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Immune thrombocytopenia (ITP) is a rare autoimmune disease due to autoantibodies targeting platelet glycoproteins (GP). The mechanism of platelet destruction could differ depending on the specificity of antiplatelet antibodies: anti-GPIIb/IIIa antibodies lead to phagocytosis by splenic macrophages, in a Fc&gamma, receptor (Fc&gamma, R)-dependent manner while anti-GPIb/IX antibodies induce platelet desialylation leading to their destruction by hepatocytes after binding to the Ashwell&ndash, Morell receptor, in a Fc&gamma, R-independent manner. Considering the Fc&gamma, R-dependent mechanism of action of intravenous immunoglobulins (IVIg), we assumed that the response to IVIg could be less efficient in the presence of anti-GPIb/IX antibodies. We conducted a multicentric, retrospective study including all adult ITP patients treated with IVIg who had antiplatelet antibodies detected between January 2013 and October 2017. Among the 609 identified, 69 patients were included: 17 had anti-GPIb/IX antibodies and 33 had anti-GPIIb/IIIa antibodies. The response to IVIg was not different between the patients with or without anti-GPIb/IX (88.2% vs. 73.1%). The response to IVIg was better in the case of newly diagnosed ITP (odds ratio (OR) = 5.4 (1.2&ndash, 24.7)) and in presence of anti-GPIIb/IIIa (OR = 4.82 (1.08&ndash, 21.5)), while secondary ITP had a poor response (OR = 0.1 (0.02&ndash, 0.64)). In clinical practice, the determination of antiplatelet antibodies is therefore of little value to predict the response to IVIg.

Introduction Malgre les progres de l’imagerie vasculaire, l’analyse histologique de biopsie d’artere temporale (BAT) reste l’examen de reference pour le diagnostic d’arterite a cellules geantes (ACG) [1] . Cependant, la BAT presente un certain nombre de limites - manque de sensibilite (50-85 %), caractere invasif, ou encore cout en temps et en personnel - si bien que des methodes d’imagerie des arteres temporales se developpent pour montrer des signes de vascularite (echo-Doppler, IRM, TEP scanner) [2] . Couramment utilisee en ophtalmologie clinique pour l’imagerie non invasive de coupes retiniennes, la tomographie de coherence optique (abregee OCT pour optical coherence tomography) exploite l’interference lumineuse comme principale source d’information pour l’observation des milieux biologiques. Nous rapportons pour la premiere fois son utilisation dans un montage haute resolution - l’OCT plein champ [3] - pour le diagnostic d’ACG, en comparaison de l’histologie conventionnelle. Materiels et methodes Des coupes congelees de 16 BAT ont ete analysees en OCT plein champ (Light-CTScanner, LLTech SAS, Paris, France). Apres coloration HES, les BAT etaient classees en 3 groupes: BAT negative sans hyperplasie intimale (n = 9), BAT negative avec hyperplasie intimale (n = 3) et BAT positive (n = 4). Une double analyse qualitative et quantitative des images obtenues en histologie (NDP.view2), puis OCT plein champ (ImageJ), a ensuite permis de confronter les deux techniques pour la visualisation ex vivo des modifications structurales de l’architecture de la paroi arterielle au cours de l’ACG. Enfin, l’application d’un filtre de Gabor a ete utilisee dans le but de cartographier l’orientation structurale comparee des fibres au sein de la paroi arterielle et ainsi tester l’hypothese