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SARS-CoV-2, which causes Covid-19, was first identified in Wuhan, Hubei Province, China, and is now spreading on a global scale. Diagnosis is performed by real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR) by nasopharyngeal swab collection (NFS). Due to high testing demand and low supplies of collection materials, the need for alternative methods to facilitate accurate universal Covid-19 screening and pandemic control is highlighted. Thus, this study aimed to evaluate the molecular efficiency of saliva as a means of detecting SARS-CoV-2 in health professionals and patients in the surgical circuit of Hospital Universitário Lauro Wanderley. For this, 365 collections of SNF and saliva samples were performed, which were extracted and quantified in concentration. Identification was performed by RT-qPCR. The results showed that of the 365 samples analyzed, 45 (12.3%) had detection in at least one type of sample and the majority were 27 (60%) asymptomatic. 21 (46.7%) samples were positive for SNF and saliva, while 14 (31.1%) were positive for SNF samples only and 10 (22.2%) were positive for saliva samples only. The concentration of saliva samples was 28.6 and 30.4 ± SD for 7.6 and 8.38 ± SD of SNF. Purity ranged from 1.81 and 0.3 ± SD in saliva to 1.82 and 0.25 ± SD in SNF. Using SNF samples as the gold standard of reference, the sensitivity and specificity of saliva were 60% 97%, while positive and negative predictive values were 68% and 96%, respectively. The accuracy was 93.0% and the Kappa coefficient was 0.596. In conclusion, the results obtained in the self-collection of pure saliva are similar compared to SNF samples, being viable to be used in the detection of SARS-CoV-2. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O SARS-CoV-2, causador da Covid-19 foi identificado pela primeira vez em Wuhan, província de Hubei, China, e agora se propaga em escala global. O diagnóstico é realizado através da reação em cadeia da polimerase em tempo real de transcrição reversa (RT-qPCR) por coleta Swab nasofarínge (SNF). Devido à alta demanda exames e os baixos suprimentos de materiais de coleta destacam a necessidade de métodos alternativos para facilitar a triagem universal precisa da Covid-19 e controle da pandemia. Desta forma, este estudo teve como objetivo avaliar a eficiência molecular da saliva como meio de detecção do SARS-CoV-2 em profissionais de saúde e pacientes do circuito cirurgico do Hospital Universitário Lauro Wanderley. Para isso, foram realizadas 365 coletas de amostras SNF e saliva que foram extraídas e quantificadas em concentração. A identificação foi realizada através da RT-qPCR. Os resultados mostraram que das 365 amostras analisadas, 45 (12,3%) tiveram detecção em pelo menos um tipo de amostra e a maioria era 27 (60%) assintomáticos. Em SNF e saliva foram postivos em 21 (46,7%) amostras, enquanto 14 (31,1%) foram positivos apenas para amostras SNF e 10 (22,2%) positivo apenas em amostras de saliva. A concentração das amostras de saliva foi de 28,6 e 30,4 ± DP para 7,6 e 8,38 ± DP de SNF. A pureza foi de 1,81 e 0,3 ± DP em saliva para 1,82 e 0,25 ± DP em SNF. Usando amostras SNF como padrão ouro de referência a sensibilidade e especificidade da saliva foram de 60% 97%, equanto os valores preditivos positivos e negativos foram de 68% e 96%, respectivamente. A acurácia foi de 93,0% e o coeficiente Kappa foi de 0,596. Em conclusão, os resultados obtidos na auto coletada da saliva pura é semelhante em comparação com amostras SNF, sendo viável para ser usado na detecção do SARS-CoV-2.

