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Por un lado, la reducción de la formación de biopelícula en la cepa mutante en Psl de PssUMAF0158 incrementa la virulencia en foliolos de tomate, tal y como se había descrito previamente para el polisacárido celulosa. Por otro lado, la reducción de la formación de biopelícula en la cepa mutante en Psl de PcPCL1606 tiene un impacto negativo sobre la efectividad de la actividad de biocontrol frente a la podredumbre blanca radicular del aguacate causada por el hongo fitopatógeno Rosellinia necatrix. La fibra de tipo amiloide Fap, la cual es producida por PcPCL1606 pero no por PssUMAF0158, no posee un papel relevante en la formación de biopelículas in vitro, pero sí ha mostrado tener un papel en adhesión temprana a superficies de tipo abiótico y biótico y en la eficacia de la actividad de control biológico en el sistema mencionado. Adicionalmente, en esta tesis doctoral se ha demostrado que la temperatura y la luz influyen en la producción de polisacáridos en las cepas de P. syringae pv. syringae y, por lo tanto, que esta bacteria puede modular la formación de biopelículas en respuesta a factores ambientales. La formación de biopelículas ha mostrado ser una característica relevante de la bacteria fitopatógena Pseudomonas syringae pv. syringae y del agente de control biológico Pseudomonas chlororaphis durante la interacción con plantas. Un análisis genómico comparativo reveló que los polisacáridos alginato y Psl, así como la fibra de tipo amiloide Fap, relevantes para la formación de biopelículas en otras Pseudomonas, podrían ser componentes de la matriz extracelular de Pseudomonas syringae pv. syringae UMAF0158 (PssUMAF0158), agente causal de la necrosis apical del mango, y/o del agente de biocontrol Pseudomonas chlororaphis PCL1606 (PcPCL1606). A diferencia del polisacárido alginato, el polisacárido Psl sólo ha sido estudiado en Pseudomonas aeruginosa, a pesar de que la región genómica que lo codifica está presente en varias cepas de pseudomonas asociadas a plantas, incluidas PssUMAF0158 y PcPCL1606. Los resultados obtenidos han mostrado que el polisacárido alginato no desempeña un papel esencial para la formación de biopelículas en estos dos modelos de estudio, como se había descrito previamente en P. aeruginosa. El clúster génico de tipo psl de la cepa PssUMAF0158 está presente en todos los filogrupos del complejo P. syringae que están asociados a plantas. Sin embargo, la presencia del clúster génico de tipo psl de la cepa PcPCL1606 dentro del complejo Pseudomonas fluorescens es más variable, aunque está presente en todas las cepas del filogrupo P. chlororaphis que se han analizado. Estudios de formación de biopelículas y virulencia en PssUMAF0158 y de formación de biopelículas y actividad de biocontrol en PcPCL1606 con las cepas silvestres y mutantes afectados en la producción de Psl han revelado que este polisacárido es un componente de la matriz extracelular de estas cepas con un papel importante para la formación de biopelículas y la ecología bacteriana.

Comunicación congreso The Psl polysaccharide has only been studied in Pseudomonas aeruginosa, and its role in bacteria that interact with plants is still unknown. On the one hand, P. syringae is a model of study of plant-pathogen interactions. On the other hand, P. chlororaphis is a biocontrol agent of plant-fungal diseases, as the white root rot caused by Rosellinia necatrix. In silico analysis have let us identify in both species a genomic region which is ortholog to the Psl-encoding region of P. aeruginosa PAO1. We constructed mutants of this region in both strains and analysed its phenotype in biofilm formation, both in static microwell plates and dynamic flow-cell chamber experiments. The results revealed a different and an important role of this polysaccharide in the biofilm architecture of both strains. Furthermore, in P. syringae this Psl-like polysaccharide has a very important role in swarming motility. All these striking phenotypes led us further study the implication of this polysaccharide in the lifestyles of both models of plant-bacteria interaction. Universidad de Málaga. Campus de Excelencia Internacional Andalucía Tech. AGL2017-83368-C2-1-R

Las bacterias pertenecientes al género Pseudomonas constituyen un modelo de estudio de la interacción microorganismo-planta. Pseudomonas syringae es una especie que produce enfermedades en la parte aérea de algunas plantas. Por otro lado, Pseudomonas chlororaphis interacciona con la raíz y ha demostrado ser un agente de control biológico. Ambas especies forman biopelículas y, a pesar de su diferente estilo de vida, análisis in silico han puesto de manifiesto la existencia de regiones genómicas tanto comunes como diferenciales que parecen estar implicadas en la biosíntesis de matriz extracelular. En este trabajo se han construido mutantes de estas regiones y analizado su implicación en la formación de biopelícula y aspectos relacionados. Universidad de Málaga. Campus de Excelencia Internacional Andalucía Tech. Este trabajo ha sido financiado por el Proyecto de Excelencia de la CICE, Junta de Andalucía (P12-AGR-1473) y el Proyecto del Plan Nacional I+D+I MINECO (AGL2017-83368-C2-l-R), cofinanciados ambos con fondos FEDER. Zaira María Heredia está financiada por un contrato del programa FPU del Ministerio de Educación (referencia FPU15/03644).