trolox/g of extract, indicating an expressive reactivity of the phase with this radical. The aqueous phases (from hexane, ethyl acetate and methanol extracts) were active in all tested microorganisms, except E. faecalis. Las bacterias del género Streptomyces son una fuente prometedora de productos biológicamente activos, con aplicaciones en medicina, industria y agricultura. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue evaluar las actividades citotóxicas, antioxidantes y antimicrobianas de los extractos y fracciones semipurificadas de Streptomyces spp. aislada de la rizósfera de Paullinia cupana, Amazonas-Brasil. Para ello, se realizó un estudio bioguiado de la actividad citotóxica con extracto metanólico de Streptomyces sp. El extracto ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) fue fraccionado con n-hexano, acetato de etilo y 2-butanol. La actividad antioxidante fue analizada a través de los métodos de DPPH, ABTS y fosfomolibdeno, mientras que la actividad antimicrobiana fue investigada por el método de microdilución para determinar la concentración minima inhibitoria (MIC) contra especies de bacterias y levaduras. En la prueba de citotoxicidad la fase butanólica (FbuOH-12H) presentó una IC50 de 1.1 µg/mL contra MOLT-4, con muerte celular probablemente por apoptosis, pero no causó citotoxicidad en las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) o en eritrocitos humanos, La prospección química detectó la presencia de saponinas y azúcares reductores en la fracción de 2-butanol (FBuOH-12H), que pueden estar relacionados con la citotoxicidad. Sobre la actividad antioxidante por ABTS, la fracción de acetato de etilo (FAcOEt-12H) mostró una capacidad antioxidante de 1161.7 ± 0.04 µM de Trolox/g de extracto, indicando una expresiva reactividad de la fase con este radical. Las fases acuosas (de los extractos de hexano, acetato de etilo y metanol) fueron activas en todos los microorganismos probados, excepto E. faecalis. As bactérias de gênero Streptomyces são fontes promissoras de produtos biologicamente ativos, com aplicações na medicina, indústria e agricultura. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades citotóxica, antioxidante e antimicrobiana do extrato fermentado em arroz e suas frações semipurificadas de Streptomyces spp. isolado da rizosfera de Paullinia cupana, Amazônia, Brasil. O estudo bioguiado foi realizado através da atividade citotóxica com o extrato metanólico de Streptomyces sp. ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) particionado com n-hexano, acetato de etila e 2-butanol. A atividade antioxidante foi analizada pelos métodos do DPPH, ABTS e fosfomilibidênio, enquanto que a atividade antimicrobiana foi feita pelo método da microdiluição para determinar a concentração inibitória minima (MIC) frente a espécies de bactérias e levedura. No teste de citotoxicidade, a fase butanólica (FbuOH-12H) apresentou IC50 de 1,1 µg/mL frente à linhagem MOLT-4, com morte celular provavelmente por apoptose, mas não causou citotoxicidade em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) nem em eritrócitos humanos. A prospecção fitoquímica detectou a presença de saponinas e açúcares redutores na fração 2-butanol (FBuOH-12H), e estes compostos podem estar relacionados à citotoxicidade. Na atividade antioxidante pelo ABTS, a partição com acetato de etila (FAcOEt-12H) apresentou capacidade antioxidante de 1161,7 ± 0,04 µM de Trolox/g do extrato, indicando uma expressiva reatividade da fase com este radical. A fase aquosa (dos extratos hexano, acetate de etila e metanol) foi ativa para todos os microrganismos testados, exceto E. faecalis.

