Search

La acuicultura es uno de los sectores de producción de alimento de más rápido crecimiento que provee actualmente casi la mitad de todo el pescado para consumo humano. Con la acuicultura intensiva en expansión a nivel mundial, los riegos asociados a la aparición y transmisión de bacterias patógenas aumentan. Un probiótico para acuicultura es un suplemento microbiano vivo que proporcionado a través de la dieta o en el agua beneficia la condición de los peces modificando la flora asociada a los mismos y al ambiente, mejorando el valor nutricional de los alimentos, la respuesta inmunológica de los peces, la eficiencia reproductiva, y la calidad del agua y del ambiente que los rodea. El objetivo de esta Tesis fue aislar cepas bacterianas autóctonas de ambientes acuáticos de la región patagónica y estudiar sus propiedades probióticas in vitroe in vivo, para evaluar su potencial utilidad en acuicultura. A partir de muestras del tracto gastrointestinal de organismos acuáticos de Patagonia se obtuvieron 149 aislamientos. Utilizando la técnicade la doble capa, se detectaron 58 aislamientos con actividad antimicrobiana contra alguno de los patógenos indicadores Aeromonas salmonicidasubsp. salmonicida, Lactococcus garvieae, Yersinia ruckeri yCarnobacterium piscicola. De dichos aislamientos, las únicas cepas cuya actividad antimicrobiana fue del tipo extracelular fueron T4, T15 y M5, y sólo contra C. piscicola. Estas cepas correspondieron al género Carnobacterium(99,93% homología en la secuencia del gen ARNr 16S con Carnobacterium maltaromaticumDSM 20345(T)). Además, se sumó al estudio la cepa H16,previamente aislada y parcialmente caracterizada, conactividad antimicrobiana extracelular contra A. salmonicida subsp. salmoniciday V. alginolyticus. La secuencia del gen ARNr 16S de H16 mostró 100% de homología con la de Lactobacillus pentosusJCM 1558(T). Carnobacteriumsp. T4, Carnobacteriumsp. T15, Carnobacteriumsp. M5 y Lactobacillus pentosusH16 mostraron baja resistencia a los antibióticos y ausencia de actividad hemolítica, las cuales son características positivas en cuanto a la seguridad microbiológica de estas cepas. La actividad antimicrobiana contra V. alginolyticusy A. salmonicidasubsp. salmonicidapresentada por H16 estuvo asociada con la producción de ácidos orgánicos. En cambio,la actividad antimicrobiana presentada por las cepas T4, T15 y M5 contra C. piscicolafue causada por la producción de bacteriocinas.Debido a la producción temprana del agente antimicrobiano y a su mayor título de inhibición, T4 fue elegida entre las cepas del género Carnobacteriumpara continuar los estudios. Así, las propiedades probióticas de T4, H16 y Lactococcus lactisTW34 (una cepa proveniente de la colección del laboratorio) fueron evaluadas en ensayos in vitroe in vivo. T4, H16 y TW34 mostraron tolerancia a la bilis de trucha arco iris (TAI) y resistencia a pH ácido, sugiriendo que podrían adaptarse a las condiciones del tracto digestivo de los peces. Además, las tres cepas fueron capaces de adherirse al mucus de TAI. La capacidad de adhesión al mucus es una condición favorable para posibilitar la colonización del intestino del pez. En particular, H16 fue capaz de inhibir la adhesión de V. alginolyticusy A. salmonicidasubsp. salmonicidaal mucus de TAI, bioencapsularse en nauplios de Artemia franciscanay protegerlos de la infección con V. alginolyticus. Estos resultados sugieren que H16 se podría administrar a través de portadores vivos, por ejemplo, en el cultivo de larvas. En ensayos in vivoutilizando el pez cebra como modelo, después de 14 días de administración de T4, H16 o TW34, los recuentos de bacterias totales disminuyeron en el intestino de los peces probablemente a expensas de las enterobacterias y Vibrio spp. que disminuyeron en promedio un orden y medio orden de magnitud, respectivamente. En cambio, las bacterias ácido lácticas (BAL) aumentaron aproximadamente dos órdenes de magnitud en los tres grupos tratados. T4 y TW34 se recuperaron del intestino sólo durante su administración mientras que H16 se recuperó 48 h después de la suspensión de su administración, con una abundancia similar a los valores registrados en el período de administración. Esto demostraría la capacidad de colonización del intestino del pez cebra de H16. En ensayos de crecimiento del pez cebra, también los recuentos de BAL en el intestino de los peces cebra fueron mayores y los de Vibriospp. y enterobacterias menores que los del grupo control sin probiótico, luego de 90 días de tratamiento con T4, H16 o TW34. A su vez, el peso corporal promedio de los peces en los tratamientos con T4 o H16 fue significativamente mayor que en el control. Particularmente, los peces tratados con H16 presentaron una mayor tasa de crecimientoespecífica, un mejor factor de condición y un menor factor de conversión del alimento, comparadocon el control. Así, el presente estudio demostró que existen microorganismos en los ambientes acuáticos de la región patagónica que cumplen con los criterios de selección de probióticos. Además, las cepas T4, H16 y TW34 lograron modificar la microbiota intestinal del pez cebra, promoviendo la población beneficiosa de BAL y disminuyendo otros grupos bacterianos conocidos por incluir patógenos oportunistas. La evaluación in vivodemostró que las cepas L. pentosusH16 y Carnobacteriumsp. T4 tuvieron efectospositivos sobre el crecimiento del pez cebra. Por lo tanto, estas cepas son prometedoras para futuros estudios de desarrollo de alimentos probióticos para acuicultura. Fil: Garcés, Marisa Elisabeth. Universidad Nacional del Comahue. Centro Regional Universitario Bariloche; Argentina.

