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Ponencias [ES] La terapia contra el cáncer ha experimentado importantes avances que se han producido con una celeridad inusitada. El arsenal terapéutico se ha intensificado en eficacia contando con los citostáticos o lo que se conoce comúnmente como “quimioterapia”, fármacos de diferentes mecanismos de acción que inducen la apoptosis o muerte celular pero de su escasa especificidad para atacar exclusivamente la célula tumoral, afectando también a células sanas. Recientemente aparecen las nuevas terapias dirigidas contra un objetivo concreto, una proteína o un receptor de membrana ubicada en la célula tumoral,. Las primeras terapias antidiana introducidas fueron anticuerpos monoclonales de administración intravenosa, sin embargo en los últimos años hemos asistido a un verdadero “boom” con el desarrollo de una nueva familia de terapias dirigidas orales, llamadas inhibidores de tirosinquinasa. Estas novedades en apoyo a la cirugía y la oncorradiología con sus avances espectaculares de los últimos años han contribuido de forma muy importante a una mejora del control de la enfermedad o en la calidad de vida de los pacientes.[EN] Cancer therapy has undergone major developments that have occurred with unusual speed. The therapeutic arsenal has intensified in effectively having cytostatic or what is commonly known as “chemo” drugs of different mechanisms of action that induce apoptosis or cell death but its poor specificity to attack only the tumor cell, affecting also healthy cells. New therapies directed against a specific target, a protein or a membrane receptor located on the tumor cell recently shown, The first antidiana therapies were introduced intravenously administered monoclonal antibodies, however in recent years have witnessed a real “boom” with the development of a new family of oral targeted therapies, called tyrosine kinase inhibitors. These developments in support of surgery and oncoradiología with its spectacular advances in recent years have contributed very significantly to improved disease control or quality of life of patients. No

Breast cancer is a burden for western societies, and an increasing one in emerging economies, because of its high incidence and enormous psychological, social, sanitary and economic costs. However, breast cancer is a preventable disease in a significant proportion. Recent developments in the armamentarium of effective drugs for breast cancer prevention (namely exemestane and anastrozole), the new recommendation from the National Institute for Health and Care Excellence to use preventative drugs in women at high risk as well as updated Guidelines from the US Preventive Services Task Force and the American Society of Clinical Oncology should give renewed momentum to the pharmacological prevention of breast cancer. In this article we review recent major developments in the field and examine their ongoing repercussion for breast cancer prevention. As a practical example, the potential impact of preventive measures in Spain is evaluated and a course of practical actions is delineated.

L’oncohematologia ha assistit en les últimes dècades a importants avenços en el tractament i supervivència. La toxicitat derivada de la quimioteràpia clàssica i la necessitat de millorar l’eficàcia i tolerància als tractaments han fet que es desencadene un allau d’activitat investigadora que constantment proporciona fruits. Gran part d’aquest esforç s’ha enfocat al desenvolupament de «teràpies diana» dirigides contra determinades alteracions funcionals, clau per a la supervivència de la cèl·lula tumoral. Així es pretén aconseguir major eficàcia en el tractament i que el pacient pague un menor cost en toxicitat. Avenços en altres disciplines de l’oncologia com l’epidemiologia, la cirurgia i la radioteràpia dirigida han contribuït així mateix a fer de l’oncologia una àrea en progrés constant. En definitiva, es comença a albirar un futur ple d’esperança per al pacient amb càncer, un futur, alhora, apassionant per al metge i l’investigador.

La posició de la dona dins de l’àmbit científic ha evolucionat positivament de manera signifi cativa en els últims anys, especialment en l’última dècada amb l’aprovació de mesures per a aconseguir la igualtat efectiva entre dones i homes. No obstant això, tot i que el nombre de dones és cada vegada major en les universitats, és evident que falta molt de camí per recórrer.

La última década la podríamos definir como la más prolífica en cuanto a la generación de conocimientos en el área de la biología molecular del cáncer, y en especial del cáncer de mama. Hemos sido testigos en los últimos diez años de un cambio radical en nuestra manera de entender el cáncer de mama a nivel diagnóstico y terapéutico. Gracias a un avance tecnológico sin precedentes con la aparición y la simplificación de técnicas de biología molecular de alto rendimiento, si bien no se nos ha desvelado la verdadera naturaleza de esta enfermedad, sí hemos podido ver que se trata de una patología que implica mecanismos biológicos complejos a distintos niveles, que precisa de la participación de varias vías de señalización interconectadas entre sí, que no sólo es importante la célula desregulada, sino también el microambiente en el que se desregula y las características constitutivas del paciente, y que todos estos factores influyen en la aparición de la neoplasia, su desarrollo y su respuesta al tratamiento. Todas estas aportaciones nos han permitido entender que la enfermedad neoplásica es única en cada paciente, y con ello avanzar un poco más hacia el tratamiento personalizado.

The 4-5% of the breast cancer patients have metastases in the eye. We present the case of a 30-year-old woman with an infiltrant duct carcinoma of the breast pT2N2M0 HER2 positive. Six months after primary radical treatment she had a systemic relapse with multiples metastatic sites, so several treatment with trastuzumab in combination with chemotherapy were started. After 4 years patient presented multiple white-coloured micronodules in the iris of the right eye. Only a 3-7.8% of ocular metastases are located in the iris. With mantenaince therapy with trastuzumab natural history of the illness has changed. Several studies had analyzed if metastases in the brain during treatment with trastuzumab have increased in comparison with the pretrastuzumab era. The infrequent presentation of metastases in the anterior uveal makes difficult to establish if it is an spontaneous fact or if it is favoured by trastuzumab treatment.

