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La presente tesis doctoral fue diseñada para optimizar los procesos de criopreservación de espermatozoides de morueco y conseguir una mejor respuesta celular basada en el incremento del vigor cinético, supervivencia, funcionalidad e integridad morfológica. Los espermatozoides preservados deben ser capaces de atravesar la barrera cervical luego de una inseminación artificial (IA) cervical o transcervical. Las técnicas de reproducción asistida (TRA) usadas en los actuales programas de selección y mejora genética ovina están orientadas a mejorar la respuesta espermática para incrementar la fertilidad. En este sentido, la presente tesis está enfocada en la elección de un método de purificación celula rmás eficaz, diluyentes y nuevos aditivos que preserven exitosamente los espermatozoides tanto en refrigeración como en congelación, así como a la optimización de rampas de congelación que minimicen el daño a la células espermática..., The present thesis was designed to optimize the processes of cryopreservation of ram sperm to achieve a successful cellular response based on an increase in kinetic vigor, survival, functionality and morphological integrity. The preserved sperm must be able to cross the cervical barrier after either cervical or transcervical artificial insemination (AI). Assisted reproductive techniques (ART) used in the current ovine crossbreeding programs are aimed to improve sperm response to increasing fertility. In this sense, this thesis was focused on the choice of most effective sperm selection method, extenders and new additives that successfully preserve sperm both in cooling or freezing using controlled cooling rates.

La presente tesis doctoral fue diseñada para optimizar los procesos de criopreservación de espermatozoides de morueco y conseguir una mejor respuesta celular basada en el incremento del vigor cinético, supervivencia, funcionalidad e integridad morfológica. Los espermatozoides preservados deben ser capaces de atravesar la barrera cervical luego de una inseminación artificial (IA) cervical o transcervical. Las técnicas de reproducción asistida (TRA) usadas en los actuales programas de selección y mejora genética ovina están orientadas a mejorar la respuesta espermática para incrementar la fertilidad. En este sentido, la presente tesis está enfocada en la elección de un método de purificación celula rmás eficaz, diluyentes y nuevos aditivos que preserven exitosamente los espermatozoides tanto en refrigeración como en congelación, así como a la optimización de rampas de congelación que minimicen el daño a la células espermática...

Esta tesis ha sido pensada y estructurada para estudiar los aspectos básicos de la espermatología aviar y desarrollar las técnicas de criopreservación de semen en diferentes especies de aves. Estas técnicas, que forman parte de las denominadas técnicas de reproducción asistida o TRA están ganando cada vez más protagonismo en la mejora y preservación tanto de razas cómo de especies. El desarrollo de estas técnicas ha permitido la proliferación de proyectos de cría en cautividad apoyando los programas de conservación de especies autóctonas y han supuesto una importante mejora en el manejo genético de las poblaciones. Aún así, a pesar del éxito obtenido con estas técnicas en algunas especies de aves, son técnicas apenas desarrolladas en aves silvestres, en gran parte debido a la falta de conocimientos sobre los aspectos fisiológicos y las características bilógicas de los espermatozoides de estas especies. El estudio de los aspectos biofísicos de los gametos y del tejido gonadal de las diferentes especies es el método más efectivo para desarrollar protocolos apropiados de criopreservación. Además en las diferentes especies de aves silvestres el acceso al material genético y las muestras viables de semen es difícil, consecuencia de su anatomía y fisiología, y muy reducida en el tiempo, debido a la breve estación reproductiva que presentan y por lo tanto las técnicas de criopreservación representan, además, una posibilidad de mejorar el aprovechamiento de los recursos disponibles. Es por ello que en el trabajo se planteó en primer lugar el desarrollo y evaluación de las técnicas de recolección post-mortem de semen, empleando como modelo una especie de ave doméstica, el gallo (Capítulo 1)..., This thesis has been design and structured the basic aspects of avian spermatology and developing cryopreservation protocols y different avian species. These techniques, which are part of the artifitial reproduction techniques or ART, are increasing their importance for improving and preserving varities and species. The developed of these techniques has allowed the growth of captive breeding projects backing the efforts to native species conservation, with an important improvement of the population management subserving the genetic variability. Therefore, apart from the punctual success with some species, these are techniques not completely developed in wild species, in part due to the lack of knowledge about physiology, and biology characteristics of the sperm of these species. The study of the biophysical aspects of gametes and gonadal tissue of the different species is the most effective method for developing of suitable cryopreservation protocols. Moreover in wild species the access to genetic material and viable spermatozoa samples is challenging, due to their anatomy, physiology characteristics, and the short breeding season, so cryopreservation techniques represent an improvement of resources management. For this reason in this work was structured in two phases; the first part, the developing and evaluation of different post mortem collection techniques for spermatozoa in a domestic species as a model (Chapter 1). In this chapter two post mortem collection techniques, flushing and floating, are compared...

Esta tesis ha sido pensada y estructurada para estudiar los aspectos básicos de la espermatología aviar y desarrollar las técnicas de criopreservación de semen en diferentes especies de aves. Estas técnicas, que forman parte de las denominadas técnicas de reproducción asistida o TRA están ganando cada vez más protagonismo en la mejora y preservación tanto de razas cómo de especies. El desarrollo de estas técnicas ha permitido la proliferación de proyectos de cría en cautividad apoyando los programas de conservación de especies autóctonas y han supuesto una importante mejora en el manejo genético de las poblaciones. Aún así, a pesar del éxito obtenido con estas técnicas en algunas especies de aves, son técnicas apenas desarrolladas en aves silvestres, en gran parte debido a la falta de conocimientos sobre los aspectos fisiológicos y las características bilógicas de los espermatozoides de estas especies. El estudio de los aspectos biofísicos de los gametos y del tejido gonadal de las diferentes especies es el método más efectivo para desarrollar protocolos apropiados de criopreservación. Además en las diferentes especies de aves silvestres el acceso al material genético y las muestras viables de semen es difícil, consecuencia de su anatomía y fisiología, y muy reducida en el tiempo, debido a la breve estación reproductiva que presentan y por lo tanto las técnicas de criopreservación representan, además, una posibilidad de mejorar el aprovechamiento de los recursos disponibles. Es por ello que en el trabajo se planteó en primer lugar el desarrollo y evaluación de las técnicas de recolección post-mortem de semen, empleando como modelo una especie de ave doméstica, el gallo (Capítulo 1)...