The Catingueiro, Cristalino and Ligeiro Rivers, present in the eastern region of Cianorte, Paraná, Brazil, are under constant influence of industrial effluents and agrochemicals. In 2022, the public supply of this municipality will be made by waters of the Ligeiro River, and the sites predicted for abstraction are close to the sites of confluence of the Catingueiro River and the Cristalino River with the Ligeiro River. We evaluated in two periods of 2020, based on different parameters, the water quality of the Catingueiro River at two sites, P1 and P2 (P2, upstream of the confluence), the Cristalino River in one site, P3, and the Ligeiro River at two sites, P4 and P5 (P5, downstream of the confluence). Levels of nitrite, nitrate and sulfate in waters were within the range set by law. All points had a high concentration of fluorides and phosphato in the two collections. In P1, in both collections, a high concentration of copper was found. P1 and P2, in the second collection, presented high levels of aluminum. Silicon was detected at all sites. Waters were phytotoxic to L. sativa and cytotoxic to the root meristems of A. cepa. Physical-chemical and toxicity analyses suggest a compromise in water quality. These data are an alert to the public authorities of Cianorte and Paraná regarding the anthropic actions carried out in these rivers and alert the sanitation company to carry out a preliminary and periodic analysis of the waters in order to know the contaminants present before treating them. Los ríos Catingueiro, Cristalino y Ligeiro, presentes en la región oriental de Cianorte, Paraná, Brasil, están constantemente bajo la influencia de efluentes industriales y agroquímicos. En 2022, el abastecimiento público de este municipio se hará por las aguas del río Ligeiro, y los lugares previstos para la recolección están próximos a los lugares donde confluyen el río Catingueiro y el río Cristalino con el río Ligeiro. Se evaluó en dos periodos de 2020, con base en diferentes parámetros, la calidad del agua del río Catingueiro en dos localidades, P1 y P2 (P2, aguas arriba de la confluencia), el río Cristalino en una localización, P3 y el río Ligero. en dos ubicaciones, P4 y P5 (P5, aguas abajo de la confluencia). Los niveles de nitrito, nitrato y sulfato en el agua estaban dentro del rango definido por la ley. Todos los puntos mostraron altas concentraciones de flúor y fosfato en ambas colecciones. En P1, en ambas colecciones, se encontró una alta concentración de cobre. P1 y P2, en la segunda colección, mostraron altos contenidos de aluminio. Se detectó silicio en todos los puntos. Las aguas fueron fitotóxicas para L. sativa y citotóxicas para los meristemas de las raíces de A. cepa. Los análisis fisicoquímicos y de toxicidad sugieren un compromiso en la calidad del agua. Estos datos alertan a las autoridades públicas de Cianorte y Paraná sobre las acciones antrópicas que se llevan a cabo en estos ríos y alertan a la empresa sanitaria para que realice un análisis preliminar y periódico de las aguas para conocer los contaminantes presentes antes de tratarlos. Os rios Catingueiro, Cristalino e Ligeiro, presentes na região leste de Cianorte, Paraná, Brasil, estão sob constante influência de efluentes industriais e agroquímicos. Em 2022, o abastecimento público deste município será feito pelas águas do rio Ligeiro, e os locais previstos para captação são próximos aos locais de confluência do rio Catingueiro e do rio Cristalino com o Ligeiro. Avaliou-se em dois períodos de 2020, com base em parâmetros diferentes, a qualidade da água do Rio Catingueiro em dois locais, P1 e P2 (P2, a montante da confluência), o Rio Cristalino em um local, P3, e o Rio Ligeiro em dois locais, P4 e P5 (P5, a jusante da confluência). Os níveis de nitrito, nitrato e sulfato nas águas estiveram dentro da faixa definida por lei. Todos os pontos apresentaram alta concentração de flúor e fosfato nas duas coletas. Em P1, em ambas as coletas, foi encontrada alta concentração de cobre. P1 e P2, na segunda coleta, apresentaram altos teores de alumínio. O silício foi detectado em todos os pontos. As águas foram fitotóxicas para L. sativa e citotóxicas para os meristemas das raízes de A. cepa. Análises físico-químicas e de toxicidade sugerem um comprometimento na qualidade da água. Esses dados alertam os poderes públicos de Cianorte e do Paraná sobre as ações antrópicas realizadas nesses rios e alertam a empresa de saneamento para fazer uma análise preliminar e periódica das águas para conhecer os contaminantes presentes antes de tratá-los.

