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Isoprostanes are non-enzymatically generated metabolites of polyunsaturated fatty acids (PUFA), and are ubiquitous in vertebrate species. As they are produced by the action of free oxygenated radicals on PUFA, they are considered as excellent oxidative stress biomarkers in the organisms. The synthesis of isoprostanoids is necessary to determine their potential as biomarkers of oxidative stress by LC-MS/MS analysis. The aim of the work reported in this thesis is the development of organocatalytic synthesis pathways of new metabolites, possessing all-cis and cis-trans-trans (prostaglandins stereochemistries and derived from docosahexaenoic and eicosapentaenoic acids., Les isoprostanoïdes sont des métabolites non-enzymatiques des acides gras polyinsaturés (AGPI) et sont omniprésentes chez les espèces vertébrées. Elles sont produites par l'action de radicaux libres oxygénés sur les AGPI et sont donc considérées comme d'excellents biomarqueurs du stress oxydant dans les organismes. Afin de déterminer leurs potentiels de biomarqueurs du stress oxydant pour l’analyse LC-MS/MS, la synthèse totale de ces métabolites oxydés doit tout d'abord être réalisée. Les travaux exposés dans ce manuscrit ont donc pour but de développer de nouvelles voies de synthèses organocatalytiques de métabolites de stéréochimies tout-cis et cis-trans-trans (stéréochimie prostaglandine) provenant de l'acide docosahexaénoïque et de l'acide icosapentaénoïque.

Introduction and objective : Obesity is increasing among parturient women. Physiopathologics phenomenons could explain the rise of prolonged pregnancies in this population, causing these patients to be insensitive to natural prostaglandins, type E2. Our objective was to evaluate the response to different prostaglandins allowing cervical maturation and labouring, PGE1 or PGE2, in a population of obese women with prolonged pregnancies.Material and methods : A bi-centric retrospective study was performed in the CHIPS and Port Royal maternity unit. It collected data from 189 patients from 2013 to 2016. The analysis compares the results of the two groups using different types of prostaglandins, PGE1 for CHIPS or PGE2 for Port-Royal.Results : A reduction in the cesarean section rate in the PGE1 group (33.9% versus 49.3%) was observed in our study. The distribution of cesarean section indications was similar. Oxytocin or artificial rupture of membranes prior to labour was more often required in the PGE2 group (p=0.02). Hypercontractility and pathologic heart rates were also increased (p=0.03 and p=0.04). Despite the increase in cesarean section, with fetal indication being the primary indication, we did not see an increase in adverse neonatal outcomes in the PGE2 group.Conclusion : The use of PGE1 for labour induction in a population of obese patients with prolonged pregnancy had a positive impact on their delivery and obstetrical prognosis. Maternal and neonatal prognosis are not affected by the type of prostaglandins.; Introduction et objectif : L’obésité est croissante au sein des parturientes. L’augmentation des grossesses prolongées dans cette population peut s’expliquer par des phénomènes physiopathologiques, provoquant une insensibilité de ces patientes aux prostaglandines naturelles, de type E2. L'objectif de ce mémoire était d’évaluer la réponse aux différentes prostaglandines permettant la maturation cervicale et la mise en travail, PGE1 ou PGE2, dans une population de femmes obèses présentant une grossesse prolongée. Matériel et méthodes : Une étude rétrospective et bicentrique a été réalisée au sein du CHIPS et de la maternité Port Royal. Elle a permis de rassembler les données de 189 patientes de 2013 à 2016. L’analyse compare les résultats des deux groupes utilisant un type de prostaglandines différent, PGE1 pour le CHIPS ou PGE2 pour Port-Royal.Résultats : Une réduction du taux de césarienne dans le groupe PGE1 (33,9% versus 49,3%, p=0,03) a été observée au cours de notre étude. La répartition des indications de césarienne était similaire. Le recours à l’ocytocine ou la rupture artificielle des membranes avant travail était plus souvent nécessaire dans le groupe PGE2 (p=0,02). L’hypercontractilité et les rythmes cardiaques pathologiques étaient également augmentés (p=0,03 et p=0,04). Malgré l’augmentation de la césarienne, l’indication fœtale étant l’indication principale, nous n’avons pas constaté l’augmentation d’issues néonatales défavorables dans le groupe PGE2.Conclusion : L’utilisation de la PGE1 pour l’induction du travail dans une population de patientes obèses présentant une grossesse prolongée a eu un impact positif concernant leur pronostic d’accouchement et obstétrical. Les pronostics maternel et néonatal ne sont pas modifiés par le type de prostaglandines.

