Search

The aim of this work was to investigate viral diseases affecting Phlox paniculata grown in botanical gardens in Lithuania and Ukraine; to identify their agents applying the classical and modern, molecular biology methods. Plants exhibiting symptoms characteristic of viral diseases (plant stunting, leaf malformation, various shaped chlorotic and necrotic spots, ringspots, flower breaking) were collected in Botanical Garden of Vilnius University and N. N. Grishko Kyiv National Botanical Garden. The causal agents of viral diseases, Alfalfa mosaic virus (AMV) and Tobacco rattle virus (TRV), have been isolated and identified in all investigated Lithuanian and Ukrainian Phlox paniculata samples by the methods of testplants, electron microscopy, double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (DAS–ELISA), and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Darbo tikslas buvo ištirti Lietuvos ir Ukrainos botanikos soduose auginamų Phlox paniculata virusines ligas ir identifikuoti jų sukėlėjus, pritaikius klasikinius ir molekulinės biologijos metodus. Vilniaus universiteto ir Kijevo N. N. Griško vardo nacionaliniame botanikos soduose buvo surinkti sergantys flioksai, turintys virusinėms ligoms būdingus augalų žemaūgės, lapų deformacijos, įvairios formos chlorotinių ir nekrotinių dėmių ant lapų, žiedų margligės požymius. Liucernos mozaikos (Alfalfa mosaic virus, AMV) ir tabako garbanotosios dryžligės (Tobacco rattle virus, TRV) virusai buvo išskirti ir augalų indikatorių, elektroninės mikroskopijos, imunofermentinės analizės (DAS-ELISA) ir atvirkštinės transkripcijos polimerazės grandininės reakcijos (AT-PGR) metodais identifikuoti visuose Lietuvoje ir Ukrainoje surinktuose pavyzdžiuose.

Thalictrum plants exhibiting symptoms characteristic of viral and phytoplasmal diseases were collected at botanical gardens and different floriculture farms in Lithuania. Viral disease was expressed by leaf curling, pinpoint light green spotting and malformation. The causal agent of viral disease, Tomato ringspot nepovirus was isolated and identified by the me-thods of test-plants and transmission electron microscopy. Phytoplasmal symptoms included general stunting of plants, proliferation and flower distortion. Amplification of phytoplasmal 16SrRNA gene sequence in polymerase chain reactions (PCRs) containing phytoplasma universal primer pairs P1/P7, R16F2n/R16R2 and template DNA extracted from diseased plants, confirmed that the plants were infected by phytoplasma. The 1,2 kbp rDNA product was subjected to single enzyme digestions with 9 restriction endonucleases. RFLP analysis revealed that the Thalictrum plants were infected by a phytoplasma belonging to group 16SrI (aster yellows phytoplasma group), subgroup L. This work was the first investigation of viral and phytoplasmal diseases of Thalictrum plants and identification of their causal agents. Thalictrum is the new host-plant of Tomato ringspot nepovirus (ToRSV) and subgroup 16Sr I–L of phytoplasmas. Vingirių (Thalictrum L.) augalai, turintys virusinėms ir fitoplazminėms ligoms būdingus požymius, buvo surinkti Lietuvos botanikos soduose, gėlininkystės ūkiuose, Vilniaus miesto ir privačiuose gėlynuose. Virusinės ligos pasireiškė lapų deformacija, garbanotumu, taškine žalsva mozaika ant lapų, gyslų pašviesėjimu, neryškiu žiediškuoju dėmėtumu. Virusinių ligų sukėlėjas, pomidorų žiediškosios dėmėtligės virusas (Tomato ringspot nepovirus, ToRSV), buvo išskirtas ir identifikuotas augalų indikatorių ir elektroninės mikroskopijos metodais. Fitoplazminės ligos požymiai pasireiškė augalų žemaūgiškumu, ūglių proliferacija, žiedų susmulkėjimu. Polimerazinėje grandininėje reakcijoje, atliktoje naudojant universalius fitoplazmų pradmenis P1/P7, R16F2n/R16R2 ir iš sergančių augalų išskirtą matricinę DNR, buvo pagausintas 16S rRNR geno sekos fragmentas, patvirtinantis augalų fitoplazminę infekciją. 1,2 kbp dydžio rDNR produktas buvo sukarpytas su 9 restrikcijos endonukleazėmis. Restrikcijos fragmentų ilgio polimorfizmo (RFLP) analizė parodė, kad augalai buvo užsikrėtę 16SrI (astrų geltos) grupės I–L pogrupio fitoplazma. Tai yra pirmas darbas apie vingirių virusinių ir fitoplazminių ligų sukėlėjų tyrimus. Vingiris yra naujas ToRSV ir 16SrI–L pogrupio fitoplazmos augalas šeimininkas.