[Resumen]: Los contaminantes emergentes, entre los que se encuentran los fármacos y productos de higiene personal, representan una amenaza para los ecosistemas acuáticos y, en particular, para la comunidad microalgal, de quien depende la mayor parte de la producción primaria de estos ambientes. El anti-inflamatorio no esteroideo diclofenaco es uno de los medicamentos más consumido y con mayor presencia en las aguas de todo el mundo; sin embargo, no se conoce mucho acerca de su potencial ecotoxicidad. En este trabajo se estudió el potencial efecto citotóxico del diclofenaco sobre la microalga dulceacuícola Chlamydomonas reinhardtii y la diatomea marina Phaeodactylum tricornutum. Los cultivos microalgales se expusieron a concentraciones de 50, 100, 125 y 150 mg L-1 de diclofenaco durante 24 y 96 h. Múltiples biomarcadores de citotoxicidad fueron analizados: crecimiento, contenido de pigmentos fotosintéticos, eficiencia fotosintética, propiedades inherentes, viabilidad celular, actividad metabólica, pH intracelular, potencial de membrana citoplasmática y estrés oxidativo. Los resultados mostraron que el diclofenaco es tóxico para las dos especies ensayadas. La más sensible fue P. tricornutum, cuyo crecimiento se vio completamente inhibido a las concentraciones más altas. La eficiencia fotosintética, la complejidad celular, la autofluorescencia, el pH intracelular y el potencial de membrana citoplasmática también se vieron significativamente afectados; sin embargo, para C. reinhardtii, sólo la actividad metabólica y la eficiencia fotosintética resultaron ser sensibles. El único parámetro que se ha visto significativamente afectado en ambas especies fue la eficiencia fotosintética. La viabilidad celular, el contenido de pigmentos fotosintéticos y el estrés oxidativo no se vieron afectados significativamente en ninguna de las dos especies. [Resumo]: Os contaminantes emerxentes, entre os que se atopan os fármacos e produtos de hixiene persoal, representan unha ameaza para os ecosistemas acuáticos e, en particular, para a comunidade microalgal, de quen depende a maior parte da produción primaria destes ambientes. O anti-inflamatorio non esteroideo diclofenaco é un dos medicamentos máis consumidos e con maior presencia nas augas de todo o mundo; porén, non se coñece moito acerca da súa potencial ecotoxicidade. Neste traballo, estudouse o potencial efecto citotóxico do diclofenaco sobre a microalga dulceacuícola Chlamydomonas reinhardtii e a diatomea mariña Phaeodactylum tricornutum. Os cultivos de microalgas expuxéronse a concentracións de 50, 100, 125 e 150 mg L-1 de diclofenaco durante 24 e 96 h. Múltiples biomarcadores de citotoxicidade foron analizados: crecemento, contido de pigmentos fotosintéticos, eficiencia fotosintética, propiedades inherentes, viabilidade celular, actividade metabólica, pH intracelular, potencial membrana citoplasmática e estrés oxidativo. Os resultados mostraron que o diclofenaco é tóxico para as dúas especies ensaiadas. A máis sensible foi P. tricornutum cuxo crecemento se viu completamente inhibido ás concentracións máis altas. A eficiencia fotosintética, a complexidade celular, a autofluorescencia, o pH intracelular e o potencial de membrana citoplasmática tamén se viron significativamente afectados; porén, para C. reinhardtii, só a actividade metabólica e a eficiencia fotosintética resultaron ser sensibles. O único parámetro que se viu afectado significativamente en ambas especies foi a eficiencia fotosintética. A viabilidade celular, o contido de pigmentos fotosintéticos e o estrés oxidativo non se viron significativamente afectados en ningunha das dúas especies. [Abstract]: Emerging contaminants, including pharmaceuticals and personal care products, represent a threat to aquatic ecosystems and, in particular, to the microalgal community, on which most of the primary production of these environments depends. The non-steroidal antiinflammatory diclofenac is one of the most consumed and most prevalent drug in world's waters; however, not much is known about its ecotoxicity potential. In this work the potential cytotoxic effect of diclofenac on the freshwater microalgae Chlamydomonas reinhardtii and the marine diatom Phaeodactylum tricornutum was studied. Microalgal cultures were exposed to concentrations of 50, 100, 125 and 150 mg L-1 of diclofenac for 24 and 96 h. Multiple biomarkers of cytotoxicity were analyzed: growth, photosynthetic pigment content, photosynthetic efficiency, inherent properties, cell viability, metabolic activity, intracellular pH, cytoplasmic membrane potential and oxidative stress. Results showed that diclofenac is toxic to both species assayed. The most sensitive species was P. tricornutum, whose growth was completely inhibited at the highest concentrations. Photosynthetic efficiency, cellular complexity, autofluorescence, intracellular pH and cytoplasmic membrane potential were also significantly affected; however, for C. reinhardtii, only metabolic activity and photosynthetic efficiency were found to be sensitive. The only parameter significantly affected in both species was photosynthetic efficiency. Cell viability, photosynthetic pigment content and oxidative stress were not significantly affected in either species. Traballo fin de mestrado (UDC.CIE). Biotecnoloxía avanzada. Curso 2018/2019

