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Introdução: A contaminação bacteriana (CB) de hemocomponentes é um evento adverso da transfusão de hemocomponentes, potencialmente grave e grande causadora de sepse e mortes relacionadas a transfusão. A AABB (Association for the Advancement of Blood & Biotherapies) define que os Serviços de Hemoterapia (SH) devem ter métodos para detectar bactérias em todos os componentes plaquetários (CP) destinados a transfusão. No Brasil, a Portaria de Consolidação n°5 fixa a obrigatoriedade em 1% da produção. Nos SH comumente é utilizada a hemocultura, valendo-se de 8 a 10 ml de amostra, dificultando e depreciando os CP, que já possuem baixos volumes. Faz-se necessário uma alternativa para detecção de CB nas bolsas de CP, mantendo-se a sensibilidade e utilizando-se menor volume de amostra possível, a um custo permissivo. Objetivo: Definir um protocolo para hemocultura dos CP, utilizando baixo volume de amostra, avaliando-se a sensibilidade do teste aplicado e o custo da operação. Materiais e métodos: Os doadores de sangue foram triados no Serviço de Hemoterapia e Terapia Celular do Hospital Israelita Albert Einstein entre abril e junho de 2024. As hemoculturas automatizadas foram processadas no equipamento BD BACTECTM, que utiliza uma metodologia de fluorescência para rápida detecção de bactérias em amostras. Os frascos utilizados foram os PlateletsAerobic/F Culture Vials e PlateletsAnaerobic/f Culture Vials, recém registrados para uso no Brasil e específicos para utilização em amostras de CP deleucotizadas provenientes de SH. Para validação foram utilizadas 12 cepas bacterianas. O volume mínimo requerido pelo fabricante para inoculação foi de 4 ml por frasco. Para os controles negativos foram utilizados CP e salina. Resultados: Todas as amostras positivas demonstraram resultado conforme esperado. O tempo médio para positivar os frascos inoculados foi: S.aureus (t = 13:28h), E.clocae (t = 10:54h), E.coli (t = 10:37h), S.agalactiae (t = 9:35h), S.epidermidis (t = 19:46h), S.mascescens (t = 11:13h), K.oxytoca (t = 11:15h), C.albicans (t = 23:05h), P.aeruginosa (t = 15:01h), C.perfringens (11:04h), B.cereus (t = 11:43h), C.acnes (t = 11:03h). Os frascos sem inóculo apresentaram resultados negativos. Discussão: O tempo médio de detecção dos patógenos se mostrou adequado (< 24h), comprovando sensibilidade para todas as cepas testadas. Em se tratando de um hemocomponente cujo volume total é significativamente baixo (40 a 70 ml), a possibilidade de uma inoculação de apenas 4 mls contra 8 mls dos frascos tradicionais se mostra bastante significativa e benéfica para o produto final. O custo do insumo é parecido com os frascos já utilizados pelo Serviço, o que possibilitaria sua implementação. Conclusão: A sensibilidade semelhante, associada a um baixo consumo de amostragem, oferta de um hemocomponente mais volumoso, e um custo financeiro similar tornam a realização das hemoculturas automatizadas com frascos aeróbios e anaeróbios de plaquetas uma boa solução para SH que realizam triagens microbiológicas para seus produtos plaquetários.

Objetivo: O Daratumumab (anti-CD38) é uma terapia bastante aplicada no tratamento de Mieloma Múltiplo (MM), porém o uso desse medicamento causa interferência nos exames de Imunohematologia devido a uma panaglutinação do soro do paciente com hemácias comerciais usadas em testes pré-transfusionais. Essa interferência pode ser mitigada através do uso de um reagente bastante conhecido como o Ditiotreitol (DTT 0,2M), capaz de romper essa proteína de superfície (CD38) também expressa em células eritrocitárias e possibilitar a identificação de aloanticorpos que poderiam ser mascarados. No entanto, o DTT 0,2M também destrói alguns antígenos eritrocitários importantes, tais como antígenos dos sistemas KEL, DO, YT. O objetivo desse estudo foi avaliar a aplicabilidade do DTT na pesquisa de anticorpos em uma concentração mais baixa (DTT 0,04M) e o efeito desse reagente nos antígenos eritrocitários de alta frequência. Materiais e métodos: Foram analisados soros de 20 pacientes, sendo que, 16 apresentaram somente o anti-CD38 e 4 apresentaram outros anticorpos associados (1 anti-Fya, 1 anti-E, 1 anti-k e 1 anti-s). Os soros foram testados na metodologia de gel teste (BioRad). Foram adicionados nos poços do cartão ID-Liss/Coombs (BioRad) 50 μL de hemácias de triagem ID-Diacell I, II, III (BioRad) e em seguida, 25 μL de DTT 0,04M. No controle da diluição foi adicionada Solução Salina Tamponada (PBS). O tempo de incubação do tratamento das hemácias foi de 30 minutos a 37ºC. Após este período, foram adicionados aos poços 25 μL de cada soro teste, com uma incubação de 15 minutos seguida de centrifugação do cartão. Hemácias de triagem foram testadas com antissoros raros provenientes do Scarf dirigidos a antígenos de alta frequência, antes e após o tratamento com o DTT 0,04M. Resultados: Todos os soros testes apresentaram 100% de concordância com resultados prévios, mostrando que o DTT na concentração de 0,04M foi eficaz na remoção do CD38 da superfície das hemácias e não diminuiu a reatividade dos aloanticorpos presentes nos soros. Os antígenos de alta frequência: k, LWª, Knª, JMH, Ytª, Lub, Hy, Gyª, Tcª, Crª, Drªe GUTI mantiveram resultados positivos após o tratamento, com exceção do antígeno Drª(CROM:5) que apresentou reatividade reduzida comparado com o resultado pré-tratamento. O tempo de realização do teste também foi reduzido em 30 minutos (90min para 60min) comparado a técnica do DTT 0,2M. Conclusão: O DTT 0,04M simplifica a pesquisa de anticorpos, reduzindo o tempo de liberação do concentrado de hemácia para os pacientes com MM além de preservar antígenos de grupos sanguíneos desnaturados pelo tratamento com o DTT 0,2M. Pelo conhecimento dos autores, este é um dos únicos estudos realizados que analisaram a eficiência do DTT 0,04M abrangendo um maior número de antígenos de alta frequência, mostrando que o DTT em baixa concentração preserva boa parte dos antígenos e possibilita maior segurança transfusional quando comparado com o DTT 0,2M.

