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La apicultura reviste una gran importancia en el mundo, no solo por los productos obtenidos de la colmena, si no por su rol como polinizadores. Muchas enfermedades afectan a las abejas, en particular las virosis han sido relacionadas con pérdidas de colmenas en todo el mundo.El plan de trabajo está dividido en etapas, la primera consiste en el aislamiento de cepas autóctonas del virus de las alas deformes y el virusde la cría ensacada. Las muestras de abejas serán para extracción de Ácidos nucleicos y posterior detección por RT-PCR. A partir de las muestras positivas a los virus en cuestión se procederá al aislamiento, a la replicación viral in vitro en líneas celulares convencionales o cultivos primarios de células de abeja. Una vez aisladas las partículas virales se caracterizarángenómicamente. Por último,se buscará un modelo de replicación in vivo que permita la realización controlada de ensayos de infección experimental de los virus en larvas y abejas adultas. Se realizará la disección de larvas inoculas en distintos estadios y adultos de obreras y zánganos con el finde de obtener fluidos y distintas partes de la anatomía de la abeja. Se extraerá ARN total y para determinar la carga viral relativa se diseñaránprimers específicos para la detección de los virus utilizando RT-PCR cuantitativa. Los resultados serán comparados con expresión relativa de marcadores del sistema inmune., Universidad Nacional de La Plata

El objetivo general es desarrollar un suplemento alimenticio abase de canola (Brassica napus L.) y aceites esenciales (AE) de plantas nativas Elionorus muticus (Spreng.) Kuntze y Lippia junelliana (Mold.) Tronc.), que permitan mejorar el desarrollo nutricional de las colonias de abejas melífera (Apis mellifera., L.).La canola es consideradafuente excelente de ácidos grasos insaturados, omega 3 y omega 6 y se cultiva con el propósito de obtener aceite para consumo humano dando diferentes subproductos que son insumos apropiados para la formulación de sustitutos nutricionales aplicados en la alimentación de aves y mamíferos. Por otro lado, los AE son compuestos naturales derivados del metabolismo secundario de las plantas, ampliamente conocidos por sus propiedades antisépticas y medicinales para el tratamiento de enfermedades del hombre, animales y la abeja melífera. La temática surge debido a la profunda crisis que sufren a nivel mundial los polinizadores, en particular la abeja melífera. Hace varios años los apicultores degran cantidad de países reportaron la desaparición espontanea de colonias, lo que posteriormente fue denominado por los investigadores como “Síndrome de colapso de las colonias” (CCD: Colony Collapse Disorder, por sus siglas en inglés)., Universidad Nacional de La Plata

Honey bees (Apis mellifera) pollinate plants in both natural and managed ecosystems, contributing to food production and sustaining and increasing biodiversity. Unfortunately bee depopulation and colony losses are becoming increasingly common worldwide. Several factors contribute to the decline of bee populations, including pathogens (parasites, fungi, bacteria and viruses), ecosystem alteration or loss, and/or agrochemical use. All of these factors alter the defense mechanisms of the bee immune system. Honey bees have an innate immune system that includes physical barriers and generalized cellular and humoral responses to defend themselves against infectious and parasitic organisms. Pathogens, acaricides, fungicides, herbicides and other pesticides affect the bee immune system and consequently bee health. The defense mechanisms of the bee immune system include signaling pathways, pathogen recognition receptors and innate immune system effectors. Although A. mellifera’s immune system is very similar to that of Drosophila flies and Anopheles mosquitoes, they possess only about a third of the immune system genes identified in these genera. This relatively low number of genes is probably a consequence that A. mellifera has developed social immunity. This defense strategy lowers pressure on the individual immune system of bees. This review article summarizes and discusses the bases of the honey bee immune system., Facultad de Ciencias Veterinarias

There are numerous threats that affect bee populations worldwide such as exposure to pesticides; genetic diversity, poor nutrition and the impact of pathogens. Between them, Ascosphaera apis is the etiological agent of chalkbrood disease that affects honeybees brood. To understand the biology of this pathogen, we revised the phylogeny, morphology, and sexual reproduction. The pathogenesis, closely related to the factors that affect the virulence the A. apis and their interactions with the host, are determinant at moment of developing chalkbood. The honeybee develops several strategies to defend themselves from these pathogens. First, the individual immunity mechanisms such us perithrophic membrane, the microbiota of midgut larvae and the humoral and cellular immunity are the first defense barriers against A. apis. Later, other mechanisms would appear, related to the social immunity, such as their social organization, the polyandry, the hygienic behavior and the social fever, that change the environmental conditions in the bee colony reducing A. apis viability. However, other pathogens such as Nosema spp, Varroa destructor, several viruses, and the presence of pesticides affect the sanitary status of the honeybee allowing the fungus to develop easily. Finally, we describe to our knowledge, the best three natural alternatives that could be studied in order to employ them in field trails., Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales, Facultad de Ciencias Veterinarias

