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Resumen: El lapacho negro es una especie forestal de gran importancia, es maderable y ornamental, por lo que el establecimiento de un protocolo de micropropagación de Handroanthus heptaphyllus podría constituirse en una alternativa para la producción masiva de esta especie. La experimentación se llevó a cabo en el Laboratorio de Biotecnología del Área de Biología de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Asunción, teniendo como objetivo establecer un protocolo para la micropropagación in vitro de Handroanthus heptaphyllus a partir de segmentos nodales. Para la población de variables y unidades fueron sembrados 1620 explantes, cada unidad experimental estuvo constituida por 1 segmento nodal. La experimentación tuvo 12 tratamientos sembrados en dos medios de cultivo (Agar/Agua y MS), los cuales se basaron en variaciones en tiempos de inmersión de etanol e hipoclorito de sodio para el control de contaminación, para el control de oxidación se aplicó el tratamiento de prevención de oxidación 2 g/l de carbón activado, y fueron adicionados fitorreguladores (AIB y BAP). Las plantas madre fueron tratadas con Oxicloruro de cobre (OxiCob®) y Ditiocarbamato (Mancozeb®) en proporción de 3 y 2 g/l respectivamente. Las variables estudiadas fueron el control de manchas foliares en plantas madre, la contaminación de explantes, la oxidación, la sobrevivencia, la brotación, la formación de callos y la longitud de los brotes. El análisis estadístico consistió en pruebas de normalidad de Kolmogorov-Smirnov para todas las variables. Se logró un 45,8% de control de manchas foliares, un 50% de control de la contaminación y la oxidación fue controlada al 100%. Se obtuvo un 60% de explantes vivos hasta los 50 días con diferenciación foliar de 1,5 mm de elongación promedio. Con base en estos resultados se concluye que los tratamientos aplicados incidieron en las variables estudiadas. Abstract: The lapacho negro is a forest species of great importance, it is timber and ornamental, so the establishment of a protocol for micropropagation of Handroanthus heptaphyllus could become an alternative for the mass production of this species. The experimentation was carried out in the Biotechnology Laboratory of the Biology Area of the Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Asunción, with the general objective of establishing a protocol for the in vitro micropropagation of Handroanthus heptaphyllus from nodal segments. For the population of variables and units, 1620 explants were planted, each experimental unit consisted of 1 nodal segment. The experimentation had 12 treatments sown in two culture media (Agar/Water and MS), which were based on variations in immersion times of ethanol and sodium hypochlorite for contamination control, for oxidation control the treatment was applied of oxidation prevention 2 g/l of activated carbon, and phytoregulators (AIB and BAP) were added. The mother plants were treated with Copper Oxychloride (OxiCob®) and Dithiocarbamate (Mancozeb®) in a proportion of 3 and 2 g/l respectively. The variables studied were the control of leaf spots in mother plants, contamination of explants, oxidation, survival, sprouting, callus formation and the length of the shoots. Statistical analysis consisted of Kolmogorov-Smirnov normality tests for all variables. 45.8% leaf spot control was achieved, 50% contamination control, oxidation was 100% controlled. 60% of living explants were obtained up to 50 days with leaf differentiation of 1.5 mm of average elongation. Based on these results, it is concluded that the applied treatments affected the variables studied.

Dentro de la familia de las Musaceas, el género Musa ha adquirido importancia en la alimentacion a nivel mundial, ya sea por el consumo directo (fruta) o indirecto (previa cocción) como es en caso de Bolivia, sin embargo por cambio de actividades agroeconómicas este rubro esta siendo afectado, y tambien carecen de un mecanismo de regeneracion de los plantines libre de enfermedades. El presente estudio tuvo como objetivo estandarizar la desinfección de hijuelos de Gran enano (banano) y Harton (plátano) con diferentes concentraciones de hipoclorito de sodio (NaClO) e inducir la multiplicación con la aplicación de bencilaminopurina. Los hijuelos de ambas variedades fueron sometidas a dos tiempos de desinfección, el primero consistió en seleccionar los hijuelos de 10 a 12 cm de longitud y sumergirlas en hipocloriro de sodio al 8 % durante 12 min y posteriormente, se dividio en dos grupos para la segunda desinfeccion de 2 y 4 % con hipoclorito de sodio durante 7 min, luego fueron enjuagadas y sembradas en el medio Murashige y Skoog (MS) con 2 mg L-1 BAP (bencilaminopurina) + 1 mg L-1 ANA (ácido naftalenacético). En la fase de multiplicación los brotes se sembraron en medios de cultivo (MC1 = MS + 2.5 mg L-1 BAP + 1 mg L-1 ANA) y (MC2 = MS + 5 mg L-1 BAP + 1 mg L-1 ANA). Se determinó que la combinacion de una primera y segunda desinfección 8 y 4 % de NaClO desinfectó un 80 % en Gran enano y 40 % en Hartón respectivamente. En la fase de multiplicación se determinó que el medio de cultivo MS suplementado con 5 mg L-1 de BAP favoreció en la formación de 8 brotes en banano en ambas variedades.

Calibrachoa, perteneciente a la familia Solanaceae, es un género nativo de América del Sur. Las variedades comerciales de esta planta tienen un alto impacto en el mercado de plantas ornamentales por la atractiva forma y color de sus flores, y por su capacidad para adaptarse al uso en canteros y macetas. El objetivo de esta investigación fue desarrollar un protocolo eficiente para la propagación in vitro de Calibrachoa var. Pampa Salmón INTA a partir de meristemas apicales. La combinación de MS ½ + 0,01 mg L-1 BAP resultó en la obtención de un alto porcentaje de regeneración de plantas completas, además de una mayor producción aérea y radical que, consecuentemente, permitieron una alta tasa de sobrevivencia de plantas luego de su transferencia al invernáculo. Calibrachoa, which belongs of the Solanaceae family, is a genus native to South America. Some commercial varieties of this plant have a high impact on the ornamental plant market because of the color and attractive shape of their flowers as well as their adaptability to be grown in flower beds and flower pots. The objective of this work was to develop an efficient protocol for in vitro propagation of Calibrachoa var. Pampa Salmon INTA from apical meristems. The combination of MS ½ and 0.01 mg L-1 BAP resulted in a high percentage of regeneration of plants in addition to a greater aerial (shoot) and radical (root) production that, consequently, allowed for a high rate of plant survival after transfer to the greenhouse. Instituto de Floricultura Fil: Tombion, Leticia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentina Fil: Kato, Adriana Elena. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentina Fil: Soto, Maria Silvina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentina

Quishuar es una especie forestal apreciada por sus usos. La explotación intensiva y la oferta insatisfecha de plantas han sido limitantes para cumplir con programas de reforestación. La micropropagación es una técnica que ayudaría a erradicar este problema ya que el propósito es producir mayor cantidad de plantas en menor tiempo. El objetivo de esta investigación fue desarrollar protocolos para la desinfección, establecimiento y multiplicación in vitro, para el efecto se realizaron ensayos partiendo de semillas y brotes de plantas. La primera fase se realizó con semillas, utilizando kilol y benomil, junto con NaOCl al 3 % (10 min). Los resultados indican que el porcentaje de germinación fue de 100 % en MS (Murashige y Skoog medium) y el porcentaje de contaminación y oxidación de 0 %. Por otro lado, los brotes sometidos a fungicidas con adición de antioxidantes y NaOCl al 1 % (10 min) no presentaron contaminación ni oxidación. El porcentaje de brotación fue de 100 % en WPM (Woody Plant Medium). En la segunda fase en medio MS sin adición de hormonas se observó una mayor longitud de brote (1.95 cm), número de nudos (1.94 nudos) e índice de multiplicación (2.47). Basándose en los resultados, se sugiere que los protocolos son efectivos para la propagación in vitro.// Quishuar is a forest species which is well known for its uses. Intensive farming and unsatisfied plant supply have been limited to meet reforestation programs. Micropropagation is a technique that would help eradicate this problem as the purpose is to produce more plants in less time. The objective of this research was to develop protocols for disinfection, establishment, and multiplication in vitro; for this reason, tests from seeds and plants sprouts were carried out; the first phase with seeds, using kilol and benomil, together with NaOCl at 3 % (10 min). The results indicate that the germination percentage was 100 % in MS (Murashige y Skoog medium) and the contamination, oxidation percentage was 0 %. On the other hand, plants sprouts exposed to fungicides, antioxidants and NaOCl at 1 % (10 min), did not have contamination or oxidation. The sprouting percentage was 100 % in WPM (Woody Plant Medium). In the second phase in MS medium without the addition of hormones, plant sprouts (1.95 cm), knots number (1.94 knots) and multiplication rate (2.67) were observed. Based on the results, it is suggested that protocols are effective for in vitro propagation.

Carludovica palmata Ruíz & Pavón is a plant that belongs to the Cyclanthaceae family. Its commercial interest is related to the production of fibers for the manufacture of handicrafts, mainly the Panama hat, so it is important to study its propagation. This investigation aimed to determine the effect of 6-benzylaminopurine (BAP) in the formation of new shoots and 1-naphthaleneacetic acid (NAA) in the formation of roots, as well as the adaptation in greenhouse conditions of Carludovica palmata Ruíz & Pavón. In order to find the optimal multiplication rate, 0.5 cm length explants were planted in glass jars with 15 mL of semisolid MS with different concentrations of BAP and cultured under in vitro conditions for 90 days. The multiplication parameters in this stage were number of shoots per explant (NSE), length of shoots (LS), and length of roots (LR) as multiplication parameters. In a similar procedure, the number of roots per explant (NRE), length of roots (LR), and length of plantlets (LP) was determined using different concentrations of NAA. Finally, different substrates were evaluated for the adaptation of plantlets of C. palmata produced in vitro, under greenhouse conditions for 80 days. The highest multiplication rate (17±3 shoots per explant) was obtained with 2.0 mg L-1 of BAP. Root formation occurred efficiently in all treatments, without significant statistical differences between them. On the other hand, the use of substrate soil-t15 was the best treatment for the growth of C. palmata under greenhouse conditions. From the results obtained, it is concluded that C. palmata can be efficiently multiplied under in vitro conditions and did not present problems during the in vivo rooting process. RESUMEN Carludovica palmata Ruíz & Pavón es una planta que pertenece a la familia Cyclanthaceae. Su interés comercial se relaciona con la producción de fibras para la elaboración de artesanías principalmente el sobrero de Panamá, por lo que es importante estudiar su propagación. El objetivo de esta investigación fue determinar el efecto de la concentración de 6-bencilaminopurina (BAP) en la formación de nuevos brotes y de ácido 1-naftalenacético (NAA) en la formación de raíces, así como, la adaptación en condiciones de vivero de Carludovica palmata Ruíz & Pavón. Para determinar la tasa de multiplicación óptima, se sembraron explantes de 0.5 cm de longitud en frascos de vidrio con 15 mL de MS semisólido en diferentes concentraciones de BAP y se cultivó bajo condiciones in vitro durante 90 días, obteniendo el número de brotes por explante (NSE), longitud de brotes (LS) y longitud de raíces (LR) como parámetros de multiplicación. En un procedimiento similar, el número de raíces por explante (NRE), longitud de raíces (LR) y longitud de las plántulas (LP), fueron determinadas usando diferentes concentraciones de NAA. Finalmente se evaluaron diferentes sustratos en la adaptación de plántulas de C. palmata producidas in vitro, bajo condiciones de invernadero por un periodo de 80 días. La tasa de multiplicación más alta (17±3 brotes por explante) fue obtenida con 2.0 mg L-1 de BAP. La formación de raíces se dio eficientemente en todos los tratamientos, sin diferencias estadísticas significativas entre estos. Por otra parte, el uso del sustrato suelo-t15 fue el mejor tratamiento en el crecimiento de plántulas C. palmata, bajo condiciones de invernadero. A partir de los resultados obtenidos, se concluye que C. palmata puede multiplicarse eficientemente con técnicas de cultivo in vitro, y no presentó problemas durante el proceso de enraizamiento bajo condiciones in vivo.

Dasylirion cedrosanum es una especie nativa del desierto Chihuahuense y de importancia económica para la producción de alcohol, esto ha generado su saqueo y deforestación. En la técnica de micropropagación el medio basal Murashige y Skoog (MS) es el más utilizado, este medio basal incrementa los costos a nivel comercial. El objetivo de este trabajo fue comparar el medio MS con un medio basal orgánico elaborado a partir de un extracto de vermicompost (EV) en las etapas de multiplicación y enraizamiento de D. cedrosanum. Se establecieron semillas en medio MS para su germinación, posteriormente las plántulas obtenidas se utilizaron como explantes secundarios para la etapa de multiplicación. En la etapa de multiplicación se evaluaron siete tratamientos, en un diseño completamente al azar con 10 repeticiones. Se compararon un testigo (medio MS) y seis concentraciones de EV (30, 25, 20, 15, 10 y 5 mL L-1). En los resultados obtenidos la mayor formación de brotes se obtuvo en el tratamiento testigo (8.25 brotes por explante), en los tratamientos base EV el que generó la mayor cantidad de brotes fue la concentración de 25 ml L-1 (3 brotes por explante), no se encontraron diferencias significativas entre el testigo y la concentración de 25 ml L-1 en las variables número y longitud de hoja. En la etapa de enraizamiento no se presentó diferencia significativa entre tratamientos en el número de raíces. El tratamiento de medio MS y 10 ml L-1 de EV resultaron estadísticamente iguales en largo de raíz (6.53 y 5.99 cm) respectivamente, la concentración de 10 ml L-1 de EV supero al MS en el ancho de raíz (1.13 mm). El medio a base de EV a una concentración de 10 ml L-1 se puede utilizar para sustituir completamente el medio MS en la etapa de enraizamiento de D. cedrosanum.

