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COVID-19 convalescent plasma (CCP) contains neutralising anti-SARS-CoV-2 antibodies that may be useful as COVID-19 passive immunotherapy in patients at risk of developing severe disease. Such plasma from convalescent patients may also have additional immune-modulatory properties when transfused to COVID-19 patients.CCP (n = 766) was compared to non-convalescent control plasma (n = 166) for soluble inflammatory markers, ex-vivo inflammatory bioactivity on endothelial cells, neutralising auto-Abs to type I IFNs and reported adverse events in the recipients.CCP exhibited a statistically significant increase in IL-6 and TNF-alpha levels (0.531 ± 0.04 vs 0.271 ± 0.04; (95% confidence interval [CI], 0.07371-0.4446; p = 0.0061) and 0.900 ± 0.07 vs 0.283 ± 0.07 pg/mL; (95% [CI], 0.3097-0.9202; p = 0.0000829) and lower IL-10 (0.731 ± 0.07 vs 1.22 ± 0.19 pg/mL; (95% [CI], -0.8180 to -0.1633; p = 0.0034) levels than control plasma. Neutralising auto-Abs against type I IFNs were detected in 14/766 (1.8%) CCPs and were not associated with reported adverse events when transfused. Inflammatory markers and bioactivity in CCP with or without auto-Abs, or in CCP whether or not linked to adverse events in transfused patients, did not differ to a statistically significant extent.Overall, CCP exhibited moderately increased inflammatory markers compared to the control plasma with no discernible differences in ex-vivo bioactivity. Auto-Abs to type I IFNs detected in a small fraction of CCP were not associated with reported adverse events or differences in inflammatory markers. Additional studies, including careful clinical evaluation of patients treated with CCP, are required in order to further define the clinical relevance of these findings.French National Blood Service-EFS, the Association "Les Amis de Rémi" Savigneux, France, the "Fondation pour la Recherche Médicale (Medical Research Foundation)-REACTing 2020".

Platelets found within platelet components (PCs) intended for transfusion release inflammatory molecules. Despite the implementation of leukoreduction, some of these PCs are occasionally associated with adverse transfusion reactions (ATRs). The aim of this study was to decipher the platelet proteome in two types of PCs, buffy-coat-derived pooled PCs (PPCs) and single-donor apheresis PCs (SDA-PCs), associated with ATRs. A label-free LC-MS/MS method was used for the proteomic analysis of washed platelet pellets from 3 PPCs and 3 SDA-PCs associated with ATRs, compared to matched controls. Bioinformatics tools allowed us to characterise the differentially expressed (DE) proteins between cases (ATR-PCs) and controls (no.ATR-PCs). From the PPCs and SDA-PCs, 473 and 146 proteins were DE, respectively. The functional interpretation of these proteins revealed enrichment in platelet activation and degranulation as the most important biological process. The most dysregulated pathways were integrin signaling for PPCs and acute phase response signaling for SDA-PCs. Interestingly, inflammatory disorders were found to be enriched in both PC types. Profound proteome changes were found in the platelets of PCs that led to clinical ATRs in patients. This study presents the first exploration of the platelet proteomic signature associated with ATRs and could provide clues to improving transfusion medicine. BIOLOGICAL SIGNIFICANCE: Adverse transfusion reactions (ATRs) can still occur after transfusion of platelet components (PC). This is the first report on the proteomic analysis of PCs associated with ATR. In this study, the contents of PC bags implicated in ATRs were examined. The aims of this study were to characterise molecules that could be central to the inflammation of ATRs and to highlight dysregulated mechanisms to explain the onset of ATRs. Two types of PCs were used: 3 PPCs (each from 5 donors) and 3 SDA-PCs (each from one donor). We have shown that the two types of PCs, from bags undergoing different processing (i.e., sampling, preparation), involve two types of dysregulated - pathophysiological mechanisms associated with the onset of ATRs. The most dysregulated signaling pathways were cytoskeleton and integrin regulation for PPCs, acute phase response signaling and remodelling of adherens junctions for SDA-PCs. Inflammation, platelet activation and degranulation processes were present in both PC types but were more important for PPCs. This proteomics analysis provides a better understanding of the pathophysiological mechanisms involved in ATRs and may lead to novel steps to ensure safe PC transfusion.