Se evaluó la concentración inhibitoria mínima (CIM) del aceite esencial de Cymbopogon citratus y cinco diluyentes sobre cultivos de Ascosphaera apis. Se determinó la toxicidad en abejas adultas y se calculó el radio de selectividad de la formulación aceite esencial-diluyente. Se determinó la CIM mediante difusión en agar MY20 de 28 aislados de A. apis de Argentina y Chile con los diluyentes Tween 80, dimetilsufóxido (DMSO), propilenglicol, alcohol 70º y agua en concentraciones 150, 250, 500 y 750 mg/l, formuladas en 2,5 % del diluyente v/v. La toxicidad oral aguda sobre la abeja melífera adulta se evaluó para la combinación de C. citratus con propilen glicol y con alcohol 70°, usando dimetoato como control tóxico. El alcohol 70° resultó ser el mejor diluyente para el C. citratus, ya que presentó una CIM90 de 250 mg/l, fue “virtualmente no tóxico” para abejas adultas y presentó un radio de selectividad de 6 μL/abeja a las 72 horas, transformándolo en la formulación aceite esencial–diluyente menos tóxica para el control de A. apis en colonias de abejas. The minimal inhibitory concentration (MIC) of the essential oil of Cymbopogon citratus and five diluents against Ascosphaera apis crops was evaluated. Toxicity in adult bees was determined. Also, the selectivity ratio of the essential oil-diluents’ formulation was calculated. The MIC was determined by agar diffusion in MY20 medium against 28 isolates of A. apis from Argentina and Chile. Diluents Tween 80, dimethyl sulfoxide (DMSO), propylene glycol (PG), alcohol 70° and water at the concentrations 150, 250, 500 and 750 mg/l, formulated in the diluent 2.5 % v/v were used. The acute oral toxicity on adult honey bee was tested for C. citratus in combination with PG and alcohol 70°, using dimethoate as toxic control. Alcohol 70° was the best diluent for C. citratus since it exhibited a MIC90 of 250 mg/l, was “virtually non-toxic” for adult bees and showed a selectivity ratio of 6 μL /bee at 72 hours, being the essential oil-diluent formulation least toxic to control A. apis in honey bee colonies. Fil: Albo, Graciela Noemí. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales; Argentina Fil: Reynaldi, Francisco José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología. Cátedra de Virología; Argentina Fil: Altamirano, R.. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales; Argentina Fil: Vivot, W.. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”; Argentina Fil: Córdoba, Susana Beatríz. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales; Argentina

La apicultura es una de las actividades agrícolas más importantes de la República Argentina. En los últimos años se ha observado, a nivel mundial, una marcada disminución en el número de abejas. La mortalidad de las abejas, puede atribuirse a la interacción de factores ambientales, al manejo de las colonias o a la acción de diversos microorganismos, entre ellos los virus. Teniendo en cuenta que en la Argentina en este momento solamente se cuenta con técnicas de diagnostico moleculares para la detección de virus, el objetivo de este trabajo fue desarrollar un test de inmunodifusión que permita la detección del Virus de la Cría Ensacada de forma más sencilla y económica. Para ello una cepa autóctona del virus Virus de la Cría Ensacada fue utilizada para inocular un conejo a partir del cual se obtuvieron anticuerpos específicos contra este virus, que posteriormente fueron utilizados para estandarizar la técnica de inmuodifusión. Esta técnica podría ser de gran utilidad en el futuro para realizar un relevamiento rápido de las condiciones sanitarias para SBV en colmenas de la República Argentina ya que debido a su baja complejidad podría ser llevada a cabo en laboratorios de baja complejidad de todo el país., Beekeeping is one of the most important agricultural activities in Argentine.In recent years, there has been a decrease in the number of bees worldwide. The mortality of bees can be attributed to several factors, such as the interaction of environmental factors, wrong management of colonies or the action of various patognes, including viruses. Considering that in Argentina, only molecular diagnostic techniques are available for the detection of viruses, the objective of this work was to develop an immunodiffusion test that allows the detection of the sacbrood bee virus as a simpler and Economical alternative. To developed the immunodiffusion test we use an indigenous virus strain of sacbrood was used to inoculate a rabbit from which specific antibodies were obtained against this virus. Later were used to standardize the immuodiffusion technique. This technique could be very useful in the future to carry out a rapid survey of the sanitary conditions for SBV in hives of Argentine, because due to its low complexity it could be carried out in laboratories of low complexity throughout the country., Laboratorio de Virología, Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales

Se evaluó la concentración inhibitoria mínima (CIM) del aceite esencial de Cymbopogon citratus y cinco diluyentes sobre cultivos de Ascosphaera apis. Se determinó la toxicidad en abejas adultas y se calculó el radio de selectividad de la formulación aceite esencial-diluyente. Se determinó la CIM mediante difusión en agar MY20 de 28 aislados de A. apis de Argentina y Chile con los diluyentes Tween 80, dimetilsufóxido (DMSO), propilenglicol, alcohol 70º y agua en concentraciones 150, 250, 500 y 750 mg/l, formuladas en 2,5 % del diluyente v/v. La toxicidad oral aguda sobre la abeja melífera adulta se evaluó para la combinación de C. citratus con propilen glicol y con alcohol 70°, usando dimetoato como control tóxico. El alcohol 70° resultó ser el mejor diluyente para el C. citratus, ya que presentó una CIM90 de 250 mg/l, fue “virtualmente no tóxico” para abejas adultas y presentó un radio de selectividad de 6 μL/abeja a las 72 horas, transformándolo en la formulación aceite esencial–diluyente menos tóxica para el control de A. apis en colonias de abejas., The minimal inhibitory concentration (MIC) of the essential oil of Cymbopogon citratus and five diluents against Ascosphaera apis crops was evaluated. Toxicity in adult bees was determined. Also, the selectivity ratio of the essential oil-diluents’ formulation was calculated. The MIC was determined by agar diffusion in MY20 medium against 28 isolates of A. apis from Argentina and Chile. Diluents Tween 80, dimethyl sulfoxide (DMSO), propylene glycol (PG), alcohol 70° and water at the concentrations 150, 250, 500 and 750 mg/l, formulated in the diluent 2.5 % v/v were used. The acute oral toxicity on adult honey bee was tested for C. citratus in combination with PG and alcohol 70°, using dimethoate as toxic control. Alcohol 70° was the best diluent for C. citratus since it exhibited a MIC90 of 250 mg/l, was “virtually non-toxic” for adult bees and showed a selectivity ratio of 6 μL /bee at 72 hours, being the essential oil-diluent formulation least toxic to control A. apis in honey bee colonies., Facultad de Ciencias Veterinarias

Hasta el presente, se han identificado 22 virus de abejas que infectan las colonias. La mayoría de estos virus tiene un genoma de ARN de simple cadena con polaridad positiva y son clasificados como virus tipo Picornavirus (Picorna-like virus). En Argentina se ha detectado la presencia de 6 virus (Virus de las Alas Deformadas (DWV), de las Celdas Reales Negras BQCV), de la Cría Ensacada (SBV), de la Parálisis Aguda (ABPV), de la Parálisis Crónica (CBPV) y el Virus Israelí de la Parálisis Aguda (IAPV)). Asimismo, se buscó la presencia del Virus de Cachemira, que no fue detectado en este estudio (Reynaldi et al., 2010; 2011a; 2011b). Con el objetivo de establecer el status sanitario en colmenares de las diferentes Regiones Apícolas de la Prov. de Buenos Aires, se realizó un muestreo de abejas para de determinar la incidencia de Varroa destructor y seis virus comúnmente encontrados en abejas en Argentina., Facultad de Ciencias Veterinarias

Pollination is critical for food production and has the particularity of linking natural ecosystems with agricultural production systems. Recently, losses of bumblebee species have been reported worldwide. In this study, samples from a commercial exploitation of bumblebees of Argentina with a recent history of deaths were studied using a multiplex PCR for the detection of the honey bee viruses most frequently detected in South America. All samples analysed were positive for co-infections with Deformed wing virus, Black queen cell virus and Sacbrood virus. This is the first report of infection of Bombus atratus with honey bee viruses. A better understanding of viral infections in bumblebees and of the epidemiology of viruses could be of great importance as bumblebees can serve as possible viral reservoirs, resulting in pathogen spillover towards honey bees and native bumblebees., A polinização é essencial para a produção de alimentos e tem como particularidade a conexão entre os ecossistemas naturais com sistemas de produção agrícola. Recentemente, as perdas de espécies de bumblebee em todo o mundo têm sido relatadas. Neste trabalho, amostras de uma exploração comercial de bumblebee da Argentina, com recente história de mortes foram estudadas utilizando uma Multiplex PCR para a detecção de vírus de abelha mais frequentemente detectados na América do Sul. Todas as amostras analisadas foram positivas para as co-infecções com Deformed wing virus, Black queen cell viruses e Sacbrood virus. Este trabalho descreve o primeiro relato de infecção de Bombus atratus com vírus de abelhas. Uma melhor compreensão das infecções virais em bumblebee e da epidemiologia dos vírus poderia ser de grande importância, uma vez que tais abelhas podem servir como reservatório viral, com possível repercussão tanto na produtividade de abelhas melíferas como afetando-as diretamente., Facultad de Ciencias Veterinarias