d’une possible analyse automatisee des images acquises avec le systeme d’OCT plein champ. Resultats Les donnees acquises en OCT plein champ ont permis de visualiser les structures anatomiques presentes au sein de la paroi arterielle avec une resolution spatiale autorisant la detection d’une cellule unique: individualisation des trois tuniques (intima, media, adventice), limitante elastique interne (LEI) et vasa vasorum. La symetrie circulaire, la LEI et l’architecture de la paroi vasculaire etaient parfaitement conservees pour les 12 BAT negatives. En analyse quantitative, il existait une excellente correlation entre histologie conventionnelle et OCT plein champ pour la mesure de l’epaisseur des differentes tuniques, ce qui a permis de distinguer sans difficultes les BAT negatives avec ou sans hyperplasie intimale. Appuyee par l’application du filtre de Gabor et l’analyse d’image automatisee, l’observation des 4 BAT positives en OCT plein champ a montre une perte de la symetrie circulaire, avec homogeneisation des contrastes entre media et intima. Ce remodelage structural s’associait a une densification du tissu conjonctif qui s’etendait dans les trois directions de l’espace et finissait par effacer les contours de la LEI. Discussion Cette etude de preuve de concept rapporte la premiere utilisation de l’OCT plein champ pour le diagnostic histopathologique d’ACG. Ainsi, en quelques minutes seulement et sans traitement prealable de l’echantillon apres BAT, cette technique interferometrique hautement resolue permet l’acquisition directe de sections optiques transverses ex vivo, puis l’identification automatisee d’anomalies structurales caracteristiques d’ACG. Il devient notamment aise, meme pour des cliniciens non-inities au montage d’OCT plein champ, de retrouver des lesions elementaires d’ACG - remodelage structural de la paroi arterielle avec hyperplasie intimale et rupture de LEI - tres proches de celles observees en histologie apres colorations standards. Conclusion L’imagerie optique d’artere temporale par OCT plein champ constitue une alternative de choix pour le diagnostic rapide et automatise d’ACG. Des travaux complementaires sont en cours pour confirmer le potentiel de cette technologie et son application future.

Introduction L’arterite a cellules geantes (ACG) est une vascularite granulomateuse affectant les arteres de gros calibres dont le diagnostic repose sur l’association de signes cliniques et d’une preuve de vascularite apportee par la biopsie d’artere temporale (BAT) et/ou les donnees de l’imagerie. Les cellules musculaires lisses (CML) presentes dans la media jouent un role majeur dans la physiopathologie de cette vascularite. En presence d’interferon-gamma (IFN-γ) produit par les lymphocytes Th1 infiltrant la paroi arterielle, les CML secretent des chimiokines aboutissant au recrutement de lymphocytes T (LT) et de monocytes dans la paroi vasculaire. L’objectif de notre travail etait d’etudier les interactions entre CML, myofibroblastes (MF) et LT au sein des arteres de patients atteints d’ACG. Materiels et methodes Depuis novembre 2017, un fragment des BAT realisees dans notre centre etait envoye au laboratoire le jour meme a l’etat frais. Le phenotype des cellules de la paroi vasculaire etait analyse par microscopie confocale (microscope Leica TCS SP8). Des fragments de BAT negatives ont ete mis en culture ex