Platelet transfusions may be associated with certain adverse effects in recipients, potentially caused by the presence of biological response modifiers contained in the platelet concentrates. The aim of this study is to identify the parameters that reflect platelet activation during both the preparation process and the storage of platelet concentrates. A total of 3,949apheresis platelet concentrate samples were studied with regard to parameters related to the donor as well as to the preparation process and their storage. Key glycoproteins characteristic of platelet activation, i.e. soluble CD40L and CD62P, were quantified in platelet concentrate supernatants on completion of their processing and during storage, using Luminex technology. We observed an increase in soluble factors over time. However, the different parameters studied in connection either with the donors or with the donations, such as (i) donor gender, (ii) donor blood group, (iii) time of collection and (iv) type of apheresis separator, do not seem to have any effect on platelet activation or the release of soluble CD40L and CD62P.

Even though used systematically with leukocyte reduction, platelet transfusions still cause adverse reactions in recipients. They include Transfusion-Related Acute Lung Injury (TRALI), respiratory distress that occurs within six hours of the transfusion. The pathophysiology of this transfusion complication brings complex cellular communication into play. The role, particularly inflammatory, played by blood platelets in TRALI pathophysiology has been demonstrated, but is still under debate. Blood platelets play a role in inflammation, particularly via the CD40/CD40L (sCD40L) immunomodulator complex. In this study, we examine in particular the specific involvement of the CD40/CD40L (sCD40L) complex in the inflammatory pathogenesis of TRALI. This molecular complex could be a major target in a TRALI prevention strategy. Improving the conditions in which the platelet concentrates (PC) are prepared and stored would contribute to controlling partly the risks of non-immune TRALI.

Cette etude vise a dechiffrer le proteome plaquettaire dans les concentres plaquettaires (CP) en pool (MCP) provenant de 5 donneurs et les CP d’apherese a donneur unique (CPA), associes a des effets indesirables receveur (EIR). En effet, certaines poches de concentres plaquettaires (CP) transfuses provoquent encore des EIR. Les culots plaquettaires provenant de 3 MCP et 3 CPA associees a des EIR vs leurs temoins apparies ont ete analyses par le systeme LC couple a un spectrometre de masse benchtop Orbitrap quadripole Electrospray Q-Exactive. Les proteines ont ete identifiees par SEQUEST via Proteome Discoverer 1.4. Les donnees brutes de LC-MS/MS ont ete importees dans Progenesis QI 2.0 pour quantification des peptides et comparaison statistique. Nous avons identifie 1723 et 4116 proteines, parmi lesquelles 473 et 146 etaient differentiellement exprimees (DE) dans les MCP et CPA respectivement, entre les cas (EIR-CP) et les temoins (no.EIR-CP). L’interpretation fonctionnelle a revele un enrichissement important de l’activation et de la degranulation plaquettaires, constituant les processus biologiques les plus significativement associes aux EIR. Les voies de signalisation etaient celles des integrines pour les MCP et celle du syndrome d’inflammation aigue pour les CPA. Les troubles inflammatoires se sont reveles enrichis dans les deux types de CP. Des modifications profondes du proteome ont ete identifiees dans les plaquettes des CP qui ont conduit a des EIR chez les patients. Cette etude presente la premiere exploration de la signature proteomique plaquettaire associee aux EIR et pourrait ainsi fournir des indices pour ameliorer la medecine transfusionnelle ( Fig. 1 , Fig. 2 , Fig. 3 , Fig. 4 ).

Microparticles are small membrane-bound vesicles found in body fluids including peripheral blood. Microparticles are an intrinsic part of blood labile products delivered to transfused patients and have active roles in inflammation. They are delimited by a lipid bilayer composed mainly of phospholipids, cholesterol, membrane-associated proteins, intracellular components such as metabolic enzymes, proteins-involved in adhesion and fusion, cytoskeletal-associated proteins, surface glycoproteins and/or chemokines. Microparticles can trigger a pro-inflammatory message to neighbouring or target cells. Microparticles originating from platelets, leukocytes, erythrocytes, and endothelial cells are associated with a variety of pathophysiological conditions. This review summarises the role of Microparticles in modulating inflammation.