Introdução: Um dos requisitos para obter a certificação de Laboratório de Referência em Imunohematologia pela AABB (Association for the Advancement of Blood & Biotherapies ) é estar associado a um programa de doadores raros internacional. Esse programa é o ARDP (American Rare Donor Program ) coordenado pela American Red Cross criado em 1998 na Filadélfia com o objetivo de fornecer unidades de sangue raro para pacientes com fenótipos específicos e/ou aloimunizados que necessitam de transfusão. O ARDP possui um banco de dados de doadores raros ativos (mais de 90K) graças a cooperação dos membros de vários países participantes (EUA, Kwait, Itália e Brasil) que pesquisam, identificam e cadastram doadores raros numa plataforma digital facilitando o reconhecimento e a busca pelo fenótipo especial. Objetivo: : Apresentar a experiência do Laboratório de Referência em Imunohematologia (LRI) do Hospital Israelita Albert Einstein (HIAE) na busca e cadastro de doadores raros sendo o único laboratório de referência na América Latina participante do programa de doadores raros ARDP. Materiais e métodos: Entre Jan/22 a Jun/24, doadores dos grupos sanguíneos A e O foram analisados para os antígenos dos sistemas RH (D, C, c, E, e, CW), Kell, Kidd, Duffy e MNS sendo selecionados aqueles que apresentaram fenótipos homozigotos. Muitos também foram submetidos a um screening com soros raros anti-Ge2 e anti-Dibpela técnica de gel automatizada (Wadiana Grifols S.A). Doadores com fenótipos que se encaixavam nos critérios do programa ARDP: combinações antigênicas em homozigose, ausência de antígeno de alta frequência e/ou variantes RHD e RHCE tiveram seu DNA extraído e os resultados foram confirmados por genotipagem automatizada (BloodChip®, Progenika) ou PCR-RFLP, PCR-SSP. Resultados: Um total de 22.290 doadores foram analisados para os antígenos dos sistemas RH (D, C, c, E, e, CW) e K. As hemácias dos doadores que apresentaram fenótipos homozigotos (n = 8.695), poderiam ter a fenotipagem estendida para os antígenos Fya, Fyb, Jka, Jkb, S, s. Um total de 3.413 doadores também foram testados frente aos soros raros anti-Ge2, anti-Dib. 20 doadores com fenótipos raros identificados, concordaram em participar do programa assinando o termo de consentimento obrigatório. Desses, 15 apresentaram múltiplos antígenos negativos, 2 (Dib−), 1 (U-), 1 (Coa) e 1 (r”r”). Todos foram inseridos no banco de dados do ARDP através do site ARDP@redcross.org. Conclusão: A adesão ao ARDP por meio da AABB, proporcionou um vínculo mais próximo com nossos doadores raros, ampliou o cadastro de fenótipos incomuns do Serviço, possibilitou o acesso a um amplo banco de doadores especiais, além de contribuir para atendimento transfusional mais efetivo dos pacientes aloimunizados no âmbito nacional e internacional.

Introdução: A plataforma digital RedCap (Research Eletronic Data Capture) foi desenvolvida para projetos de pesquisas clínicas na área da saúde e é muito utilizada na coleta e consulta de dados online, na elaboração de relatórios personalizados, garantindo o máximo de precisão, segurança e rapidez na obtenção de informações disponibilizadas para pesquisadores. Objetivo: O objetivo deste estudo é demonstrar a aplicabilidade da ferramenta RedCap, na rotina de um Laboratório de Referência em Imunohematologia (LRI) de forma a atender os padrões de qualidade dele que é o inventário de amostras raras. Materiais e métodos: A implementação da plataforma RedCap no setor de imunohematologia do banco de sangue do Hospital Israelita Albert Einstein iniciou-se com a configuração dos dados personalizados direcionados ao inventário de amostras raras dentro desse software. Os dados foram construídos digitalmente ou foram importados do sistema informatizado através do Microsoft Excel, PDF ou CSV. Um total de 500 amostras raras (n = 300 hemácias, n = 200 soros) foram migrados do Excel (pastas físicas Hemateca e Soroteca) para o software RedCap. Os dados pertencentes as amostras de hemácias e soros raros foram organizados de acordo com a sua identificação, fator raro e localização em butijão criogênico ou freezer, respectivamente. Através de uma lógica de programação foi possível compor os fenótipos eritrocitários de cada hemácia. Discussão: Uma vez implementado o inventário de amostras raras, o colaborador pode logar o programa RedCap tanto para inserir quanto para excluir uma amostra do relatório; pode criar painéis de hemácias selecionadas para exclusão de anticorpos e pode gerenciar melhor o estoque de hemácias e soros raros através da obtenção de relatórios e gráficos estatísticos. Conclusão: A plataforma RedCap possui muitos recursos de pesquisa e esta observação demostrou que é possível construir um inventário de amostras raras congeladas digital para atender uma das exigências da AABB. O software personalizado permite a organização dos dados facilitando o acesso às informações das amostras, reduzindo a impressão de papéis e esforços necessários para o gerenciamento manual dessas amostras.

