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Introducción El moho gris es una de las principales causas de pudrición en poscosecha del fruto de fresa (Fragaria x ananassa Duch.), la cual es ocasionada por el hongo Botrytis cinerea Pers.:fr. El tratamiento con fungicidas químicos es el método principal de su control; no obstante, su uso ocasiona problemas de salud y contaminación. Lo anterior promueve la investigación hacia alternativas de control. El objetivo de la presente investigación fue evaluar el efecto de compósitos de quitosano-ácidos grasos sobre la infección de B. cinerea en frutos de fresa en poscosecha.Método Se realizaron bioensayos in vitro para evaluar el efecto del quitosano, octanoato de sodio y ácido decanoico sobre el crecimiento micelial de B. cinerea. Asimismo, en bioensayos in vivo se evaluó la protección de los compuestos solos y en mezcla sobre la severidad de la infección del moho gris en frutos de fresa en poscosecha. Los tratamientos se evaluaron bajo un diseño completamente al azar, y los datos se analizaron mediante análisis de varianza (ANOVA) (p ≤ 0.05) y comparación de medias por el método de Tukey (p ≤ 0.05).Resultados El quitosano inhibió el crecimiento en 100 % cuando se aplicó en concentraciones de 10, 12.5 y 15 mg/mL, mientras que el octanoato de sodio alcanzó el mismo porcentaje de inhibición en las concentraciones de 0.33 y 0.49 mg/mL. Finalmente, el ácido decanoico inhibió en 100 % a B. cinerea en las concentraciones de 0.17, 0.34 y 0.51 mg/mL. En los bioensayos in vivo, los mejores resultados de protección de los frutos de fresa de la infección por B. cinerea fueron aquellos en los que se utilizó el compósito quitosano/octanoato de sodio (12.5/0.49 y 15/0.49 mg/mL) con ausencia de severidad. También destacaron los tratamientos de quitosano (15 mg/mL), ácido decanoico (0.51 mg/mL) y del compósito quitosano/ácido decanoico (12.5/0.51 y 15/0.51 mg/mL), donde el grado de severidad fue entre 1 y 2.Discusión o Conclusión El quitosano, octanoato de sodio y ácido decanoico inhibieron significativamente el crecimiento micelial in vitro de B. cinerea. El compósito quitosano/octanoato de sodio posee un efecto protector mayor de los frutos de fresa, en relación a los compuestos aplicados solos. El quitosano y el ácido decanoico presentaron un efecto protector significativo de los frutos, aplicados solos o como compósito. Lo anterior sugiere que estos compuestos podrían ser utilizados potencialmente en el control de B. cinerea en poscosecha.

Introducción: El moho gris es una de las principales causas de pudrición en poscosecha del fruto de fresa (Fragaria x ananassa Duch.), la cual es ocasionada por el hongo Botrytis cinerea Pers.:fr. El tratamiento con fungicidas químicos es el método principal de su control; no obstante, su uso ocasiona problemas de salud y contaminación. Lo anterior promueve la investigación hacia alternativas de control. El objetivo de la presente investigación fue evaluar el efecto de compósitos de quitosano-ácidos grasos sobre la infección de B. cinerea en frutos de fresa en poscosecha. Método: Se realizaron bioensayos in vitro para evaluar el efecto del quitosano, octanoato de sodio y ácido decanoico sobre el crecimiento micelial de B. cinerea. Asimismo, en bioensayos in vivo se evaluó la protección de los compuestos solos y en mezcla sobre la severidad de la infección del moho gris en frutos de fresa en poscosecha. Los tratamientos se evaluaron bajo un diseño completamente al azar, y los datos se analizaron mediante análisis de varianza (ANOVA) (p ≤ 0.05) y comparación de medias por el método de Tukey (p ≤ 0.05). Resultados: El quitosano inhibió el crecimiento en 100 % cuando se aplicó en concentraciones de 10, 12.5 y 15 mg/mL, mientras que el octanoato de sodio alcanzó el mismo porcentaje de inhibición en las concentraciones de 0.33 y 0.49 mg/mL. Finalmente, el ácido decanoico inhibió en 100 % a B. cinerea en las concentraciones de 0.17, 0.34 y 0.51 mg/mL. En los bioensayos in vivo, los mejores resultados de protección de los frutos de fresa de la infección por B. cinerea fueron aquellos en los que se utilizó el compósito quitosano/octanoato de sodio (12.5/0.49 y 15/0.49 mg/mL) con ausencia de severidad. También destacaron los tratamientos de quitosano (15 mg/mL), ácido decanoico (0.51 mg/mL) y del compósito quitosano/ácido decanoico (12.5/0.51 y 15/0.51 mg/mL), donde el grado de severidad fue entre 1 y 2. Discusión o Conclusión: El quitosano, octanoato de sodio y ácido decanoico inhibieron significativamente el crecimiento micelial in vitro de B. cinerea. El compósito quitosano/octanoato de sodio posee un efecto protector mayor de los frutos de fresa, en relación a los compuestos aplicados solos. El quitosano y el ácido decanoico presentaron un efecto protector significativo de los frutos, aplicados solos o como compósito. Lo anterior sugiere que estos compuestos podrían ser utilizados potencialmente en el control de B. cinerea en poscosecha.