Blood transfusion is made possible principally by use of donated homologous components that - in turn - can be perceived as sources of danger by recipients. This may create an innate immune response dominated by inflammation, especially when transfusion is repeated. Residual leukocytes in blood components can source inflammatory lesions but considerably less than used to be prior to systematic, early and stringent - in process - leukoreduction. Every blood component can cause inflammation, though barely in the case of therapeutic plasma (in such a case, this is mainly restricted to allergy). Iron that may be freed by red blood cells but also processing and storage lesions such as the emission of microparticles can reveal themselves as pro-inflammatory. Platelets in platelet components represent the main source of inflammatory and/or allergic hazards in transfusion; this is linked with processing and storage lesions but also with the platelet physiology itself. It is of utmost importance to avoid inflammatory adverse events in patients that are fragile because of their primary condition and/or treatment; this stands for their safety, as inflammation can be extremely severe and even lethal, and also for their comfort; this increases efficacy of transfusion programs while reducing the overall costs.

Introduction Les plaquettes jouent un role essentiel dans l’hemostase et la thrombose. Malgre la mise en œuvre de la leucoreduction, les effets indesirables receveurs (EIR) n’ont pas disparu. Le but de ce travail est de caracteriser l’ensemble des modifications du transcriptome plaquettaire dans les melanges de concentres plaquettaires (MCP) impliques dans un EIR. Methodes Une analyse transcriptomique des plaquettes a ete realisee dans 6 MCP associes a l’apparition d’un EIR versus 6 temoins apparies. Le sequencage a ete realise avec la technologie Ion-Proton®, l’alignement des reads avec le logiciel STAR sur le genome de reference hg19, la quantification des genes a l’aide de l’algorithme EM du logiciel Partek® Flow. Les packages R (DESeq2, Edge R, Limma voom) ont ete utilises pour les analyses statistiques. Les proteines codant pour les genes differentiellement exprimees (DE) qui impactent sur les processus biologiques (BP) et sur les voies de signalisation ont ete etudiees via une analyse d’interaction gene-gene (String db) et une analyse fonctionnelle (PANTHER). Resultats Soixante dix neuf genes significativement DE (p > 0,05) ont ete identifies. Un reseau constitue de 15 genes fortement connectes a ete mis en evidence, avec SPTBN1 comme gene hub. L’analyse fonctionnelle revele, entre autre, un enrichissement de la voie de transduction du signal impliquant RHOC et ARHGAP30 (retrouves en interaction dans String db). Conclusion Des modifications profondes du transcriptome des MCP ont ete observees. Ces observations renforcent l’idee que l’apparition d’un EIR puisse etre associee a la modification de la structure plaquettaire et plus precisement par remodelage de son cytosquelette.

Le TRALI propose une pathogenie tres complexe mettant en jeu diverses cellules de l’inflammation, telles que les neutrophiles, les monocytes, les plaquettes et les cellules endotheliales. Meme si aucun consensus actuel n’a valide les cellules reellement impliquees (neutrophiles vs monocytes vs macrophages pulmonaires vs plaquettes sanguines) un point commun existe entre toutes ces cellules, l’implication du complexe proteique CD40/CD40L. Les plaquettes sanguines, par la production d’environ 95 % du CD40L soluble, agoniste a la forme membranaire, sont au cœur d’une physiopathologie CD40/CD40L dependante. Ce couple immun participe activement a l’etablissement de l’immunite innee, adaptative et l’inflammation. En ciblant ce complexe proteique, nous avons donc emis l’hypothese d’une inhibition du developpement de l’ALI, caracterise par un etat inflammatoire non regule, induit dans un modele murin par des injections successives de LPS et d’anticorps anti-CMH I. Plutot que l’activation cellulaire, c’est la migration des neutrophiles et des plaquettes sanguines, depuis le compartiment vasculaire jusqu’a l’espace alveolaire qui a ete freinee. En effet, dans le compartiment sanguin, l’inflammation n’est pas limitee sous traitement a base d’anticorps anti-CD40L neutralisant, mais l’action des neutrophiles et des plaquettes au niveau pulmonaire est sensiblement reduite. L’inhibition du couple CD40/CD40L semble, au cours de cette etude, avoir egalement un impact sur les monocytes, parametre qui meriterait une investigation plus approfondie. Cette etude met en avant un role trop longtemps sous-estime du complexe proteique CD40/CD40L dans la physiopathologie du TRALI.