The prevalence of snakebites is a public health problem that causes significant impact economically and socially. In South America, Brazil has the highest recorded rate of snakebites, with approximately 29,000 cases per year. Of the components that play a central role in the symptomatology of snakebites, phospholipases A2 (PLA2s) acts on substrates by hydrolyzing biomembranes phospholipids. Coagulation occurs by the activation of clotting factors together with calcium and platelets, and these factors are possible targets for PLA2s to act. In the present study, the pharmacological effects of PLA2s from Bothrops and Crotalus snake venom on secondary hemostasis were evaluated and a probable mechanism of the anticoagulant action of these proteins was proposed. In vitro, Prothrombin Time (PT) and Partial Thromboplastin Time (PTT) of citrated human plasma samples were evaluated in the presence of different quantities of the five anticoagulant drugs or the PLA2s. None of the evaluated PLA2s caused significant PT prolongation, while the aPTT demonstrated significant changes caused for all PLA2s. Asp49-PLA2s basic (bothropic) were classified as strong anticoagulant; Asp49-PLA2s acidic (bothropic) and basic (crotalic) were weak anticoagulant; while all Lys49-PLA2s were moderate anticoagulant. In silico studies, multiple alignment, phylogeny and interaction between PLA2s and Factors IXa and Xa were performed. In conclusion, PLA2s can interfere in the coagulation cascade by three independent mechanisms, or a combination of them: i) inhibition of the tenase complex formation observed in Asp49-PLA2s basic (bothropic) and Lys49-PLA2s. These PLA2s interact with the B subunit of factors IXa or Xa, which may cause a steric hindrance; ii) allosteric modulation of Factors IXa and Xa induced by the interaction of Lys49-PLA2s through the C-terminal region, iii) phospholipids hydrolysis and/or competition of catalytically active PLA2s with the clotting factors for the lipid surface. Nenhuma A prevalência de acidentes ofídicos é um problema de saúde pública que causa significativo impacto econômico e social. O Brasil é o país da América do Sul com maior índice de empeçonhamento registrado, com aproximadamente 29 mil casos anuais. Dentre os componentes que exercem papel central na sintomatologia do empeçonhamento, as Fosfolipases A2 (PLA2s) atuam sobre substratos hidrolisando fosfolipídios de biomembranas. A coagulação sanguínea ocorre pela ativação de fatores de coagulação, juntamente com cálcio e plaquetas, e esses fatores são possíveis alvos para a atuação das PLA2s. No presente estudo foram avaliados os efeitos farmacológicos de PLA2s ofídicas, dos gêneros Bothrops e Crotalus, na hemostasia secundária e proposto um mecanismo provável de ação anticoagulante dessas proteínas. Foram avaliados, in vitro, o Tempo de Protrombina (TP) e o Tempo de Tromboplastina Parcial ativada (TTPa) de amostras de plasma humano citratado na presença de quantidades distintas de cinco fármacos anticoagulantes ou das PLA2s. Nenhuma das PLA2s avaliadas causou significativo prolongamento do TP, enquanto o TTPa apresentou alterações significativas para todas as PLA2s. As Asp49-PLA2s básicas botrópicas foram classificadas como fortemente anticoagulantes; as Asp49-PLA2s ácida botrópica e básica crotálica foram fracamente anticoagulantes, enquanto todas as Lys49-PLA2s foram moderadamente anticoagulantes. Foram realizados estudos, in sílico, alinhamento múltiplo, filogenia e interação entre as PLA2s e os Fatores IXa e Xa. Em conclusão, as PLA2s podem interferir na cascata de coagulação por três mecanismos independentes ou pela combinação deles: i) inibição da formação do complexo tenase observado nas Asp49-PLA2s e Lys49-PLA2s básicas botrópicas que interagiram com a subunidade B dos fatores IXa ou Xa, podendo causar um impedimento estérico; ii) modulação alostérica dos Fatores IXa e Xa induzida pela interação das Lys49-PLA2s através da região de C-terminal, iii) hidrólise de fosfolipídios e/ou competição das PLA2s cataliticamente ativas com os fatores de coagulação pela superfície lipídica.

