Search

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Agrobiología. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Maestría en Ciencias Biológicas In vitro antagonistic capacity of a strain of Trichoderma atroviride (CMU-08) against different phytopathogens was evaluated in this study, through assays of confrontation in dual cultures, of inhibition by volatile compounds and antibiosis using malt extract agar (AEM), potato-dextrose agar (PDA) and Vogel minimum media (MMV). The antagonism of strain CMU-08 towards Fusarium sp. in confrontation assays was Type 1 in the three culture media, in the case of Colletotrichum gloeosporioides the greatest inhibition was through the production of volatile metabolites, being 92.8% in MMV. Phytophthora cinnamomi, was efficiently antagonized by confrontation and antibiosis with 70.2% inhibition in MMV; volatile inhibition for Botrytis cinerea was 67.0% in AEM. No basal activity of β-1,3 glucanase and chitinase of the CMU-08 strain of T. atroviride was found in basal condition using minimal Vogel (MMV) and induction medium in MMV supplemented with cell walls. The activity of β-1,3 glucanase induced by cell walls (0.5% w / v) of B. cinerea (Bc) reached maximum (484.1 ± 223.9 U / μL) at 18 h of incubation, while in the presence of Fusarium sp. (Fsp) showed the maximum (721.0 ± 53.1 U / μL) at 12 h.Chitinase activity in medium supplemented with Bc and Fsp cell walls was detected from six hours of incubation, reaching the maximum in both cases, with 1625.6 (± 803.4) U / μL and 2671.3 (± 542.9) U / μL, respectively. In dual cultures it was observed that the three chitinase genes, ech42, chit33 and chit36, as well as the gluc18 gene encoding an endoglucanase are expressed during and after the contact of CMU-08 with Fusarium sp. The expression of these genes is greater after contact with the phytopathogen. En el presente trabajo se evaluó la capacidad antagónica in vitro de una cepa de Trichoderma atroviride (CMU-08) contra distintos fitopatógenos, mediante ensayos de confrontación en cultivos duales, de inhibición por compuestos volátiles y antibiosis empleando agar extracto de malta (AEM), agar papa-dextrosa (PDA) y medio mínimo Vogel (MMV). El antagonismo de la cepa CMU-08 hacia Fusarium sp. en los ensayos de confrontación en los tres medios de cultivo fue Tipo 1, en el caso de Colletotrichum gloeosporioides se encontró la mayor inhibición a través de la producción de metabolitos volátiles, siendo de 92.8% en MMV. T. atroviride antagonizó eficientemente mediante confrontación y antibiosis a Phytophthora cinnamomi, con 70.2% de inhibición en MMV; la inhibición por volátiles para Botrytis cinerea fue de 67.0% en AEM. No se encontró actividad basal de β-1,3 glucanasa y quitinasa de la cepa CMU-08 de T. atroviride en condición basal empleando medio mínimo Vogel (MMV) y de inducción en MMV suplementado con paredes celulares. La actividad de β-1,3 glucanasa inducida por paredes celulares (0.5% p/v) de B. cinerea (Bc) alcanzó el máximo (484.1±223.9 U/μL) a las 18 h de incubación, mientras que en presencia de paredes celulares de Fusarium sp. (Fsp) mostró el máximo (721.0±53.1 U/μL) a las 12 h. La actividad de quitinasa en medio suplementado con paredes celulares de Bc y Fsp se detectó desde las seis horas de incubación, alcanzando ahí el máximo en ambos casos, con 1625.6 (±803.4) U/μL y 2671.3 (±542.9) U/μL, respectivamente. En cultivos duales se observó que los tres genes de quitinasas, ech42, chit33 y chit36, así como el gen gluc18, codificante de una endoglucanasa se expresan durante y después del contacto de CMU-08 con Fusarium sp. La expresión de estos genes es mayor después del contacto con el fitopatógeno.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Agrobiología. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Maestría en Ciencias Biológicas Family agriculture is an agricultural system that is practiced in rural areas of the country. This is commonly practiced for self-consumption in family settings where all members participate as the work force. Family agriculture is a common practice in more than 90% of the farmland in Michoacan, where corn is the main agricultural crop. Fungal genres such as Aspergillus and Penicillium are frequently found in corn warehouses causing damage to the seeds integrity and probably, producing mycotoxins, such as ochratoxin A (OTA). As a consequence, the producers’ health can be affected and they can face serious economic losses. The aims of this study were to analyze the identity of the fungal species found in corn warehouses of producers practicing family agriculture, if the fungi affect the physical and physiological quality of the corn seeds, to determine contamination of the seeds by OTA and finally, to compare the common storage device of producers against a validated system by FAO. Fungi found in the location storage devices were from the genres Aspergillus, Fusarium and Penicillium, especially Aspergillus flavus and Fusarium verticilloides, which are fungal species known for being mycotoxigenic. The corn varieties here studied were resistant to fungal damage and had a high percentage of germination and vigor. OTA was present in all samples analyzed and the production of OTA by the fungal strains isolated from the corn samples was confirmed under laboratory conditions. The isolates that produced OTA in the culture media were: two from Aspergillus, one from Penicillium and one from Talaromyces. The validated storage device produced better results in terms of protecting the seeds from fungal damage and that they had higher percentage of germination and vigor; however, when the results were compared with the