Les plaquettes dans les CP sont la principale source de facteurs responsables de manifestations inflammatoires et/ou allergiques. Les plaquettes, durant leur conservation, secretent de nombreux BRM, qui sont des ligands pour des recepteurs des cellules endotheliales et pour la plupart des types leucocytaires circulants ou adherents aux endotheliums. Nos travaux permettent de preciser les mecanismes par lesquels des surnageants plaquettaires conduisent a activer les cellules endotheliales, en fonction de la duree de stockage des CP et s’ils ont declenche un EIR. Pour cela, des CP au jour de preparation (consideres comme temoins), des CP au jour de delivrance ainsi que des CP ayant entraine un EIR, ont ete collectes. Des cellules endotheliales EA.hy926 cultivees, in vitro, ont ensuite ete mises en presence des differents surnageants plaquettaires. Par la suite, l’etude du signalosome des cellules endotheliales a ete realisee par des techniques de biologie moleculaire. Nos resultats indiquent que certains genes impliques dans l’inflammation des cellules endotheliales sont plus ou moins exprimes en fonction des stimulations. L’analyse de l’expression de marqueurs d’activation, d’apoptose ainsi que la production de facteurs inflammatoires solubles des cellules endotheliales a egalement mis en evidence des differences d’expression en fonction des surnageants plaquettaires. Cette etude est completee par un « Woud healing test ». Ce criblage a permis d’identifier des genes d’interet afin d’etudier les expressions proteiques membranaires et/ou solubles possiblement consecutives.

Le TRALI est considere comme l’une des reactions post-transfusionnelles avec la mortalite la plus elevee. Cette pathologie est caracterisee par une atteinte pulmonaire severe justifiant ce fort taux de mortalite. La pathogenie du TRALI se rapproche de celle de plusieurs pathologies inflammatoires, telles que la pancreatite ou encore les pathologies inflammatoires de l’intestin. La physiopathologie du TRALI repose sur l’activation de plusieurs cellules de l’inflammation initiant la migration, dans l’espace alveolaire, de ces memes cellules. Lors de la pancreatite une mecanistique similaire, orchestree par la migration des neutrophiles dans le tissu lese, peut-etre observee. Nous emettons l’hypothese que lors de l’induction du TRALI, des organes plus profonds, tels que le pancreas, peuvent etre une cible secondaire. Comme les deux pathogenies, celle de la pancreatite et du TRALI, sont etroitement liees, nous emettons egalement l’hypothese d’une implication du couple proteique CD40/CD40L dans la regulation de la pancreatite induite suite au developpement d’un TRALI. En utilisant, ici, un modele animal de TRALI induite par injection successive de LPS et d’anticorps anti-CMH I et un traitement preventif a base d’anticorps anti-CD40L, nous avons pu demontrer que l’atteinte pancreatique, observee dans notre modele de TRALI, est sensiblement prevenu lors de l’inhibition du complexe immun CD40/CD40L.

Endocan est une glycoproteine exprimee par l’endothelium vasculaire dont le role est de maintenir l’integrite de la paroi vasculaire et assurer l’impermeabilite de la barriere endotheliale face aux composes sanguins. Apres liberation, endocan peut se fixer aux recepteurs leucocytaires ayant prealablement adhere aux cellules endotheliales par le complexe LFA-1/ICAM-1, limitant ainsi la transmigration endotheliale des leucocytes dans le tissu interstitiel. La liberation d’encodan est donc augmentee dans le but de contrer l’atteinte de l’endothelium vasculaire. Au cours de cette etude, le but etait de mettre en evidence l’influence inflammatoire des composes presents dans les milieux de conservation des concentres plaquettaires, associe au developpement de reactions post-transfusionnelles, sur l’endothelium vasculaire et d’evaluer la liberation d’endocan depuis ce dernier. Nous avons pu observer une exacerbation de l’etat inflammatoire des cellules endotheliales caracterise par une liberation plus importante de mediateurs solubles comme IL-6, mais egalement endocan, lorsque ces cellules sont stimulees avec des surnageants de CP lies a des reactions transfusionnelles par rapport a des surnageants de CP sans induction pathologique chez le receveur. Cette production endotheliale est correlee avec une proliferation cellulaire reduite et une apoptose plus accrue. Ainsi, comme pour d’autres pathologies inflammatoires, nous pourrions envisager la mesure de la concentration plasmatique d’endocan comme un marqueur precoce de la lesion inflammatoire de l’endothelium et donc de reactions post-transfusionnelles inflammatoires.