Objetivos: Alterações no gene RHD, podem ser detectadas pela variação na intensidade de reações sorológicas com diferentes reagentes anti-Ds e podem estar associadas com alelos RHCE presentes em determinadas etnias. Descrevemos uma variante RHD prevalente em caucasianos, mas que foi identificada em um indivíduo afrodescente apresentando a mutação GATA. Diante da alta miscigenação da população brasileira, protocolos complementares de genotipagem tornam-se ferramentas úteis para a caracterização de raros alelos RHD. Material e métodos: Esse estudo foi realizado na amostra de um indivíduo do sexo masculino, 43 anos, afrodescendente, candidato a doador de medula óssea, que na avaliação inicial apresentou uma leve neutropenia (segmentados: 1.472 uL; Valor de Referência: 1.700 a 8.000 uL). A tipagem RHD foi realizada com dois antissoros anti-D (IgM MS-26/ IgG MS-201, Fresenius Kabi) e com painel de soros comerciais anti-D (ESD1 BioRad; P3X61, P3X290, PX35, PX21223 B10, RUM-1, ESD-1M–Grifols; D175, D415–Immucor®; NaTH119, LOR-15C9 Imunoscan). As fenotipagens eritrocitárias dos Sistemas Rh (C,c,E,e) e Duffy (Fya, Fyb) foram determinadas nas técnicas de Gel (DG Gel Rh Pheno e com antissoros policlonais, Grifols S.A, respectivamente). A genotipagem foi realizada por técnicas de PCR-Multiplex com primers específicos do gene RHD (exons 3, 4, 5, 6, 7 e 9 ), PCR- RFLP para regiões do gene FY (125G>A e -67T>C), técnicas automatizadas utilizando a plataforma Bloodchip (Kit ID CORE XT Grifols S.A.) e sequenciamento Sanger com análise dos 10 exons do gene RHD. Resultados: A tipagem RHD apresentou resultado discrepante entre os dois anti-D nos testes de rotina (Anti-D IgM negativo e IgG fracamente positivo). Os demais antissoros apresentaram reações sorológicas fracas e inconsistentes. Além desse achado, a presença de neutropenia leve no hemograma do doador motivou a investigação dos fenótipos dos Sistemas RH e FY: RH:2,-3,4,5 (Ccee) e FY:-1,-2/Fy(a-b-). O PCR-multiplex detectou todos os éxons do gene RHD. As genotipagens, convencional e automatizada confirmaram o polimorfismo GATA em homozigose (FY*2_67C>C) na região promotora gene FY, e o sequenciamento apontou a troca de um único nucleotídeo (833G>A) no éxon 6 confirmando o alelo RHD*01W.38. Discussão: O fenótipo D fraco tipo 38 está envolvido na aloimunização anti-D, sua prevalência é 1,5% em individuos caucasianos de origem portuguesa e o genótipo GATA é relativamente comum em afrodecendentes. A amplificação dos exons RHD, a associação com o haplótipo RHCE*Ce (frequente em caucasianos) e a mutação GATA, foram fatores que determinaram a análise do DNA desse doador pela técnica do Sequeciamento, uma vez que, protocolos de genotipagem estendidos para as variantes RHD consomem tempo e são de alto custo. Conclusão: A identificação de indivíduos com fenótipos incomuns é importante tanto para fins transfusionais, como para caracterizar frequências populacionais onde a miscigenação é alta, ou em populações onde normalmente elas não seriam pesquisadas. A disponibilidade de técnicas de sequeciamento proporciona resultados mais acertivos e rápidos uma vez que analisam regiões de exons e introns do gene RHD, onde metodologias de PCRs convencionais demorariam mais ou até mesmo, mostrariam-se inconclusivas.

Aim: We describe a case of an obstetric patient, asian, whose Red Blood Cells (RBCs) showed a low expression of the RH:1 antigen in the routine tests and the strategies used for the characterization of an unusual RHD variant. Material and methods: Japanese, 25th weak of pregnancy, showed discrepant results in RhD typing with different anti-D monoclonal antibodies (Clones MS-201/MS26 (Fresenius-Kabi); ESD-1 (Diaclon); Blend MS-201/MS26 (Fresenius-Kabi); P3×61, P3×290, P3×35, P3×61 and P3×21223 B10 (Grifols); RUM-1/ESD1-M (Grifols); D175+D415 (Immucor), NaTH119+LOR-15C9 (Imunoscan). The phenotype C, c, E, e, Cw was performed by Gel Card (DG Gel RH+Kell, Grifols). Screening was performed to detect the most prevalent RHD alelles variants in Asians: RHD*Del1 (c.1227G>A), RHD*DVI.3 (D-CE(3-6)-D); RHD*01.W11 (c.885G>T) and RHD*01.W15 (c.845G>A) according to PCR-Multiplex, PCR-RFLP protocols and Sanger Sequencing method. RHD zygosity genotyping was performed by AS-PCR protocol. The RhD antigen density of the sample was determined by Flow cytometry (Navius EX, Beckman Coulter) using monoclonal IgG anti-D (Clone MS26) and the secondary antibody was goat anti-human IgG, Fab-fragment, FITC-conjugated (Life Technologies). Results: The pregnant women was phenotyped as C+c-E-e+Cw-. Blood sample showed inconsistent hemagglutination reactions (negative/weak/2+) with the anti-D panel. Genomic analyzes defined a single nucleotide change (845G>A) in the exon 6, leading to the amino acid change Gly282Asp located between transmembranous and exofacial RhD protein that is associated with RHD*weak D type 15 phenotype. The low D density found (323 sites/cell) and the hemizigozity status could explain why RHD*01.W15 was mistyped as RhD-negative by some anti-D serum including identification antibody test. Discussion: RHD allele that encodes a protein with very weak expression of the D antigen are rare in asian population. These variations in the RhD antigen structure result either in a D partial, Del and weak D phenotype. Although the frequency of the RHD*01.W15 genotype is relatively common in Japanese populations (16%), this is the first case found in a Japanese pregnant woman detected in our service. Accurate identification of RhD Variants is of great significance for a safe and effective clinical measures to prevent Hemolytic Disease of Newborn (HDN) for women childbearing age. Conclusion: The identification of there rare individuals associated with unusual phenotypes is very important, both for Transfusion purposes and to prevent HDN.

Objetivos: Descrever o uso da plataforma Epvix na busca, seleção e realização da prova cruzada virtual de plaquetas HLA compatíveis para pacientes com Refratariedade Transfusional Plaquetária Imunes (RPI), assim como demostrar a eficácia da transfusão dessas plaquetas selecionadas. Material e métodos: Este estudo foi realizado com uma coorte prospectiva de pacientes hematológicos diagnosticados com RPI avaliados durante o período de 2018 a 2022 em hospital terciário de São Paulo. O banco de doadores (1052 indivíduos) com tipagem HLA-classe I já conhecida foi previamente incluído na plataforma Epvix. O Painel de Reatividade de Anticorpos (PRA) de cada paciente aceito no estudo foi inserido na plataforma e de forma automatizada realizada a busca, seleção e prova cruzada virtual para identificar doadores HLA compatíveis. As transfusões conduzidas com plaquetaféreses provenientes de doadores HLA compatíveis foram monitoradas através do CCI de 24 horas. Resultados: Um total de 6 pacientes foram incluídos neste estudo. Todos tinham doenças hematológicas (3 SMD; 1 LLA-B; 1 LMA; 1 Anemia Aplasica), sendo 4 mulheres, 2 homens e a média de idade foi de 61 anos (intervalo: min=44, max=82). Em todos os pacientes foram detectados anticorpos HLA como causas imunes, e quatro pacientes apresentaram também causas não imunes durante a avaliação da refratariedade plaquetária. Um alto percentual de aloimunização foi detectado em todos os pacientes estudados (média PRA: 85,7%). A prova cruzada virtual da plataforma Epvix identificou pelo menos um doador de plaquetas HLA compatível para todos os pacientes. Trinta doadores diferentes puderam agendar e realizar doação de plaquetas. A média de eplets incompatíveis entre paciente e doador foi de 12,7 (min=0, max=68). A contagem média de CCI em 24 horas foi de 9882 (min=0, max=25200). Todas as transfusões de plaquetas atingiram uma contagem CCI satisfatória, exceto por dois eventos de transfusão. Em um caso, o doador HLA-casse I idêntico foi selecionado e o CCI foi 0, em outro caso, o CCI foi 1500, não sendo considerado satisfatório. A presença de causas não imunes descritas nesses dois casos (febre, transplante de medula óssea e quimioterapia) pode ser o motivo pelo qual a CCI não foi satisfatório como esperado. Discussão: O manejo dos pacientes com refratariedade transfusional plaquetária exige adequada logística e agilidade para uma eficiente abordagem transfusional. Em especial, nos casos de RPI, estratégias de seleção de doador compatível são fundamentais. O EpViX é um aplicativo gratuito alocado na web e sua interface foi desenvolvida com base nas melhores práticas de interface humano-computador. Este aplicativo utiliza o algoritmo HLAMatchmaker para a geração de relatórios de histocompatibilidade, e já foi validado como ferramenta para a prova cruzada virtual de plaquetas e a automação do programa agrega agilidade na busca de doadores compatíveis. O presente estudo demonstrou a eficiência da prova cruzada virtual realizada pela plataforma Epvix uma vez que incremento transfusional plaquetário foi atingido na maioria dos casos. Contudo, em determinados casos, a prova cruzada real ainda se fará necessária pois a plataforma não contempla o polimorfismo HPA. Conclusão: A plataforma Epvix é uma ferramenta inovadora e eficiente na busca e seleção de doadores HLA compatíveis para os casos com refratariedade transfusional plaquetária imune.