The search for natural resources with antiviral potential, as an alternative to synthetic drugs, has been growing and, in this sense, oregano presents itself as a potential candidate. However, the antiviral studies with oregano are still poorly explored. BoHV-1 stands out among veterinary pathogens, for its economic impact on cattle production. In this study, the antiviral and virucidal activity of polar extracts of Origanum vulgare was evaluated against BoHV-1. Infusion (INF10), decoction (DEC), and hydroalcoholic (HAE) extracts were tested to cytotoxic and antiviral assays on MDBK cells. Cytotoxic effects were analyzed through MTT assay and the antiviral activity was expressed as a percentage of inhibition (PI). BoHV-1 was incubated with O. vulgare extracts as virucidal assay. Concentrations ≤3.12 mg/ml (INF10) and ≤1.56 mg/ml (DEC/HAE) preserved the cell viability above 60%, and all extracts were safe (>96%) between 0.78 and 0.39 mg/ml. Regarding the antiviral activity, pre-treatment of all extracts highlighted in comparison to the post-treatment. The pre-treatment of infusion at 2 mg/ml highlighted due to the high cell viability (84.69%) and the elimination of the viral load. All extracts inactivated BoHV-1 from 2 hours of incubation (20 mg/ml), showing virucidal activity. These findings may be related to 4-hydroxybenzoic acid as prevalent in all extracts. These findings showed the in vitro antiviral and virucidal activity of oregano polar extracts against BoHV-1 and may be promising for the therapeutic use against herpesviruses infections. La búsqueda de recursos naturales con potencial antiviral, como alternativa a las drogas sintéticas, ha ido creciendo y, en este sentido, el orégano se presenta como un candidato potencial. Sin embargo, los estudios antivirales con orégano aún están poco explorados. El BoHV-1 se destaca entre los patógenos veterinarios por su impacto económico en la producción ganadera. En este estudio, se evaluó la actividad antiviral y virucida de extractos polares de Origanum vulgare contra BoHV-1. Se probaron extractos de infusión (INF), decocción (DEC) e hidroalcohólicos (HAE) para ensayos citotóxicos y antivirales en células MDBK. Los efectos citotóxicos se analizaron mediante el ensayo MTT y la actividad antiviral se expresó como porcentaje de inhibición (PI). Se incubó BoHV-1 con extractos de O. vulgare como ensayo virucida. Las concentraciones ≤3,12 mg/ml (INF) y ≤1,56 mg/ml (DEC / HAE) preservaron la viabilidad celular por encima del 60%, y todos los extractos fueron seguros (>96%) entre 0,78 y 0,39 mg/ml. En cuanto a la actividad antiviral, se destacó el pretratamiento de todos los extractos en comparación con el postratamiento. El pretratamiento de infusión a 2 mg/ml destacó por la alta viabilidad celular (84,69%) y la eliminación de la carga viral. Todos extractos inactivaron BoHV-1 en 2 horas de incubación (20 mg/ml), mostrando actividad virucida. Estos hallazgos pueden estar relacionados con el ácido 4-hidroxibenzoico, predominante en todos extractos. Estos hallazgos mostraron la actividad antiviral y virucida in vitro de los extractos polares de orégano contra BoHV-1 y pueden ser prometedores para el uso terapéutico contra infecciones por herpesvirus. A busca por recursos naturais com potencial antiviral, como uma alternativa aos fármacos sintéticos, tem sido crescente e, neste sentido, o orégano apresenta-se como um candidato em potencial. No entanto, estudos antivirais com orégano ainda são pouco explorados. O alphaherpesvírus bovino 1 (BoHV-1) destaca-se entre os patógenos veterinários por seu impacto econômico na pecuária. Neste estudo foi avaliada a atividade antiviral e virucida de extratos polares de Origanum vulgare contra o BoHV-1. Extratos de infusão (INF10), decocção (DEC) e hidroalcoólico (HAE) foram testados em ensaios citotóxicos e antivirais em células MDBK. Os efeitos citotóxicos foram analisados ​​por meio de ensaio MTT e a atividade antiviral expressa em Porcentagem de Inibição (PI). O BoHV-1 foi incubado com os extratos de O. vulgare para avaliação do potencial virucida. As concentrações de ≤3,12 mg/ml (INF10) e ≤1,56 mg/ml (DEC / HAE) preservaram a viabilidade celular acima de 60%, e todos os extratos foram seguros (>96%) entre 0,78 e 0,39 mg/ml. Em relação à atividade antiviral, o pré-tratamento de todos os extratos destacou-se em comparação ao pós-tratamento. O pré-tratamento da infusão de 2 mg/ml destacou-se pela alta viabilidade celular (84,69%) e pela eliminação da carga viral. Todos os extratos inativaram o BoHV-1 a partir de 2 horas de incubação (20 mg/ml), mostrando atividade virucida. Esses achados podem estar relacionados ao ácido 4-hidroxibenzóico, prevalente em todos os extratos. Esses achados demonstram atividade antiviral e virucida in vitro de extratos polares de orégano contra BoHV-1, podendo ser promissores no uso terapêutico contra infecções por herpesvírus.