La lesion pulmonaire aigue transfusionnelle (TRALI), est une reaction grave. La physiopathologie de cette complication n’est pas encore tres bien admise par la communaute scientifique, notamment en ce qui concerne le role des plaquettes sanguines au sein de la mecanistique cellulaire responsable du developpement du TRALI. Au cours de cette etude, des travaux preliminaires sont proposes pour tenter de repondre en partie a cette interrogation. Un modele murin a ete utilise pour induire le developpement d’un ALI par des injections successives de lipopolysaccharide et d’anticorps anti-CMH I. Des traitements prealables a base d’anticorps anti-GPIbα, initiateur d’une depletion plaquettaire, et de ML354, molecule inhibitrice de la voie d’activation du recepteur PAR-4, ont ete administres a des souris BALB/c 30 min avant l’induction de la pathologie. La depletion plaquettaire, prealable a l’induction de l’ALI, semble reduire la severite liee a la lesion pulmonaire aigue, sans en inhiber entierement son developpement. En revanche, le traitement a base de ML354 n’a prouve aucune efficacite. Enfin, nous avons pu observer une activation specifique des plaquettes lors de stimulation, ex vivo, avec les memes stimuli utilises pour declencher l’ALI dans notre modele murin. A ce stade, cette etude propose que les plaquettes sanguines soient, au moins secondairement, impliquee dans la physiopathologie du TRALI.

Transfusion of labile blood products (LBPs) generates occasional inflammatory : type, hazards; for a large part of these, no antigen/antibody conflict is thus, detected. Residual leucocytes used to account for a large part of such incidents - rarely accidents. Since, however, the systematic leukoreduction of LBPs, leucocytes are the less and less incriminated in adverse events. Platelets themselves proved capable of secreting copious amounts of inflammatory mediators, even in the absence of any deliberated stimulation. Meanwhile, even though exceptionally, inflammation can be observed after red blood cell transfusion. It has been noticed that the collection mode of cellular compounds, as well as the preparation and storage conditions are capable of inflicting lesions to the cell membranes and to activate those cells, and thus promoting inflammatory responses. Storage lesions as well as ageing of the stored cells alongside with cell apoptosis contribute to inflammatory responses. This present 'State of the Art' paper aims at encompassing the primary and secondary components of the LBPs, along with the various types of molecules displaying pro-inflammatory properties that can be encountered in transfusion. A better knowledge of causes of inflammatory transfusion-linked hazards is indeed instrumental to the implementation of safety measures aimed at reducing or suppressing these unwanted effects.

Platelets are currently acknowledged as cells of innate immunity and inflammation and play a complex role in sepsis. We examined whether different types of LPS have different effects on the release of soluble signaling/effective molecules from platelets. We used platelet-rich plasma from healthy volunteers and LPS from two strains of gram-negative bacteria with disparate LPS structures. We combined LPS-stimulated platelet supernatants with reporter cells and measured the PBMC cytokine secretion profiles. Upon stimulation of platelets with both Escherichia coli O111 and Salmonella minnesota LPS, the platelet LPS::TLR4 interaction activated pathways to trigger the production of a large number of molecules. The different platelet supernatants caused differential PBMC secretion of IL-6, TNFα, and IL-8. Our data demonstrate that platelets have the capacity to sense external signals differentially through a single type of pathogen recognition receptor and adjust the innate immune response appropriately for pathogens exhibiting different types of 'danger' signals.

For patients with platelet deficiencies, platelet components are therapeutic products for which there is no substitute. However, transfusion complications are more frequent with this labile blood product than with others. This is attributable to products secreted by the platelets themselves, including a variety of cytokines, chemokines, and biological response modifiers, some of which are secreted in large quantities following platelet activation. Why platelets are activated and prone to releasing these molecules during certain inflammatory and innate immune responses is not yet fully understood, but it could be due to several parameters including incompatibilities between blood donors and recipients, the process of platelet preparation and preservation, and the ability of the donor's immune system to sense danger presented by external stimuli during the blood donation process. This review presents our current knowledge of how the platelets that constitute the platelet component for transfusion are sources of cytokines and biological response modifiers and discusses methods to improve the quality of blood transfusion products and safety for patients.