Introdução: O Concentrado de Plaquetas (CP) é obtido do sangue total após duas centrifugações. No método de processamento de Plasma Rico em Plaquetas (PRP), o CP é obtido após a segunda centrifugação, mais pesada para sedimentação das plaquetas. Antes de ser armazenado no agitador de plaquetas, o CP deve ficar no mínimo 60 minutos em repouso para desfazer parcialmente os agregados plaquetários, alguns serviços recomendam prazo até maior, de 120 minutos. É logisticamente preferível deixar um CP apenas 1 hora em repouso antes de colocar no agitador contínuo, principalmente quando o processamento do ST ocorre no final do dia. Objetivo: Avaliar se existe diferença na contagem plaquetária do CP quando comparamos o descanso de 60 minutos com o de 120 minutos antes do armazenamento em agitação contínua. Materiais e métodos: O estudo foi conduzido em um serviço de Hemoterapia em São Paulo, SP. Foi realizado no período de junho a julho/2023. Foram analisadas bolsas de Sangue Total (ST). Feito contagem de plaquetas do ST em triplicata. Unidades de ST eram selecionadas aleatoriamente, agrupados por volume semelhantes e divididos entre os dois grupos para evitar diferenças dependentes do doador. Após a coleta, o ST fica em repouso por 60 minutos antes da centrifugação. No nosso serviço, o CP é obtido pelo método de processamento PRP. Após a segunda centrifugação, o plasma sobrenadante é transferido para uma bolsa satélite, utilizando o extrator manual. Antes de ser armazenado no agitador contínuo, 60 CP ficaram em repouso por 60 minutos (R60min) e 60 CP ficaram por 120 minutos (R120min). Foi feito uma contagem de plaquetas no produto em triplicata no 1º dia de armazenamento. O teste t-Student não pareado foi utilizado para calcular a diferença entre os grupos. Resultados: Foram analisadas 120 bolsas de ST, com volume médio de 460 mL (R60min) e 466 mL (R120min). A contagem de plaquetas média do ST foi 215 ×103/mm3 no R60min (143‒333) e 214 ×103/mm3 no R120min (157‒346), não houve diferença entre os grupos (p=0,949). 60 CP ficaram em repouso por 60 minutos, apresentando contagem plaquetária média de 8,33 ×1010 (4,55‒16,80). 60 CP ficaram em repouso por 120 minutos, com contagem plaquetária média de 8,39 ×1010 (5,02‒16,77). Não houve diferença estatística entre os grupos (p=0,907). Conclusão: Não houve diferença na contagem plaquetária entre os concentrados de plaquetas randômicas que ficaram em repouso por 60 ou 120 minutos. Esses achados confirmam que manter o CP em repouso por 60 minutos também é eficaz, permitindo uma contagem de plaquetas adequada no CP. Essa redução no tempo leva a uma otimização do processo no banco de sangue.

Introdução: A participação dos neutrófilos como mediadores de infecção, trombose e neoplasia tem sido descrita em vários cenários. Além de seu papel na imunidade inata, sabe-se que os neutrófilos contribuem para ativação de inflamação, coagulação, imunossupressão através da formação de redes extracelulares de neutrófilos (NETs -neutrophil extracellular traps) em resposta a estímulos antigênicos e de ácidos nucleicos. Entretanto, pouco se sabe sobre o papel da NETose no cenário do transplante hepático, situação em que há um estado inflamatório persistente, exacerbado por vários eventos, inclusive transfusão de hemocomponentes. Ainda, sabe-se que os pacientes hepatopatas são bastante complexos do ponto de vista hemostático e a identificação de possíveis marcadores preditores de transfusão e hemoderivados potencialmente auxiliaria no manejo clínico destes pacientes. O objetivo deste estudo foi avaliar o papel de NETs como preditores de transfusão de hemocomponentes, bem como estabelecer uma correlação entre NETs e complicações em transplante hepático. Materiais e métodos: Foram quantificados DNA livre pela técnica de PicoGreen (dsDNAAssay Kit (ThermoFisherScientific, EUA) e H3 citrulinado por ELISA (clone 11D3, ELISA, Cayman), marcadores de remanescentes de NETs, no pré-operatório, intraoperatório e pós-operatório de 93 pacientes submetidos a transplante hepático em um hospital terciário em São Paulo-SP. Os pacientes foram seguidos desde a internação até a alta hospitalar e foram avaliados os seguintes desfechos clínicos: transfusão de hemocomponentes, uso de hemoderivados e antifibrinolíticos, rejeição, trombose, infecção e disfunção de órgãos. Resultados: Observamos uma ascensão dos níveis de H3 citrulinado e DNA livre do pré-operatório para o intraoperatório, com posterior declínio pré-alta hospitalar, de maneira estatisticamente significativa, (p < 0.0001), confirmando a ocorrência de NETOse exacerbada no intraoperatório do transplante hepático. Ainda, demonstramos que a liberação de NETs no intraoperatório foi preditora de óbito intra-hospitalar (OR = 1,168, CI 95% = 1,021-1,336, p = 0,024). Não se observou nenhuma associação entre NETose e transfusão, nem uso de hemoderivados. Entretanto, observou-se que a liberação de H3 citrulinado foi associada a menor uso de ácido tranexâmico durante o transplante (OR:0,824, CI95%0,705-0,964, p:0,016). Não foram observadas outras associações entre NETose no intraoperatório e demais desfechos clínicos negativos (rejeição, trombose, infecção ou disfunção de órgãos). Conclusão: Não foi possível estabelecer correlação entre NETose e necessidades transfusionais nos pacientes submetidos a transplante hepático. Entretanto, o presente estudo evidenciou uma associação significativa entre NETose e óbito intra-hospitalar. Dada a relevância da associação entre NETose e óbito e o papel central dos NETs na inflamação do transplante hepático, consideramos que NETs podem ser potenciais biomarcadores de inflamação nestes pacientes. Ainda, o desenvolvimento de terapêuticas focando na inibição de NETose poderia ser uma estratégia plausível para redução de efeitos deletérios da inflamação exacerbada inerente ao transplante. Mais estudos são necessários a fim de confirmar esta hipótese.