vivo dans une matrice (MATRIGEL) afin de generer des cellules vasculaires qui ont ete analysees par immunofluorescence, cytometrie en flux et RT-PCR. [1] Leur proliferation a ete evaluee par impedancemetrie (iCELLigence system). Ces cellules vasculaires ont ete traitees ou non par IFN-γ (100 ng/mL) et TNF-α (40 ng/mL) ou interleukine-6 (IL-6) (10 ng/mL) et recepteur soluble de l’IL-6 (IL-6Rs) (100 ng/mL) pendant 72 heures puis cultivees seules ou en presence de cellules mononucleees (PBMC) pendant 7 jours. Les PBMC et les cellules vasculaires ont ensuite ete separees par traitement a l’EDTA et analysees par cytometrie en flux. Le logiciel FlowJo etait utilise l’analyse des donnees de cytometrie en flux. L’expression des ARNm des genes etudies en RT-PCR etait exprimee en unite arbitraire en reference a l’expression du gene GusB. Les resultats etaient exprimes en mediane et P etait le resultat de tests de Wilcoxon. Resultats L’analyse en microscopie confocale des BAT presentant des lesions d’ACG a montre que la neointima hyperplasique etait constituee de MF derivant des CML (d-MF) (α-SMA + Desmin + MHC11lowCD90 + ) dont le phenotype correspondait a celui des cellules obtenues a partir des cultures ex vivo de BAT. A l’inverse des BAT saines, les CML et les d-MF presents dans les BAT atteintes d’ACG, exprimaient HLA-DR, la forme phosphorylee de STAT1 (pSTAT1) et plus moderement pSTAT3, montrant que la voie de signalisation de l’IFN-γ etait activee dans ces cellules. Nous avons reproduit ce type d’activation sur les d-MF cultives in vitro. Lorsque les d–MF etaient prealablement exposes a l’IFN-γ et au TNF-α, leur capacite de proliferation etait diminuee et leur niveau d’expression de HLA-DR et de CD86 augmentait (mediane de fluorescence respectives passant de 57 a 0 [p = 0,03] et de 103 a 34 [p = 0,03]). Exposes a l’IL-6 et l’IL-6Rs, leur capacite de proliferation n’etait pas modifiee et leur niveau d’expression de HLA-DR (MFI = 7,7) et de CD86 (MFI = 67,7) etait significativement plus faible qu’apres traitement par IFN-γ et TNF-α (p = 0,03). La polarisation des LT en Th1 (CD4 + CD8-IFN-γ+) et Tc1 (CD4-CD8 + IFN-γ+) et dans une moindre mesure en Th17 (CD4 + CD8-IL-17 + ) et Tc17 (CD4-CD8 + IL-17 + ) etait augmentee lorsque les PBMC etaient cultivees en presence de d-MF (p ≤ 0,001 et p ≤ 0,05 respectivement). Cet effet sur la polarisation Th1/Tc1 etait augmente lorsque les d-MF avaient prealablement ete exposes a l’IFN-γ et au TNF-α (p = 0,03). Les d-MF exprimaient faiblement le gene IL12p35 a l’etat basal ; son expression augmentait apres exposition a l’IFN-γ et au TNF-α (3,78 vs 32,57, p = 0,03), ce qui est concordant avec l’effet positif des d-MF sur la polarisation Th1. Conclusion Dans les arteres presentant des lesions d’ACG, les cellules constituant la neointima hyperplasique ont un phenotype de d–MF et expriment fortement pSTAT1 ce qui traduit une exposition in vivo a l’IFN-γ. Lorsque ces cellules sont en contact avec des PBMC, elles orientent la polarisation des LT vers la voie Th1/Tc1. Cet effet est encore plus important lorsque les d-MF sont prealablement exposes a un environnement cytokinique de type Th1 (IFN-γ + TNF-α), ce qui n’est pas le cas lorsque ces cellules sont exposees a l’IL-6. Nos resultats suggerent donc que les d-MF jouent un role dans l’amplification de l’inflammation vasculaire de type Th1 au cours de l’ACG.

