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As leveduras do gênero Candida têm grande importância pela alta frequência com que colonizam e infectam o hospedeiro humano, sendo a espécie C. albicans a mais comum. A busca por produtos naturais que apresentem uma ação antifúngica eficiente frente a microrganismos se mostra uma alternativa para o controle de infecções. O óleo essencial de Melaleuca alternifolia Cheel (Myrtaceae) possui comprovada ação antimicrobiana contra bactérias e fungos, e tem sido apontado como uma opção para o tratamento de infecções fúngicas causadas pelo gênero Candida. O objetivo deste trabalho foi verificar a atividade antifúngica, em diferentes concentrações, do óleo essencial comercial de M. alternifolia contra cepa de isolado clínico da espécie C. albicans. Para a avaliação da atividade antifúngica foram utilizadas concentrações de 5 a 100% do óleo essencial puro de M. alternifólia em testes de sensibilidade a antimicrobianos por discodifusão, segundo norma estabelecida pelo Clinical and Laboratory Standards Institute, com modificações. De acordo com os resultados obtidos, o óleo essencial apresentou atividade, inibindo o crescimento do microrganismo, com a formação de halo de inibição a partir da concentração de 25%, com variação dos halos de 3 a 17 mm. Dessa forma, pode-se dizer que a cepa do isolado clínico avaliada apresentou sensibilidade ao óleo essencial de M. alternifolia, o que demonstra potencial antimicrobiano do óleo estudado, despertando grande interesse farmacêutico.