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Prosopis pallida, conocido como algarrobo, es una especie emblemática de los bosques secos del norte del Perú. Es de gran importancia económica por su uso en la producción de leña y carbón, así como en la producción de algarrobina proveniente de sus frutos. Actualmente las actividades humanas han deforestado grandes poblaciones de algarrobo en el bosque seco, por lo que es muy importante una propagación masiva para planes de reforestación a gran escala en esos ecosistemas, con la finalidad de conservar la especie y también las características genéticas de individuos élite. El objetivo de la investigación fue establecer un protocolo para la propagación in vitro de algarrobo. Previo a la siembra in vitro, se evaluaron tres tratamientos pregerminativos para poder acelerar la germinación de las semillas con la finalidad de obtener mayor material de propagación. Luego se evaluó el efecto del medio de plantas leñosas con la adición de cuatro concentraciones (0; 0,5; 1,0 y 1,5 mg/L) de citoquininas (BAP y ZEA) sobre la propagación in vitro de Prosopis pallida, habiendo realizado tres ensayos debido a la poca efectividad de brotación de las yemas apicales, resultando mejor la ausencia de citoquininas en yemas apicales con sus dos cotiledones, usando tapas de algodón en los tubos de ensayo. En esta etapa se evaluó el número de nudos, altura de plántula y número de brotes. Para el enraizamiento se ensayó con tres concentraciones (0; 0,5 y 1,0 mg/L) de auxinas (NAA, IBA y IAA), y se evaluó el porcentaje de enraizamiento, longitud de la raíz y número de raíces; obteniéndose mejores resultados con 0,5 mg/L IBA. En la fase de aclimatación se evaluó el porcentaje de aclimatación en dos tipos de sustratos, obteniéndose mejores resultados con sustrato comercial de turba y vermiculita.

To evaluate the effect of plastic film coverage on ex vitro acclimatization of arrow cane (Gynerium sagitatum Aubl.), shoots of "Criolla", "Martinera" and "Costera" cultivars were in vitro micropropagated in a medium supplied with 6-Benzylaminopurine and half of them were rooted in a medium with 1-Naphtalene acetic acid. Rooted and unrooted shoots were transplanted in a shade house with fog irrigation, into plastic trays (72 clusters per tray), using peat as substrate and half of them was covered with translucent plastic film during 5 days after transplant while the other half was maintained uncovered. The experiment consisted of a three-way factorial arrangement with 12 treatments distributed with a split-plot design where tray coverage was the main plot, cultivars were the split, and rooting condition was the split-plot. Each treatment (36 clusters) was repeated three times for a total of 1296 experimental units. After 40 days in the shade house, the survival rate was calculated, and plant heigth, number of shoots and number of roots data were analyzed by ANOVA (P<0.05) and means were separated by Tukey test (P<0.05). Plant survival was complete (100%) regardless of genotype, rooting, or coverage condition. Transferring plant into uncovered trays statistically resulted in higher levels for plant height, number of shoots, and number of roots. Ex vitro adaptation of micropropagated arrow cane plants without plastic film covers increased plant growth and reduced labor. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Carludovica palmata Ruíz & Pavón is a plant that belongs to the Cyclanthaceae family. Its commercial interest is related to the production of fibers for the manufacture of handicrafts, mainly the Panama hat, so it is important to study its propagation. This investigation aimed to determine the effect of 6-benzylaminopurine (BAP) in the formation of new shoots and 1-naphthaleneacetic acid (NAA) in the formation of roots, as well as the adaptation in greenhouse conditions of Carludovica palmata Ruíz & Pavón. In order to find the optimal multiplication rate, 0.5 cm length explants were planted in glass jars with 15 mL of semisolid MS with different concentrations of BAP and cultured under in vitro conditions for 90 days. The multiplication parameters in this stage were number of shoots per explant (NSE), length of shoots (LS), and length of roots (LR) as multiplication parameters. In a similar procedure, the number of roots per explant (NRE), length of roots (LR), and length of plantlets (LP) was determined using different concentrations of NAA. Finally, different substrates were evaluated for the adaptation of plantlets of C. palmata produced in vitro, under greenhouse conditions for 80 days. The highest multiplication rate (17±3 shoots per explant) was obtained with 2.0 mg L-1 of BAP. Root formation occurred efficiently in all treatments, without significant statistical differences between them. On the other hand, the use of substrate soil-t15 was the best treatment for the growth of C. palmata under greenhouse conditions. From the results obtained, it is concluded that C. palmata can be efficiently multiplied under in vitro conditions and did not present problems during the in vivo rooting process. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

La manzanilla (Matricaria recutita L., Chamomilla recutita L. y Matricaria chamomilla L.), es conocida por su alto contenido de compuestos fenólicos que le confieren propiedades antiinflamatorias, antisépticas y antimutagénicas. En este estudio se evaluó el porcentaje de fenoles totales y la germinación en cinco periodos de almacenamiento de semillas de M. recutita (5, 31, 75, 96 y 128 días). Además, se evaluó el efecto de citoquininas (6-Bencil Amino Purina, BAP y Kinetina) y auxinas (α-Ácido Naftalen Acético, ANA) en la brotación in vitro de esta especie. Se evidenció que la concentración total de fenoles disminuyó de 13.8% a 1.9% en los cinco periodos de almacenamiento evaluados y que los porcentajes de germinación aumentaron de 2.2% a los cinco días a 8,9% a los 128 días de almacenamiento, mostrándose evidencia de una correlación de -0.989 entre la germinación y el contenido de fenoles totales. Los mejores resultados para inducir brotación (5 brotes/explante) fueron obtenidos en el medio de cultivo MS con citoquininas.

In this study plant materials were selected in 53 farms belonging to four growers associations of blackberry in the municipalities of Pamplona and Chitagá (North of de Santander, Colombia). Nodal segments were used as initial explants of R. glaucus. For the establishment stage Murashige and Skoog, 1962 (MS) media was used and, supplemented with of gibberellic acid (GA3) (0.0 -0.1 mg/L) and 6-aminopurine (BAP) (0.0 -2.0 mg/L); for the multiplication stage MS was supplemented with GA3 (0.0 -0.03 mg/L) and BAP, (0.0 -2.5 mg/L) and for the rooting stage MS was supplemented with acid indolbutirico (0.0 -1.0 mg/L). From the data generated during the three stages, an experimental design of incomplete blocks was randomly applied and the treatments averages were statistically analyzed using the Tukey Test. The results indicated average rates of contamination (16.5-49.7 %), multiplication (3.8-4.3 shoots/explant) and in vitro rooting (3.3-4.3 roots/plant) for the different evaluated materials. These results, achieved first in the Northeastern region of Colombia, are important in that they will feature selected materials available for blackberry growers in the region.