Background/case studies: Cromer blood group system consists of 12 high-prevalence and three low-prevalence antigens. The molecular basis for the antigens is known, and the majority is the product of a single nucleotide change in the DAF gene and has been localized to one of the four complement control protein domains on the DAF protein. Antibodies to Cromer antigens are rarely encountered. This case reports a 72 year-oldAfrican descendent Brazilian woman with endometrioid adenocarcionoma had an antibody reactive with all red blood cells (RBCs) and cord RBCs. The direct antiglobulin test (DAT) and autocontrol were negative. She had 2 previous pregnancies and a previous transfusion 20 years ago. Siblings were recruited and a familiar study was performed. Serological and molecular studies were carried out to define the patient‘s phenotype and the antibody specificity. Methods: Serological investigation was performed by hemagglutination in gel cards.Antibody identification was performed in the patient's serum with untreated and treated RBCs with papain, trypsin, α-chymotrypsin and 200 mM dithiothreitol (DTT).Antigen typing was performed for the most common antigens with commercial reagents and for high frequency antigens with sera from our collection coming from SCARF. Genomic DNA was used to amplify and sequence CROM exons. Results: The patient‘s serum reacted with all panel cellsincluding phenotypically similar RBCs. Only the autologous control was non-reactive. Crossmatching was negative with RBCs of 2 siblings and positive with the other two. Antibody titration showed a titre of 64.The antigen was sensitive to papain, typsin and α-chymotrypsin-treatment but was resistant to 200 mM DTTwhich suggested the presence of a high-frequency antibody to an antigen of the Cromer system. Sequencing analysis of CROM revealed the patient and her two sisters with negative crossmatching were homozygous for the molecular change c.679G > Cin exon 6, which predict the Cr(a-) phenotype. DNA sequencing of the two other siblings with positive crossmatching showed this molecular change in heterozygous.The antibody was determined to be of anti-Cra specificity and other underlying antibodies were ruled out through adsorption and elution with R1R1, Jk(b-) and Fy(b-) allogeneic RBCs. Conclusion: This study reported for the first time a rare case of anti-Cra in a Brazilian family. Due to the complexity of the Cromer system and the scarcity of anti-Cra and Cr(a-) RBCs, molecular analysis was essential for the conclusion of the case. Anti-Cra is rarely encountered and has already been related to moderate transfusion reaction but its clinical significance can be variable. Although no transfusions were requiredat this time, the family study was essential to find compatible donors.

Introdução: A transfusão de sangue é uma terapia vital no tratamento e prevenção de algumas complicações das síndromes mielodisplásicas (SMD). No entanto, apesar das transfusões de concentrados de hemácias melhorarem significativamente a qualidade de vida nesta população de pacientes, sua utilização é limitada devido à frequente ocorrência de aloimunização, uma complicação grave em pacientes com SMD que pode resultar em Reação Transfusional Hemolítica Tardia (RTH). Entretanto, nem todos os pacientes desenvolvem anticorpos após exposição à transfusão de hemácias. A hipótese é de que os pacientes aloimunizados representem um ou mais grupos geneticamente distintos dotados de suscetibilidade aumentada à sensibilização aos antígenos eritrocitários. Estudos têm mostrado que o processo de aloimunização aos antígenos eritrocitários pode ser modulado a cada passo por fatores adquiridos e/ou genéticos, embora a importância destes fatores na aloimunização de pacientes mielodisplásicos não tenha sido ainda completamente elucidada. Testes pré-transfusionais que poderiam auxiliar a predizer antecipadamente quais pacientes irão desenvolver aloanticorpos eritrocitários são necessários. Objetivos: Esse estudo teve como objetivo identificar marcadores genéticos de risco para a aloimunização eritrocitária. Métodos: Foi realizada a genotipagem de polimorfismos de nucleotídeo único em genes de citocinas em 117 pacientes, sendo 30 pacientes não politransfundidos e não aloimunizados, 59 pacientes politransfundidos e não aloimunizados e 28 pacientes politransfundidos e aloimunizados. Foram realizadas genotipagens de polimorfismos das citocinas IL-1B, IL-4 intron 3 VNTR, IL4-590, IL-6, IL-10 e IL17-A, IL17-F e HLA classe II, além de genotipagem para alelos de grupos sanguíneos eritrocitários, onde os resultados foram comparados entre grupos e controle. Resultados: Em relação ao perfil transfusional e aloimunização, segregamos os grupos em não politransfundidos e não aloimunizados (23,9%), politransfundidos e não aloimunizados (50,4%) e politransfundidos, aloimunizados (25,6%), sendo que os principais aloanticorpos identificados foram contra antígenos Rh e K. Foi possível estabelecer uma correlação significativa entre IL17A–197G/A e aloimunização eritrocitária. O alelo A e genótipo AA foram significativamente mais frequentes em PA em relação ao grupo PNA (alelo A, 27,1% vs. 46,4%, p = 0,012; OR = 2,3; 95% IC 1,1–4,9; genótipo AA, 6,8% vs. 25%, p = 0,041; OR = 6,2; 95% IC 1,3–30,8). Além disso, uma associação significativa de aloimunização para antígenos Rh com o alelo IL17-A e genótipo AA também foi identificada no grupo PA (alelo A, 27,1% vs. 45%, p = 0,036; OR = 2,5; 95% IC 1,1–5,7; genótipo AA, 6,8% vs. 30%, p = 0,042; OR = 7,9; 95% IC 1,5–42,3). Conclusões: O presente trabalho não mostrou associação em relação aos alelos HLA-DRB1 para risco ou proteção de aloimunização eritrocitária; entretanto, o SNP IL17A – 197G/A foi significativamente associado ao risco de aloimunização de hemácias em pacientes brasileiros com SMD.