El 4-5% de las pacientes con cáncer de mama presentan metástasis oculares. Presentamos a una mujer de 30 años con un carcinoma ductal infiltrante de mama pT2N2M0 HER2 positivo. A los seis meses de finalizar el tratamiento presentó una recaída sistémica con múltiples localizaciones metástaticas por lo que inició tratamientos combinados de trastuzumab mantenido y quimioterapia. Tras 4 años con trastuzumab de mantenimiento presenta en iris de ojo derecho multiples micronódulos blanquecinos. Solo un 3-7.8% de las metástasis oculares se localizan en el iris. Con la terapia mantenida con trastuzumab la historia natural de la enfermedad avanzada ha cambiado, diversos estudios analizaron si existe mayor frecuencia de metástasis cerebrales en pacientes tratados con trastuzumab que en la era pretrastuzumab. La infrecuente aparición de metástasis en úvea anterior hace difícil establecer si es un hecho espontáneo o si está favorecido por el tratamiento con trastuzumab.

El 4-5% de las pacientes con cáncer de mama presentan metástasis oculares. Presentamos a una mujer de 30 años con un carcinoma ductal infiltrante de mama pT2N2M0 HER2 positivo. A los seis meses de finalizar el tratamiento presentó una recaída sistémica con múltiples localizaciones metástaticas por lo que inició tratamientos combinados de trastuzumab mantenido y quimioterapia. Tras 4 años con trastuzumab de mantenimiento presenta en iris de ojo derecho multiples micronódulos blanquecinos. Solo un 3-7.8% de las metástasis oculares se localizan en el iris. Con la terapia mantenida con trastuzumab la historia natural de la enfermedad avanzada ha cambiado, diversos estudios analizaron si existe mayor frecuencia de metástasis cerebrales en pacientes tratados con trastuzumab que en la era pretrastuzumab. La infrecuente aparición de metástasis en úvea anterior hace difícil establecer si es un hecho espontáneo o si está favorecido por el tratamiento con trastuzumab. The 4-5% of the breast cancer patients have metastases in the eye. We present the case of a 30-year-old woman with an infiltrant duct carcinoma of the breast pT2N2M0 HER2 positive. Six months after primary radical treatment she had a systemic relapse with multiples metastatic sites, so several treatment with trastuzumab in combination with chemotherapy were started. After 4 years patient presented multiple white-coloured micronodules in the iris of the right eye. Only a 3-7.8% of ocular metastases are located in the iris. With mantenaince therapy with trastuzumab natural history of the illness has changed. Several studies had analyzed if metastases in the brain during treatment with trastuzumab have increased in comparison with the pretrastuzumab era. The infrequent presentation of metastases in the anterior uveal makes difficult to establish if it is an spontaneous fact or if it is favoured by trastuzumab treatment.

Objetivo: en este artículo se presenta un estudio multicéntrico realizado por la Sociedad Catalana de Cirugía Ortopédica y Traumatología sobre el tratamiento de la necrosis avascular de la cabeza femoral del adulto. Material y método: se elaboró un protocolo de encuesta que fue enviado a 54 centros, obteniéndose respuesta de 28 de ellos. En total se recogieron datos de 556 pacientes. Resultados: en 132 pacientes (26,7%) de estadios 0, I, II y III de Ficat se utilizó el foraje-biopsia descompresivo. Los resultados fueron buenos en 73 casos (55,3%), regulares en 15 (11,36%) y malos en 44 (33,3%). Ningún caso de estadio I II obtuvo un buen resultado. En 343 pacientes de estadios 11, III y IV se realizó artroplastia de cadera (no cementada en un 52,5%, cementada en un 24,5%, híbrida en un 23%). En 13 casos se llevó a cabo osteotomía de cadera. Conclusiones: el foraje-biopsia descompresivo debe utilizarse en los estadios iniciales de la enfermedad. La osteotomía debe emplearse en los estadios intermedios. La artroplastia de cadera debe realizarse en las fases avanzadas (estadio III con más de 130 grados de ángulo de Kerboul y estadio IV).