Wild tubers of the genus Dioscorea sold for medicinal use were collected for the purpose of achieving its establishment under in vitro conditions. First we taxonomically identified the species and through phytochemical analysis demonstrated pharmaceutical potential. The material collected was identified as Dioscorea coriacea, D. lehmannii, D. meridensis, D. polygonoides and the edible species D. trifida. Tubers collected from wholesale distributors and from the field were washed, disinfected, sprayed with Gibberellic Acid (GA3) and planted in substrate BM-2®, in a greenhouse at 18 ° C during the day and 10 ° C overnight. Whole tubers or sections thereof were stored in sealed bags at room temperature. Subsequently plant material of the species D. coriacea, D. lehmannii, D. meridensis and D. polygonoides was disinfected and healthy buds (D. coriacea / laboratory) were selected for in vitro establishment. Three different culture media were evaluated for establishment; that which presented the best results was the Murashige & Skoog (1962) medium, supplemented with BAP 1 mL / L, GA3 1 mL / L and Putrescin 2 mL / L. For the collection and analysis of secondary metabolites, tubers of D. coriacea, D. lehmannii and D. polygonoides were used, using methanol as the extraction solvent. The highest concentration of plant extract, 54%, was found in D. coriacea, a higher value than that of D. polygonoides, which had been reported previously; the presence of saponins was confirmed by thin layer chromatography (TLC). These results will enable more advanced analysis of the present compounds and enhance their mass propagation under in vitro conditions.

Título en ingles: In vitro culture response on Zamia incognita, an alternative for preservation Resumen: Las Zamiaceas son plantas relictuales consideradas fósiles vivientes. En Colombia, el 65% de esta familia se encuentra en alguna categoría de amenaza, por la destrucción del hábitat e intensa recolección. Teniendo en cuenta que entre las ventajas de la propagación in vitro está la conservación ex situ de germoplasma, el presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el potencial de regeneración de plantas de Z. incognita a partir de explantes foliares y embriones cigoticos. Se evaluó el efecto de diferentes combinaciones de Auxinas (2,4-D y ANA) y citoquininas (KIN, BAP y TDZ) sobre la formación de callo y la regeneración de brotes (directa o indirecta), utilizando como medio basal MS (MB1) y medio basal B5 modificado (MB2). La formación de callo se presentó sobre un amplio rango de concentraciones de 2,4-D con KIN y 2,4-D con BAP, independientemente del medio basal, pero no en los explantes tratados con ANA más KIN o TDZ. Para los explantes foliares no hubo respuesta a la formación de embriones somáticos y/o brotes con las combinaciones y concentraciones hormonales evaluadas, no obstante los callos inducidos en MB2 con 2,4-D (0,22 mg/l) y BAP (0, 1, 2, 3 mg/l) fueron diferentes, su aspecto nodular, color crema y apariencia proembriogénica coincidió con una gran cantidad de células meristemáticas potenciales para el proceso de regeneración. A partir de embriones cigoticos inmaduros se logró la formación de embriones somáticos en el medio MB2 exento de reguladores o conteniendo 2,4-D solo (0,22 mg/l) y en combinación con BAP (1 mg/l), sin lograr el proceso de conversión a plántulas. Palabras clave: micropropagación; hojas jóvenes; reguladores de crecimiento; embriones cigóticos; medio basal. Abstract: Zamiaceas are relict plants considered living fossils. In Colombia, 65% of this family is under some threat category due to their habitat destruction and their intense collection. Given that the advantages of in vitro propagation is ex situ conservation of germoplasm, this study aimed to evaluate the regeneration potential of Z incognita plants from leaf explants and zygotic embryos. The effect of different combinations of auxin (2.4-D and NAA) and cytokinins (KIN, BAP and TDZ) was evaluated on the formation of callus and shoot regeneration (direct or indirect), using MS (MB1) basal medium and B5 (MB2) basal modified medium. The callus formation was presented over a wide concentration range of 2.4-D with KIN and 2.4-D with BAP, regardless of the basal medium, but not in explants treated with ANA more TDZ or KIN. For leaf explants there was no response to the formation of somatic embryos or shoots with hormonal combinations and concentrations evaluated; however, MB2 calluses induced with 2.4-D (0.22 mg / l) and BAP (0. 1 , 2. 3 mg / l) were different, their nodular aspect, cream color and pro-embryogenic appearance coincided with a lot of potential meristematic cells for the regeneration process. From immature zygotic embryos, somatic embryo formation in the MB2 medium was achieved without growth regulators or containing 2.4-D alone (0.22 mg /l) or 2.4-D in combination with BAP (1 mg/l) without achieving the conversion process to seedlings. Key words: microprogation; young leaves; plant growth regulators; zygotic embryos; basal medium.

Evaluation of Curcuma longa L. plants obtained by tissue culture in organoponic conditions. Resumen: La cúrcuma es una planta utilizada como condimento y colorante que posee múltiples propiedades medicinales. La evaluación de la estabilidad genética y la respuesta en condiciones de producción constituye una etapa muy importante en los sistemas de propagación de plantas por cultivo de tejidos. En este trabajo se evaluó la respuesta morfoagronómica de plantas de cúrcuma obtenidas por cultivo de tejido y por rizomas en condiciones de organopónico. Los resultados muestran una alta supervivencia (100%), para las plantas provenientes del cultivo in vitro, así como para las obtenidas a partir de los rizomas. Se logró un mayor crecimiento de las plantas propagadas por el cultivo de tejidos durante todo el ciclo de cultivo, sin cambios en las características morfológicas evaluadas. Los rendimientos en las plantas provenientes del cultivo de tejidos fueron superiores en comparación con las plantas propagadas por el método tradicional. Palabras clave: cúrcuma; Biotecnología; micropropagación; cultivo in vitro; evaluación morfológica; evaluación agronómica. Abstract: Turmeric is a plant uses like condiment and coloring. It has multiples medicinal properties. The genetic stability and response in production conditions is an important stage in plant propagation system by tissue culture. In this paper was evaluated the morphoagronomic response of turmeric plants obtained by tissue culture in organoponic conditions. Results show a high survival (100%) for a plant from in vitro culture as well as for the plant obtained by rizomes . A bigger growth of the plants obtained by tissue culture was observed during the whole cultured cycle without changes in the morphologycal characteristic evaluated. The yields of the plants obtained by tissue culture were higher that the plants planted by the traditional method. Keys words: turmeric; Biothecnology; micropropagation; field evaluation; morphologycal evaluation; agronomic evaluation.