El objetivo de esta tesis fue estudiar las variaciones cefálicas en dos especies nativas de la Patagonia que se encuentran ampliamente distribuidas y poseen diferentes registros de variación morfológica. Por un lado, Percichthys trucha una especie con gran variación morfológica documentada. Esta variación se relaciona con las longitudes de los huesos maxilar y dentario, altura de la aleta dorsal y longitud de las branquispinas. Por otro lado Odontesthes hatcheri es una especie de la cual no se ha documentado variación morfológica hasta el momento. Se capturaron adultos reproductivos, se fecundaron los ovocitos de cada hembra con el esperma de un solo macho, por fertilización artificial, para disminuir al máximo la variación génica y trabajar con hermanos. Los huevos fueron incubados a distintas temperaturas. Se estudió la variación morfológica de los embriones recién eclosionados, en relación a las temperaturas de incubación y cantidad de vitelo. En larvas, se estudió la variación morfológica en relación a la temperatura de incubación y desarrollo, días después de la eclosión y unidades térmicas acumuladas e inicio de la alimentación exógena. Se capturaron individuos juveniles. Se efectuaron experimentos de inducción, de plasticidad fenotípica mediante el suministro de distintas dietas y estudios de trayectoria morfológica a través de la alimentación con una misma dieta experimental (Tubifex) en el tiempo. Los adultos de O. hatcheri fueron capturados en 12 localidades pertenecientes a la región original de distribución de esta especie. Se tomaron fotografías de la región cefálica de vii todos los individuos. El estudio de la variación morfológica cefálica se realizó con análisis de Morfometría Geométrica, digitalizando en cada imagen puntos homólogos. Las características del desarrollo embrionario, no presentaron diferencias aparentes entre las temperaturas de incubación. En embriones libres recién eclosionados, la variación morfológica está relacionada a la curvatura del embrión sobre el saco vitelino, variando entre parejas y entre temperaturas de incubación. El tamaño del saco vitelino, varió de manera apreciable dentro de parejas y temperaturas de incubación, al momento de eclosión. Las estructuras que mostraron variación en hermanos incubados a la misma temperatura fueron las longitudes del dentario y maxilar y el diámetro del ojo. En juveniles inducimos plasticidad fenotípica, por alimentación diferencial, encontrando un alargamiento cefálico, en relación a los individuos recién capturados. En adultos de O. hatcheri se encontró diversidad morfológica relacionada con la introgresión génica con O. bonariensis, provocada por los planes de siembra en los últimos 50 años. Asimismo, se encontró una relación entre la presunta manifestación morfológica de la integración y la distancia al lugar desde el cual se realizaban dichas siembras. Por otro lado, se verificó la relación con el contenido de clorofila a y la temperatura del agua. Se observó en ambas especies crecimiento compensatorio con canalización del fenotipo a lo largo de la ontogenia, encontrando valores altos de variación morfológica en los embriones libres y larvas. La plasticidad fenotípica manifestada por P. trucha resulta claramente explicativa de la variación morfológica observada en adultos. Llamativamente, O. hatcheri mostró una gran plasticidad fenotípica cefálica, no esperada en función de la diversidad morfológica de los adultos en condiciones naturales. Fil: Crichigno, Sonia. Universidad Nacional del Comahue. Centro Regional Universitario Bariloche. Departamento de Acuicultura; Argentina.

