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Introdução: O teste de ganho de peso em camundongos (TGPC) para a determinação da toxicidade da vacina pertussis de células inteiras (VPCI) é essencial para aprovar o emprego da vacina adsorvida contra a difteria, o tétano e a pertussis (DTP) nos programas de vacinação infantil. Objetivo: Avaliar a influência do sexo e das linhagens de camundongo (NIH e BALB/c An) no TGPC da VPCI de referência, da toxina pertussis (TP) e de 36 amostras de vacinas DTP. Método: Dez animais de cada sexo e linhagem foram pesados e, em seguida, inoculados intraperitonealmente com 0,5 mL/camundongo da VPCI de referência, de TP (0,25-2,0 μg/animal) ou de vacinas DTP. Grupos-controle para VPCI e TP foram inoculados com PBS e para vacinas DTP empregou-se o cloreto de sódio 0,9% com 100 ppm de timerosal. O teste é satisfatório se não ocorrerem mortes, se o ganho de peso médio (GPM) dos animais inoculados no 3° dia for superior ao inicial e no 7° dia o GPM for igual ou maior que 60% do controle. Os resultados do TGPC foram avaliados pelos critérios em vigência e pelo proposto no 7° dia, no qual o limite inferior do intervalo de confiança de 95% do GPM seja igual ou maior que 60% do controle. Resultados: A VPCI de referência foi satisfatória em fêmeas NIH e BALB/cAn e insatisfatória em machos de ambas as linhagens considerando-se ambos os critérios. O TGPC em ambas as linhagens e sexos revelou baixa sensibilidade na detecção do efeito da TP isolada (0,25-2,0μg/camundongo). As vacinas DTP foram satisfatórias em camundongos NIH de ambos os sexos e em fêmeas BALB/cAn, porém o resultado foi insatisfatório para 14,0% das vacinas DTP em machos BALB/cAn por ambos os critérios. Conclusões: O TGPC de vacinas DTP em camundongos fêmeas de ambas as linhagens deve ser considerado, pois evidenciou-se que fêmeas NIH e BALB/cAn são adequadas para a realização do TGPC. A adoção do critério proposto no 7° dia deve ser estimulado por aumentar a sensibilidade e precisão do TGPC.

The biological activity of Rhinella icterica parotoid secretion (RIPS) and some of its chromatographic fractions (RI18, RI19, RI23, and RI24) was evaluated in the current study. Mass spectrometry of these fractions indicated the presence of sarmentogenin, argentinogenin, (5β,12β)-12,14-dihydroxy-11-oxobufa-3,20,22-trienolide, marinobufagin, bufogenin B, 11α,19-dihydroxy-telocinobufagin, bufotalin, monohydroxylbufotalin, 19-oxo-cinobufagin, 3α,12β,25,26-tetrahydroxy-7-oxo-5β-cholestane-26-O-sulfate, and cinobufagin-3-hemisuberate that were identified as alkaloid and steroid compounds, in addition to marinoic acid and N-methyl-5-hydroxy-tryptamine. In chick brain slices, all fractions caused a slight decrease in cell viability, as also seen with the highest concentration of RIPS tested. In chick biventer cervicis neuromuscular preparations, RIPS and all four fractions significantly inhibited junctional acetylcholinesterase (AChE) activity. In this preparation, only fraction RI23 completely mimicked the pharmacological profile of RIPS, which included a transient facilitation in the amplitude of muscle twitches followed by progressive and complete neuromuscular blockade. Mass spectrometric analysis showed that RI23 consisted predominantly of bufogenins, a class of steroidal compounds known for their cardiotonic activity mediated by a digoxin- or ouabain-like action and the blockade of voltage-dependent L-type calcium channels. These findings indicate that the pharmacological activities of RI23 (and RIPS) are probably mediated by: (1) inhibition of AChE activity that increases the junctional content of Ach; (2) inhibition of neuronal Na+/K+-ATPase, leading to facilitation followed by neuromuscular blockade; and (3) blockade of voltage-dependent Ca2+ channels, leading to stabilization of the motor endplate membrane.