Título en inglés: Direct organogenesis in vitro from leaves of Solanum nudum Dunal – Antiplasmodial plant Resumen Solanum nudum Dunal (Solanaceae), es una especie vegetal con potencial para desarrollar un tratamiento quimioterapéutico contra la malaria. Este es el primer reporte de un protocolo rápido, eficiente y reproducible de organogénesis directa a partir de segmentos de hoja de plántulas in vitro de esta especie. Los segmentos de hojas de plántulas de 5 meses de germinadas fueron cultivados sobre medio Murashige y Skoog (MS) a mitad de sales y vitaminas, con diferentes concentraciones de Bencilaminopurina (BAP), en combinación con Acido Indolacético (AIA). Se evaluó también el efecto de la iluminación en periodos 0/45, 15/30 y 30/15 días oscuridad/ luz, sobre la inducción de brotes. Se registró un promedio alto de formación de brotes (4,83) en explantes cultivados en medio suplementado con 2,0 mg/L de BAP y 0,1 mg/L de AIA, bajo condición de iluminación por un periodo de 30/15 días oscuridad/luz. Luego de la inducción, los brotes obtenidos fueron transferidos a medio MS suplementado con 0,3 mg/L de Giberelina (GA3), y mantenidos en condiciones de luz donde también enraizaron. Las plántulas regeneradas se llevaron a condiciones de invernadero y fueron morfológicamente similares a las plantas madres. Palabras clave: Solanaceae, Solanum nudum, Planta antimalárica, micropropagación, inducción de brotes. Abstract Solanum nudum Dunal (Solanaceae) is a plant with a potential for developing chemotherapeutic treatments against malaria. This is the first report of a fast, efficient, and reproducible direct organogenesis protocol from leave segments from in vitro seed-grown plantlets. Leaves segments from 5 months old germinated plantlets were placed on half concentration Murashige and Skoog medium (MS), supplemented with several concentrations of Bencilaminopurin (BAP) combinated with Indolacetic Acid (IAA). Dark/ light incubation effect in periods 0/45, 15/30 and 30/15 dark/light days were evaluated on the buds induction. High frequency buds formation was shown (4,83) in explants cultured on MS supplemented with BAP 2,0 mg/L and AIA 0,1 mg/L under a period of 30 days of dark condition incubation. After induction, buds obtained were transferred to MS medium supplemented with gibberellic acid (GA3) 0,3 mg/L and maintained under artificial cool light, there the plantlets rooted. Regenerated plantlets were placed under greenhouse conditions and these were morphologically similar to donor plants. Key words: Solanaceae, Solanum nudum, Antimalarial plant, micropropagation, buds induction

Se evaluó una técnica de micropropagación de plantas de mora (Rubus glaucus) de la variedad sin espinas, a partir de ápices meristemáticos. En la fase de establecimiento se evaluó un protocolo de desinfección utilizando por 5 min solución de jabón detergente comercial y agua + alcohol 70% por 2 min + hipoclorito 3% con dos tiempos de exposición diferentes: T1 por 5 min y T2 por 10 min. Después de desinfectar las microestacas se extrajeron los ápices meristemáticos y se establecieron in vitro bajo un diseño completamente al azar para evaluar dos medios de cultivo: M1 y M2. A partir de las plántulas desarrolladas se efectuó la multiplicación en los medios de cultivo M1, M3 y M4. Ambos tratamientos de desinfección resultaron efectivos alcanzando 100% de desinfección de los explantes con cada uno de ellos. La siembra de ápices meristemáticos permitió el establecimiento de cultivos asépticos y un adecuado desarrollo de los explantes después de seis semanas de cultivo, con prendimiento de 83.4% para M1 y 66.6% para M2. El análisis de varianza (Anova) y la prueba de rangos múltiples mostraron que la multiplicación fue mejor en el medio M1 con una mayor tasa de crecimiento y desarrollo del explante, al obtener coeficientes de multiplicación de 7.5 brotes/plántula y una altura promedio de 1.95 cm.

En este trabajo se evalúo el cultivo de tejidos vegetales in vitro como una alternativa en la propagación y preservación de Ilex kunthiana, especie endémica de gran interés en programas de revegetalización. Se determinó que el efecto del Benlate® a 0,5% durante 12 horas y el hipoclorito de sodio al 0,5% por 1 min., como agentes desinfectantes de las semillas, permiten obtener el 100% de explantes adaptados a condiciones in vitro. Las semillas son cultivadas en medio MS con Ácido Giberélico (AG3) (0,0, 0,5, 1,0 mg/L). Cuando las plántulas germinaron, se aislaron los nudos con yemas axilares y se cultivaron en medio MS enriquecido con la Auxina Ácido Indol Butírico (AIB) (0,0, 0,5, 1,0 mg/L) y la citoquinina 6-bencilaminopurina (BAP) (0,0, 0,5, 1,0 mg/L). A fin de inducir su enraizamiento, posteriormente los brotes regenerados se cultivaron con las Auxinas Ácido Indol Butírico (AIB) (0,0, 0,5, 1,0 mg/L) y Ácido Naftalén Acético (ANA) (0,0; 0,5; 1,0 mg/L). Se estableció que 0,5 mg/L de AG3 favoreció la 100% de germinación de las semillas que fueron la fuente de los nudos. El mejor índice de formación de brotes se logró cuando los nudos se cultivaron con 0,5 mg/L del BAP y 0,5 mg/L del AIB que posteriormente fueron exitosamente enraizados con 0,5 mg/L de AIB, estableciendo las condiciones mas adecuadas para la propagación in vitro de Ilex kunthiana. Palabras clave: Ilex kunthiana; micropropagación; plantas en vías de extinción; AIB; BAP; micropropagatio; endangered plant.

Con el empleo del sistema de inmersión temporal fue posible incrementar la multiplicación in vitro de los segmentos nodales en el clon de ñame Blanco de Guinea. Con este tipo de sistema de cultivo se obtuvieron los más altos valores para la altura de la planta, número de entrenudos por planta, así como para la masa fresca y seca de las mismas. Las condiciones de cultivo creadas en el sistema de inmersión temporal para la multiplicación in vitro de los segmentos nodales lograron el más alto coeficiente de multiplicación (8,50), así como redujeron el número de plantas con síntomas de vitrificación (3,30). Las plantas cultivadas en este tipo de sistema de cultivo se caracterizaron por el mayor crecimiento de los segmentos nodales, coloración verde y hojas más desarrolladas. La utilización de este tipo de sistema de cultivo en la fase de multiplicación in vitro de los segmentos nodales posibilitará incrementar el empleo de la micropropagación para la producción de semilla en el complejo Dioscorea cayenensis - D. rotundata. Palabras clave: sistema de inmersión temporal; medio líquido; micropropagación; temporary immersion system; liquid medium; micropropagation.