La mastitis es una enfermedad que afecta al ganado bovino lechero a nivel mundial, provocando una disminución en la calidad y cantidad de la leche producida, lo cual genera pérdidas económicas considerables. Esta enfermedad es causada por una variedad de microorganismos, entre los cuales Staphyloccocus aureus es uno de los más importantes. El objetivo del trabajo fue caracterizar 20 aislamientos de Staphylococcus spp. obtenidos de la glándula mamaria de vacas lactantes con mastitis en un sistema de producción de traspatio, mediante el uso de polimorfismos derivados de la amplificación al azar de ADN (RAPD's) y su sensibilidad hacia trece antibióticos y 1 detergente. Las pruebas de sensibilidad a los 13 antibióticos demostraron que todos los aislamientos fueron resistentes a penicilina y sensibles a cefalotina, eritromicina y trimetoprim. Todos los aislamientos fueron susceptibles a una concentración menor de 6 µg/ml de bromuro de cetil trimetil amonio (CTAB). La caracterización molecular permitió determinar que los aislamientos SA7 y SA8, SA30 y SA32, presentaron una similitud superior al 90 % en el patrón de bandas obtenida por RAPD, mientras que los aislamientos SA35 y SA36 fueron idénticos, sin embargo, el resto de los aislamientos presentaron perfiles de amplificación distintos. Los aislamientos SA7 y SA8, SA30 y SA32, SA35 y SA36, tuvieron patrones de resistencia a antibióticos y de RAPD similares, por lo que probablemente se trató de reaislamientos. Los aislamientos de Staphylococcus de Tarí­mbaro, Michoacán presentaron una diversidad de perfiles de amplificación.

Epigenetic mechanisms are essential in the regulation of immune response during infections. Changes in the levels of reproductive hormones, such as prolactin, compromise the mammary gland’s innate immune response (IIR); however, its effect on epigenetic marks is poorly known. This work explored the epigenetic regulation induced by bovine prolactin (bPRL) on bovine mammary epithelial cells (bMECs) challenged with Staphylococcus aureus. In this work, bMECs were treated as follows: (1) control cells without any treatment, (2) bMECs treated with bPRL (5 ng/ml) at different times (12 or 24 h), (3) bMECs challenged with S. aureus for 2 h, and (4) bMECs treated with bPRL at different times (12 or 24 h), and then challenged with S. aureus 2 h. By western blot analyses of histones, we determined that the H3K9ac mark decreased (20%) in bMECs treated with bPRL (12 h) and challenged with S. aureus, while the H3K9me2 mark was increased (50%) in the same conditions. Also, this result coincided with an increase (2.3-fold) in HDAC activity analyzed using the cellular histone deacetylase fluorescent kit FLUOR DE LYS®. ChIP-qPCRs were performed to determine if the epigenetic marks detected in the histones correlate with enriched marks in the promoter regions of inflammatory genes associated with the S. aureus challenge. The H3K9ac mark was enriched in the promoter region of IL-1β, IL-10, and BNBD10 genes (1.5, 2.5, 7.5-fold, respectively) in bMECs treated with bPRL, but in bMECs challenged with S. aureus it was reduced. Besides, the H3K9me2 mark was enriched in the promoter region of IL-1β and IL-10 genes (3.5 and 2.5-fold, respectively) in bMECs challenged with S. aureus but was inhibited by bPRL. Additionally, the expression of several miRNAs was analyzed by qPCR. Let-7a-5p, miR-21a, miR-30b, miR-155, and miR-7863 miRNAs were up-regulated (2, 1.5, 10, 1.5, 3.9-fold, respectively) in bMECs challenged with S. aureus; however, bPRL induced a down-regulation in the expression of these miRNAs. In conclusion, bPRL induces epigenetic regulation on specific IIR elements, allowing S. aureus to persist and evade the host immune response.

