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Pochonia chlamydosporia (Pc) is a nematophagous fungus with saprotrophic activity. However, little is known about the interaction between Pc and green manure. This study aimed to investigate the interaction effects of different green manures and Pc on the control of Meloidogyne javanica in soybean. Two greenhouse experiments were conducted in different periods using a 6 × 2 factorial design, with six replicates. The first factor was green manure application (oat, brachiaria, crotalaria, millet, buckwheat, and untreated control) and the second factor was treatment with Pc (in-furrow application and untreated control). Cover crops were grown separately and applied to pots as green manure 15 days before soybean sowing. At 5 days after sowing, soybean was inoculated with 2 000 eggs and juveniles of M. javanica. At 60 days after inoculation, nematode and vegetative variables were determined. All green manures reduced nematode population levels, especially oat, crotalaria, and buckwheat. Pc treatment did not influence nematode population levels. Soybean plants treated with oat or crotalaria green manure had greater height than untreated plants in both experiments. The effects of factors on shoot fresh and dry weights differed between experiments, and green manure application did not affect root development. The findings confirmed the potential of plant residues to control M. javanica. RESUMO Pochonia chlamydosporia (Pc) em um fungo nematófago, com atividade saprofítica em matéria orgânica. Contudo, pouco é conhecido a respeito da interação entre resíduos de coberturas verdes e o fungo. Objetivou-se avaliar o efeito da associação de resíduos de diferentes espécies de plantas de cobertura com Pc no controle de Meloidogyne javanica em soja. Dois experimentos foram conduzidos em épocas distintas, em casa-de-vegetação, em fatorial 6 x 2, com a palhada de cinco plantas de coberturas (aveia, braquiária, crotalária, milheto e trigo mourisco) e uma testemunha sem palhada, com e sem Pc. Para realização dos experimentos, as palhadas foram produzidas separadamente e aplicadas nos vasos 15 dias antes da semeadura da soja. Após cinco dias da semeadura, a soja foi inoculada com 2000 ovos e juvenis do nematoide. Aos 60 dias da inoculação, foram realizadas avaliações das variáveis nematológicas e vegetativas. Apenas a adição de resíduos promoveu redução na população de nematoides, sendo as menores médias observadas para aveia, crotalária e trigo mourisco. Plantas que cresceram sob palhada de aveia e crotalária apresentaram maior altura em ambos os experimentos. Resultados de massa fresca e seca de parte aérea variaram entre os experimentos, e as coberturas não afetaram o crescimento da raiz. A pesquisa comprovou o potencial dos resíduos vegetais em controlar M. javanica.

RESUMO O presente estudo investigou a ação in vitro dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001), Monacrosporium thaumasium (NF 34) e Pochonia chlamydosporia (VC1 e VC4) sobre ovos de Eurytrema coelomaticum. Os ovos foram vertidos sobre a superfície de culturas dos isolados fúngicos cultivados sobre ágar-água 2% (AA 2%) em placas de Petri, e sobre AA 2% sem fungo como controle. Ao completarem 7, 10 e 14 dias, os ovos foram removidos e classificados de acordo com os seguintes parâmetros: efeito tipo 1, efeito lítico sem prejuízo morfológico a casca do ovo; tipo 2, efeito lítico com alteração morfológica da casca e embrião; e tipo 3, efeito lítico com alteração morfológica do embrião e da casca, além de penetração de hifas e colonização interna do ovo. Os isolados AC001 e NF34 não causaram os efeitos dos tipos 2 e 3, contudo o isolado VC1 causou tal efeito determinando atividade ovicida sobre 27,2% dos ovos no dia 7, 23,1% no dia 10, e 25,0% no dia 14 após tratamento. Da mesma forma, o isolado VC4 causou atividade ovicida: 15,0%, 25,4%, e 21,8% nos dias 7, 10 e 14, respectivamente. P. chlamydosporia é um fungo promissor para o controle biológico de E. coelomaticum. ABSTRACT The present study investigated the in-vitro action of the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001), Monacrosporium thaumasium (NF34) and Pochonia chlamydosporia (VC1 and VC4) on eggs of Eurytrema coelomaticum. Eggs were placed on fungal cultures surface over water-agar 2% (WA 2%) in Petri plates, and on WA 2% with no fungus (control). After 7, 10 and 14 days, the eggs were removed and classified according to the following parameters: type 1, lytic effect without morphological damage to eggshell; type 2, lytic effect with morphological alteration of embryo and eggshell; and type 3, lytic effect with morphological alteration of embryo and eggshell, besides hyphal penetration and internal egg colonization. The isolate AC001 and NF34 did not cause the type 2 and 3 effects; however, the isolate VC1 caused the type 3 effect determining the ovicidal activity on 27.2% of eggs at day 7, 23.1% at day 10, and 25.0% at day 14 after treatment. Also, the isolate VC4 caused ovicidal activity: 15.0%, 25.4% and 21.8% at day 7, 10 and 14, respectively. Pochonia chlamydosporia is a promising fungus for biological control of E. coelomaticum.

Bioverm® (Duddingtonia flagrans) is a fungal formulation indicated for controlling gastrointestinal nematodes in ruminants and horses, which has recently been authorized for commercialization in Brazil. The objective was to determine the efficiency of Bioverm® against larvae of gastrointestinal nematodes after passage through the gastrointestinal tract of cattle. Twelve animals were used, divided into two groups. In the treated group, a single dose of 1 g of Bioverm® per 10 kg of live weight (containing 105 chlamydospores of D. flagrans) was provided for each animal. Fecal samples were obtained from the animals in each group at 12, 24, 36, 48, 60 and 72 hours after administration. In assay A, 2 g of feces were added to Petri dishes containing 2% agar-water medium. In assay B, coprocultures were performed. In both assays, the peak of larval predation occurred within 48 hours after administration of Bioverm®. In assay A, a significant larval reduction (P < 0.05) was seen at 48 h (88.2%). In assay B, significant reductions (P < 0.05) were seen at 36 h (43.7%) and 48 h (82.3%). Bioverm® showed high predatory capacity after passage through the gastrointestinal tract of cattle and was effective for controlling gastrointestinal nematodes. Resumo O Bioverm® (Duddingtonia flagrans) é uma formulação fúngica indicada para o controle de nematódeos gastrintestinais de ruminantes e equídeos, recentemente autorizado para a comercialização no Brasil. Objetivou-se determinar a eficiência do Bioverm® contra larvas de nematódeos gastrintestinais após a passagem pelo trato gastrintestinal de bovinos. Foram utilizados doze bovinos divididos em dois grupos. No grupo tratado, foi fornecida, por animal, a dose única de 1g (105 clamidósporos de D. flagrans) do Bioverm® para cada 10 kg de peso vivo. Foram obtidas amostras fecais dos animais de cada grupo a partir de 12, 24, 36, 48, 60 e 72 horas após a administração. No ensaio A, 2g de fezes foram adicionadas em placas de Petri contendo meio ágar-água 2%. No ensaio B, foram realizadas coproculturas. Em ambos os ensaios, o pico de predação larval ocorreu em 48 horas após a administração do Bioverm®. No ensaio A, houve redução larval significativa (P

The study evaluated the ovicidal activity of enzymatic extracts of Purpureocillium lilacinum and Trichoderma virens against trichostrongylid eggs from sheep. Filtered extract (FE) and macerated crude extract (MCE) were prepared from fungal cultures in minimal broth. In the experiment, 100 trichostrongylid eggs, obtained from the feces of naturally infected sheep, were exposed to fungal extracts for 24 and 48 hours/25°C. In the control group, eggs were incubated in minimal broth. The number of L1 larvae was ascertained. Each treatment consisted of four repetitions and the experiment was repeated five times. It was observed that the effect of FE and MCE of P. lilacinum and T. virens on egg hatchability differed from that of the control group. MCE of T. virens and P. lilacinum showed higher ovicidal activity than FE over both periods and at 48 hours of exposure, respectively. From the percentage reductions in hatchability of the eggs, MCE was shown to be superior to FE for both fungi. This study demonstrated the ovicidal potential of these fungi against trichostrongylid eggs. However, further studies are needed in order to identify the molecules responsible for the ovicidal effects, and to evaluate the behavior of fungal extracts in biotic and abiotic interactions. Resumo O estudo avaliou a atividade ovicida de extratos enzimáticos de Purpureocillium lilacinum e Trichoderma virens sobre ovos de tricostrongilídeos de ovinos. Extrato filtrado (EF) e extrato macerado bruto (EMB) foram preparados a partir de culturas fúngicas em caldo mínimo. No ensaio experimental, 100 ovos de tricostrongilídeos, obtidos de fezes de ovinos naturalmente infectados, foram expostos durante 24 e 48 horas/25ºC aos extratos dos fungos. No grupo controle, os ovos foram incubados em caldo mínimo. O número de larvas L1 foi determinado. Cada tratamento consistiu em quatro repetições e o experimento foi repetido cinco vezes. Observou-se que o efeito ovicida do EF e EMB de P. lilacinum e T. virens diferiu do grupo controle. O EMB de T. virens e P. lilacinum evidenciou atividade ovicida superior ao EF em ambos os períodos avaliados e em 48 horas de exposição, respectivamente. O percentual de redução de eclodibilidade evidenciou que o EMB foi superior ao EF em ambos os fungos. Este estudo demonstra o potencial ovicida desses fungos sobre ovos de tricostrongilídeos. No entanto, estudos adicionais são necessários para identificar as moléculas responsáveis pelo efeito ovicida, bem como avaliar o comportamento dos extratos fúngicos em interações bióticas e abióticas.

Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Soybean is considered the most economically important crop in Brazil, but its yield may be reduced due to pathogens and pests, if not controlled. Plant-parasitic nematodes are responsible for part of this decrease. Among the nematodes of the genus Meloidogyne, the Meloidogyne javanica is the most worrying due to its large number of hosts and its wide geographical distribution. To reduce the use of chemical control, to mitigate environmental damage, has been opted for alternative controls. Integrated management is the set of controls in which biological control, genetic control, physical control, and cultural control assist in reducing the use of chemical control, but with the same efficiency. The objective of this work was to evaluate different soybean genotypes regarding their reaction to M. javanica, and to evaluate if isolates of Trichoderma from different regions of Brazil can control M. javanica. The inoculum was obtained from soybean plants and reinoculated in tomato for proliferation. For the reaction test, 37 soybean cultivars were tested, which were inoculated for each plant 5,000 eggs + second stage juveniles (J2), with six replications each, also containing control treatment. The experiment was evaluated 60 days after inoculation, weighing the roots, and counting the number of galls and number of nematodes per gram of root to calculate the reproduction factor. For the in vitro tests of parasitism, and mortality and egg + J2 hatching inhibition, 40 Trichoderma isolates were obtained (4 isolates from the Midwest, 7 isolates from the Southeast and 29 isolates from the South). Next, a suspension of nematodes was made and individually separated 50 eggs + J2 that was passed to individual wells of the Elisa plate, and a spore solution from each isolate was pipetted into each well for parasitism test and a fungal filtrate solution for each isolate for the mortality test and egg + J2 hatching inhibition. After 15 days of application parasitism, 48 hours after application mortality was evaluated and 21 days after application inhibition of egg + J2 hatching was evaluated. All cultivars had reproductive factor greater than 1, which characterizes susceptibility to M. javanica. The in vitro tests resulted in values above 85.50% parasitism, 65.30% mortality of J2 and 66.00% inhibition of egg + J2 hatching. It can be concluded that the use of Trichoderma and less susceptible cultivar, such as FPS ATALANTA with FR = 1.2, can help the management of M. javanica in the field. A soja é considerada a cultura mais importante economicamente no Brasil, porém a sua produtividade pode ser diminuída devido a patógenos e pragas, caso não seja realizado um controle destes. Os fitonematoides são responsáveis por parte dessa diminuição. Dentre os nematoides do gênero Meloidogyne, o Meloidogyne javanica é o mais preocupante por sua grande quantidade de hospedeiros e sua ampla distribuição geográfica. Para diminuir o uso do controle químico, para mitigar danos ao meio ambiente, têm se optado por controles alternativos. O manejo integrado é o conjunto de controles, em que o controle biológico, controle genético, controle físico e controle cultural auxiliam na redução do uso de controle químico, porém com mesma eficiência. Neste trabalho objetivou-se avaliar diferentes genótipos de soja quanto a sua reação à M. javanica, e avaliar se isolados de Trichoderma, oriundos de diferentes regiões do Brasil, podem controlar M. javanica. A obtenção dos inóculos foi a partir de plantas de soja e re-inoculados em tomate para proliferação. Para o teste de reação, foi testado 37 cultivares de soja, que foram inoculados para cada planta 5.000 ovos + juvenis de segundo estágio (J2), com seis repetições cada, também contendo tratamento controle. O experimento foi avaliado 60 dias após a inoculação, realizando a pesagem das raízes, e contando o número de galhas e número de nematoides por grama de raíz para o cálculo do fator de reprodução. Para os testes in vitro de parasitismo e de mortalidade e inibição da eclosão de J2, foi obtido 40 isolados de Trichoderma (4 isolados do Centro-Oeste, 7 isolados do Sudeste e 29 isolados do Sul). A seguir, foi realizada uma suspensão de nematoides e individualmente separados 50 ovos + J2 e passados para poços individuais da placa de Elisa, e pipetado em cada poço uma solução de esporos de cada isolado para o teste de parasitismo e uma solução de filtrados fúngicos de cada isolado para o teste de mortalidade e inibição da eclosão de J2. Após 15 dias a aplicação o parasitismo, 48 horas após a aplicação foi avaliada a mortalidade e 21 dias após a aplicação foi avaliada a inibição da eclosão dos J2. Todas cultivares obtiveram fator de reprodução maior que 1, que caracteriza susceptibilidade à M. javanica. Os resultados dos testes in vitro, obteve-se valores acima de 85,50% de parasitismo, 65,30% de mortalidade de J2 e 66,00% da inibição da eclosão de J2. Conclui-se que o manejo o uso de Trichoderma e cultivar menos suscetível, como a FPS ATALANTA com FR=1,2, podem auxiliar no manejo do M. javanica à campo.

The objectives of this study were to describe occurrences of Rhabditis spp. causing parasitic otitis in dairy cattle of Gir breed in the state of Espírito Santo, southeastern Brazil, and to evaluate the biological control of this nematode using the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34). After nematode detection and collection, three groups were formed: two groups that were treated, respectively, with the fungal isolates; and a control group, without fungus. The treatments were as follows: (a) Petri dishes containing the culture medium 2% water agar (WA) + 250 nematodes + AC001; (b) Petri dishes containing 2% WA + 250 nematodes + NF34; and (c) Petri dishes containing only 2% WA + 250 nematodes. After seven days at 27 °C the treatments with fungi were able to capture and destroy the nematodes, with percentages of 82.0% (AC001) and 39.0% (NF34) in relation to the control group. The results demonstrate the occurrence of Rhabditis spp. after animals physical examination and that there was efficacy of the in vitro predatory activity of both fungal isolates. Thus, these results are important because they can assist in future in vivo control of this nematode in cattle. Resumo Os objetivos neste estudo foram descrever ocorrências do nematódeo Rhabditis spp., causando otite parasitária em bovinos leiteiros da raça Gir no estado do Espírito Santo, sudeste do Brasil, e avaliar o controle biológico desse nematódeo utilizando os fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34). Após a detecção e coleta dos nematódeos, três grupos foram formados: dois grupos que foram tratados com os isolados fúngicos, respectivamente; e um grupo controle, sem fungos. Os tratamentos foram os seguintes: (a) placas de Petri contendo o meio de cultura 2% ágar de água (WA) + 250 nematoides + AC001; (b) placas de Petri contendo 2% de WA + 250 nematoides + NF34; e (c) placas de contendo apenas 2% de nematódeos WA + 250. Após sete dias a 27 °C os tratamentos com fungos foram capazes de capturar e destruir os nematódeos, com porcentagens de 82,0% (AC001) e 39,0% (NF34) em relação ao grupo controle. Os resultados demonstram a ocorrência de Rhabditis spp., no Estado do Espírito Santo e a eficácia da atividade predatória in vitro dos isolados fúngicos utilizados. Assim, esses resultados são importantes, pois podem auxiliar no controle alternativo in vivo de Rhabditis spp. em bovinos com otite parasitária.

Durante muitos anos, o Brasil ocupou a condição de maior produtor e exportador de borracha do mundo. Após a metade do século passado, esta realidade mudou e o país passou a importar este produto, principalmente dos países do Sudoeste Asiático. Quando se pensa no manejo da seringueira, deve-se dar grande atenção aos problemas fitossanitários que podem contribuir para redução na produção. Pouca atenção tem sido dada aos nematoides, mesmo já tendo sido relatados danos em função do ataque de Meloidogyne exigua. O controle dos nematoides no solo pode ser feito por diferentes métodos, dando destaque aos métodos químico e biológico. Os objetivos do trabalho foram testar produtos biológicos e químicos visando o manejo à campo da Morte Descendente da Seringueira e a redução da densidade populacional de M. exigua, avaliar se houve aumento da produção de látex e determinar se há relação entre infestação e incremento diamétrico das árvores. O experimento foi conduzido em uma fazenda localizada no Triângulo Mineiro, MG. Foram utilizados os produtos Nemat + Ecotrich (300 g ha-1 de cada); Nemix (1,0 a 1,5 kg ha-¹); GF 422 (1 g L-1) + Onyx (1 mL L-1) e Rizos (2 mL L-1) (primeira aplicação: GF 422 + Onyx; segunda aplicação: GF 422 + Rizos; terceira aplicação: GF 422 + Onyx); Rugby (Cadusafós, 15 L ha-1) e Nimitz (Fluensulfone, 3 L ha-¹), além da testemunha, sem aplicação de nenhum produto. O experimento foi instalado em delineamento de blocos casualizados, com seis tratamentos e cinco repetições. Foram realizadas quatro amostragens para determinação da densidade populacional do nematoide em pré e pós aplicações. As amostras foram acondicionadas em sacos plásticos e levadas ao Laboratório de Nematologia da Universidade Federal de Uberlândia para o processamento. Foram avaliados o fator de reprodução, a produtividade de látex e o diâmetro médio das árvores. De todos os tratamentos utilizados, Nimitz e Nemix demonstraram redução do fator de reprodução em comparação aos demais. Nenhum dos produtos demonstrou eficiência quanto às três características de produtividade avaliadas: kg ha-1, kg árvore-1 e kg parcela-1, indicando que ainda não se justifica a recomendação dos produtos para esta característica. Os diâmetros médios das parcelas também não foram influenciados pelos tratamentos utilizados. Brazil held the position of the greatest rubber producer and exporter of the world for many years. After the second half of the past century, such reality changed and the country became an importer, mostly from southeastern Asia. Great attention must be given to phytosanitary problems, which can contribute for production reduction, for the proper management of a rubber tree orchard. Little attention has been given to nematodes, despite reported damages in function of attack by Meloidogyne exigua. Nematode control in the soil can be done by different methods, with emphasis to chemical and biological methods. This study evaluated biological and chemical products for field management of Rubber Tree Descending Death and the reduction of M. exigua population density, it also evaluated if there is a relation between infestation and diameter increment of the trees. The experiment was done in a farm located in the Triângulo Mineiro, MG. The products Nemat + Ecotrich (300 g ha-1each); Nemix (1.0 to 1.5 kg ha-¹); GF 422 (1 g L-1) + Onyx (1 mL L-1) and Rizos (2 mL L-1) (first application: GF 422 + Onyx; second application: GF 422 + Rizos; third application: GF 422 + Onyx); Rugby (Cadusaphos, 15 L ha-1) and Nimitz (Fluensulfone, 3 L ha-¹) were evaluated, besides a non-sprayed control. The experimental design was randomized blocks, with six treatments and five replications. Four samplings were done to determine nematode population density before and after each application. The samples were placed in plastic bags and taken to the Laboratório de Nematologia of Universidade Federal de Uberlândia for processing. Reproduction factor, latex productivity and tree average diameter were evaluated. Among all treatments evaluated, Nimitz and Nemix reduced the reproduction factor in relation to the others. None of the products was effective for the three yield characteristics evaluated: production per hectare, production per tree and production per plot, indicating that their recommendation for these characteristics is not justified yet. The average tree diameter was not affected by any of the treatments evaluated. Dissertação (Mestrado)

SUMMARY Parasites are common in intensive or organics systems destined for chickens, which is more conducive to the emergence of gastrointestinal parasites, favored by direct contact with soil and other organisms. The growing demand for animal protein stimulates an expansion of production systems, increasing the stocking density. Outdoor poultry breeding systems (organic or not) that enable lower population density and higher animal welfare does not exclude these animals the presence of environmental pathogens. The control of gastrointestinal helminthosis in non-organic intensive and extensive systems is accomplished by administering anthelmintics with high cost and results unsatisfactory due to the misuse of drugs with consequent selection parasite strains resistant to chemical bases. This problem stimulate research into alternative control measures. Nematophagous fungi are used by its enzymatic action in controlled conditions and how environmental biocontrolers of larvae of gastrointestinal nematodes of livestock. This study evaluated the capacity of conidia/chlamydospores of nematophagous fungi as Duddingtonia flagrans (AC001 and CG722) and Monacrosporium thaumasium (NF34A) for cross the gastrointestinal tract of domestic chickens (Gallus gallus domesticus), and yours germination after traffic and predatory activity “in vitro” on larvae of Panagrellus spp. Fungi conidia/chlamydospores was identified in feces of chickens at times of 6, 12 and 24 hours after administration and spores viability was found after observing the germination, mycelial growth, followed by production of traps, capture and death of Panagrellus spp larvae in feces. Fungi Nematophagous are alternative control measures, efficient and innovative technology for the biological control of helminth parasites of chickens. RESUMO Parasitas são comuns em sistemas intensivos avícolas ou orgânicos, mais propício para o surgimento de parasitas gastrointestinais, favorecido pelo contato direto dos animais com o solo e outros organismos. O aumento da demanda por proteína animal estimula a expansão dos sistemas de produção com aumento da densidade animal. Sistemas de criação livres (orgânicos ou não) com baixa densidade e alto padrão tecnológico não excluem estes animais do contato com patógenos ambientais. O controle das helmintoses gastrointestinais em sistemas extensivos ou intensivos não orgânicos é realizado pela administração de anti helmínticos com elevado custo e resultados insatisfatórios devido ao mau uso dos produtos com consequente seleção de cepas parasitárias resistentes às bases químicas. Este problema estimula a pesquisa de medidas alternativas de controle. Fungos nematófagos são utilizados por sua atividade enzimática em condições controladas e como biocontroladores de larvas de namatóides gastrointestinais em animais. Este estudo avaliou a capacidade de conídios/clamidósporos dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001 e CG722) e Monacrosporium thaumasium (NF34A) passar pelo trato gastrointestinal de galinhas domésticas (Gallus gallus domesticus), a germinação após passagem e atividade predatória “in vitro” sobre larvas de Panagrellus spp. Conídios/clamidósporos fúngicos foram identificados nas fezes das aves nos tempos 6, 12 e 24 horas após administração e a viabilidade dos esporos foi contatada após germinação, crescimento micelial, seguido pela produção de armadilhas, captura e destruição de larvas de Panagrellus spp. nas fezes. Fungos nematófagos são medidas alternativas de controle, uma eficiente tecnologia e inovadora para o controle biológico de helmintos parasitas de aves.

