Search

Laktik asit bakterileri antimikrobiyal etkiye sahip bakteriyosin gibi bazı maddeler üretirler. Bunlar, hem gıda üretiminde hem de sağlık sektöründe patojen mikroorganizmalara karşı inhibitör olarak kullanılma potansiyeline sahiptirler. Bu çalışmada, Afyonkarahisar İli'nde satışa sunulan markasız, paketsiz 20 farklı süt ve süt ürününden (peynir, kefir, yoğurt) 34 adet laktik asit bakterisi izole edilmiştir. İzolatların moleküler identifikasyonları için 16S rDNA PZR analizi yapılmıştır. İzolatların 16S rDNA sekans analiz sonuçlarına göre, % 41,1'i Lactobacillus, % 26,4'sı Lactococcus, % 32,3'ü Enterococcus cinsine dahil bulunmuştur. En fazla laktik asit bakterisi peynir örneklerinden izole edilerek identifikasyonları tamamlanmıştır. 16S rDNA sekans analizi sonuçlarına göre peynir örneklerinden izole edilen laktik asit bakterileri Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus rhamnosus, Lactococcus lactis, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium olarak tanımlanmıştır. Süt örneklerinden elde edilen laktik asit bakterileri Lactobacillus fermentum, Lactococcus lactis, Enterococcus faecium türleri olarak tanımlanmıştır. Kefir örneklerinden elde edilen laktik asit bakterileri Lactobacillus fermentum, Enterococcus faecium, Enterococcus durans türleri olarak tanımlanmıştır. Yoğurt örneklerinden ise Lactococcus lactis ve Lactococcus garvieae, Enterococcus durans, Lactobacillus fermentum türleri olarak tanımlanmıştır. İzolatların antimikrobiyal aktivitesini belirlemek için agar spot ve agar kuyu difüzyon testi kullanılmıştır. İzolatların tümü test edilen patojen mikroorganizmalar üzerinde farklı seviyelerde antimikrobiyal etki göstermiştir. LAB izolatları Listeria monocytogenes ATCC 1911, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Klebsiella pneumoniea NRRLB 4420, Pseudomonas aeuroginosa ATCC 11778, Streptococcus feacalis üzerinde Escherichia coli ATCC 35218 ve Bacillus subtilis NRS-744 göre daha yüksek seviyede antimikrobiyal etki göstermiştir. LAB izolatları en yüksek antimikrobiyal etkiyi ise Listeria monocytogenes ATCC 1911 üzerinde göstermiştir.Anahtar Kelimeler: Bakteriyosin, İzolasyon, İdentifikasyon, Laktik asit bakterileri Lactic acid bacteria produce some substances that has got a antimicrobial activity, such as bacteriocin. They have the potential to be used as inhibitors against pathogenic microorganisms in both food production and health sector. In this study, 34 lactic acid bacteria were isolated from 20 different milk and fermented milk products (cheese, kefir, yogurt) in Afyonkarahisar province. 16S rDNA PCR analysis was performed for molecular identifications of isolates. According to the results of 16S rDNA sequence analysis of isolates, 41,1% were found to belong to Lactobacillus, 26.4 % to Lactococcus and 32,3 % to Enterococcus genus. Most of lactic acid bacteria were isolated from cheese samples and their identified. As a result of 16S rDNA sequence analysis isolates of cheese samples were identifed as Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus rhamnosus, Lactococcus lactis, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium. İsolates of milk samples were identifed as Lactobacillus fermentum, Lactococcus lactis, Enterococcus faecium. Lactic acid bacteria of kefir samples were identifed as Lactobacillus fermentum, Enterococcus faecium, Enterococcus durans. Lactic acid bacteria of yogurt samples were identifed as Lactococcus lactis ve Lactococcus garvieae, Enterococcus durans, Lactobacillus fermentum. Agar spot and agar-well diffusion