Introduction: Breast cancer is a heterogeneous disease consisting of uncontrolled growth of epithelial cells originating in the ducts or breast lobules. It is currently the most diagnosed cancer worldwide and the fifth cause of cancer-related death in general population, but the first cause in women. Breast cancer incidence is higher in developed countries due to increased risk factors and to increased and earlier detection by mammography screening, which considerably reduces mortality. This is the reason why transitioning countries have higher mortality despite having lower incidence. Regarding the origin of the disease, it is evidenced that the pathways implicated in normal development of the mammary gland are deregulated in breast cancer disease. Nevertheless, despite several models have been proposed, the specific mechanism by which breast cancer is originated and how its formation and progression occur is still unknown. Between the risk factors, genetic risk factors are responsible of around 10% of breast cancers, being BRCA1 and BRCA2 the most common inherited mutations. Non-genetic risk factors are related to ethnicity, breast conditions or previous breast pathologies and lifestyle factors, such as hormonal therapy, alcohol consumption, overweight, lack of physical activity and late age at giving birth or not breastfeeding. Diagnosis in the very initial steps of the disease is one of the major issues in the clinic and enables efficacy of the therapies and reduces the risk of breast cancer death. For this issue, mammography screening has been demonstrated to be the best strategy and is implemented in most of the developed countries. Mammography together with clinical examination, imaging and needle biopsy are performed for diagnosis. After diagnosis, breast tumors should be classified according to TNM stage, mainly based of tumor size, lymph node involvement and metastasis; histological grading based on differentiation; histological subtypes that include ductal invasive carcinoma, lobular invasive carcinoma and other special subtypes, and pathological or intrinsic subtypes. Currently pathological subtype, which is based on expression of estrogen and progesterone receptors, HER2 and Ki67 by immunohistochemistry, determines treatment decision. Molecular intrinsic subtyping is based on gene expression in tumor tissue and classifies breast cancer into six subtypes. This classification has demonstrated potential value to predict prognosis and treatment response. However, it is not fully applicable to the clinic nowadays. Regarding treatment, locoregional therapy of early breast cancer consists of a surgery and radiation therapy if necessary. For systemic treatment, neoadjuvant or adjuvant strategies could be performed with endocrine therapy in luminal tumors, HER2 blockade in HER2+ breast cancer and chemotherapy, that could be used in all subtypes but is the standard of care for triple negative breast cancer. HER2+ breast cancer presents overexpression of HER2 receptor which, upon dimerization, leads to activation of downstream pathways involved in proliferation, angiogenesis, survival, differentiation, apoptosis, invasion and metastasis. Between them, RAS/RAF, MAPK, JAK/STAT and PI3K/AKT/mTOR are the most studied. HER2+ breast cancer accounts for 15-20% of the cases and is characterized by an aggressive biological and clinical behaviour which correlates with poor prognosis. However, development of targeted therapies against HER2 has considerably improved HER2+ breast cancer patients’ outcome and changed the paradigm of clinical management. Based on this fact, a variety of anti-HER2 agents have been approved for the treatment of HER2+ breast cancer and others are under evaluation. The antibody trastuzumab was the first anti-HER2 agent to be developed and approved and, in combination with pertuzumab, remains the standard of care for HER2+ breast cancer. Despite the evident improvement of HER2+ breast cancer disease management and the effectiveness of anti-HER2 therapies, still around 20% of HER2+ breast cancer patients experience relapse leading to metastatic disease, that nowadays is considered incurable. Disease relapse may occur due to resistance to anti-HER2 agents. Thus, the main challenge in the last years has been to decipher the mechanisms underlying anti-HER2 resistance, to identify biomarkers to predict treatment response and to develop new therapeutic strategies to overcome resistance. Four major mechanisms have been described to be involved in anti-HER2 therapy resistance: impediments of drug binding to HER2 due to upregulation of mucines or HER2 isoforms; failure to trigger immune response because of Fc receptor dysfunctions; activation PI3K/AKT/mTOR downstream signaling pathway due to PIK3CA mutations, loss of PTEN or AKT deregulation; and upregulation of alternative pathways such as cell cycle, SRC or FASN. Crosstalk with other receptors has also been described to occur and to activate alternative pathways. Between them, crosstalk with hormone receptors, HER family members and other receptors tyrosine kinase have been involved in anti-HER2 resistance. Epithelial to mesenchymal process is implicated in metastasis, invasion, migration and colonization and has been related to drug resistance, including anti-HER2 resistance. Some receptors tyrosine kinase, such as AXL and MET, have been described to be involved in this process and subsequently take part in metastasis and mechanisms of therapy resistance. AXL can be activated by ligand-dependent or independent mechanism and by dimerization, leading to activation of downstream signaling pathways, such as PI3K/AKT/mTOR, JAK/STAT, NF-κB, and RAS/RAF/MEK/ERK that play major roles in tumor cell survival, migration, invasion, anoikis, angiogenesis and drug resistance. AXL is overexpressed in several types of cancer including breast cancer and correlates with worse prognosis. In breast cancer, it was shown to be a driver for metastasis and to be essential for epithelial to mesenchymal process, besides, AXL has been proposed as a therapeutic target in triple negative breast cancer. Regarding drug resistance, associations between AXL and chemotherapy or targeted drugs resistance have been reported in several cancers. In the particular case of breast cancer, AXL is involved in chemo- and radio-resistance and EGFR-targeted therapy resistance in triple negative breast cancer. However, the role of AXL in anti-HER2 therapy resistance has been poorly investigated. Several AXL-targeted therapies have been shown to supress tumor growth and metastasis and to potentiate the effect of chemotherapy and targeted therapies and some of them are currently under clinical evaluation in solid tumors. Given the knowledge of AXL's role in resistance to therapy, future studies will help to determine the translational application of AXL as a biomarker of treatment response and as a therapeutic target in HER2+ breast cancer. Objectives: In the frame of the antecedents described above, we hypothesize that AXL could be involved in acquisition of trastuzumab resistance in HER2+ breast cancer maybe due to crosstalk with HER2 receptor. Thus, the present work is focused on the study of the role of AXL in acquisition of trastuzumab resistance, as well as