Introdução: O controle de estoque de hemocomponentes é um desafio para os bancos de sangue. Consiste na manutenção de um estoque adequado, sem escassez e minimizando descartes, que geram custos desnecessários aos centros produtores. Dentre os hemocomponentes para fins transfusionais, o plasma fresco congelado (PFC) é um produto de indicação mais restrita. Embora possa ser substituído por hemoderivados em pacientes com determinadas situações clínicas, ainda é necessário mantê-lo em estoque, principalmente nos casos de pacientes com púrpura trombocitopênica trombótica e em pacientes submetidos a transfusões maciça. Segundo dados da ANVISA de 2018, apenas 10% das transfusões no Brasil são relacionadas a PFC, porém sua produção envolve um alto custo com equipamentos e mão de obra especializada. Objetivo: Estabelecer um modelo de dimensionamento de estoque de PFC por tipo sanguíneo afim de evitar escassez e produção excessiva. Material e métodos: O estudo foi conduzido no Departamento de Hemoterapia e Terapia Celular do Hospital Israelita Albert Einstein. Realizada uma análise retrospectiva do consumo de 7752 PFCs entre o período de janeiro de 2017 a dezembro de 2019. Para o cálculo do novo estoque foi utilizado limite de normalidade de 95%, 99% e 99,9% de acordo com o grupo sanguíneo. Com isso, avaliamos a capacidade de atender a demanda no ano de 2021 e qual seria a redução do estoque em relação ao nosso estoque atual. Resultados: A distribuição do consumo por grupo sanguíneo foi 38,8% A, 15% B, 8% AB e 38,2% O. A média mensal de PFCs utilizados no período analisado foi de 215,3 unidades (62 – 654). Para o grupo sanguíneo A, foi utilizado o limite de normalidade de 99% para o estoque mínimo e de 99,9% para o estoque máximo, 263 e 322 unidades, respectivamente. Já para os tipos B e O, foram utilizados os limites de normalidade de 95% para o estoque mínimo e de 99% para o estoque máximo. Os estoques mínimo e máximo foram de 147 e 195 para tipo B e 246 e 314 para O. Para o grupo sanguíneo AB, apenas o estoque mínimo foi calculado com limite de normalidade de 99,9%, 87 unidades. Discussão: Optamos por não estabelecer um limite máximo para o estoque do grupo sanguíneo AB por ser o tipo universal. Para o estoque de A, optamos por definir limite mínimo e máximo mais alto do que do estoque de B e O, pois é o tipo sanguíneo de plasma mais transfundido no nosso serviço, e é compatível com as hemáceas do 2 tipo mais transfundido. Com base no histórico de consumo dos anos de 2017 a 2019 e pensando apenas em transfusões isogrupo, com os novos limites de estoque, teríamos plasma suficiente para atender a demanda transfusional do tipo AB, em 99,9% dos meses, para o tipo A em 99 a 99,9% dos meses e para tipo B e O em 95 a 99% dos meses. O consumo médio de plasma nos 7 primeiros meses do ano de 2021 foi de 174 unidades (46 – 406). Com o novo estoque de PFC seria possível suprir a demanda mensal. Excluindo o tipo sanguíneo AB e utilizando os limites máximos dos outros grupos, o novo estoque teria 831 unidades de plasma, uma redução de 34% em comparação com nossa média de estoque atual, de 1260 unidades. Conclusão: Uma medida simples, baseada em limites de normalidades de uma análise retrospectiva de 3 anos, foi suficiente para estabelecer limites de produção de PFC, reduzindo custos desnecessários associados ao congelamento, armazenamento e manutenção de estoques superdimensionados, associado a manutenção de um estoque suficiente para atender a demanda.

Introdução: A participação de NETs (neutrophil extracellular traps- NETs- redes extracelulares de neutrófilos) na fisiopatogenia da COVID19 já foi descrita, especialmente nos casos graves de infecção por SARSCoV2, em que se destacam a inflamação sistêmica e imunotrombose culminando com injúria tecidual e insuficiência respiratória. Sabe-se que o estado protrombótico já nas fases iniciais da COVID19 deve-se em parte à formação de NETs em resposta à inflamação sistêmica desencadeada pela infecção viral Avaliamos 55 casos de pacientes com diagnóstico de pneumonia grave por COVID19 e mensuramos marcadores de NETose à admissão hospitalar e alta, a fim de identificar associações entre NETs e melhora clínica. Materiais e métodos: Avaliamos marcadores de NETs (H3 citrulinado por ELISA (clone 11D3, ELISA, Cayman e DNA livre pela técnica de PicoGreen (dsDNAAssay Kit (ThermoFisherScientific, EUA) no D0 (admissão no protocolo),D5 e alta em 55 pacientes com diagnóstico de pneumonia grave por SARSCoV2 (de acordo com os critérios da Organização Mundial de Saúde, definida por saturação em ar ambiente < ou igual a 93%, e/ou frequência respiratória igual ou superior a 30), admitidos à Unidade de Terapia Intensiva (UTI) em um hospital terciário em São Paulo, SP. O acompanhamento desses pacientes foi feito desde a admissão até a alta, a fim de correlacionar NETs no D0 (dia de inclusão no protocolo) e melhora clínica (definida por redução de 2 ou mais pontos na escala ordinal de gravidade da Organização Mundial de Saúde) desde a admissão até o D14 de internação hospitalar. Para as análises simples, foram realizados testes de MannWhitney e t de student e para as análises múltiplas, foram realizadas regressões logísticas. Resultados: Observamos que os níveis de H3 citrulinado sofrem uma ascensão do D0 para o D5, com posterior queda no momento alta, de maneira estatisticamente significativa (p = 0,025); evidenciando que a formação de NETs e sua queda acompanham o curso clínico da COVID19. Nas análises univariadas, observou-se associação significativa entre níveis de H3 citrulinado no D0 e melhora clínica (p=0.03), sendo que pacientes com melhora clínica têm níveis mais baixos de H3 citrulinado do que pacientes sem melhora clínica. Outras variáveis preditoras de melhora clínica nesta análise foram idade (p = 0.014) e escore SOFA (Sequential Organ Failure Assessment) no D0 (p < 0.001). Entretanto, nas análises múltiplas, apenas o score de SOFA (OR = 0,2, IC95%:0,05-0,84, p = 0.028) manteve esta associação. Discussão e conclusão: A associação entre NETs e fisiopatologia da COVID19 já foi descrita em alguns cenários, bem como correlacionados os marcadores de NETose à gravidade da doença. Os achados do presente estudo sugerem que a formação de NETs acompanha o curso clínico da COVID19. A intensidade da NETose no início da doença parece ser um parâmetro preditor de melhora clínica, porém, são necessários mais estudos para afirmar esta hipótese.