assay method were used to determine the antimicrobial activity of the lactic acid bacteria isolates. All of the isolates showed antimicrobial activity at different levels on the tested pathogenic microorganisms. LAB isolates showed higher antimicrobial activity on Listeria monocytogenes ATCC 1911, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Klebsiella pneumoniea NRRLB 4420, Pseudomonas aeuroginosa ATCC 11778, Streptococcus. feacalis than Escherichia coli ATCC 35218 and Bacillus subtilis NRS-744. LAB isolates showed the highest antimicrobial activity on Listeria monocytogenes ATCC 1911.Key words: Bacteriocin, İdentification, İsolation, Lactic Acid Bacteria

Özden, M., Comparison Of Two Different Dectontamination, Homogenization Procedures Applied Before The Mycobacterıum tuberculosıs Isolation, Hacettepe University Graduate School Of Health Sciences Microbiology Master’s Degree, Ankara, 2019. The aim of this study is to compare the homogenization and decontamination efficiency of two methods, namely n-acetyl-l-cysteine-sodium hydroxide (nalc-naoh) decontamination method and decomics decontamination kit, in sputum samples spiked with Mycobacterium tuberculosis H37 Ra, by using staining, culture and pcr methods. Two series of spiked bacterial suspensions were prepared from M. tuberculosis H37Ra strain. Serial dilutions were made in three ml sputum containing sterile tubes, by adding 0.5 ml bacteria to the concentrations of 10¹/ml-10⁸/ml. One of the series was used for decontamination with NALC-NaOH method and the other for Decomics decontamination kit. The study was carried out 37 times. After decontamination, samples were stained; inoculated in Löwenstein Jensen (LJ) medium and Middlebrook (MB) 7H10 medium and PCR was performed. There was no significant difference between the results of the NALC-NaOH method and Decomics method in acid-fast bacilli (AFB) staining and PCR examinations at 10⁸, 10⁷, 10⁶, 10³, 10² and 10¹/ml. However, in the rest of the concentrations, significant differences were found between the NALC-NaOH method and the Decomics method. (AFB staining (10⁵/ml) p=0.016 and PCR (10⁵/ml) p=0.5, AFB staining (10⁴/ml) p=0.012 and PCR (10⁴/ml) p=0.016). There was no significant difference between the results of NALC-NaOH method and Decomics method at 10⁸, 10⁷, 10⁶, 10⁵,10³, 10² and 10¹/ml in cultures on MB and LJ media. However, a significant difference was found between the NALC-NaOH method and the Decomics method in cultures with 10⁴/ml bacteria. As a result, it can be said that, Decomics efficiently decontaminates sputum and bacilli can be detected in the concentrations of approximately 105-108/ml. Usage of Decomics decontamination kit can be helpful where tuberculosis is endemic and in areas where the laboratory facilities are inadequate since Decomics kit does not require centrifugation. ONAY SAYFASI iii YAYIMLAMA VE FİKRİ MÜLKİYET HAKLARI BEYANI iv ETİK BEYAN v TEŞEKKÜR vi ÖZET vii ABSTRACT viii İÇİNDEKİLER ix SİMGELER ve KISALTMALAR xi ŞEKİLLER xii TABLOLAR xiii 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 3 2.1. Tarihçe 3 2.2. Epidemiyoloji 4 2.2.1. Dünyada Tüberküloz 4 2.2.2. Türkiye'de Tüberküloz 5 2.3. Mikobakterilerin Genel Özellikleri 5 2.3.1.Taksonomi 5 2.3.2. Mikobakterilerin Bakteriyolojik Özellikleri 6 2.3.3. Hücre Duvarı 6 2.4. Tüberküloz 8 2.5. Tüberküloz’un Tanısı 8 2.5.1. Örneklerin Toplanması 9 2.5.2. Mikroskobik İnceleme 10 2.5.3. Kültür Temelli Yöntemler 11 2.5.4. Moleküler Yöntemler 16 2.5.5. İmmünolojik Yöntemler 19 3. GEREÇ VE YÖNTEM 20 3.1. Bakterinin Canlandırılması 20 3.2. Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar 20 3.2.1. Besiyerleri 20 3.2.2. Kimyasal Maddeler 20 3.3. Besiyerlerinin Hazırlanması 21 3.4. Kinyoun Boyama için Boyaların Hazırlanması 21 3.4.1. Karbolfuksin’in Hazırlanması 21 3.4.2. Asit Alkol Çözeltisinin Hazırlanması 21 3.4.3. Metilen Mavisi’nin Hazırlanması 22 3.5. NALC-NaOH ile Dekontaminasyon İçin Solüsyonların Hazırlanması 22 3.5.1. %2’lik NALC-NaOH Solüsyonunun Hazırlanması 22 3.5.2. Fosfat Tamponu Hazırlığı 22 3.6. Bakteri Süspansiyonunun Hazırlanması 22 3.7. Homojenizasyon ve Dekontaminasyonların Yapılması 22 3.7.1. NALC-NaOH ile Dekontaminasyon 23 3.7.2. Decomics Kiti ile Dekontaminasyon 23 3.8. Ekim ve Yayma İşleminin Yapılması 23 3.9. Aside Dirençli Boyamaların ve Mikroskobik İncelemelerin Yapılması 23 3.10. Real-time PCR İşleminin Yapılması 24 3.10.1. DNA İzolasyonu 24 3.10.2. Real-time PCR’ın Yapılması 24 3.11. İstatistiksel Analiz 25 4. BULGULAR 26 4.1. ARB Bulguları 26 4.2. Kültür Bulguları 28 4.2.1. LJ Besiyerindeki Üreme Sonuçları 28 4.2.2. MB Besiyerindeki Üreme Sonuçları 30 4.3. RT-PZR Bulguları 33 4.4. İstatistiksel Veriler 35 5. TARTIŞMA 36 6. SONUÇ VE ÖNERİLER 43 7. KAYNAKLAR 45 8. EKLER 50 EK.1 Tez Çalışması ile İlgili Bildiriler ve Yayınlar 50 EK.2 Orjinallik Raporu ve Dijital Makbuz 51 9. ÖZGEÇMİŞ 53 Özden, M., Mycobacterium tuberculosis İzolasyonu Öncesinde Uygulanan İki Farklı Dekontaminasyon, Homojenizasyon İşleminin Karşılaştırılması, Hacettepe Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Mikrobiyoloji Programı Yüksek Lisans Tezi, Ankara, 2019. Bu çalışmanın amacı, iki farklı dekontaminasyon yöntemi olan, N-asetil-L-sistein-sodyum hidroksit (NALC-NaOH) ve Decomics homojenizasyon-dekontaminasyon kitinin etkinliğini, Mycobacterium tuberculosis H37Ra suşu eklenerek hazırlanan balgam örneklerinde boyama, kültür ve polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) ile değerlendirmektir. M. tuberculosis H37Ra suşu kullanılarak içerisinde 108-101/ml yoğunluğunda bakteri süspansiyonları hazırlanmıştır. Bu süspansiyonlardan üç ml balgam bulunan 50 ml’lik steril tüpün içerisine 0,5 ml eklenmiştir. Otuzyedi defa İki set şeklinde hazırlanan örnekler NALC-NaOH yöntemi ve Decomics kiti kullanılarak homojenize-dekontamine edilmiştir. Dekontaminasyon sonrası sıvılardan aside dirençli boyama (ARB) yapılarak mikroskopta incelenmiş, Löwenstein – Jensen (LJ) ve Middlebrook (MB) 7H10 besiyerlerine ekilmiş ve PZR yapılmıştır. ARB ve PZR incelemelerinde 10⁸, 10⁷, 10⁶, 10³, 10² ve 10¹/ml yoğunluklarda NALC-NaOH yöntemi ve Decomics kitinin sonuçları arasında anlamlı bir fark yokken; 105, 10⁴/ml oranında bakteri bulunan örneklerin ARB boyama ve PZR’larında NALC-NaOH yöntemi, Decomics kitine göre daha başarılı bulunmuştur. İstatistiksel olarak anlamlı bir fark vardır, [ARB boyama (10⁵/ml) p=0,016 ve PZR (10⁵/ml) p=0,5; ARB boyama (10⁴/ml) p=0,012 ve PZR (10⁴/ml) p=0,016]. MB ve LJ besiyerlerinde yapılan kültür sonunda, 10⁸, 10⁷, 10⁶, 10⁵, 10³, 10² ve 10¹/ml’de iki yöntem arasında fark bulunmamıştır. Ancak 10⁴/ml oranında bakteri bulunan örneğin ekimlerinde iki yöntem arasında farkın istatistiksel olarak anlamlı olduğu saptanmıştır. Sonuç olarak Decomics kiti balgamı etkin olarak dekontamine edebilmekte ve 105-108/ml yoğunlukta bakteri içeren örneklerde izolasyon başarılı olmaktadır. Decomics kitinin özellikle balgamında yoğun bir şekilde tüberküloz basili bulunan hastalarda, çok fazla ekipman ve santrifüj gerektirmediği için, kısıtlı olanakları olan laboratuvarlarda kullanılabileceğini söyleyebilmekteyiz.