Objectives - The main objective of this study was to examine the mode of delivery of cervical ripening by double-balloon or Propess®. The second objective was to observe the impact of these two methods on ripening-to-delivery interval, postpartum haemorrhage, and neonatal state. Materials and methods - We realized a descriptive, retrospective, monocentric study at the Albertville maternity ward from January 1st, 2016 to August 31st, 2017. The selected patients had received medical advice for cervical ripening. They were included in the Propess® group or in the double-balloon group depending on the method used. Inclusion criteria were a Bishop score of 6 or less on admission, cephalic presentation and a gestation age of 37 weeks or more. The primary outcome was delivery mode. Secondary outcome included ripening-to-delivery interval, administration of oxytocin, postpartum haemorrhage, and neonatal state. Results - In total, 65 patients were included in the double-balloon group and 70 in the prostaglandin group. We didn’t identify a significant difference in delivery mode (55,4% vaginal delivery in the double-balloon group vs 50% in the prostaglandins group). There was no difference between the two groups on the ripening-to-delivery interval (23,7 hours vs 19,7 hours) and the postpartum haemorrhage (4,3% vs 4,6%). More patients int the double-balloon group required oxytocin administration (p

Objective: The aim of this study was to compare the effectiveness and safety of the Foley catheter, compared to PGE2 (PGE2 insert or PGE2 gel) in IUGR and/or SGA fetuses after 34 weeks gestation.Methods: This study was a monocentric retrospective cohort study between Jan 1, 2014, and Dec 31, 2016 in the maternity hospital Armand Trousseau AP-HP. Women with a singleton pregnancy in cephalic presentation beyond 34 weeks gestation with suspected IUGR, who underwent induction of labor by Foley catheter or PGE2 (PGE2 insert or PGE2 gel) were enrolled.Results: 96 women were induced with a Foley catheter and 85 women with PGE2 (72 with PGE2 inserts and 13 with PGE2 gel). There were more vaginal deliveries after mechanical induction (71,9%) than after PGE2 induction (61,2%). There were more uterine hyperstimulation and abnormal fetal heart rates in the PGE2 group.Conclusion: Foley catheter is more effective than PGE2 in the induction of labor of IUGR and/or SGA fetuses beyond 34 weeks gestation., Objectif : L’objectif de notre étude était de comparer l’efficacité et la sécurité de la sonde de Foley et des prostaglandines (Propess® et gel de Prostine®) chez une population de fœtus PAG/RCIU au-delà de 34SA.Méthode : Il s’agit d’une étude de cohorte rétrospective monocentrique sur une période de 3 ans, janvier 2014 à décembre 2016 au sein de la maternité de type III Armand Trousseau AP-HP. Etaient inclus toutes patientes porteuses d’un fœtus PAG ou RCIU, singleton, en présentation céphalique ayant bénéficié d’une maturation cervicale par sonde de Foley ou prostaglandines au-delà de 34SA.Résultats : 96 patientes ont été maturées par sonde de Foley et 85 patientes par prostaglandines (72 patientes par Propess® et 13 patientes par gel de Prostine®). Le taux d’accouchement par voie basse est supérieur (p = 0,02) lors d’une maturation par sonde de Foley, que par prostaglandines. Le taux d’hyperstimulation utérine est supérieur en cas de maturation cervicale par prostaglandines. De même, les prostaglandines sont responsables de plus d’ARCF que la sonde de Foley.Conclusion : La sonde de Foley est plus efficace que les prostaglandines pour la maturation cervicale chez les fœtus PAG/RCIU au-delà de 34SA.

Objectifs : comparer l'efficacité du double ballonnet aux prostaglandines vaginales dans le déclenchement du travail chez des femmes ayant un col défavorable dans un contexte de fragilité utérine et/ou fœtale, et évaluer s'il existe une différence de la tolérance maternelle et fœtale entre ces deux méthodes. Matériel et méthodes : 48 patientes déclenchées par double ballonnet de dilatation étaient comparées à 101 patientes recevant des prostaglandines vaginales, chacune d'entre elles présentant un utérus cicatriciel et/ou un PAG associé à leur indication médicale de déclenchement. Le critère de jugement principal était le taux d'échec de maturation cervicale. Les critères secondaires incluaient le délai pose-accouchement, l'issue de la maturation ainsi que la morbidité maternelle et fœtale. Résultats : le taux d'échec de déclenchement n'était pas significativement différent dans les deux groupes (16,7% pour le double ballonnet vs 6,9 pour le Propess, p=0,083). Le taux de cols favorables ainsi que l'amélioration moyenne du score de Bishop étaient similaires avec les deux méthodes. On retrouvait plus de mises en travail spontané dans le groupe Propess et plus de travail dirigé dans le groupe double ballonnet, mais il n'y avait aucune différence significative quant au taux d administration d'ocytocine dans les deux groupes. Le délai pose-accouchement était significativement plus important dans le groupe double ballonnet (24,5+-11,4 vs 19,9+-8,8). Aucune différence n'a été retrouvée quant aux complications maternelles et fœtales. Conclusion : dans notre étude, le double ballonnet semble avoir une efficacité similaire aux prostaglandines dans le déclenchement du travail tout en allongeant le délai pose-accouchement. L'avantage du double ballonnet pourrait résider dans le fait que cette méthode entraîne peu de contractions au cours de la maturation, améliorant la satisfaction des patientes.