Paecilomyces lilacinus has potential for pests control. We aimed to analyze mycelial growth and spore production in P. lilacinus strains in several agro-industrial residues and commercial media. This study suggests alternative nutrient sources for fungi production and that the biotechnological potential of agro-industrial refuses could be employed in byproducts development.Paecilomyces lilacinus apresenta potencial para controle de pragas. O objetivo deste trabalho foi analisar o crescimento micelial e a produção de esporos de linhagens de P. lilacinus em resíduos agro-industriais e meios comerciais. Este estudo sugere fontes alternativas para produção de fungos com potencial biotecnológico para desenvolvimento de bioprodutos.

Paecilomyces lilacinus has potential for pests control. We aimed to analyze mycelial growth and spore production in P. lilacinus strains in several agro-industrial residues and commercial media. This study suggests alternative nutrient sources for fungi production and that the biotechnological potential of agro-industrial refuses could be employed in byproducts development. Paecilomyces lilacinus apresenta potencial para controle de pragas. O objetivo deste trabalho foi analisar o crescimento micelial e a produção de esporos de linhagens de P. lilacinus em resíduos agro-industriais e meios comerciais. Este estudo sugere fontes alternativas para produção de fungos com potencial biotecnológico para desenvolvimento de bioprodutos.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium, no controle de larvas infectantes de nematóides gastrintestinais de caprinos em campo, no Semi-Árido cearense. Uma área de 20 ha, com pasto recém-formado, livre de vermes, foi dividida em quatro piquetes de 5 ha. Em cada piquete, foi formado um grupo constituído por nove caprinos, onde cada animal recebeu os seguintes tratamentos, durante os meses de abril a junho de 2002: grupo 1, 10 g de péletes por via oral, semanalmente; grupo 2, 10 g de péletes por via oral, quinzenalmente; grupo 3, 0,5 mL de moxidectin por 25 kg de peso vivo; grupo 4, controle, não tratado. Mensalmente, dois caprinos traçadores foram colocados junto ao rebanho por 30 dias, e após esse período, foram sacrificados e necropsiados. O grupo de animais que recebeu o tratamento com o fungo uma vez por semana apresentou redução no número de ovos por grama de fezes, menor carga parasitária e maior ganho de peso, em relação aos animais dos demais grupos. O fungo M. thaumasium é eficiente no controle de larvas infectantes nas pastagens e pode ser utilizado no controle e profilaxia de nematóides gastrintestinais de caprinos, no Semi-Árido cearense. The present study aimed to evaluate the viability of the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium in the control of gastrointestinal nematodes larvae of goats in the field, in semiarid climate in Ceará State, Brazil. An area of 20 ha, free of worms, was divided into four paddocks of 5 ha. In each paddock, one group consisting of nine goats was formed and received the following treatment, individually, from April to June 2002: group 1, each animal received, orally, 10 g of pellets, weekly; group 2, the animals received 10 g of pellets, each 15 days; group 3, the animals received 0.5 mL moxidectin per 25 kg of live weight; group 4, control, not treated. Monthly, two tracer goats were introduced into the flock per 30 days. After this period, they were sacrificed and submitted to necropsy. The group of animals that received fungi treatments weekly showed reduction in the number of eggs per gram of feces, smaller parasitic load and larger weight in relation to animals of the other groups. The fungi M. thaumasium was efficient to control infective larvae in the pasture, and can be used in the control and prophylaxis of gastrointestinal nematodes of goats in semiarid climate, in Ceará State.

Em trabalho preliminar foram obtidos 24 isolados fúngicos com propriedades antagônicas a nematóides parasitas de plantas segundo experimentos realizados em laboratório. Para dar continuidade a tal trabalho, tornou-se desejável dispor de metodologia simples e de baixo custo para selecionar aqueles sem capacidade de produção de substâncias fitotóxicas, para serem empregados em experimentos em casa-de-vegetação com fitonematóides. Conseqüentemente, cultivaram-se os fungos em meio líquido e, após filtração, as fases líquidas foram liofilizadas e extraídas com acetato de etila/metanol. Os extratos foram concentrados sob vácuo e dissolvidos em água e solução de sacarose para serem submetidos a testes in vitro com sementes de alface (Lactuca sativa L.) e com coleóptilos de trigo (Triticum aestivum L.), respectivamente. Vinte e três isolados pertencentes aos gêneros Arthrobotrys, Aspergillus, Coniothyrium, Cunninghamella, Cylindrocarpon, Fusarium, Monacrosporium, Mortierella, Paecilomyces, Penicillium, Sclerotinia, Trichoderma e Verticillium, apresentaram atividade tóxica contra os coleóptilos de trigo. Apenas os isolados de Cylindrocarpon magnusianum (Sacc.) Wollenw., Fusarium moniliforme Shelden, Mortierella sp., Paecilomyces lilacinus (Thom.) Samson e Penicillium sp. apresentaram atividade fitotóxica no teste com sementes de alface. Somente um isolado de F. moniliforme se mostrou inativo em ambos os testes, o que sugere que não seja produtor de fitotoxinas. In a previous work 24 fungi cultures were selected due to their antagonic properties to phytonematodes in laboratory experiments. To proceed to further studies, it became desirable to use a simple and inexpensive methodology to identify those fungi able to produce phytotoxic substances, so that only the non phytotoxin producers could be used in green-house experiments with plant parasite nematodes. Thus, fungi were grown in liquid medium and the resulting mixtures were submitted to filtration. The liquid phases were freeze-dried and extracted with ethyl acetate/methanol. After extracts concentration under vacuum, the remaining substances were dissolved in water and aqueous saccharose solution to be submitted to in vitro assays with lettuce seeds (Lactuca sativa L.) and wheat coleoptile (Triticum aestivum L.), respectively. Twenty three isolates from genera Arthrobotrys, Aspergillus, Coniothyrium, Cunninghamella, Cylindrocarpon, Fusarium, Monacrosporium, Mortierella, Paecilomyces, Penicillium, Sclerotinia, Trichoderma and Verticillium, presented toxic activity against wheat coleoptile, though only isolates of Cylindrocarpon magnusianum (Sacc.) Wollenw., Fusarium moniliforme Shelden, Mortierella sp., Paecilomyces lilacinus (Thom.) Samson and Penicillium sp., presented phytotoxic effects in the lettuce seeds assay. Only one isolate of F. moniliforme was inactive in both assays, what suggests that this fungus is not able to produce phytotoxins.

Biological control is based on the use of microorganisms to combat populations of a specific pathogen. Nematophagous fungi have shown to be promising agents to combat nematode parasites of plants and animals. These organisms produce special structures along the hyphae, named traps, which are responsible for capturing and killing the nematode pre-parasitic stages. The growth of the isolates I31 of Arthrobotrys robusta and NF34a of Monacrosporium thaumasium was studied after submission to four different methods of preservation during eighteen months. The isolates were stored at 4ºC and cryopreserved with or without addition of cryoprotectants and stored in silica gel. The isolates did not present variation in radial growth when stored at 4ºC and frozen with or without addition of cryoprotectants. There was no significant difference between the dry mycelial mass of the isolates stored at 4ºC and those frozen after the addition of cryoprotectants. Storage in silica gel and freezing without cryoprotection interfered negatively in the capacity of the fungi to produce mycelial mass. This characteristic also was observed for sporulation of the two isolates. The behaviour of the isolates when maintained for prolonged periods under laboratory conditions is an important factor for selection of the most efficient method of preservation.O controle biológico é uma técnica baseada no emprego de microorganismos no combate a população de um patógeno específico. Os fungos nematófagos têm demonstrado serem agentes promissores no combate aos parasitos de plantas e de animais. Estes organismos produzem estruturas diferenciadas a partir das hifas, denominadas armadilhas, capazes de capturar e matar os estágios pré-parasitários dos nematóides. Foi avaliado o comportamento dos isolados I31 de Arthrobotrys robusta e NF34a de Monacrosporium thaumasium após terem sido submetidos a quatro métodos de preservação por período de dezoito meses. Os isolados foram armazenados em temperatura de 4ºC, criopreservados com e sem adição de crioprotetores e em sílica-gel. Os isolados I31 e NF34a não apresentaram variação no crescimento radial quando submetidos a armazenamento em temperatura de 4ºC e congelados com e sem adição de crioprotetores. Não foi evidenciada diferença entre a produção de massa micelial seca dos isolados armazenados em 4ºC e congelados com adição de crioprotetores. A preservação em sílica-gel e o congelamento sem crioproteção demonstraram interferir negativamente na capacidade do fungo em produzir massa micelial. Este comportamento negativo foi evidenciado também na capacidade de esporulação dos isolados. A escolha de um método eficiente de preservação destes microorganismos é uma das formas de se assegurar a capacidade predatória destes isolados após períodos prolongados de manutenção em condições laboratoriais.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Echinostoma paraensei is a trematode of the genus Echinostoma that can cause echinostomiasis in humans. The aims of this study were to evaluate the ovicidal activity of the isolates VC1 and VC4 of the nematophagous fungus Pochonia chlamydosporia on solid medium containing 2% water-agar(2% WA) on eggs of E. paraensei, selecting the most efficient isolate (assay A), evaluate the ovicidal effect (destruction of eggs) of most effective isolate on supplemented agar culture media (assay B), and to evaluate the ovicidal capacity of crude enzymatic extract of most effective isolate on E. paraensei eggs (assay C). One thousand eggs of E. paraensei (assay A) were placed in Petri dishes containing 2% WA with one isolate of fungus P. chlamydosporia (VC1 or VC4) grown for 10 days, and without fungus as control. Both the treated and control group consisted of six replicates. After 15 days, approximately one hundred eggs were removed from each dish and classified according to the following parameters: type 1 effect, physiological effect without morphological damage to eggshell, where hyphae are observed attached to the shell; type 2 effect, lytic effect with morphological alteration of embryo and egg shell with hyphal penetration through the shell; and type 3 effect, lytic effect with morphological alteration of embryo and eggshell, in addition to hyphal penetration and internal egg colonization. In assay B, E. paraensei eggs were placed in Petri dishes with different supplemented agar culture media: 2% chitin- agar (2% AC), 2% corn-meal-agar (2% CMA), 2% WA and 2% starch- agar (2% SSA) with isolate VC4 (the most effective); in control group were not used fungus. Each treatment consisted of six replicates. After 25 days, one hundred eggs were removed from each dish and the ovicidal effect was evaluated according to the parameters already mentioned. In assay C, one thousand E. paraensei eggs were poured into Petri dishes with 5 ml of isolate VC4 crude extract constituting the treated group. The control group contained one thousand eggs in 10 ml of distilled water in Petri dishes. Each treatment consisted of six replicates. After 7 days, the total number of E. paraensei eggs present on each dish of the treated and control groups were counted according to the methodology described by Mukhtar and Pervaz. In assay A, there was no difference (p > 0.05) in ovicidal activity among the tested isolates; however, the highest percentage for ovicidal activity (type 3 effect) was demonstrated by the isolate VC4. In assay B, the culture medium starch agar showed the best results for the destruction of the eggs at the end of 25 days of interaction, with a percentage of 46.6%. In assay C, the crude extract of VC4 was effective in the destruction of E. paraensei eggs at the end of 7 days, with a percentage reduction of 53%. Results of in vitro experimental assay A, B and C have shown that P. chlamydosporia (VC1 and VC4) had negative influence on the E. paraensei eggs, and thus can be considered as a potential candidate for the biological control of this helminth. Echinostoma paraensei é um trematóide do gênero Echinostoma que pode causar a equinostomíase em humanos. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a atividade ovicida dos isolados VC1 e VC4 do fungo nematófago Pochonia chlamydosporia em meio sólido ágar- água 2% sobre ovos de Echinostoma paraensei, selecionando o isolado mais eficaz (ensaio A); avaliar o efeito ovicida (destruição dos ovos) do isolado mais eficaz em meios de cultura ágar suplementados (ensaio B) e avaliar a capacidade ovicida do extrato bruto enzimático do melhor isolado sobre ovos de E. paraensei (ensaio C). Mil ovos de E. paraensei (ensaio A) foram colocados em placas de Petri contendo ágar-água 2% (AA 2%) com um isolado do fungo P. chlamydosporia crescido (VC1 ou VC4) durante 10 dias, e sem fungo como controle. Seis repetições foram feitas para ambos o grupo tratado e controle. Após 15 dias, cerca de cem ovos foram retirados de cada placa e classificados de acordo com os seguintes parâmetros: tipo 1, efeito fisiológico sem prejuízo morfológico à casca do ovo, onde hifas são observadas aderidas à casca; tipo 2, efeito lítico com alteração morfológica da casca e embrião do ovo, com penetração de hifas através da casca; e tipo 3 efeito lítico com alteração morfológica do embrião e da casca, além de penetração de hifas e colonização interna do ovo. No ensaio B, ovos de E. paraensei foram colocados em placas de Petri com diferentes meios de cultura ágar suplementados: ágar-quitina 2% (AQ 2%), corn-meal-ágar 2% (CMA 2%), ágar-água 2% (AA 2%) e ágar- amido 2% (SSA 2%) com o isolado VC4 (o mais eficaz), no grupo controle não foram utilizados fungos. Seis repetições foram feitas para cada tratamento. Depois de 25 dias, cem ovos foram retirados de cada placa e o efeito ovicida foi avaliado de acordo com os parâmetros já citados. No ensaio C, mil ovos de E. paraensei foram vertidos para placas de Petri com 5ml de extrato bruto do isolado VC4 constituindo o grupo tratado. O grupo controle tinha 1.000 ovos em 10 ml de água destilada nas placas de Petri. Cada tratamento foi constituído por seis repetições. Após 7 dias, foram contados o número total de ovos de E. paraensei presentes em cada placa dos grupos tratado e controle de acordo com a metodologia descrita por Mukhtar e Pervaz. No ensaio A, foi observado que não houve diferença (p>0,05) na atividade ovicida entre os isolados testados, contudo, o maior percentual para a atividade ovicida (efeito do tipo 3) foi demonstrado pelo isolado VC4. No ensaio B, o meio de cultura ágar- amido 2% (SSA 2%) apresentou os melhores resultados para a destruição dos ovos ao final de 25 dias de interação, com um percentual de 46.6%. No ensaio C, o extrato bruto de VC4 demonstrou ser eficaz na destruição dos ovos de E. paraensei ao final de 7 dias com um percentual de redução de 53%. Os resultados dos ensaios experimentais in vitro A, B e C demonstraram que P. chlamydosporia (VC1 e VC4) influenciou de forma negativa sobre os ovos de E. paraensei, e assim pode ser considerado como um potencial candidato a controlador biológico desse helminto.