La manzanilla (Matricaria recutita L., Chamomilla recutita L. y Matricaria chamomilla L.), es conocida por su alto contenido de compuestos fenólicos que le confieren propiedades antiinflamatorias, antisépticas y antimutagénicas. En este estudio se evaluó el porcentaje de fenoles totales y la germinación en cinco periodos de almacenamiento de semillas de M. recutita (5, 31, 75, 96 y 128 días). Además, se evaluó el efecto de citoquininas (6-Bencil Amino Purina, BAP y Kinetina) y auxinas (α-Ácido Naftalen Acético, ANA) en la brotación in vitro de esta especie. Se evidenció que la concentración total de fenoles disminuyó de 13.8% a 1.9% en los cinco periodos de almacenamiento evaluados y que los porcentajes de germinación aumentaron de 2.2% a los cinco días a 8,9% a los 128 días de almacenamiento, mostrándose evidencia de una correlación de -0.989 entre la germinación y el contenido de fenoles totales. Los mejores resultados para inducir brotación (5 brotes/explante) fueron obtenidos en el medio de cultivo MS con citoquininas.

To evaluate the effect of plastic film coverage on ex vitro acclimatization of arrow cane (Gynerium sagitatum Aubl.), shoots of "Criolla", "Martinera" and "Costera" cultivars were in vitro micropropagated in a medium supplied with 6-Benzylaminopurine and half of them were rooted in a medium with 1-Naphtalene acetic acid. Rooted and unrooted shoots were transplanted in a shade house with fog irrigation, into plastic trays (72 clusters per tray), using peat as substrate and half of them was covered with translucent plastic film during 5 days after transplant while the other half was maintained uncovered. The experiment consisted of a three-way factorial arrangement with 12 treatments distributed with a split-plot design where tray coverage was the main plot, cultivars were the split, and rooting condition was the split-plot. Each treatment (36 clusters) was repeated three times for a total of 1296 experimental units. After 40 days in the shade house, the survival rate was calculated, and plant heigth, number of shoots and number of roots data were analyzed by ANOVA (P

NEIKER-BRTA INISEFOR Forest trees are renewable sources of timber and other valuable non-timber products. Nowadays, the increase in population and demand for forestry products results in overexploitation of forestry. Therefore, there is an urgent need to produce elite plants with higher productivity under stress derived from climate change to have available to afforestation. For this reason, propagation methods should be improved to be more efficient in terms of quality and productivity. The main species planted in the Basque Country is Pinus radiata; during the last three years, Pinus radiata plantations have suffered a fungus attack affecting mainly needles until the tree's death. This crisis is caused by the combined action of two fungi of the genus Dothistroma and Lecanosticta acicola, whose expansion seems to have been enhanced by weather-related factors, such as humid and hot summers. Although we have evidence of this disease's presence in our mountains since 1942, the disease has had a speedy expansion with an aggressive effect for reasons that are not scientifically known today. For the above, Basque Country forestry sector is looking for alternative species to be used in its plantations. Part of the forestry sector considers that Sequoia sempervirens could be a good choice for plantations. Besides, its high-quality wood and its tolerance to the attack of several pathogens and other diseases derived from climate change are characteristics that could confer some advantage over other forest species. The main goal of this study was to optimize the micropropagation of adult elite trees of Sequoia sempervirens. The effect of 6-benzylaminopurine, meta-Topolin and Kinetin, and 4 types of explant in the multiplication stage were analyzed to carry out this objective. Furthermore, the effect of two types of auxins: 1-naphthalene acetic acid, indole-3-butyric acid, and a mixture of both, were evaluated on the induction of roots and their subsequent effect on the acclimatization process. The best multiplication index was obtained when 4.4 µM 6-benzylaminopurine and apical explants longer than 1.5 cm of length were used. The root induction percentage was 75% in the most responsive genotype analyzed when 4.4 µM 6-benzylaminopurine was used on the induction stage, and 50 µM of 1-naphthalene acetic acid was used for rooting. Finally, after 3 months in the greenhouse, the explants cultured with Kinetin and rooted in a culture medium with indole-3-butyric acid showed the highest acclimatization success (94%). Los árboles forestales son fuentes renovables de madera y otros valiosos productos no maderables. Hoy en día, el aumento de la población y la demanda de productos forestales se traduce en una sobreexplotación forestal. Por lo tanto, existe una necesidad urgente de producir plantas de élite con mayor productividad bajo estrés derivado del cambio climático para tener disponibles para la forestación. Por esta razón, los métodos de propagación deben mejorarse para que sean más eficientes en términos de calidad y productividad. La principal especie plantada en el País Vasco es Pinus radiata; durante los últimos tres años, las plantaciones de Pinus radiata han sufrido un ataque de hongos que afectó principalmente a las agujas hasta la muerte del árbol. Esta crisis está provocada por la acción combinada de dos hongos del género Dothistroma y Lecanosticta acicola, cuya expansión parece haberse visto favorecida por factores meteorológicos, como los veranos húmedos y calurosos. Si bien tenemos evidencia de la presencia de esta enfermedad en nuestras montañas desde 1942, la enfermedad ha tenido una rápida expansión con un efecto agresivo por razones que no se conocen científicamente en la actualidad. Por lo anterior, el sector forestal del País Vasco está buscando especies alternativas para ser utilizadas en sus plantaciones. Parte del sector forestal considera que Sequoia sempervirens podría ser una buena opción para plantaciones. Además, su madera de alta calidad y su tolerancia al ataque de varios patógenos y otras enfermedades derivadas del cambio climático son características que podrían conferir alguna ventaja sobre otras especies forestales. El objetivo principal de este estudio fue optimizar la micropropagación de árboles adultos de élite de Sequoia sempervirens. Para llevar a cabo este objetivo se analizó el efecto de la 6-bencilaminopurina, meta-Topolin y Kinetin, y 4 tipos de explantes en la etapa de multiplicación. Además, se evaluó el efecto de dos tipos de auxinas: ácido 1-naftaleno acético, ácido indol-3-butírico y una mezcla de ambos sobre la inducción de raíces y su efecto posterior en el proceso de aclimatación. El mejor índice de multiplicación se obtuvo cuando se utilizaron 4,4 µM de 6-bencilaminopurina y explantes apicales de más de 1,5 cm de longitud. El porcentaje de inducción de la raíz fue del 75% en el genotipo más sensible analizado cuando se usó 4,4 µM de 6-bencilaminopurina en la etapa de inducción y 50 µM de ácido 1-naftaleno acético para el enraizamiento. Finalmente, luego de 3 meses en invernadero, los explantes cultivados con Kinetin y enraizados en un medio de cultivo con ácido indol-3-butírico mostraron el mayor éxito de aclimatación (94%) As árvores florestais são fontes renováveis ​​de madeira e outros produtos não-madeireiros valiosos. Hoje, o aumento da população e da demanda por produtos florestais está levando à superexploração das florestas. Portanto, há uma necessidade urgente de produzir plantas de elite com maior produtividade sob estresse das mudanças climáticas para disponibilizá-las para florestamento. Por isso, os métodos de propagação devem ser aprimorados para serem mais eficientes em termos de qualidade e produtividade. As principais espécies plantadas no País Basco são Pinus radiata; Nos últimos três anos, as plantações de Pinus radiata sofreram um ataque de fungos que afetou principalmente as agulhas até a morte da árvore. Essa crise é causada pela ação conjunta de dois fungos do gênero Dothistroma e Lecanosticta acicola, cuja expansão parece ter sido favorecida por fatores meteorológicos, como verões quentes e úmidos. Embora tenhamos evidências da presença desta doença em nossas montanhas desde 1942, a doença tem se expandido rapidamente com efeitos agressivos por razões que não são cientificamente compreendidas no momento. Portanto, o setor florestal do País Basco está em busca de espécies alternativas para serem utilizadas em seus plantios. Parte do setor florestal considera que a Sequoia sempervirens pode ser uma boa opção de plantio. Além disso, sua madeira de alta qualidade e sua tolerância ao ataque de vários patógenos e outras doenças derivadas das mudanças climáticas são características que podem conferir uma vantagem sobre outras espécies florestais. O objetivo principal deste estudo foi otimizar a micropropagação de árvores adultas de Sequoia sempervirens elite. Para a realização deste objetivo, foram analisados ​​os efeitos da 6-benzilaminopurina, meta-Topolina e Kinetina, além de 4 tipos de explantes em fase de multiplicação. Além disso, foi avaliado o efeito de dois tipos de auxinas: ácido 1-naftaleno acético, ácido indol-3-butírico e uma mistura de ambos na indução de raízes e seu posterior efeito no processo de aclimatação. O melhor índice de multiplicação foi obtido quando 4,4 µM de 6-benzilaminopurina e explantes apicais com mais de 1,5 cm de comprimento foram usados. A porcentagem de indução radicular foi de 75% no genótipo mais sensível analisado quando 4,4 µM de 6-benzilaminopurina foi usado na fase de indução e 50 µM de ácido 1-naftaleno acético para enraizamento. Finalmente, após 3 meses em casa de vegetação, os explantes cultivados com Kinetin e enraizados em meio de cultura com ácido indol-3-butírico apresentaram o maior sucesso de aclimatação (94%). Universidad Nacional, Costa Rica. NEIKER, Instituto Vasco de Investigación y Desarrollo Agrario, España Instituto de Investigación y Servicios Forestales

RESUMEN Prosopis pallida, conocido como algarrobo, es una especie emblemática de los bosques secos del norte del Perú. Es de gran importancia económica por su uso en la producción de leña y carbón, así como en la producción de algarrobina proveniente de sus frutos. Actualmente las actividades humanas han deforestado grandes poblaciones de algarrobo en el bosque seco, por lo que es muy importante una propagación masiva para planes de reforestación a gran escala en esos ecosistemas, con la finalidad de conservar la especie y también las características genéticas de individuos élite. El objetivo de la investigación fue establecer un protocolo para la propagación in vitro de algarrobo. Previo a la siembra in vitro, se evaluaron tres tratamientos pregerminativos para poder acelerar la germinación de las semillas con la finalidad de obtener mayor material de propagación. Luego se evaluó el efecto del medio de plantas leñosas con la adición de cuatro concentraciones (0; 0,5; 1,0 y 1,5 mg/L) de citoquininas (BAP y ZEA) sobre la propagación in vitro de Prosopis pallida, habiendo realizado tres ensayos debido a la poca efectividad de brotación de las yemas apicales, resultando mejor la ausencia de citoquininas en yemas apicales con sus dos cotiledones, usando tapas de algodón en los tubos de ensayo. En esta etapa se evaluó el número de nudos, altura de plántula y número de brotes. Para el enraizamiento se ensayó con tres concentraciones (0; 0,5 y 1,0 mg/L) de auxinas (NAA, IBA y IAA), y se evaluó el porcentaje de enraizamiento, longitud de la raíz y número de raíces; obteniéndose mejores resultados con 0,5 mg/L IBA. En la fase de aclimatación se evaluó el porcentaje de aclimatación en dos tipos de sustratos, obteniéndose mejores resultados con sustrato comercial de turba y vermiculita. ABSTRACT Prosopis pallida, known as algarrobo, is an emblematic species of the dry forests of northern Peru. It is of great economic importance for its use in the production of firewood and coal, as well as in the production of carob from its fruits. Currently human activities have deforested large populations of algarrobo in the dry forest, so it is very important a massive propagation for large-scale reforestation plans in these ecosystems, in order to conserve the species and also the genetic characteristics of elite individuals. The objective of the research was to establish a protocol for the in vitro propagation of algarrobo. Before in vitro propagation, It was evaluated the effect of three seeds treatments to accelerate seeds germination in order to get more propagation material. Then, the effect of woody plants medium with the addition four concentrations (0, 0.5, 1.0 and 1.5 mg /L) of cytokinins (BAP and ZEA) on the in vitro propagation of Prosopis was evaluated and it has performed three trials for the ineffective budding of apical buds, resulting in a better absence of cytokinins in apical buds with their two cotyledons, and using cotton lids in the test tubes. In this stage the number of nodes, seedling height and number of shoots was evaluated. For rooting, it was tested with three concentrations (0, 0.5 and 1.0 mg /L) of auxins (NAA, IBA and IAA), and the percentage of rooting, root length and amount of roots was evaluated, obtaining better results with 0.5 mg / L IBA. In the acclimation phase, the acclimation percentage was evaluated using two substrates, and the best results were commercial substrate of peat and vermiculite.

In vitro propagation and tissue culture technique is an alternative for obtaining healthy potato seeds. However, data found in the literature differ on the optimal consistency of the culture medium to be used in vitro. The aim in this research was to look at the adaptation of potato cultivars to medium with different agar concentrations. The experimental design was entirely randomized in a factorial scheme. The experiment tested the effect of 3 agar medium concentrations (solid, semisolid and liquid) on 6 cultivars (Agata, Bel, Camila, Catucha, Clara and Eliza), with 5 repetitions. We quantified from the plantlets, fresh and dry mass of roots and shoot, the number of nodes, the multiplication capacity and vigor. The study showed that potato cultivars respond significantly to different concentrations of agar and their best response was in the semisolid medium. La técnica de propagación in vitro y cultivo de tejidos es una alternativa para obtener semillas de papa saludables. Sin embargo, los datos encontrados en la literatura difieren en la consistencia ideal del medio de cultivo que se utilizará in vitro. El objecto en este estudio, es verificar la adaptación de los cultivares de papa a los medios de cultivo con diferentes concentraciones de agar. El diseño experimental fue completamente al azar en un esquema factorial. El experimento probó el efecto de 3 concentraciones de agar del medio de cultivo (sólido, semisólido y líquido) en 6 cultivares (Agata, Bel, Camila, Catucha, Clara y Eliza), con 5 repeticiones. A partir de las plántulas, se cuantificó la masa fresca y seca de las raíces y la parte aérea, el número de nodos, la capacidad de multiplicación de las plántulas y su vigor. El estudio mostró que los cultivares de papa responden significativamente a diferentes concentraciones de agar, y su mejor respuesta fue en el medio semisólido. A técnica de propagação in vitro e cultivo de tecidos é alternativa para obter sementes sadias de batata. Entretanto, não há concordância sobre a consistência ideal do meio de cultura a ser utilizado in vitro. O objetivo neste estudo foi verificar a adaptação de cultivares de batata em meios de cultura com diferentes concentrações de ágar. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial. O experimento testou o efeito de 3 concentrações de ágar do meio de cultura (sólido, semissólido e líquido) em 6 cultivares (Agata, Bel, Camila, Catucha, Clara e Eliza), com 5 repetições. Das plântulas foi quantificada a massa fresca e seca de raízes e da parte aérea, o número de nós, a capacidade de multiplicação da plântula e seu vigor. O estudo mostrou que as cultivares de batata respondem significativamente a diferentes concentrações de ágar, sendo que sua melhor resposta foi no meio semissólido.

