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The survival of Triatoma infestans and of somatic cells from this species is affected by heat shock. In this study, we examined the cell death responses of male germ line cells from 5th instar nymphs 7 and 30 days after heat shock exposure (40ºC, 1 h). The preparations were stained by the Feulgen reaction and the TUNEL immunocytochemical assay. Apoptosis was elicited by heat shock, with positive TUNEL responses in spermatogonial chromatin and chromosomes, spermatids and sperm cells. Spermatogonia were most affected seven days after the shock whereas some spermatids and sperm cells exhibited DNA fragmentation only thirty days after heat shock. The rate of cell death varied among the cells. In some cases, cellular differentiation was unaffected by heat shock, with DNA fragmentation occurring towards the end of spermatogenesis.Uma vez que em Triatoma infestans a sobrevivência de células somáticas e dos próprios espécimes é afetada por choques de temperatura, foi estudada a indução de morte celular em células da linhagem germinativa masculina de ninfas de 5o. estadio 7 e 30 dias após choque de 1 h a 40ºC. Os preparados foram submetidos à reação de Feulgen e ao teste imunocitoquímico TUNEL. Foi encontrada apoptose induzida pelo choque de temperatura, sendo que respostas positivas ao TUNEL foram vistas na cromatina e em cromossomos de espermatogônias e em espermátides e espermatozóides. As espermatogônias foram afetadas principalmente 7 dias após o choque, enquanto algumas espermátides e espermatozóides exibiram fragmentação de DNA apenas 30 dias após o choque. Admite-se que a velocidade com a qual avança o processo de morte celular varie nessas células. Diferenciação celular não é impedida em parte das células afetadas, permitindo que a fragmentação de seu DNA ocorra mais tardiamente, inclusive no fim da espermatogênese.

Nuclear image analysis of Feulgen-stained V79 fibroblasts after three days in culture was used to discriminate apoptotic cells and cells suspected to be undergoing apoptosis from control cells based on parameters such as the Feulgen-DNA content, degree of chromatin condensation and nuclear areas, in association with visual morphology. The fibroblasts were initially plated at a density of 10(5) cells/ml and incubated under optimal culture conditions without subculturing. Following confluency, the cells underwent contact inhibition apoptosis. Image analysis revealed three nuclear phenotypes which were defined in terms of their morphological characteristics and levels of chromatin condensation. A decrease in the amount of Feulgen-DNA was detected in apoptotic cells and in cells suspected of undergoing apoptosis. This decrease was assumed to indicate DNA loss. Image analysis procedures may therefore provide a useful tool for discriminating cells in the early stages of apoptosis.Análise de imagem de núcleos de fibroblastos V79 após três dias em cultura foi realizada em preparados submetidos à reação de Feulgen para discriminar células suspeitas de estarem em fases precoces da apoptose daquelas comprovadamente apoptóticas. Parâmetros tais como conteúdo de Feulgen-DNA, grau de condensação cromatínica e área nuclear foram estudados em associação com a morfologia estabelecida em termos visuais. Os fibroblastos foram inicialmente plaqueados numa densidade de 10(5) células/ml e encubados sob condições ótimas de cultura sem subcultura. Com a confluência, as células sofreram apoptose pela inibição por contato. A análise de imagem revelou três fenótipos nucleares definidos quanto a características morfológicas e níveis de condensação cromatínica. Foi detectado decréscimo no conteúdo de Feulgen-DNA das células apoptóticas mas também nas células suspeitas de apoptose. Admite-se que este decréscimo indique perda de DNA. A análise de imagem pode ser, portanto, uma ferramenta útil na discriminação de células mesmo em fases precoces da apoptose.

