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Tissue culture cells' metabolism and viability are measured by the mitochondrial reduction rate of a yellow tetrazolium salt (MTT) to blue formazan crystalls in the MTT-bioassay. Thus the MTT-bioassay is a standardizable and reproducible bioassay for measuring cytotoxicity or cytostimulation. It is shown that the MTT-bioassay is also very suitable for determining bacterial cytotoxins using Escherichia coli's Shiga-like toxins as example. 177 strains ofE.coli, isolated from carcasses and organs of cattle, are classified biochemically and tested for cytotoxin production by means of the MTT-bioassay. One of these strains is recognized as producer of Shiga-like toxin 2. 4 Enterohemolysin-producing strains ofE.coli are cultivated from a feces sample of a diarrhoeic nubian ibex and identified as Shiga-like toxin 1 producers by help of the MTT-bioassay.

Successful cultivation and titration of Borna disease virus in cell cultures enabled detailed studies of the virus properties. Borna virus is labile towards treatment with heat, pH 3.0 and lipid solvents. It is relatively stable at low temperatures and in frozen state. It is easily inactivated by ultraviolet light as e.g. vesicular stomatitis virus. After ultrafiltration studies, the size of the infectious virus unit is between 80 and 100 nm. Its buoyant density in cesium chloride is 1.165 g per ml. The one step multiplication curve shows that Borna virus has a replication cycle of about 2 days in BSC 1 cells. In growth experiments using antimetabilites it behaves like certain RNA containing viruses. As its multiplication is not inhibited by bromo- and iododeoxyuridine and actinomycin D, no DNA step seems to be involved in virus synthesis. Regarding these properties and the intracellular antigen distribution as shown by fluorescent antibodies, it is not possible to attribute Borna virus to any of the established virus groups.

Isolation of a viral agent (107) directly from brain explants of a 15-month-old heifer with symptoms of a sporadic encephalomyelitis is described. The virus shares properties with the paramyxovirus family. It grows in a variety of cell cultures from different species, and induces nuclear and cytoplasmic inclusion bodies in infected cells. Nucleocapsids measuring 17 nm in diameter were found in the nucleus and cytoplasm of these cells when studied electron microscopically, thus indicating a close relationship of the agent to the measles-distemper-rinderpest group. No infectious virus was released from infected cells, although alignment of nucleocapsids was observed beneath the cell membrane, and no hemagglutinating activity could be detected with the methods employed. The 107 agent was compared serologically with parainfluenza viruses type 1, 2 and 3, simian virus 5, mumps and Newcastle disease virus (NDV), two bovine respiratory syncytial viruses and measles/subacute sclerosing panencephalitis, distemper and rinderpest viruses, always using 107 virus infected CV1 cells and antiserum of the different viruses in indirect FA tests. Positive FA reactions were observed only with two sera obtained from SSPE patients with high antibody titer to SSPE virus, and with one rabbit-anti-rinderpest serum. The titers of these sera to 107 virus, however, were significantly lower than those against homologous viruses. Five out of 9 sera from randomly selected healthy cattle showed antibody titers between 1:10 and 1:80 to 107 virus in FA tests. The significance of these results is discussed with respect to the epidemiology of SSPE in children and its possible implication with rinderpest in Europe.

The genome of stomatitis papulosa virus (a parapoxvirus) was cleaved with the restriction endonucleases HindIII and EcoRI, each giving rise to 6 fragments respectively. Double digestion with both enzymes resulted in 8 bands, two of which contained DNA fragments in double molar concentrations as revealed by reciprocal digests of isolated DNA fragments. The genome size, estimated by summation of the molecular weights of the fragments, is approximately 86 X 10(6) daltons, some 30 X 10(6) daltons smaller than vaccinia virus (an orthopoxvirus) DNA. The cleavage sites of HindIII and EcoRI endonucleases were mapped on the genome by analysis of reciprocal digests of isolated DNA fragments and by cross-hybridization experiments. This yielded two mapped segments which were then oriented relative to one another by cleavage of isolated partial digestion products. The terminal restriction fragments show rapid renaturation after alkali denaturation and subsequent neutralization, indicating that stomatitis papulosa virus DNA contains terminal cross-links analogous to those found in vaccinia virus DNA.

