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U današnje vrijeme upotreba ksenobiotika sve je češća, a samim time se i sve veće količine nekontrolirano ispuštaju u okoliš. Pesticidi, antiparazitici te ostali ksenobiotici i njihovi metaboliti, razgradni i transformacijski produkti dospijevaju u tlo i vodu čineći štetu biljnom i životinjskom svijetu. Kako su ksenobiotici spojevi složene kemijske strukture, vrlo ih je teško u potpunosti ukloniti iz vode, a često je potrebno korištenje složenih i skupih metoda obrade otpadnih voda. Metode obrade aktivnim muljem najzastupljenije su metode u obradi otpadnih voda. Cilj ovoga rada je ispitati mogućnosti uklanjanja ksenobiotika iz otpadnih voda biorazgradnjom pomoću aktivnog mulja. Određivana je mogućnost biorazgradnje antiparazitika febantela, albendazola i mebendazola te pesticida iz skupine insekticida tiakloprida, acetamiprida i klotianidina u vremenu od 48 sati tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti uz praćenje pH-vrijednosti, temperature, gustoće, ukupne količine ugljika te utjecaja na mikroorganizme. Proces biorazgradnje odvijao se u pet reaktora koji su bili zaštićeni aluminijskom folijom kako bi se spriječio utjecaj Sunčeve svjetlosti na razgradnju ksenobiotika. Uklanjanje ksenobiotika određivano je tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti uz detektor s nizom dioda, a uzorci su se uzimali u točno određenim vremenskim intervalima. Uz to, uzorci su se analizirali i mjerenjem ukupne količine ugljika, a pratili smo i gustoću aktivnog mulja prije procesa biorazgradnje te gustoću nakon biorazgradnje i to za reaktor s muljem, mikroplastikom i ksenobiotikom te za reaktor s muljem i ksenobiotikom. Također je za svaki ksenobiotik provedena i mikrobiološka analiza kako bi se utvrdio utjecaj pojedinog ksenobiotika na mikroorganizme koji sudjeluju u procesu biorazgradnje. Stopostotno uklanjanje postignuto je za sve antiparazitike, dok je kod pesticida uklanjanje bilo nešto lošije. Uz sam proces uklanjanja uzimala se u obzir i adsorpcija i desorpcija komponenata na površinu mikroplastike i pahuljice aktivnog mulja, a pomoću dobivenih kromatograma detektirali su se i razgradni/transformacijski produkti koji nastaju tijekom procesa biorazgradnje. Nowadays, the use of xenobiotics is becoming more and more common, and thus increasing amounts are being released into the environment in an uncontrolled manner. Pesticides, antiparasitics and other xenobiotics and their metabolites, degradation and transformation products reach the soil and water causing damage to the plant and animal life. Since xenobiotics are compounds with a complex chemical structure, it is very difficult to completely remove them from water, and it is often necessary to use complex and expensive wastewater treatment methods. Activated sludge treatment methods are the most common methods in wastewater treatment. The aim of this work is to examine the possibilities of removing xenobiotics from wastewater by biodegradation using activated sludge. The possibility of biodegradation of the antiparasitics febantel, albendazole and mebendazole and pesticides from the group of insecticides thiacloprid, acetamiprid and clothianidin was determined within 48 hours by high-performance liquid chromatography with monitoring of pH-value, temperature, density, total carbon and impact on microorganisms. The biodegradation process took place in five reactors that were protected by aluminum foil to prevent the influence of sunlight on the degradation of xenobiotics. The removal of xenobiotics was determined by high-performance liquid chromatography with a diode array detector, and samples were taken at precisely determined time intervals. In addition, the samples were analyzed by measuring the total amount of carbon, and we monitored the density of activated sludge before the biodegradation process and the density after biodegradation for the reactor with sludge, microplastics and xenobiotics and for the reactor with sludge and xenobiotics. A microbiological analysis was also carried out for each xenobiotic in order to determine the influence of each xenobiotic on the microorganisms that participate in the biodegradation process. One hundred percent removal was achieved for all antiparasitics, while the removal was slightly worse for pesticides. In addition to the removal process itself, the adsorption and desorption of components on the surface of microplastics and activated sludge flakes were also taken into account, and the resulting chromatograms were used to detect the degradation/transformation products that arise during the biodegradation process.