local storage devices, not significant statistical differences were found. Corn seeds from the local storage device contained a greater number of fungal species then the validated device. La agricultura familiar es un sistema agrícola practicado en zonas rurales del país, asociado al auto consumo de los productos agrícolas donde los miembros de la familia fungen como la principal fuerza de trabajo. En Michoacán este sistema se presenta en el 90% de los municipios, siendo el maíz el principal producto cultivado. Especies fúngicas pertenecientes a los géneros Aspergillus y Penicillium se presentan en los almacenes de maíz dañando los granos y contaminándolos con micotoxinas como la ocratoxina A (OTA), exponiendo la salud de los consumidores y provocando pérdidas económicas. Los objetivos de este estudio fueron: analizar la identidad de los hongos asociados a los almacenes de maíz de productores familiares del estado de Michoacán; conocer cómo afectan la calidad física y fisiológica de los granos almacenados, determinar la presencia de Ocratoxina A y comparar los sistemas de almacenamiento locales contra un sistema de almacenamiento validado internacionalmente. Los principales hongos encontrados en los almacenes pertenecen a los géneros Aspergillus, Fusarium y Penicillum; se encontró presencia de Aspergillus Flavus y Fusarium verticilloides, productores de micotoxinas. Las variedades de maíz utilizadas presentaron resistencia al daño y porcentajes de germinación y vigor altos. OTA se determinó en el 100% de las muestras analizadas y se logró confirmar la producción de OTA en condiciones de laboratorio por dos aislados de Aspergillus, uno de Penicillium y un aislado del genero Talaromyces. El sistema de almacenamiento validado obtuvo incidencias de hongos, daños y presencia de OTA menores, así como valores altos de germinación y vigor; sin embargo, las diferencias no fueron significativas estadísticamente. Los granos provenientes de almacenes locales tuvieron incidencias altas de hongos ocratoxigénicos, así como otras especies de importancia agronómica causantes de problemáticas en el almacenamiento y producción de micotoxinas.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Agrobiología. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Maestría en Ciencias Biológicas In this work, fungal species were isolated from three different compartments of a sorghum agroecosystem. Trichoderma spp were isolated: three from leaf tissue, two from root and seven in soil. They were identified by PCR, foliar tissue was identified at T. lixii/H. lixii; in root to T. lixii and T. atroviride and in soil to T. harzianum and T. virens. A strain from each compartment was randomly selected to assess its antagonistic potential against relevant phytopathogens: Fusarium mexicanum (FM), F. pseudocircinatum (FP), Fusarium sp. (FU), Colletotrichum acutatum (CA), C. coccodes (CC), C. gloesporoides de Morelia (CG1), C. gloesporoides de Uruapan (CG2), Phytophthora capsici (PCA), P. cinnamomi de Atécuaro (PC1) and P. cinnamomi de Uruapan (PC2). The level of antagonism was classified according to Bell et al. (1982). Results of the dual culture trials: strains T5HD (leaf tissue) and T4RB (root) class 1 versus FM. T5HD, T4RB and 2T22G (ground) versus CC and CG2, class 1; strains T5HD and 2T22G class 1 against CA and T4RB class 1 against CG1, T5HD, TARB and 2T22G class 1 against PCA, PC1 and PC2. In the Inhibition assays by soluble secondary metabolites (MSS) and by volatile (MSV), they were classified according to Worasatit et al. (1994). The results of MSS inhibition are: 2T22G class 1 against FM, T5HD and 2T22G class 1 against FU. T5HD and 2T22G class 1 against AC, 2T22G class 1 against CC. The three strains evaluated against PCA, PC1 and PC2, class 1. Inhibition by MSV are: class 2 T4RB and 2T22G against FM and FP. T4RB class 2 against tested Colletotrichum species. T4RB class 1 vs. PC1 and PC2. The isolated 2T22G soil strain presented the best antagonistic potential. En este trabajo se aislaron especies fúngicas de tres compartimentos diferentes de un agroecosistema de sorgo. Se aislaron Trichoderma spp: tres de tejido foliar, dos de raíz y siete en suelo. Se identificaron por PCR, tejido foliar se identificó a T. lixii/H. lixii; en raíz a T. lixii y T. atroviride y en suelo a T. harzianum y T. virens. Se seleccionó al azar, una cepa de cada compartimento para evaluar su potencial antagónico frente a fitopatógenos de relevancia: Fusarium mexicanum (FM), F. pseudocircinatum (FP), Fusarium sp. (FU), Colletotrichum acutatum (CA), C. coccodes (CC), C. gloesporoides de Morelia (CG1), C. gloesporoides de Uruapan (CG2), Phytophthora capsici (PCA), P. cinnamomi de Atécuaro (PC1) y P. cinnamomi de Uruapan (PC2). Se clasificó el nivel de antagonismo según Bell et al. (1982). Resultados de los ensayos de cultivo dual: las cepas T5HD (tejido foliar) y T4RB (raíz) clase 1 frente a FM. T5HD, T4RB y 2T22G (suelo) frente a CC y CG2, clase 1; las cepas T5HD y 2T22G clase 1 frente a CA y T4RB clase 1 frente a CG1, T5HD, TARB Y 2T22G clase 1 frente a PCA, PC1 y PC2. En los ensayos de Inhibición por metabolitos secundarios solubles (MSS) y por volátiles (MSV), se clasificaron según Worasatit et al. (1994). Los resultados de inhibición por MSS son: 2T22G clase 1 frente a FM, T5HD Y 2T22G clase 1 frente a FU. T5HD y 2T22G clase 1 frente a CA, 2T22G clase 1 frente a CC. Las tres cepas evaluadas frente a PCA, PC1 y PC2, clase 1. Inhibición por MSV son: clase 2 T4RB y 2T22G frente a FM y FP. T4RB clase 2 contra las especies de Colletotrichum probadas. T4RB clase 1 frente a PC1 y PC2. La cepa aislada de suelo 2T22G, presentó el mejor potencial antagónico.