its applicability as a therapeutic target and prognostic biomarker. Methods: In this study AU565, BT474 and SKBR3 HER2+ breast cancer cell lines were selected for in vitro experiments and acquired trastuzumab-resistant cell lines (AU565R, BT474R and SKBR3R) were generated by exposure to increasing concentrations of the drug for prolonged time. Innate trastuzumab-resistant HCC1954 HER2+ and MDA-MB-231 triple negative breast cancer cell lines were used as controls. Tumor tissue samples were obtained from patients with early-stage HER2+ breast cancer treated at the Hospital Clínico Universitario de Valencia by standard guidelines, after signature of informed consent and ethical approval of the study. Data from neoadjuvant phase II PAMELA study were used to analyze gene expression in this cohort of HER2+ breast cancer patients. To evaluate changes in gene expression, mRNA levels were measured by real time quantitative PCR on RNA isolated from breast cancer cells and patients’ samples. For protein expression analysis, western blot, immunohistochemistry and flow cytometry were performed and co-immunoprecipitation and proximity ligation assay were used to evaluate dimerization between AXL and HER2 proteins. Apoptosis and viability were analyzed with Annexin V and propidium iodide staining by flow cytometry. To study the effect of the loss and gain of function of specific proteins, small-interfering RNAs or cDNA overexpression plasmids were transfected into the cells by lipofectamine reagent and several functional assays were carried out. Proliferation was measured by WST-1 assay and migration and invasion were studied by wound healing and transwell assays. Mammospheres were generated from BT474R cells and number of live cells was measured by flow cytometry with propidium iodide. Patient-derived xenograft model was obtained from a HER2+ breast cancer patient. Two in vitro trastuzumab-resistant patient-derived xenograft cell lines were established by subculture in presence of increasing concentrations of trastuzumab and five trastuzumab-resistant in vivo patient-derived xenografts were generated by transplantation of tumor tissue into NOD-SCID mice treated with trastuzumab and grown with serial passages. 3D models were also generated from patient-derived xenograft cell lines and in vivo models in which viability and apoptosis were measured after treatment. For the in vivo experiment, NOD-SCID mice were injected in mammary fat pad with trastuzumab-resistant patient-derived xenograft tumors (N=30), randomly divided into 4 groups and treated with either vehicle, trastuzumab, TP-0903 or a combination of both. Tumor size and body weight were measured during follow-up and animals were sacrificed at the end of the experiment or when institutional euthanasia criteria for tumor size and health condition were reached. In-silico analysis were performed for gene expression studies in public databases and for transcription factor binding site prediction. The prognostic value of AXL and GAS6 mRNA expression was analyzed in 252 HER2+ breast cancer patients with available data from Kaplan-Meier Plotter Software. To identify predicted putative binding sites of JUNB in AXL promoter JASPAR 2022 and PROMO software were used. Statistical analysis was performed using GraphPad Prism and R software. Results were expressed as means ± SD, means ± SEM for in vivo tumor size and median and interquartile for mRNA expression in patients’ samples. Normality was checked using Shapiro-Wilks’s test. Mean comparison was carried out using two-tailed t-Student test. All experiments were reproduced at least three times. mRNA expression in patients’ cohort was dichotomized by the median and ROC analysis was carried out. Disease-free survival and overall survival were described graphically using Kaplan-Meier curves and differences were evaluated using log-rank test. Selection of the best model was done according to Akaike’s Information Criterion. To identify AXL gene expression changes in PAMELA trial we used two-tailed paired t-tests. Two-way ANOVA with Bonferroni correction post-hoc was used for in vivo statistical analysis. The cut-off for statistical significance in all tests was p-value

With current standard of care adjuvant therapy, approximately 25-30% of women with high risk early stage HR+/HER2- breast cancer experience relapse. The preoperative platform offers an opportunity to interrogate mechanisms of drug resistance that, in turn, could inform the choice of adjuvant therapy. We report herein a study where we performed targeted DNA sequencing and whole transcriptome analysis on whole tumor sections from a cohort of 68 operable ER+ breast cancers treated with the aromatase inhibitor letrozole for a median of 7.2 months before surgery, and a with a median follow up of 5 years. We found that resistant tumors were enriched in clinically actionable mutation and showed an enrichment in expression of genes involved in proliferation. Resistant tumors show a high degree of heterogeneity among them upregulating a variety of transcriptional programs. A common feature among resistant tumors was a co-expression of several genes dependent on the E2F4 transcription factor. We defined an E2F4 activation signature that define ER+ breast cancer with poor prognostic features and is sensitive to treatment with CDK4/6 inhibitors. This signature is of potential use for the identification of patients with ER+ breast cancer candidates for adjuvant therapy with CDK4/6 inhibitors in combination with antiestrogens. Our study also identifies a novel gene, PRR11 (Proline rich 11), as a putative driver of endocrine resistance in ER+ breast cancers and that merits further investigation to understand its mechanisms of action. With current standard of care adjuvant therapy, approximately 25-30% of women with high risk early stage HR+/HER2- breast cancer experience relapse. The preoperative platform offers an opportunity to interrogate mechanisms of drug resistance that, in turn, could inform the choice of adjuvant therapy. We report herein a study where we performed targeted DNA sequencing and whole transcriptome analysis on whole tumor sections from a cohort of 68 operable ER+ breast cancers treated with the aromatase inhibitor letrozole for a median of 7.2 months before surgery, and a with a median follow up of 5 years. We found that resistant tumors were enriched in clinically actionable mutation and showed an enrichment in expression of genes involved in proliferation. Resistant tumors show a high degree of heterogeneity among them upregulating a variety of transcriptional programs. A common feature among resistant tumors was a co-expression of several genes dependent on the E2F4 transcription factor. We defined an E2F4 activation signature that define ER+ breast cancer with poor prognostic features and is sensitive to treatment with CDK4/6 inhibitors. This signature is of potential use for the identification of patients with ER+ breast cancer candidates for adjuvant therapy with CDK4/6 inhibitors in combination with antiestrogens. Our study also identifies a novel gene, PRR11 (Proline rich 11), as a putative driver of endocrine resistance in ER+ breast cancers and that merits further investigation to understand its mechanisms of action.