An efficient in vitro propagation system was developed for Dodonea viscosa (L) Jacq., this being an endangered endemic shrub. This study was aimed at evaluating the effect of four growth regulators on the in vitro morphogenetic development of nodes and leaves. The basic culture medium used was Murashige and Skoog (1962), enriched with the following growth regulators: butyric indol acid and benzylaminopurine (0, 0.5, 1 and 1.5 mg.L-1) in node culture and 2, 4-dichlorofenoxy acetic acid and kinetin (0, 1, 3 and 5 mg/l-1) in leaves. D. viscosa has been propagated in in vitro conditions by using 2% benlate for one hour and 0.5% sodium hypochlorite for 5 min. Incubation in the dark has controlled D. viscosa explant oxidation, whereas using citric acid and ascorbic acid has not controlled the oxidation of explants exposed to light. The node is a suitable explant for micro- propagating D. viscous in the absence of phytohormones. The best morphogenetic-inducing treatment of leaves was the eighth one assayed (1.0 mg/l-1 kinetin and 5.0 mg/l-1 2,4-D). This protocol represents a conservation model for endangered species and encourages large-scale Dodonea viscosa (L) Jacq. propagation.

EI empleo de las técnicas de cultivo de tejidos vegetales para la propagación y el mejoramiento de especies de interés forestal es una importante herramienta de apoyo a los programas de reforestación y establecimiento de huertos semilleros clonales. EI objetivo del presente trabajo consistió en el desarrollo de una metodología para la propagación clonal in vitro de la teca a partir de arboles elite. Como fuente de explantes se emplearon ápices procedentes de brotes epicormicos, los cuales se sembraron en el medio de cultivo de Schenk y Hildebrandt, enriquecido con los microelementos de Bourgin y Nitsch, Bencil Amino Purina (BAP 0,5 mg/L) y solidificado con agar. Para la fase de proliferación se empleó el medio de cultivo de Murashige y Skoog con las sales nitrogenadas reducidas a la mitad de su concentración normal. Se evaluaron diferentes concentraciones de BAP (0, 0,1, 0,5 Y 1,0 mg/L). EI mayor coeficiente de multiplicaci6n y mejor calidad de los brotes se logr6 con 0,5 mg/L de BAP. El enraizamiento se realizó en condiciones ex vitro; se emplearon microesquejes apicales con una longitud pro media de 1,5 a 2,0 cm. Estos se trataron con diferentes concentraciones de AlB (0,250, 500, 1.000, 2.000, 4.000 Y5.000 mg/L), Los mayores porcentajes de enraizamiento y supervivencia de las plantulas se lograron con 4.000 mg/L de AlB. Esta metodología permitió el establecimiento de los arboles en condiciones de campo para apoyar los programas de huertos semilleros clonales y plantaciones a escala comercial de Refocosta.The employment of the techniques of plant tissue culture for the propagation and the genetic improvement of forest trees are importants support tool to the reforestation programs and the establishment of clonal seed orchards. This work's main objective was the development of a methodology for the in vitro clonal propagation of teak, starting from elite trees. As explants source apical shoots from epicormic buds were used, which were placed in the basal medium of Schenk and Hildebrandt supplemented with 0.5 mg/L of BAr, Bourgin and Nitsch micronutrients and solidified with agar. For the proliferation phase it was used the basal medium of Murashige and Skoog with half of the normal NH4N03 and KN03 concentration. Different concentrations of BAP were evaluated (0, 0,1, 0,5 and 1,0 mg/L). The biggest multiplication coefficient and better quality of the buds was achieved with 0.5 mg/L of BAP. The rooting was carried out under ex vitro conditions; were used microcutings between 1.5 and 2.0 em of length. Then, they were treated with different concentrations of IBA (0, 250, 500, 1.000, 2.000, 4.000 and 5.000 mg/L). The biggest rooting percentage and plantlets survival was achieved with 4000 mg/L of IBA. This methodology allowed the establishment of the trees under field conditions to support the programs of clonal seed orchards and operative plantations of Refocosta.

Título en español: Inducción de callos embriogénicos y formación de proembriones somáticos en Pterogyne nitens Tull "tipa colorada" Título en ingles: Embriogenic calli induction and somatic proembryo formation in Pterogyne nitens Tull Título corto: Callo embriogénico y proembriones somáticos en Pterogyne nitens Tull Resumen: Pterogyne nitens es un árbol que crece en bosques húmedos del Norte de la Argentina. Por su calidad maderera la especie se utiliza en forestación, reforestación o enriquecimiento de bosques nativos. Una alternativa a los métodos convencionales de propagación son las técnicas de cultivo de tejidos vegetales mediante el uso de la embriogénesis somática. El objetivo del presente trabajo es inducir la formación de callos embriogénicos y la obtención de proembriones somáticos evaluando la influencia del tipo de explanto, tipo y concentración de reguladores de crecimiento y composición del medio basal. Para la inducción de callos embriogénicos se utilizan explantos extraídos de hojas cotiledonares, foliolos, tallos y raíces de plántulas de dos meses de edad. Se emplean tres medios de cultivos MSC, MS50 y MSMOD. Cada medio de cultivo se suplementa con 2,4-D ó ANA en distintas concentraciones. A los 45 días los explantos provenientes de hojas cotiledonares en los medios de MSC con 2,4-D en concentraciones de 67.87, 107.41, 113.12, 135.74 y 180.99 µM, se logra en mayor proporción la formación de masas callosas amarillas. Con 107.41 µM de 2,4-D en el medio MSC se observa la formación de estructuras proembrionarias. Los segmentos radiculares en todos los tratamientos evaluados, no desarrollan callos. Palabras clave: Tipa colorada, micropropagación, embriogénesis, forestales, leguminosa. Abstract: Pterogyne nitens is a tree that grows in wet forests of Northern Argentina. Due to its quality timber especies are used in afforestation, reforestation or enrichment of native forests. An alternative to conventional methods of propagation is the techniques of plant tissue using somatic embryogenic. The aim of this study is to induce the formation of embryogenic callus and of somatic obtaining proembryos, evaluating the influence of type of explant, type and concentration of growth regulators and composition of the basal medium. For induction of embryogenic callus from explants extracted cotyledonary leaves, leaflets, stems and roots of seedling of two months old are used. Three means of MSC culture, MS50 and MSMOD are also used. Each culture medium is supplemented with 2,4-D at different concentration or ANA. After 45 days the explants from cotyledon leaves in MSC media supplement with 2,4-D at concentrations of 67.87, 107.41, 113.12, 135.74 and 180.99 µM, promote greater proportion of yellow callus formation masses. With 107.41 µM 2,4-D proembryos structures formation are observed. The root segments in all treatment tested, do not develop calluses. Key words: Tipa colorada, micropropagation, embryogenesis, forestry, legume. Recibido: enero 31 de 2014 Aprobado: octubre 20 de 2014