The effect of different temperatures on the predatory activity of Arthrobotrys oligospora and Duddingtonia flagrans on the free-living larval stages of cyathostomes were evaluated in an experiment where feces of horses containing the parasites’ eggs were treated with these fungi and incubated under different constant temperatures (10°C, 15°C, 20°C, 25°C and 30°C ). The results indicated that the optimum temperature for egg development was 25°C. At 10°C the number of L3 recovered was practically zero, and at 15°C and 20°C, the percentage of larvae recovered was less than 3% of the total number of eggs per gram of feces. When these cultures subsequently were incubated for an additional period of 14 days at 27°C, they allowed the development of L3. In all the cultures inoculated with fungi a significant reduction in the number of larvae was observed. When incubated at 25°C or 30°C, the fungi caused reductions above 90%, in the number of L3. The samples cultivated at 10°C, 15°C, 20°C, 25°C and 30°C, when incubated for an additional period of 14 days at 27°C the reduction percentage of larvae was above 90% for A. oligospora. However, the same did not occur for D. flagrans. Here a reduction percentage between 47.5% and 41.8% was recorded when the cultures were incubated at 10°C and 20°C, respectively. The two species of fungi tested showed to be efficient in reducing the number of L3 when mixed with equine feces and maintained at the same temperature for the development of larval pre-parasitic stages of cyathostomes.A atividade predatória de fungos nematófagos e o desenvolvimento de estádios pré-parasitários de nematódeos estrongilídeos são influenciados pela temperatura. O efeito de diferentes temperaturas constantes na atividade predatória dos fungos Arthrobotrys oligospora e Duddingtonia flagrans sobre as fases larvares de vida livre dos nematódeos ciatostomíneos foi avaliado em um experimento onde fezes de cavalos contendo ovos de parasitos foram tratadas com fungos e incubadas em diferentes temperaturas constantes (10°C, 15°C, 20°C, 25°C e 30°C). Os resultados indicaram que a temperatura ótima de desenvolvimento de ovo até L3 foi de 25°C. A 10°C o número de L3 recuperado foi praticamente zero e a 15°C e 20°C os percentuais obtidos foram inferiores a 3% do total do número de ovos por grama de fezes. Quando estes cultivos foram incubados por um período adicional de 14 dias à 27°C permitiram o desenvolvimento até L3. Em todos os cultivos inoculados com fungos, quando as larvas estavam presentes, houve redução significativa no número de larvas atribuído à ação predatória dos fungos. A 25°C e 30°C os fungos ocasionaram reduções acima de 90% no número de L3. Os cultivos mantidos à 10°C, 15°C, 20°C, 25°C e 30°C quando incubados por um período adicional de 14 dias na temperatura controle, mantiveram percentuais de redução larvar superior a 90% para o fungo A. oligospora, o mesmo não ocorrendo para D. flagrans, que apresentou percentuais de 47,5% e 41,8% quando estimulado a 10°C e 20°C, respectivamente. Esses fungos demonstraram ser eficientes na redução do número de L3 quando adicionados a fezes de eqüinos nas mesmas temperaturas ideais para o desenvolvimento dos estádios larvares pré-parasitários.

The effect of different temperatures on the predatory activity of Arthrobotrys oligospora and Duddingtonia flagrans on the free-living larval stages of cyathostomes were evaluated in an experiment where feces of horses containing the parasites’ eggs were treated with these fungi and incubated under different constant temperatures (10°C, 15°C, 20°C, 25°C and 30°C ). The results indicated that the optimum temperature for egg development was 25°C. At 10°C the number of L3 recovered was practically zero, and at 15°C and 20°C, the percentage of larvae recovered was less than 3% of the total number of eggs per gram of feces. When these cultures subsequently were incubated for an additional period of 14 days at 27°C, they allowed the development of L3. In all the cultures inoculated with fungi a significant reduction in the number of larvae was observed. When incubated at 25°C or 30°C, the fungi caused reductions above 90%, in the number of L3. The samples cultivated at 10°C, 15°C, 20°C, 25°C and 30°C, when incubated for an additional period of 14 days at 27°C the reduction percentage of larvae was above 90% for A. oligospora. However, the same did not occur for D. flagrans. Here a reduction percentage between 47.5% and 41.8% was recorded when the cultures were incubated at 10°C and 20°C, respectively. The two species of fungi tested showed to be efficient in reducing the number of L3 when mixed with equine feces and maintained at the same temperature for the development of larval pre-parasitic stages of cyathostomes. A atividade predatória de fungos nematófagos e o desenvolvimento de estádios pré-parasitários de nematódeos estrongilídeos são influenciados pela temperatura. O efeito de diferentes temperaturas constantes na atividade predatória dos fungos Arthrobotrys oligospora e Duddingtonia flagrans sobre as fases larvares de vida livre dos nematódeos ciatostomíneos foi avaliado em um experimento onde fezes de cavalos contendo ovos de parasitos foram tratadas com fungos e incubadas em diferentes temperaturas constantes (10°C, 15°C, 20°C, 25°C e 30°C). Os resultados indicaram que a temperatura ótima de desenvolvimento de ovo até L3 foi de 25°C. A 10°C o número de L3 recuperado foi praticamente zero e a 15°C e 20°C os percentuais obtidos foram inferiores a 3% do total do número de ovos por grama de fezes. Quando estes cultivos foram incubados por um período adicional de 14 dias à 27°C permitiram o desenvolvimento até L3. Em todos os cultivos inoculados com fungos, quando as larvas estavam presentes, houve redução significativa no número de larvas atribuído à ação predatória dos fungos. A 25°C e 30°C os fungos ocasionaram reduções acima de 90% no número de L3. Os cultivos mantidos à 10°C, 15°C, 20°C, 25°C e 30°C quando incubados por um período adicional de 14 dias na temperatura controle, mantiveram percentuais de redução larvar superior a 90% para o fungo A. oligospora, o mesmo não ocorrendo para D. flagrans, que apresentou percentuais de 47,5% e 41,8% quando estimulado a 10°C e 20°C, respectivamente. Esses fungos demonstraram ser eficientes na redução do número de L3 quando adicionados a fezes de eqüinos nas mesmas temperaturas ideais para o desenvolvimento dos estádios larvares pré-parasitários.

INTRODUÇÃO: Strongyloides stercoralis é um nematoide que infecta grande parte da população mundial. MÉTODOS: O objetivo deste trabalho foi comparar a capacidade predatória dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001), Monacrosporium thaumasium (NF34) e Arthrobotrys robusta (I-31) sobre larvas infectantes (L3) de Strongyloides stercoralis em condições laboratoriais no meio ágar-água 2%. RESULTADOS: Ao final do experimento, os percentuais de redução de L3 de Strongyloides stercoralis observados foram de: 83,7% (AC001); 75,5% (NF34) e 73,2% (I-31). CONCLUSÕES: Os fungos nematófagos foram capazes de capturar e destruir in vitro as L3, podendo ser utilizados como controladores biológicos de Strongyloides stercoralis. INTRODUCTION: Strongyloides stercoralis is a nematode that infects much of the population worldwide. METHODS: This study aimed to compare the ability of predatory nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001), Monacrosporium thaumasium (NF34) and Arthrobotrys robusta (I-31) on infective larvae (L3) of Strongyloides stercoralis in laboratory conditions on 2% water-agar. RESULTS: At the end of the experiment, the percentage reductions in Strongyloides stercoralis L3 were 83.7% (AC001), 75.5% (NF34) and 73.2% (I-31). CONCLUSIONS: The nematophagous fungi were able to capture and destroy the L3 in vitro and may be used as biological controls of Strongyloides stercoralis.