Les lesions de stockage des concentres plaquettaires (CP) sont decrites par des changements structurels et biochimiques des plaquettes au cours de la chaine de preparation jusqu’a la delivrance des CP. Ces lesions de stockage dependent des methodes de production, des solutions additives, eventuellement de la methode d’inactivation des agents pathogenes, de l’eventuelle irradiation ainsi que la duree de stockage. Cette etude s’interesse a la concentration de sCD40L et sCD62P, deux marqueurs inflammatoires plaquettaires, contenue dans les concentres de plaquettes d’apherese (CPA) et les melanges de concentres plaquettaires obtenus a partir de Buffy-Coat de 5 dons de sang total (MCP). Les CPA et MCP sont conserves en suspension dans du plasma (35 %) ainsi que dans une solution additive de conservation (65 %). Deux solutions de conservation sont comparees, Intersol™ et SSP+®. Pres de 9000 echantillons ont ete etudies, selon le processus de preparation, les donnees de la QBD dont la duree de stockage. Les facteurs solubles ont ete quantifies dans les surnageants plaquettaires, en utilisant la technique Luminex®. Les CPA semblent plus actives que les MCP a la fin du processus de preparation, c’est-a-dire avant le stockage. Cependant, les facteurs solubles pro-inflammatoires contenus dans les MCP sont plus eleves au cours du stockage que pour les CPA. Dans les CPA, la concentration de sCD62P est plus reguliere avec Intersol™ qu’avec SSP+® et inversement pour sCD40L. Les donnees soulignent l’importance du traitement et du stockage des CP. Dans quelle mesure ces parametres peuvent affecter l’etat du patient, cela reste a evaluer dans des etudes cliniques.

Les plaquettes jouent un role inflammatoire, notamment de par leur capacite a liberer des modificateurs de reponse biologique (BRM). La reaction inflammatoire dans le compartiment vasculaire implique une activation des cellules endotheliales en raison des interactions cellulaires et les BRM infuses avec les produits sanguins. Endocan, qui est un proteoglycane secretee par des cellules endotheliales sous le controle de cytokines pro-inflammatoires, peut etre une reponse secretoire correlee a cette reaction inflammatoire transfusionnelle. Nous avons mesure, in vitro, l’activite des cellules endotheliales vis-a-vis de l’expression d’endocan apres stimulation par des surnageants de concentres plaquettaires (CP), impliques dans les effets indesirables receveurs (EIR) ou non (Controle). La fonction des plaquettes a ete evaluee par quantification du CD62P soluble et de l’endocan. Des tests fonctionnels de surnageants de CP ont ete effectues sur des cellules endotheliales EA.Hy926 en les incubant en presence de surnageants de CP de chaque groupe. L’activation des EA.hy926 a ete evaluee par leur production en IL-6 et endocan. La secretion d’endocan plaquettaire n’a pas ete observee lors de l’activation des plaquettes. Une augmentation de la liberation d’IL-6 et d’endocan par les EA.hy926 a ete observee apres incubation avec les surnageants des CP ayant induit un EIR, compare a celles stimulees par des surnageants de CP controles, egalement en fonction du temps de stockage des CP. La correlation entre la secretion d’endocan et d’IL-6 par les cellules endotheliales suggere que l’endocan puisse etre utilise comme marqueur predictif de l’inflammation dans un contexte transfusionnel.

Beyond haemostasis, platelets exert a potent role in innate immunity and particularly in its inflammatory arm. The extent of this action remains however debatable, despite clear - and old - evidence of a link between platelets and infection. Platelets can sense infectious pathogens by pathogen recognition receptors and they can even discriminate between various types of infectious signatures. In reply, they can shape their capacity to respond by activating a signalosome and by producing different profiles of pro-inflammatory cytokines and related products. The links between pathogen sensing, signalosome activation and protein production, and their finely tuned regulation are still under investigation since platelets lack a nucleus and thus, canonical molecular biology and genomics apparati.

Blood platelets are cellular elements of primary haemostasis. During the last decade research on platelets has been subsequently based on this paradigm, with separate observations on issues such as the ability for platelets to bind infectious agents or even engulf them, to drop in counts in case of evolving infectious processes, etc. More recently, novel work has set up bases for novel functions for platelets, as members of functional immune cells, principally in innate immunity but capable of influencing adaptive immunity. Platelets are thus essential to haemostasis and to inflammation, questioning their essential functionality and the set up of a novel paradigm: could platelets be tissue-repairing cells? Such an assumption would open an entire new field of investigations. The present "State of the Art" essay attempts to discuss the main arguments on this.