Background The aim of the present work was to determine potential toxicity of degradation products of febantel generated under different stress conditions mentioned in guideline Q1A (R2) laid down by International Council for Harmonization (ICH). The stability behavior of febantel was studied by subjecting it to hydrolytic, oxidative, photolytic and thermal forced degradation conditions. Results Five degradation products (DPs) were observed which were resolved using high-performance liquid chromatography (HPLC) and characterized by LC-MS/MS using positive mode of electrospray ionization. The chromatographic separation was carried out on Hypersil® BDS C18 (150 × 4.6 mm, 5 μm) column. Optimum resolution was obtained using ammonium formate buffer (10 mM, pH 3.5) and acetonitrile programmed in gradient elution mode at 281.0 nm using photodiode array detector. Conclusion The drug was found susceptible to degradation under all the stress conditions except thermal and oxidative stress. Five major unknown degradation products DP–I, DP–II, DP–III, DP–IV, and DP–V generated under photolytic, alkali, and acidic stress condition were identified and characterized by LC-MS/MS. The drug and identified degradation products were screened for prediction of in-silico toxicity using software viz. Swiss ADME, OSIRIS Property Explorer and Pro Tox II which indicated overall no toxicological concerns. Graphical abstract

Povećanjem uporabe antihelmintika u veterinarske i druge medicinske terapijske svrhe dolazi do njihovog kontinuiranog i nekontroliranog ispuštanja u okoliš. Iako se farmaceutici i njihovi metaboliti u okolišu nalaze u tragovima mogu dovesti do visoke dugoročne koncentracije i time štetno djelovati na okoliš. Obzirom da njihova kemijska postojanost, mogućnost akumulacije, otpornost na mikrobe i sinergistički učinci još uvijek nisu u potpunosti poznati potrebno je razvijati i primjenjivati analitičke i bioanalitičke metode detekcije antihelmintika i njihovih razgradnih i/ili transformacijskih produkata. Cilj ovog rada bio je ispitati učinkovitost biorazgradnje antihelmintika mebendazola, albendazola i febantela te njihove smjese. Proces biorazgradnje provodio se u tri aerirana šaržna reaktora različitih sadržaja. Prvi reaktor je kontrolni reaktor koji je sadržavao samo radnu otopinu ispitivanog farmaceutika masene koncentracije 3 mg L^-1. Dodatak drugom reaktoru je aktivni mulj, dok je u treći uz sve prethodno navedeno dodana i poznata masa mikroplastike. Uz ispitivanje fizikalno-kemijskih parametara biorazgradnje, praćenje koncentracije antihelmintika u definiranim vremenskim razmacima uzorkovanja, procijenjen je i ekotoksični utjecaj pojedinačnih komponenti i njihove smjese. U ovom radu je postignuta biorazgradnja antihelmintika s aktivnim muljem masene koncentracije 4 - 5 g L^-1. Pretpostavka je da se uz glavni mehanizam uklanjanja antiparazitika - biorazgradnju, javljaju i hidroliza i adsorpcija na pahuljice mulja. Praćeni parametri tijekom biorazgradnje bili su pH-vrijednost, temperatura okoline, temperatura svakog reaktora i preostali radni volumen otopine u reaktoru. Novonastali razgradni i/ili transformacijski produkti detektirani su tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti. Također je procijenjena toksičnost odabranih istraživanih antihelmintika i njihove smjese nakon provedene biorazgradnje pomoću bioluminiscentne metode određivanja akutne toksičnosti bakterijom Vibrio fischeri. Increasing the use of anthelmintics for veterinary and other medical therapeutic purposes leads to their continuous and uncontrolled release into the environment. Although pharmaceuticals and their metabolites are found in traces, they can lead to high long-term concentrations and therefore have a detrimental effect on the environment. Since their chemical resistance, accumulation potential, microbial resistance and synergistic effects are not yet fully known, it is necessary to develop and apply analytical and bioanalytical methods for the detection of anthelmintics and their degradation and/or transformation products. The aim of this study was to examine the biodegradation efficiency of the anthelmintics mebendazole, albendazole and febantel, and their mixture. The biodegradation process was carried out in three aerated batch reactors of different contents. The first reactor was a control reactor containing only the working solution of the test pharmaceutical at a mass concentration of 3 mg L^-1. The addition to the second reactor is activated sludge, while in the third, in addition to all the above, a known mass of microplastics was added. In addition to examining the physicochemical parameters of biodegradation, monitoring the concentration of anthelmintics at defined sampling intervals, the ecotoxic effect of individual components and their mixture was assessed. In this study, biodegradation of anthelmintics with activated sludge with a mass concentration of 4 - 5 g L^-1 was achieved. It is assumed that in addition to the main mechanism of antiparasitic removal - biodegradation, hydrolysis, and adsorption on the floculae of activated sludge are also occuring. The parameters monitored during biodegradation were pH-value, room temperature, temperature of each reactor and the remaining working volume of the solution in the reactor. The newly formed degradation and/or transformation products were detected by high performance liquid chromatography. The toxicity of the selected investigated anthelmintics and their mixture after biodegradation was also assessed using the bioluminescent method of determining acute toxicity with bacteria Vibrio fischeri.