Título en español: Multiplicación in vitro de Psidium guajava L. en sistemas de inmersión temporal Título en ingles: In vitro multiplication of Psidium guajava L. in temporary immersion systems Resumen: La introducción de nuevos cultivares de guayabo (Psidium guajava L.) amerita su propagación masiva, lo cual solo puede ser satisfecho mediante la micropropagación. Sin embargo la micropropagación convencional dejó de ser económicamente eficiente, debido al uso de agentes gelificantes y el elevado número de operaciones manuales, por esta razón se planteó en esta investigación, generar una metodología que permita disminuir los costos de producción por la exclusión del gelificante en los medios de cultivo, evaluando los sistemas de inmersión temporal (SIT) en la multiplicación in vitro de guayabo. Para lo cual, se evaluó el efecto del cultivo en SIT, se comparó los SIT tipo BIT® y RITA® y se evaluó el tiempo(1 y 2 min) y frecuencia(3 y 4 veces/día) de inmersión. Luego de seis semanas de cultivo se evaluó: número de brotes(NB), numero de nudos(NN), longitud de brote(LB) y coeficiente de multiplicación(CM). Con el empleo de SIT se logró valores superiores para NB(2,17), NN(3,5), LB(10,7 mm) y CM(2,8). En la comparación entre SIT tipo RITA y BIT, valores superiores se obtuvieron con el RITA® para NB(3,8), NN(3,8), LB(16,6 mm) y CM(10,4). Se determinó que con 2 min de inmersión se logró los mayores valores de NB(3,7), NN(13,4), LB(15,3 mm) y con 2 min de inmersión 3-4 veces/día el mayor CM(9,4 y 10,4). Se concluye que el cultivo en RITA® en la multiplicación favoreció crecimiento y la proliferación de brotes de guayabo. Palabras clave: BIT®, guayabo, medio de cultivo líquido, micropropagación, RITA®. Abstract: The introduction of new cultivars of guava (Psidium guajava L.) deserves its mass propagation, which can only be satisfied by micropropagation. However conventional micropropagation stopped being economically efficient due to the use of gelling agents and the high number of manual operations. For this reason was considered in this research, generate a methodology to reduce production costs by exclusion of gelling in culture media, assessing temporary immersion systems (TIS) in the in vitro multiplication of guava. For which, the effect of the culture way was evaluated in TIS, type TIB® and RITA® compared the TIS and was evaluated the time(1 and 2 min) and frequency(3 and 4 times / day) of immersions. After six weeks of culture were evaluated: shoots number(NS), nodes number(NN), shoot length(SL) and multiplication rate(MR). With the use of TIS higher values for NS(2.17), NN(3.5), SL(10.7 mm) and MC(2.8) was achieved. When comparing RITA® and TIB, higher values were obtained with the RITA® for NS(3.8), NN(3.8), SL(16.6 mm) and MC(10.4). It was determined that 2 min of immersion with the highest values of NS(3.7), NN(13.4), SL(15.3 mm) and 2 min immersion 3-4 times/day achieved the highest MC(9.4 and 10.4). We conclude that the RITA® culture favored the multiplication in growth and proliferation of shoots of guava. Keys words: guava, micropropagation, liquid culture media, RITA®, TIB®. Recibido: febrero19 de 2014 Aprobado: octubre 10 de 2014

Título en español: Detección molecular de potyvirus en hojas y minibulbillos de ajo, Allium sativum, asociados a un programa de producción de semilla limpia Título en ingles: Molecular detection of potyvirus in leaves and small bulbs of garlic, Allium sativum, associated a clean seed production program Titulo corto: Detección de potyvirus en plantas de ajo Resumen: El ajo (Allium sativum L) se reproduce vegetativamente utilizando bulbillos, condición que favorece la propagación de enfermedades, especialmente bacterias, hongos y virus que afectan la calidad y el rendimiento del cultivo. Por este motivo se implementó la identificación molecular por RT-PCR de los potyvirus LYSV y OYDV en el sistema de producción de semilla limpia de ajo en tres clones nacionales. En la fase de producción de semilla limpia mediante micropropagación, se estandarizó el establecimiento de meristemos de ajo. La presencia de potyvirus se analizó en 586 plántulas mediante ELISA y en 70 por RT-PCR. Para la RT-PCR se extrajo ARN a partir de microbulbillos y hojas de plántulas, obteniéndose 1.7 a 226 ng/ml de ARN y se sintetizó entre 35 a 50 ng de cADN. Los resultados obtenidos mostraron que el protocolo de desinfección produjo una viabilidad del 73.6%. El análisis ELISA presentó un saneamiento del 96.1% de las plántulas a potyvirus, mientras que con RT-PCR se identificó la presencia de LYSV en el 8.6% de las muestras evaluadas. El virus del enanismo amarrillo de la cebolla (OYDV) no fue detectado en ninguna de las muestras. Los resultados muestran que el cultivo in vitro de meristemos de ajo es una excelente alternativa para la producción de semilla, mostrando un 92% de eficiencia. Además, validan el diagnóstico eficiente del potyvirus LYSV en hojas y microbulbillos de ajo. Palabras clave: Allium sativum, ELISA, micropropagación, LSYV, potyvirus, OYDV, RT-PCR. Abstract: Garlic (Allium sativum L), reproduces vegetatively using bulbils, condition that favors the spread of diseases, especially bacteria, fungi and viruses, which affect the quality and crop yield. For this reason, the molecular identification by RT-PCR of potyvirus: LYSV and OYDV in the production system of clean seed garlic of three national clones were implemented. In the production phase of clean seed was establishing garlic meristems micropropagation. Potyvirus presence in 586 seedlings was analyzed by ELISA and for RT-PCR in 70. RNA was extracted from leaves and small bulbs, yielding 1.7 to 226 ng/µl, and with this RNA, between 35 to 50 ng of cDNA. The results showed that the disinfection protocol produced a 73.6% viability of plants. ELISA analysis showed 96% sanitation of seedling to potyvirus, whereas, Leek Yellow Strip Virus, LYSV was identified in 8.6% of samples used RT-PCR methodology. Onion yellow dwarf virus (OYDV) was not detected in any sample. The results show that the in vitro culture of meristem of garlic, is an excellent alternative for seed production, showing a 92% efficiency. Moreover, efficient diagnostics of LYSV potyvirus was validated in leaves and small bulbs of garlic. Key words: Allium sativum, ELISA, micropropagation, LSYV, potyvirus, OYDV, RT-PCR. Recibido: octubre 18 de 2013 Aprobado: octubre 1 de 2014