Introdução: A transfusão de plasma convalescente tem sido utilizada como terapêutica alternativa no tratamento de COVID19 nos últimos meses. Avaliamos o impacto dos anticorpos neutralizantes produzidos pelos pacientes e dos anticorpos presentes nas unidades transfundidas na redução da carga viral em pacientes em tratamento hospitalar de COVID19. Materiais e métodos: Foram avaliados consecutivamente 29 pacientes admitidos para tratamento hospitalar de COVID19 em um único centro. Doses de 300 a 600 ml de plasma convalescente foram administradas ao longo de 2 dias. Foram coletados swabs nasais a cada 48 h a partir do D0 (dia de transfusão de plasma convalescente) até a alta hospitalar, a fim de determinar a carga viral por digital droplet PCR (ddPCR) dos alvos N1 e N2 do gene N (nucleocapsídeo) para análise de redução de carga viral, sendo considerado o número de cópias virais por 1000 células presente na amostra. Mensuramos os títulos de anticorpos neutralizantes (cytopathic effect-based virus neutralization test -SARS-CoV-2 GenBank MT126808.1) dos pacientes (NAbsP) antes da transfusão (D0) e títulos de anticorpos neutralizantes das unidades de plasma transfundidas (NAbsT). Para análise de associação entre NAbsP e redução de carga viral, os pacientes foram divididos em dois grupos de acordo com o status de NAbsP no D0: título de NabsP inferior a 80 e título de NabsP igual ou superior a 80. Para esta análise, foi utilizado o teste de Mann-Whitney . Para verificar a associação entre NAbsT e redução de carga viral, os pacientes foram divididos em três grupos: aqueles que receberam transfusão de plasma convalescente com título de NAbsT até 160, título de NAbsT entre 160-640 e NAbsT superior a 640. Para esta análise, foi utilizado o teste de Kruskall-Wallis. Resultados: Pacientes com baixos títulos de neutralizantes à admissão (NAbsP inferior a 80) apresentaram redução de carga viral significativamente maior (p=0,009) que pacientes com NAbsP igual ou superior a 80. Com relação ao impacto da transfusão de plasma, observou-se que quanto maior o título de anticorpos neutralizantes transfundidos maior foi a redução da carga viral; porém, tal achado não apresentou significância estatística (p = 0,528). Discussão: O combate e eliminação da viremia através dos anticorpos neutralizantes presentes no plasma convalescente compreende uma das justificativas da sua aplicação como terapia alternativa para COVID19. Contudo, estudos prévios demonstraram resultados contraditórios em relação ao seu impacto no clearance viral. Na presente casuística, pacientes com baixos títulos de anticorpos neutralizantes apresentaram maior redução de carga viral após a transfusão de plasma convalescente do que pacientes com altos títulos. Pacientes que já apresentavam títulos elevados de neutralizantes parecem não se beneficiar da transfusão de plasma no que se refere à redução de carga viral. A estratificação dos pacientes de acordo com os níveis basais de anticorpos neutralizantes parece ser um ponto importante a ser discutido no tratamento de COVID19 com plasma convalescente e fornece uma explicação plausível para os resultados controversos previamente observados.

Introdução: Sabe-se que a infecção por SARSCOV2 é notavelmente marcada por fenômenos inflamatórios exacerbados e envolvimento tanto da imunidade inata quanto adaptativa, por meio de respostas imunes complexas. Um dos mecanismos descritos na fisiopatogenia da COVID19 é a formação de NETs (neutrophil extracelullar traps), redes extracelulares de neutrófilos, responsáveis em parte pela injúria tecidual e microtrombos que acometem os pacientes infectados com formas graves de COVID19. A transfusão de plasma convalescente tem sido utilizada como terapêutica alternativa no tratamento da COVID19. Entende-se que o benefício desta terapêutica seria baseado na presença de anticorpos neutralizantes, que seriam capazes de bloquear a progressão da infecção viral. O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto na formação de marcadores de NETs em pacientes com formas graves de COVID 19 que receberam transfusão de plasma convalescente. Materiais e métodos: Foram avaliados 55 pacientes com pneumonia grave por COVID19 de acordo com critérios da Organização Mundial de Saúde, admitidos para tratamento em Unidades de Terapia intensiva em um hospital terciário em São Paulo-SP. Foram coletadas amostras dos pacientes na admissão do estudo (D0= dia da transfusão de plasma convalescente), D5 e na alta hospitalar. Foram mensurados os marcadores de NETs (H3 citrulinado por ELISA (clone 11D3, ELISA, Cayman) e DNA livre pela técnica de PicoGreen (dsDNAAssay Kit (ThermoFisherScientific, EUA) no D0, D5 e alta dos pacientes. As transfusões de plasma convalescente ocorreram entre os dias D0 e D2, em doses de 300 a 600 ml e foram transfundidos plasmas com títulos de anticorpos neutralizantes (NAbsT) superiores a 160, mensurados pela técnica de CPE-VNT (Cytopathic effect-based virus neutralization test CPE-VNT -SARS-CoV-2 GenBank MT126808.1). Foram também mensurados os títulos de anticorpos neutralizantes dos pacientes (NabsP)antes da transfusão de plasma no D0. Os testes realizados para verificar possíveis associações entre títulos de anticorpos transfundidos, características dos pacientes e variação dos marcadores de NETs no D0 e D5 foram correlações de Spearman. Resultados: Verificamos um aumento nos níveis de H3 citrulinado no D0 para o D5 e posterior queda do D5 para a alta, de maneira estatisticamente significativa (p = 0,025). O mesmo ocorreu com os níveis de DNA livre, porém sem significância estatística (p = 0,065). Ao analisar os fatores envolvidos na expressão dos marcadores de NETose do D0 para o D5, não se estabeleceu nenhuma associação entre níveis de anticorpos neutralizantes transfundidos (NabsT) (p=0,714) nem níveis basais de anticorpos produzidos pelos próprios pacientes (NabsP) antes da transfusão do plasma convalescente. Ainda, não encontramos quaisquer associações entre demais variáveis analisadas (idade, peso, escore SOFA Severity Organ Failure Assessment, sexo, presença de comorbidades e início de sintomas até a transfusão) e variação de marcadores de NETose nos pacientes incluídos no estudo. Conclusão e discussão: Nesta análise, a transfusão de plasma convalescente não teve nenhum impacto nos marcadores de NETose de pacientes com formas graves de COVID que receberam transfusão de plasma convalescente. Não se observou nenhuma associação entre anticorpos neutralizantes transfundidos e expressão de NETs entre D0 e D5. Neste estudo, a expressão de NETs durante o curso da doença variou de maneira independente de todas as variáveis estudadas.