Der nach einer Infektion der Chorioallantoismembran des Huhnerembryos entstehende Taubenpocken-Primarherd hat nur ein begrenztes Wachstum. Der Grund hierfur liegt darin, das nach einer bestimmten Zeit die Zellen am Rande des Pockenherdes die Fahigkeit erlangen, einer weiteren Ausbreitung der Virusinfektion zu widerstehen. Sie bauen das sich neubildende Virus intrazellular ab und verhindern dadurch eine weitere, ortliche Ausbreitung der Virusinfektion. Die einzelnen Abbaustadien werden beschrieben und die antiviralen, zellularen Abwehrvorgange in den Spatstadien einer Pockeninfektion diskutiert.

Das Variolavirus konnte aus menschlichem Pustel- und Krustenmaterial intraperitoneal in infantilen Mausen angezuchtet und in fortlaufenden Passagen weitergefuhrt werden. Es blieb innerhalb von 20 Passagen in bezug auf seine biologischen Eigenschaften im Huhnerembryo stabil. Eintagige Mause waren empfanglicher als dreitagige Tiere. Innerhalb verschiedener Mausefamilien bestand eine unterschiedliche Resistenz gegenuber der Variolainfektion. Bei resistenteren Tieren vermehrte sich das Virus, ohne klinische Erscheinungen zu verursachen.

Ein vom Rhinozeros isolierter Pockenvirusstamm konnte als Huhnerpockenvirus charakterisiert werden. Das Virus unterschied sich von den bisher bekannten Huhnerpockenstammen in mehrfacher Hinsicht. Es vermehrte sich nicht in Zellkulturen aus embryonalen Huhnerfibroblasten mit einem cytopathogenen Effekt, die Pockenherdbildung auf der Chorioallantoismembran des Huhnerembryos und die parallel laufenden entzundlichen Prozesse verliefen gewebefreundlicher und die Inkubationszeit im Eintagskuken betrug bei relativ starker Virulenz 3 bis 4 Wochen.

Huhner-, Tauben- und Kanarienpockenviren fuhrten in Huhnerembryofibroblasten-Kulturen zu einer typischen Plaque-Bildung. Die optimale Bebrutungszeit betrug 11 Tage. Es wird eine geeignete Technik beschrieben, mit der es moglich ist, die Kulturen mindestens 11 Tage unter dem festen Agar-uberschichtungsmedium aktiv zu erhalten. Bei allen drei Virusarten bestand eine lineare Beziehung zwischen der Zahl der plaquebildenden Einheiten und der Viruskonzentration. Die Adsorptionszeit betrug 45 Minuten. Ein Zusatz von 5% KAlberserum zur Verdunnungsflussigkeit bei den Virustitrierungen bewirkte eine leichte Titererhohung. Die Plaque-Technik war der Titrierung im bebruteten Huhnerei uberlegen, gegenuber dem Rohrchen-Kulturtest fiel sie etwas ab. Die Huhner-, Tauben- und Kanarienpockenviren bildeten in Form und Aussehen unterschiedliche Plaques. Die Plaque-Bildung stellt damit eine wertvolle Hilfe fur die Differenzierung der einzelnen Virusarten der Geflugelpocken-Untergruppe dar. Bei der Plaque-Bildung kam es zur Ausbildung eines sogenannten RingzonenphAnomens, wie es schon bei der Pockenherdbildung auf der Chorioallantoismembran des Huhnerembryos beschrieben wurde. Ein Zusammenhang mit dem Mechanismus der ortlichen Virusausbreitung einerseits und der Interferonbildung andererseits wurde diskutiert.