"Pé-duro" (hard foot) is a rare breed of beef cattle of European (Bos taurus taurus) origin, originated in northern and northeastern Brazil. Y chromosome morphology, outer genital elements and other phenotypic characteristics were examined in 75 "pé-duro" bulls from the Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa) herd in the Brazilian State of Piauí. The purpose was to investigate possible racial contamination with Zebu animals (Bos taurus indicus) in a cattle that has been considered closest to its European origin (B. t. taurus). The presence of both submetacentric and acrocentric Y chromosomes, typical of B. t. taurus and B. t. indicus, respectively, and the larger preputial sheath in bulls with an acrocentric Y chromosome indicated racial contamination of the "pé-duro" herd with Zebu cattle. Phenotypic parameters involving horn, dewlap, ear, chamfer, and coat color characteristics, indicative of apparent racial contamination, were not associated with acrocentric Y chromosome.Um plantel de touros "pé-duro", consistindo de 75 animais do núcleo da Embrapa envolvido com a preservação desse gado no Estado do Piauí, foi examinado quanto à morfologia do seu cromossomo Y, bem como em relação a elementos da genitália externa e outras características fenotípicas dos machos. O objetivo era investigar a contaminação racial por animais zebuínos (Bos taurus indicus) num gado bovino que tem sido considerado mais próximo de sua origem européia (Bos taurus taurus). Tanto a forma submetacêntrica quanto a forma acrocêntrica do cromossomo Y, típicas das sub-espécies B. t. taurus e B. t. indicus, respectivamente, bem como maior bainha prepucial nos espécimes portadores do cromossomo Y acrocêntrico, indicativa de contaminação racial por gado zebuíno, foram detectadas no rebanho "pé-duro" mantido no núcleo da Embrapa. Outras características fenotípicas analisadas que podem informar sobre a contaminação racial aparente não foram associadas ao tipo de cromossomo Y. A detecção de contaminação racial no estoque de touros "pé-duro" aqui analisado não invalida os esforços da Embrapa em preservar este gado de importância regional para o Nordeste do Brasil, porém quase extinto.

The binding of toluidine blue molecules to nucleic acid phosphates under conditions of competition with Mg2+ ions was studied in Trichosia pubescens polytene chromosome regions differing in composition and organization (RNA-rich areas and puffs, DNA puffs, heterochromatin). The aim was to find variability in the Mg2+ concentration at which metachromasy was completely prevented (= critical electrolyte concentration; CEC) and that could reflect differences at the level of nucleoprotein complexes in particular chromosome regions and developmental phases. Although high CEC values have been found in tightly packed chromatin such as that of heterochromatin zones, the CEC values for the other regions have proven to be affected not only by availability and proximity of DNA phosphates but also by RNA richness and other factors. Among these, changes in DNA geometry and packing state have been assumed for explaining increased values after RNA removal in DNA puffs and RNA-rich zones. Based on CEC values it has been suggested that alterations at the level of nucleoprotein complexes may occur in puffs before they are morphologically detectable. CEC results for polytene chromosomes were thus revealed to vary considerably with slight variations in nucleoprotein composition and organization. However, since a complex and apparently contradictory rationale has to be used for explaining part of the results, CEC is not recommended as a useful tool for extensive and comparative studies of this particular model.A ligação de moléculas de azul de toluidina a grupamentos fosfatos de ácido nucléico em condições de competição com íons Mg2+ foi estudada em regiões de cromossomos politênicos de Trichosia pubescens que diferem em composição e organização (áreas ricas em RNA, pufes de RNA e DNA, heterocromatina). O objetivo foi encontrar variabilidade na concentração de Mg2+ na qual a metacromasia fosse completamente abolida (= concentração crítica de eletrólitos; CEC) e que refletisse diferenças ao nível dos complexos nucleoprotéicos em regiões cromossômicas e fases do desenvolvimento particulares. Embora valores altos de CEC tenham sido encontrados na cromatina altamente empacotada, como nas zonas heterocromáticas, os valores de CEC para outras regiões mostraram-se afetados não apenas pela disponibilidade e proximidade de fosfatos do DNA mas também pela riqueza em RNA e outros fatores. Entre estes, mudanças na geometria e no estado de empacotamento do DNA foram consideradas para explicar valores aumentados após remoção de RNA em pufes de DNA e zonas ricas em RNA. Baseando-se em valores de CEC foi sugerido que possam ocorrer alterações ao nível dos complexos nucleoprotéicos em pufes antes que estes sejam detectáveis morfologicamente como tal. Os valores de CEC nos cromossomos politênicos revelaram-se, pois, altamente variáveis com as variações em composição e organização nucleoprotéica do substrato. Contudo, uma vez que um raciocínio complexo e aparentemente contraditório tem que ser utilizado para a interpretação de parte dos resultados, a CEC não é recomendável como ferramenta para estudos extensivos e comparativos neste modelo em particular.