INTRODUCCIÓN: El cáncer de mama es el tumor más frecuente en la población femenina tanto en países desarrollados como en los que se encuentran en vías de desarrollo. La incidencia de cáncer de mama se ha ido incrementando a un ritmo de 0,4% por año desde 2004. La detección precoz es el elemento fundamental que marca el buen pronóstico de las pacientes. Para ello son fundamentales las pruebas de imagen. La mamografía es la técnica de elección para el cribado poblacional. Sin embargo en las mamas más densas, la sensibilidad de la prueba puede disminuir hasta un 40%. Es por ello que otras pruebas se suman al estudio preoperatorio de las pacientes con cáncer de mama como la ecografía o la resonancia magnética nuclear (RMN). Ambas sumadas a la mamografía han demostrado aumentar la sensibilidad de detección pero generan un elevado número de falsos positivos que llevan a biopsias y seguimientos innecesarios. Es por ello que nuevas pruebas de imagen basadas en la medicina nuclear, tan en auge en el momento actual, se están desarrollando para mejorar el estudio de estas pacientes. Son las denominadas PET mamodedicadas (dbPET). Dentro de ellas se encuentra el dispositivo objeto de estudio de esta tesis basado en la Mamografía mediante Imagen Molecular PET (MAMMI-PET). Esta novedosa herramienta ha sido escasamente estudiada por lo que proponemos un trabajo en el que se calculen los verdaderos parámetros de validez y seguridad de la misma en el estudio de pacientes con cáncer de mama ya diagnosticado. HIPÓTESIS: El MAMMI-PET mejora el estudio preoperatorio de las pacientes con carcinoma de mama aumentando la detección de focos tumorales y ayudando a definir la naturaleza benigna o maligna de las lesiones mamarias. MATERIAL Y MÉTODOS: Estudio observacional prospectivo, descriptivo y analítico sobre una muestra de pacientes con cáncer de mama confirmado histológicamente, atendidas en el Hospital General de Valencia entre enero de 2017 y noviembre de 2018. Los hallazgos descritos en el estudio anatomopatológico (AP) de la pieza quirúrgica se han tomado como gold standard sobre el que establecer comparaciones con los hallazgos descritos por el MAMMI-PET. Para ello se ha evaluado el grado de concordancia entre ambos y se han calculado los parámetros de validez y seguridad de la prueba. Se ha realizado el mismo estudio comparativo con las otras tres pruebas de imagen (mamografía, ecografía y RMN) y se ha evaluado la existencia de diferencias entre la sensibilidad del MAMMI-PET y el resto de pruebas. Asimismo se ha estudiado qué prueba define mejor el tamaño real de las lesiones en cada uno de los tres diámetros espaciales. En el caso de las pacientes que recibieron quimioterapia (QT) neoadyuvante, todas las pruebas se repitieron tras el tratamiento y en un periodo inferior a un mes antes de la cirugía. RESULTADOS: Se han evaluado los datos de 32 pacientes y un total de 44 lesiones (36 malignas y 8 benignas). 32 lesiones fueron carcinomas ductales infiltrantes (CDI) y 4 carcinomas lobulillares infiltrantes (CLI). 7 pacientes fueron excluidas del estudio. La edad media de las pacientes fue de 51.50 ± 11.68. Veinte pacientes recibieron QT y 2 fueron diabéticas. El grado de concordancia Kappa entre el MAMMI-PET y la AP fue débil (K 0,349, p-valor 0,001) con una tasa de concordancia del 84,3% para lesiones benignas y del 62,6% para malignas. Los parámetros obtenidos para la prueba fueron: sensibilidad 75%, especificidad 57,1%, valor predictivo positivo 81,8%, valor predictivo negativo 47,1%. La sensibilidad de la prueba mejoró en el grupo sin QT y de forma estadísticamente significativa en el subtipo Luminal B al compararlo respecto al Luminal A. No se evidenciaron diferencias estadísticamente significativas al comparar la sensibilidad del MAMMI-PET con la del resto de pruebas de imagen. La mejor concordancia se obtuvo para los diámetros cráneo-caudal y latero-lateral medidos por RMN. CONCLUSIONES: No se han evidenciado diferencias en la sensibilidad de detección de focos tumorales entre el MAMMI-PET y las otras pruebas de imagen. Presenta una buena sensibilidad y un elevado valor predictivo positivo. Esto implica que si una lesión es descrita como dudosa por alguna o varias de las otras tres pruebas de imagen y definida como patológica por el MAMMI-PET, con una probabilidad muy alta la lesión será maligna. INTRODUCTION: Breast cancer is the most frequent tumor in the female population in both developed and developing countries. Its incidence has been increasing at a rate of 0,4% per year since 2004. Early detection is the key element that marks a good prognosis and for this, imaging tests are essential. Mammography is the gold standard technique for population screening. Nevertheless, in patients with dense breast tissue the sensitivity of this test can decrease up to a 40%. Other imaging tests can be performed as part of the preoperative study like ultrasound or Magnetic Resonance Imaging (MRI). Both of them, added to mammography have demonstrated an increase in the sensitivity of tumor detection. However, this association generates