Introduction: induction of labor (IOL) is often prefered in case of Small for gestational age (SGA) because of the association of this condition with stillbirth. There is a lack of consensus about the most appropriated cervical ripening method to use in case of SGA. Nevertheless, Prostaglandins are associated with more hyperstimulation and fetal heart rate changes. The primary outcome was cesarean section rate between two cervical ripening methods: dinoprostone insert and foley catheter. The secondary outcomes were maternal, neonate outcomes and the pain. Study design: open-label randomized controlled trial 1 : 1, between Nov 1st, 2015 and Jan 20, 2017, Center Aliénor d'Aquitaine. Enrollment: women with a pregnancy affected by SGA with decision of IOL after 32 weeks, with an unfavorable cervix. Results: 69 women were included and 68 women were analyzed, 34 in the Foley catheter group (BIC) and 34 in the dinoprostone group (PIV). Cesarean rate were much the same between the two groups, 23,5% in the BIC group versus 35.3% in the PIV group (p=0.43). Less hyperstimulation and fetal heart changes occurred in the BIC group (p=0.005 and 0.013 respectively). Using balloon catheter was less painful (p=0.001). Use of ocytocin and instrumental delivery were higher in the BIC group (p=0.02). Serious maternal or neonatal morbidity in the trial were infrequent and comparable. Conclusion: balloon catheter is a interesting and safe cervical ripening method in case of SGA., Introduction : le risque de mort fœtale in utero dans un contexte de restriction de croissance fait souvent choisir l'induction de la naissance par l'obstétricien. Il n'y a pas de consensus sur la méthode de maturation cervicale à utiliser en cas de PAG (Petit pour l'âge gestationnel). Cependant, les prostaglandines intravaginales sont à l'origine de plus d'hypercinésies avec anomalies du rythme cardiaque fœtal (ARCF). Nous avons comparé le taux de césariennes en fonction du moyen de maturation : ballon intracervical versus dinoprostone à libération prolongée en situation de PAG. Les objectifs secondaires étaient de comparer les issues obstétricales, néonatales et la tolérance maternelle. Méthode : étude prospective randomisée 1 : 1, monocentrique, du 1er novembre 2015 au 20 janvier 2017 au Centre Aliénor d'Aquitaine. Population : patientes présentant un fœtus porteur d'un PAG pour lequel était décidé un déclenchement sur col défavorable, après 32 semaines d'aménorrhée. Résultats : sur 69 patientes randomisées, 68 patientes ont été analysées, 34 dans le groupe ballon (BIC) et 34 dans le groupe dinoprostone (PIV). Il n'existait pas de différence significative entre les taux de césariennes, 35.3% dans le groupe PIV et 23.5% dans le groupe BIC (p=0.43). Il y avait moins d'hypercinésie et d'ARCF pendant la maturation dans le groupe BIC (p=0.005 et 0.013 respectivement). La tolérance maternelle était meilleure dans le groupe BIC (p=0.001). Les recours à la perfusion d'ocytocine et à l'extraction instrumentale étaient supérieurs dans le groupe BIC (p=0.02). Les complications obstétricales étaient rares et les issues néonatales comparables. Conclusion : la sonde de Foley semble intéressante pour la maturation cervicale en situation de PAG.

International audience; OBJECTIVES: Glaucoma is a major cause of blindness, preventable by a regular therapy. Thus, a good knowledge of patients' adherence to preventive therapy is critical to improve disease management. Early persistence to first-line glaucoma therapy is poorly documented in France. We verified to what extent first-line glaucoma therapy was interrupted within the 12 months following initiation and how this interruption varied with patients' characteristics and drug classes. METHODS: Patients newly-treated with chronic glaucoma therapy (prostaglandins, beta-blockers alone or combined with another therapy, and topical carbonic anhydrase inhibitors) between 2005 and 2008 were identified in the French National Claims data (1/97th random sample). Twelve-month persistence was defined by the presence of the first-line drug class (>=1dispensation) between the 12th and 24th months following initiation. Twelve-month persistence was compared between patients according to the first-line drug classes and baseline characteristics. Proportion of days covered (12 months) and number of quarters with initiated drug class (24 months) were also studied. RESULTS: Among 5331 patients initiated with chronic glaucoma therapy in monotherapy (63% aged >=60 years old, 57% females), initiated therapy mainly consisted of prostaglandins (43%) and beta-blockers alone (32%). Only 45% of the patients were persistent to first-line therapy 12 months after initiation. Salient differences in persistence rates appeared between drug classes (P\\textless0.0001): from 59% with prostaglandins to 26% for topical carbonic anhydrase inhibitors. Better results also appeared for prostaglandins with other dimensions of adherence. Non-persistent patients were more likely younger than 40, or conversely aged>=80 (P\\textless0.0001). They were also more likely to necessitate social assistance for therapy (P=0.0007). No salient difference appeared as to gender. CONCLUSIONS: Our findings confirm the low early persistence of first-line therapy, despite better results for prostaglandins. Education of patients and identification of barriers to adherence could contribute to improve quality of care.