A six-month-old Pomeranian male dog was referred due to a month long history of unformed, soft faeces and mild weight loss. Stool analyses by direct faecal smear, Zinc sulphate flotation and the Baermann concentration method revealed an infection with Strongyloides stercoralis. The dog was initially treated once with a combination drug of praziquantel, pyrantel and febantel (½ Drontal® Plus Tablets for puppies and small dogs; Bayer; i.e. 31.5 mg/kg bodyweight of febantel ). The treatment was repeated after 12 days with the same dosage for 3 consecutive days. The stool analyses performed 14 days and 3 months after the second treatment were negative for S. stercoralis larvae. The results suggest that a repeated treatment with Drontal® Plus Tablets is effective against S. stercoralis in dogs and has no adverse effects.

Classical methods of wastewater treatment fail to remove small molecules of contaminants such as pharmaceuticals. For many years pharmaceuticals have been used for medical therapeutic purposes and therefore have been uncontrollably released in the environment, through excretion, inappropriate disposal or because of inadequate waste water treatment. Recently, they have been recognized as potentially harmful pollutants, so accordingly the term emerging contaminants has been formed. One of commonly used pharmaceuticals is the anthelmintics whose representative is febantel. Febantel is used in human medicine and in veterinary practice very often. In spite of its frequent usage, about febantel behavior during and after wastewater treatment, there are still no sufficient data to predict its behavior and possible impact on the environment. The goal of this paper was monitoring the degradation products of febantel after biodegradation with activated sludge and compares them with the degradation products obtained after advanced oxidation processes (AOPs), so that, it can be used in system for waste water treatment. The effectiveness of febantel degradation and identification of degradation products formed during the processes was monitored by analytical and bioanalytical methods. Degradation products have been detected and identified by high and ultra-high performance liquid chromatography coupled to mass spectrometers. Assessment of toxicity of degradation process was done by measuring the bioluminescence inhibition of Vibrio fischeri bioassay. Finally, the results indicated that degradation products obtained during biodegradation are different from degradation products obtained by AOPs. Also degradation products after AOPs proved to be more toxic.

Uporaba farmaceutika je svakim danom u porastu te stoga kontinuirano dospijevaju u otpadne vode. Zbog složene kemijske strukture i postojanosti, iako prisutni u niskim koncentracijama podliježu procesu nagomilavanja u okolišu (akumulacije) te zaostaju u vodi nakon obrade u klasičnom komunalnom postrojenju Upitan je njihov štetan utjecaj na okoliš, a definirani su kao „nove onečišćujuće tvari“. Potrebno je razvijati i primijenjivati osjetljive analitičke i bioanalitičke metode detekcije farmaceutika i njihovih razgradnih produkata. Time je moguće definirati profil razgradnje i ekotoksični utjecaj farmaceutika na okoliš te posredno predvidjeti njihov učinak na okoliš i zdravlje ljudi. Cilj ovog rada je motrenje biorazgradnje veterinarskih farmaceutika antiparazitika febantela, prazikvantela, pirantel pamoata i njihove smjese u šaržnom reaktoru sa aktivnim muljem, praćenjem fizikalno-kemijskih pokazatelja mikrobne razgradnje odabranih antiparazitika u aerobnim uvjetima u vodenom mediju. Učinkovitost biorazgradnje farmaceutika i identifikacija transformacijskih produkata biorazgradnje motrena je i određena analitičkim i bioanalitičkim metodama. U ovom radu postignuta je biorazgradnja antiparazitika u vodi sa aktivnim muljem. No, ne smije se zanemariti i utjecaj hidrolize i adsorpcije farmaceutika na pahuljicu aktivnog mulja. Transformacijski produkti su detektirani i identificirani tekućinskom kromatografijom ultravisoke djelotvornosti praćenu spektrometrijom masa, a procjena toksičnosti nakon provedene biorazgradnje odabranih istraživanih antiparazitika provedena je bioluminiscentnom metodom određivanja akutne toksičnosti pomoću bakterijske vrste Vibrio fischeri. The use of the pharmaceuticals is growing daily and therefore they continuously appear in the wastewaters. Because of their complex structure and persistence, although present at low concentrations, they bioaccumulate and are detected in water after treatment in a conventional wastewater treatment plant. Therefore their harmful environmental impact is matter of further investigation and they are defined as "new emerging contaminats". Sensitive analytical and bioanalytical methods of detection