Introduction La reponse lymphocytaire T est perturbee au cours de l’arterite a cellules geantes (ACG). Les lymphocytes T (LT) recrutes au sein de la paroi arterielle se polarisent en LT helper (Th)-1 et Th17 produisant respectivement de l’IFN-γ et de l’IL-17. Contrastant avec cet exces de LT pro-inflammatoires, il existe au cours de l’ACG un deficit quantitatif en lymphocytes T regulateurs (Treg) [1] , [2] . Cependant, peu de donnees sont disponibles concernant les caracteristiques fonctionnelles des Treg au cours de l’ACG et leur evolution apres traitement par corticoides ou tocilizumab (TCZ). Patients et methodes Des prelevements sanguins ont ete obtenus chez 43 patients au moment du diagnostic d’ACG et apres 3 mois de traitement par prednisone (n = 23) ou prednisone + TCZ (n = 20). Des prelevements identiques ont ete realises chez 40 sujets controles apparies pour l’âge, ne recevant aucun traitement anti-inflammatoire ou immunosuppresseur, etant indemnes de pathologie infectieuse, auto-immune ou neoplasique connue et ayant une CRP Resultats L’etude quantitative a confirme, qu’avant traitement, le pourcentage de Treg (CD4 + CD25highFoxP3 + ) etait diminue chez les patients atteints d’ACG comparativement aux controles (2,5 % vs 4,7 %; p [2] . Le pourcentage de cette sous-population de Treg etait augmente au cours de l’ACG comparativement aux controles (23 % vs 10 % ; p = 0,0096) et se corrigeait apres traitement par prednisone et TCZ (p = 0,049) mais pas apres traitement par prednisone seule (p = 0,788). L’etude fonctionnelle des Treg a montre qu’en comparaison aux Treg de sujets sains, les Treg des patients atteints d’ACG active inhibaient significativement moins la proliferation des LT effecteurs. En presence de TCZ, les Treg des patients ACG retrouvaient le meme pouvoir immunosuppressif que les Treg temoins. Afin d’eliminer l’hypothese d’une resistance des T effecteurs des patients ACG aux Treg et non d’une perte de capacite suppressive par les Treg, nous avons montre que les LT effecteurs des patients ACG restaient sensibles a l’action des Treg. En effet, les Treg temoins inhibaient la proliferation des LT effecteurs des patients ACG. Les Treg ont une capacite suppressive mais sont aussi capables de modifier la differenciation des LT helpers. Alors que les Treg des sujets controles n’avaient pas d’effet significatif sur la polarisation des LT effecteurs en Th17, les Treg des patients atteints d’ACG induisaient une augmentation de 50 % des LTh17 qui disparaissait apres ajout de TCZ dans les cultures. De plus, la production d’IL-17 par les Treg des patients atteints d’ACG etait plus elevee par rapport a celle des Treg des sujets sains (16,8 % vs 4,6 % ; P = 0,048). Le traitement par dexamethasone d’arteres temporales atteintes d’ACG cultivees ex vivo pendant 5 jours induisait une diminution de la transcription des genes de l’IL-6 et de FoxP3, ce qui explique probablement la diminution de Treg chez les patients ACG sous corticotherapie. A l’inverse, le TCZ, qui bloque le recepteur de l’IL-6, ne modifiait pas le niveau d’expression des genes de l’IL-6 et de FoxP3, probablement car la perte d’expression de l’exon-2 est liee a un epissage alternatif et non pas a des modifications transcriptionnelles. Conclusion Les resultats de cette etude montrent qu’il existe d’importantes perturbations de la fonction T regulatrice au cours de l’ACG : la quantite de Treg est diminuee et leurs capacites fonctionnelles sont alterees. Ce deficit quantitatif et fonctionnel en Treg est corrige apres blocage de la signalisation de l’IL-6 par le TCZ, ce qui n’est pas le cas apres corticotherapie seule. Cette derniere aggrave meme le deficit quantitatif en Treg, ce qui pourrait expliquer la survenue de rechutes lors du sevrage de la corticotherapie.