International audience; Les produits pharmaceutiques à usage humain, tel que les anti-inflammatoire non stéroïdiens (AINS),font partie des contaminants émergents pouvant présenter des risques pour les organismes dumilieu aquatique. Ces composés sont synthétisés pour atteindre des cibles biologiques spécifiqueschez l’Homme. Ils sont susceptibles de provoquer des effets chez les organismes aquatiques pourlesquels ces cibles sont conservées. Certains composés, tels que le diclofénac (DCF) ont ainsi étéintroduits dans la liste de vigilance de la Directive Cadre sur l’Eau. Chez l’Homme, le DCF agit parinhibition des cyclooxygénases (COX), enzymes catalysant la transformation de l’acide arachidoniqueen prostaglandines (PG). Les PG permettent la médiation d’une large gamme de fonctionsbiologiques [1]. Plusieurs études font part de la biosynthèse des prostaglandines chez un grandnombre d’invertébrés, notamment chez les bivalves [2]. Cependant, aucune étude n’a été consacréeà établir des liens entre une exposition au DCF et une modulation du niveau des PG chez les bivalves.Par ailleurs, une exposition de poisson au DCF met en évidence l’apparition de métabolites comme le4’-hydroxy-diclofénac (4’OH-DCF) et le 5-hydroxy-diclofénac (5OH-DCF) [3] qui n’ont, jusqu’ici, pasété étudiés chez les bivalves.Depuis quelques années, l’approche métabolomique se développe dans le but de mettre en évidencel’impact des contaminants sur les organismes aquatiques lors d’expositions à de faibles doses. Lesempreintes métaboliques collectées sont susceptibles de refléter soit l’exposition par la détectiondirecte des composés parents et de leurs métabolites dans les organismes, soit les effets par l’étudedes perturbations physiologiques [4]. Cette méthode a, par exemple, révélé des effets au niveaumétabolique suite à une exposition à des produits pharmaceutiques tels que la carbamazépine oul’ibuprofène chez les daphnies [5]. Cette approche mérite d’être mise en place pour tester sacapacité à révéler des marqueurs complémentaires d’exposition au DCF.Les objectifs de notre étude sont i) quantifier l’accumulation du DCF dans les tissus de moulesMytilus galloprovincialis et chercher ses métabolites majoritaires, le 4’OH-DCF et le 5OH-DCF, ii)déterminer si une exposition au DCF affecte les niveaux de PG chez la moule et iii) explorer si uneapproche d’analyse non-ciblée met en évidence des marqueurs d’exposition du DCF chez la moule.

Metabolic syndrome is a major risk factor for the development of diabetes mellitus and cardiovascular diseases. Pharmacological antagonism of the mineralocorticoid receptor (MR), a ligand-activated transcription factor, limits metabolic syndrome in preclinical models, but mechanistic studies are lacking to delineate the role of MR activation in adipose tissue. In this study, we report that MR expression is increased in visceral adipose tissue in a preclinical mouse model of metabolic syndrome and in obese patients. In vivo conditional upregulation of MR in mouse adipocytes led to increased weight and fat mass, insulin resistance, and metabolic syndrome features without affecting blood pressure. We identified prostaglandin D2 synthase as a novel MR target gene in adipocytes and AT56, a specific inhibitor of prostaglandin D2 synthase enzymatic activity, blunted adipogenic aldosterone effects. Moreover, translational studies showed that expression of MR and prostaglandin D2 synthase is strongly correlated in adipose tissues from obese patients.

Objective : Study mode of delivery after cervical ripening with vaginal prostaglandin E2 (PGE2) in pregnancies with foetus small for gestationnel age (SGA). Identify risk factors of emergency caesarian section (CS).Methods : A retrospective study in the CHU of Caen between January 2012 and December 2013. Study regroups 132 women with suspected SGA (sonography with estimated weight or abdominal circumference below the 10th percentile) from 32 SA. Results : Induction of labor with vaginal PGE2 results in vaginal delivery rate of 77%. Nulliparity, maternal pathology ans Bishop score lower increased risk of emergency cesarian section. Conclusion : Principal mode of delivery after induction of labor with PGE2 is vaginal delivery. Risk factors of emergency CS are nulliparity, maternal pathology and lower Bishop score.; Objectif : Étudier le mode d'accouchement après une maturation cervicale avec des prostaglandines E2 (PGE2) auprès de fœtus petits pour l'âge gestationnel (PAG). Identifier les facteurs prédictifs d'une césarienne en cours de travail. Méthodes et matériel : Étude rétrospective au CHU de Caen entre janvier 2012 et décembre 2013 réunissant 132 dossiers de fœtus suspectés d'être PAG (estimé par un PA et/ou un EPF inférieur au 10ème percentile) à partir de 32 SA. Résultats : Le mode d'accouchement principal est la voie basse (77%). Les facteurs retrouvés comme majorant le risque de césarienne en urgence sont la nulliparité, la présence d'une pathologie maternelle, un score de Bishop bas. Conclusion : L'induction du travail par PGE2 en cas de col défavorable permet une voie basse dans la majorité des cas. La nulliparité, la présence d'une pathologie maternelle, un score de Bishop bas sont des facteurs majorant le risque de césarienne en urgence.