Alstroemeria (Alstroemeriaceae) es un género nativo de Sudamérica. Sus especies, que se distribuyen desde Venezuela hasta Argentina y Chile, tienen alto impacto en el mercado de plantas ornamentales, debido al color y atractiva forma de sus flores. El cultivo in vitro de meristemas aumenta la eficiencia de la propagación de las plantas y su calidad, por contribuir con el saneamiento de enfermedades sistémicas. El presente estudio tuvo como objetivo desarrollar un protocolo eficiente de cultivo in vitro de meristemas de rizoma de Alstroemeria híbrida var. Fiesta de 15 INTA, a partir del agregado de reguladores de crecimiento bencilaminopurina (BAP) y ácido naftalenacético (ANA) a un medio de cultivo base. Se evaluó la cantidad total de plantas completas alcanzadas, producción de hojas, longitud aérea y radical, formación de callo, necrosis y mortandad de los explantos sembrados sobre MS; MS + 1 mg L-1 BAP; MS + 0,2 mg L-1 ANA; y MS + 0,2 mg L-1 ANA + 1 mg L-1 BAP. Se realizó un análisis de la varianza y la evaluación de diferencias entre medias por el test de Tukey. La suplementación de 0,2 mg L-1 ANA al medio MS es suficiente para el cultivo de meristemas de rizoma de Alstroemeria var. Fiesta de 15 INTA, ya que su empleo resultó en una mayor producción aérea y radical y, consecuentemente de plantas completas, además de un alto porcentaje de sobrevivencia de plantas luego de su transferencia al invernáculo. Alstroemeria (Alstroemeriaceae) is a genus endemic to South America. Its species, which are distributed from Venezuela to Argentina and Chile, have a high impact on the ornamental plant market because of the color and attractive shape of their flowers. In vitro culture of meristems increases the efficiency of plant propagation and quality by contributing to the cleaning of systemic diseases. The present study aimed to develop an efficient protocol for rhizome meristems culture of Alstroemeria hybrida var. Fiesta de 15 INTA with the addition of growth regulators bencilaminopurine (BAP) and naftalenacetic acid (NAA) to a base culture medium. Whole plants, leaf production, shoot and root length, callus formation, necrosis and mortality of explants planted on MS; MS + 1 mg L-1 BAP; MS + 0.2 mg L-1 NAA; and MS + 0.2 mg L-1 NAA + 1 mg L-1 BAP were evaluated. An analysis of variance and evaluation of differences between means were performed by the Tukey test, which indicated that an efficient method for the micropropagation of Alstroemeria var. Fiesta de 15 INTA consists of MS supplemented with 0.2 mg L-1 NAA. This procedure resulted in a greater shoot (aerial) and root (radical)growth and, consequently, in a higher number of whole plants as well as a high plant survival rate after transfer to the greenhouse. Instituto de Floricultura Fil: Tombion, Leticia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentina Fil: Soto, Maria Silvina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentina Fil: Mori, Marcela Noemi. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentina Fil: Mira, Anabela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentina Fil: Facciuto, Gabriela Rosa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentina

Se desarrolló un protocolo para la micropropagación de Epithelantha micromeris, cactácea en estatus de riesgo, que comprende cuatro etapas: establecimiento, multiplicación, enraizamiento y aclimatación, a fin de obtener plantas con tamaño uniforme en cantidad suficiente y con buena calidad fitosanitaria. El método de propagación presentado es eficiente respecto al tradicional y constituye una nueva tecnología de producción cuya aplicación es factible en el sistema-producto ornamental, bajo el esquema de laboratorio-invernadero. Las semillas de E. micromeris son quiescentes y pueden establecerse in vitro en el medio MS a 50%, en el cual registra un PG máximo de 60%, que supera a su homólogo adicionado con fitohormonas (AG3); esto significa que el taxón no requiere promotores para germinar. La inducción de brotes se logró mediante segmentos de epicotilo, como explantes, en medio de cultivo MS con diferentes tratamientos. Se determinó que el tipo y la concentración de fitohormona influyen en la tasa de multiplicación, pues se formaron hasta 15 brotes por explante; la cinetina (KIN) en interacción 10:1 con AIB en baja concentración es la promotora de ese efecto. Durante el enraizamiento in vitro se observó que la aplicación de 1.5 x 106 UFC mL-1 de Azospirillum brasilense tiene un efecto positivo en el proceso rizogénico: se originaron hasta nueve raíces por planta, con 2.3 cm de longitud. A partir de esta metodología es posible regenerar especies en estatus de riesgo de importancia ecológica para el Desierto Chihuahuense y optimizar los procesos biológicos para la producción de plantas de ornato.

Achyrocline satureioides is a shrub native from South America. In popular medicine it is used in infusions such as digestive, carminative, antispasmodic, eupeptic and emmenagogue. However, its main use is as an ingredient in the liquor industry. Commercial exploitation is carried out through the collection of natural populations in an unsustainable way. The micropropagation of A. satureioides will allow its massive propagation and it will settle a base for its domestication. For this, a clone denominated as M1-5 was first propagated by cuttings. Subsequently, nodal segments obtained from young stems were disinfected by a standard method and cultured on MS medium. These shoots were used as a source of explants for subsequent assays. For its in vitro establishment MS medium and WPM were tested. Once the culture was established, the responses of the explants to increasing concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) (0.0; 0.5; 2.5 and 5.0 μM) with and without 0.05 μM α-naphthalene acetic acid (NAA) on WPM as basal medium were studied during 35 days. The proliferation of buds, the presence of callus and the number and length of the roots were evaluated. All of the “macela” cuttings in vivo propagated rooted and developed satisfactorily under the conditions tested. The application of 5.0 μM BAP alone generated the best multiplication rate, so it was selected as the multiplication medium. De novo shoots rooted spontaneously and finally, transferred to the greenhouse. Here in it was possible to establish a micropropagation protocol not only for the production of plantlets of selected clones but also for the application of biotechnological tools in the development of A. satureioides germplasm. Achyrocline satureioides é um arbusto nativo da América do Sul. Na medicina popular é usado em infusões como digestivo, carminativo, antiespasmódico, eupéptico e emenagogo. No entanto, seu principal uso é como ingrediente na indústria de bebidas. A exploração comercial é feita através da coleta em populações naturais, de modo extrativista e predatório. A micropropagação de A. satureioides permite a multiplicação massiva dessa espécie e é um reforço para sua domesticação e melhoramento. Para isso, um clone denominado M1-5 foi propagado por estacas. Posteriormente, segmentos nodais obtidos de hastes jovens, desse clone, foram desinfetados pelo método padrão e cultivados em frascos contendo meio MS. Essas brotações foram usadas como fonte de explantes para ensaios subsequentes. Testaram-se no estabelecimento in vitro, o meio MS e o WPM. Uma vez estabelecida a cultura in vitro, estudaram-se as respostas dos explantes em relação a concentrações crescentes 0; 0,5; 2,5 e 5,0 μM de 6-benzilaminopurina (BAP) e adição ou ausência de ácido α-naftaleno acético (ANA) 0,05 μM, em meio basal WPM. A cultura foi monitorada periodicamente por 35 dias, registrando a proliferação de gemas, a presença de calos e o número e comprimento das raízes. Todas as estacas da «macela» propagadas in vivo enraizaram-se e desenvolveram-se satisfatoriamente nas condições testadas. A aplicação de 5,0 μM de BAP por si só gerou a melhor taxa de multiplicação, razão pela qual foi estabelecida como a dose ideal de trabalho. Os brotos gerados de novo enraizaram espontaneamente e foram transferidos para casa de vegetação. Neste trabalho foi possível estabelecer um protocolo de micropropagação para propagação em larga escala de plataforma tecnológica, seja para a produção de mudas de clones selecionados, seja para a aplicação de ferramentas biotecnológicas no pré-melhoramento de germoplasma de “macela”. Achyrocline satureioides é um arbusto nativo da América do Sul. Na medicina popular é usado em infusões como digestivo, carminativo, antiespasmódico, eupéptico e emenagogo. No entanto, seu principal uso é como ingrediente na indústria de bebidas. A exploração comercial é feita através da coleta em populações naturais, de modo extrativista e predatório. A micropropagação de A. satureioides permite a multiplicação massiva dessa espécie e é um reforço para sua domesticação e melhoramento. Para isso, um clone denominado M1-5 foi propagado por estacas. Posteriormente, segmentos nodais obtidos de hastes jovens, desse clone, foram desinfetados pelo método padrão e cultivados em frascos contendo meio MS. Essas brotações foram usadas como fonte de explantes para ensaios subsequentes. Testaram-se no estabelecimento in vitro, o meio MS e o WPM. Uma vez estabelecida a cultura in vitro, estudaram-se as respostas dos explantes em relação a concentrações crescentes 0; 0,5; 2,5 e 5,0 μM de 6-enzilaminopurina (BAP) e adição ou ausência de ácido α-naftaleno acético (ANA) 0,05 μM, em meio basal WPM. A cultura foi monitorada periodicamente por 35 dias, registrando a proliferação de gemas, a presença de calos e o número e comprimento das raízes. Todas as estacas da «macela» propagadas in vivo enraizaram-se e desenvolveram-se satisfatoriamente nas condições testadas. A aplicação de 5,0 μM de BAP por si só gerou a melhor taxa de multiplicação, razão pela qual foi estabelecida como a dose ideal de trabalho. Os brotos gerados de novo enraizaram espontaneamente e foram transferidos para casa de vegetação. Neste trabalho foi possível estabelecer um protocolo de micropropagação para propagação em larga escala de plataforma tecnológica, seja para a produção de mudas de clones selecionados, seja para a aplicação de ferramentas biotecnológicas no pré-melhoramento de germoplasma de “macela” Instituto de Genética Fil: Guariniello, Julian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina Fil: Iannicelli, Jesica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina Fil: Peralta, Patricia Angelica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética ; Argentina Fil: Escandon, Alejandro Salvio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina

Renealmia alpinia is a medicinal plant that has been cultivated and used for the treatment of headaches, abdominal pain, as a febrifuge and to treat snake bites in southeast Colombia and in the Caribbean islands. Moreover, its edible fruits are commonly used as spice in Mexico. The R. alpinia leave-extracts have shown enzymatic inhibition of Bothrops atrox and Bothrops asper snake poison. The extracts also showed effects as a peripheral analgesic agent. This report investigates the analgesic activity of the essential oils obtained by hydrodistillation from wild and in vitro propagation samples of R. alpinia as well as the chemical profile using GC-MS. The essential oils isolated from R. alpinia evaluated on concentrations of 50, 75 and 100 mg/kg showed significant antinociceptive effects in the test of acetic-acid-induced abdominal writhing, compared to the control animals. The essential oil of the wild flora leaves showed the highest percentage of pain inhibition by 200 mg/kg, concluding that the essential oil of R. alpinia presents antinociceptive activity in an in vivo model. These results help us to understand the traditional use of R. alpinia to treat pain and make it a potential source for the development of phytopharmaceutics. COL0014476

Resumen Introducción. Las propiedades nutricionales, capacidad antioxidante y valor comercial de la pitahaya amarilla son un atractivo para su siembra, por ello, es necesario estudiar mejoras tecnológicas para su propagación. Objetivo. Evaluar la viabilidad del establecimiento y multiplicación in vitro de pitahaya amarilla, con el uso como explantes de plántulas provenientes de la germinación in vitro y distintas fuentes hormonales. Materiales y métodos. El experimento se desarrolló en el Laboratorio de Fisiología y Biotecnología Vegetal de la Universidad Nacional Toribio Rodríguez de Mendoza, Perú, entre febrero y junio de 2020. Se evaluaron cuatro tratamientos para la germinación [control: agua estéril (3 mL), E1: MS (50 %), sacarosa (30 g L-1), agar (6 g L-1), E2: AG3 (250 mg L-1), E3: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (6 g L-1), AG3 (250 mg L-1)] y multiplicación [control: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (7 g L-1), M1: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (7 g L-1), agua de coco (10 ml L-1), M2: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (7 g L-1), agua de coco (20 ml L-1), carbón activado (2 g L-1), M3: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (7 g L-1), BAP (0,10 mg L-1), ANA (3 mg L-1)]. Las variables evaluadas fueron: germinación (%), número y longitud de brotes y raíces, formación de callos (%), enraizamiento (%) y número de aréolas. Resultados. La mejor germinación (100 %) se obtuvo en el medio E1, con más de tres raíces y dos brotes por plántula. El medio M2 generó la mejor multiplicación, con 82,5 % de enraizamiento, brotes de 1,66 cm y 1,86 aréolas, y menor presencia de tejido calloso (60 %). Conclusión. Se logró la micropropagación de pitahaya amarilla al emplear como fuente de explante plántulas obtenidas in vitro. Abstract Introduction. The nutritional properties, antioxidant capacity, and commercial value of the yellow dragon fruit are attractive for its sowing; therefore, it is necessary to study technological improvements for its propagation. Objective. To evaluate the feasibility of in vitro establishment and multiplication of yellow dragon fruit, with the use as explants of seedlings from the in vitro germination and various hormonal sources. Materials and methods. The experiment was developed in the Plant Physiology and Biotechnology Laboratory of the Universidad Nacional Toribio Rodriguez de Mendoza, Peru, between February and June 2020. Four treatments were evaluated for germination [control: sterile water (3 ml), E1: MS (50 %), sucrose (30 g L-1), agar (6 g L-1), E2: AG3 (250 mg L-1), E3: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (6 g L-1), AG3 (250 mg L-1)] and multiplication [control: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (7 g L-1), M1: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (7 g L-1), coconut water (10 ml L-1), M2: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (7 g L-1), coconut water (20 ml L-1), activated carbon (2 g L-1), M3: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (7 g L-1), BAP (0.10 mg L-1), ANA (3 mg L-1)]. The evaluated variables were: germination (%), number and length of shoots and roots, callus formation (%), rooting (%), and the number of areoles. Results. The best germination (100 %) was obtained in the E1 medium, with more than three roots and two shoots per seedling (2,64 cm). The M2 medium generated the best multiplication, with 82.5 % rooting, 1.66 cm shoots and 1.86 areoles, and less presence of callus tissue (60 %). Conclusion. The micropropagation of yellow dragon fruit was achieved by using seedlings obtained in vitro as an explant source.