Título en español: Organogénesis y embriogénesis en Curcuma longa L. a partir de capas delgadas de células, segmentos y bases de hoja Título en ingles: Curcuma longa L. embryogenesis and organogenesis from thin cell layers, leaf segments and bases of leaf Título corto: Organogénesis y embriogénesis en Curcuma longa L. Resumen: A pesar de sus propiedades farmacológicas, alimenticias e industriales y su gran potencial de mercado, Curcuma longa L. no ha sido comercializada en la medida en que se esperaría. La dificultad de propagación de la especie, que se da exclusivamente por vía vegetativa al ser un triploide estéril, aunada a las exigencias ambientales de su cultivo y su alta susceptibilidad al ataque de distintos patógenos han sido las causas por las cuales no se ha dado un aprovechamiento acorde a las propiedades y potenciales de la planta. Como estrategia para la obtención de gran cantidad de germoplasma con características fitosanitarias óptimas, se han implementado diferentes técnicas de cultivo in vitro, incluyendo la formación de microrrizomas y la micropropagación de plantas. Sin embargo, aún no se dispone de métodos eficientes para la inducción de procesos de organogénesis y embriogénesis somática. En el presente estudio se reporta el efecto de diferentes reguladores de crecimiento vegetal y sus combinaciones sobre segmentos de hojas, bases de hoja y capas delgadas de células (thin cell layers - TCL) de Curcuma longa L. para la inducción de callos y embriones. Los tejidos evaluados mostraron una respuesta diferencial de acuerdo con sus características y los reguladores de crecimiento vegetal adicionados. En las bases de hoja y TCLs se obtuvo particularmente una respuesta embriogénica. De otro lado, fue posible inducir morfogénesis caulinar y radicular simultáneamente en todos los tejidos evaluados. Las plantas regeneradas a partir de las bases de hoja fueron mucho mas vigorosas que las de los otros tejidos. Palabras clave: micropropagación, embriogénesis, organogénesis, reguladores de crecimiento vegetal. Abstract: In spite of its pharmacological, nutritional and industrial properties and its great potential market, Curcuma longa L. has not been commercialized to the extent that would be expected. The difficulty of propagation of the species, which is provided exclusively by vegetative to be a sterile triploid, coupled with the environmental requirements of the crop and its high susceptibility to attack by different pathogens, have been the causes for which has not been given a use according to the properties and potential of the plant. As a strategy for obtaining large numbers of germplasm with optimal phytosanitary characteristics, different techniques have been implemented in vitro culture, including the formation of microrrizomas and micropropagation of plants. However, not yet available efficient methods for somatic embryogenesis and organogenesis induction processes. In this study, we report the effect of different plant growth regulators and their combinations on the leaf segments, leaf bases and thin cells layers (TCL) of Curcuma longa L. for the callus and embryos induction. The evaluated tissues showed a differential response, according to its characteristics and the plant growth regulators added. Embryogenic response was particularly obtained in leaf bases and TCL. On the other hand, it was possible to induce cauline and root morphogenesis simultaneously in all evaluated tissue. Regenerated plants from leaf bases were more vigorous than the others tissues. Keywords: Micropropagation, embryogenesis, organogenesis, plant growth regulators. Recibido: febrero 15 de 2014 Aprobado: octubre 22 de 2014

Título en ingles: Advances in vitro propagation via somatic embryogenesis of Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes, medicinal plant critically endangered Título corto: Avances en la propagación vía embriogénesis somática de Psychotria ipecacuanha Resumen: Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes (Rubiaceae Juss), es una especie vegetal con reconocidas propiedades medicinales. Esta especie se encuentra en peligro crítico de extinción, debido a la sobreexplotación de las poblaciones naturales. Conociendo además las dificultades para su propagación por medio de semillas (debido a la baja tasa de germinación y elevada muerte prematura de las plántulas) y por vía vegetativa (lento crecimiento), el presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el potencial de propagación vía embriogénesis somática directa. Segmentos de hojas jóvenes de plantas mantenidas en casa malla fueron desinfectados y sembrados en el medio de cultivo MS (Murashige y Skoog) suplementado con diferentes concentraciones y combinaciones de reguladores de crecimiento. Las combinaciones IBA y BAP a 1 y 2 mg/L y 2 y 1 mg/L, respectivamente; mostraron ser efectivas en la formación de embriones somáticos en esta especie. La procedencia de la planta donadora parece tener influencia en la sensibilidad del tejido foliar a la respuesta. Este es el primer reporte de embriogénesis somática directa para esta especie y el primer reporte de cultivo in vitro de poblaciones colombianas. Palabras clave: micropropagación, conservación, nativa, extinción, regeneración in vitro Abstract: Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes (Rubiaceae Juss), is a species with known medicinal properties. This species is critically endangered due to overexploitation of natural populations. Besides knowing the difficulties in propagation by seed (due to the low rate of germination and high seedling premature death) and by vegetative (slow growth), the present study evaluated the potential for propagation by using direct somatic embryogenesis. Young leaves segments from plants cultivated in a greenhouse were disinfected and planted in MS medium (Murashige y Skoog), supplemented with different concentrations of growth regulators. IBA and BAP combinations at 1 and 2 mg / L and 2 and 1 mg / L, respectively, shown to be effective in the formation of somatic embryos in this species. The origin of the donor plant seems to influence foliar tissue sensitivity to the outcome. This is the first report of direct somatic embryogenesis for this species and the first report of in vitro culture in Colombian populations. Key words: micropropagation, conservation, native species, in vitro regeneration, overexploitation.