A capacidade predatória de um isolado de fungo predador de nematoides Duddingtonia flagrans (AC001) sobre larvas infectantes de ciatostomíneos foi avaliada em condições laboratoriais em ensaio experimental em meio ágar-água 2% (AA 2%). Houve redução significativa (p < 0,01) de 93,64% na média de larvas infectantes de ciatostomíneos recuperadas do meio AA2%, ao final de sete dias. Os resultados desse ensaio evidenciam que o isolado fúngico AC001 poderia ser utilizado no controle biológico de ciatostomíneos de equinos. The predatory capacity of one isolate of nematode-trapping fungus Duddingtonia flagrans (AC001) on infective larvae of cyathostomes was evaluated in laboratorial conditions in medium water-agar 2% (WA 2%). There was significant reduction (p < 0. 01) of 93.64% in the average of infective larvae of cyathostomes recovered of medium WA 2% at seven day. These results show that the isolated AC001 could be used in the biological control of cyathostomes of horses.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior The gastrointestinal nematodes caused mainly by the genus: Trichostrongylus spp., Cooperia spp., Oesophagostomum spp, Strongyloides spp and Haemonchus spp. are a deadlock to raise small ruminants (caprine and ovine). The control of these parasites has been done by anti-helminthic drugs, however there are many reports about the occurrence of resistance. In this context, the use of nematophagous fungi, come as a viable alternative in the fight against gastrointestinal nematodes. The isolated of nematophagous fungi of the genus Duddigtonia flagrans (AC001), Monacrosporium thaumasium (NF34), Arthrobotrys robusta (I31) and A. conoides (I40) were used in an associated form (AC001+I31) and (NF34+I40) aiming to evaluate in vitro the viability of association of nematophagous fungi after passing through the gastrointestinal tract of goats. In order to do so, it was used association of nematophagous fungi above the concentration of 1x106 conidium and chlamidospore / kg of live weight (LW), given in a single dose. And after, evaluate the viability of the associations of fungi isolated (AC001 + I31) and (NF34 + I40) in pellet matrix of sodium alginate in the biological control of nematodes of sheeps under field conditions. Therefore, were evaluated number of infective larvae recovered in distances 0-20 cm and 20-40 cm from the fecal matter, Egg counts per gram of faeces (EPG), in groups treated and control, prevalence of genus strongyilis recovered in fecal cultures, hematocrit and total protein count in the blood. Fungi structures associated were capable of passing through the gastrointestinal tract of goats and reduce the number of infected larvae (L3) of gastrointestinal nematodes in vitro. For the association among the isolates AC001 and I31, there were differences between the treated group and the control of the interval of 12h (P< 0,01) and 48h (P< 0,05), L3 percentage of reduction in gastrointestinal nematodes of 53% and 68% respectively. On the other hand, the association of the isolates NF34 and I40), differences (P < 0,01) were observed in the interval of 24, 48 and 72 hours, with percentage reduction of larvae of 56%, 61% and 48% respectively. The association among the isolated AC001 and I31 in matrix of sodium alginate was X not able to reduce the counting of eggs by grams of feces (EPG) of sheeps under fields conditions. On the other hand, the association among the isolates NF34 and I40 in the same conditions showed a difference (P< 0,01) in EPG compared to the control group. There was a difference (P< 0,05) between the number of L3 recovered in the distance of 0-20 cm from fecal pats, with a higher predominance of the genus Haemonchus ssp., Cooperia spp., Trichostrongylus spp.and Oesophagostomum spp. The results showed that the associations of the isolated of nematophagous fungi AC001+I31 and NF34+I40 can be used as a way of biological control of gastrointestinal nematodes of small ruminants at lab conditions as well as field conditions. As nematodioses gastrintestinais causadas principalmente pelos gêneros: Trichostrongylus spp., Cooperia spp., Oesophagostomum spp, Strongyloides spp e Haemonchus spp. são um entrave para a criação de pequenos ruminantes (caprinos e ovinos). O controle destes parasitos tem sido realizado com drogas antihelmínticas, porém há muitos relatos do aparecimento de resistência. Nesse contexto, a utilização de fungos nematófagos, surge como uma alternativa viável no combate aos nematoides gastrointestinais. Os isolados de fungos nematófagos Duddigtonia flagrans (AC001), Monacrosporium thaumasium (NF34), Arthrobotrys robusta (I31) e A. conoides (I40) foram utilizados de forma associada (AC001+I31) e (NF34+I40) com o objetivo de avaliar in vitro a viabilidade da associação de fungos nematófagos após a passagem pelo trato gastrintestinal de caprinos. Para tal, foram utilizadas associações de fungos nematófagos acima na concentração de 1x106 conídios e clamidósporos/ kg de peso vivo (PV), administrado em dose única por via oral. Posteriormente foi avaliada a viabilidade das associações dos isolados fúngicos (AC001 + I31) e (NF34 + I40) em péletes de matriz de alginato de sódio no controle biológico de nematoides de ovinos criados a campo. Neste sentido, foram avaliados o número de larvas infectantes de nematoides gastrintestinais recuperadas nas pastagens nas distancias de 0 a 20 cm do bolo fecal e de 20 a 40 cm do bolo fecal, contagem do número de ovos por grama de fezes (OPG) nos grupos tratados e controle, prevalência dos gêneros de estrongilideos recuperados nas coproculturas, hematócrito e contagem de proteínas totais no sangue. Estruturas fúngicas associadas foram capazes de passar pelo trato gastrintestinal de caprinos e reduzir o número de Larvas infectantes (L3) de nematoides gastrintestinais in vitro. Para a associação entre os isolados AC001 e I31, houve diferenças entre o grupo tratado e controle nos horários de 12h (P< 0,01) e 48h (P< 0,05), com percentagem de redução L3 nematoides gastrintestinais de 53% e 68% respectivamente. Já para a associação entre os isolados NF34 e I40, diferenças (P< 0,01) foram observadas nos tempos de 24, 48 e 72 horas, com percentagem de redução de larvas de 56%, VIII 61% e 48% respectivamente. A associação entre os isolados AC001 e I31 em matriz de alginato de sódio não foi capaz de reduzir a contagem de ovos por grama de fezes (OPG) de ovinos criados a campo. Por outro lado, a associação entre os isolados NF34 e I40 nas mesmas condições demonstrou diferença (P< 0,01) no OPG em relação ao grupo controle. Houve diferença (P< 0,05) entre o número de L3 recuperadas na distância de 0-20 cm do bolo fecal, com maior prevalência dos gêneros Haemonchus ssp., Cooperia spp., Trichostrongylus spp.e Oesophagostomum spp. Os resultados demonstraram que as associações dos isolados de fungos nematófagos AC001+I31 e NF34+I40 podem ser utilizadas como forma de controle biológico de nematoides gastrintestinais de pequenos ruminantes tanto em condições laboratoriais quanto a campo.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Sodium alginate pellets of two different nematode predatory fungus D. flagrans and Monacrosporium thaumasium (biologic control) and Moxidectin (chemical control) were evaluated in the control of bulls gastrointestinal nematodiasis. Four groups of ten six month-old male Nellore calves were kept in paddocks of Brachiaria decumbens for 12 months. Each animal of group A received 1g/10 kg of body weight (b.w.) of pellets of D. flagrans (0.2 g of fungus/10 kg b.w.) twice a week, for 12 months. In group B, each animal received 1g/10 Kg of body weight of M. thaumasium pellets, twice a week, for 12 months. In group C each animal received 1 mL/50 Kg body weight of the anthelmintic moxidectin 1% in May, July and September 2010. Animals of the group control (group D) received no treatment. In the analysis of fecal egg count (EPG) of groups A and B were 56.7% and 47.8% smaller than control group (p