In this research, Verbascum pyramidatum which is used for hemorrhoid and rheumatism treatment in Turkish folk medicine has been investigated. The air dried and powdered flowers and leaves of the plant were extracted with methanol separately. The methanolic exctracts were dissolved in water and then partitioned with chloroform in order to obtain the water and the chloroform extracts. These extracts were performed for the in vivo anti-inflammatory (carregeenan-induced hind paw edema model) and in vivo analgesic (p- benzoquinone-induced writhing reflex) activity assays. The water extract of the flowered parts were found to be the most active and the study was carried on it. By means of a serial of chromatographic studies on the active water extract, 3 iridoid glycosides (3′-O-β- glucopyranosylcatalpol: VP-1, Saccatoside: VP-2/VP-3a and 6-O-(3′′-O-trans-p- coumaroyl)-α-rhamnopyranosylcatalpol: VP-3b); 2 phenylethanoid glycosides (Verbascoside: VP-4, Echinacoside: VP-5) were isolated. The structures of the isolated compounds were elucidated by means of spectroscopic methods (1H NMR, 13C NMR, 2D NMR ). Türkiye’ de halk arasında hemoroid ve romatizma tedavisinde kullanılan Verbascum pyramidatum (Scrophulariacea) bitkisi üzerinde Farmakognozik araştırmalar yapılmıştır. Bitkinin açık havada ve gölgede kurutulan ve toz haline getirilen çiçek ve yaprak kısımları ayrı ayrı metanol ile ekstre edilmiştir. Yoğunlaştırılan metanol ekstrelerinin suda çözülüp, kloroform ile partisyona tabi tutulması sonucunda kloroform ve sulu ekstreleri elde edilmiştir. Bu ekstreler in vivo antienflamatuvar (karragen ile oluşturulan arka ayak ödemi testi) ve analjezik (p- benzokinon nedenli ağrı testi) aktivite tayin yöntemlerinde denenmiştir. Aktif bulunan çiçeklerden hazırlanan sulu ekstresine uygulanan çeşitli kromatografik yöntemlerle gerçekleştirilen izolasyon çalışmaları neticesinde, 3 iridoit glikoziti ( 3′- O-β-glukopiranozilkatalpol: VP-1, Sakkatozit: VP-2/VP-3a, 6-O-(3′′-O-trans-p- kumaroil)-α-ramnopiranozilkatalpol: VP-3b) ve 2 feniletanoit glikoziti (Verbaskozit: VP-4, Ekinakozit: VP-5) elde edilmiştir. Elde edilen bileşiklerin yapıları spektroskopik yöntemler (1H NMR, 13C NMR, 2D NMR) kullanılarak aydınlatılmıştır.