La transfusion sanguine est une therapeutique (ou un support therapeutique) indispensable pour laquelle il n’existe pas actuellement de substitut. La transfusion de produits sanguins labiles (PSL) est dans la grande majorite des cas tres bien toleree, mais elle peut etre a l’origine d’effets indesirables chez les receveurs (EIR) notamment de type inflammatoire. La composante inflammatoire de ces reactions est multifactorielle car la transfusion sanguine est basee sur un triptyque transfusionnel : Donneurs/Produits/Patients. Nous avons identifie des cytokines/chimiokines (qu’on rassemblera sous le terme de modificateurs du comportement biologique ou BRM), qui semblent pouvoir declencher une reaction inflammatoire chez le receveur, dont la principale est le CD154 soluble (ou sCD40L soluble). De plus, nous avons montre que la concentration de l’ADN mitochondrial plaquettaire, l’IL-27 et l’Ox40-Ligand sont presents en quantite significativement plus importante dans les concentres plaquettaires (CP) ayant induit un EIR. Un travail recent de notre groupe, avec une modelisation par une arborescence mathematique, demontre que des molecules peuvent etre predictives de la survenue d’un EIR (IL-13, MIP-1α), mais aussi de la presentation clinique de cet EIR. Nous avons evalue, in vitro, le potentiel inflammatoire des CP sur l’endothelium vasculaire. Des differences d’activation des cellules endotheliales, dans un modele in vitro, ont ete observees lorsqu’elles sont en presence de surnageant de concentres plaquettaires ayant induits un EIR. Enfin, nous avons mis en en evidence, in vivo dans des modeles de souris, l’importance du CD40/CD40L dans la prevention du TRALI. Nos travaux permettent d’identifier les BRM plaquettaires qui sont, d’une part, modules au cours de la preparation et du stockage des CP et, d’autre part, impliques dans les EIR et ceci au travers des approches ex vivo, in vivo et in vitro.

Resume Les microbicides peuvent se definir comme des substances topiques susceptibles de reduire le risque d’infections sexuellement transmissibles. L’objet de cette revue est de presenter un etat des lieux des connaissances relatives aux microbicides vaginaux susceptibles de proteger les femmes contre l’infection par le virus de l’immunodeficience humaine de type 1 (VIH-1). Les molecules microbicides a visee anti-VIH comprennent des composes non specifiques comme les detergents, les polyanions ou les inhibiteurs d’entree, et des molecules specifiques de VIH-1 qui incluent principalement des inhibiteurs des etapes precoces de l’infection virale et des inhibiteurs de la reverse transcriptase. Bien que l’approche microbicide soit tres seduisante sous l’angle conceptuel, aucun essai clinique controle et randomise, conduit avec des molecules de premiere generation n’a fait la preuve de l’efficacite preventive de ces composes contre l’infection par VIH-1. Des resultats encourageants ont ete obtenus chez des primates non humains et plusieurs essais cliniques menes a travers le monde devraient livrer leur verdict assez vite. Cette revue discute ces differents aspects et encore l’evaluation preclinique de la balance benefices-risques des produits microbicides, les associations de composes microbicides anti-VIH-1 et la capacite de ces substances a selectionner des mutants resistants. Une meilleure connaissance des modes de franchissement de la muqueuse cervico-vaginale par VIH-1 devrait permettre d’affiner les strategies microbicides qui, en l’absence de vaccination preventive a moyen terme, constituent une alternative a evaluer pour proteger les femmes – et notamment les plus vulnerables d’entre elles – vis-a-vis de l’infection par VIH-1.

Platelets are nonnucleated cellular elements that play a role in the process of haemostasis, and also in various ways in innate immunity and in inflammation. Platelets also contain numerous secretory products and can exert critical roles in several aspects of haemostasis. In addition, they house and secrete a variety of cytokines, chemokines and associated molecules which behave as ligands for receptors/counterparts displayed by endothelial cells lining tissue vessels and most leukocyte subsets. These latter studies show that platelets have an important role in innate as well as adaptive immunity; thus platelets can take part in an immune directive response. Moreover, platelets display receptors for several types of cytokines/chemokines along with FcgammaRII receptors. Finally, platelets not only express a variety of Toll-like receptors, with recently identified functions or not as-yet fully identified, but have also been demonstrated to express the key tandem pair of inflammatory and antigen presentation molecules (CD40 and CD40-ligand/CD154), this latter function making them the major purveyors of soluble CD40L in the plasma. It appears that platelets may be regarded as one of the neglected components of immune cell regulators, and platelets contribute to some interesting aspects in bridging innate and adaptive immunity. We propose that platelets discriminate danger signals and adapt the subsequent responses, with polarized cytokine secretion. Platelets may recognize several types of infectious pathogens and limit microbial colonization by sequestering these pathogens and releasing immunomodulatory factors. This review allows us to re-explore indications that platelets exert direct anti-infection immunity and we will present experimentally-driven arguments in favour of a role of platelet TLR in regulating certain immune activities.