Introduction L’arterite a cellules geantes (ACG) est une vascularite granulomateuse affectant les arteres de gros calibre et touchant les patients de plus de 50 ans. Les causes de l’ACG sont inconnues a ce jour ; cependant comme les MAIT (Mucosal associated invariant T lymphocytes), lymphocytes T caracterises par l’expression d’un TCR semi-invariant (TCRVα7.2) dont l’interaction est restreinte a MR1 (MHC related protein 1) [1] , semblent impliques au cours d’autres vascularites comme les vascularites associees aux ANCA [2] , nous avons analyse leurs caracteristiques quantitatives et fonctionnelles au cours de l’ACG. Materiels et methodes Apres signature d’un consentement eclaire, 27 patients atteints d’ACG au diagnostic et avant tout traitement (≥ 3/5 criteres ACR avec preuve histologique ou par imagerie de vascularite) et 16 sujets sains (absence de pathologie auto-immune, infectieuse, neoplasique et CRP ≤ 5 mg/L) ont ete inclus dans cette etude. Apres 3 mois de traitement par corticoides, un prelevement supplementaire a ete obtenu chez 20/27 patients. Les MAIT, definis par le phenotype CD3 + CD4-TCRγd-TCRVα7.2 + CD161 +, ont ete quantifies et phenotypes par cytometrie en flux. Pour l’etude de l’expression de l’IL-17 et l’IFN-γ, les cellules ont ete stimulees par PMA et Ionomycine en presence de brefeldine A (4 heures). Les donnees ont ete acquises sur un LSR II (BD Bioscience) et analysees avec Flowjo v10®. Les MAIT et les lymphocytes T (LT) CD161 + TCRVα7.2- ont ete isoles par Fluorescent Assisted Cell Sorting (FACS) puis cultives dans differentes conditions : aucune stimulation, billes anti-CD3/CD28, IL-12 et IL-18 (n = 4 patients et 5 temoins). Apres 7 jours, la proliferation cellulaire a ete mesuree par cytometrie en flux et l’index de proliferation calcule avec le logiciel ModFit®. Les coupes de biopsie d’arteres temporales positives ont ete etudiees par microscopie confocale (Leica TCS SP8). Les resultats sont exprimes en mediane [intervalle interquartile] et P est le resultat de tests de Mann–Whitney ou de Wilcoxon. Resultats Dans le sang, la frequence des MAIT parmi les LTαβ totaux etait comparable entre patients et temoins (0,48 [0,15–1,01] vs 0,47 [0,28–1,125] % ; p = 0,63) et n’etait pas modifiee par le traitement de l’ACG (0,48 [0,15–0,76] vs 0,43 [0,14–0,88] % ; p = 0,51). Le phenotype des MAIT etait modifie chez les patients : diminution de l’expression de CXCR3 (6,08 [1,57–13,96] vs 8,33 [6,13–36,66] % ; p = 0,048), augmentation de l’expression d’INF-γ (47,7 [31,8–66,7] vs 31,0 % [16,6–38,7] % ; p = 0.027). Le traitement par corticoides ne permettait pas de corriger ces anomalies phenotypiques des MAIT : respectivement (8,31 [3,90–16,3] vs 4,36 [1,64–17,47] % ; p = 0.96) et (39,8 [23,7–61,27] vs 42,4 [23,5–63,3,] % ; p = 0.85). A la difference des LT CD161 + TCRVα7.2-, les MAIT etaient capables de proliferer en presence d’IL-12 et d’IL-18 sans activation de leur TCR et a un niveau plus important chez les patients que chez les temoins : index de proliferation a 3,39 [2,36–7,15] vs 1,4 [1,2–2,42] ; (p = 0,032). Des MAIT, definies par le phenotype CD3 + IL-18R + TCRVα7.2 + ont ete identifies au sein des zones d’infiltrats en LT dans les arteres temporales de patients atteints d’ACG (n = 3). Discussion Meme si la frequence des MAIT n’est pas modifiee dans le sang des patients atteints d’ACG, leurs caracteristiques fonctionnelles sont modifiees vers un profil pro-inflammatoire cours de l’ACG : plus forte expression d’IFN-γ et plus forte proliferation en presence d’IL-12 et IL-18 sans activation de leur TCR. L’IL-12 et l’IL-18 etant 2 cytokines fortement exprimees dans les lesions d’ACG, nos resultats suggerent que les MAIT pourraient, en etant activees de facon independante de leur TCR, jouer un role dans l’amplification de la reponse inflammatoire au cours de l’ACG, ce d’autant que la corticotherapie ne permet pas de corriger le phenotype des MAIT. La diminution de l’expression de CXCR3 par les MAIT des patients atteints d’ACG pourrait etre liee au recrutement de MAIT CXCR3 + au sein des lesions de vascularite mais nos resultats ne permettent pas encore de le confirmer. Conclusion La modification du phenotype et des caracteristiques fonctionnelles des MAIT associes a leur presence dans les lesions de vascularite suggerent fortement que qu’ils jouent un role dans la physiopathologie de l’ACG.