Evaluation of professional practices : the use of moistened Propess® : innocuity, efficacy and acceptability. About twenty percent of labors are induced in France since 1995. Propess® is one of the most frequently used ways of inducing labor. It's composed of natural prostaglandins. Many studies compared it with other methods, but there is no data about how to manipulate it. We tried to evaluate the use of moistened Propess® about it's innocuity, efficacy and acceptability. We observed that some midwives used water or other lubricating substances to insert the Propess®. Our study is both prospective and retrospective. Data were collected from two different hospitals during 2013 for eight month. 68 cases "dry" and 69 "moistening" were included. We analyzed results regarding both general population and small groups (primiparous, multiparous). It appears that labor is quicker in the primiparous (75% are in labor < 24h in the group "moistened", 55,9% in the group "dry", p=0.030). When the Propess® is dry, a second way of inducting labor is more needed than when it's moistened (p=0,008). When the Propess® is removed, there are more women in labor in the group "moistened" (37,5%) than in the group "dry" (17,6%, p=0,033). No significant difference was found regarding delivery and neonatal issues. Propess®'s moistening seems to be effective and it does not have more side effects. A randomized control study should be realized to verify this assessment. Moreover, since no explanation has been found, an in vitro study could be done to explain the mechanism.; Le taux de déclenchement en France reste aux alentours de 20% depuis 1995. Le Propess® est l'un des moyens existant permettant la maturation cervicale. Il est composé de dinoprostone qui est une prostaglandine naturellement présente dans le corps. Il existe de nombreuses études qui l'ont comparé à d'autres moyens de déclenchement mais encore aucune d'entre elles ne s'est intéressée à la manipulation de celui-ci. Notre avons donc évalué quels pouvaient être les impacts de l'humidification du Propess® sur son innocuité, son efficacité et son acceptabilité. Nous avons réalisé une étude prospective et rétrospective sur 2 maternités de type III sur une période de 8 mois. Nous avons recueilli 68 cas "secs" et 69 cas "humidifiés". Nous avons ainsi évalué notre population générale, puis des sous-populations composées uniquement de primipares, de multipares et stratifiée sur la parité. Le délai de mise en travail apparait significativement raccourci chez les primipares (75% de patientes en travail < 24h chez les "humidifiés" contre 55,9% chez les "secs", p=0.030). Il y a significativement plus de recours à un autre moyen de déclenchement dans le groupe "secs" comparativement au groupe "humidifiés" (p=0.008). Dans les conditions de retrait du dispositif vaginal, nous retrouvons plus de femmes en travail significativement dans le groupe "humidifiés" (37,5%) que dans le groupe "secs" (17,6%, p=0.033). Il n'existe pas d'autre différence significative sur le déroulement de l'accouchement et l'état néonatal. L'humidification du Propess® semble donc être bénéfique pour réduire le délai de mise en travail tout en conservant une innocuité comparable à celle d'un dispositif sec. Il serait alors judicieux d'évaluer cette même problématique en effectuant une étude randomisée à grande échelle. De plus, l'hypothèse du mécanisme d'action n'ayant pas été élucidé ici, une étude in vitro permettrait d'évaluer cette action.

Increasing evidences suggest that enteric glial cells (EGC) are critical for intestinal epithelial barrier (IEB) functions and enteric neurons survival. EGC effects are currently associated to the release of glial-derived factors. In this context, this work leads to the identification of 15-deoxy-delta12,14 prostaglandin J2 (15d-PGJ2), an omega-6 fatty acid derivative, as a new mediator synthesised and secreted by EGC. Results show that both EGC and 15d-PGJ2 inhibit intestinal epithelial cells (IEC) proliferation and promote IEC differenciation through a PPARγ dependant pathway. In addition, our results show a neuroprotective effect of EGC and 15d-PGJ2 on enteric neurons, against an oxidative stress, with the activation of glutathione synthesis, associated to the Nrf2 pathway. Finally, in vivo murine colorectal carcinogenesis was associated with an alteration of glial markers and prostaglandin enzyme expression. An in situ analysis of enteric nervous system, using a method developed in this work, might complete these pathophysiological studies. The pleiotropic effects revealing of this new glial-derived lipidic mediator, the 15d- PGJ2, arise the crucial role of EGC in the neuro-glio-epithelial unit and in digestive function control., Des études récentes suggèrent que les cellules gliales entériques (CGE) ont un rôle essentiel dans les fonctions de la barrière épithéliale intestinale (BEI) et dans la survie neuronale, les effets des CGE étant souvent associés à la libération de facteurs gliaux. Dans ce contexte, ce travail de thèse a d'abord permis d'identifier la 15-déoxy-delta12,14 prostaglandine J2 (15d-PGJ2), un dérivé de l'acide arachidonique, comme nouveau facteur synthétisé et sécrété par les CGE. Les résultats obtenus montrent que les CGE et la 15d-PGJ2 inhibent la prolifération des cellules épithéliales intestinales (CEI) et augmentent leur différenciation en utilisant une voie de signalisation dépendante de PPARγ. Nos résultats montrent également un effet neuroprotecteur des CGE et de la 15d-PGJ2 sur les neurones entériques dans des situations de stress oxydant avec une activation de la synthèse du glutathion dans les neurones, associée à une voie de signalisation dépendante de Nrf2. Enfin, dans une étude in vivo de carcinogénèse colique chez la souris, des altérations de marqueurs gliaux et des enzymes impliquées dans la synthèse des prostaglandines ont été mis en évidence. Une approche globale in situ du système nerveux entérique mise au point dans ce travail devrait permettre de compléter ces études physiopathologiques. La mise en évidence des effets pléïotropiques de ce nouveau médiateur lipidique d'origine gliale, la 15d-PGJ2, souligne l'importance des CGE au sein de l'unité neuro-glioépithéliale et dans le contrôle des fonctions digestives.

