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1‐Deoxysphingolipide sind eine erst kürzlich beschriebene Klasse von Sphingolipiden, die in Zusammenhang mit verschiedenen Krankheiten wie diabetischer und erblicher Neuropathie gebracht werden. Die Identifizierung und Charakterisierung von 1‐Deoxysphingolipiden und deren Metaboliten ist in diesem Kontext sehr wichtig. Eine exakte Strukturbestimmung erfordert jedoch die Kombination von verschiedenen anspruchsvollen analytischen Techniken, da unterschiedliche Isomerentypen vorliegen können: Keton/Alkenol‐Isomere, Kohlenstoff‐Kohlenstoff‐Doppelbindungs(C=C)‐Isomere und Hydroxyl‐Regioisomere. Wir zeigen, dass kryogene Gasphasen‐Infrarot(IR)‐Spektroskopie von ionisierten 1‐Deoxysphingolipiden die Identifizierung und Unterscheidung von Isomeren anhand ihres einzigartigen spektroskopischen Profils ermöglicht. Insbesondere die Position und Konfiguration von C=C‐Bindungen können aufgrund von spezifischen Interaktionen zwischen dem geladenen Amin und der Doppelbindung bestimmt werden. Die Ergebnisse verdeutlichen das Potential der Gasphasen‐IR‐Spektroskopie, die Herausforderungen der Isomerenunterscheidung in der konventionellen Massenspektrometrie zu überwinden und den Weg für eine umfangreiche Analyse des Lipidoms zu ebnen.

International audience; Sphingolipid metabolism is tightly controlled by enzymes to regulate essential processes in human physiology. The central metabolite is ceramide, a pro-apoptotic lipid catabolized by ceramidase enzymes to produce pro-proliferative sphingosine-1phosphate. Alkaline ceramidases are transmembrane enzymes that recently attracted attention for drug development in fatty liver diseases. However, due to their hydrophobic nature, no specific small molecule inhibitors have been reported. Here, we present the discovery and mechanism of action of the first drug-like inhibitors of alkaline ceramidase 3 (ACER3). In particular, we chemically engineered novel fluorescent ceramide substrates enabling screening of large compound libraries and characterized enzyme:inhibitor interactions using mass spectrometry and MD simulations. In addition to reveal a new paradigm for inhibition of lipid metabolising enzymes with nonlipidic small molecules, our data lay the ground for targeting ACER3 in drug discovery efforts.

HPA-12 is an inhibitor of CERT-mediated non-vesicular transport of ceramide from the ER membranes to the Golgi apparatus. The inhibitor effectively blocks the synthesis of the membrane lipid sphingomyelin and may represent a novel drug prototype. Previous syntheses relied on non-commercial catalysts or specialized chemistries. Here we present a straightforward and effective method to synthesize HPA-12 from commercially available protected L-serinol in four steps. Some new analogues were synthesized and evaluated for their CERT-binding activity.