of pharmaceuticals and their degradation products need to be developed and applied. Consequently it is possible to define the degradation profile and the ecotoxic effect of certain pharmaceuticals in the environment, thus predicting their impact on the environment and human health. The aim of this study was to optimize the conditions of biodegradation veterinary pharmaceuticals from the group of anthelmintics: febantel, praziquantel and pyrantel pamoate in a batch reactor by monitoring the physical and chemical parameters in water media. The efficiency of the biodegradation proces and identification of transformation products formed during the process are monitored by analytical and bioanalytical methods. In this study the biodegradation of anthelmintics in the water with activated sludge is achieved whereby the impact of hydrolysis on that process, and also the adsorption on the flocculae of active sludge it could not be ignored. Transformation products have been detected and identified by ultrahigh performance liquid chromatography, and toxicity assessment of biodegradation process was made with bioluminiscent methodology of acute toxicity determination with Vibrio fischeri bacterial species.

Rast ljudske potrošnje iz godine u godinu uzrokuje i povećanje upotrebe farmaceutika u svakodnevnom životu. To izrazito nepovoljno djeluje na okoliš, prije svega onaj vodni, uzrokujući njegovo onečišćenje. Problem se javlja pri nastojanju obrade takvih otpadnih voda jer se voda onečišćena farmaceuticima vrlo teško obrađuje klasičnim metodama obrade. Sve te činjenice, kao i nepostojanje zakonskih regulativa koje propisuju maksimalno dopuštene koncentracije farmaceutika u okolišu, nagnale su znanstvenike i brojne stručnjake na provedbu istraživanja koja su usmjerena na razvoj modernih tehnologija obrade otpadnih voda. Cilj ovoga rada je odrediti toksičnost čistih aktivnih supstanci antiparazitika (albendazol, febantel, prazikvantel) i antibiotika (cefdinir, nitrofurantoin). Prije određivanja toksičnosti farmaceutskih aktivnih tvari na okoliš, bitno je odrediti toksičnost njihovih čistih komponenti kako bi se lakše mogla pratiti toksičnost njihovih metabolita i razgradnih produkata u okolišu. Za određivanje toksičnosti primijenjena je bioluminiscentna metoda DIN 38412-L-34 koja za test organizme koristi bakterije Vibrio fischeri koje su osjetljive na organska onečišćenja i njihova prisutnost uzrokuje smanjenje njihove luminiscencije. Mjerenja su pokazala kako svi farmaceutici pri višim koncentracijama čiste komponente uzrokuju inhibiciju bakterijske kulture. Koja će se pak koncentracija uzeti kao granična ovisi o težini promatranog učinka. Kako za većinu farmaceutika nije poznato djelovanje nakon uporabe, potrebno je provoditi što više ovakvih mjerenja, prije svega za antibiotike i estrogene za koje se sumnja da opstaju u okolišu, bilo zbog nemogućnosti biološke razgradnje ili zbog kontinuiranog ispuštanja u okoliš. The growth of human consumption from year to year increases the use of pharmaceuticals in everyday life. This has extremely negative effect on environment, especially the water, causing the pollution. The problem occurs in the treatment of such waste water because the water, which contaminated with pharmaceuticals, is very difficult to process with conventional methods of treatment. All these facts, and the lack of legal regulations that prescribe the maximum permissible concentrations of pharmaceuticals in environment, prompted the scientists and numerous experts on doing researches which are focused on the development of modern technologies for wastewater treatment. The aim of this study was to determine toxicity of pure active compounds of anthelmintics (albendazole, febantel, praziquantel) and antibiotics (cefdinir, nitrofurantoin). Before determining toxicity of pharmaceutical active substances in environment, it is important to determine the toxicity of pure active components to help track the toxicity of their metabolites and degradation products in environment. To determine the toxicity was applied bioluminescent method DIN 38412-L-34 that as test organisms used Vibrio fischeri bacteria which are sensitive to organic contaminants which presence causes a reduction of their luminescence. Measurements have shown that all pharmaceuticals with higher concentrations of pure component cause inhibition of bacterial culture. What concentration will be taken as the limit one depends on the severity of the observed effect. As for the most pharmaceuticals is not known action after their use, it is necessary to implement more and more such measurements, especially for antibiotics and estrogens, which are suspected to persist in environment, either due to disability of biodegradation or continuous discharge.