This work details the investigation of the influence of organo-mineral supplementation on the production of secondary metabolites in in vitro-germinated Bromelia balansae Mez. The seeds were germinated in vitro and transplanted to standard soils to undergo organo-mineral supplementation. The fully-grown plants were subjected to qualitative phytopharmacological prospection; quantitative analysis of total phenols and flavonoids; as well as chemical profiling by mass spectrometry. The in vitro germination of B. balansae was successful, with a germination rate of 94.95 %, thereby equaling to “super seeds” reported in literature. Moreover, the organo-mineral supplementation enhances the production of secondary metabolites in both leaves and roots, what therefore leads to higher yield of total phenols and flavonoids. Furthermore, mass spectrometry analysis confirmed the results from phytopharmacological prospection, and allowed the detection of fragments of secondary metabolites from shikimate/polyketide/mevalonate pathways. Este trabajo detalla la investigación de la influencia de la suplementación organomineral en la producción de metabolitos secundarios en Bromelia balansae Mez. germinada in vitro. Las semillas se germinaron in vitro y se trasplantaron a suelos estándar para someterse a una suplementación organomineral. Las placas completamente desarrolladas se sometieron a prospección fitofarmacológica cualitativa; análisis cuantitativo de fenoles y flavonoides totales; así como el perfilado químico por espectrometría de masas. La germinación in vitro de B. balansae fue exitosa, con una tasa de germinación del 94,95%, lo que equivale a las “super semillas” reportadas en la literatura. Además, la suplementación organomineral mejora la producción de metabolitos secundarios tanto en hojas como en raíces, lo que conduce a un mayor rendimiento de fenoles y flavonoides totales. Además, el análisis de espectrometría de masas confirmó los resultados de la prospección fitofarmacológica y permitió la detección de fragmentos de metabolitos secundarios de las rutas de shikimato / policétido / mevalonato. Este trabalho detalhou a investigação da influência da suplementação organo-mineral na produção de metabólitos secundários em Bromelia balansae Mez. germinada in vitro. As sementes foram germinadas in vitro e transplantadas para solos padrão para suplementação organo-mineral. As plantas totalmente crescidas foram submetidas a prospecção fitofarmacológica qualitativa; análise quantitativa de fenóis e flavonóides totais; bem como perfis químicos por espectrometria de massa. A germinação in vitro de B. balansae foi bem-sucedida, com taxa de germinação de 94,95%, igualando-se às “super sementes” relatadas na literatura. Além disso, a suplementação organo-mineral aumentou a produção de metabólitos secundários tanto nas folhas quanto nas raízes, o que, portanto, levou a um maior rendimento de fenóis e flavonóides totais. Além disso, a análise por espectrometria de massa confirmou os resultados da prospecção fitofarmacológica e permitiu a detecção de fragmentos de metabólitos secundários das vias do chiquimato/ policetídeo / mevalonato.

En la presente investigación se estableció un protocolo de micropropagación para Espeletia paipana S. Díaz y Pedraza, especie en peligro de extinción con una población actual de 26 plantas adultas. Los explantes primarios (semillas) fueron desinfectados superficialmente con hipoclorito de sodio (NaOCl) o hipoclorito de calcio [Ca(ClO)2]. Los embriones asépticos se cultivaron en medio MS con macroelementos a diferentes concentraciones, con y sin ácido giberélico (GA3), kinetina (KIN) y 3-ácido indolbutírico (AIB), también se estudió el efecto de luz y temperatura sobre la germinación; para la multiplicación de brotes se utilizó MS suplementado con AIB y bencil amino purina (BA). Para el enraizamiento se probó AIB+BA, AIB y ácido naftalenacético (ANA) y para el endurecimiento de plántulas se ensayaron diferentes mezclas de capote, tierra y arena. Los resultados mostraron que el mayor porcentaje de embriones asépticos (66%) se obtuvo utilizando 1% de Ca(ClO)2. El mayor porcentaje de embriones germinados (50%) se registró en medio basal MS/4 suplementado con 1 mg l-1 de GA3 y la mayor cantidad de embriones reactivos y de plántulas viables se obtuvo a 24 ºC e iluminación continua. Los mejores resultados de proliferación de brotes se cuantificaron en MS con 0,5 mg l-1 AIB + 0,05 mg l-1 de BA, mientras que el 85% de enraizamiento se logró en MS con 5 mg l-1 de AIB. El mayor porcentaje de plántulas viables (65%) en invernadero se cuantificó utilizando una mezcla de capote y tierra, proporción 3:1. El protocolo establecido es aplicable para desarrollar programas de propagación masiva que permitan evitar la extinción de E. paipana.

Polyphenols are a large diversity of chemical types and interactions that can be responsible for a multiplicity of protective functions ranging from toxicity and light/UV shielding to signal transduction. Bacharis antioquensis has been described as a potential source of new photoprotective compounds with antioxidant capacity associated to polyphenols compounds. The aim of the present work was to develop a micropropagation protocol of B. antioquensis and evaluate the production of polyphenols by in vitro plants exposure to UVB radiation. Branches in juvenile stage of B. antioquensis were collected, desinfected and cultured on half strength Murashige and Skoog medium, supplemented or not with growth regulators (TDZ, BA or GA3) on light/darkness conditions and liquid/solid media. After UV treatments, the absorption coefficient in the UVA-UVB range, the antioxidant capacity and the total phenol content (TPC) from all tissue cultures and the wild tissue were evaluated. Growth regulators, light conditions and type of culture medium (solid or liquid) had a favorable effect on the response of explants. Treatments containing BA + GA3 regulators (2 and 0.5 mg/L respectively) and TDZ (0.5 mg/L) showed positive results in bud growth in liquid medium and darkness. Results showed that UVR exhibited promoting effects on the accumulation of polyphenols, enhancing the absorption coefficient in the UVA-UVB range, the antiradical capacity and the TPC of B. antioquensis in vitro plants. Rev. Biol. Trop. 66(2): 754-764. Epub 2018 June 01. Resumen Los polifenoles son compuestos químicos con una diversidad de interacciones que pueden ser responsables de muchas funciones, que van desde la toxicidad hasta la protección y blindaje contra la luz/UV. Baccharis antioquensis es una fuente potencial de compuestos fotoprotectores con capacidad antioxidante. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un protocolo de micropropagación para B. antioquensis y evaluar la producción de polifenoles in vitro por exposición a la radiación UVB. Ramas juveniles fueron colectadas y cultivadas en medio de Murashige y Skoog (MS) y suplementadas o no con reguladores de crecimiento (TDZ, BA o GA3) en diferentes condiciones de luz/oscuridad y medios líquidos/sólidos. Después de los tratamientos UVR, se midió el espectro de absorción UV y se evaluó el coeficiente de absorción en la región UVA-UVB, la capacidad antioxidante y TPC tanto en las plantas in vitro como en las plantas silvestres. Los tratamientos que contenían reguladores BA + GA3 (2 y 0.5 mg / L respectivamente) y TDZ (0.5 mg / L) mostraron resultados positivos en el crecimiento del brote en medio líquido y en condiciones de oscuridad. Los resultados mostraron que la UVR tiene efectos promotores sobre la acumulación de metabolitos secundarios, aumentando el coeficiente de absorción en la región UVA-UVB, la capacidad antiradicalaria y TPC en las plantas in vitro.

El árbol de eucalipto (Eucalyptus pellita) es un recurso forestal que representa una importante oportunidad para el fomento de reforestación en la Orinoquia colombiana. Para la propagación clonal de árboles seleccionados por sus características sobresalientes de crecimiento y calidad de la madera se requiere desarrollar estrategias para lograr su eficiente multiplicación. El objeto del presente trabajo fue el de propagar árboles plus de E. pellita F. Muell, mediante la técnica de cultivo de tejidos vegetales in vitro. Para la fase de establecimiento se empleó como fuente de explantes segmentos nodales obtenidos a partir de brotes epicórmicos de árboles plus. En condiciones de total asepsia se realizó una desinfección con etanol al 70% durante un minuto, seguido por una inmersión en hipoclorito de sodio al 1% durante 15 minutos. La siembra se realizó en el medio de Murashige y Skoog obteniéndose hasta un 70% de cultivos libres de contaminación. Para la proliferación se evaluó el efecto de diferentes concentraciones de BAP, donde las dosis de 0,25 y 0,5 mg L-1 permitieron obtener 8,83 y 7,88 brotes por explante en 30 días. El enraizamiento se logró cuando se adicionó al medio de cultivo 1 mg L-1 de AIB con un 80% de brotes que formaron raíces. Cuando las plántulas se llevaron a aclimatización en un sustrato compuesto por turba en condiciones de riego por microaspersión automatizado, se obtuvo un 100% de supervivencia.

Se presentan los procedimientos para la propagación in vitro de Perezia pinnatifida (Humb. & Bonpl.) Wedd., conocida como “valeriana”. Se utilizaron las metodologías de multiplicación de brotes y embriogénesis somática indirecta. El medio de cultivo basal para todas las etapas fue Murashige y Skoog a mitad de sales, suplementado con sacarosa 2.0%, phytagel 0.3% y pH 5.67; y fue usado con o sin fitohormonas en los diferentes tratamientos. Los suplementos hormonales fueron: para la multiplicación de brotes BAP 1.0 mg.L-1 + ANA 0.01 mg.L-1 ó BAP 1.0 mg.L-1; para la inducción de callos embriogénicos ANA ó 2,4-D (1.0 mg.L-1 y 2.0 mg.L-1); y para la germinación de embriones BAP (0.5 y 1.0 mg.L-1) o BAP 0.5 mg.L-1 + ANA 0.05mg.L-1. El mayor número de brotes se obtuvo el medio suplementado con BAP 1.0 mg.L-1. En la embriogénesis somática, ANA a 1.0 mg.L-1 indujo mayor área de callos embriogénicos, y BAP a 0.5 mg.L-1 permitió mayor germinación de los embriones somáticos., This work inform on in vitro propagation of the "valeriana" Perezia pinnatifida (Humb. & Bonpl.) Wedd. Shoot multiplication and indirect somatic embryogenesis methodologies were performed. The basal culture medium for all stages was Murashige and Skoog, middle of salts supplemented with 2.0% sucrose, 0.3% phytagel and pH 5.67; the treatments were prepared with or without phytohormones. The hormonal supplements for the shoot multiplication were: BAP 1.0 mg.L-1 + ANA 0.01 mg.L-1, and BAP 1.0 mg.L-1; for embryogenic callus induction were: ANA or 2,4-D (1.0 mg.L-1 and 2.0 mg.L-1); and for the embryo germination were: BAP (0.5 and 1.0 mg.L-1) or BAP 0.5mg.L-1 + ANA 0.05mg.L-1. BAP 1.0 mg.L-1 produced the higher number buds. For somatic embryogenesis, ANA 1.0 mg.L-1 induced a greater area of embryogenic callus, and BAP 0.5 mg.L-1 allowed major germination of the somatic embryos.