Introduction Le risque d’evenement cardiovasculaire est accru au cours de l’arterite a cellules geantes (ACG), en particulier dans les premiers mois suivant le diagnostic de la vascularite [1] . L’objectif de ce travail etait de decrire les caracteristiques des infarctus du myocarde (IDM) survenant chez des patients atteints d’ACG et de les comparer avec des IDM survenant chez des patients ne presentant pas d’ACG au moment de leur IDM. Patients et methodes Les patients atteints d’ACG ont ete identifies parmi la liste des biopsies d’artere temporale (BAT) qui montraient des lesions d’ACG et qui avaient ete analysees entre le 1er janvier 2001 et le 31 decembre 2016 dans les deux laboratoires d’anatomie et cytologie pathologiques de notre departement. Les diagnostics d’IDM survenus entre le 1er janvier 2001 et le 3 septembre 2019 dans la population atteinte d’ACG (cas) ont ete identifies dans la base de donnees RICO (obseRvatoire des Infarctus de Cote d’Or). Chaque cas a ete compare a 5 temoins sans ACG et presentant un IDM dans la meme periode d’etude, apres appariement sur l’âge, le sexe, les facteurs de risque cardiovasculaire et les antecedents de maladies cardiovasculaires. L’IDM etait de type 1 s’il etait cause par une maladie coronarienne atherothrombotique responsable d’un thrombus intraluminal, ou de type 2 s’il etait lie a un desequilibre entre besoins et apport en oxygene au myocarde et qu’il n’y avait pas d’argument pour un IDM de type 1. L’IDM etait considere en lien avec l’ACG s’il etait diagnostique dans les 3 mois precedant ou suivant une poussee d’ACG. Resultats Parmi les 251 patients presentant une ACG a BAT positive pendant la periode etudiee, 13 ont presente un IDM, dont 6 (2,4 %) etaient en lien avec une poussee d’ACG. Ces 13 cas ont ete compares a 65 temoins. Les IDM en lien avec une poussee d’ACG survenaient le plus souvent au moment du diagnostic d’ACG, avec un delai median de 25 jours Ces IDM etaient majoritairement de type 2 contrairement aux IDM sans lien avec l’ACG (80 % vs 16,7 %, p = 0,080) et la vascularite a eteconsideree comme le seul facteur declenchant pour 75 % des IDM de type 2 lies a l’ACG. Les patients presentant un IDM en lien avec une poussee d’ACG etaient plus jeunes (p = 0,005), n’avaient pas d’antecedent de pathologie cardiovasculaire (p = 0,070) et avaient une atteinte coronarienne monotronculaire (p = 0,034). Les IDM non lies a une poussee d’ACG survenaient plusieurs annees apres le diagnostic d’ACG (delai median = 6,5 ans ), chez des patients plus âges ayant une coronaropathie etendue (100 % des cas) et des antecedents de maladies cardiovasculaires (57 % des cas). Ces patients avaient recu une dose cumulee de prednisone plus elevee (5,1 vs 4,2 g a 6 mois [p = 0,048] et 7,4 vs 5,7 g a 12 mois du diagnostic d’ACG [p = 0,032]). Les analyses multivariees ont montre que l’ACG n’etait pas associee a une diminution de la survie 1 an apres l’IDM. Conclusion Notre etude apporte une description precise des caracteristiques des IDM survenant chez les patients atteints d’ACG. L’IDM en lien avec l’ACG est un evenement rare dont les caracteristiques sont singulieres. Il s’agit generalement d’IDM de type 2 favorises par l’importante inflammation systemique qui caracterise cette vascularite. Par ailleurs, la corticotherapie au long cours semble jouer un role favorisant dans la survenue d’IDM non lies a une poussee d’ACG, plus tardifs et de mecanisme atheromateux.