The aim of this study was to evaluate the predatory activity of the fungus Duddingtonia flagrans (AC001) on infective larvae of Ancylostoma ceylanicum after gastrointestinal transit in hamsters. Twenty animals were used in the experiment, divided into two groups: a treated group (10 animals) and a control group (10 animals). In the group treated with D. flagrans, each animal received mycelium from the AC001 isolate, at an oral dose of 5 mg/25 g of live weight. To evaluate the predatory activity of the fungus, fecal samples were collected from the animals in both groups, at the times of 6, 8, 12, 24 and 36 hours after the treatment. Then, subsamples of 2 g of feces were placed in Petri dishes containing 2% water-agar (2% WA) culture medium and 1000 L3 of A. ceylanicum. Over the study period, the following percentage reductions were observed: 43.2% (6 hours), 30.8% (8 hours), 25.8% (12 hours), 30% (24 hours) and 11% (36 hours). The fungus D. flagrans presented predatory activity on the L3 of A. ceylanicum, after passing through the hamsters' gastrointestinal tract. It was therefore concluded that the fungus D. flagrans may be an alternative for biological control of the L3 of A. ceylanicum. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade predatória do fungo Duddingtonia flagrans (AC001) sobre larvas infectantes de Ancylostoma ceylanicum após o trânsito gastrintestinal em hamsters. Foram utilizados vinte animais no experimento, divididos em dois grupos: um grupo tratado (10 animais) e um grupo controle (10 animais). No grupo tratado com D. flagrans, cada animal recebeu 5mg/25g de peso vivo de micélio do isolado AC001, por via oral. Para avaliar a atividade predatória do fungo, amostras fecais foram coletadas de ambos os grupos de animais nos horários de: 6, 8, 12, 24 e 36 após o tratamento. A seguir, 2g de fezes foram colocadas em placas de Petri contendo o meio de cultura ágar-água 2% (AA2%) e 1000 L3 de A. ceylanicum. Ao longo dos horários estudados os seguintes percentuais de redução foram observados: 43,2% (6 horas); 30,8% (8 horas); 25,8% (12 horas); 30% (24 horas) e 11% (36 horas). O fungo D. flagrans (AC001) apresentou atividade predatória sobre as L3 de A. ceylanicum após o trânsito pelo trato gastrintestinal de hamsters. Além disso, foi observada uma diferença significativa nos percentuais obtidos de cada horário em relação ao numero de L3 recuperadas (P < 0,01). Conclui-se, portanto, que o fungo D. flagrans pode ser uma alternativa de controle biológico das L3 de A. ceylanicum.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de subproduto do processo de produção de Pochonia chlamydosporia var. chlamydosporia no desenvolvimento de mudas e plantas de alface. Esse subproduto, um resíduo constituído de arroz que continha propágulos do fungo, foi adicionado em diferentes concentrações (0, 2 e 4% volume de resíduo:volume de substrato) a três tipos de substratos para mudas (formulado, comercial e fibra de coco). Sementes de alface foram semeadas em bandejas de isopor que continham os diferentes substratos enriquecidos com o resíduo. As mudas de alface foram transplantadas para vasos com o substrato solo e areia na proporção 1:1 (v:v), 28 dias após a semeadura. Todos os tipos de substratos e doses do resíduo apresentaram interação significativa para todas as variáveis relacionadas ao desenvolvimento das mudas e das plantas de alface. O maior desenvolvimento das mudas ocorreu na testemunha (sem o resíduo) dos substratos. Entretanto, após o transplantio das mudas para os vasos, as doses de resíduo até 4 e 2% v:v - nos substratos formulado e comercial, respectivamente - foram as que promoveram o maior desenvolvimento das plantas. A utilização de até 2% v:v do resíduo nos substratos formulado e comercial é viável e não prejudica o desenvolvimento de plantas de alface. The objective of this work was to evaluate the effect of a by-product of the production process of Pochonia chlamydosporia var. chlamydosporia in the development of lettuce seedlings and plants. This by-product, a residue made up of rice containing propagules of the fungus, was added at different concentrations (0, 2, and 4% volume of residue:volume of substrate) to three types of substrates for seedlings (formulated, commercial, and coconut fiber). Lettuce seeds were sown in polystyrene trays containing the different substrates enriched with the residue. The lettuce seedlings were transplanted into pots containing soil and sand substrate at the proportion 1:1 (v:v), 28 days after sowing. All types of substrates and residue levels showed a significant interaction for all variables related to the development of lettuce seedlings and plants. The highest development of seedlings occurred in the control treatment (no residue) of the substrates. However, after transplanting the seedlings into the pots, the residue levels of up to 4 and 2% v:v - in the formulated and commercial substrates, respectively - promoted the highest plant growth. The use of up to 2% v:v of the residue on the formulated and commercial substrates is viable and does not affect the development of lettuce plants.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_juliana_nunes_vieira.pdf: 749761 bytes, checksum: d10f921e3d83dd0cb845cc767149a9f3 (MD5) Previous issue date: 2012-03-14 The rapid development of resistance to gastrointestinal parasites anthelmintics has shown the limited efficiency of this method in the suppression of endoparasitoses in ruminants, and has furthered research in alternative control methods. The use of chemicals in animal anthelmintic treatment, in association with nematophagous fungi used for biological control, is a strategy that has proven to be effective in reducing the nematode population density of farm animals. This study aims to verify the in vitro susceptibility of the nematophagous fungi Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans, Paecilomyces fumosoroseus, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces marquandii and Paecilomyces variotii against the antiparasitic drugs albendazole, thiabendazole, ivermectin (100%), levamisole (7.5%) and closantel (10%) by using the Minimum Inhibitory Concentration (MIC). MICs ranged between 4 and 0,031µg/mL for albendazole, thiabendazole and ivermectin, between 0,937 and 0,117µg/mL for levamisole, and between 0,625 and 0,034 for closantel. The results obtained showed that all antiparasitic drugs tested had an in vitro inhibitory effect on nematophagous fungi, being able to jeopardize the fungus action as a biological control bioagent. O rápido desenvolvimento de resistência de parasitos do trato gastrintestinal a antihelmínticos tem demonstrado limitada eficiência desse método para o controle de determinadas endoparasitoses em ruminantes, incentivado assim, pesquisas com métodos alternativos de controle parasitário. A utilização de compostos químicos no tratamento anti-helmíntico de animais, em associação com fungos nematófagos usados no controle biológico, é uma estratégia que vem se mostrando eficaz para a redução da densidade populacional de nematódeos nos animais de produção e pouco se sabe sobre seu emprego simultâneo. Este trabalho teve por objetivo verificar, através da Concentração Inibitória Mínima (CIM), a suscetibilidade in vitro dos fungos nematófagos Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans, Paecilomyces fumosoroseus, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces marquandii e Paecilomyces variotii aos antiparasitários albendazol, tiabendazol e ivermectina (100%), levamisol (7,5%) e closantel (10%). As CIMs variaram de 4 a 0,031µg/mL para albendazol, tiabendazol e ivermectina, de 0,937 a 0,117µg/mL para o levamisol e de 0,625 a 0,039µg/mL para o closantel, dependendo do fungo testado. Os resultados mostram que todos os antiparasitários testados tiveram efeito inibitório in vitro sobre os fungos nematófagos, podendo comprometer suas ações como bioagentes de controle biológico.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Gatrointetistinal helminthosis cause damage and can kill ruminants and other animals, including man. The indiscriminate use of anthelminthic caused the selection of populations of helminthes resistant to different chemical groups used. Nematophagous fungi are used in the biological control of gastrointestinal helminthosis, such as Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Pochonia chlamydosporia. In the first experiment, sheep were treated with pellets with nematophagous fungi D. flagrans and M. thaumasium evidencing that the fungus can be used as an alternative for control of ovine gastrointestinal nematodiosis. In the second experiment, D. flagrans (AC001 isolate) and M. thaumasium (NF34a isolate) were efficient in controlling in vitro larvae in the third stage (L3) of Haemonchus contortus of ovine and can be used in the biological control of this nematode. In the third experiment, isolates of P. chlamydosporia (VC1 and VC4) had an important role in the destruction of eggs of human Trichuris trichiura. In addition, fungi D. flagrans (AC001) and M. thaumasium (NF34a) preyed L3 of H. contortus, but no predation by P. chlamydosporia was found. Thus, isolates of P. chlamydosporia (VC1 and VC4) can be potential biological controllers of Trichuris trichiura in humans and D. flagrans (AC001) and M. thaumasium (NF34a) of H. contortus for ovine. In the fourth experiment, isolates of P. chlamydosporia (VC1 and VC4) showed ovicidal activity (p < 0.05) in eggs of T. vulpis of dogs. Fungi of D. flagrans (AC001) and M. thaumasium (NF34a) did not show ovicidal effect, but P. chlamydosporia is a potential agent for biological control of T. vulpis eggs in dogs. In the fifth experiment, isolate of nematophagous fungi P. chlamydosporia (VC1) destroyed eggs of Anoplocephala perfoliata in horses. D. flagrans (AC001) and M. thaumasium (NF34a) were effective in controlling gastrointestinal nematodioisis of ovine and P.chlamydosporia isolates (VC1 e VC4) destroyed eggs of T. trichiura in humans and T. vulpis of dogs. The isolate (VC1) destroyed eggs of A. perfoliata in horses. As helmintoses gastrointestinais provocam danos e podem matar ruminantes e outros animais, incluindo o homem. O uso indiscriminado de anti-helmínticos provocou a seleção de populações de helmintos resistentes aos diferentes grupos químicos utilizados. Fungos nematófagos, como Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Pochonia chlamydosporia são utilizados no controle biológico das helmintoses gastrintestinais. No primeiro experimento, ovelhas foram tratadas com péletes contendo D. flagrans e M. thaumasium evidenciando que esses fungos podem ser usados como uma alternativa para o controle das nematodioses gastrintestinais de ovinos. No segundo experimento, D. flagrans (isolado AC001) e M. thaumasium (isolado NF34a) foram eficazes no controle in vitro de larvas de 3° estágio (L3) de Haemonchus contortus de ovinos e podem ser usados no controle biológico desse nematóide. No terceiro experimento, isolados de P. chlamydosporia (VC1 e VC4) tiveram papel importante na destruição de ovos de Trichuris trichiura de humanos. Além disso, em outro ensaio os fungos D. flagrans (AC001) e M. thaumasium (NF34a) predaram L3 de H. contortus de ovinos, mas nenhuma predação pelo fungo P. chlamydosporia foi observada. Os isolados de P. chlamydosporia (VC1 e VC4) podem ser controladores biológicos potenciais de Trichuris trichiura de humanos e os fungos D. flagrans (AC001) e M. thaumasium (NF34a) de H. contortus de ovinos. No quarto experimento, isolados de P. chlamydosporia (VC1 e VC4) demonstraram atividade ovicida (p < 0,05) em ovos de T. vulpis de cães. Os fungos D. flagrans (AC001) e M. thaumasium (NF34a) não mostraram efeito ovicida, mas P. chlamydosporia é um agente potencial para o controle biológico de ovos de T. vulpis de cães. No quinto experimento, o isolado do fungo nematófago P. chlamydosporia (VC1) destruiu ovos de Anoplocephala perfoliata de equinos. Os fungos D. flagrans (AC001) e M. thaumasium (NF34a) foram efetivos no controle das nematodioses gastrintestinais de ovinos e os isolados VC1 e VC4 de P. chlamydosporia destruíram ovos de T. trichiura de humanos e T. vulpis de cães. O isolado VC1 destruiu ovos de A. perfoliata de equinos.

INTRODUÇÃO: Strongyloides venezuelensis tem sido utilizado como um modelo para estudo da estrongiloidose humana. MÉTODOS: O objetivo deste trabalho foi comparar a capacidade predatória dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001), Arthrobotrys robusta (I-31) e Monacrosporium sinense (SF53) sobre larvas infectantes (L3) de Strongyloides venezuelensis em condições laboratoriais no meio ágar-água 2%. RESULTADOS: Ao final do experimento, os percentuais de redução de L3 de Strongyloides venezuelensis observados foram de: 93% (AC001); 77,2% (I-31) e 65,2% (SF53). CONCLUSÕES: Os fungos nematófagos foram capazes de capturar e destruir in vitro as L3, podendo ser utilizados como controladores biológicos de Strongyloides venezuelensis. INTRODUCTION: Strongyloides venezuelensis has been used as a model for studying human strongyloidosis. METHODS: This study aimed to compare the ability of predatory nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001), Arthrobotrys robusta (I-31) and Monacrosporium sinense (SF53) and on infective larvae (L3) of Strongyloides venezuelensis in laboratory conditions on 2% water-agar medium. RESULTS: At the end of the experiment, the percentage reductions of Strongyloides venezuelensi L3 were: 93% (AC001), 77.2% (I-31) and 65.2% (SF53). CONCLUSIONS: The nematophagous fungi were able to capture and destroy the L3 in vitro and can be used as biological controllers of Strongyloides venezuelensi.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior With the aim of: testing a pellet formulation in sodium alginate containing Duddingtonia flagrans (isolate AC001) mycelial fungus for biological control cyathostomins of horses raised in field, evaluate in vitro effect of D. flagrans (isolate AC001), Monacrosporium thaumasium (isolate NF34a) and P. chlamydosporia (isolates VC1 and VC4) on Oxyuris equi and Austroxyuris finlaysoni eggs; evaluate the in vivo ovicidal activity of P. chlamydosporia (isolate VC4) fungus on Oxyuris equi eggs and to evaluate the predatory capacity in vitro of D. flagrans nematophagous fungus on horses cyathostomin infective larvae (L3); test P. chlamydosporia (isolate VC4) fungal extract action on cyathostomins eggs eclosion; optimize the protease production by D. flagrans (isolate AC001) and its larvicidal action on horses cyathostomin and, to evaluate crude enzymatic extract production and ovicidal activity of P. chlamydosporia (isolates VC1 and VC4) and Paecilomyces lilacinus (PL1) on O. equi eggs, tests were conducted in experimental laboratory and in field conditions. The animals in the group treated with D. flagrans (AC001) pellets showed a different (p

Com o objetivo de demonstrar a eficácia do fungo Paecilomyces lilacinus sobre ovos de Taenia saginata em condições laboratoriais, foi montado ensaio em placas de Petri com agar - água 2%. Houve atividade ovicida (p