Es de gran importancia mantener la diversidad genética de los materiales tradicionales y de plantas silvestres. Se realizó la salvaguarda del germoplasma de manzana Emilia, utilizando técnicas de cultivo de tejidos in vitro. Se evaluaron dos medios de cultivo y seis concentraciones para desinfección; además, de ocho tratamientos para brotación, utilizando distintas concentraciones de 6-bencilaminopurina (BAP) y para enraizamiento cuatro tratamientos con ácido indol butírico (IBA). Se utilizó un DCA con un arreglo factorial 2 x 4 con seis observaciones. Se evaluó: porcentajes de contaminación, de oxidación, viabilidad, días a la brotación, numero de brotes y longitud de brotes. Los tratamientos iguales y superiores al 10% de NaClO durante 10 minutos presentaron valores adecuados de no contaminación de explantes. La menor cantidad de explantes oxidados presentaron correlación directamente proporcional en las respuestas a menor concentración y tiempo de exposición. El mayor porcentaje de explantes viables (77%) se expresó en el tratamiento de NaClO al 10% durante 15 minutos. Las mejores respuestas en cuanto a la variable días a la brotación se presentó en los tratamientos sin intervención del BAP. La mejor respuesta en cuanto al número de brotes se manifestó para el tratamiento 1 ppm de BAP en los medios de cultivo (Murashige y Skoog modificado - MSM y Medio CHU 10 Modificado por Gerloff). La mejor respuesta en el tamaño del brote se expresó en el tratamiento CHU + 1 ppm de BAP. Los tejidos celulares de la manzana Emilia presentan alta susceptibilidad a contaminantes microbianos y a la oxidación de tejidos, por lo cual dificulta la multiplicación por medio de cultivo in vitro. Las altas concentraciones de BAP inhiben respuestas fisiológicas espontáneas en explantes de la manzana Emilia, especialmente en etapas iniciales donde existe mayor producción de efectos hormonales intrínsecos.// It is of great importance to maintain the genetic diversity of traditional materials and wild plants. The Emilia apple germplasm was safeguarded, using in vitro tissue culture techniques. Two culture media and six concentrations were evaluated for disinfection; in addition, eight treatments for budding, using different concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) and for rooting four treatments with indole butyric acid (IBA). We used a DCA with a 2 x 4 factorial arrangement with six observations. The percentages of contamination, oxidation, viability, days at sprouting, number of shoots and length of shoots were evaluated. Treatments equal to and greater than 10% NaClO for 10 minutes had adequate values of non-contamination of explants. The lower number of oxidized explants had a direct proportional correlation in the responses to less concentration and time of exposure. The highest percentage of viable explants (77%) was expressed in 10% NaClO treatment for 15 minutes. The best responses regarding the variable days to budding were presented in the treatments without BAP intervention. The best response in the number of outbreaks was manifested for the 1 ppm BAP treatment in the culture media (Murashige and Skoog modified - MSM and Modified CHU 10 by Gerloff). The best response in the size of the outbreak was expressed in the treatment CHU + 1 ppm BAP. The cellular tissues the Emilia apple show high susceptibility to microbial contaminants and the oxidation of tissues, which makes it difficult to multiply by in vitro culture. High concentrations of BAP inhibit spontaneous physiological responses in explants of the Emilia apple, especially in the early stages where there is greater production of intrinsic hormonal effects.

Numerosos trabajos de propagación in vitro de mandioca se han citado, sin embargo, la eficiencia de la multiplicación sólo se ha establecido para un número muy restringido de cultivares y/o subcultivos. Con el objeto de evaluar el comportamiento in vitro de 20 cultivares de mandioca de interés para el Nordeste Argentino durante la fase de multiplicación (6 subcultivos totales realizados cada 30 días), se cultivaron segmentos uninodales en medio basal de Murashige y Skoog (1962) más 0,01 mg/L de ácido 1-naftalenacético, 0,01 mg/L de 6-bencilaminopurina y 0,1 mg/L de ácido giberélico. En el 100% de los cultivares fue posible la regeneración de plantas durante los 6 subcultivos. Independientemente del subcultivo, el número promedio de nudos regenerados por explante varió significativamente con el cultivar (P0,0001), rondando valores de 2 a 5 nudos. El número promedio de nudos acumulados fue significativamente distinto dependiendo del cultivar, alcanzando valores de 46 a 16.568 nudos totales (P0,0001). Fue posible distinguir 3 grupos de cultivares, en relación a su capacidad de propagación y de crecimiento en longitud. El conocimiento de la tasa de multiplicación de distintos cultivares de mandioca permitirá ajustar los protocolos para optimizar la eficiencia de la micropropagación de mandioca. Micropropagation efficiency determination of cassava (Manihot esculenta, Euphorbiaceae) genotypes of interest to the Northeast of Argentina. In vitro cassava propagation has been reported in numerous studies; however, the efficiency of multiplication had only been established in a very restricted number of cultivars and / or subcultures during micropropagation. In order to evaluate the in vitro multiplication of 20 economically important cassava cultivars of Northeast Argentina (six total subcultures performed every 30 days), uninodal segments were cultured in basal Murashige and Skoog (1962) supplemented with 0.01 mg/L of 1-naphthaleneacetic acid, 0.01 mg/L of 6-benzylaminopurine and 0.1 mg/L gibberellic acid. Plant regeneration was possible in 100% of the cultivars during the 6 subcultures. Regardless of the subculture, the average number of nodes regenerated per explant varied significantly among cultivar from two to five nodes per plants (P?0,0001). The average number of accumulated nodes was significantly different among cultivars with values that ranged from 46 to 16,568 nodes per plants (P?0,0001). Results show variability due to genotype, distinguishing three cultivars groups according to their propagation efficiency and growth in length ability. Determining the multiplication rate of different cassava cultivars is essential for optimizing micropropagation. Fil: Medina, Ricardo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina Fil: Schaller, Silvia Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina Fil: Dolce, Natalia Raquel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina Fil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina

La caña flecha Gynerium sagitatum Aubl. (Poaceae) es una especie de gran importancia ambiental, cultural y económica para ciertas comunidades indígenas del Norte de Colombia, empleando su fibra en la fabricación apreciables artesanías. La cosecha de la planta y la no reposición de esta, viene contribuyendo en la disminución de poblaciones naturales de la esta especie. La micropropagación ha emergido como una de las la única posibilidades de producir de forma eficiente material vegetal para el establecimiento de cultivos y restaurar zonas afectadas. Con el fin de mejorar la eficiencia económica del protocolo de micropropagación, estructuras del tipo rizomas fueron inducidas in vitro a partir de explantes consistentes de plantas stablecidas in vitro bajo tres niveles de sacarosa, cuatro de benzilaminopurina – BAP y cuatro de ácido abscísico – ABA en MS con (en mg L-1) myo-inositol (100), tiamine HCL (0,4) y solidificados con Phytagel® (3.000). Los tratamientos (48) fueron distribuidos con un diseño completamente al azar con seis repeticiones por tratamiento. Los cultivos fueron mantenidos durante ocho semanas a 25 °C con 12 h de fotoperíodo (40 μmol fotones m-2 s-1) suministrada con lámparas de luz fría fluorescente. Diferencias estadísticas se observaron con respecto al número de rizomas formados y longitud de los rizomas como efecto de la interacción de los tres factores. La recuperación de las plantas ex vitro ocurrió en mayor número (6,0) cuando los rizomas se desarrollaron en medios suplidos con 263000 µM de sacarosa combinado con 4,44 y 8,88 µM de Benzilaminopurina – BAP. Los resultados evidencian la posibilidad de inducir in vitro rizomes de caña flecha para ser utilizados en conservación y propagación de esta especie.

El túbero de ñame (Dioscorea rotundata Poir.) es una de las principales fuentes alimenticias de los pobladores de la Costa Atlántica Colombiana y la cuenca del Caribe, y su demanda ha aumentado en el mercado internacional en los últimos años; sin embargo, las técnicas convencionales de cultivo afectan la cantidad y calidad de la producción. Con el fin de ofrecer mecanismos de producción de material de siembra de ñame de buena calidad, se evaluó el efecto de tres concentraciones de sacarosa y cuatro niveles de ácido abscísico en la producción in vitro de microtúberos a partir de explantes nodales. Los tratamientos se distribuyeron con un diseño completamente al azar con ocho repeticiones por tratamiento. El análisis de varianza y la prueba de media de Duncan indicaron que tanto las variables del crecimiento de las plantas como el número de microtúberos mostraron diferencias significativas (Pr

Resumen Stevia rebaudiana (Bertoni) Bertoni (Asteraceae), conocida como “estevia”, es una planta herbacea originaria del suroeste de Brasil y Paraguay y cultivada en muchos paises del mundo debido a que contiene un esteviosido utilizado como edulcorante, el cual no se metaboliza en nuestro organismo, por tanto, no eleva el nivel de glucosa en la sangre. Se propaga vegetativamente por esquejes, metodo sencillo pero no suficiente para implementar sistemas de propagacion masiva ya que su propagacion por semillas solo se hace con fines de investigacion, motivo por el cual nos proponemos implementar el metodo de micropropagacion in vitro aplicando diferentes concentraciones de acido giberelico y asi lograr mediante esta tecnologia un sistema de propagacion masiva de alta calidad genetica y fitosanitaria, a bajos costos y en cantidades suficientes para abastecer las necesidades. Las plantas madres utilizadas procedieron del Laboratorio de Biotecnologia del Instituto de la Papa y Cultivos Andinos de la Universidad Nacional de Trujillo. Se utilizaron segmentos nodales con una yema y se cultivaron en M & S, 1962 suplementado con 0,00; 0,50 y 1,00 ppm de acido giberelico, los cuales constituyeron los tratamientos. Se analizo el efecto de estas concentraciones en los parametros altura de plantula, numero de raices y raiz mas desarrollada. El analisis de varianza aplicado no encontro diferencias significativas entre estos tratamientos y para los parametros analizados, concluyendo que, a las concentraciones trabajadas, el acido giberelico no ejerce ningun efecto, pudiendose micropropagar S. rebaudiana por segmentos nodales sin la presencia de este fitrorregulador. Palabras clave: Stevia rebaudiana , micropropagacion, acido giberelico. Abstract Stevia rebaudiana (Bertoni) Bertoni (Asteraceae), known as “stevia”, is a herbaceous plant, native from southwestern Brazil and Paraguay and cultivated in many countries of the world because contains a stevioside used as a sweetener which is not metabolized in our organism, therefore, it does not increase the glucose level in blood. It is propagated vegetatively by cuttings, a simple but not sufficient method to implement systems of mass propagation since its propagation by seeds is only done for research purposes, reason why we propose to implement the method of in vitro micropropagation by applying different concentrations of gibberellic acid and then to achieve by means of this technology a mass propagation system of high genetic and phytosanitary quality, at low costs and in quantities sufficient to supply the requirements. The mother plants used came from the Biotechnology Laboratory of the Potato and Andean Crops Institute of the National University of Trujillo. Nodal segments were used with a bud and cultivated in M & S, 1962 supplemented with 0.00, 0.50 and 1.00 ppm of gibberellic acid, which constituted the treatments. The effect of these concentrations on the parameters seedling height, number of roots and most developed root was analyzed. The analysis of variance applied did not find significant differences between these treatments and for the analyzed parameters, concluding that, at the concentrations essayed, gibberellic acid does not exert any effect, so it is possible to micropropagate S. rebaudiana by nodal segments without the presence of this phytoregulator. Keywords: Stevia rebaudiana , micropropagation, gibberellic acid.

El aprovechamiento de halof itas como Salicornia bigelovii representa una alternativa con potencial economico para la agricultura del desierto y zonas costeras. No obstante, el exito en el establecimiento de parcelas comerciales se ha visto limitado por los bajos porcentajes de germinacion de la especie. La propagacion por esquejes representa una opcion viable y rapida a esta problematica. La formacion de raices funcionales es fundamental en la propagacion por esquejes y se ha logrado mediante la aplicacion de productos quimicos reguladores de crecimiento. La aplicacion de quitosano en algunos cultivos ha mostrado ser una alternativa en el proceso de germinacion y mejores rendimientos de cosecha; sin embargo, con relacion a la halof ita S. bigelovii, son nulos los estudios sobre el efecto del quitosano. El objetivo de la presente investigacion fue evaluar el efecto del quitosano de origen marino y el acido indol butirico como agentes promotores de raices en esquejes de Salicornia bigelovii. Se aplicaron las concentraciones (individual y en conjunto) de quitosano al 100 y 50% y acido indol butirico a razon de 0.937 y 1.25 g kg-1. Se utilizo un diseno completamente al azar con nueve tratamientos con cinco repeticiones, evaluandose 225 unidades experimentales. Como variables respuesta se midieron: longitud radicular, peso fresco y peso seco total de la raiz, numero y longitud de nuevos brotes. Los resultados indican que el tratamiento mas ef iciente fue 100% de quitosano + 0.937 g kg-1 de acido indol butirico, el cual promovio la produccion de brotes fotosinteticos hasta en un 800%. Estos resultados demuestran que es factible lograr la propagacion de Salicornia mediante esquejes utilizando quitosano de origen marino como promotor de crecimiento.

El cultivo in vitro de esporas y los aspectos reproductivos del helecho anual Anogramma chaerophylla (Pteridaceae). Anogramma chaerophylla pertenece a un género de helechos con esporofitos anuales y gametofitos potencialmente perennes. En el área de estudio, la Reserva Natural Punta Lara, la vegetación crece bajo estrés debido principalmente a la contaminación y la invasión de especies exóticas. Como parte de un proyecto de conservación de helechos que habitan en la provincia de Buenos Aires, los objetivos del trabajo fueron evaluar en Anogramma chaerophylla las condiciones para la germinación de esporas in-vitro y analizar las distintas etapas de su ciclo reproductivo. Las esporas fueron desinfectadas en solución 10 % de NaCIO durante distintos tiempos y sembradas luego en medio de cultivo Murashige – Skoog, sin agregado de sacarosa. Las cápsulas se incubaron con un fotoperíodo de 12 h luz/oscuridad y una temperatura de 22 (± 2) °C. A las dos semanas germinaron el 80% de las esporas. El patrón de germinación fue tipo Vittaria y el desarrollo del protalo tipo Ceratopteris.Los gametangios aparecieron primero en la región engrosada del protalo donde posteriormente se originaron los tubérculos bisexuales. Los esporofitos se desarrollaron solo en asociación con los tubérculos. Durante su cultivo en macetas, éstos dieron origen a una segunda generación de protalos.Nuestros resultados demuestran que la técnica de cultivo in vitro es apropiada para la propagación de Anogramma chaerophylla y como estrategia para su conservación ex-situ.

