Summary Background: recombinant bovine somatotropin (rbST) is used in bovine embryo donors to improve superovulatory response and embryo quality. Objectiv e: this study evaluated the effect of applying one versus two injections of 500 mg of rbST to donor Holstein heifers on estrus incidence (IE), diameter of the largest preovulatory follicle (dLPF), superovulation response (SR), embryo yield, and pregnancy rate in recipient Holstein cows (PRR). Methods: two superstimulation programs were conducted. Heifers were assigned to one of two treatments: 1) rbST-I, n = 5: heifers received one injection of rbST on day 0 (day of CIDR (controlled internal drug release) removal); 2) rbST-II, n = 5: heifers received the first rbST injection on day -8 and the second one on day 0. Thirty-eight cows were used as recipients and were assigned to receive one embryo from one of the two treatments. Results : there was no effect of treatment (p > 0.05) on PRR, dLPF, IE, and SR. The number of oocytes increased (p 0.05) of degenerated (1.0 ± 0.5 vs 4.5 ± 3.0) or transferable (1.0 ± 0.5 vs 1.4 ± 0.7) embryos between heifers in the rbST-I and rbST-II treatments, respectively. Moreover, no oocytes or embryos were recovered from 36.8% of donor heifers in either treatment. Conclusion : the application of 500 mg of rbST on days -8 and 0 of the follicular wave synchronization program did not increase the superovulatory response but significantly reduced the number of oocytes recovered from superovulated Holstein heifers. Keywords: conception rate, donor heifers, incidence of estrus, preovulatory follicle. Resumen Antecedentes : la somatotropina bovina recombinante (rbST) ha sido aplicada en vacas donadoras de embriones con el objetivo de mejorar la respuesta superovulatoria y la calidad embrionaria. Objetivo : este trabajo de investigacion evaluo el efecto de aplicar una versus dos inyecciones de 500 mg de rbST a novillas Holstein donadoras de embriones sobre la incidencia de celo (IE), diametro del foliculo preovulatorio de mayor tamano (dLFP), respuesta superovulatoria (SR), produccion de embriones y tasa de concepcion en vacas Holstein receptoras de embriones (PRR). Metodos : se llevaron a cabo dos programas de superestimulacion. En cada programa las novillas fueron asignadas a uno de dos tratamientos: 1) rbST-I, n = 5: las novillas recibieron una inyeccion de rbST el dia cero (dia de remocion del CIDR (dispositivo intravaginal liberador de progesterona); 2) rbST-II, n = 5: las novillas recibieron la primera inyeccion de rbST el dia -8 y la segunda el dia cero. Treinta y ocho vacas fueron utilizadas como receptoras. Cada receptora recibio un embrion proveniente de una donadora de uno de los dos tratamientos. Resultados : la aplicacion de una o dos inyecciones de rbST no afecto (p > 0,05) la PRR, dLFP, IE ni la SR. El numero de ovocitos fue mayor (p 0,05) entre las vaquillas del tratamiento rbST-I y rbST-II. Ademas, del 36,8% de donadoras de ambos tratamientos no se colecto ningun ovocito o embrion. Conclusion : la aplicacion de 500 mg de rbST los dias -8 y cero del protocolo de sincronizacion de la onda folicular no incremento la respuesta superovulatoria pero redujo significativamente el numero de ovocitos recolectados de vaquillas Holstein superovuladas. Palabras clave: foliculo preovulatorio, incidencia de celo, novillas donadoras, tasa de concepcion. Resumo Antecedentes : a somatotropina bovina recombinante (rbST) tem sido aplicada em vacas doadoras de embrioes com o objetivo de melhorar a resposta superovulatoria e a qualidade embrionaria. Objetivo : o presente trabalho avaliou o efeito da aplicacao de uma contra duas injecoes de 500 mg de rbST em novilhas de raca Holandesa doadoras de embrioes na incidencia do cio (IE), diâmetro do maior foliculo pre-ovulatorio (dLFP), resposta superovulatoria (SR), producao de embrioes e taxa de gestacao em vacas receptoras de raca Holandesa (PRR). Metodos : foram feitos dois programas de superestimulacao, em cada superstimulacao as novilhas foram distribuidas em um de dois tratamentos: 1) rbST-I, n = 5: as novilhas receberam uma injecao de rbST no dia zero (dia de remocao do CIDR -dispositivo intravaginal de liberacao controlada de progesterona). 2) rbST-II, n = 5: as novilhas receberam a primeira injecao de rbST no dia -8 e a segunda injecao no dia zero. Trinta e oito vacas foram utilizadas como receptoras e receberam um embriao proveniente de uma doadora de um dos dois tratamentos. Resultados : a aplicacao de uma ou duas injecoes de rbST nao afetou (p > 0,05) a PRR, dLFP, IE nem a SR. O numero de oocitos foi maior (p 0,05) entre as novilhas do tratamento rbST-I e rbST-II. Alem disso, do 36.8% das doadoras de ambos os tratamentos nao foi possivel coletar nenhum oocito ou embriao. Conclusoe s: A aplicacao de 500 mg de rbST o dia -8 e zero do protocolo de sincronizacao da onda folicular nao aumentou a resposta superovulatoria, mas diminuiu significativamente o numero de oocitos coletados de novilhas de raca Holandesa superovuladas. Palavras chave: foliculo pre-ovulatorio, incidencia do cio, novilhas doadoras, taxa de gestacao.