The female genital tract is an important site for numerous pathogens entry. Local immunization, generating specific mucosal IgA and systemic IgG, represents an interesting alternative immunization pathway. However, such a vaccine strategy needs mucosal adjuvants to obtain the best immune response. Considering that the immunization process is mainly dependent on the capture and on the transport of the antigen by Langerhans cells, we evaluated potential adjuvant molecules by analysing their effects on the CCL20 secretion by endocervical and exocervical/vaginal epithelial cells as well as on dendritic cell and Langerhans cell maturation. We demonstrated that DC-Chol and Zymosan are the most efficient mucosal candidate immunoadjuvants that generate a strong increase of CCL20 secretion by the two epithelial cell lines and the maturation of dendritic and Langerhans cells, respectively.

Au cours d’une transfusion sanguine, et notamment plaquettaire, le receveur peut manifester un effet indesirable (EIR), dont la gravite est variable. Les principales manifestations sont febriles non hemolytiques (RFNH), allergiques/pseudo-allergiques, cardiovasculaires (hypotensions), et des œdemes pulmonaires lesionnels aigus post-transfusionnels ou Transfusion Related Acute Lung Injury (TRALI). Les EIR peuvent avoir des causes immunologiques dependantes ou non d’un conflit Ag/Ac, qui peuvent aboutir aux absences de rendement, voire a des impasses transfusionnelles. Nous nous interessons dans le cadre de nos travaux principalement aux etats inflammatoires « purs » independants d’un conflit Ag/Ac decelable. Nous avons recemment identifie des cytokines/chimiokines (qu’on rassemblera sous le terme de modificateurs du comportement biologique ou BRM), qui semblent pouvoir declencher une reaction inflammatoire chez le receveur, dont la principale est le CD154 soluble (ou sCD40L) soluble. De plus, nous avons montre que la concentration de l’ADN mitochondrial plaquettaire, l’IL-27 et l’Ox40-Ligand sont presents en quantite significativement plus importante dans les concentres plaquettaires (CP) ayant induit un EIR. Un travail recent de notre groupe, avec une modelisation par une arborescence mathematique, demontre que des molecules peuvent etre predictives de la survenue d’un EIR (IL-13, MIP-1α), mais aussi de la presentation clinique de cet EIR. Nos travaux permettent d’identifier les BRM plaquettaires qui sont, d’une part, modules au cours de la preparation et du stockage des CP, et, d’autre part, impliques dans les EIR.

La transfusion de produits sanguins labiles (PSL) est a l’origine d’incidents – plus rarement d’accidents – de type inflammatoire pour une large partie sans mise en evidence d’un conflit antigene-anticorps. Tous les PSL peuvent etre en cause, meme si la transfusion de plasma ne s’accompagne principalement – et de surcroit rarement – que de manifestations allergiques ou dites allergiques. Dans cette etude, nous etudions les concentrations des microparticules et molecules inflammatoires (TGFβ1, RANTES, VCAM-1, ICAM-1, PF4, CD40L, IL-13, CD62P, INFγ, IL1β, MIP1α, TNFα) des plasmas issus de deux types de processus de preparation : aphereses plasmatiques simples (Haemonetics PCS®2) et cellulaires (Gambro BCT–Trima). Les concentrations des facteurs suivants sont significativement plus elevees dans le plasma issu d’aphereses plasmatiques simples vs cellulaires (Microparticules, RANTES, TGFβ1, sVCAM-1 et sCD40L) et inversement pour le sCD62E. Aucune variation significative n’est observee entre les deux groupes concernant le sCD62P, IL-13 et sICAM. Le potentiel pro-inflammatoire des plasmas sur des cellules endotheliales dans un modele in vitro est en cours d’investigation. La question de l’evaluation du plasma therapeutique permet de revisiter les grandes questions de l’evaluation des pratiques en transfusion. Ce travail a, pour objectif secondaire, de degager des pistes de reflexion pour la preparation future des plasmas therapeutiques.