L'asthme est une maladie chronique inflammatoire des voies aériennes qui pose un véritable problème de santé publique en France et à travers le monde. Les traitements actuels de l'asthme sont relativement efficaces en particulier pour les formes légères et intermédiaires, cependant une part importante des sujets asthmatiques ne contrôle pas ses symptômes du fait de traitements insuffisants.De nombreux axes de recherche sont actuellement étudiés afin de trouver de nouveaux médicaments qui permettraient d'améliorer la prise en charge des patients asthmatiques en termes de gestion des mesures environnementales, de traitement des causes notamment allergiques. Le terrain atopique constitue l'un des facteurs les plus importants prédisposant à l'asthme. Or, la prostaglandine D2 (PGD2) est un médiateur clé dans les réactions allergiques.En effet, la liaison de la PGD2 à son récepteur CRTH2 (Chemoattractant Receptor homologous molecule expressed on Th2 cells) produit une cascade d'évènements impliquée dans la pathogenèse de l'asthme, dont le recrutement de cellules inflammatoires telles que les lymphocytes Th2, les éosinophiles et les basophiles sur les sites de l'inflammation. De ce fait, la PGD2 constitue une cible thérapeutique idéale pour le traitement del'asthme allergique et l'inhibition du récepteur CRTH2 suscite de l'intérêt auprès des industries pharmaceutiques. Ce travail, après rappel des mécanismes cellulaires et des médiateurs impliqués dansl'asthme allergique, présente le rôle de la PGD2 et fait le point de l'avancement des recherches précliniques et cliniques sur les antagonistes du récepteur CRTH2. Actuellement, 10 antagonistes du récepteur CRTH2 sont en développement clinique pour le traitement de l'asthme allergique.

National audience; Le vêlage est provoqué par le fœtus lui-même, une fois atteint d’une maturité suffisante de son axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien. Une élévation du taux de cortisol circulant chez le fœtus est le signal inducteur du vêlage. La prévision du moment du vêlage repose sur l’observation des signes de préparation (vulve, mamelle et surtout ligaments sacrosciatiques). Le suivi de la température rectale est une méthode simple et efficace. Pour assister l’éleveur, quelques systèmes électroniques, basés sur un changement de température, les contractions abdominales ou l’inclinaison de la queue, peuvent être placés sur la vache et être activés au moment du vêlage. La maîtrise (relative) du jour du vêlage passe par l’induction médicamenteuse, à base de corticoïdes et/ou de prostaglandines F2alpha. La principale complication de cette pratique est la rétention placentaire, mais les effets délétères sont d’autant plus limités que le vêlage est induit près du terme. Le contrôle de l’heure du vêlage est pharmaceutique (report du vêlage à l’aide d’un beta2 adrénergique) ou, moins efficacement zootechnique (accès à l’alimentation restreint au soir).