Genus Scutellaria (Lamiaceae), which includes about 350 species in worldwide, is widespread in Europe, America and East Asia. It is represented by 16 species in the flora of Turkey. Scutellaria species are the most popular herbs in traditional Chinese medicines and are used in the treatment of gastrointestinal disorders such as diarrhea, cramps, nausea, vomiting; inflammation, hypertension, cardiovascular diseases, bacterial and viral infections, and for anticancer purposes. In the present study, three endemic Scutellaria species (S. salviifolia Benth., S. glaphyrostachys Rech.f. and S. rubicunda Stapf. subsp. brevibracteata) were studied for their chemical compositions by isolation and LC-MS/MS studies; some biological effects were determined according to the effects and uses of the species. As a result of the phytochemical studies, the structures of 22 compounds, 4 of which are new, were elucidated by advanced spectroscopic methods. The new compounds are two -pyrone glucosides, 3,4-dihydroxy-6-methylpyran-2-one 3-O-β-glucopyranoside (=scusalvioside A) and 3,4-dihydroxy-6-methylpyran-2-one 3-O-β-(6'-O-E-caffeoyl)glucopyranoside (=scusalvioside B) with new skeletal structure and two iridoid glucosides, 6'-O-E-caffeoyl 8-epi-loganic acid and 6'-O-E-caffeoyl geniposidic acid. Biological effects of extracts, fractions and pure compounds from active fractions were investigated by DPPH, NO, SO and ABTS radical scavenging capacities, cytotoxic activities against HEp-2 and HeLa cancer cells and healthy cells of RAW 264.7 and L929; antiinflammatory effects via NO, IL-6 cytokine levels in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. The results showed that they possessed higher DPPH radical scavenging capacity than other radicals, selective cytotoxicity against cancer cells, and significant antiinflammatory effect on the cytokine levels. Our thesis work, with detailed phytochemical and biological studies on 3 endemic Scutellaria species growing in our country, is important in terms of finding new species that can be suggested instead of Scutellaria species used in the treatment and obtaining new drug candidate molecules. TÜBİTAK (2211-C Yurtiçi Öncelikli Alanlar Doktora Burs Programı) ve H.Ü.B.A.B. (Hızlı Destek Projesi- 014 D08 301 001-594; Lisansüstü Tez Desteği- TDK-2017-14236). ONAY SAYFASI iii YAYIMLAMA VE FİKRİ MÜLKİYET HAKLARI BEYANI iv ETİK BEYAN v TEŞEKKÜR vi ÖZET vii ABSTRACT viii İÇİNDEKİLER ix SİMGELER ve KISALTMALAR xi ŞEKİLLER xv TABLOLAR xxii 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 4 2.1. Botanik Bilgiler 4 2.1.1. Labiatae (Lamiaceae) Familyası 4 2.1.2. Scutellaria L. Cinsi 4 2.1.3. Yayılış ve Habitat 8 2.2. Scutellaria L. Türleri Üzerinde Yapılan Çalışmalar 12 2.2.1. Fitokimyasal Çalışmalar 12 2.2.2. Scutellaria L. Türlerinin Kullanılışları ve Biyolojik Etkileri 58 3. GEREÇ ve YÖNTEM 70 3.1. Fitokimyasal Çalışmalar 70 3.1.1. Gereç ve Yöntem 70 3.1.2. Fitokimyasal Çalışmalarda Kullanılan Aletler 76 3.1.3. Ekstraksiyon ve İzolasyon Çalışmaları 76 3.1.4. Folin Ciocalteu Metoduna Göre Toplam Fenol Miktar Tayini 86 3.2. Biyolojik Etki Çalışmaları 86 3.2.1. Biyolojik