an elevated number of false positive that lead to unnecessary biopsies and follow ups. Because of this, new imaging tests based on nuclear medicine are being developed to improve the study of these patients. There are different dedicated breast Positron Emission Tomography (dbPET) scanners available on the market. One of them is the MAMmography with Molecular Imaging (MAMMI) PET. This novel tool has been poorly studied. The aim of this study is to define the security and validity parameters of this new device in the preoperative evaluation of patients with breast cancer diagnosis. HIPOTHESIS: The MAMMI-PET improves the preoperative study in patients with breast cancer, increasing the detection rate of tumoral foci. It also helps to determine the benign or malignant nature of breast lesions. MATERIAL AND METHODS: Prospective, descriptive and analytical observational study on a patient sample with confirmed histologically breast cancer treated at the General University Hospital of Valencia from January 2017 to November 2018. Findings from the anatomopathological study of the surgical specimen were used as the gold standard to establish comparisons with the findings described by the MAMMI-PET. The degree of concordance between them has been evaluated and the security and validity parameters of this imaging test have been calculated. The same comparisons were estimated for the other three major tests (mammography, ultrasound and MRI). Sensitivity differences between the MAMMI-PET and the rest of the imaging tests were evaluated. We also studied which of the tests best defined the real size of the breast lesions in each of the three spatial diameters. In patients who received neoadjuvant chemotherapy (NAC), all the tests were repeated after the treatment ended and in a period one month prior to surgery. RESULTS: 39 patients were enrolled in the study but 7 were finally excluded. Data from 32 patients and 44 lesions (36 malignant and 8 benign) were evaluated. There were 32 invasive ductal carcinoma (IDC) and 4 invasive lobular carcinomas (ILC). The mean age of the patients was 51,50 ± 11,68. Twenty patients received chemotherapy and 2 were diabetic. Kappa concordance coefficient between MAMMI-PET and pathological study of the surgical specimen was weak (K=0,349, p-value 0,001) with a concordance rate of 84,3% for benign lesions and 62,6% for malignant ones. The parameters obtained from the contingency table were: sensitivity 75%, specificity 57,1%, positive predictive value 81,8% and negative predictive value 47,1%. The sensitivity of the test improved in the chemotherapy group and in the Luminal B subtype with statistically significant difference when compared to Luminal A. No statistically significant differences were observed when comparing the sensitivity of the MAMMI-PET with the rest of the imaging tests. The best level of agreement was obtained for the cranio-caudal and lateral-lateral diameters measured by MRI. CONCLUSIONS: No differences in tumor foci detection sensitivity between MAMMI-PET and other imaging tests have been evidenced. MAMMI-PET has shown a good sensitivity and a high positive predictive value. Consequently a lesion characterized as malignant by MAMMI-PET with a very high probability will be malignant.

El cáncer de mama tiene la tasa de incidencia más alta de todos los cánceres en mujeres en todo el mundo. Este cáncer suele tener un excelente pronóstico con un 80% de supervivencia. Aunque las mujeres menores de 35 años representan el 3-4% del total de casos diagnosticados, sus tumores se caracterizan por ser más grandes, más proliferativos y con una mayor representación de subtipos más agresivos y de peor pronóstico. Las transformaciones neoplásicas se asocian con alteraciones en la metilación del ADN, que incluyen tanto la hipometilación global como la hipermetilación específica. Por otro lado, los miRNAs son pequeñas moléculas no codificantes con un papel importante en la regulación de la expresión génica como parte de la maquinaria epigenética, pero también pueden modificarse epigenéticamente mediante la metilación del ADN. Uno de los objetivos del presente trabajo es establecer un perfil de expresión de miRNAs característico de mujeres menores de 35 años utilizando líneas celulares de cáncer de mama disponibles comercialmente e identificar un buen modelo celular para el estudio del cáncer de mama en mujeres jóvenes. Además, queremos evaluar las diferencias de metilación (metilación global y metilación de genes que codifican miRNAs) entre mujeres jóvenes y mayores con cáncer de mama y evaluar su edad biológica a través del análisis de la metilación del ADN. El perfil de expresión de miRNAs se llevó a cabo utilizando Affymetrix Genechip miRNA 2.0 microarray que incluye 1 100 miRNAs humanos cuya expresión se analizó en 5 líneas celulares de cáncer de mama: HCC1500, HCC1937, MDA-MB-231, MDA-MB-468 y HCC1806. Además, los estudios de metilación del ADN se realizaron con Illumina Human Methylation 850k Beadchip, analizando 21 muestras de mujeres jóvenes y 13 de mayores. Se identificó un perfil de