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Afim de investigar a estabilidade, os fármacos foram submetidos processos de degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendado de degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendadode degradação sob diferentes condições como recomendado pela Conferência pela Conferência pela Conferência pela Conferência pela Conferência pela Conferência pela Conferência pela Conferência pela Conferência Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à utilizando uma coluna C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 μm de tamanho partícula) à temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa temperatura ambiente com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa de ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min e ácido acético 0,1%) fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.mine ácido acético 0,1%) e fase móvel B (acetonitrila) fluxo de 1,0 mL.min -1 em um em um em um em um em um em um tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. Com tempo de eluição 10 min e comprimento onda detecção UV 250 nm. 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Com estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos 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estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol estas condições, o tempo 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tiabendazol 2,8 min, feba2,8 min, feba 2,8 min, feba2,8 min, feba2,8 min, feba 2,8 min, feba2,8 min, feba 2,8 min, feba2,8 min, febantel em 5,7 min, toltrazuril 6,1 min e fluazuron 8,1 min. 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As curvas padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 padrões foram lineares na faixa de concentração 175 - 325 µg.mL325 µg.mL325 µg.mL325 µg.mL325 µg.mL325 µg.mL325 µg.mL -1 (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de (coeficiente de correlação > 0,99). 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Parâmetros de validação, como a seletividade, linearidade, limite de detecçãode detecçãode detecçãode detecçãode detecçãode detecçãode detecçãode detecção de detecção (0,004 (0,004 (0,004 (0,004 (0,004 - 0,118 µg.mL0,118 µg.mL 0,118 µg.mL0,118 µg.mL0,118 µg.mL0,118 µg.mL0,118 µg.mL0,118 µg.mL 0,118 µg.mL-1), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 ), limite de quantificação (0,015 - 0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL0,393 µg.mL-1), precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão 98,51 - 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, 99,94%), e robustez, apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. 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para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina icado com sucesso para o controle de qualidade rotina na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias. na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias. na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias. na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias. na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo farmacêutico e suas formulações farmacêuticas veterinárias.na análise de insumo 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U ovom diplomskom radu uspješno su razvijene metode za određivanje sadržaja i onečišćenja febantela/pirantela/prazikvantela te albendazola/levamisola po principu kvalitete ugrađene u dizajn (QbD). Forsirana razgradnja provedena je na temeljnoj standardnoj otopini pojedinog anthelmintika kako bi se vidjela potencijalna onečišćenja. Ispitana je osjetljivost anthelmintika na temperaturu, oksidans, kiselinu, lužinu i svjetlost (pirantel). Nakon što su definirani uvjeti kojima se postiže 10-30% razgradnih produkata forsirana razgradnja je provedena prema najblažim uvjetima na otopinama febantela/pirantela/prazikvantela i albendazola/levamisola kako bi se procjenila učinkovitost razvijenih metoda. Metode su razvijene na BEH C18 koloni (100 x 2,1 nm, 1,7 μm) na tekućinskom kromatografu ultra visoke djelotvornosti. Optimalni pH za odjeljivanje sastavnica uzorka dobiven je programskim paketom Marvin Benas, a metode su razvijene koristeći programski paket DryLab