Etki Çalışmalarında Kullanılan Aletler 86 3.2.2. Radikal Süpürücü Etkinlik Tayini 87 3.2.3. Sitotoksik Etki Tayini 89 3.2.4. Antienflamatuvar Etki Tayini 90 4. BULGULAR 95 4.1. Fitokimyasal Çalışmalara Ait Bulgular 95 4.1.1. Folin Ciocalteu Yöntemine Göre Toplam Fenol Miktar Tayini 98 4.1.2. İzole Edilen Bileşiklerin Yapı Tayinleri 99 4.1.3. LC-MS/MS Çalışmalarına Ait Bulgular 257 4.1.4. HPLC-DAD Çalışmalarına Ait Bulgular 263 4.2. Biyolojik Etki Çalışmalarına Ait Bulgular 264 4.2.1. Radikal Süpürücü Etkinlik Çalışmalarına Ait Bulgular 265 4.2.2. Sitotoksik Etki Çalışmalarına Ait Bulgular 271 4.2.3. Antienflamatuvar Etki Çalışmalarına Ait Bulgular 279 5. TARTIŞMA 285 6. SONUÇ ve ÖNERİLER 316 7. KAYNAKLAR 318 8. EKLER EK-1: Scutellaria Türlerinden Elde Edilen Neoklerodan Diterpenleri. EK-2: Scutellaria rubicunda Hornem. subsp. brevibracteata J.R.Edm. EK-3: Scutellaria glaphyrostachys Rech.f. EK-4: Scutellaria salviifolia Benth. 9. ÖZGEÇMİŞ Dünyada 350 türü bulunan Scutellaria L. (Lamiaceae) cinsi, Avrupa, Amerika ve Doğu Asya’ya yayılmıştır. Türkiye florasında ise 16 tür ile temsil edilmektedir. Scutellaria türleri geleneksel Çin ilaçları bileşimine giren en popüler bitkilerdendir ve enflamasyon, hipertansiyon, kardiyovasküler hastalıklar, bakteriyel ve viral enfeksiyonlar, diyare, kramp, bulantı, kusma gibi gastrointestinal sıkıntıların tedavisinde ve antikanser amaçlı kullanımları vardır. Tez çalışmamızda üç endemik Scutellaria türünün (S. salviifolia Benth., S. glaphyrostachys Rech.f. ve S. rubicunda Stapf. subsp. brevibracteata) kimyasal bileşimleri, izolasyon çalışmaları ve LC-MS/MS yöntemiyle aydınlatılmış, türlerin etki ve kullanımlarından yola çıkılarak, bazı biyolojik etkileri tayin edilmiştir. Fitokimyasal çalışmalar sonucunda 4’ü yeni olmak üzere toplam 22 bileşiğin yapısı ileri spektroskopik yöntemlerle aydınlatılmıştır. Yeni bileşikler α-piron yapısında yeni bir iskelete sahip, 3,4-dihidroksi-6-metilpiran-2-on 3-O-β-glukopiranozit (=skusalviozit A) ile 3,4-dihidroksi-6-metilpiran-2-on 3-O-β-(6'-O-E-kafeoil) glukopiranozit (=skusalviozit B) ve iridoit glukoziti yapısındaki 6'-O-E-kafeoil 8-epi-loganik asit ile 6'-O-E-kafeoil genipozidik asittir. Ekstre, fraksiyon ve aktif fraksiyonlardan elde edilen saf bileşiklerin biyolojik etkileri; DPPH, NO, SO ve ABTS radikali süpürücü etkinliklerinin, HEp-2 ve HeLa kanser hücreleri ile RAW 264.7 ve L929 sağlıklı hücrelerine karşı sitotoksik etkilerinin ve LPS ile uyarılmış RAW 264.7 hücrelerinde NO, IL-6 sitokin düzeyleri üzerinden antienflamatuvar etkilerinin araştırılması ile izlenmiştir. Sonuçlar, DPPH radikaline karşı diğer radikallerden daha yüksek etkinlik, kanser hücrelerine karşı seçici sitotoksisite ve çalışılan sitokin düzeylerine göre de belirgin antienflamatuvar etkiye sahip olduklarını göstermiştir. Tez çalışmamız, ülkemizde yetişen 3 endemik Scutellaria türü üzerinde yürütülen ayrıntılı fitokimyasal ve biyolojik etki araştırmalarıyla, tedavide kullanılan Scutellaria türleri yerine önerilebilecek yeni türler bulunması ve yeni ilaç adayı moleküllerin elde edilerek bilime kazandırılması açısından önem arzetmektedir.