Aplochiton zebra está presente en cuencas de vertiente pacífica de la Patagonia, tanto en poblaciones diadrómicas como encerradas, mayormente fuera del área glacial del Pleistoceno. El análisis de la morfología de A. zebra no mostró dependencia de la forma corporal con el ambiente para individuos con LE > 40 mm, no obstante, los ejemplares menores de los lagos Puelo, Rivadavia y Futalaufquen mostraron diferencias en el diámetro del ojo y en la longitud de la aleta dorsal. Los juveniles del lago Puelo, donde la transparencia del agua es menor, tuvieron ojos más grandes, mientras que los juveniles capturados en el lago Futalaufquen, de mayor transparencia, mostraron los diámetros de ojos más pequeños. La relación entre los componentes principales de la morfología y la dieta en los lagos Puelo y Futalaufquen indica que, en parte, la morfología de los pequeños juveniles podría correlacionarse con la dieta. Los hábitos tróficos de la especie mostraron un cambio del zooplancton al bentos litoral. La captura de ejemplares con peces en sus estómagos amplió el espectro trófico de A. zebra, caracterizada anteriormente como “predador de invertebrados”. El análisis de las interacciones tróficas puso de manifiesto un solapamiento significativo entre la dieta de juveniles de A. zebra y Oncorhynchus mykiss en la zona litoral de los lagos. Aplochiton zebra a su vez fue consumido por adultos de Percichthys trucha y Salmo trutta. Para el análisis del crecimiento se validó la frecuencia de formación de los anillos diarios en los otolitos sagittae de juveniles, mediante experimentos de marcado con oxitetraciclina. Los individuos capturados en los distintos ambientes correspondieron a siete grupos de edad, entre 0+ y 7+ años. Los datos largo estándar - edad de juveniles pequeños (incrementos diarios) se ajustaron el modelo de Laird-Gompertz (LSt= 9.244 e1.881 (1-exp (-0.0162 t))) y los datos largo estándar - edad para los ejemplares mayores (marcas anuales) se ajustaron al modelo de von Bertalanffy (LS= 155.93 (1 - e(-0.624 (t + 0.08)))). A partir de estos datos también se calcularon las tasas de crecimiento para los lagos Puelo y Rivadavia. La determinación de la edad y el estudio gonadal a nivel histológico permitieron estimar la talla - edad de la primera madurez sexual en 129,8 mm LS y 3 años para las hembras con oocitos vitelogénicos y en 116,4 mm LS y 2 años para los machos con espermatozoides. El conteo de oocitos vitelogénicos en ovario permitió establecer la fecundidad en 5700-6400 huevos por hembra. La estimación de la época de desove provino de 4 evidencias: 1) la presencia de huevos en las paredes de concreto de la trampa de peces del arroyo Pocahullo, 2) el estado gonadal de los adultos colectados en el mismo ambiente, 3) el análisis del crecimiento diario en los juveniles del lago Rivadavia y 4) el análisis del crecimiento anual y de la frecuencia de tallas de los ejemplares del lago Puelo. Se estableció una única época de desove por lago, que varía latitudinalmente entre Julio-Agosto (Lago Lácar), Agosto (Lago Puelo) y Septiembre (Lago Rivadavia). Se describió el desarrollo embrionario de la especie, a una temperatura media diaria de 4,5 ºC, que no difirió del resto de los galáxidos. La eclosión ocurrió entre 40 y 42 días después del desove y los embriones libres midieron 9-13 mm LT. Las características térmicas de A. zebra lo ubican entre las especies con amplios rangos de tolerancia térmica (euritérmicas) y, aparentemente, con bajas capacidades de aclimatación. El rango de temperaturas de capturas ocupa una fracción importante (50%) del rango de tolerancia térmica, excediendo incluso el rango de temperaturas de preferencia. Esto indicaría una solución de compromiso entre su óptimo metabólico y cuestiones ecológicas tales como la evasión a la depredación y la disponibilidad de alimento. La información presentada en este trabajo permitió clarificar la distribución y diversos aspectos de la historia de vida de A. zebra, con importantes implicancias en la conservación de la especie. Fil: Lattuca, María Eugenia. Universidad Nacional del Comahue. Centro Regional Universitario Bariloche; Argentina.