koji na temelju unesenih podataka stvara virtualne kromatograme i predviđa kromatografske parametre pojedine sastavnice uzorka. Trajanje metode za određivanje sadržaja febantela/pirantela/prazikvantela je 10 min, a za određivanje onečišćenja 19 min, dok je za određivanje sadržaja albendazola/levamisola potrebno 7 min, a za određivanje onečišćenja 9 min. The aim of this study was to develop UPLC method for assay and impurities determination of febantel/praziquantel/pyrantel and albendazole/levamisole using quality by design approach (QbD). Stock solutions were exposed to the influence of temperature, oxidizing agent, acid, base and light (pyrantel) in order to achieve 10-30% degradation products so the potential impurities could be detected. After defining the forced degradation conditions, febantel/pyrantel/praziquantel solution and albendazole/levamisole solution were exposed to the mildest conditions. Based on the collected results, efficacy of separating the components using developed methods was evaluated. Methods were successfully developed using BEH C18 column (100 x 2,1 nm, 1,7 μm) on ultra-performance liquid chromatograph. Optimal pH for separating the components was determined using Marvin Beans software, while methods were developed using DryLab software. Based on the input data, DryLab creates virtual chromatograms and predicts chromatographic parameters for each component. Duration of method for assay determination of febantel/pyrantel/praziquantel is 10 min, while method for impurities determination lasts 19 min. Method for assay determination of albendazole/levamisole lasts 7 min, while duration of method for impurities determination lasts 9 min.

Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2015-12-01T18:03:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Desenvolvimento e validacao de um metodo indicativo de estabilidade por cromatografia liquida de alta eficiencia.pdf: 556894 bytes, checksum: ff26959f8910bb882380c0c2d66297e6 (MD5) Approved for entry into archive by Morgana Andrade (morgana.andrade@ufes.br) on 2015-12-30T15:23:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Desenvolvimento e validacao de um metodo indicativo de estabilidade por cromatografia liquida de alta eficiencia.pdf: 556894 bytes, checksum: ff26959f8910bb882380c0c2d66297e6 (MD5) Made available in DSpace on 2015-12-30T15:23:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Desenvolvimento e validacao de um metodo indicativo de estabilidade por cromatografia liquida de alta eficiencia.pdf: 556894 bytes, checksum: ff26959f8910bb882380c0c2d66297e6 (MD5) Previous issue date: 2015 CNPQ Este trabalho descreve um método analítico para a determinação simultânea de febantel, toltrazuril, tiabendazol e fluazuron em insumos farmacêuticos e suas formulações farmacêuticas veterinárias por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A fim de investigar a estabilidade, os fármacos foram submetidos a processos de degradação sob diferentes condições como recomendado pela Conferência Internacional de Harmonização (ICH). As condições cromatográficas foram otimizadas utilizando uma coluna Zorbax Eclipse Plus C18 (100 x 3,0 mm, 3,5 μm) à temperatura ambiente (25 ºC) com programação gradiente da fase móvel A (solução aquosa de ácido acético 0,1% V/V) e fase móvel B (acetonitrila) e fluxo de 1,0 mL.min-1 em um tempo de eluição de 10 min e comprimento de onda com detecção UV de 250 nm. Nestas condições, o tempo de retenção dos fármacos em estudo foram: tiabendazol em 2,8 min, febantel em 5,7 min, toltrazuril em 6,1 min e fluazuron em 8,1 min. As curvas padrões foram lineares na faixa de concentração de 175 - 325 μg.mL-1 (coeficiente de correlação > 0,99). Parâmetros de validação, como a seletividade, linearidade, limite de detecção (0,004 - 0,118 μg.mL-1), limite de quantificação (0,015 - 0,393 μg.mL-1), precisão (desvio padrão relativo < 3,97%), exatidão (98,51 - 99,94%), e robustez, apresentaram resultados dentro dos padrões aceitáveis. Portanto, o método desenvolvido pode ser aplicado com sucesso para o controle de qualidade de rotina na análise de insumo farmacêutico em formulações farmacêuticas veterinárias. This study describes an analytical method for the simultaneous determination