Calotropis procera belongs to the Apocynaceae family and is found in the Northeast of Brazil. Several activities are attributed to this species, such as anti-inflammatory, antibacterial and anti-cancer activities. This research aimed to conduct a bioguided study of C. procera in order to isolate and identify triterpenes of the species and evaluate the cytotoxic activity of products of the plant species. The crude ethanolic extract (CEE) was obtained and partitioned. The hexanic phase was chromatographed giving the compound Cp-1, which was identified using spectroscopic techniques and thermal analysis. It was possible to identify Cp-1 as a triterpene called calotropenyl acetate, already reported in the literature. The cytotoxicity test was performed using the MTT technique and it was observed a good activity of CEE and hexanic phase against HL-60 and KS62 lines with an IC50 ranging between 26.8 ± 0.4 µg mL-1 and 47.0 ± 0.5 µg mL-1, besides no toxicity in normal lines, while Cp-1 showed no relevant activity against the tumor cells tested. The results indicated that the species contains in its chemical composition products with pharmacological interest, in addition to cytotoxic for leukemic cells, which can be further explored in complementary studies. Calotropis procera es una planta arbustiva perteneciente a la familia Apocynaceae, que se encuentra ampliamente en la región noreste de Brasil. A la especie se le atribuyen diversas actividades, como antiinflamatorias, antibacterianas y anticancerígenas, y el género Calotropis se caracteriza por presentar flavonoides, terpenos, taninos y compuestos fenólicos. Esta investigación tuvo como objetivo realizar un estudio bioguiado de C. procera con el fin de aislar e identificar triterpenos de la especie y evaluar la actividad citotóxica de productos de la especie vegetal. El extracto etanólico crudo (EEB) se obtuvo mediante maceración en etanol al 96% y se repartió con disolventes orgánicos, utilizando un gradiente de polaridad. La fase de hexano se cromatografió en columna con gel de sílice y se eluyó con disolventes orgánicos puros o en mezclas binarias dando lugar al compuesto codificado por Cp-1, que se identificó mediante técnicas espectroscópicas (RMN y IV) y análisis térmico. La evaluación de los datos del análisis espectroscópico y térmico permitió identificar al Cp-1 como un triterpeno denominado acetato de calotropenilo, ya reportado en la literatura. La prueba de citotoxicidad de productos obtenidos de la especie también se realizó mediante la técnica MTT. En la prueba de citotoxicidad, se observó una buena actividad de la EEB y de la fase hexano contra las cepas HL-60 y KS62 con un IC50 que varió de 26,8 ± 0,4 µg mL-1 a 47,0 ± 0,5 µg mL-1, además de ausencia de toxicidad en cepas normales, mientras que Cp-1 no mostró actividad relevante contra las células tumorales ensayadas. Los resultados indicaron que la especie contiene en su composición química productos con potencial fitoquímico para el aislamiento e identificación de compuestos por técnicas espectroscópicas y termoanalíticas, así como citotóxicos para células leucémicas, que pueden ser explorados con mayor profundidad en estudios complementarios. Calotropis procera é um vegetal arbustivo pertencente à família Apocynaceae, sendo amplamente encontrado na região Nordeste do Brasil. Diversas atividades são atribuídas a espécie, tais como as atividades anti-inflamatórias, antibacteriana e anticancerígena e o gênero Calotropis caracteriza-se por apresentar flavonoides, terpenos, taninos e compostos fenólicos. Esta pesquisa teve como objetivo realizar um estudo bioguiado de C. procera com o intuito de isolar e identificar triterpenos da espécie e avaliar a atividade citotóxica dos produtos da espécie vegetal. O extrato etanólico bruto (EEB) foi obtido por maceração em etanol a 96% e particionado com solventes orgânicos, utilizando um gradiente de polaridade. A fase hexânica foi cromatografada em coluna com gel de sílica e eluída com solventes orgânicos puros ou em misturas binárias dando origem ao composto codificado por Cp-1, que foi identificado utilizando técnicas espectroscópicas (RMN e IV) e de análise térmica. A avaliação dos dados espectroscópicos e de análise térmica permitiu identificar Cp-1 como sendo um triterpeno denominado acetato de calotropenil, já relatado na literatura. Também foi realizado o ensaio de citotoxicidade dos produtos obtidos da espécie utilizando a técnica de MTT. No ensaio de citotoxicidade observou-se uma boa atividade do EEB e da fase hexânica frente as linhagens HL-60 e KS62 com um IC50 variando entre 26.8 ± 0.4 µg mL-1 e 47.0 ± 0.5 µg mL-1, além de nenhuma toxicidade em linhagens normais, enquanto que Cp-1 não mostrou atividade relevante contra as células tumorais testadas. Os resultados indicaram que a espécie contém na sua composição química produtos com potencial fitoquímico para isolamento e identificação de compostos por técnicas espectroscópicas e termoanalíticas, além de citotóxico para células leucêmicas, que podem ser mais explorados em estudos complementares.