Abstract Bacillus thuringiensis INTA 7-3, INTA 51-3, INTA Mo9-5 and INTA Mo14-4 strains were obtained from Argentina and characterized by determination of serotype, toxicity, plasmid composition, insecticidal gene content (cry and vip) and the cloning of the single-vip3A gene of the INTA Mo9-5 strain. The serotype analysis identified the serovars tohokuensis and darmstadiensis for the INTA 51-3 and INTA Mo14-4 strains, respectively, whereas the INTA Mo9-5 strain was classified as “autoagglutinated”. In contrast to the plasmid patterns of INTA 7-3, INTA 51-3 and INTA Mo9-5 (which were similar to B. thuringiensis HD-1 strain), strain INTA Mo14-4 showed a unique plasmid array. PCR analysis of the four strains revealed the presence of cry genes and vip3A genes. Interestingly, it was found that B. thuringiensis 4Q7 strain, which is a plasmid cured strain, contained vip3A genes indicating the presence of these insecticidal genes in the chromosome. Bioassays towards various lepidopteran species revealed that B. thuringiensis INTA Mo9-5 and INTA 7-3 strains were highly active. In particular, the mean LC50 obtained against A. gemmatalis larvae with the INTA Mo9-5 and INTA 7-3 strains were 7 (5.7-8.6) and 6.7 (5.6-8.0) ppm, respectively. The INTA Mo14-4 strain was non-toxic and strain INTA 51-3 showed only a weak larvicidal activity. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The Verbesina gender represents the second most diverse group from the Asteraceae family in Mexico; Verbesina sphaerocephala is one of the most distributed species along the Mexican territory. This species has been poorly studied, reporting the presence of some bioactive compounds with antioxidant and antibacterial activity. In this study, phenolic and flavonoid contents and composition, antioxidant and antifungal activities of aqueous extracts of the stem of V. sphaerocephala and its fractions were determined. The results showed that the highest antifungal activity against Botrytis cinerea was shown by the aqueous extract (IC50: 0.10 mg/mL) and the ethyl acetate fraction (IC50: 14.8 mg/mL). In addition, the aqueous extract and the ethyl acetate fraction exhibited the highest phenolic (21.40 and 21.26 mg gallic acid equivalents per gram of dry extract, respectively) and flavonoid contents (11.53 and 3.71 mg rutin equivalents, respectively) and high antioxidant activity determined by the Total Antioxidant Capacity (20.62 and 40.21 mg ascorbic acid equivalents per gram of dry extract, respectively), Ferric Reducing Power (74.76 and 129.57 mg gallic acid equivalents per gram of dry extract, respectively), DPPH (IC50: 12.38 and 7.36 mg/mL, respectively), and ABTS (IC50: 5.60 and 7.76 mg/mL, respectively) methods. Twelve phenolic compounds were detected in the aqueous extract using UPLC-MS analysis, of which the major ones were protocatechuic, vanillic, and hydroxybenzoic acid, while in the ethyl acetate fraction, the presence of 18 phenolic compounds were identified, of which the majority were vanillin, rutin, and hydroxybenzoic acid. The results of this research demonstrate that the aqueous extract of V. sphaerocephala stems has phenolic compounds with antifungal and antioxidant activity.

Changes in the levels of reproductive hormones compromise the bovine innate immune response (IIR). Changes in 17β-estradiol (E2) and prolactin (bPRL) levels affect the IIR of bovine mammary epithelial cells (bMECs), the target tissue of these hormones. In this work, we explored the effect of the combined hormones on bMEC IIR during Staphylococcus aureus infection, and if they can modulate epigenetic marks. By gentamicin protection assays, we determined that combined hormones (bPRL (5 ng/mL) and E2 (50 pg/mL)] decrease S. aureus internalization into bMECs (~50%), which was associated with a reduction in integrin α5β1 membrane abundance (MA) (~80%) determined by flow cytometry. Additionally, combined hormones increased Toll-like receptor 2 (TLR2) MA (~25%). By RT-qPCR, we showed that combined hormones induce the expression of pro- and anti-inflammatory cytokine genes, as well as up-regulate antimicrobial peptide gene expression. The combined hormones induced H3K9Ac at 12 h of treatment, which coincides with the reduction in histone deacetylase (HDAC, ~15%) activity. In addition, hormones increased the H3K9me2 mark at 12 h, which correlates with a reduction in the expression of KDM4A. In conclusion, bPRL and E2 modulate the IIR of bMECs, an effect that can be related to the regulation of histone H3 modifications such as H3K9Ac and H3K9me2.

Bovine mammary epithelial cells (bMECs) are capable of initiating an innate immune response (IIR) to invading bacteria. Staphylococcus aureus is not classically an intracellular pathogen, although it has been shown to be internalized into bMECs. S. aureus internalizes into nonprofessional phagocytes, which allows the evasion of the IIR and turns antimicrobial therapy unsuccessful. An alternative treatment to control this pathogen is the modulation of the innate immune response of the host. The Mexican avocado (Persea americana var. drymifolia) is a source of molecules with anti-inflammatory and immunomodulatory properties. Hence, we analyze the effect of a lipid-rich extract from avocado seed (LEAS) on S. aureus internalization into bMECs and their innate immunity response. The effects of LEAS (1-500 ng/ml) on the S. aureus growth and bMEC viability were assessed by turbidimetry and MTT assays, respectively. LEAS did not show neither antimicrobial nor cytotoxic effects. S. aureus internalization into bMECs was analyzed by gentamicin protection assays. Interestingly, LEAS (1-200 ng/ml) decreased bacterial internalization (60-80%) into bMECs. This effect correlated with NO production and the induction of the gene expression of IL-10, while the expression of the proinflammatory cytokine TNF-α was reduced. These effects could be related to the inhibition of MAPK p38 (∼60%) activation by LEAS. In conclusion, our results showed that LEAS inhibits the S. aureus internalization into bMECs and modulates the IIR, which indicates that avocado is a source of metabolites for control of mastitis pathogens.