Honey bee mortality has recently been associated with Israeli acute paralysis virus (IAPV), a proposed etiological agent for a new syndrome known as Colony Collapse Disorder. Bees infected with this virus show shivering wings, progress into paralysis, and finally die outside the hive. During the last years, honey bee mortality became a serious problem for Argentinean beekeepers. We herein report the preliminary results of a survey carried out to detect IAPV in samples taken from several Argentine provinces, by using a reverse transcription Polymerase Chain Reaction assay. Our data indicate the existence of high frequency of IAPV in asymptomatic hives of Argentina. Recientemente la mortalidad de las abejas melíferas ha sido asociada al virus israelí de la parálisis aguda (IAPV), propuesto como agente etiológico del denominado síndrome de despoblamiento de las colmenas. Las abejas infectadas con este virus presentan temblores en las alas que progresan hasta convertirse en parálisis, y finalmente mueren fuera de la colmena. Durante los últimos años, la mortalidad de las abejas melíferas se ha transformado en un serio problema para los productores de miel de la Argentina. Nosotros informamos aquí los resultados preliminares de un estudio realizado para detectar IAPV en muestras de colmenas provenientes de varias provincias argentinas utilizando la técnica de transcripción reversa-reacción en cadena de la polimerasa. Nuestros datos indican la presencia de IAPV en un alto porcentaje de las colonias estudiadas. Fil: Reynaldi, Francisco José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales. Departamento de Ciencias Biológicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología; Argentina Fil: Sguazza, Guillermo Hernán. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología. Cátedra de Virología; Argentina Fil: Tizzano, Marco Antonio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología. Cátedra de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentina Fil: Fuentealba, Nadia Analia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología. Cátedra de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Galosi, Cecilia Monica. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología. Cátedra de Virología; Argentina Fil: Pecoraro, Marcelo Ricardo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología. Cátedra de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina

Honey bee mortality has recently been associated with Israeli acute paralysis virus (IAPV), a proposed etiological agent for a new syndrome known as Colony Collapse Disorder. Bees infected with this virus show shivering wings, progress into paralysis, and finally die outside the hive. During the last years, honey bee mortality became a serious problem for Argentinean beekeepers. We herein report the preliminary results of a survey carried out to detect IAPV in samples taken from several Argentine provinces, by using a reverse transcription Polymerase Chain Reaction assay. Our data indicate the existence of high frequency of IAPV in asymptomatic hives of Argentina., Recientemente la mortalidad de las abejas melíferas ha sido asociada al virus israelí de la parálisis aguda (IAPV), propuesto como agente etiológico del denominado síndrome de despoblamiento de las colmenas. Las abejas infectadas con este virus presentan temblores en las alas que progresan hasta convertirse en parálisis, y finalmente mueren fuera de la colmena. Durante los últimos años, la mortalidad de las abejas melíferas se ha transformado en un serio problema para los productores de miel de la Argentina. Nosotros informamos aquí los resultados preliminares de un estudio realizado para detectar IAPV en muestras de colmenas provenientes de varias provincias argentinas utilizando la técnica de transcripción reversa-reacción en cadena de la polimerasa. Nuestros datos indican la presencia de IAPV en un alto porcentaje de las colonias estudiadas., Centro de Investigaciones en Fitopatología, Facultad de Ciencias Veterinarias