ÖZETStreptokok türleri, insan ve hayvanlarda deride ve mukozal yüzeylerde bulunabilenmikroorganizmalardır ve birçok hayvanda olduğu gibi, balıklarda da hastalık oluşturarakekonomik kayıplara neden olmaktadır. Bu nedenle streptokokkal infeksiyonlar, özellikle iç sukültür balıklarında büyük bir öneme sahiptir. Bu araştırmada, Ege Bölgesi kültürbalıklarındaki Streptokokkal infeksiyonların belirlenmesi amaçlanmıştır.Bu araştırmada, Ege Bölgesi'nde bulunan çeşitli balık çiftliklerinden canlı olaraksağlıklı ve hasta olmak üzere rutin teşhis laboratuvarına getirilen 150 kültür balığından toplam101 adet mikroorganizma izole edildi. Bu bakterilerin 10 adeti (% 9.90) Gram Negatif kok vebasil, 91 adeti (% 90.10) ise Gram Pozitif kok-kokoid olarak belirlendi.Gram Pozitif kok-kokoid tarzı 91 adet mikroorganizmadan 4 adeti Staphylococcusspp. olarak belirlenirken, 32 adet Lactococcus lactis, 3 adet Enterococcus avium, 16 adetEnterococcus feacalis, 1 adet Listeria spp., 10 adet Aerococcus viridans, 5 adet Aerococcusurinae, 7 adet Streptococcus pyogenes ve 13 adet Streptococcus agalactiae identifiye edildi.S. agalactia, sağlıklı balıkların % 10.42'sinden izole edilirken, %7.84 oranında hastabalıklarda izole edilmiştir. S. pyogenes ise, sağlıklı balıkların % 6.25'inden izole edilirken,hasta balıkların % 3.92'sinden izole edilmiştir. SUMMARYStreptococcus spp., can be present on skin and mucosal surfaces of animal and human.Like most of the animals also these microorganisms can create diseases on fish and so theycan cause economical looses. Therefore, Streptococcal infections are very importantespecially for cultured freshwater fısh. The aim of this study was, to define Streptococcalinfections at culture fish in Aegian Region.In this research, 150 live culture fishes were taken from various fish farms on AegeonRegion and they classified as healthy or diseased. After analiysing these 150 culture fishes atroutine identification laboratories, 101 microorganism isolated. 10 (%9,90) of these bacteriawere identified as Gram-Negative cocci and bacilli, 91 (%90,10) of them were identified asGram-Positive cocci-coccoid.After identification of these 91 Gram positive cocci-coccoid microorganisms, the mostprevelant strains were Lactococcus lactis (32), Enterococcus avium (3), Enterococcus feacalis(16), Listeria spp. (1), Aerococcus viridans (10), Aerococcus urinae (5), Streptococcuspyogenes (7) and Streptococcus agalactiae (13).S. agalactia, isolated from 10.42 % of healthy fish as well as they isolated from 7.84% of diseased fish. Also S. pyogenes isolated from 6.25 % of healthy fish and 3.92 % ofdiseased fish. 44

Bu çalışmada Siirt il merkezinde hizmet veren çeşitli birimlerdeki (lokanta, kafeterya)alet-ekipman ve çevre hijyeni yönünden durumu araştırıldı. Bu amaçla 15 lokanta ve restoranpilot nokta seçilerek bu iş yerlerinde kullanılan alet-ekipman ve çevreden alınan toplam 135örnek materyal kullanıldı. Yapılan mikrobiyolojik analizler sonucunda, iş önlüklerinde %95,tepsi %95, tava %90, tencere %85, tezgah %95, buzdolabı kapı kolu %95, lavabo (muslukbaşı) %90, havluluk %95, sabun kabı %90 oranında mikroorganizma tespit edildi.Sonuç olarak bu araştırmada kontrol edilen lokantaların genel hijyenik durumlarınıniyi olmadığı tespit edilmiştir. Ayrıca alet-ekipman ve çevreden alınan örneklerde besinzehirlenmeleri yönünden önemli mikroorganizmaların saptanması, bu iş yerlerinin tüketicisağlığı açısından potansiyel bir risk kaynağı oluşturabileceği düşüncesini uyandırmıştır. Bubağlamda kontrol programının uygulanması yararlı olacaktır.Anahtar Kelimeler: Bakteri, İzolasyon, İdentifikasyon, Hijyen, Restoran In this study, various equipments in different units (restaurant, cafeteria) servicing inthe center of Siirt province were detected about environmental hygene. For this aim, 15restaurants were chosen as pilot point and 135 samples were taken from the equipments usedin these units. As a result of microbiologic analyses, microorganisms were detected as theraito of 10% in aprons, 95% in bowls, 90% in pans, 85% in cooking pans, 95% in floors, 95%in fridge handles, 90% in faucets, 95% in toel handles, 90% in soap containers.As a result of this study, it was seen that the detected restaurant had poor generalhygenic condition. In addition, some microorganisms were isolated important for foodpoisonings and this is a potential risk for public health. For this situation, proceeding ofcontrol programmes will be useful.Keywords: Bacteria, Isolation, Identification, Hygene, Restaurant 37