En la micropropagación tiene particular importancia la fuente y concentración de azúcar debido a que afecta los procesos de organogénesis. En este estudio se compararon los portainjertos de vid (Vitis sp.) ‘Saltcreek’ y ‘Freedom’ cultivados en un medio reducido en sales, con tres fuentes de azúcar (sacarosa, glucosa y manitol), y tres concentraciones (43.82, 87.64 y 175.28 mM), más un testigo sin azúcar. La respuesta se determinó mediante la cinética de enraizamiento, número y longitud de raíces y potencial osmótico del medio. El mayor enraizamiento se registró en el portainjerto ‘Freedom’, en el que inició al quinto día de establecido el cultivo, mientras que en ‘Saltcreek’ inicio hasta el décimo día. El máximo enraizamiento (100 % para ‘Freedom y 75 % para ‘Saltcreek’) se obtuvo al usar como fuente de carbono a glucosa, aunque el mayor número de raíces en ‘Freedom’ se obtuvo con sacarosa y en ‘Saltcreek’ con glucosa, ambos a 175.28 mM. La longitud de raíz fue superior en el tratamiento con glucosa 175.28 mM en ‘Freedom’, y con sacarosa a 87.64 mM en ‘Saltcreek’. Se observó que al aumentar la concentración de azúcares el potencial osmótico disminuyó de -0.26 MPa en 43.82 mM de manitol hasta -0.69 MPa en 175.28 mM de sacarosa. En ‘Freedom’ se puede obtener hasta 97 % de enraizamiento en medio con potencial osmótico -0.69 MPa.

Orchid micropropagation of species Euchile mariae was achieved from the in vitro culture of protocorms sections, obtained from the germination of seeds. The top and bottom protocorms sections, used as explants, were cultivated in modified MS culture medium, added with different concentrations of α-naph- thaleneacetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BA). The morphogenetic response obtained of both types of explants, was the formation of protocorm like bodies (PLB’s), that gave place to the formation of new plantlets. Of two tested explants the biggest formation of PLB’s was obtained from the bottom proto- corms sections. The acclimatization of the plantlets was successful, with a 100% percent survival. Plant cell tissue culture represents a useful alternative for the study, conservation and massive propagation of this and other endangered species. Orchid micropropagation of species Euchile mariae was achieved from the in vitro culture of protocorms sections, obtained from the germination of seeds. The top and bottom protocorms sections, used as explants, were cultivated in modified MS culture medium, added with different concentrations of α-naph- thaleneacetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BA). The morphogenetic response obtained of both types of explants, was the formation of protocorm like bodies (PLB’s), that gave place to the formation of new plantlets. Of two tested explants the biggest formation of PLB’s was obtained from the bottom proto- corms sections. The acclimatization of the plantlets was successful, with a 100% percent survival. Plant cell tissue culture represents a useful alternative for the study, conservation and massive propagation of this and other endangered species.

Regeneration protocols were established from the in vitro culture of protocormos of Stanhopea tigrina, Epidendrum veroscriptum, Laelia anceps and Cattleya x esbetts using the Murashige and Skoog culture medium added with different concentrations of N6-benzyladenine (BA) (0, 1, 3, y 5 mg/l) y 2,4 dichlorofenoxiacetic acid (2,4-D). The regeneration and formation of new plantlets was achieved by multiple shoot and also through protocorm like bodies (PLBs). For each species the best concentration of growth regulator, as well as the time of acquisition of competence for the highest shoot formation and/or PLBs were deter- mined. As far as we know there are no reports with reference to the acquisition of competence within the Orchidaceae family that allow the production of many individuals within the shortest time and reducing the financial cost. This could form the base that covers their commercial demand and also contribute to the con- servation and sustainable use of mainly wild species. Regeneration protocols were established from the in vitro culture of protocormos of Stanhopea tigrina, Epidendrum veroscriptum, Laelia anceps and Cattleya x esbetts using the Murashige and Skoog culture medium added with different concentrations of N6-benzyladenine (BA) (0, 1, 3, y 5 mg/l) y 2,4 dichlorofenoxiacetic acid (2,4-D). The regeneration and formation of new plantlets was achieved by multiple shoot and also through protocorm like bodies (PLBs). For each species the best concentration of growth regulator, as well as the time of acquisition of competence for the highest shoot formation and/or PLBs were deter- mined. As far as we know there are no reports with reference to the acquisition of competence within the Orchidaceae family that allow the production of many individuals within the shortest time and reducing the financial cost. This could form the base that covers their commercial demand and also contribute to the con- servation and sustainable use of mainly wild species.

Título en ingles: Identification, in vitro establishment and preliminary phytochemical analysis of wild yam (Dioscorea spp.) used for medicinal purposesTítulo corto: Identificación, establecimiento in vitro y análisis fitoquímico preliminar de especies silvestres de ñameResumen: Tubérculos del género Dioscorea comercializados con fines medicinales, fueron recolectados con el propósito de lograr su establecimiento a condiciones in vitro. Previamente se lograron identificar taxonómicamente las especies y por medio de análisis fitoquímicos demostrar su potencial farmacéutico. El material recolectado fue identificado como Dioscorea coriacea, D. lehmannii, D. meridensis, D. polygonoides y una especie comestible D. trifida. Tubérculos recolectados de centros de acopio y traídos de campo fueron lavados, desinfectados, asperjados con Ácido Giberélico (AG3) y sembrados en sustrato BM-2®, en invernadero a 18°C día y 10°C noche. Los tubérculos completos o por secciones fueron almacenados en bolsas herméticas a temperatura ambiente. Posteriormente se desinfectó material vegetal de las especies D. coriacea, D. lehmannii, D. meridensis y D polygonoides, seleccionando explantes de brotes sanos (D. coriacea / laboratorio) para su establecimiento. Se evaluaron tres medios de cultivo para establecimiento, el que presentó los mejores resultados fue Medio Murashige & Skoog (1962) suplementado con BAP 1 mL/L, AG3 1 mL/L y Putrescina 2 mL/L. Para la extracción y análisis de metabolitos secundarios se utilizaron tubérculos de D. coriacea, D. lehmannii y D. polygonoides, empleando como solvente de extracción metanol. Se encontró mayor concentración de extracto vegetal en D. coriacea (54%), y mediante cromatografía en capa delgada (CCD), se confirmó la presencia de saponinas, que resultó mayor en comparación con D. polygonoides especie reconocida por su alto contenido de saponinas. Estos resultados permitirán realizar análisis más avanzados de los compuestos presentes y plantear su propagación masiva en condiciones in vitro. Palabras clave: diosgenina, micropropagación, ñame silvestre, cultivo de tejidos vegetales, saponinas, fitoquímica.Abstract: Wild tubers of the genus Dioscorea sold for medicinal use were collected for the purpose of achieving its establishment under in vitro conditions. First we taxonomically identified the species and through phytochemical analysis demonstrated pharmaceutical potential. The material collected was identified as Dioscorea coriacea, D. lehmannii, D. meridensis, D. polygonoides and the edible species D. trifida. Tubers collected from wholesale distributors and from the field were washed, disinfected, sprayed with Gibberellic Acid (GA3) and planted in substrate BM-2®, in a greenhouse at 18 ° C during the day and 10 ° C overnight. Whole tubers or sections thereof were stored in sealed bags at room temperature. Subsequently plant material of the species D. coriacea, D. lehmannii, D. meridensis and D. polygonoides was disinfected and healthy buds (D. coriacea / laboratory) were selected for in vitro establishment. Three different culture media were evaluated for establishment; that which presented the best results was the Murashige & Skoog (1962) medium, supplemented with BAP 1 mL / L, GA3 1 mL / L and Putrescin 2 mL / L. For the collection and analysis of secondary metabolites, tubers of D. coriacea, D. lehmannii and D. polygonoides were used, using methanol as the extraction solvent. The highest concentration of plant extract, 54%, was found in D. coriacea, a higher value than that of D. polygonoides, which had been reported previously; the presence of saponins was confirmed by thin layer chromatography (TLC). These results will enable more advanced analysis of the present compounds and enhance their mass propagation under in vitro conditions.Key words: diosgenin, micropropagation, wild yam, tissue culture, saponins, phitochemistry.Recibido: agosto 20 de 2014 Aprobado: abril 20 de 2015

Titulo en espanol: Induccion de callos embriogenicos y formacion de proembriones somaticos en Pterogyne nitens Tull "tipa colorada" Titulo en ingles: Embriogenic calli induction and somatic proembryo formation in Pterogyne nitens Tull Titulo corto: Callo embriogenico y proembriones somaticos en Pterogyne nitens Tull Resumen: Pterogyne nitens es un arbol que crece en bosques humedos del Norte de la Argentina. Por su calidad maderera la especie se utiliza en forestacion, reforestacion o enriquecimiento de bosques nativos. Una alternativa a los metodos convencionales de propagacion son las tecnicas de cultivo de tejidos vegetales mediante el uso de la embriogenesis somatica. El objetivo del presente trabajo es inducir la formacion de callos embriogenicos y la obtencion de proembriones somaticos evaluando la influencia del tipo de explanto, tipo y concentracion de reguladores de crecimiento y composicion del medio basal. Para la induccion de callos embriogenicos se utilizan explantos extraidos de hojas cotiledonares, foliolos, tallos y raices de plantulas de dos meses de edad. Se emplean tres medios de cultivos MSC, MS50 y MSMOD. Cada medio de cultivo se suplementa con 2,4-D o ANA en distintas concentraciones. A los 45 dias los explantos provenientes de hojas cotiledonares en los medios de MSC con 2,4-D en concentraciones de 67.87, 107.41, 113.12, 135.74 y 180.99 µM, se logra en mayor proporcion la formacion de masas callosas amarillas. Con 107.41 µM de 2,4-D en el medio MSC se observa la formacion de estructuras proembrionarias. Los segmentos radiculares en todos los tratamientos evaluados, no desarrollan callos. Palabras clave: Tipa colorada , micropropagacion, embriogenesis, forestales, leguminosa. Abstract: Pterogyne nitens is a tree that grows in wet forests of Northern Argentina. Due to its quality timber especies are used in afforestation, reforestation or enrichment of native forests. An alternative to conventional methods of propagation is the techniques of plant tissue using somatic embryogenic. The aim of this study is to induce the formation of embryogenic callus and of somatic obtaining proembryos, evaluating the influence of type of explant, type and concentration of growth regulators and composition of the basal medium. For induction of embryogenic callus from explants extracted cotyledonary leaves, leaflets, stems and roots of seedling of two months old are used. Three means of MSC culture, MS50 and MSMOD are also used. Each culture medium is supplemented with 2,4-D at different concentration or ANA. After 45 days the explants from cotyledon leaves in MSC media supplement with 2,4-D at concentrations of 67.87, 107.41, 113.12, 135.74 and 180.99 µM, promote greater proportion of yellow callus formation masses. With 107.41 µM 2,4-D proembryos structures formation are observed. The root segments in all treatment tested, do not develop calluses. Key words: Tipa colorada , micropropagation, embryogenesis, forestry, legume. Recibido: enero 31 de 2014 Aprobado: octubre 20 de 2014

Titulo en espanol: Deteccion molecular de potyvirus en hojas y minibulbillos de ajo, Allium sativum, asociados a un programa de produccion de semilla limpia Titulo en ingles: Molecular detection of potyvirus in leaves and small bulbs of garlic, Allium sativum , associated a clean seed production program Titulo corto: Deteccion de potyvirus en plantas de ajo Resumen: El ajo ( Allium sativum L) se reproduce vegetativamente utilizando bulbillos, condicion que favorece la propagacion de enfermedades, especialmente bacterias, hongos y virus que afectan la calidad y el rendimiento del cultivo. Por este motivo se implemento la identificacion molecular por RT-PCR de los potyvirus LYSV y OYDV en el sistema de produccion de semilla limpia de ajo en tres clones nacionales. En la fase de produccion de semilla limpia mediante micropropagacion, se estandarizo el establecimiento de meristemos de ajo. La presencia de potyvirus se analizo en 586 plantulas mediante ELISA y en 70 por RT-PCR. Para la RT-PCR se extrajo ARN a partir de microbulbillos y hojas de plantulas, obteniendose 1.7 a 226 ng/ml de ARN y se sintetizo entre 35 a 50 ng de cADN. Los resultados obtenidos mostraron que el protocolo de desinfeccion produjo una viabilidad del 73.6%. El analisis ELISA presento un saneamiento del 96.1% de las plantulas a potyvirus, mientras que con RT-PCR se identifico la presencia de LYSV en el 8.6% de las muestras evaluadas. El virus del enanismo amarrillo de la cebolla (OYDV) no fue detectado en ninguna de las muestras. Los resultados muestran que el cultivo in vitro de meristemos de ajo es una excelente alternativa para la produccion de semilla, mostrando un 92% de eficiencia. Ademas, validan el diagnostico eficiente del potyvirus LYSV en hojas y microbulbillos de ajo. Palabras clave: Allium sativum, ELISA, micropropagacion, LSYV, potyvirus, OYDV, RT-PCR. Abstract: Garlic ( Allium sativum L), reproduces vegetatively using bulbils, condition that favors the spread of diseases, especially bacteria, fungi and viruses, which affect the quality and crop yield. For this reason, the molecular identification by RT-PCR of potyvirus: LYSV and OYDV in the production system of clean seed garlic of three national clones were implemented. In the production phase of clean seed was establishing garlic meristems micropropagation. Potyvirus presence in 586 seedlings was analyzed by ELISA and for RT-PCR in 70. RNA was extracted from leaves and small bulbs, yielding 1.7 to 226 ng/µl, and with this RNA, between 35 to 50 ng of cDNA. The results showed that the disinfection protocol produced a 73.6% viability of plants. ELISA analysis showed 96% sanitation of seedling to potyvirus, whereas, Leek Yellow Strip Virus, LYSV was identified in 8.6% of samples used RT-PCR methodology. Onion yellow dwarf virus (OYDV) was not detected in any sample. The results show that the in vitro culture of meristem of garlic, is an excellent alternative for seed production, showing a 92% efficiency. Moreover, efficient diagnostics of LYSV potyvirus was validated in leaves and small bulbs of garlic. Key words : Allium sativum , ELISA, micropropagation, LSYV, potyvirus, OYDV, RT-PCR. Recibido: octubre 18 de 2013 Aprobado: octubre 1 de 2014