Running title: Controlling hyperhydricity in teak Influencia de la 6-Bencilaminopurina y el agente gelificante en la reducción de la hiperhidricidad en Tectona grandis L. Abstract: The influence of different factors on shoot proliferation and the occurrence of hyperhydricity in teak (Tectona grandis L.) have been studied. Four concentrations of BA (2.22, 4.44, 6.66 and 8.88 µM) and a control treatment with 0 BA were examined. Aiming at reducing the costs during commercial propagation by using gelrite in stead of agar, the use of both gelling agent in the proliferation and hyperhydricity was tested. In order to evaluate if hyperhydricity can be reduced by increasing the gelrite concentration in the culture medium, three concentrations (2.0, 2.5 and 3.0 g l-1) were tested in combination with 4.44 µM BA. The proliferation and occurrence of hyperhydricity during 21 successive subcultures were evaluated. The highest proliferation was achieved in the treatments with 6.66 or 8.88 µM BA. They yielded 5.22 and 5.56 shoots/explant, respectively. But also, the highest percent of hyperhydric shoots was achieved in this treatment. Gelrite resulted in a higher proliferation, but also an almost two times higher hyperhydricity as compared to agar-solidified media. Satisfactory reduction in hyperhydricity (18%) was achieved with 3.0 g l-1 gelrite. However, the successive subcultures onto proliferation in this treatment favored hyperhydricity compromising shoot quality and its competence to proliferate. In vitro teak plants were ex vitro rooted and then transferred to greenhouse conditions for acclimatization; ten weeks after transfer they were ready for field plantation. Key words: cytokinin; forestry; micropropagation; morpho-physiological disorder; teak Abbreviations: BA- 6-Benzyladenine, MS- Murashige and Skoog basal medium, IBA- Indole-3-butyric acid, ANA-Naphtalene acetic acid Resumen: Se estudió la influencia de diferentes factores en la proliferación y la ocurrencia de la hiperhidricidad in teca (Tectona grandis L.). Se probaron cuatro concentraciones de BA (2,22; 4,44; 6,66 and 8,88 µM) y un control sin BA. Con el objetivo de reducir los costos durante la propagación comercial se experimentó sustituir el agar por el gelrite, para lo cual se estudió en efecto de ambos gelificantes en la proliferación y la hiperhidricidad de los brotes. Se estudiaron, tres concentraciones de gelrite (2,0; 2,5 and 3,0 g l-1) combinadas con 4,44 µM BA, con el objetivo de evaluar si la hiperhidricidad podía ser reducida incrementando la concentración de gelrite. Se evaluó la proliferación de brotes y la ocurrencia de la hiperhidricidad durante 21 subcultivos. Se logró una alta proliferación de brotes en los tratamientos con 6,66 y 8,88 µM BA (5,22 y 5,56 brotes), pero el porcentaje de brotes hiperhídricos también se incrementó. El gelrite resultó en una alta proliferación de brotes, pero con mayor incidencia de la hiperhidricidad que el medio gelificado con agar. Se obtuvo una reducción satisfactoria de la hiperhidricidad (18%), cuando la concentración de gelrite se incrementó hasta 3,0 g l-1. No obstante, la multiplicación de los brotes en este tratamiento más allá del 11no subcultivo favoreció la hiperhidricidad, lo que afectó la calidad de los brotes y su competencia para la proliferación. Las plantas fueron enraizadas ex vitro, transferidas a condiciones de invernadero para su aclimatización y diez semanas después de la transferencia estaban listas para la plantación en campo. Palabras clave: citoquinina; forestal; micropropagación; desorden morfo-fisiológico; teca

Título en ingles: Micropropagation of Stevia rebaudiana Bertoni, a natural sweetener, through pre existing meristem explants Titulo corto: Micropropagación de Stevia rebaudiana Bertoni Resumen: Las hojas de Stevia rebaudiana son fuente de esteviosidos y rebaudiosidos, sustancias endulzantes con bajo contenido calórico. La propagación sexual y clonal de estevia es difícil debido a la calidad de la semilla y el tamaño reducido de la planta. Para evaluar la multiplicación, brotes establecidos in vitro fueron cultivados en ½ MS con cinco concentraciones de BAP (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 y 17.6 µM). Posteriormente, los tallos multiplicados se subcultivaron en presencia de cinco concentraciones de ANA (0.0, 2.69, 5.37, 10.74 de 21.48 µM) para evaluar enraizamiento. Finalmente, tallos multiplicados sin enraizar, tratados o no con 0.4% de ANA, y otros enraizados in vitro fueron transferidos a condiciones ex vitro. Todos los experimentos fueron distribuidos usando un DCA. Los resultados indicaron que el medio 1/2MS adicionado con BAP indujo una mayor tasa de multiplicación. 10.74 µM de ANA indujo el mejor enraizamiento; sin embargo, los tallos sin enraizamiento resultaron en la mayor supervivencia ex vitro. Palabras clave: estevia, esteviosido, micropropagación, reguladores de crecimiento vegetal. Abstract: Stevia rebaudiana Bertoni leaves are source of stevioside and rebaudioside, non-caloric sweetener substances. Seed and cutting estevia propagation are difficult due to seed sterility and small size plant. To evaluate shoot proliferation, in vitro-established estevia shoots were cultured in ½ MS with five (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 and 17.6 µM) BAP levels. Afterwards, proliferated shoots were cultured on ½ MS with five NAA levels (0.0, 2.69, 5.37, 10.74 and 21.48 µM) to evaluate shoot rooting. Finally, non-rooted shoots, in vitro-rooted shoots and non-rooted shoots treated with a 0.4% NAA powder were transferred to ex vitro conditions. All experiments were distributed using a complete randomized design. The data indicated that BAP treated shoots showed a higher rate of shoot proliferation. An 87% of rooting and higher number of roots per explant was achieved with 10.74 µM of NAA. Non-rooted shoots transferred directly from Stage II showed the best survival rate. Key words: Stevia, stevioside, micropropagation, plant growth regulator.

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En este trabajo se evalúo el cultivo de tejidos vegetales in vitro como una alternativa en la propagación y preservación de Ilex kunthiana, especie endémica de gran interés en programas de revegetalización. Se determinó que el efecto del Benlate® a 0,5% durante 12 horas y el hipoclorito de sodio al 0,5% por 1 min., como agentes desinfectantes de las semillas, permiten obtener el 100% de explantes adaptados a condiciones in vitro. Las semillas son cultivadas en medio MS con Ácido Giberélico (AG3) (0,0, 0,5, 1,0 mg/L). Cuando las plántulas germinaron, se aislaron los nudos con yemas axilares y se cultivaron en medio MS enriquecido con la Auxina Ácido Indol Butírico (AIB) (0,0, 0,5, 1,0 mg/L) y la citoquinina 6-bencilaminopurina (BAP) (0,0, 0,5, 1,0 mg/L). A fin de inducir su enraizamiento, posteriormente los brotes regenerados se cultivaron con las Auxinas Ácido Indol Butírico (AIB) (0,0, 0,5, 1,0 mg/L) y Ácido Naftalén Acético (ANA) (0,0; 0,5; 1,0 mg/L). Se estableció que 0,5 mg/L de AG3 favoreció la 100% de germinación de las semillas que fueron la fuente de los nudos. El mejor índice de formación de brotes se logró cuando los nudos se cultivaron con 0,5 mg/L del BAP y 0,5 mg/L del AIB que posteriormente fueron exitosamente enraizados con 0,5 mg/L de AIB, estableciendo las condiciones mas adecuadas para la propagación in vitro de Ilex kunthiana. Palabras clave: Ilex kunthiana; micropropagación; plantas en vías de extinción; AIB; BAP; micropropagatio; endangered plant.

Con el empleo del sistema de inmersión temporal fue posible incrementar la multiplicación in vitro de los segmentos nodales en el clon de ñame Blanco de Guinea. Con este tipo de sistema de cultivo se obtuvieron los más altos valores para la altura de la planta, número de entrenudos por planta, así como para la masa fresca y seca de las mismas. Las condiciones de cultivo creadas en el sistema de inmersión temporal para la multiplicación in vitro de los segmentos nodales lograron el más alto coeficiente de multiplicación (8,50), así como redujeron el número de plantas con síntomas de vitrificación (3,30). Las plantas cultivadas en este tipo de sistema de cultivo se caracterizaron por el mayor crecimiento de los segmentos nodales, coloración verde y hojas más desarrolladas. La utilización de este tipo de sistema de cultivo en la fase de multiplicación in vitro de los segmentos nodales posibilitará incrementar el empleo de la micropropagación para la producción de semilla en el complejo Dioscorea cayenensis - D. rotundata. Palabras clave: sistema de inmersión temporal; medio líquido; micropropagación; temporary immersion system; liquid medium; micropropagation.