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-25Bitstream added on 2014-06-13T20:58:18Z : No. of bitstreams: 1 martinelli_prp_me_jabo.pdf: 3498110 bytes, checksum: 26c5aa48f388ce4f86f0f39aaecfd26a (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Embora numerosas espécies de fitonematóides já tenham sido encontradas em pomares de citros em todo o mundo, poucas são consideradas pragaschave da cultura. No Brasil, apenas o nematóide dos citros (Tylenchulus semipenetrans Cobb) e o nematóide das lesões radiculares dos citros (Pratylenchus jaehni Inserra et al.) detêm esse status. Entre esses, T. semipenetrans é o mais distribuído, enquanto P. jaehni é o mais agressivo. Essa praga já foi encontrada em pomares de mais de 30 municípios paulistas, dois mineiros e três paranaenses. O objetivo deste estudo foi isolar, identificar, documentar ao microscópio fotônico e eletrônico de varredura e avaliar a eficácia de fungos nematófagos para o controle biológico dos nematóides dos citros (P. jaehni e T. semipenetrans). Foram analisadas 38 amostras coletadas em pomares de citros de municípios paulistas e goiano no Laboratório de Nematologia da UNESP/FCAV, Câmpus de Jaboticabal-SP. Dessas amostras, foram isolados Arthrobotrys robusta de 23,7% das amostras, A. musiformis de 18,4%, A. oligospora de 10,5% e A. conoides de 5,2%. Monacrosporium elegans, M. eudermatum, Dactyllela leptospora e Paecilomices lilacinus foram encontrados em 2,6% das amostras. Do total de 26 isolados dos fungos obtidos, 92,8% foram patogênicos a T. semipenetrans e 82,1% a P. jaehni. Um isolado de cada espécie desses fungos foi incluído na documentação das características mais marcantes ao microscópios fotônico e eletrônico de varredura. Em testes in vitro, foram selecionados isolados de cinco espécies de fungos nematófagos, sendo Monacrosporium eudermatum, Dactylella leptospora, Arthrobotrys musiformis, A. conoides e Paecilomyces lilacinus formulados para T. semipenetrans. Para P. jaehni, foram formulados Arthrobotrys robusta, A. oligospora, A. musiformis, Dactylella leptospora e Monacrosporium eudermatum... Although many species of nematodes have already been found in orchards of citrus in the world, few are considered key pests of the culture. In Brazil, only the citrus nematode (Tylenchulus semipenetrans Cobb) and the lesion nematode of citrus (Pratylenchus jaehni Inserra et al.) have that status. Between these, T. semipenetrans is more distributed, but P. Jaehni is the most aggressive. This pest has been found in orchards of more than 30 counties in São Paulo State, two in Minas Gerais and three in Paraná State. The aim of this study was to isolate, identify, document and assess the effectiveness of nematophagous fungi for the biological control of the citrus nematode (P. jaehni and T. semipenetrans). Were analyzed 38 samples collected in the citrus orchards of Counties of Sâo Paulo State and one in Goiás, in Laboratório de Nematologia of UNESP/FCAV, Câmpus of Jaboticabal, SP. From these samples were isolated Arthrobotrys robusta, 23.7% of the samples, A. musiformis 18.4%, A. oligospora 10.5% in A. conoides 5.2%. Monacrosporium elegans, M. eudermatum, Dactyllela leptospora and Paecilomices lilacinus were found in 2.6% of samples. From a total of 26 isolates of the fungi obtained, 92.8% were pathogenic to T. semipenetrans and 82.1% to P. Jaehni. An isolate from each species of these fungi was included in the documentation of the most remarkable characteristics at the light microscope and scanning electron microscope. In tests in vitro were selected five isolates of nematophagous fungi being Monacrosporium eudermatum, Dactylella leptospora, Arthrobotrys musiformis, A. conoides and Paecilomyces lilacinus formulated for T. Semipenetrans. For, P. Jaehni were formulated Arthrobotrys robusta, A. oligospora, A. musiformis, Dactylella leptospora and Monacrosporium eudermatum. These fungi have been applied in doses of 1, 2, 4 and 6 liters of a formulation consisting of equal parts of mixing ...(Complete abstract, click electronic access below)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Twenty-nine isolates of Pochonia chlamydosporia were found in Meloidogyne infested-soils samples of vegetables crops from Viçosa (MG), Mariópolis (PR) and Venda Nova do Imigrante (ES). Among them, 65.52 % were identified as P. chlamydosporia var. chlamydosporia and 34.48 % as P. chlamydosporia var. catenulata. The potential of these isolates including four isolates from Alicante Spain, as biological control agents against Meloidogyne javanica on tomato plants was evaluated under greenhouse conditions. The isolates Pc-1, Pc-2, Pc-3, Pc-4, Pc-9, Pc-10, Pc-21, Pc-24, Pc-28 and Pc-64 were the most efficient in reducing the number of eggs of the nematode per root system. These isolates were re-evaluated and the most efficient were the Pc-64, originated from Alicante Spain, reducing 72.0 % the number of eggs and 10.4 % the number of galls, and the Pc-10, originated from Viçosa Brazil, reducing 60.0 % the number of eggs and 21.3 % the number of galls. The isolate Pc-10 was then used in the following experiments. When this isolate was added into the M. javanica infested-soil 7 days before the transplanting of the tomato seedlings, all chlamydospore rates (5,000, 10,000, 15,000, 20,000 or 25,000 per gram of soil) resulted in reduction of the number of eggs of M. javanica (up to 56 %), but no effect on the number the galls was observed. In the following experiment, the application of 5,000 chlamydospores/g of soil of the antagonist 15 days before the transplanting of tomato reduced in 82 % the number of eggs and in 50 % the number of galls per root system. In another experiment, the isolate Pc-10 of P. chlamydosporia was used with summer cover crops, pearl millet (Pennisetum americanum (L.) Leek) and suriname grass (Brachiaria decumbens Stapf), or winter cover crops, black oat (Avena strigosa Schreb) and oil radish (Raphanus sativus var. oliferus Metzg), for reducing Meloidogyne javanica population in the soil was studied under greenhouse conditions. The cover crops treatments, associated or not with P. chlamydosporia, reduced the root- knot nematode population. P. chlamydosporia Pc-10 alone did not reduce the number of galls or eggs of the nematode in the summer experiment. On the other hand, the fungus alone reduced the number of galls and eggs of M. javanica in the winter experiment. The isolates Pc-3, Pc-10 and Pc-19 promoted the growth of tomato seedlings on coconut fiber substrate, in vitro conditions. The fungal isolate Pc-19 colonized the rhizosphere of tomato plants and produced a large amount of chlamydospores after 15 days. Scanning microscopy revealed that the isolate Pc-10 colonized the rhizoplane of the tomato plants in this same period and the hyphae penetrated the epidermal cells. Vinte e nove isolados de Pochonia chlamydosporia foram obtidos de solos cultivados com olerícolas e naturalmente infestados com Meloidogyne spp. nos municípios de Viçosa (MG), Mariópolis (PR) e Venda Nova do Imigrante (ES). Desses isolados, 65,52 % foram identificados morfologicamente como P. chlamydosporia var. chlamydosporia e 34,48 % como P. chlamydosporia var. catenulata. Tais isolados, juntamente com mais quatro isolados de P. chlamydosporia provenientes da Universidade de Alicante, Espanha, foram avaliados quanto ao potencial de controle de Meloidogyne javanica, em casa de vegetação. Dos trinta isolados testados, os isolados Pc-1, Pc-2, Pc-3, Pc-4, Pc-9, Pc-10, Pc-21, Pc-24, Pc-28 e Pc-64 foram os mais eficientes na redução do número de ovos do nematóide por sistema radicular. Na reavaliação destes isolados, os mais eficientes foram o Pc-64, proveniente da Espanha, com redução no número de ovos e de galhas de 72 e 10,4 %, respectivamente, e o isolado Pc-10, de Viçosa, com redução de 60 % quanto ao número de ovos e de 21,3 % quanto ao número de galhas. O isolado Pc-10 foi utilizado para testes posteriores. Quando aplicado ao solo infestado com ovos de M. javanica, sete dias antes do plantio do tomate, esse isolado reduziu o número de ovos por sistema radicular quando comparado ao tratamento testemunha sem o fungo, mas não houve aumento da eficiência com o aumento da dose aplicada (5.000, 10.000, 15.000, 20.000 ou 25.000 clamidósporos/g de solo). A aplicação do fungo não reduziu o número de galhas por sistema radicular. No entanto, a aplicação deste isolado, na dose de 5.000 clamidósporos/g de solo, 15 dias antes do transplantio do tomateiro em solo infestado com o nematóide, proporcionou reduções de 50 e 82 % nos números de galhas e ovos, respectivamente. Além disso, o isolado Pc-10 de P. chlamydosporia foi aplicado ao solo cultivado com plantas de cobertura de solo de verão ou de inverno para redução da população de M. javanica, em casa de vegetação. O cultivo das plantas de cobertura de solo, tanto de verão como de inverno, em associação ou não com P. chlamydosporia, promoveu reduções significativas na população de M. javanica. No ensaio com as plantas de verão, a aplicação de P. chlamydosporia var. chlamydosporia Pc-10 nos solos em pousio (solo nu) ou em cultivo sucessivo com tomateiro, não reduziu o número de galhas ou de ovos quando comparado com suas respectivas testemunhas. No entanto, no ensaio com as plantas de inverno, o antagonista reduziu o número de galhas nesses tratamentos bem como o número de ovos no tratamento pousio solo nu. Os isolados Pc-3, Pc-10 e Pc-19 promoveram o crescimento de plântulas de tomate quando crescidas em substrato de fibra de coco colonizado. A análise em microscópio óptico das raízes de plântulas de tomate crescidas em substrato com P. chlamydosporia var. chlamydosporia Pc-19 permitiu observar que o fungo colonizou a rizosfera das plântulas em apenas 15 dias e produziu uma grande quantidade de clamidósporos. A análise em microscopia de varredura do isolado Pc-10 permitiu constatar que este isolado, além de colonizar o rizoplano das plantas, também penetra nas células epidermais da raiz de tomate.

A viabilidade de uma formulação do fungo Monacrosporium sinense foi avaliada no controle de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Dois grupos de 10 bezerros cada um, mestiços Holandês x Zebu, de seis a nove meses de idade, foram colocados em pastagem de Brachiaria brizantha. Em um dos grupos, cada animal recebeu 20g de péletes em matriz de alginato de sódio, contendo massa miceliana do fungo M. sinense via oral, duas vezes por semana, durante seis meses, com início no mês de outubro; no outro grupo, controle, os bezerros não receberam esse tratamento. As contagens de ovos por grama de fezes (OPG) e de larvas infectantes por kg de matéria seca foram maiores (P

Scutellonema bradys (Steiner & LeHew) Andrassy is the most important yam nematode in the State of Bahia, Brazil, being responsible for the decay of yam tubers, known as dry rot disease. Nematode-trapping fungi are potential biocontrol agents against plant parasitic nematodes. The in vitro predatory ability of Arthrobotrys musiformis Drechsler and Monacrosporium thaumasium Drechsler on S. bradys was evaluated. The fungi were grown in PDA medium, than transferred to the center of Petri dishes with 2% agar plus water. After 14 days of the fungal cultures incubation, 150 nematodes were added to the dishes. For a period of 5 days, at 24-hour intervals, the number of captured nematodes was counted. Both fungi formed trapping structures of single ring and three-dimensional adhesive network types, 24 hours after the addition of the nematodes to the fungal cultures. The percentage of nematodes captured by each fungus increased linearly with time, reaching 94.6% and 97.3% of captured nematodes by A. musiformis and M. thaumasium, respectively, at the fifth day of evaluation. Both fungi presented good predatory ability upon S. bradys. This is the first report of nematophagous fungi capturing S. bradys. Further studies should evaluate the potential of these fungi as biocontrol agents of S. bradys in yam plantations. Scutellonema bradys (Steiner & LeHew) Andrassy é o nematóide mais importante da cultura do inhame (Dioscorea cayennensis Lam.) no Estado da Bahia, Brasil, responsável pela necrose superficial das túberas, conhecida como casca preta do inhame. Os fungos nematófagos são potenciais agentes de biocontrole contra nematóides fitoparasitos. A atividade predatória de Arthrobotrys musiformis Drechsler a S. bradys foi avaliada in vitro. Os fungos foram multiplicados em meio BDA durante 15 dias, transferidos para o centro de placas de Petri contendo 2% de agar-água e após 14 dias de incubação, foram adicionados 150 nematóides. Durante cinco dias, em intervalos de 24 horas, foi quantificado o número de nematóides capturados pelos fungos. Ambos os fungos formaram estruturas de captura do tipo anéis simples e malha adesiva tri-dimensional, 24 horas após a infestação das placas com S. bradys. A percentagem de nematóides capturados por cada fungo aumentou linearmente com o tempo, atingindo 94,6% e 97,3% de captura por A. musiformis e M. thaumasium, respectivamente, no quinto dia de avaliação. Ambos os fungos apresentaram boa capacidade predatória sobre S. bradys. Esse é o primeiro relato de fungos nematófagos capturando S. bradys. Estudos futuros deverão avaliar o potencial destes agentes de biocontrole como alternativa para o controle de S. bradys em plantios de inhame.

