Dissertação de mestrado em Controlo da Qualidade e Toxicologia dos Alimentos, apresentada à Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa, 2017. Coorientadora Ana Sanches Silva, Departamento de Alimentação e Nutrição do INSA. O Bisfenol A (BPA – do inglês, Bisphenol A) é um composto químico orgânico com atividade estrogénica, amplamente utilizado na produção de policarbonato e resinas epóxi, aplicados a embalagens alimentares e produtos médicos. A sua similaridade com os estrogénios humanos atribui-lhe atividade como desregulador endócrino. O BPA e o éter diglicidílico do bisfenol A (BADGE - do inglês, Bisphenol A Diglycidyl Ether), um derivado do BPA e epicloridrina, possuem a capacidade de migrar para os alimentos, podendo originar efeitos adversos na saúde humana. Como tal este trabalho terá como principais focos o BPA e o seu derivado BADGE, tendo como objetivos os seguintes pontos: • Verificar o conhecimento de uma amostra da população portuguesa acerca do BPA, assim como o conhecimento da mesma sobre os riscos a que está sujeita e se conhece quais as medidas que podem ser tomadas para diminuir a exposição ao BPA; • Otimizar e validar um método cromatográfico para a determinação e quantificação de BPA e BADGE; • Aplicar o método validado a amostras de pescado enlatado, a fim de verificar o cumprimento dos limites de migração especifica (LME), estabelecidos na legislação da União Europeia. Elaborou-se então um questionário para averiguar se uma amostra da população portuguesa sabe o que é o BPA. A análise das respostas ao questionário divulgado online sugere que a amostra da população portuguesa em análise, não detém conhecimento suficiente para se proteger desta exposição, sendo que a maioria dos indivíduos não sabia sequer da existência deste composto. Foi otimizado e validado um método de extração sólido-líquido e um método de cromatografia líquida de ultra eficiência (UHPLC – do inglês, Ultra High Performance Liquid Chromatography) acoplado a um detetor de fluorescência (FL) para identificação e quantificação de BPA e de BADGE. Os resultados do ensaio de validação sugerem que o método cromatográfico UHPLC-FL é linear tanto para o BPA (r2 = 0,9998) como para o BADGE (r2 = 0,9999) na gama de trabalho selecionada (0,025 - 5 μg/mL para o BPA e BADGE de 0,025 - 10 μg/mL para o BADGE), com limites de deteção (LOD – do inglês, Limit Of Detection) e quantificação (LOQ - do inglês, Limit Of Quantification) de 0,01 e 0,025 μg/mL respetivamente, respetivamente. O método apresentou boa precisão, apresentando uma repetibilidade inferior a 3,3 % para o BPA e inferior a 1,8 % no caso do BADGE, e precisão intermédia, inferior a 4,9 % no caso do BADGE, e inferior a 4,4 % no caso do BPA. A exatidão do método foi estabelecida através de ensaios de recuperação, para o BPA encontram-se entre 106 e 110 %; e para o BADGE encontram-se entre 80 e 83 % O método validado foi aplicado a 10 amostras de pescado – atum e sardinha – enlatado. Todas as amostras analisadas apresentaram valores de BPA inferior ao limite de deteção, pelo que cumprem com o limite máximo de migração específica estabelecido pela União Europeia para o BPA (0,6 mg/kg). Os resultados deste estudo mostram que estamos perante um método adequado para a determinação de bisfenóis em alimentos enlatados. Para além disso, demonstram também que os produtos enlatados analisados, são seguros no que respeita à migração de BPA. Relativamente ao BADGE, não podemos concluir sobre o cumprimento do mesmo com a legislação europeia uma vez que o limite de migração específica é de 9 mg/kg para a soma dos compostos BADGE, BADGE.H2O e BADGE.2H2O e de 1 mg/kg para o conjunto dos compostos BADGE.HCL, BADGE.2HCL e BADGE.H2O.HCL. No futuro deverá tentar-se incluir os outros derivados do BPA no método proposto. Bisphenol A (BPA) is an organic chemical compound with estrogenic activity, widely used in the production of polycarbonate and epoxy resins, applied to food packaging and medical products. Its similarity with human estrogens attributes it activity as an endocrine disrupter. BPA and Bisphenol A Diglycidyl Ether (BADGE), a derivative of BPA and epichlorohydrin, and BPA can both migrate into food and may have adverse effects on human health. As such this work will have as focus the BPA and its derivative BADGE, having the following objectives: • Address the knowledge of a sample of the Portuguese population about BPA, its knowledge about the risks to which it is exposed and knows what measures can be taken to reduce BPA exposure; • Optimize and validate a chromatographic method for the determination and quantification of BPA and BADGE; • Apply the validated method to samples of canned fish to verify compliance with the specific migration limits (SML) established by European union legislation. A questionnaire was then prepared to find out if a sample of the Portuguese population knows what BPA is. The questionnaire revealed that the sample of the Portuguese population in analysis showed it did not have sufficient knowledge to protect themselves from this exposure, and that most of the individuals did not even know of the existence of this compound. A solid-liquid extraction method and an Ultra-High Performance Liquid chromatography method coupled to a fluorescence detector (UHPLC-FL) were optimized and validated for identification and quantification of BPA and BADGE. The results of the validation of the method suggest that the UHPLC-FL chromatographic method is linear for both BPA (r2 = 0.9999) and BADGE (r2 = 0.9999) in the selected working range (0.025-5 μg/ml for BPA and BADGE of 0.025-10 μg/mL for BADGE), with limits of detection (LOD) and quantification (LOQ) of 0.01 and 0.025 μg/mL respectively, for the two compounds. The method presented good precision, presenting a repeatability lower than 3.3% for BPA and lower than 1.8% for BADGE, and intermediate precision of lower than 4.9% for BADGE and lower than 4.4% for BPA. The accuracy of the method was established through the determination of recovery, for BPA is between 106 and 110%; and for BADGE is between 80 and 83%. The validated method was applied to 10 samples of tuna and sardine - canned fish, all analyzed samples showed BPA values below the detection limit and therefore meet the European Union 's specific migration limit for BPA (0.6 mg/kg). The results of this study show that we are dealing with a suitable method for the determination of bisphenols in canned foods. In addition, they demonstrate that the canned products analyzed are safe with respect to BPA migration. Regarding BADGE, we cannot conclude on its compliance with European legislation since the specific migration limit is 9 mg/kg for the sum of the compounds BADGE, BADGE.H2O and BADGE.2H2O and 1 mg/kg for the compounds BADGE.HCL, BADGE.2HCL and BADGE. H2O.HCl. Further work should be made in order to include the other BPA derivatives in the proposed method. N/A