Large-scale poultry slaughter is a highly automated process, which makes cross-contamination possible during the process due to failures in the cleaning and maintenance of automatic equipment, line speed, among other control parameters. To this end, using organic acids to decontaminate poultry meat is a unique strategy for reducing foodborne illnesses. Given the above, this work investigated the application of peracetic acid (PAA) in chicken breast and thigh cuts, to (a) evaluate the effectiveness of PAA as an antimicrobial against Enterobacteriaceae and aerobic mesophilic count (b) evaluate the impact of PAA on the color, texture and cooking loss of skinless chicken breast and chicken thighs with skin. Through the Central Composite Rotational Design (CCRD) with 11 trials and 3 replicates of the central point, the best conditions variable's concentration and time of application of PAA in the cuts were determined. In cuts treated with 1500 PAA solution, a reduction of 2.90 for Enterobacteriaceae in chicken breast was possible with conditions in the central point region and a reduction of 3.65 for Enterobacteriaceae in chicken thigh, when concentrations above 1800 ppm were applied. Peracetic acid (PAA) did not influence the physicochemical characteristics of chicken meat, since it did not change the appearance of fresh meat evaluated by objective analyses (color, texture, and cooking loss), which could impact consumer preference and acceptability., Competing Interests: DISCLOSURES The authors declare that they have no known competing financial interests or personal relationships that could have appeared to influence the work reported in this paper, (Copyright © 2024 The Authors. Published by Elsevier Inc. All rights reserved.)

The most significant occurrence of food-borne diseases is due to Campylobacter and Salmonella contamination from chicken meat, and for this reason, strict regulations about strategies to improve the control of food pathogens are imposed by food safety authorities. Despite the efforts of poultry industry since the beginning of risk analysis and critical control point to reduce the burden of food-borne illness, technological barriers along the way are increasingly necessary to ensure safe food. The aim of this review was to carry out a scientific approach to the influence of peracetic acid (PAA) as an antimicrobial and its toxicological safety, in particular the stabilizer used in the formulation of PAA, 1-hydroxyethylidene 1,1-diphosphonic acid (HEDP), suggesting the possibility of researching the residual HEDP in meat, which would allow the approval of the PAA by the health authorities of several countries that still restrict it. This review also aims to ascertain the effectiveness of PAA, in different cuts and carcasses, by different application methods, comparing the effectiveness of this antimicrobial with other antimicrobials, and its exclusive or combined use, for the decontamination of poultry carcasses and raw parts. The literature results support the popularity of PAA as an effective intervention against pathogenic bacteria during poultry processing., (Copyright © 2023 The Authors. Published by Elsevier Inc. All rights reserved.)

This study aims to determine the background values for metals in the Suape estuarine system, Brazil, and to identify contamination caused by anthropogenic sources. Two cores were sampled. Sedimentation rates and metal content were analysed. The Al-normalized method was used to infer the background values, and to identify anthropic influences, the enrichment and contamination factors and the geoaccumulation index were employed. The results revealed an Mn, Ni, Zn, Ga, Pb, Sr, Ti, Mg, V and Fe content (mg kg -1 ) of 101.8, 5.7, 24.4, 8.3, 14.5, 41.9, 2744.6, 4581, 14.9 and ~ 1% respectively. After the installation of the Suape port, an increase in metal contents and in fluxes were recorded. Increases in Zn, Ga, V and Pb are supported by the indexes showing moderate contamination, enrichment and suggest an area moderately polluted. The other studied metals do not reflect an anthropogenic impact, with low values of contamination, enrichment factors and geoaccumulation indexes., (Copyright © 2020 Elsevier Ltd. All rights reserved.)

Thyroid carcinomas are the most common endocrine malignancy. Inconclusive results for the analysis of malignancies are an issue in the diagnosis of thyroid carcinomas; 20% of thyroid cancer diagnoses are indeterminate or suspicious, resulting in a surgical procedure without immediate need. The use of Raman spectroscopy may help improve the diagnosis of thyroid carcinoma. In this study, 30 thyroid samples, including normal thyroid, goiter and thyroid cancer, were analyzed by confocal Raman spectroscopy. Principal component analysis (PCA), linear discriminant analysis (LDA) with cross validation and binary logistic regression (BLR) analysis were applied to discriminate among tissues. Significant discrimination was observed, with a consistent rate of concordant pairs of 89.2% for normal thyroid versus cancer, 85.7% for goiter versus cancer and 80.6% for normal thyroid versus goiter using just the amide III region. Raman spectroscopy was thus proven to be an important and fast tool for the diagnosis of thyroid tissues. The spectral region of 1200-1400cm -1 discriminated normal versus goiter tissues despite the great similarity of these tissues., (Copyright © 2016 Elsevier B.V. All rights reserved.)

Systemic lupus erythematosus (SLE) is an autoimmune disease that is characterized by fatigue; however, little research has been performed to identify non-pharmacological strategies, such as physical exercise, that can be employed in the prevention and treatment of fatigue in patients with SLE. Moreover, it is not clear whether physical fitness (defined here as cardiovascular fitness and muscle strength) and functional capacities are related to SLE-associated fatigue. Here, we review the studies, mechanisms and results that relate to SLE-associated fatigue. The main findings indicate that SLE patients have lower cardiovascular capacity than healthy subjects. Physical fitness, muscle strength and functional capacity are also lower in patients with SLE than in healthy individuals. The effects of exercise programs in reducing symptoms of fatigue in SLE patients remain unclear., (Copyright © 2011 Elsevier B.V. All rights reserved.)

Two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) was used to better understand alterations in renal metabolism induced by fluoride (F). Three groups of weanling male Wistar rats were treated with drinking water containing 0 (control), 5, or 50 ppm F for 60 days (n=6/group). Kidneys were collected for proteomic and histological (HE) analysis. After protein isolation, renal proteome profiles were examined using 2-DE and Colloidal Coomassie Blue staining. Protein spots with a 2-fold significant difference as detected by quantitative intensity analysis (Image Master Platinum software) and t-test (p<0.05) were excised and analyzed by MALDI-TOF MS (matrix assisted laser desorption ionization-time-of-flight mass spectrometry). The histological analysis revealed no damage in kidneys induced by F, except for a vascular congestion in the 50 ppm F group. Between control vs 50 ppm F, and control vs 5 ppm F groups, 12 and 6 differentially expressed proteins were detected, respectively. Six proteins, mainly related with metabolism, detoxification and housekeeping, were successfully identified. At the high F group, pyruvate carboxylase, a protein involved in the formation of oxaloacetate was found to be downregulated, while enoyl coenzyme A hydratase, involved in fatty acids oxidation, was found to be upregulated. Thus, proteomic analysis can provide new insights into the alterations in renal metabolism after F exposure, even in low doses.