Este trabalho objetivou avaliar, in vitro e in vivo, o fungo predador Arthrobotrys musiformis, administrado via oral na forma de conídios microencapsulados em alginato ou in natura em meio líquido, após passagem pelo trato gastrintestinal de ovinos. No teste in vitro, avaliou-se a manutenção da atividade predatória, e no teste in vivo, a capacidade de controlar nematóides parasitos de ovinos naturalmente infectados, mantidos em pastagens. O resultado do teste in vitro confirmou a viabilidade de A. musiformis (95,5%), mesmo após a passagem pelo trato gastrintestinal. Na avaliação in vivo, não houve diferença estatística entre o número de ovos por grama de fezes dos grupos tratados e controle, provavelmente em razão da baixa lotação dos piquetes, da quantidade e periodicidade insuficientes de oferecimento de conídios aos ovinos, o que teria proporcionado dispersão e migração das larvas na pastagem. Contudo, os helmintos recuperados na necropsia dos animais traçadores mostraram que A. musiformis reduziu em 50,9% e 57,6% o número de Trichostrongylus colubriformis dos grupos tratados com conídios microencapsulados e in natura, respectivamente, e em 95% o número de L4 de Haemonchus do grupo tratado com conídios in natura. Embora os resultados não sejam conclusivos, A. musiformis mostrou-se promissor agente no biocontrole de nematóides parasitos gastrintestinais. The objective of the present study was to assess in vitro and in vivo the predatory fungus Arthrobotrys musiformis administered orally, in the form of alginate-microencapsulated conidia, or in natura in liquid medium after passage through the gastrointestinal tract of sheep. Maintenance of the predatory activity of the fungus was evaluated in the in vitro test, and its ability to control parasitic nematodes in naturally infested sheep maintained on pastures was analyzed in the in vivo test. The result of the in vitro test confirmed the viability of A. musiformis (95.5%) even after passage through the gastrointestinal tract. In vivo analysis revealed no difference in the number of eggs per gram between treated and control groups, probably because of the low crowding of the corrals, the insufficient amount and interval time of conidial supplying, permitting dispersal and migration of the larvae in the pasture. However, helminths recovered at autopsy from the tracer animals showed that A. musiformis reduced 50.9% and 57.6% the number of Trichostrongylus colubriformis in the groups treated with microencapsulated conidia and conidia in natura, respectively, and 95% the number of L4 larvae of Haemonchus in the group treated with conidia in natura. Despite the inconclusiveness of the results, A. musiformis was considered a promising agent in the biocontrol of gastrintestinal parasitic nematodes.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:46:52Z No. of bitstreams: 1 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:46:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) Previous issue date: 2005-09-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T17:56:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) S0100-204X2005000900013.pdf.txt: 30178 bytes, checksum: 0a1cfcf78027f182859c7b199c681a27 (MD5) Previous issue date: 2005-09-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:16:13Z No. of bitstreams: 2 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) S0100-204X2005000900013.pdf.txt: 30178 bytes, checksum: 0a1cfcf78027f182859c7b199c681a27 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:16:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-204X2005000900013.pdf: 67758 bytes, checksum: d74c54400eab68f185c88fb24c1a266d (MD5) S0100-204X2005000900013.pdf.txt: 30178 bytes, checksum: 0a1cfcf78027f182859c7b199c681a27 (MD5) Previous issue date: 2005-09-01 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Este trabalho objetivou avaliar, in vitro e in vivo, o fungo predador Arthrobotrys musiformis, administrado via oral na forma de conídios microencapsulados em alginato ou in natura em meio líquido, após passagem pelo trato gastrintestinal de ovinos. No teste in vitro, avaliou-se a manutenção da atividade predatória, e no teste in vivo, a capacidade de controlar nematóides parasitos de ovinos naturalmente infectados, mantidos em pastagens. O resultado do teste in vitro confirmou a viabilidade de A. musiformis (95,5%), mesmo após a passagem pelo trato gastrintestinal. Na avaliação in vivo, não houve diferença estatística entre o número de ovos por grama de fezes dos grupos tratados e controle, provavelmente em razão da baixa lotação dos piquetes, da quantidade e periodicidade insuficientes de oferecimento de conídios aos ovinos, o que teria proporcionado dispersão e migração das larvas na pastagem. Contudo, os helmintos recuperados na necropsia dos animais traçadores mostraram que A. musiformis reduziu em 50,9% e 57,6% o número de Trichostrongylus colubriformis dos grupos tratados com conídios microencapsulados e in natura, respectivamente, e em 95% o número de L4 de Haemonchus do grupo tratado com conídios in natura. Embora os resultados não sejam conclusivos, A. musiformis mostrou-se promissor agente no biocontrole de nematóides parasitos gastrintestinais. The objective of the present study was to assess in vitro and in vivo the predatory fungus Arthrobotrys musiformis administered orally, in the form of alginate-microencapsulated conidia, or in natura in liquid medium after passage through the gastrointestinal tract of sheep. Maintenance of the predatory activity of the fungus was evaluated in the in vitro test, and its ability to control parasitic nematodes in naturally infested sheep maintained on pastures was analyzed in the in vivo test. The result of the in vitro test confirmed the viability of A. musiformis (95.5%) even after passage through the gastrointestinal tract. In vivo analysis revealed no difference in the number of eggs per gram between treated and control groups, probably because of the low crowding of the corrals, the insufficient amount and interval time of conidial supplying, permitting dispersal and migration of the larvae in the pasture. However, helminths recovered at autopsy from the tracer animals showed that A. musiformis reduced 50.9% and 57.6% the number of Trichostrongylus colubriformis in the groups treated with microencapsulated conidia and conidia in natura, respectively, and 95% the number of L4 larvae of Haemonchus in the group treated with conidia in natura. Despite the inconclusiveness of the results, A. musiformis was considered a promising agent in the biocontrol of gastrintestinal parasitic nematodes. Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Dep. de Produção Vegetal Unesp FCAV Centro de Pesquisas em Sanidade Animal Unesp FCAV Dep. de Patologia Veterinária Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Dep. de Produção Vegetal Unesp FCAV Centro de Pesquisas em Sanidade Animal Unesp FCAV Dep. de Patologia Veterinária

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:59:28Z No. of bitstreams: 1 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:59:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) Previous issue date: 2004-08-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:56:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) S0103-84782004000400043.pdf.txt: 12399 bytes, checksum: 865b26bba6a695839af2abd458d0bf22 (MD5) Previous issue date: 2004-08-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:14:36Z No. of bitstreams: 2 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) S0103-84782004000400043.pdf.txt: 12399 bytes, checksum: 865b26bba6a695839af2abd458d0bf22 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:14:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0103-84782004000400043.pdf: 93279 bytes, checksum: 4a70e7f567b6d935d642d51ad5c738f9 (MD5) S0103-84782004000400043.pdf.txt: 12399 bytes, checksum: 865b26bba6a695839af2abd458d0bf22 (MD5) Previous issue date: 2004-08-01 O nematóide reniforme (Rotylenchulus reniformis) é um importante patógeno de importantes culturas brasileiras, tais como soja, algodão, feijão, caupi, maracujazeiro, mamoeiro, tomate e alface, entre outras. Dentre os fungos nematófagos com potencial de utilização comercial como agentes do controle biológico de nematóides, destacam-se espécies do gênero Monacrosporium. No presente estudo, avaliou-se, in vitro, a capacidade predatória e de parasitismo de Monacrosporium robustum ao nematóide reniforme. em períodos de 24, 48 e 72 horas após, constatou-se que a percentagem de predação do nematóide pelo fungo foi de, respectivamente, 81,3, 99,9 e 100. The reniform nematode (Rotylenchulus reniformis) is an important pathogen of many of the most important Brazilian crops such as soybean, cotton, beans, cowpea, passiflora, papaya, tomato, lettuce, among others. Among the nematophagous fungi with potential of commercial utilization as agents of biological control of nematodes are the species of Monacrosporium.The predatory capacity of Monacrosporium robustum to the reniform nematode was evaluated in vitro. The percentage of predatism was 81.3%, 99.9% and 100% at 24, 48 and 72h, respectively, after inoculation. Universidade Estadual de São Paulo FCAV Departamento de Fitossanidade

The viability of a formulation of the fungus Monacrosporium thaumasium associated with ivermectin was evaluated for the biological control of bovine gastrointestinal nematode parasites. Four groups of five calves each were placed in pastures with a stocking rate of 1.6 animal/hectare. In group 1 (control), the calves did not receive any treatment. In group 2, each animal received 20g of pellets of M. thaumasium orally twice a week during a six-month period that began with the onset of the rainy season (October 23, 2000). In group 3, each animal received 20g of pellets of M. thaumasium orally twice a week during the same period as 2, as well as two strategic treatments with ivermectin (200 mcg/kg) on May 10, 2001 and July 5, 2001. In group 4, the animals were treated with ivermectin alone as described for group 3. EPG counts for group 1 were significantly greater (P< 0.01) than those for groups 2 and 3 and the difference at the end of the study period was near 100%. The EPGs of group 4 animals remained high until the first strategic treatment with ivermectin. Values for groups 1 and 4 differed significantly (P< 0.05) from those of groups 2 and 3 from December 2000 onwards. It was concluded that the use of this dose and periodicity of application of M. thaumasium pellets makes the application of anthelminthic treatments unnecessary. A viabilidade de uma formulação do fungo Monacrosporium thaumasium associada com ivermectina foi avaliada no controle biológico de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Quatro grupos de cinco bezerros foram colocados em pastagens com uma taxa de lotação de 1,6 animal/hectare. No grupo 1 (controle), os bezerros não receberam nenhum tratamento. No grupo 2, cada animal recebeu 20 g de pellets de M. thaumasium, via oral, duas vezes por semana e durante um período de seis meses que começou na estação chuvosa (23 de outubro, 2000). No grupo 3, cada animal recebeu 20g de pellets de M. thaumasium, via oral, duas vezes por semana e durante o mesmo período do grupo 2, assim como dois tratamentos estratégicos com ivermectina (200 mcg/kg) em 10 de maio de 2001 e em 5 de julho de 2001. No grupo 4, os animais foram tratados somente com ivermectina como descrito no grupo 3. As contagens de OPG dos animais do grupo 1 foram significativamente maiores (P< 0,01) do que os animais dos grupos 2 e 3 e a diferença no final do experimento foi próxima de 100%. Os OPGs dos animais do grupo 4 permaneceram altos até o primeiro tratamento estratégico com ivermectina. Os resultados do grupo 1 e 4 diferiram significativamente (P< 0,05) daqueles dos grupos 2 e 3 a partir de dezembro de 2000. Concluiu-se que a aplicação de pellets de M. thaumasium nesta dosagem e periodicidade de aplicação tornaram os tratamentos anti-helmínticos desnecessários.