A celulose bacteriana possui em comparação com a celulose vegetal elevado grau de pureza, resistência mecânica, cristalinidade, biocompatibilidade e alta absorção de água apresentando potencial de aplicação em diversas áreas. Pode ser produzida por diversas fontes microbianas, como a bactéria Gluconacetobacter xylinus, com alto nível de pureza. Outra fonte de produção de celulose bacterianaé o SCOBY, symbiotic colony of bacteria and yeasts bebida Kombucha, que consiste em uma comunidade microbiana constituída por leveduras e bactérias. No entanto, o elevado custo de produção de celulose bacteriana compromete a sua produção em escala industrial. Meios de cultura que utilizem fontes alternativas de carbono apresentam potencial para produção promovendo a diminuição de custo do produto final. O objetivo do presente trabalho consistiu em avaliar a produção de celulose bacteriana em cultivo estático utilizando o SCOBY de kombucha e G. xylinus em meio contendo glicerol como fonte de carbono. A produção de CB utilizando SCOBY e o microrganismo isolado G. xylinusfoi realizada em 400 mL de meio HSG a 26 °C por 7 dias, por 5 semanas consecutivas. Após a produção, as membranas foram purificadas através de tratamento com NaOH e ácido acético e posteriormente foram secas por 24 horas a 45 °C, para determinação da massa seca. Em seguida foram realizados os métodos comumente empregados para caracterização de celulose bacteriana: rendimento, controle microbiológico por meio do teste de esterilidade, resistência à tração, absorção de água e resistência a soluções básicas e ácidas. A produção utilizando o microrganismo G. xylinus obteve rendimento semelhante ao obtido utilizando o SCOBY na quinta semana de cultivo, de 1,64 g/L e 1,48 g/L, respectivamente. O teste de esterilidade, mostrou que a etapa de purificação foi capaz de remover as células viáveis, assim como o processo de autoclavagem, uma vez que não foi observado turvação do meio em nenhuma das amostras. Dentre os parâmetros avaliados, não foi verificado diferença estatística, considerando intervalo de 95% de confiança, nas membranas produzidas por G. xylinus e SCOBY para o teste de resistência mecânica e resistência a ácidos. No entanto para o teste de resistência a soluções básicas e para o teste de absorção de água foi verificado que a membrana proveniente de G. xylinus foi capaz de absorver mais água e houve uma perda maior de massa no teste em solução básica. Os resultados deste trabalho demonstram que o SCOBY de kombucha apresenta-se como uma potencial fonte de celulose bacteriana tanto no que se refere ao rendimento de produção como características da membrana obtida. Novos estudos deverão ser realizados buscando investigar o uso de fontes de carbono alternativas para sua produção. Bacterial cellulose has compared to plant cellulose a high degree of purity, mechanical resistance, crystallinity, biocompatibility and high-water absorption, presenting potential application in several areas. It can be produced by several microbial sources, such as the Gluconacetobacter xylinus bacteria, with a high level consists of a microbial community made up of yeasts and bacteria. However, thehigh cost of producing bacterial cellulose compromises its production on an industrial scale. Culture media that use alternative carbon sources have potential for production, reducing the cost of the final product. The objective of the present work was to evaluate the production of bacterial cellulose in static culture using SCOBY from kombucha and G. xylinus in a medium containing glycerol as a carbon source. BC production using SCOBY and the isolated microorganism G. xylinus was performed in 400 mL of HSG medium at 26 °C for 7 days, for 5 consecutive weeks. After production, the membranes were purified by treatment with NaOH and acetic acid and subsequently dried for 24 hours at 45 °C, to determine the dry mass. Then, the methods commonly used for characterization of bacterial cellulose were carried out: yield, microbiological control through the sterility test, tensile strength, water absorption and resistance to basic and acidic solutions. The production using the microorganism G. xylinus obtained a yield like that obtained using SCOBY in the fifth week of cultivation, of 1,64 g/L and 1,48 g/L, respectively. The sterility test showed that the purification step was able to remove viable cells, as well as the autoclaving process, since no medium turbidity was observed in any of the samples. Among the parameters evaluated, there was no statistical difference, considering a 95% confidence interval, in the membranes produced by G. xylinus and SCOBY for the mechanical resistance and acid resistance tests. However, for the resistance test to basic solutions and for the water absorption test, it was verified that the membrane from G. xylinus was able to absorb more water and there was a greater loss of mass in the basic solution test. The results of this work demonstrate that SCOBY from kombucha presents itself as a potential source of bacterial cellulose both in terms of production yield and characteristics of the membrane obtained. New studies should be carried out seeking to investigate the use of alternative carbon sources for its production.