of febantel, toltrazuril, thiabendazole and fluazuron in bulk and their veterinary pharmaceutical formulations using high-performance liquid chromatography (HPLC). In order to investigate stability, pharmaceutical products were submitted to degradation processes under different conditions, such as recommended by the International Conference on Harmonization (ICH). The chromatographic conditions were optimized using a C18 column Zorbax Eclipse Plus (100 x 3,0 mm, 3.5 μm of particle size) under room temperature with gradient programing of mobile phase A (acetic acid watery solution 0.1% W/W) and mobile phase B (acetonitrile) and flow rate of 1.0 mL.min-1 elution time of 10 min, and UV detection wavelength of 250nm. Under these conditions, retention time of study pharmaceuticals was: thiabendazole in 2.8 min; febantel in 5.7 min; toltrazuril in 6.1 min; and fluazuron in 8.1 min. Standard curves were linear at the concentration range of 175 - 325 μg.mL-1 (correlation coefficient > 0.99). Validation parameters, such as selectivity, linearity, detection limit (0.004 – 0.118 μg.mL-1), quantification limit (0.015 – 0.393 μg.mL-1), precision (relative standard deviation < 3.97%), accuracy (98.51 – 99.94%), and robustness showed results within acceptable standards. Therefore, the method developed can be applied successfully to routine quality control in the

Tyrimo tikslas - nustatyti dviejų profilaktinio dehelmintizavimo programų efektyvumą šunų užsikrėtimui zoonotiniais ir kitais virškinamojo trakto helmintais Lietuvos kaimuose, naudojant kombinuotą antihelmintiką (prazikvantelis, pirantelis, febantelis). Baigiamojo darbo rengimo laikotarpis truko nuo 2011 m. iki 2013 m., dehelmentizuotų ir kontrolinių šunų užsikrėtimas buvo tiriamas 5-ių mėnesių laikotarpyje, nuo 2013-05 iki 2013-09. Visi tiriamieji šunys atsitiktinės atrankos būdu buvo suskirstyti į tris grupes. Pirma šunų grupė buvo dehelmintizuota vieną kartą, antra – du kartus su trijų mėnesių pertrauka (2 dehelmintizacijos), o kontrolinės grupės šunys buvo nedehelmentizuojami. Šunų užsikrėtimui virškinimo trakto helmintais nustatyti, kartą per mėnesį buvo tiriamos jų išmatos. Išmatos buvo renkamos nuo žemės prie šuns būdos arba iš aptvaro, kuriame šuo buvo laikomas. Šunų užsikrėtimui virškinimo trakto helmintais nustatyti, išmatų mėginiai buvo tiriami flotacijos metodu su cinko chloridu ir mikroskopuojami. Toxocara kiaušinėlių rūšiai nustatyti, jie buvo matuojami. Išmatų mėginiai, kuriuose buvo rasta Taeniidae kiaušinėlių, buvo nuosekliai praplaunami per neiloninį tinklelį (Mathis et al., 1996) ir surenkami vėliasniems molekuliniams tyrimams. Tyrimo metu buvo nustatyta, kad dažniausiai šunys buvo užsikrėtę Taeniidae cestodais (2,8%), Toxocara nematodais (2,8%), Uncinaria nematodais (5%) ir C. aerophilus (3,9%). Taikant kombinuotą antihelmintiką (prazikvantelis, pirantelis... [toliau žr. visą tekstą] The aim - of the study was to determine the efficiency of two preventive deworming programs on gastrointestinal helminth infection in Lithuanian village dogs, using a combination of anthelmintics (praziquantel, pyrantel and febantel). The performed during - five month period, from 2013-05 to 2013-09. All dogs were randomly divided into three groups. The first group of dogs was dewormed once, a second - twice every three months (2 dewormings), and dogs in control group were not treated. The feces were examined once a month to determine the presence of gastrointestinal helminth infection. Feces were collected from the ground to dog kennels or enclosure in which the dog was kept. The fecal samples were examined by flotation method using zinc chloride flotation fluid and examined microscopically. Toxocara eggs were measured to determine the species. Fecal samples with Taeniidae eggs were washed sequentially through nylon mesh (Mathis et al., 1996) and eggs were isolated for further molecular differentiation. It was found that 2,8% of dogs were infected with cestodes Taeniidae, 2,8% with Toxocara nematodes, 5% with Uncinaria nematodes and 3,9% with C. aerophilus. The treatment with combination of anthelmintics (praziquantel, pyrantel, febantel) was effective reducing infection with Taeniidae cestodes and Toxocara nematodes (since 2,8% to 0,9% and 0%), Uncinaria nematodes (since 5% to 1,8%), C. aerophilus nematodes (since 3,9% to 1%). Deworming program was similarly effective and... [to full text]