Titulo en ingles : Micropropagation of Stevia rebaudiana Bertoni, a natural sweetener, through pre existing meristem explants Titulo corto : Micropropagacion de Stevia rebaudiana Bertoni Resumen: Las hojas de Stevia rebaudiana son fuente de esteviosidos y rebaudiosidos, sustancias endulzantes con bajo contenido calorico. La propagacion sexual y clonal de estevia es dificil debido a la calidad de la semilla y el tamano reducido de la planta. Para evaluar la multiplicacion, brotes establecidos in vitro fueron cultivados en ½ MS con cinco concentraciones de BAP (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 y 17.6 µM). Posteriormente, los tallos multiplicados se subcultivaron en presencia de cinco concentraciones de ANA (0.0, 2.69, 5.37, 10.74 de 21.48 µM) para evaluar enraizamiento. Finalmente, tallos multiplicados sin enraizar, tratados o no con 0.4% de ANA, y otros enraizados in vitro fueron transferidos a condiciones ex vitro . Todos los experimentos fueron distribuidos usando un DCA. Los resultados indicaron que el medio 1/2MS adicionado con BAP indujo una mayor tasa de multiplicacion. 10.74 µM de ANA indujo el mejor enraizamiento; sin embargo, los tallos sin enraizamiento resultaron en la mayor supervivencia ex vitro . Palabras clave : estevia, esteviosido, micropropagacion, reguladores de crecimiento vegetal. Abstract: Stevia rebaudiana Bertoni leaves are source of stevioside and rebaudioside, non-caloric sweetener substances. Seed and cutting estevia propagation are difficult due to seed sterility and small size plant. To evaluate shoot proliferation, in vitro-established estevia shoots were cultured in ½ MS with five (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 and 17.6 µM) BAP levels. Afterwards, proliferated shoots were cultured on ½ MS with five NAA levels (0.0, 2.69, 5.37, 10.74 and 21.48 µM) to evaluate shoot rooting. Finally, non-rooted shoots, in vitro-rooted shoots and non-rooted shoots treated with a 0.4% NAA powder were transferred to ex vitro conditions. All experiments were distributed using a complete randomized design. The data indicated that BAP treated shoots showed a higher rate of shoot proliferation. An 87% of rooting and higher number of roots per explant was achieved with 10.74 µM of NAA. Non-rooted shoots transferred directly from Stage II showed the best survival rate. Key words : Stevia, stevioside, micropropagation, plant growth regulator.

Titulo en ingles: Advances in vitro propagation via somatic embryogenesis of Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes , medicinal plant critically endangered Titulo corto: Avances en la propagacion via embriogenesis somatica de Psychotria ipecacuanha Resumen: Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes (Rubiaceae Juss), es una especie vegetal con reconocidas propiedades medicinales. Esta especie se encuentra en peligro critico de extincion, debido a la sobreexplotacion de las poblaciones naturales. Conociendo ademas las dificultades para su propagacion por medio de semillas (debido a la baja tasa de germinacion y elevada muerte prematura de las plantulas) y por via vegetativa (lento crecimiento), el presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el potencial de propagacion via embriogenesis somatica directa. Segmentos de hojas jovenes de plantas mantenidas en casa malla fueron desinfectados y sembrados en el medio de cultivo MS (Murashige y Skoog) suplementado con diferentes concentraciones y combinaciones de reguladores de crecimiento. Las combinaciones IBA y BAP a 1 y 2 mg/L y 2 y 1 mg/L, respectivamente; mostraron ser efectivas en la formacion de embriones somaticos en esta especie. La procedencia de la planta donadora parece tener influencia en la sensibilidad del tejido foliar a la respuesta. Este es el primer reporte de embriogenesis somatica directa para esta especie y el primer reporte de cultivo in vitro de poblaciones colombianas. Palabras clave : micropropagacion, conservacion, nativa, extincion, regeneracion in vitro Abstract: Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes (Rubiaceae Juss), is a species with known medicinal properties. This species is critically endangered due to overexploitation of natural populations. Besides knowing the difficulties in propagation by seed (due to the low rate of germination and high seedling premature death) and by vegetative (slow growth), the present study evaluated the potential for propagation by using direct somatic embryogenesis. Young leaves segments from plants cultivated in a greenhouse were disinfected and planted in MS medium (Murashige y Skoog), supplemented with different concentrations of growth regulators. IBA and BAP combinations at 1 and 2 mg / L and 2 and 1 mg / L, respectively, shown to be effective in the formation of somatic embryos in this species. The origin of the donor plant seems to influence foliar tissue sensitivity to the outcome. This is the first report of direct somatic embryogenesis for this species and the first report of in vitro culture in Colombian populations. Key words : micropropagation, conservation, native species, in vitro regeneration, overexploitation.

Melina (Gmelina arborea Roxb.) es una especie forestal de gran potencial por la rapidez de crecimiento y altura de sus árboles; sin embargo, la propagación clonal para siembra de huertos forestales se basa preferencialmente en el enraizamiento de estacas provenientes de plantas jóvenes obtenidas a partir de semillas. En el presente estudio se evaluó la micropropagación de plantas de melina obtenidas de miniestacas enraizadas aisladas de árboles adultos. Los explantes fueron desinfectados con 0,5% NaOCl y establecidos en medio MS semisólido con (en mg L-1) mio-inositol (100), sacarosa (30.000) y agar (7.000). Se evaluó el efecto de BAP (0; 0,44; 1,33 y 2,22μM) sobre la multiplicación de brotes, el efecto de AIB(0; 0,49; 1,48 y 2,46μM) sobre el enraizamiento de tallos micropropagados y el del tipo de sustrato (arena y turba) sobre la adaptación ex vitro de las plantas micropropagadas. Todos los tratamientos se distribuyeron con un DCA y cada tratamiento se repitió 20 veces para un total de 80 unidades experimentales. Los resultados mostraron que el suministro de BAP en el medio incrementa significativamente la tasa de multiplicación, la longitud de brotes y el número de hojas producidas, mientras que la adición de AIB aumenta el porcentaje de enraizamiento e influye significativamente en las variables número de raíces por tallo y longitud promedio de raíz. La mayor supervivencia se observó en el sustrato turba. Melina (Gmelina arborea Roxb.) is a forest species with fast growing, tall trees. Melina propagation is based on cuttings isolated from juvenile seedlings. The present research focused on micropropagation of melina plants, grown from cuttings isolated from mature trees. Explants were surface disinfected with NaOCl (0.5%) and established on semisolid MS with (in mg L-1) myo-inositol (100), sucrose (30.000) and TC-agar (7.000). The effect of BAP (0; 0.44; 1.33 and 2.22μM) on shoot proliferation, AIB (0, 0.49, 1.48 and 2.46μM) on in vitro rooting and substrate (sand and peat) on ex vitro survival were evaluated. Treatments were distributed with a complete randomized design, 20 replicates per treatment and 80 total experimental units were evaluated. Collected data showed that compared to control BAP increased shoot proliferation, shoot length and leaf number, while IBA induced higher root number, root length and rooting percentages. Higher survival rates were observed when plants were transferred to peat. Incluye referencias bibliográficas

El arándano es un arbusto de la familia de las ericáceas, del género Vaccinium, al cual pertenecen varias especies, entre las que se reconoce V. corymbosum. Debido al alto valor medicinal y nutricional de sus frutos, estas plantas se consideran de gran interés económico y una alternativa de producción para agricultores de zonas altas. Para desarrollar la metodología de propagación masiva in vitro, se tomaron explantes provenientes de plantas adultas de arándano (variedad Avonblue) de la Estación Experimental Fraijanes de la Universidad de Costa Rica, en Alajuela. Para el establecimiento in vitro, las estacas fueron sometidas a cuatro distintas desinfecciones, de igual manera se evaluó y comparó el efecto sobre la brotación de yemas de las citocininas 2iP (N6 [2-isopentenil]adenina, isopenteniladenina), BAP (6-(benzilamino)-9-(2-tetrahidropiranil)-9H-purina, bencilaminopurina) y CPPU (N-(2-cloro-4-piridil)- N`-fenilurea, Forclorofenurón) en una concentración de 2,5 mg L-1. Se encontró que la utilización de brotes tiernos de las plantas maduras y la desinfección, que consistió de hipoclorito de sodio al 1,5% y 0,1% de Tween 20 por 40 minutos, permitió el mayor porcentaje de explantes asépticos y que la adición de CPPU indujo el mayor número de brotes a partir del explante inicial, sin embargo, el 2ip promovió la mayor longitud de los brotes. Blueberry is a shrub of the Ericaceae family, that belongs to the genus Vaccinium, which comprises several species, among them V. corymbosum. Due to the high medicinal and nutritional value of the fruit, these plants are considered of great economic value and a production alternative for upland farmers. In order to establish this species in vitro, explants were taken from adult plants (variety Avonblue) from Fraijanes Experimental Station of the University of Costa Rica, Alajuela. For in vitro establishement, cuttings were subjected to four different disinfection procedures, likewise evaluated and compared, the effect on budding of various cytokinins as 2iP (N6 [2-isopentenyl] adenine, isopentenyladenine), BAP (6 - (benzylamino) -9- (2-tetrahydropyranyl) -9H-purine, benzylaminopurine) and CPPU (N-(2-chloro-4-pyridyl)-N ‘-phenylurea, Forclorofenuron) at a concentration of 2.5 mg L-1. It was found that the use of young cuttings from mature plants allowed the highest percentage of aseptic explants when a disinfection solution was sodium hypochlorite at 1.5% and 0.1% Tween 20 for 40 minutes and the addition of CPPU induced highest number of shoots from initial explant, however, 2ip promoted the greatest length of shoot. Universidad Nacional, Costa Rica. Instituto de Investigación y Servicios Forestales

Se ha desarrollado un protocolo eficaz para el establecimiento in vitro mediante la proliferación de yemas axilares de material procedente de genotipos adultos de aliso. Las estaquillas, obtenidas de árboles de 20-30 años, fueron “forzadas” a brotar y los brotes se cultivaron en medio Woody Plant Medium (WPM) (Lloyd y McCown, 1980) con 2 mg/l de benciladenina (BA) y 0,5 mg/l de ácido indol-3-acético (AIA). El mantenimiento de los cultivos se realiza mediante subcultivos secuenciales cada 9 semanas en el mismo medio mineral adicionado con 0,1 mg/l de BA y 0,5 mg/l de AIA. Transferencias a medio fresco cada 3 semanas, la inclusión de la zeatina (Z) en el último ciclo y la sustitución de sacarosa 3% por glucosa 2%, mejoran las tasas de multiplicación y la calidad de los brotes. Los brotes obtenidos en la etapa de multiplicación fueron enraizados con facilidad incluso en el tratamiento sin auxina (84,0%), aunque la presencia de ácido indol-3-butírico (AIB) en el medio incrementó los porcentajes de enraizamiento, especialmente cuando la glucosa 2% (93,4%) fue incorporada al medio en vez de sacarosa 3% (86,9%). Las plantas enraizadas fueron aclimatadas en una cámara de crecimiento durante 6 semanas, y posteriormente transferidas al invernadero.

La biotecnología vegetal tiene un gran potencial para aportar en la solución de problemas mundiales de alto impacto como el déficit alimentario que se prevé, la producción de materiales para la salud, la industria y la preservación ambiental. De ahí la importancia de introducirla en la enseñanza de la educación básica y media, para que las generaciones futuras puedan hacer un uso adecuado de sus productos y aplicaciones, tomando decisiones responsables en cuanto a políticas públicas y de impacto ambiental. El cultivo de tejidos vegetales “in vitro” es una oportunidad para desarrollar competencias laborales en los jóvenes de la educación media, lo que genera retos para el diseño y desarrollo de herramientas pedagógicas novedosas y creativas que estimulen el pensamiento complejo en los estudiantes. El trabajo por proyectos es una de ellas ya que puede ayudar a resolver problemas reales mediante el trabajo en equipo, la búsqueda de información, la formación para el trabajo y el acercamiento a los conocimientos y procedimientos científicos. / Abstract. Plant biotechnology has a great potential to solve global problems such as high impact food deficit is expected, the production of materials for health, industry and environmental preservation. Hence the importance of introducing biotechnology in basic and secondary education; so that future generations canmake an appropriate use of their products and applications, makingresponsible decisions about public policies and environmental impact. The plant tissue culture "in vitro" is an opportunity todevelop labor skills in secondary education studentsto generate challenges in the design and development of innovative and creative teaching tools that encourage thinking in high level students. Project work is one of the best teaching strategies because it can help tosolve real problems through teamwork, the searching of information, and the approach to knowledge and scientific procedures Maestría

Paulownia elongata es una especie forestal de origen oriental y rápido crecimiento, que fue introducida en México a finales de 1998 para ser incorporada en plantaciones comerciales maderables, pues su madera es ligera, por lo cual se emplea en la manufactura de muebles, artesanías, instrumentos musicales y en el acabado de interiores. El objetivo de este trabajo fue determinar las mejores condiciones de cultivo in vitro, para la regeneración de plántulas de P. elongata a partir de diversos tipos de explantes de segmentos internodales, foliares y peciolares, lo que derivó en un protocolo para organogénesis directa apto para usarse en sistemas de transformación genética. En todos los casos el medio Murashige y Skoog (MS) fue adicionado con 6-benciladenina (BA) y ácido naftalenacético (ANA), en distintas concentraciones. Se obtuvo respuesta en la totalidad de los explantes con la combinación de 5 mg L-1 de BA y 1.0 mg L-1 de ANA; sin embargo, los segmentos internodales mostraron una mejor inducción de brotes: 83% de explantes con brotes y 1.52 brotes por explante con la combinación de 4 mg L-1 de BA y 0.2 mg L-1 de ANA, a diferencia de los segmentos de pecíolo que produjeron sus mejores resultados de 53% de explantes con brote y 0.62 brotes por explante, con una mezcla de 7 mg L-1 de BA y 0.2 mg L-1 de ANA.