Ecole Doctorale "Des génomes aux organismes" Diplôme : Dr. d'Université; Chez les mammifères, des interactions réciproques entre le blastocyste prêt à s’implanter et l’utérus en état de le recevoir est nécessaire pour permettre la réussite de l’implantation et l’établissement de la gestation. Bien que de nombreuses voies métaboliques soient connues pour participer à ces échanges, une compréhension intégrée du processus de l’implantation fait encore défaut. Les études d’expression de gènes et l’élaboration de modèles génétiques chez la souris ont apporté des preuves que les lipides bioactifs ou médiateurs lipidiques, sont d’importantes molécules de signalisation et qui coordonnent des séries d’événements au début de la gestation dont la formation et le développement de l’embryon pré-implantatoire, l’implantation et la croissance post-implantatoire. Dans ces travaux nous avons tenté de comprendre le rôle des médiateurs lipidiques tel l’acide lysophosphatidique (LPA) et les prostaglandines (PGs) au début du développement de l’embryon et au cours de l’implantation chez le mouton. La première étape afin d’interpréter le rôle de la signalisation liée au LPA au moment de la reconnaissance maternelle de la gestation et de l’initiation de l’implantation chez le mouton a été de vérifier la présence du médiateur lipidique dans l’utérus des animaux gravides et d’examiner l’expression et la distribution cellulaire des différents partenaires impliqués dans la synthèse et dans la transduction du signal. Nous avons analysé l’expression et la localisation cellulaire de l’autotaxine (lysophospholipase-D)(lysoPLD) qui est considérée comme la principale enzyme impliquée dans la production du LPA. Nous avons examiné au niveau du transcrit et de la protéine l’expression de trois des récepteurs membranaires du LPA (LPA1, LPA2, LPA3) dans l’utérus de la brebis et chez l’embryon pendant la période péri-implantatoire. Nos résultats démontrent que l’acide lysophosphatidique est accumulé dans l’utérus de la brebis gravide. L’enzyme (autotaxine) responsable de la production du médiateur lipidique est exprimé aussi bien dans le trophoblaste du conceptus et dans l’utérus maternel. Dans l’endomètre ovin l’autotaxine/lysoPLD est localisée principalement dans les glandes superficielles. Les récepteurs cibles du LPA sont identifiés aussi bien dans le compartiment maternel que dans l’embryon. Nos résultats révèlent la présence des récepteurs LPA1 et LPA3 dans l’utérus de la brebis au cours du cycle oestrien et de la gestation. En outre, des expériences effectuées avec des brebis ovariectomisées ont montré que l’expression du récepteur LPA1 ne dépend pas de la progestérone à la différence de LPA3 dont l’expression est régulé par les hormones stéroïdes dans l’endomètre de brebis. Dans l’endomètre de brebis gravide, le récepteur dépendant de la progestérone est surtout exprimé dans l’épithélium luminal et les glandes superficielles, site des interactions embryons-utérus. Les récepteurs LPA1 et LPA3 sont aussi présents dans le trophoblaste durant la période péri-implantatoire et montrent le même profil d’expression finement régulée. L’expression de leur transcrits est faible jusqu’au 13e jour, s’élève très fortement au 14e et diminue ensuite. Le pic d’expression protéique des deux récepteurs est retardé et observé au 17e jour du développement de l’embryon. La localisation cellulaire révèle que LPA1 est présent dans les membranes cellulaires ainsi que dans les compartiments perinucléaires et nucléaires des cellules trophoblastiques. En revanche, le récepteur LPA3 est observé uniquement dans le compartiment membranaire des cellules trophoblastiques de l’embryon. Dans l’étape suivante du travail, nous avons analysé l’influence de l’acide lysophosphatidique sur la production de prostaglandines au moyen d’un modèle de lignée de cellules trophoblastiques dérivées de conceptus ovin. Nos résultats démontrent que le LPA est capable d’augmenter la synthèse de le PGF2α des cellules trophoblastiques en culture. Nous suggérons que le lipide bioactif stimule la synthèse de prostaglandine par un mécanisme en deux phases. Dans un premier temps, le LPA augmente la production de prostaglandine sans augmenter l’expression des gènes des enzymes impliquées dans la synthèse des prostaglandines. Plus tardivement, le LPA amplifie la synthèse de prostaglandines en augmentant la transcription des deux principales enzymes impliquées dans la production de prostaglandines : cPLA2α et PTGS2. Pour rendre compte de l’augmentation de la synthèse de prostaglandines au cours de la première phase, nous suggérons que le LPA, pour lequel nous avons montré qu’il entraîne l’activation phosphorylante des MAPkinase ERK1/2, permet, après phosphorylation, l’activation par translocation de la cPLA2α. Puisque le LPA régule le niveau des transcrits de cPLA2α et de PTGS2 dans les cellules trophoblastiques dans des conditions in vitro, nous avons analysé le profil d’expression de ces enzymes chez le conceptus de brebis au cours de la période péri-implantatoire. Nos résultats démontrent que ces deux enzymes présentent le même profil biphasique d’expression qui coïncide à deux périodes critiques du développement embryonnaire. Au cours de la période analysée, entre le 7e et le 16e jour de développement, les enzymes cPLA2 et PTGS2 sont exprimées dans l’embryon ovin sous forme de deux pics d’expression aussi bien au niveau du transcrit que de la protéine. Le premier pic correspond à la période d’éclosion du blastocyste sortant de la zone pellucide tandis que le second, qui s’installe à partir du 14e jour, correspond à la première phase de l’implantation durant laquelle le blastocyste s’appose contre l’épithelium utérin.

The murine AKR1B7 protein belongs to the aldose reductase family. By its tissuerestricted expression and its tissue-specific hormonal regulation, it is a good model for the study of aldose reductase physiological functions. On the one hand, these doctoral work demonstrated ex vivo the role of murine and human aldose reductase prostaglandin F synthase activity in the adrenal gland. We highlighted a new feed-back loop between the cortex and the medulla using prostaglandin F2alpha as paracrine and/or autocrine signal. On the other hand, to achieve adrenal cortex specific inactivation of genes, we have developed the first transgenic mouse line showing specific Cre recombinase expression in this tissue. This line is a very powerful tool to create animal models of adrenal tumors.; La protéine murine AKR1B7 appartient à la famille des aldoses réductases. Par son expression limitée à un petit nombre de tissus et son contrôle hormonal, elle constitue un modèle de choix pour l'étude des fonctions physiologiques de cette famille enzymatique. D'une part, ces travaux de thèse ont permis de démontrer ex vivo le rôle de l'activité prostaglandine F synthase des aldoses réductases murines et humaines dans la glande surrénale. Nous avons mis en évidence une nouvelle boucle de régulation négative des fonctions endocrines surrénaliennes qui utilise la prostaglandine F2alpha comme signal paracrine et/ou autocrine entre le cortex et la medulla. D'autre part, nous avons développé la première lignée de souris transgéniques exprimant spécifiquement la recombinase Cre dans la cortico-surrénale pour réaliser l'invalidation conditionnelle de gènes dans ce tissu. Cette lignée constitue un outil très puissant pour la création de modèles murins de pathologies tumorales surrénaliennes