Gastrointestinal (GI) parasitism are the most serious problem affecting sheep and goats worldwide. Economic losses caused by GI strongyles are related to decreased production, costs for treatment and prophylaxis and animal death. Effective control of internal parasites in small ruminants is one of the most difficult challenges encountered by veterinary in practice. For control of helminth parasites in grazing animals it is important knowledge of epidemiology of the parasite as it interacts with the host in a specific climatic, management and production environment. Sheep and goats are infected by many of the same GI nematodes, but feeding and management practices alter levels of parasitism between the two ruminants. The most commonly anthelmintics used for helminth control in small ruminants include three chemical groups: Imidazothiazoles/ Pyrimidines (Im/Pm), Benzimidazoles / Probenzimidazoles (Bz/Pbz) and Macrocyclic Lactones (ML). The control of gastrointestinal strongyles infections in goats shows specific patterns. The use of anthelmintics in goats is based upon anthelmintics goats-suited dose rates taking into account the specific pharmacokinetics features of some anthelmintics in this species. Several types of control strategies: deworming programs, grazing management, biological control, supplementary feeding and breeding approaches are discussed

International audience

Gemlik Askeri Veteriner Araştırma Enstitüsü ve Eğitim Merkezi Komutanlığı 'nda bulunan atlardan 96'sının dışkısı parazitolojik yönden incelenmiş, hayvanlardan tümünün (% 100) Strongylidae türleri ile enfekte oldugu belirlenmiş olup 8 (% 8.33) atta aynca Paraseans equonım enfeksiyonu saptanmıştır. Strongylidae türleriyle enfekte hayvanlardan 48'i denemeye alınmış olup, bunlar enfeksiyon şiddeti beşinci gnıp ise albendazolün 7.5 mg/kg dozları ile tedavi edilmiş, altıncı grup ise tedavi edilmeksizin kontrol bırakılmıştır. Uygulanan tedavilerden 14 gün sonra hayvanların gram dışkılarındaki yumuna sayılarında gözlenen azalma febantelin 5 ve 10 mg kg dozlarda verildiği gruplarda sırasıyla % 76.5 ve % 92.0; luxabendazolün 5 ve 10 mg/kg verildiği gruplarda % 91.0 ve % 97.5; albendazoliin 7.5 mg kg dozda uygulandığı grupta ise % 100 olmuştur. İlaçlar kullanıldıkları dozlarda hayvanlarda herhangi bir olumsuz etki meydana getirmemiştir. A sum of 96 horses at different age and sex were subjected to fecal examination for parasitic manifestations. All 96 horses were bıfected itlı Strongylidae spp. (100 percent), and 8 of 96 were also infecled with Parascaris quonını (8.33 percent). Half of the hearth ard ( 48 horses) were u sed in the study, while 8 of 48 were kept as negative controls. Founyh orses were divided into 5 equal study groutps each being consisted of 8 animals. bı the first and second groups 5 and 10 mg/kg of febantel, the third and founh groups 5 and 10 mg/kg hxabendazole, and the last group was treated witlı 7.5 mg/kg of albendazole orally. The fecal examinations canied out 14 days post treatments, and percent reductions of viable eggs per gram off eces were 76.5 to 92 percent for f ebantel, 91.0 to 97.7 percent for luxabendazole, and 100 percent for albendazole treated groutps respectively. No undesired side effects were observed at the dosages applied.

A new, simple, accurate and rapid spectrophotometric method was developed for the quality control of febantel (FBT), in pure and dosage forms. The method was based on the utility of π-acceptors such as 3,6-dichloro-2,5-dihydroxy-p-benzoquinone (CAA) or 2,3-dichloro-5,6-dicyano-p-benzoquinone (DDQ) for the determination of FBT which act as an e-donor to form a highly colored complex with absorption bands at 524 and 579 nm, respectively. The applicability of the method was demonstrated by the determination of the studied drug in commercial tablets and the results were statistically evaluated as per the ICH guidelines. The new spectrophotometric method described in this paper is fast, convenient and has the novelty of carrying out the quantitative determination of FBT in pure and dosage forms.