The use bulbs of Eleutherine bulbosa for treatament of diseases caused by malaria, amoeba and bacteria. This study accomplished the botanical and phytochemical characterization, antimicrobial activity and cytotoxic of E. bulbosa. For the anatomical studies, the studied material was fixed in formaldehyde – acetic acid and ethanol and it was dyed in safranin and in astra blue. For histochemistry, was fixed in buffered neutral formalin and in ferrous sulphate in formalina. Ethanolic Extract (EE) was submitted to fractionation in a chromatographic column and four (4) fractions were obtained from it. The Dichloromethane Fraction (DF) was submitted to a new fractionation. The biological activity was evalueted by diffusion in agar, microdilution and celular viability MTT. The bulb of E. bulbosa is characterized by a reduced caulinar axis and by succulent amiliferous cataphylls, epidermis with the presence of anthocyanins, homogeneous mesophyll with idioblasts of prismatic crystals of calcium oxalate and phenolic compounds. In agar diffusion it was observed that EE, DF and ethyl acetate fraction (ACF) were active for Staphylococcus aureus. In microdilution, DF (Inhibitory minimum concentration= 125 µg/ mL) was more active. For all samples the Minimous Bactericidal Concentration was >1000 µg/ mL. The fractionation contributes positively with the citotoxicity, being subfractions S1 and S2 the most citotoxic ones. The Fraction Dichloromethane was the most active one for S. aureus and more citotoxicity to VERO cells. Probably the less citotoxicity of EE is related to the presence of anthocyanins that are present on bulbs epidermis. El uso de bulbos de Eleutherine bulbosa para el tratamiento de enfermedades causadas por malaria, ameba y bacterias. Este estudio logró la caracterización botánica, fitoquímica, antimicrobiana y citotóxica de E. bulbosa. Para los estudios anatómicos, el material estudiado se fijó en formaldehído - ácido acético y etanol y se tiñó con safranina y azul astra. Para histoquímica, se fijó en formalina neutra tamponada y en sulfato ferroso en formalina. El Extracto Etanólico (EE) se sometió a fraccionamiento en columna cromatográfica y de él se obtuvieron cuatro (4) fracciones. La Fracción de Diclorometano (DF) se sometió a un nuevo fraccionamiento. La actividad biológica se evaluó mediante difusión en agar, microdilución y viabilidad celular MTT. El bulbo de E. bulbosa se caracteriza por un eje caulinar reducido y por suculentos catafilos amilíferos, epidermis con presencia de antocianinas, mesófilo homogéneo con idioblastos de cristales prismáticos de oxalato cálcico y compuestos fenólicos. En difusión en agar se observó que EE, DF y fracción de acetato de etilo (ACF) fueron activos para Staphylococcus aureus. En microdilución, DF (concentración mínima inhibitoria = 125 µg / mL) fue más activo. Para todas las muestras, la concentración bactericida mínima fue> 1000 µg / ml. El fraccionamiento contribuye positivamente con la citotoxicidad, siendo las subfracciones S1 y S2 las más citotóxicas. La Fracción Diclorometano fue la más activa para S. aureus y más citotoxicidad para las células VERO. Probablemente la menor citotoxicidad de EE esté relacionada con la presencia de antocianinas presentes en la epidermis de los bulbos. Bulbos de Eleutherine bulbosa são usados para tratamento de malária, ameba e bactérias. Este estudo realizou a caracterização botânica e fitoquímica, atividade antimicrobiana e citotóxica de E. bulbosa. Para os estudos anatômicos, o material estudado foi fixado em formaldeído - ácido acético e etanol e corado em safranina e azul astra. Para histoquímica, foi fixado em formalina neutra tamponada e em sulfato ferroso em formalina. O Extrato Etanólico (EE) foi submetido ao fracionamento em coluna cromatográfica e a partir dele foram obtidas quatro frações. A Fração Diclorometano (DF) foi submetida a um novo fracionamento. A atividade biológica foi avaliada por difusão em ágar, microdiluição e viabilidade celular MTT. O bulbo de E. bulbosa é caracterizado por eixo caulinar reduzido e por catafilos amilíferos suculentos, epiderme com presença de antocianinas, mesofilo homogêneo com idioblastos de cristais prismáticos de oxalato de cálcio e compostos fenólicos. Na difusão em ágar observou-se que EE, DF e fração acetato de etila (ACF) foram ativos para Staphylococcus aureus. Na microdiluição, o DF (concentração mínima inibitória = 125 µg / mL) foi mais ativo. Para todas as amostras, a Concentração Bactericida Mínima foi> 1000 µg / mL. O fracionamento contribui positivamente com a citotoxicidade, sendo as subfrações S1 e S2 as mais citotóxicas. A Fração Diclorometano foi a mais ativa para S. aureus e com maior citotoxicidade para as células VERO. Provavelmente, a menor citotoxicidade do EE está relacionada à presença de antocianinas que estão presentes na epiderme dos bulbos.

