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A conservação dos cães Fila Brasileiro depende de projetos e ações que perpassem a caracterização genética das principais populações preservadas in vivo e sua análise comparativa, a criação e manutenção de bancos de sêmen para a preservação in vitro, além de um trabalho de conscientização para a asociação de criadores conservacionistas. Objetivou-se com este trabalho caracterizar geneticamente uma população representativa da raça e testar diferentes diluídores para congelar o sêmen de seus reprodutores. Foram realizados dois experimentos. Primeiro, 40 cães Fila Brasileiro, enquadrados no padrão Paulo Santos Cruz, foram genotipados por meio de 21 marcadores microsatélites de DNA. No segundo experimento, realizaram-se análises clínicas, andrológicas e zootécnicas, com posterior coleta de sêmen de seis reprodutores Fila Brasileiro. Foram avaliadas variáveis do sêmen fresco imediatamente após a coleta e sua congelabilidade em quatro diluídores sob um protocolo de congelação. Foram também avaliadas a motilididade dos espermatozóides bem como variáveis pós-congelação por meio do sistema CASA e por testes de morfologia e funcionais de integridade das membranas espermáticas. Houve sucesso na criopreservação possibilitando o uso da inseminação artificial (IA) com sêmen congelado na preservação e na crisção. Conclui-se que genotipar cães Fila Brasileiro- PSC pode cotribuir com a preservação e criação desse grupamento, especialmente se associadas ao uso da IA com sêmen congelado. The conservation of FIla Brasileiro dogs depends on projects and actions related to genetic characterization of the main in vivo preserved bloodlines and its comparative analyses, the creation and maintenance of banks for the in vitro preservation and an educational work directed to the association of conservationist breeders. The aim of the present study was to genetically characterize a pure Fila population and to test different extenders for the semen freezing process for the breed. Two experiments were conducted. In the first experiment 40 Fila Brasileiro. phenotipically cassified according to Paulo Santos Cruz standart, were genotyped using 21 DNA microsatellites marker (ISAG, 2008). In the second, clinical andrological examinations and semen collections of six Fila were perfomed. Characteristics of semen were evaluated immediately after sampling and also its freezability in four different extenders. Motility, as well as posthawing characteristics, were obtained by CASA and by Functional tests for the integrity of spermatic membranes (HOST, FCDA and PI) during a thermo-resistance test. Successful semen cryopreservation were obtained and allows the artificial insemination (AI) with frozen stored semen usefull for preservation programs and breeding. It can be concluded tha genotyping Fila Brasileira-PSC dogs using genetic analyses from DNA microstallite markers can help Fila preservation programs and breeding, specially associated with the use of frozen semen AI.

De todos os constituintes da gema do ovo, atribui-se às lipoproteínas de baixa densidade (LBD) o maior efeito crioprotetor durante o processo de congelamento dos espermatozóides. O objetivo deste trabalho foi testar se a LBD pode substituir a gema do ovo total no congelamento de espermatozóides caninos. Para isso, foram realizados quatro experimentos. No Experimento I foram testadas diferentes concentrações de sulfato de amônio utilizadas na extração da LBD da gema do ovo de galinha, segundo a técnica descrita por Moussa et al. (2002). No Experimento II foram testados meios diluidores, de centrifugação e de congelamento, e temperaturas de descongelamento para o uso em sistema computadorizado de congelamento de espermatozóides. No Experimento III testou-se a substituição da gema de ovo total do meio de congelamento pela LBD, nas formas natural e liofilizada, em diferentes concentrações. O último experimento avaliou a eficácia da associação da LBD aos crioprotetores glicerol, etileno glicol e dimetil formamida para o congelamento de espermatozóides canino. Pode-se concluir que a LBD extraída com 50% de sulfato de amônio, e adicionada ao meio Tris-cítrico, pode substituir a gema do ovo total na forma natural e nas concentrações de 9,64, 19,28 e 24,1mg, tanto em associação com o glicerol quanto com o etileno glicol Among the components of the egg yolk, the low-density lipoproteins (LDL) are considered to have the best cryoprotectant effect when freezing sperm cells. The objective of the present study was to evaluate if LDL can substitute the hens egg yolk on cryopreservation of canine spermatozoa. The study was divided in four experiments. The Experiment I was designed to test different concentrations of ammonium sulfate to extract LDL from hens egg yolk, according to the technique of Moussa et al. (2002). The purposes of Experiment II were to elect extenders for centrifugation and freezing which adjusted best to a particular computerized cooling rate. Additionally several thawing temperatures were tested. The substitution of hens egg yolk by different concentrations of LDL, in natural and lyophilized forms, was the aim of Experiment III. The last experiment was designed to test which association - glycerol, dimetilformamide or ethylene glycol with LDL would show better cryoprotectant effect on sperm cells. The conclusions were: 50% of ammonium sulfate concentration extracted best LDL; the substitution of hens egg yolk in Tris-citric extender, by either 9.64, 19.28 or 24.1 mg of LDL in natural form showed to be effective to cryopreserve canine sperm cells; and the association of LDL with glycerol or ethylene glycol showed best results