Puya santossi (L) es una especie endémica de la zona altoandina que se encuentra en vías de extinción, razón por la cual es indispensable establecer los procedimientos de conservación de este importante germoplasma. Ante esta situación, en este estudio se evaluó la adaptación a condiciones in vitro de P. santossi con la utilización del Benlate® y nueve tratamientos del efecto del hipoclorito de sodio en el proceso del control de la contaminación, y el efecto de cinco fitorreguladores de crecimiento en el desarrollo morfogenético de meristemos caulinares y láminas foliares. El medio de cultivo básico empleado fue el MS, enriquecido con los siguientes fitorreguladores: en el cultivo de meristemos, el ácido indol butírico (AIB) y la bencilaminopurina (BAP) (0,0; 0,5; 1,0 y 1,5 mg/L). Para el enraizamiento de los brotes regenerados, el ácido α -naftalén acético (ANA) (0,0; 1,0; 2,0 y 3,0 mg/L). En la inducción morfogenética de láminas foliares, el ácido 2,4-diclorofenoxi acético y la Kinetina (0,0; 1,0; 3,0 y 5,0 mg/L). De los nueve tratamientos evaluados en el control de la contaminación se observó que el tratamiento 5 (NaOCl al 1% - 10 min) fue el más exitoso. El explante más adecuado para la propagación in vitro de Puya santossi es el meristemo, que permite la proliferación masiva de brotes adventicios cuando son cultivados en el medio MS enriquecido con 1,5 mg/L de BAP. El enraizamiento de los brotes, provenientes del cultivo de meristemos, se logró con 3,0 mg/L de ANA. Este protocolo permite la propagación a gran escala de P. santossi, y además sirve como modelo de conservación para especies que se encuentran en vías de extinción. En esta investigación se descubrió que el proceso morfogenético de las láminas foliares fue inhibido por la presencia de un grupo de algas clorofíceas que se encontraron asociadas simbióticamente con P. santossi. Palabras clave: Puya santossi; micropropagación; plantas en vías de extinción; reguladores de crecimiento.

Un eficiente sistema de propagación bajo condiciones in vitro fue desarrollado para Dodonea viscosa (L) Jacq., un arbusto endémico y en vías de extinción. En este estudio se evaluó el efecto de cuatro fitohormonas en el desarrollo morfogénico de nudos y láminas foliares bajo condiciones in vitro. El medio de cultivo básico empleado fue el de Murashige y Skoog (1962), enriquecido con los siguientes fitoreguladores: en el cultivo de nudos el ácido indol butírico y la bencilaminopurina (0, 0,5, 1 y 1,5 mg/l-1); en láminas foliares el ácido 2,4-diclorofenoxi acético y la kinetina (0, 1, 3 y 5 mg/l-1). El establecimiento de D. viscosa bajo condiciones in vitro se logra mediante el uso del benlate® al 2% durante una hora, y el hipoclorito de sodio al 0,5% durante 5 minutos. La incubación bajo condiciones de oscuridad controla la oxidación de los explantes de D. viscosa, mientras que el ácido cítrico y el ácido ascórbico no controlaron la oxidación de los explantes expuestos a la luz. El nudo es el explante adecuado para micropropagar D. viscosa en ausencia de fitohormonas. El mejor tratamiento inductor del proceso morfogénico en láminas foliares fue el ocho (1,0 mg/l-1 de kinetina y 5,0 mg/l 1 de 2,4-D). Este protocolo es un modelo de conservación para especies que se encuentran en vías de extinción, y además permite la propagación a gran escala de Dodonea viscosa (L) Jacq.

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EI empleo de las técnicas de cultivo de tejidos vegetales para la propagación y el mejoramiento de especies de interés forestal es una importante herramienta de apoyo a los programas de reforestación y establecimiento de huertos semilleros clonales. EI objetivo del presente trabajo consistió en el desarrollo de una metodología para la propagación clonal in vitro de la teca a partir de arboles elite. Como fuente de explantes se emplearon ápices procedentes de brotes epicormicos, los cuales se sembraron en el medio de cultivo de Schenk y Hildebrandt, enriquecido con los microelementos de Bourgin y Nitsch, Bencil Amino Purina (BAP 0,5 mg/L) y solidificado con agar. Para la fase de proliferación se empleó el medio de cultivo de Murashige y Skoog con las sales nitrogenadas reducidas a la mitad de su concentración normal. Se evaluaron diferentes concentraciones de BAP (0, 0,1, 0,5 Y 1,0 mg/L). EI mayor coeficiente de multiplicaci6n y mejor calidad de los brotes se logr6 con 0,5 mg/L de BAP. El enraizamiento se realizó en condiciones ex vitro; se emplearon microesquejes apicales con una longitud pro media de 1,5 a 2,0 cm. Estos se trataron con diferentes concentraciones de AlB (0,250, 500, 1.000, 2.000, 4.000 Y5.000 mg/L), Los mayores porcentajes de enraizamiento y supervivencia de las plantulas se lograron con 4.000 mg/L de AlB. Esta metodología permitió el establecimiento de los arboles en condiciones de campo para apoyar los programas de huertos semilleros clonales y plantaciones a escala comercial de Refocosta.

La abundancia de Drosera sp., único género de la familia Droseraceae en Colombia, es relativamente baja. En el mundo existen alrededor de 170 especies de este género, tres de ellas son conocidas hasta el presente en Colombia. Una de especial interés es Drosera colombiana (A. Fernández) por su utilización en medicina popular debido a sus propiedades antitusígenas y antiespasmódicas. D. colombiana posee hojas cubiertas de pelos largos, cafés rojizos, con glándulas móviles en los extremos, que atrapan a los insectos y los digieren por la acción de enzimas. Debido a la escasa población y su inevitable explotación para la comercialización, se propone una metodología y estandarización de un medio de cultivo in vitro para su propagación. El método se basó en el estímulo de primordios foliares. La eficiencia de este nuevo sistema estriba en el mayor número de plantas obtenidas y en la gran estabilidad vegetativa de los individuos. En un medio de cultivo Murashige y Skoog (MS), suplementado con 0,01 mg L-1 de AG3, se logró la inducción de múltiples brotes a partir de sus nódulos foliares. El enraizamiento in vitro de los brotes fue de un 100% cuando se utilizó MS/2 sin ningún suplemento hormonal. Es posible que se puedan aclimatar en invernadero con una eficac ia del 80%, instaurando un ambiente muy húmedo, con una temperatura no menor a los 5 ºC.