Reactive Black 5 (RB5) is an azo dye widely used in the textile industry because of its high chemical stability. Since it does not entirely fix on the fabrics, it pollutes water sources. In this work, the decolorization of aqueous solutions with RB5 was performed by heterogeneous photocatalysis with TiO2/UV. The reaction was carried out in an aluminum photoreactor equipped with five lamps. The effect of TiO2 (0.1, 0.175, and 0.25 g L-1), RB5 concentration (50, 75, and 100 mg L-1), and pH (3, 7, and 11) was evaluated for 14 h, using a Box-Behnken experimental statistical design. Complete decolorization of RB5 was obtained at 14 h, employing 0.175 g L-1 TiO2, 50 mg L-1 RB5, and pH 3. A 98.44% of decolorization was achieved in 10 h (0.25 g L-1 of TiO2, 50 mg L-1 of RB5, and pH 7). The highest decolorization percentage of RB5 (99.51%) was obtained at 10 h of exposure to UV light, using 0.5 g L-1 of TiO2, 50 mg L-1 of the dye, and a pH of 3. Cytotoxicity tests on the HepG2 cell line indicated that photocatalytic degradation of RB5 did not generate cytotoxic byproducts. Resumen El Negro Remazol B (NRB) es un colorante azoico, usado en la industria textil por su estabilidad química. Este tinte no se fija al 100%, ocasionando contaminación en el agua. En este trabajo se evaluó la decoloración de soluciones acuosas con NRB mediante fotocatálisis heterogénea con TiO2/UV. La reacción se realizó en un fotorreactor de aluminio equipado con cinco lámparas. El efecto de la concentración de TiO2 (0,1; 0,175 y 0,25 g L-1), y NRB (50, 75 y 100 mg L-1) y el pH (3, 7 y 11) fue evaluado durante 14 h, tomando un diseño estadístico experimental Box-Behnken. La decoloración completa del NRB se obtuvo después de 14 h (0,175 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 de NRB, y pH 3). Se alcanzó un 98,44% de decoloración después de 10 h (0,25 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 de NRB, y pH 7). Se encontró que el mejor porcentaje de decoloración del NRB (99,51%) se obtuvo a las 10 h de exposición a luz UV, utilizando 0,5 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 del colorante y un pH de 3. Los ensayos de citotoxicidad sobre la línea celular HepG2 indicaron que la degradación fotocatalítica del NRB no generó subproductos citotóxicos. Resumo O Negro Remazol B (RNB) é um corante azoico usado na indústria têxtil pela sua estabilidade química. O corante não é fixo no tecido em 100%, então contamina as fontes de água. Neste trabalho, avaliou-se a descoloração de soluções aquosas com RNB por meio de fotocatálise heterogênea com TiO2/UV. A reação foi feita no fotoreactor de alumínio com cinco lâmpadas. O efeito da concentração de TiO2 (0,1; 0,175 e 0,25 g L-1), RNB (50, 75 e 100 mg L-1) e pH (3, 7 e 11) foi avaliado durante 14 h utilizando o modelo estatístico Box-Behnken. Ás 14 h, foi atingida a descoloração completa do RNB (pH 3; 0,175 g L-1 de TiO2 e 50 mg L-1 de RNB). Utilizando 0,25 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 de RNB e pH 7, obteve-se descoloração de 98,44% em 10 h. Encontrou-se que a melhor porcentagem de descoloração do RNB (91,51%) foi obtida com 10 h de exposição à luz UV usando 0,5 g L-1 de TiO2, 50 mg L-1 do corante e pH de 3. Adicionalmente, os testes de citotoxicidade na linha celular HepG2 mostraram que a degradação fotocatalítica do RNB não gerou subprodutos citotóxicos.

La biopelícula como un mecanismo de virulencia en Staphylococcus involucrada en infecciones intrahospitalarias es regulada por un represor negativo icaR, responsable de la transcripción completa del operón icaADBC. La búsqueda de dominios funcionales por modulación computacional de icaR permitió hallar las secuencias peptídicas con actividad biológica análoga a la proteína icaR. Mediante biología computacional se diseñaron péptidos empleando el programa de predicción AntiBP (http://www.imtech.res.in/raghava/antibp/); la síntesis química se hizo por Nα-Fmoc y se caracterizaron y purificaron tres moléculas por RP-HPLC y MALDI-TOF. Se evaluó su seguridad biológica mediante ensayo de actividad citotóxica realizada sobre macrófagos murinos de la línea J774 y la actividad hemolítica se determinó mediante el uso de glóbulos rojos. Los tres péptidos caracterizados IR1, IR2 e IR3, presentaron estructura secundaria predominantemente alfa helicoidal, alto grado de pureza y alto score antimicrobiano; además, mostraron baja toxicidad, evidenciada por la actividad citotóxica y hemolítica en las concentraciones ensayadas y en comparación con los controles usados, que permitiría su potencial uso como moléculas candidatas o principios activos con actividad análoga al represor nativo icaR, frente a la biopelícula de los Staphylococcus sp. Staphylococcus sp. biofilm, formed as a mechanism of virulence that is involved in hospital acquired infections, is regulated by a negative repressor icaR, which is responsible for the full transcription of the operon icaADBC. This study, through functional commands by computational modulation of icaR, allowed to find peptide sequences with similar biological activity to the icaR protein. Peptides were designed by means of computational biology using the prediction program AntiBP (http://www.imtech.res.in/raghava/antibp/). The chemical synthesis of peptides was performed by Nα-Fmoc. The purification and characterization of three molecules were carried out using RP-HPLC and MALDI-TOF. Biological safety of peptides was evaluated by tests of cytotoxic activity on murine macrophage cells line J774, and their hemolytic activity was determined by using red cells. The three characterized peptides IR1, IR2 and IR3 presented a predominantly secondary alpha helical structure with a high degree of purity and high antimicrobial scores. In addition, the peptides exhibited low toxicity, proved by their low cytotoxic and hemolytic activity in the tested concentrations and in comparison to the standards used. These results allow the potential use of these peptides as candidate molecules or active principles with similar activity to the native repressor icaR against the Staphylococcus biofilm. O biofilme formado como um mecanismo de virulência em Staphylococcus sp., que está envolvido com infecções intra-hospitalares, é regulado por um repressor negativo icaR, o qual é responsável pela plena transcrição do operão icaADBC. Por tanto, o presente estudo, avaliando a segurança biológica de moléculas, concebeu peptídeos antibiofilme semelhantes ao repressor icaR. Por meio da biologia computacional foram concebidos peptídeos usando o programa de predição AntiBP (http://www.imtech.res.in/raghava/antibp/) para identificar as sequências com uma atividade biologicamente similar à da proteína icaR. A Síntese química dos peptídeos se fez pelo Nα-Fmoc e foram caracterizadas e purificadas três moléculas por RP-HPLC e MALDI-TOF. O ensaio de atividade citotóxica foi realizado nos macrófagos murinos da linha J774 e a atividade hemolítica foi determinada por meio do uso de glóbulos vermelhos. Foram caraterizados três peptídeos IR1, IR2 e IR3, além de mostrarem uma estrutura secundaria predominantemente alfa helicoidal, com alto grau de pureza, alto score antimicrobiano e baixa toxicidade, estes podem ser postulados como moléculas candidatas ou princípios ativos com uma atividade similar ao repressor nativo icaR frente ao biofilme dos Staphylococcus sp.