expresión de miRNAs diferente entre líneas celulares de cáncer de mama de mujeres mayores y jóvenes que se comparó con el perfil de miRNAs identificado en pacientes con cáncer de mama. Nuestro estudio nos ha permitido caracterizar las dos líneas celulares de cáncer de mama, HCC1937 y HCC1500, ambas de mujeres jóvenes, como buenos modelos para el estudio del cáncer de mama en pacientes menores de 35 años. Por otro lado, observamos un perfil de metilación diferente entre los grupos de edad, también en las regiones reguladoras de genes que codifican miRNAs. Específicamente, nuestros resultados mostraron una hipometilación global en tumores de mujeres jóvenes, así como una hipermetilación específica, centrada principalmente en las regiones “opensea” del genoma, en pacientes más jóvenes. También encontramos una aceleración en la edad epigenética de los tumores de mujeres jóvenes que podrían aumentar la inestabilidad del genoma. HDAC5 estaba significativamente hipometilado y sobreexpresado en mujeres jóvenes con cáncer de mama. Los estudios funcionales con líneas celulares mostraron una reducción significativa en la proliferación y migración cuando el gen HDAC5 fue inhibido por el inhibidor de HDACi, LMK-235. Esta inhibición fue evidente en los subtipos moleculares triples negativos de ambos grupos de edad. La hipometilación del miR-124-2 se asoció con una peor supervivencia en pacientes con cáncer de mama menores de 35 años en comparación con las mujeres mayores. Las diferencias observadas en pacientes jóvenes con cáncer de mama en nuestro trabajo y otros, refuerzan la hipótesis de que el cáncer de mama que ocurre en mujeres muy jóvenes tiene características biológicas potencialmente únicas, más agresivas y complejas y se deben hacer más esfuerzos para lograr un tratamiento más personalizado. Breast cancer has the highest incidence rate of all cancers in women worldwide. This cancer usually has an excellent prognosis with an 80% of survival rates. Although women under 35 years of age represent 3-4% of the total cases diagnosed, their tumours are characterized by being larger, more proliferative, and with an overrepresentation of more aggressive subtypes and worse prognosis. Neoplastic transformations are associated with alterations in DNA methylation, including both global hypomethylation and gene-specific hypermethylation. On the other hand, miRNAs are small non-coding molecules of RNA with an important role in the regulation of gene expression as part of the epigenetic machinery, but they can also be epigenetically modified by DNA methylation. One of the aims of the present work is to establish a miRNA expression profile characteristic of women younger than 35 years using breast cancer cell lines commercially available and identify a good cellular model for the study of breast cancer in young women. Moreover, we want to evaluate methylation differences (global methylation and methylation of genes encoding miRNAs) between young and old women with breast cancer and their DNA epigenetic age. The miRNA expression profile was carried out using Affymetrix Genechip miRNA 2.0 microarray that includes 1 100 human miRNAs whose expression was analysed in 5 breast cancer cell lines: HCC1500, HCC1937, MDA-MB-231, MDA-MB-468 and HCC1806. Additionally, DNA methylation studies were performed using the Illumina Human Methylation 850k Beadchip, analysing 21 samples from young women and 13 from older counterparts. We identified a different miRNA expression profile between breast cancer cell lines from old and young women that was compared with the miRNA profile identified in breast cancer patients. Our study has allowed us to characterize the two breast cancer cell lines, HCC1937 and HCC1500, both from young women, as good models for the study of breast cancer in patients younger than 35 years. On the other hand, we observed a different methylation profile between age groups, also in regulatory regions of gene encoding miRNAs. Specifically, our results showed a global hypomethylation in tumours from young women as well as a specific hypermethylation, centred mainly in open-sea regions of the genome in younger patients. We also found an acceleration in the epigenetic age of tumours from young women that could be increasing their genome instability. HDAC5 was significantly hypomethylated and overexpressed in young women with breast cancer. Functional studies with cell lines showed a significant reduction in the proliferation and migration when the HDAC5 gene was inhibited by the HDACi inhibitor, LMK-235. This inhibition was evident in the triple-negative molecular subtypes of both age groups. The hypomethylation of miR-124-2 was associated with poor survival in patients with breast cancer younger than 35 years old compared to older women. The differences observed in young patients with breast cancer in our work and others, reinforce the hypothesis that breast cancer that occurs in very young women has potentially unique, aggressive and complex biological features and more efforts should be done to achieve a more personalized treatment.