La Loque Americana es una enfermedad causada por la bacteria Gram positiva Paenibacillus larvae que ataca a las larvas y pupas de las abejas melíferas. El objetivo del presente trabajo fue determinar la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM), la Concentración Bactericida Mínima (CBM), la relación CBM/CIM y calcular las curvas de muerte para los antibióticos tilosina, tilmicosina, lincomicina y clorhidrato de oxitetraciclina frente a 6 cepas de P. larvae. Los resultados obtenidos de la relación CBM/CIM demostraron que las cepas presentaron un comportamiento variable según el antibiótico probado, con excepción de la cepa ATCC 9535 que resultó susceptible por CIM, con efecto bacteriostático por CBM y tolerante por CBM/CIM frente a todos los antibióticos. En términos generales oxitetraciclina y tilosina presentaron un mayor efecto bactericida y tilmicosina y lincomicina un mayor efecto bacteriostático. No obstante, la tilosina presentó la mejor actividad in vitro para el control de Paenibacillus larvae, dado por los menores valores de CIM, CBM, relación CBM/CIM y el mejor efecto bactericida observado en las curvas de muerte., American foulbrood caused by the Gram positive spore-forming bacterium Paenibacillus larvae is one of the most virulent diseases affecting the larval and pupal stages of honey bees. The aim of this study was to determine the Minimal inhibitory concentration (MIC), the minimal bactericidal concentration (MBC), the relationships between MBC / MIC and killing curves of the antibiotics tylosin, tilmicosin, lincomycin and oxytetracycline to 6 P. larvae strains. Results obtained from MBC/MIC showed variable results according to the strain tested with the exception to ATCC 9535 that was susceptible by MIC, bacteriostatic by MBC and presented tolerant effect by MBC/MIC to all the antibiotics. In general terms, OTC and tylosin showed a bactericidal effect while tilmicosin and lincomicin resulted in a bacteriostatic effect. Nevertheless, tylosin showed the best in vitro activity for the inhibition of P. larvae according to their MIC, MBC and MBC/MIC values., Facultad de Ciencias Veterinarias

La loque americana es la enfermedad más grave de origen bacteriano que afecta a las larvas de las abejas melíferas en todo el mundo. En este trabajo, se evaluó la eficacia de 3 dosis diferentes de tartrato de tilosina administradas bajo la forma de “paperpack” en colmenas inoculadas artificialmente con esporas de Paenibacillus larvae, agente etiológico de la enfermedad. La ausencia de larvas con síntomas clínicos demostró que las dosis de 1.000 mg y 1.200 mg de tilosina fueron las más efectivas in vivo protegiendo a las colmenas por un período de hasta 365 días desde la aplicación del tratamiento. Paralelamente, se encontró una mayor efectividad de la dosis de 1.000 mg con el agregado de gelatina de cereza como saborizante. La utilización del tartrato de tilosina en Argentina puede ser una herramienta alternativa para el control de la loque americana a campo, principalmente en colmenares en los cuales se haya detectado resistencia a tetraciclina. Un tratamiento otoñal de 1.000 mg de p.a. de tilosina con saborizante junto con otras pautas de manejo facilitaría el control integrado de la enfermedad evitando la difusión de cepas del patógeno resistentes a tetraciclina., American foulbrood (AFB), caused by the spore-forming bacterium Paenibacillus larvae is the most serious disease affecting the larval and pupal stages of honey bees worldwide. Field studies were conducted to evaluate the optimum dosage of tylosin tartrate for controlling infections of American Foulbrood in artificially inoculated colonies. The absence of larvae with clinical symptoms demonstrated that tylosin tartrate at the doses of 1,000 mg and 1,200 mg per colony were effective for the elimination of clinical signs for up to 365 days. On the other hand, cherry jelly used as attractant increased the consumption of the antibiotic. Tylosin tartrate at a doses of 1,000 mg a.i. plus cherry jelly is a valuable tool for controlling AFB infections., Facultad de Ciencias Veterinarias

La microbiota intestinal del cerdo ejerce roles que benefician al huésped, como la digestión, función hormonal, regulación de la respuesta inmune y protección contra patógenos. El destete es un evento crítico en el ciclo de vida del cerdo asociado con infecciones entéricas y uso de antibióticos. Este trabajo revisa los avances en el empleo de probióticos y aceites esenciales como aditivos en la dieta del cerdo, en particular, en el control de diarreas en pos-destete. Los probióticos son microorganismos vivos que bien administrados confieren buena salud al huésped. Los más empleados pertenecen al género Lactobacillus y se usan para reponer la microbiota intestinal, recuperar el sistema inmunitario del huésped, reducir los efectos de antitoxinas y diarreas, favorecer la digestibilidad de nutrientes y mejorar el rendimiento del cerdo. Por otro lado, los aceites esenciales son productos naturales derivados del metabolismo secundario de las plantas constituidos por diferentes componentes. Empleados como aditivos fitogénicos mejoran las secreciones digestivas, absorción de nutrientes; ejercen acción antimicrobiana y antioxidante, refuerzan el estado inmunológico y el rendimiento en cerdos. Futuros estudios permitirán profundizar el estudio del mecanismo de acción de los aceites esenciales y su interacción con los probióticos y otros aditivos empleados en la dieta del cerdo., Facultad de Ciencias Veterinarias