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Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-07Bitstream added on 2014-06-13T19:40:32Z : No. of bitstreams: 1 silva_ncc_dr_botib.pdf: 675325 bytes, checksum: 770804101b6bf91187e2941b56d767bb (MD5) Staphylococcus sp é agente comum da mastite bovina, causando grandes perdas econômicas na pecuária brasileira. Esse micro-organismo possui fatores de virulência bastante conhecidos como a produção de hemolisinas, leucotoxinas e superantígenos como a toxina do síndrome do choque tóxico e enterotoxinas. Além disso, várias espécies de Staphylococcus podem adquirir genes de resistência aos antibióticos β lactâmicos. O objetivo do estudo foi caracterizar molecularmente isolados de Staphylococcus sp provenientes de leite de vacas com mastite clinica e subclínica de várias regiões do estado de São Paulo. Foram realizadas coletas de leite de vacas com mastite clinica e subclínica de diferentes fazendas no estado de São Paulo e realizados testes fenótipicos de resistência a antimicrobianos e de virulência (Toxina de Panton Valentine, sindrome do choque tóxico e toxinas esfoliativas), além de testes moleculares como Pulse Field Gel Eletrophoresis (PFGE), Multiloccus Sequence Typing (MLST) e Spa typing para comparação entre as cepas epidemiologicamente importantes e da tipagem do cromossomo cassette estafilocócico em cepas meticilina reistentes. As cepas resistentes a meticilina apresentaram amplo perfil de resistência e genes de resistência importantes e pouco relatados, sendo observados genes como fexA, lsaE, lnuB. Foram detectados dois novos spatyping (t10852 e t10856), bem como um novo alelo yqiL e um novo ST (2493). Os ECNs apresentaram resistências à maioria dos antibióticos estudados e foi observado a uma deleção no gene ermC, que codifica a resistência à eritromicina. Staphylococcus sp. is the common agent of bovine mastitis, causing big economic losses in Brazilian cattle. This micro-organism have virulence factors have been well known as the production of hemolysin, and leucotoxinas toxin superantigens such as toxic shock syndrome and enterotoxins. In addition, several Staphylococcus species can acquire antibiotic resistance genes β lactamics. The objective of the study is to characterize molecularly Staphylococcus sp. from milk of cows with subclinical mastitis in various regions of the state of São Paulo. Samples were coleted from milk of cows with subclinical and clinical mastitis from different farms in the state of São Paulo. Tests were performed phenotypic antimicrobial resistance and virulence (toxin Panton Valentine, toxic shock syndrome and exfoliative toxins), molecular tests as Eletrophoresis Pulse Field Gel Electrophoresis (PFGE), Multiloccus Sequence Typing (MLST) and spa typing for comparison between epidemiologically important strains, as well as the typing of strains in staphylococcal cassette chromosome methicillin reistentes. Methicillin-resistant strains showed broad resistance profile and resistance genes important and underreported were detected as fexA, lsaE, lnuB. Two new spatyping (t10852 and t10856) were detected as well as a new allele yqiL and a new ST (2493). The ECN showed resistance to most antibiotics and was observed the deletion in ermC gene encoding resistance to erythromycin.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-24Bitstream added on 2014-06-13T19:08:45Z : No. of bitstreams: 1 silva_ncc_me_botib.pdf: 970054 bytes, checksum: 78a595b017ac9de55a9477b66b11bc57 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A propriedade antimicrobiana das plantas pode ser explicada pela produção de compostos ativos gerados durante o metabolismo secundário. Atualmente os conhecimentos, as vezes empíricos, desta propriedade têm sido confirmados cientificamente, revelando assim o enorme potencial das plantas no controle de doenças infecciosas, enquanto verifica-se um aumento nos casos de microrganismos patogênicos resistentes aos antimicrobianos conhecidos. Extratos e óleos essenciais de plantas têm mostrado efeitos sobre desenvolvimento de microrganismos em inúmeras situações, o que sugere uso prático destes produtos. O estudo teve por objetivo comparar a ação inibidora de extratos e óleos essenciais de quatro plantas (pitanga - Eugenia uniflora, Alecrim do Campo - Baccharis dracunculifo/ia, Camomila - Matricaria chamomilla e Assa Peixe - Vernonia polyanthes) sobre linhagens de Staphylococcus aureus e Escherichia coli, através da diluição dos antimicrobianos vegetais em meio Mueller Hinton Agar e verificação dos valores de Concentração Inibitória Mínima (CIM). De maneira geral verificou-se efeito antimicrobiano para todos os produtos vegetais, com uma discreta tendência de maior susceptibilidade para a bactéria Gram positiva. Os resultados apontam os extratos de pitanga e assa peixe como os mais efetivos sobre S.aureus e E.co/i. Em relação aos óleos, os óleos de alecrim do campo e pitanga foram os mais eficientes sobre s.aureus. Para E.coli, evidenciou-se os óleos de assa peixe e alecrim do campo como os mais eficientes. Em uma segunda etapa do estudo verificou-se possíveis interações entre estes derivados vegetais com drogas antimicrobianas utilizando metodologia dos discos, adaptado de Kirby&Bauer e através da determinação de curvas de sobrevivência utilizando misturas entre as drogas convencionais e antimicrobianos vegetais. Foi verificado nos testes in vitro uma taxa... The antimicrobial property of plants can be explained by the production of active compounds generated during the secondary metabolismo Currently the knowledge, often empirical, of this property has been confirmed scientifically, thus revealing the potential of plants in the control of infectious diseases, while there is an increasing incidence of pathogens resistant to known antibiotics. Extracts and essential oils of plants have shown effects on development of micro-organisms in many situations, suggesting the practical use of these produets. The study aimed to compare the inhibitory action of extracts and essential oils of four plants (Surinam Cherry - Eugenia uniflora, Alecrim do Campo - Baccharis dracunculifolia, Chamomile - Matricaria chamomilla and Assa Peixe - Vernonia polyanthes) on strains of Staphylococcus aureus and Escherichia coli, through dilution of plant antimicrobials in Mueller Hinton Agar and the minimal inhibitory concentration (MIe) values were performed. In general it was found antimicrobial effectiveness for alI plant products, with a slight tendency for increased susceptibility to Gram positive bacteria. The results show the extracts of Surinam cherry and assa peixe as the most effective on S. aureus and E.coli. For waste oils, aleCrim do campo and Surinam cherry were the most effeetive on S. aureus. For E.coli, there was the oils of alecrim do campo and assa peixe as the most efficient. In a second step ofthe present study, possible interactions between these plant derivatives from antimicrobial drugs using discs methodology adapted from Kirby & Bauer and by determining the survival curves using mixtures of conventional drugs and antimicrobial plant. It was observed in vitro tests a higher rate of synergism between drugs and essential oils, and essential oils of alecrim do campo and assa peixe showed a higher frequency of synergism with drugs... (Complete abstract click electronic access below)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Diante da necessidade de um alimento com qualidade sanitária e nutricional objetivou-se caracterizar Staphylococcus aureus presente na produção de queijo de coalho artesanal, bem como a utilização de produtos naturais (ervas e inulina) na elaboração desse produto. Para tanto foram isoladas colônias de S. aureus presentes no leite, equipamentos e utensílios utilizados na fabricação, etapas do preparo e o produto final de dois estabelecimentos produtores, totalizando 52 amostras. Foram realizadas a identificação fenotípica das colônias, a pesquisa de genes codificadores de enterotoxinas, de resistência a antibióticos e a tipagem por agr typing, além do teste de sensibilidade a antibióticos. Foram elaborados dois queijos de coalho artesanais. Em uma produção utilizou-se a substituição de cloreto de sódio por ervas nas proporções de 30%, 22,2% e 12,5%. Também foi utilizado leite semidesnatado e integral com adição de 8% de inulina na produção do segundo produto. Nas amostras dos dois queijos fabricados foram analisados o crescimento microbiano, a composição química e parâmetros físicos durante 10 dias de armazenamento refrigerado e realizada análise sensorial. No processo produtivo do queijo de coalho observou-se elevada contaminação (50%) por S. aureus, assim como presença de gene produtor de enterotoxina sea (19%) e gene mecA (45,7%). Os genes dos grupos agr estiveram presentes no processo de produção do queijo com maior prevalência do agr III (12,7%). Quanto a resistência a antibióticos observou-se resistência múltipla a penicilina, oxacilina, eritromicina e clindamicina em 79% dos isolados. Nas formulações com ervas foi possível reduzir as contagens de estafilococos coagulase positiva (5,64 log UFC/g) até o 5º dia de armazenamento, assim como o teor de sódio e melhorar a aceitação do queijo com a adição de 12,5% de ervas. Em relação a inulina, esta não interferiu no crescimento microbiano e manteve a aceitação sensorial equivalente ao queijo de coalho sem inulina. Nos estabelecimentos onde a produção de queijo de coalho foi analisada encontraram-se cepas de S. aureus com potencial enterotoxigênico demonstrando a necessidade de uma fabricação com melhores condições de higiene. Além disso, a adição de ervas pode ser uma alternativa para melhorar a qualidade microbiológica, que aliada a utilização da inulina melhoram a qualidade nutricional do queijo de coalho. In view of the need for food with sanitary and nutritional quality, the objective was to characterize Staphylococcus aureus present in the production of artisanal “coalho” cheese, as well as the use of natural products (herbs and inulin) in the preparation of this product. For this purpose, colonies of S. aureus present in milk, equipment and utensils used in the manufacture, stages of preparation and the final product of two producing establishments were isolated, totaling 52 samples. Colon phenotypic identification, search for genes encoding enterotoxins, antibiotic resistance and typing by agr typing were performed, in addition to antibiotic sensitivity testing. Two artisanal “coalho” cheeses were made. In one production, the substitution of sodium chloride for herbs in the proportions of 30%, 22.2% and 12.5% was used. Semi-skimmed and whole milk was also used with the addition of 8% inulin in the production of the second product. In the samples of the two cheeses manufactured, microbial growth, chemical composition and physical parameters were analyzed during 10 days of cold storage and sensory analysis was performed. In the production process of “coalho” cheese, high contamination (50%) by S. aureus was observed, as well as the presence of a gene producing sea enterotoxin (19%) and a mecA gene (45.7%). The genes of the agr groups were present in the cheese production process with a higher prevalence of agr III (12.7%). Regarding antibiotic resistance, multiple resistance to penicillin, oxacillin, erythromycin and clindamycin was observed in 79% of the isolates. In herbal formulations it was possible to reduce the counts of coagulase positive staphylococci (5.64 log CFU / g) until the 5th day of storage, as well as the sodium content and improve the acceptance of the cheese with the addition of 12.5% of herbs. In relation to inulin, it didn’t interfere with microbial growth and maintained the sensory acceptance equivalent to “coalho” cheese without inulin. In establishments where the production of “coalho” cheese was analyzed, strains of S. aureus with enterotoxygenic potential were found, demonstrating the need for manufacturing with better hygiene conditions. In addition, the addition of herbs can be an alternative to improve microbiological quality, which combined with the use of inulin improves the nutritional quality of “coalho” cheese.