El Mercurius-Heel®S es un medicamento homeopático utilizado para tratar patologías infecciosas como la gingivitis y la periodontitis; principalmente de la cavidad oral. El componente principal de este medicamento es el Mercurius solubilis. Se estableció el efecto citotóxico a través de la viabilidad celular o antiinflamatorio por medición de citocinas del Mercurius-Heel®S sobre fibroblastos gingivales humanos (FGH). Las células fueron tratadas con Mercurius-Heel®S a concentraciones desde 300 mg/ml hasta 0.0005 mg/ml y como control, células sin tratamiento. La viabilidad celular fue medida mediante la prueba colorimétrica MTS® y la expresión de citocinas (IL1b, TNFa e IL10) presentes en sobrenadantes celulares, fue realizada con Quantiquine® ELISA. Se observó incremento de la viabilidad celular significativamente mayor con respecto al control (concentraciones bajas del medicamento) a partir de 3,7 mg/ml hasta 0.0005 mg/ml. La producción de citocinas no mostró diferencias significativas a diferentes concentraciones de Mercurius-Heel®S. No se evidenció incremento significativo de IL1b, IL10 y TNFa y el Mercurius-Heel®S no mostró efecto citotóxico sobre FGH. Mercurius-Heel®S is a homeopathic remedy used to treat infectious diseases such as gingivitis and periodontitis, mainly in the oral cavity. The main component of this drug is the Mercurius solubilis. Its cytotoxic effect was established based on cell viability and its anti-inflammatory effect by measuring the cytokines Mercurius-Heel®S on human gingival fibroblasts (FGH). We treated cells with Mercurius-Heel®S at concentrations of 300 mg/ml to 0.0005 mg/ml and left untreated cells as a control. Cell viability was measured using the MTS® colorimetric assay and the expression of cytokines (IL1b, TNFa e IL10) present in cell supernatants was performed with Quantiquine® ELISA. From 3.7 mg/ml to 0.0005 mg/ml, we observed a significantly higher increase in cell viability in comparison to the control (lower concentrations of the drug). Cytokine production was not significantly different at different concentrations of Mercurius-Heel®S. There was no significant increase in IL1b, IL10 and TNFa and Mercurius-Heel®S showed no cytotoxic effect on FGH. Mercurius-Heel®S é um medicamento homeopático utilizado para tratar patologías infecciosas como la gengvite e a periodontite; principalmente da cavidade oral. O componente principal deste medicamento é o Mercurius solubilis. Estabeleceu-se o efeito citotóxico através da viabilidade celular a anti-inflamatório por medição de citocinas do Mercurius-Heel®S sobre fibroblastos gengivais humanos (FGH). As células foram tratadas com Mercurius-Heel®S a concentrações desde 300 mg/ml até 0.0005 mg/ml e como controlo, células sem tratamento. A viabilidade celular foi medida a prova colorimétrica MTS® e a expressão de citocinas (IL1b, TNFae IL10) presentes em sobrenadantes celulares, foi realizada com Quantiquine® ELISA. Observou-se incremento da viabilidade celular significativamente maior com respeito ao controlo (concentrações baixas do medicamento) a partir de 3,7 mg/ml até 0.0005 mg/ml. A produção de citocinas não mostrou diferenças significativas a diferentes concentrações de Mercurius-Heel®S. Não se evidenciou incremento significativo de IL1b, IL10 e TNFa e o Mercurius-Heel®S não mostrou efeito citotóxico sobre FGH.