Ein in Polen aus einem abortierten Pferdefotus isolierter Erreger, Stamm RAC, wurde auf Grund seiner Eigenschaften als Rhinopneumonitisvirus der Pferde charakterisiert. Das Rhinopneumonitisvirus gehort zur Gruppe der Herpesviren, Auffallig ist das breite kulturelle Wirtsspektrum des Rhinopneumonitisvirus, das sich in Pferde-, Kalber- und Schweinenieren-Zellkulturen zuchten last, wobei vor allem den leicht erhaltlichen Schweinenierenkulturen der Vorzug gegeben werden soll. Nach Adaptierung ist eine Zuchtung auch in Schafnieren-, Bullenhoden- und Huhnerembryofibroblasten-Kulturen moglich.

Tissue cultures of chick embryo fibroblasts are suitable for culturing fowl-, pigeon-, and canary pox viruses. Virus multiplication is accompanied by cytopathogenic effects which allow the titration of these viruses and the differentiation between different virus strains, especially in the fowl pox group.

1. Trotz der guten Erfahrungen einzelner Autoren mit Eihaut- und Kulturvaccinen haben sich diese Impfstoffe in der allgemeinen Praxis nicht eingefuhrt. Das Fur und Wider wurde diskutiert. 2. Aus einem Zellstamm von Rinderzungen, der sich in Dauerkulturen weiterfuhren last, wurde eine Pockenschutzvaccine hergestellt. Ein Impfstoff aus bovinen Zellkulturen last erwarten, das er die gleichen biologischen, vor allem aber immunisierenden Eigenschaften hat, wie eine Dermovaccine. 3. Die verschiedenen Methoden der Wertbestimmung und ihre Eignung fur qualitative Prufungen der Vaccine werden aufgezeigt. 4. Die Wertbestimmung der Kulturvaccine im bebruteten Huhnerei, am Kaninchen nachGroth undCalmette-Herzberg und in der infantilen Maus ergab keine Unterschiede gegenuber der entsprechenden Dermovaccine desselben Virusstammes. Die Uberprufung der Kulturvaccine am Menschen brachte das gleiche Ergebnis. Die mehrmalige Passage des Vaccinevirus in der Rinderzellkultur hat die biologischen Eigenschaften der daraus produzierten Variolavaccine, soweit die tierexperimentellen Versuche und die Impfergebnisse am Menschen ein Urteil erlauben, in keiner Weise verandert. 5. Falls die Anwendung auf breiter Basis die bisherigen Beobachtungen bestatigt, haben wir ein Verfahren, das uns erlaubt, Kulturimpfstoff mit den bewahrten Eigenschaften der Dermovaccine herzustellen.

A virus isolated from horses after abortion was propagated in cultures of swine kidney cells. Shape and structure of the virus particles as seen in negatively stained preparations and changes observed in ultrathin sections of infected cells suggest that the virus belongs to the herpes group. However, most of the virus particles in the nucleus and in the cytoplasm have a structure different from that of herpes virus. Instead of the nucleoid, vesicle-like formations are arranged in the particle, so as to produce a cross-shaped light area in the center of the particle.

61 untersuchte Pockenimpfstoffe des In- und Auslandes waren frei von ECBO-Viren. In Pockenimpfstoffen, die von sechs ECBO-Virus ausscheidenden Jungtieren (zwei colostrumfrei aufgezogene Kalber und vier Jungrinder) hergestellt worden waren, konnten ebenfalls mit keiner Methode ECBO-Viren nachgewiesen werden. Zwischen dem Vaccine- und ECBO-Virus besteht in empfanglichen Zellen keine Interferenz. Da sich das ECBO-Virus aber anscheinend nicht in Rinderhaut-Epithelzellen vermehren kann, ist die Gefahr einer Verunreinigung von Pockenimpfstoffen mit ECBO-Viren bei Anwendung von Impfverbanden und entsprechenden Reinigungsverfahren vor der Impfstoffabnahme nicht gegeben.

Durch zahlreiche Passagen in Schweinenierenkulturen veranderten sich, parallel zur Abnahme der Virulenz fur das Schwein, auch die chemischphysikalischen Eigenschaften des Teschenvirus.