The murine AKR1B7 protein belongs to the aldose reductase family. By its tissuerestricted expression and its tissue-specific hormonal regulation, it is a good model for the study of aldose reductase physiological functions. On the one hand, these doctoral work demonstrated ex vivo the role of murine and human aldose reductase prostaglandin F synthase activity in the adrenal gland. We highlighted a new feed-back loop between the cortex and the medulla using prostaglandin F2alpha as paracrine and/or autocrine signal. On the other hand, to achieve adrenal cortex specific inactivation of genes, we have developed the first transgenic mouse line showing specific Cre recombinase expression in this tissue. This line is a very powerful tool to create animal models of adrenal tumors., La protéine murine AKR1B7 appartient à la famille des aldoses réductases. Par son expression limitée à un petit nombre de tissus et son contrôle hormonal, elle constitue un modèle de choix pour l'étude des fonctions physiologiques de cette famille enzymatique. D'une part, ces travaux de thèse ont permis de démontrer ex vivo le rôle de l'activité prostaglandine F synthase des aldoses réductases murines et humaines dans la glande surrénale. Nous avons mis en évidence une nouvelle boucle de régulation négative des fonctions endocrines surrénaliennes qui utilise la prostaglandine F2alpha comme signal paracrine et/ou autocrine entre le cortex et la medulla. D'autre part, nous avons développé la première lignée de souris transgéniques exprimant spécifiquement la recombinase Cre dans la cortico-surrénale pour réaliser l'invalidation conditionnelle de gènes dans ce tissu. Cette lignée constitue un outil très puissant pour la création de modèles murins de pathologies tumorales surrénaliennes

Le but de ce travail est d'évaluer l'efficacité et la tolérance des prostaglandines E1 chez le nouveau-né porteur d'une cardiopathie congénitale ducto-dépendante. 62 dossiers de patients ont été revus rétrospectivement. La durée moyenne des perfusions de PGE1 est de 134, 07 heures +/- 112,41 heures (6-480 heures). La dose moyenne administrée fût 111 [gamma]/kg. La perfusion de PGE1 a été d'emblée efficace chez 53,3 % des nouveaux-nés. Onze enfants ont nécessité une répétition des doses de charge pour rouvrir leur ductus arteriosus ou empêcher sa fermeture. Dans notre travail, 39% des nouveaux-nés ont présenté au moins un effet secondaire imputable au traitement par PGE1 au cours de leur hospitalisation : apnées (19,4%), distensions abdominales (15,5%), bradycardies (12,9%) et entérocolites ulcéronécrosantes (6,5%). Soixante-sept pour cent des enfants inclus dans notre étude ont bénéficié d'une intervention chirurgicale en période néonatale. L'influence du diagnostic anténatal dans la prise en charge des cardiopathies ducto-dépendantes est abordée ensuite. L'acidose à l'admission, reflet de la sévérité de la cardiopathie sous-jacente et de sa décompensation, a été montrée dans notre étude comme facteur de mortalité précoce. Notre travzil pourrait permettre d'élargir à un protocole d'utilisation des PGE1. Tout nouveau-né porteur d'une cardiopathie ducto-dépendante doit bénéficier sans délai de la mise en route d'un traitement par PGE1 avec une dose de charge de 0,05 à 0,1 [gamma]/kg/mn ; cette dose doit être maintenue jusqu'à la chirurgie cardiaque.

Not available, Une des méthodes immunologiques pouvant être appliquée au dosage de biomolécules de faible masse moléculaire est la polarisation de fluorescence. Cette méthodologie a été appliquée aux biomolécules à fonction carboxyle telles que les éicosanoïdes, et en particulier au thromboxane B2, métabolite de la membrane plaquettaire impliqué dans l'hémostase et la thrombose. Les conditions opératoires d'amidification ont été optimisées après la synthèse et la purification du marqueur fluorescent, une fluorescéine fonctionnalisée par une fonction amine. La dérivation de la prostaglandine E1 (PGE1), et du thromboxane B2 (TxB2) a permis d'obtenir des traceurs fluorescents qui ont été purifiés par chromatographie sur couche mince. Leurs caractéristiques spectrales ont été déterminées. La conservation de l'immunréactivité a été vérifiée dans différents systèmes utilisant des marqueurs isotopiques ou enzymatiques. La praticabilité de l'immunodosage a été montrée pour la PGE1. La méthodologie a pu être transposée au TxB2. Le TxB2 libéré par les plaquettes après activation par un agent pro-agrégant a été dosé. Les résultats obtenus sont en accord avec les données bibliographiques

Not available, Non disponible