Se desarrolló un procedimiento de micropropagación de plantas adultas de Vaccinium meridionale utilizando como explantes primarios ápices caulinares. Durante la fase de establecimiento in vitro de explantes se estudió el efecto de los medios MS/3, WPM, AND y el propuesto por Kyte para Blueberry, suplementados con 2-iP más AIA ó BA más AIA. Durante la proliferación de microtallos se evaluó el efecto del medio MS/3 líquido, sólido y en doble fase (una fase líquida sobre una fase solidificada con agar), suplementados con 2-iP más AIA. El enraizamiento in vitro y ex vitro de microtallos y macollas se indujo utilizando auxinas y/o carbón activado y para el desarrollo de raíces se utilizó un sustrato enriquecido con materia orgánica. El endurecimiento de plántulas se realizó de manera simultánea con el proceso de desarrollo radical. Después de la fase de establecimiento, la media más alta, 4.5, yemas axilares desarrolladas por explante viable, se cuantificó en MS/3 suplementado con 59.05 µM de 2-iP más 17.13 µM de AIA. Durante la fase de proliferación de microtallos la media más alta, 7.25, se cuantificó en MS/3 en doble fase. Después de 60 días de endurecimiento el 88-100% de los microtallos enraizaron y reactivaron su crecimiento. Using stem apex as primary explants, a micropropagation protocol of Vaccinium meridionale was established. During establishment phase the effect of the MS/3, WPM, AND and Kyte media, supplemented with 2-iP plus IAA or BA plus IAA was studied. During microshoot proliferation the effect of MS/3 liquid, solid and double phase (the liquid phase in a solidified phase with agar) supplemented with 2-iP plus IAA was evaluated. In vitro and ex vitro rooting of microshoots and microshoots was accomplished using auxines and/or activated charcoal; for root development a substratum with abundant organic matter was utilized. Plantlet hardening was achived simultaneously with the radical development process. After establishment phase, the highest quantity of axillary buds/explant was quantified in cultures performed in MS/3 supplemented with 2-iP, 59.05 µM plus IAA 17.13 µM. During the microshoot proliferation phase the highest average production was obtained in double phase MS/3. After 60 days of hardening 88-100% of rooted microshoots was obtained; these plantlets showed growth reactivation.

Cultivo in vitro de Geophila macropoda (Ruiz - Pav. DC) a partir de embriones cigoticos. El objetivo de esta investigacion fue desarrollar un protocolo para el cultivo in vitro de Geophila macropoda. Este trabajo se efectuo en Guacimo de Limon, Costa Rica, entre junio del 2006 y febrero del 2007. En la fase de establecimiento in vitro se utilizaron estacas y embriones cigoticos. En el cultivo in vitro, la contaminacion bacteriana impidio establecer altos porcentajes de material vegetal. Con embriones se obtuvo hasta del 89%. Para la multiplicacion de brotes, se evaluaron cinco concentraciones de bencilaminopurina (BAP). Los mejores resultados se obtuvieron en el medio complementado con 2 mg/l BAP con 13,4 nuevas plantulas a partir de una vitroplanta inicial. El enraizamiento se alcanzo en medio Murashige - Skoog al 50% de las sales recomendadas por tales autores y sin reguladores de crecimiento. Durante la aclimatacion se obtuvo una sobrevivencia del 100%.

Con el objetivo de inducir la regeneración de plántulas in vitro de 11 cultivares regionales de crisantemo, se reaealizó un ensayo en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales de la Facultad de CieCieCienciaias Agrícolas de la Universidad Autónoma del Estado de México en el peperiodo 2005-2006. SeSe sembraron meristemos apiapiapicales de cada varieiedad en el medio de cultivo Murashige y Skoog 1962, más 3 % de sacarosa, 6,5 g/l de agar y un pH de 5,7-5,8. SeSe evaluaron doce combinaciones posibles producto de cuatro dosis de ANAANAANA (0,01; 0,02; 0,03 y 0,04 mg/l) por tres dosis de K (0,5; 1,0 y 1,5 mg/l). La tasa de multipiplicación varió de 1:8 hasta 1:29 depeepeependieiendo del cultivar.

The husk tomato is a Solanaceous plant of Mexican origin. In Mexico, this plant can grows at wild or culture way. The in vitro propagation is an alternative for producing very much healthy plants. But some times the acclimatization has been the limiting factor to reach this objective. There are not so much reports related with husk tomato micropropagation, and this is the first where the changes on stomatal density and water potential, are evaluated. That evaluation was done during the acclimatization from plantlets obtained by mean of apical meristem culture. Plants of 30 days old with similar size were placed in individual hydroponics system, during seven weeks, all of them covered with plastic covers, which were opened each seven days. Each time, the temperature and relative humidity were measured, in the acclimatization system and the growth chamber, for calculating the water potential. At the sixth week, the water potential in the acclimatization system was close to that of the growth chamber (-107.8 and -102.2 ± 4.91 respectively). On the other hand, the stomatal density was evaluated at 15, 30 and 45 days during the acclimatization stage. Significant differences were observed at this parameter between adaxial and abaxial leaf plant and between plant ages. When both water potential and stomatal density data were related, a great correlation was observed. 100 % of the plants survived later the acclimatization stage.

En este trabajo se evaluó el cultivo de tejidos vegetales in vitro como una alternativa en la propagación y preservación de Hypericum goyanesii, especie en vía de extinción. Se determinó que el efecto que tiene el hipoclorito de sodio (1.5% por 5 min.) y el benlate, como agentes desinfectantes de las secciones de nudos, permiten obtener el mayor porcentaje de brotes adaptados a condiciones in vitro. Los nudos con yemas axilares se sembraron en medios Murashige & Skoog (1962) enriquecido con la Auxina Acido Indol Butírico (AIB) (0; 0.5; 1.0; 1.5 mg.L -1 ) y la Citoquinina 6-bencilaminopu-iina (BAP) (0; 0.5; 1.0; 1.5 mg.L -1 ). Se determinó que la utilización de 0.5 mg.L-1 de Bencilaminopurina permite la obtención del mayor número de plántulas, estableciendo las condiciones más adecuadas para la propagación in vitro de Hypericum goyanesii.

Running title: Controlling hyperhydricity in teak Influencia de la 6-Bencilaminopurina y el agente gelificante en la reduccion de la hiperhidricidad en Tectona grandis L. Abstract: The influence of different factors on shoot proliferation and the occurrence of hyperhydricity in teak ( Tectona grandis L.) have been studied. Four concentrations of BA (2.22, 4.44, 6.66 and 8.88 µM) and a control treatment with 0 BA were examined. Aiming at reducing the costs during commercial propagation by using gelrite in stead of agar, the use of both gelling agent in the proliferation and hyperhydricity was tested. In order to evaluate if hyperhydricity can be reduced by increasing the gelrite concentration in the culture medium, three concentrations (2.0, 2.5 and 3.0 g l -1 ) were tested in combination with 4.44 µM BA. The proliferation and occurrence of hyperhydricity during 21 successive subcultures were evaluated. The highest proliferation was achieved in the treatments with 6.66 or 8.88 µM BA. They yielded 5.22 and 5.56 shoots/explant, respectively. But also, the highest percent of hyperhydric shoots was achieved in this treatment. Gelrite resulted in a higher proliferation, but also an almost two times higher hyperhydricity as compared to agar-solidified media. Satisfactory reduction in hyperhydricity (18%) was achieved with 3.0 g l -1 gelrite. However, the successive subcultures onto proliferation in this treatment favored hyperhydricity compromising shoot quality and its competence to proliferate. In vitro teak plants were ex vitro rooted and then transferred to greenhouse conditions for acclimatization; ten weeks after transfer they were ready for field plantation. Key words: cytokinin; forestry; micropropagation; morpho-physiological disorder; teak Abbreviations: BA- 6-Benzyladenine, MS - Murashige and Skoog basal medium, IBA - Indole-3-butyric acid, ANA -Naphtalene acetic acid Resumen: Se estudio la influencia de diferentes factores en la proliferacion y la ocurrencia de la hiperhidricidad in teca ( Tectona grandis L.). Se probaron cuatro concentraciones de BA (2,22; 4,44; 6,66 and 8,88 µM) y un control sin BA. Con el objetivo de reducir los costos durante la propagacion comercial se experimento sustituir el agar por el gelrite, para lo cual se estudio en efecto de ambos gelificantes en la proliferacion y la hiperhidricidad de los brotes. Se estudiaron, tres concentraciones de gelrite (2,0; 2,5 and 3,0 g l -1 ) combinadas con 4,44 µM BA, con el objetivo de evaluar si la hiperhidricidad podia ser reducida incrementando la concentracion de gelrite. Se evaluo la proliferacion de brotes y la ocurrencia de la hiperhidricidad durante 21 subcultivos. Se logro una alta proliferacion de brotes en los tratamientos con 6,66 y 8,88 µM BA (5,22 y 5,56 brotes), pero el porcentaje de brotes hiperhidricos tambien se incremento. El gelrite resulto en una alta proliferacion de brotes, pero con mayor incidencia de la hiperhidricidad que el medio gelificado con agar. Se obtuvo una reduccion satisfactoria de la hiperhidricidad (18%), cuando la concentracion de gelrite se incremento hasta 3,0 g l -1 . No obstante, la multiplicacion de los brotes en este tratamiento mas alla del 11 no subcultivo favorecio la hiperhidricidad, lo que afecto la calidad de los brotes y su competencia para la proliferacion. Las plantas fueron enraizadas ex vitro , transferidas a condiciones de invernadero para su aclimatizacion y diez semanas despues de la transferencia estaban listas para la plantacion en campo. Palabras clave: citoquinina; forestal; micropropagacion; desorden morfo-fisiologico; teca

El cultivo de tejidos vegetales comprende un conjunto técnicas ampliamente usadas para propagación vegetal in vitro; sin embargo, una desventaja es el alto costo de componentes utilizados para el medio de cultivo, entre éstos, el agar (solidificante más utilizado), pues la demanda ha elevado su precio. En este artículo se recopilan algunas investigaciones sobre sustancias que se han utilizado como agentes solidificantes alternativos, entre los que se resaltan los almidones (nativos o modificados) y algunas gomas de plantas y exudados bacterianos, que han sido empleados en procesos de organogénesis, embriogénesis y proliferación vegetativa. Los almidones y las gomas reportadas presentaron resultados favorables en el cultivo in vitro de algunas especies vegetales. Se concluye que tanto las gomas como los almidones pueden ser potenciales sustitutos, parciales o totales del agar y logran una disminución de los costos con los almidones, y su posibilidad de modificarse químicamente para mejorar su capacidad gelificante

Las Callas (Zantedeschia spp.) son plantas de la familia Araceae de gran interés como plantas ornamentales en maceteros y como flores de corte. Resulta de gran interés la propagación in vitro de las nuevas variedades obtenidas, por la diversidad de colores de sus flores. Cuando se desean introducir nuevos híbridos en el mercado, las técnicas de propagación tradicional son insuficientes, por lo que resultan de gran interés las técnicas de propagación in vitro. Con el objetivo de establecer un protocolo para la propagación in vitro más eficiente se evaluaron diferentes formas de cultivo (semi-sólido; líquido en movimiento e inmersión temporal), en la proliferación y calidad de los brotes. Se logró el establecimiento de un protocolo para la multiplicación in vitro de la Zantedeschia en Sistemas de Inmersión Temporal de mayor eficiencia biológica que los métodos convencionales de propagación (semi-sólido y liquido en movimiento).

Establecimiento in vitro de loroco (Fernaldia pandurata Woodson). Se cultivaron meristemos apicales del brote de plantas de loroco en el laboratorio de Biotecnología del Centro Nacional de Tecnología Agropecuaria y Forestal (CENTA) en los meses de agosto de 2002 a abril 2003. Dichos explantes se establecieron en un medio basal de Murashige y Skoog, solidificado con Phytagel (2 g/l) suplementado con diferentes concentraciones de ácido naftalenacético (ANA) y ácido bencilaminopurina (BAP) en dosis comprendidas entre 0,5 mg/l y 1,0 mg/l; con el objetivo de producir material vegetativo a través del cultivo in vitro para la propagación masiva de plantas de calidad genética y fitosanitaria, y la conservación y distribución de germoplasma vegetal. El pH fue ajustado a 5,7. Los explantes se sembraron en tubos de ensayo con 25 ml de medio de cultivo estéril, estos fueron colocados a luz con intensidad de 1.500 lux. La temperatura de la cámara de crecimiento fue de 28 +/- 2 °C. Se evaluaron nueve tratamientos con un diseño factorial 32 completamente aleatorizado con diez observaciones cada uno. Además se realizaron pruebas de deshidratación de callos para la regeneración de plántulas; con cambios a medios frescos cada 28 días para un total de cuatro subcultivos en un lapso de cinco meses. Los resultados obtenidos indicaron la formación de brotes a los 15 días, en los tratamientos suplementados con 0,5 mg/l y 1,0 mg/l de BAP respectivamente, pero el tratamiento con 1,0 mg/l de BAP resultó ser más eficiente, con una mejor elongación y cantidad de tallos. Las restantes combinaciones de las concentraciones de ANA y BAP, solo favorecieron la formación de callos friables, existiendo diferencia significativa entre ellos.