El tratamiento neoadyuvante en el cáncer de mama (CM) permite estudiar marcadores subrogados que puedan predecir respuesta clínica y supervivencia. La respuesta completa patológica (RCp) definida como la ausencia de tumor infiltrante en la mama y axila en la pieza quirúrgica se asocia a mejor supervivencia. En los tumores triple negativos el tratamiento de elección es la combinación de quimioterapia, antraciclinas y taxanos son los esquemas con mayor evidencia, junto con carboplatino alcanzando tasas de RCp del 35-60 %. Sin embargo, no disponemos de factores predictivos que identifiquen qué subgrupo obtendrá mayores tasas de RCp. Existe evidencia que niveles altos de infiltrado linfocitario tumoral (TIL) se han correlacionado con mayores tasas de RCp y mejor pronóstico. Sin embargo, la determinación de los niveles TIL en CM ha sido heterogénea, lo que ha dificultado la interpretación y comparación de los resultados entre los diferentes estudios. En 2015 se presentan las recomendaciones del Grupo de trabajo Internacional en Infiltrado linfocitario tumoral en CM. Gracias a éstas se ha podido simplificar su determinación para que sea reproducible y con una interpretación más objetiva. El objetivo de nuestro trabajo fue evaluar según la metodología comentada el TIL, como factor predictivo de respuesta al tratamiento neoadyuvante y su valor pronóstico, tanto en la biopsia diagnóstica como en la enfermedad residual, en términos de supervivencia libre de evento (SLE). Se incluyeron 164 pacientes con cáncer de mama triple negativas estadio clínico II-III tratadas con esquemas de quimioterapia neoadyuvante entre 1998 y 2015. Las características más destacables fueron edad media 49 años y estadio clínico III 37%. En nuestra serie, 58 pacientes (35.4%) presentaron niveles altos de TIL mientras que las 106 pacientes (64.6%) restante presentaba niveles bajos de TIL en la biopsia diagnóstica. Ambos grupo estaban bien balanceados en cuanto a características clínico-patológicas y habían sido tratadas de forma homogénea. El grupo de alto TIL en la biopsia presentó una tasa RCp de 87.9% frente al grupo de pacientes de bajo TIL de 9.4% (P= 0.001). Tras un seguimiento de 78meses, el grupo de alto TIL en la biopsia diagnóstica presenta una recaída tumoral del 14.2% frente al 42.1% en el grupo de bajo TIL (P=0.010). El valor pronóstico del TIL se mantiene también en la enfermedad residual. El grupo de alto TIL en la pieza quirúrgica presenta una recaída tumoral del 23 % mientras que el grupo de bajo TIL del 66.2% (P=0.001) Existe una buena correlación entre el infiltrado tumoral linfocitario en la biopsia diagnóstica y en la enfermedad residual de las pacientes que no obtienen una RCp (coeficiente de Pearson de 0.676, P=0.001). Los cambios entre el TIL en la biopsia y en la enfermedad residual también tienen valor pronóstico; a los 6 años, en el grupo que aumenta el TIL se presenta una recaída del 16.5 % mientras que en el grupo disminuye el TIL es del 38.9% y en el que no presenta cambios del 56.6% (P=0.001). Las pacientes que no presentan cambios o disminuye el TIL entre la biopsia y la enfermedad residual comparado con las que aumenta el TIL, presentan un mayor riesgo de recaída tumoral con una HR 4.01; IC 95% 1.69-9.59 (P=0.002) en el análisis univariante y esta valor pronóstico se mantiene en el análisis de regresión logística multivariante, con HR 2.92; IC 95% 1.05-9.66 (P=0.040) Las pacientes con CM triple negativo que no alcanzan la RCp, presentan un escenario crítico dado que la intuición sugiere que las células tumorales remanentes después de la quimioterapia neoadyuvante contiene una población de células intrínsecamente resistentes a la quimioterapia, y serán las responsables de las micrometástasis que derivarán en metástasis a distancia. Se realizó una secuenciación para caracterizar mediante genes relacionados con el sistema inmune los tumores de forma individual así como realizar una subclasificación de los mismos permitiendo ofrecer una mejor orientación pronóstica. Tras el análisis de expresión de los 549 inmunogenes en 33 pacientes, se objetiva una expresión diferencial de 104 genes, que divide a las pacientes en dos clusters. El cluster 2 presentaba una mediana de supervivencia libre de evento de 75 meses frente a los 37 meses en el cluster 1. Sin embargo, estas diferencias no son estadísticamente significativas, aunque una explicación plausible es el pequeño tamaño muestral. Se ha valorado la posible heterogeneidad intratumoral, mediante la expresión diferencial en diferentes áreas de la misma muestra, y se presentaba una buena correlación en 6 de las 8 muestras con coeficiente de Pearson > 0.78. Al enfrentar los datos de expresión entre el grupo de alto TIL en la biopsia diagnóstica frente a los de bajo TIL se han identificado una expresión diferencial de 25 inmunogenes. Los genes que destacan por estar sobreexpresados en los pacientes con alto TIL se relacionan con los linfocitos citotóxicos como CD8A, con células natural killer como KLRG1 o CD5 y la actividad citotóxica como los genes GZMA, y DEFB. Así como genes relacionados con la función del linfocito B como CASP1, SLAMF6, y con quimoquinas como CCR4, CCR5, TNFSF14, CCL2, CCL5,CXCL6, CXCR6 o interleukinas como IL10RA, IL1, IL2RB, IL7R. Análogamente, se han identificado 11 genes (MAGEA1, MAGEC1, DUSP4, TNFRS11, CCL28, SMAD2, CTSS, CTSH, CD68, ALCAM, CCL18) que se expresan de forma diferencial entre pacientes triple negativas que presentan una recaída tumoral o siguen libres de eventos. Los resultados de este trabajo plantean la posibilidad de nuevas dianas terapéuticas inmunes; los antígenos cáncer-específicos como MAGEA1 o MAGEC1, en aquellas pacientes que no alcanzan la respuesta completa patológica, que por tanto tiene un peor pronóstico y mayor riesgo de recaída.